UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR BUCURETI FACULTATEA DE HORTICULTUR

CONF. DR. LILIANA BDULESCU

BIOCHIMIE HORTICOL

2010

Biochimie horticol

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

PREFA

Biochimia, considerat pn nu demult o ramur a chimiei, a rezultat din interferena cunotinelor fundamentale de biologie i chimie, evolund ntr-o tiin de sine stttoare, interdisciplinar, care trateaz materia vie n unitatea ei structural i funcional. Studiul compoziiei chimice a organismelor vegetale a evideniat existena unui numr uimitor de mare de substane, ndeosebi organice, care se afl ntr-o continu transformare datorit schimbului permanent de substane i energie al materiei vii cu mediul ambiant. Lucrarea de fa prezint att descrierea structurii i proprietilor principalelor categorii de substane din plante, mecanismele biochimice ale sintezei i degradrii lor la nivel celular, funciile pe care la ndeplinesc, precum i cile de control al principalelor procese biochimice n care sunt implicate. Numrul deosebit de mare al substanelor organice gsite n plante poate fi grupat fie dup structura lor chimic (glucide, lipide, proteine, acizi organici, acizi nucleici, etc.), fie dup rolul fiziologic pe care l dein (substane plastice, substane de rezerv, substane active i substane secundare). Din considerente didactice, n lucrare au fost selectate i prezentate noiuni de biochimie descriptiv care abordeaz n cadrul fiecrei clase de compui organici, structura chimic, proprietile i reprezentanii importani din plantele horticole, urmat de aspecte de metabolism, respectiv biochimia proceselor metabolice care include i cile de reglare a celor mai importante dintre acestea. S-a dorit astfel o abordare structural i funcional a substanelor organice care intr n alctuirea organismelor vegetale, constituind o baz pentru nelegerea fiziologiei, geneticii i ameliorrii plantelor horticole, precum i a aplicrii tehnologiilor de cultur n scopul mbuntirii cantitative i calitative a recoltelor, a creterii rezistenei plantelor la boli i duntori, la secet i nghe i a produselor horticole la pstrare. Pornind de la aceste premise, lucrarea Biochimie horticol se adreseaz cu predilecie studenilor Facultii de Horticultur, forma de nvmnt la Distan, ns poate constitui un punct de plecare n studiul biochimiei vegetale i pentru viitori specialiti cu profil nrudit.

Autoarea

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

CUPRINS Capitolul 1. Noiuni introductive 1.2. Substanele anorganice 1.2.1. Apa 1.2.2. Substanele minerale Capitolul 2. Glucide 2.1. Noiuni introductive 2.2. Principalele glucide din speciile horticole 2.2.1. Monoglucidele i derivaii lor 2.2.2. Oligoglucide 2.2.3. Poliglucide Capitolul 3. Lipide 3.1. Noiuni introductive 3.2. Acizii grai 3.3. Alcooli 3.4. Lipide simple 3.4.1. Gliceride 3.4.2. Ceride (ceruri vegetale) i etolide 3.5. Lipide complexe 3.5.1.Fosfatide (fosfolipide) 3.5.2. Sfingolipide 3.5.3. Glicolipide 3.5.4. Sulfatide Capitolul 4. Aminoacizi i proteine 4.1. Aminoacizi 4.1.1. Structur, clasificare i rol biochimic 4.1.2. Proprieti generale ale aminoacizilor 4.2. Peptide 4.2.1. Proprieti generale ale peptidelor 4.2.2. Peptide din plante 4.3. Proteine 4.3.1. Structura proteinelor 4.3.2. Proprieti generale ale proteinelor 4.3.3. Proteine cu importan biologic Capitolul 5. Acizi nucleici 5.1. Nucleotide 5.2. Structura, rolul i proprietile ADN 5.3. Structura, clasificarea i proprietile ARN Capitolul 6. Vitamine 6.1. Vitamine hidrosolubile structur, clasificare i rol biochimic 6.1. Vitamine hidrosolubile structur, clasificare i rol biochimic 6.3. Modificarea coninutului n vitamine pe parcursul creterii i maturrii Capitolul 7. Hormoni 7.1. Principalii hormoni vegetali 7.1.1. Auxine 7.1.2. Gibereline 7.1.3. Citochinine 7.1.4. Acidul abscisic 7.1.5. Etilena 7.1.6. Alte substane reglatoare de cretere i maturare 7.2. Activitatea hormonal 6 7 7 8 13 13 14 14 23 26 31 31 32 33 39 39 40 41 41 43 43 43 45 46 46 48 50 50 51 52 53 58 60 64 64 66 69 71 71 76 76 80 80 80 81 82 83 83 84 86
4

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

Capitolul 8. Pigmenii vegetali 8.1. Substanele carotenoide 8.2. Pigmenii clorofilieni 8.3. Substanele flavonoide 8.4. Substanele fenolice Capitolul 9. Metabolismul plantelor 9.1. Noiuni introductive 9.2. Enzimele 9.3. Metabolismul glucidic 9.3.1. Biosinteza glucidelor 9.3.2. Biodegradarea glucidelor 9.4. Metabolismul lipidic 9.4.1. Biosinteza lipidelor 9.4.2. Biodegradarea lipidelor 9.5. Metabolismul proteinelor 9.5.1. Biosinteza i interconversia aminoacizilor 9.5.2. Biosinteza proteinelor 9.5.2. Biodegradarea proteinelor 9.6. Ciclul Krebs 9.7. Biodegradarea anaerob Capitolul 10. Transformarea substanelor n plante

88 88 90 93 96 99 99 104 108 108 114 119 119 120 122 122 124 128 129 130 135

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

CAPITOLUL 1. NOIUNI INTRODUCTIVE Definiia i obiectul biochimiei Biochimia este tiina modern care studiaz materia vie i procesele specifice acesteia sub raportul compoziiei, tipului, structurii moleculare, asamblrii i corelaiilor biomoleculelor componente, precum i al proceselor de biosintez i biodegradare prin care se genereaz i se consum energia necesar vieii. Caracteristicile biochimice ale organismelor vii Comparativ cu materia nevie, organismele vii se caracterizeaz printr-un ansamblu de principii i trsturi definitorii de organizare i funcionare la nivelul moleculelor, cum ar fi: Sunt sisteme deschise, adic se afl ntr-un permanent schimb de materie, energie i informaie cu mediul ambiant i au drept caracteristic definitorie metabolismul, concept care definete esena material i dinamismul vieii; Posed un nalt grad de organizare i complexitate, adic sunt alctuite din diferite tipuri de molecule i macromolecule cu structuri variate i funcii specifice; Reprezint o stare calitativ superioar, att sub aspectul naturii, structurii i modului de asamblare a biomoleculelor componente, dar mai ales sub aspectul interaciunilor dintre acestea; Au capacitatea unic de a absorbi i de a transforma energia din mediul ambiant, adaptnd-o i utiliznd-o pentru sinteza propriilor structuri i pentru meninerea organizrii structurale; Au capacitatea de autoreplicare precis din generaie n generaie, n forme identice ca mas, conformaie, structuri interne i proprieti; Pentru toate organismele vii, celula este unitatea de baz structural i funcional, ce conine echipamentul complet pentru meninerea i continuitatea vieii.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

1.2. SUBSTANELE ANORGANICE

Organismele vegetale au o compoziie chimic foarte complex i variabil n funcie de vrst, organ, condiiile de cultur. Se cunoate deja faptul c materia vie este format dintr-un numr aproape constant de elemente chimice, ns n proporii diferite n funcie de specie i condiiile de mediu. Dintre acestea aproximativ 99% sunt reprezentate de macroelemente - elemente care intr n alctuirea tuturor celulelor vii (C, H, O, N, S, P, K, Ca, Mg, Na, Fe, Si, Cl), restul fiind reprezentat de microelemente - peste 60 de elemente aflate n cantiti mici (Cu, Mn, Mo, Zn, F, B, Co, Cr, Ni, Al, Pb, etc.). Aceste elemente chimice formeaz o varietate extrem de mare de combinaii grupate n substane organice (ex. glucide, lipide, proteine, vitamine, etc.) i substane anorganice (apa i substanele minerale), aflate n diferite proporii n organismele vegetale. Totalitatea substanelor organice i a substanelor minerale alctuiesc substana uscat, care poate reprezenta ntre 3 % (la fructele de castravei) i 88% (la seminele de fasole) din masa total, restul fiind reprezentat de ap. Apa constituie mediul de desfurare a reaciilor biochimice, particip la transportul substanelor dizolvate, reglarea temperaturii plantelor i creterea acestora. Substanele minerale intr n alctuirea unor compui chimici cu rol structural, dar au i o importan fiziologic deosebit, fiind activatori sau inhibitori ai unor sisteme enzimatice sau fiind componente ale unor substane organice (enzime, coenzime, pigmeni etc.). Apa i srurile minerale provin n cea mai mare parte din sol, de unde sunt absorbite de ctre plante cu ajutorul rdcinilor. ntr-o msur mai mic provin i din absorbia, prin organele aeriene, a apei de ploaie sau de rou, a elementelor minerale din soluiile de ngrminte sau insecto-fungicide aplicate prin stropiri foliare. Srurile minerale absorbite din sol sub form de ioni sunt transportate mpreun cu apa n toate organele plantelor. n celule, ionii se pot acumula n citoplasm sub form de sruri solubile sau insolubile (ex. oxalat de Ca) sau pot ramne n vacuole sub form de ioni. 1.2.1. Apa In esuturile vegetale, apa se gsete sub form liber, reprezentat n special de apa din vacuole i din esuturile conductoare i sub form legat, reprezentat de apa cuprins n coloizii hidrofili. Apa liber mpreun cu apa legat alcatuiesc apa total. Macovschi (1969), n teoria sa asupra biostructurii, susine c exist i o a treia form, apa asimilat, integrat n biostructur i care se elibereaz numai odat cu moartea organismului. n organismele vegetale proporia de ap variaz n funcie de organul analizat. Astfel, tulpinile plantelor lemnoase au ntre 20-30% ap, frunzele ntre 80-90%, fructele ntre 7590%, iar seminele ntre 8-15%. Proporia n care apa se afl n esuturile vegetale
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

influeneaz capacitatea de pstrare a legumelor i fructelor, sensibilitatea lor la manipulare i transport etc. Produsele care au un coninut ridicat de ap au o capacitate de pstrare redus i un grad de perisabilitate mai ridicat comparativ cu cele la care coninutul n ap este mai mic. n general, legumele i fructele au un coninut n ap care variaz n limite foarte largi (3-97%), n funcie de specie (tabelul nr. 1). ntre soiuri, limitele de variaie ale coninutului n ap sunt mai mici (1-16%).
Tabelul 1 Limitele coninutului n ap din legume i fructe (Gherghi i colab.,1973, 1980)
Specia 1 Ardei Cartofi Ceap Castravei Ciuperci Conopid Dovlecei Fasole verde Gulii Mazre verde Morcov Pstrnac Ptrunjel Pepene verde Pepene galben Praz Ridichi Salat Sfecl roie Spanac Sparanghel Tomate elina Varz alb Varz roie Vinete g/100 g produs proaspt 2 87-93 73-80 80-87 90-97 90-91 87-92 80-90 85-90 85-92 72-78 85-91 78-82 75-88 92-94 80-85 80-90 85-94 90-96 82-91 87-93 90-93 93-96 82-95 88-93 88-92 90-93 Specia 3 Afine Agrie Alune Ananas Banane Castane Cpuni Caise Ciree Coacze negre Coacze roii Grapefruit Gutui Lmi Mere Migdale Nuci Piersici Pere Portocale Prune Struguri Smochine Viine Zmeur g/100 g produs proaspt 4 79-86 83-88 3-6 82-89 70-77 47-53 84-93 79-88 75-87 77-85 81-89 86-91 77-87 89-91 77-88 4-6 3-7 82-91 79-87 84-87 72-88 75-83 78-83 77-88 80-86

1.2.2. Substanele minerale Coninutul n substane minerale este caracteristic pentru o specie sau pentru un organ vegetal i variaz n limite destul de largi n funcie de factorii climatici, pedologici, tehnologia de cultur etc. Cantitatea de substane minerale, exprimat n coninut de cenu rezultat n urma calcinrii (arderii, oxidrii) substanei uscate, variaz ntre 0,2-2 % la fructele i legumele proaspete. Prile lemnoase i seminele au un coninut mai redus de substane minerale (exprimat n procente din substana uscat) dect frunzele, iar plantele tinere au un coninut mai ridicat dect cele senescente (Burnea i colab., 1977). Coninutul mediu al elementelor minerale care asigur creterea plantelor variaz cu specia. Valorile medii raportate la substana uscat sunt cuprinse n urmtoarele limite: 0,3-5% pentru azot, 1____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

5% pentru potasiu, 0,1-5% pentru calciu, 0,1-0,5% pentru fosfor i sulf, 0,15-0,35% pentru magneziu (Marschner, 1995). Coninutul total n elemente minerale din legume i fructe variaz ntre 0,27 % (dovlecei) i 3,9 % (fasole boabe), iar al celor mai importante dintre ele este redat n tabelul 2. Tabelul 2. Coninutul n elemente minerale al legumelor i fructelor (n 100 g parte edibil)
(Souci i colab.1972,1981)

Element Specia
Total (g)

Na

Mg Ca Mn

Fe

Co

Cu

Zn

Cl

I
g

mg/100 g parte edibil LEGUME

Ardei Cartofi Ceap Castravei Conopid Ciuperci Dovlecei Fasole boabe Gulii Morcovi Mazre verde Ptrunjel Pstrnac Praz Ridichi Ridichi negre Spanac Salata Sparanghel Tomate elina Usturoi Varz alb

0,57 1,02 0,59 0,60 0,82 1,00 0,27 3,90 0,95 0,86 0,92 1,68 1,18 0,86 0,90 0,75 1,51 0,72 0,62 0,61 0,94 1,42 0,59

1,7 3,2 9,0 8,5 16,0 8,0 1,1 2,0 32,0 60,0 2,0 33,0 8,0 5,0 17,0 18,0 65,0 10,0 4,0 6,3 77,0 32,0 13,0

212 443 175 141 328 422 383 1310 380 290 304 880 469 225 255 322 633 224 207 297 321 515 227

12 25 9 8 17 13 8 132 43 18 33 41 22 18 8 15 58 11 20 20 9 36 23

11 10 31 15 20 8 22 102 68 41 24 203 51 87 34 33 126 37 21 14 68 38 46

0,10 0,15 0,36 0,15 0,17 0,11 0,04 2,00 0,13 0,21 0,66 0,20 0,07 0,05 0,05 0,76 0,35 0,27 0,14 0,15 0,46 0,10

0,40 0,80 0,50 0,50 0,63 1,26 0,80 6,10 0,90 0,66 1,84 6,80 0,62 1,00 1,50 0,80 4,10 1,10 1,00 0,50 0,53 1,40 0,50

0,001 0,010 0,350 0,003 0,002 0,003 0,002 0,009 -

0,10 0,15 0,08 0,09 0,40 0,08 0,84 0,12 0,08 0,38 0,21 0,10 0,30 0,15 0,13 0,12 0,05 0,15 0,09 0,02 0,26 0,06

0,03 0,27 1,40 0,16 0,14 0,39 0,20 2,80 0,23 0,39 2,65 0,92 0,08 0,31 0,16 0,20 0,50 0,22 0,32 0,24 0,31 1,00 0,18

29 50 42 23 0,23 123 44 429 49 35 108 63 73 46 26 29 55 33 46 26 80 134 27

0,01 0,04 0,02 54 0,03 0,001 0,03 0,03 0,11 0,07 0,11 0,03 0,05 0,02 0,01 0,01

19 45 37 0,01 67 18 47 57 61 28 156 24 44 19 54 57 53 60 150 30 137

2,3 3,8 2,0 2,5 0,29 18,0 1,4 15,0 4,2 3,6 8,0 8,0 20,0 3,3 7,0 1,7 2,8 2,7 5,2

FRUCTE ELEMENT SPECIA Alune Afine Agrie Ananas Arahide Banane Castane Cpuni Coacze Total g 2,44 0,30 0,45 0,39 2,22 0,83 1,18 0,50 0,80 2,0 1,0 1,6 2,1 5,2 1,0 1,5 2,5 1,5 636 65 203 173 706 393 707 147 310 156 2 15 17 163 36 145 15 17 226 10 29 16 59 9 333 26 46

Na

Mg Ca Mn

Fe

Co

Cu

Zn

Cl

I
g

mg/100 g parte edibil 4,20 0,40 0,04 0,11 1,13 0,53 0,75 1,20 0,68 3,80 0,74 0,63 0,40 2,11 0,55 1,32 0,96 1,29 0,012 0,030 1,28 0,11 0,09 0,08 0,55 0,13 0,23 0,12 0,11 1,87 0,10 0,10 0,26 3,07 0,15 0,12 0,18 333 29 30 9 372 22 87 29 40 0,02 0,01 0,01 0,01 0,13 0,02 0,02 0,03 10 5 1 1 7 79 13 14 15

1,5 0,2 0,2 13,0 2,8 1,0 1,0

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

. negre Coacze roii Ciree Caise Gutui Lmi Mere Migdale Mure Msline Nuci Pere Portocale Prune Piersici Struguri Smochine Viine Zmeur

Biochimie horticol

0,63 0,49 0,66 0,44 0,50 0,32 0,51 0,51 1,98 0,33 0,48 0,49 0,45 0,38 0,70 0,50 0,51

1,4 2,7 2,0 2,0 2,7 3,0 3,0 3,0 2,4 2,4 2,1 1,4 1,7 1,3 1,9 2,0 2,0 1,7

238 229 178 201 149 144 189 189 55 544 126 177 221 205 192 240 114 170

13 14 9 8 28 6 30 30 22 129 8 14 10 9 9 20 8 30

29 17 16 10 11 7 44 44 61 87 10 42 14 8 18 54 40

0,60 0,06 0,27 0,04 0,04 0,06 0,59 0,59 0,50 1,97 0,05 0,03 0,08 0,11 0,07 0,35 0,51

0,91 0,35 0,65 0,60 0,45 0,48 0,90 0,90 1,60 2,50 0,26 0,40 0,44 0,48 0,51 0,60 0,60 1,00

0,002 0,002 0,010 0,009 0,015 0,001 0,001 -

0,10 0,09 0,15 0,13 0,36 0,11 0,14 0,14 0,46 0,88 0,09 0,07 0,09 0,05 0,06 0,07 0,14

0,20 0,15 0,07 0,12 0,12 2,70 0,23 0,10 0,07 0,02 0,08 0,25 -

27 20 21 21 16 12 30 30 17 409 15 23 18 23 20 32 7 44

0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,68 0,01 0,02 0,01 0,02 -

14 3 1 2 5 2 23 2 4 1 3 2 18 21 -

1,0 1,0 0,5 3,0 1,5 2,1 1,0 1,0 0,7 1,5 -

Cunoaterea compoziiei minerale prezint importan att pentru aprecierea strii de nutriie a plantelor, ct i pentru aprecierea valorii alimentare a produselor horticole (Davidescu i Davidescu, 1974). Analizele efectuate de Gherghi i colab. (1982) la merele din soiul Starkrimson au evideniat c proporia de elemente minerale variaz chiar n diferite zone ale unui fruct. Astfel, n epicarp s-a determinat cel mai ridicat coninut n N, Cu, Al, Fe, Ni, Zn, Mn; n parenchimul din zonele casei seminale s-a determinat cel mai ridicat coninut n P, Cl, Ca, As, Na, Co, Cr, n timp ce n parenchimul din zona calicial s-a determinat cel mai ridicat coninut n S, Si, B i V. Rolul elementelor minerale n corpul plantelor este extrem de variat i specific, lipsa acestora sau carena determin simptome specifice la nivelul frunzelor, n primul rnd, dar i la nivelul fructelor sau organelor de depozitare. Fosforul are rol n bioenergetica plantelor, intrnd n componena ATP, activeaz unele enzime i este util n semnalizarea celular. Potasiul regleaz nchiderea i deschiderea stomatelor, reduce pierderea apei prin frunze n timpul transpiraiei i crete rezistena plantelor la secet. Azotul este esenial pentru procesul de cretere intrnd n componena tuturor proteinelor. Sulful este un component structural al unor aminoacizi i vitamine, este esenial pentru activitatea cloroplastelor i are rol n aprarea contra stresului oxidativ. Calciu regleaz transportul altor nutrieni n plante i este implicat n activarea unor enzime. Magneziu este component structural a clorofilei, fiind implicat n procesul de fotosintez; are rol n producerea ATP, este cofactor enzimatic.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

10

Biochimie horticol

Fierul este component al substanelor transprtoare de electroni n procesul de fotosintez, fiind implicat n transformarea energiei luminoase n energie biochimic i este cofactor enzimatic. Molibdenul este cofactor al enzimelor din calea de biosintez a aminoacizilor. Borul este implicat n transportul glucidelor, diviziunea celular i sinteza unor enzime. Cuprul este esenial n procesul de fotosintez, intrnd n compoziia plastocianinei; este implicat n biosinteza ligninei i producerea seminelor. Manganul este un component esenial funcionrii cloroplastelor i procesului de fotosintez, fiind implicat n fotoliza apei i producerea de O2, H+ i e-. Zincul joac un rol escnial n transcripia ADN; este cofactor enzimatic. Clorul este necesar pentru realizarea osmozei i are rol n fotosintez. n cele ce urmeaz sunt prezentate cteva efecte ale carenei n Ca, Cl, Mo, Mn, Mg, Fe, K, Mn, N, P, S, Zn, B i Cu la tomate.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

11

Biochimie horticol

Autoevaluare 1. Definiia i obiectul biochimiei. 2. Definii macroelementele i microelementele. Exemple. 3. Definii substana uscat i cenua. 4. Formele de ap din esuturile vegetale. Limite de concentraie la 5 specii de legume i 5 specii de fructe. 5. Precizai limitele coninutului de K i Mg la speciile de legume i fructe prezentate n tabelul 2. Bibliografie selectiv 1. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 2. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 3. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 4. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 5. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

12

Biochimie horticol

CAPITOLUL 2. GLUCIDE Cuvinte cheie: monoglucide, glucoza, oligoglucide, zaharoza, poliglucide, amidon, metabolism, biosintez, biodegradare, interconversie Rezumat Glucidele, cunoscute i sub denumirea de zaharuri (zaharide), oze sau carbohidrai (hidrai de carbon) sunt definii ca polihidroxialdehide/polihidroxicetone sau derivai ai acestora. Formula empiric (CH2O)n a sugerat denumirea iniial de hidrai de carbon, studiile ulterioare dovedind o structur complex, cu atomi de carbon asimetrici care confer proprieti specifice izomerilor monozaharidelor. Dup numrul de uniti componente se clasific n monoglucide, oligoglucide i poliglucide. Monoglucidele sau monozaharidele sunt constituite dintr-o singur unitate polihidroxialdehidic sau polihidroxicetonic, avnd 3-9 atomi de carbon, ceea ce confer denumirea specific: trioze-nonoze. Glucoza i fructoza reprezint compui de baz ai metabolismului intermediar, precum i substane organice de rezerv la unele specii de plante. Oligoglucidele conin ntre 2-10 uniti monozaharidice, unite prin legturi glicozidice. Zaharoza este principala form de transport a fotoasimilatelor n corpul plantelor. Polizaharidele conin mai multe uniti monozaharidice unite n lanuri liniare sau ramificate. Multe dintre polizaharide conin un singur tip sau dou tipuri alternative de uniti monozaharidice. Polizaharidele au dou funcii biologice majore: form de stocare a energiei i elemente structurale. Amidonul este forma principal de stocare a energiei la cele mai multe specii de plante, iar celuloza este principalul component structural situat la nivelul pereilor celulari ai celulelor vegetale. 2.1. Noiuni introductive Glucidele sunt substane organice cu funciune mixt ce au n compoziia lor att grupri lice, ct i o grupare carbonilic. Glucidele constituie o clas de substane foarte important att pentru organismele vegetale, ct i pentru cele animale. Sub aspect biochimic i fiziologic, glucidele constituie o materie prim pentru sinteza tuturor substanelor organice existente n plante: proteine, lipide, cetoacizi, acizi organici, etc. De asemenea, constituie substane de rezerv utilizate de ctre celule i esuturi (amidon i glucide solubile) sau pot avea rol plastic (celuloza, hemicelulozele, substanele pectice etc.).

Nomenclatura Cel care ncearc prima dat s denumeasc glucidele este C. Schmidt n anul 1844, care le denumete hidrai de carbon datorit raportului observat ntre atomii de hidrogen i oxigen de 2:1. S-a propus iniial formula general de Cn (H2O)n pentru glucidele simple, care ulterior a fost modificat n formula (CH2O)n, dei are unele inconveniente:

Hidrogenul i oxigenul nu sunt legai sub form de molecule de ap de atomul de carbon

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

13

Biochimie horticol

Exist substane de tipul aldehidei formice CH2O, acidul lactic C3(H2O)3, care nu sunt glucide. Structura chimic general

Glucidele simple, de la care deriv glucidele complexe, sunt polihidroxialdehide sau polihidroxicetone. Conform acestei ncadrri convenionale, cele mai simple glucide sunt aldehida gliceric, ca reprezentant al polihidroxialdehidelor, i dihidroxiacetona ca reprezentant al polihidroxicetonelor:

Glucidele care se caracterizeaz prin prezena unei grupri aldehidice n molecul se numesc aldoze, iar cele care conin o grupare cetonic poart numele general de cetoze. Datorit prezenei gruprilor carbonilice i hidroxilice n molecul, glucidele prezint reaciile chimice caracteristice acestor grupri funcionale. Clasificarea are la baz comportarea glucidelor la reacia de hidroliz: Oze cunoscute i sub denumirea de monoglucide sau glucide simple sunt glucidele care prin hidroliz nu pot fi descompuse n molecule mai simple care s posede proprieti fizicochimice caracteristice glucidelor; Ozide cunoscute i sub denumirea de glucide compuse sunt substane formate prin unirea mai multor molecule de monoglucide:

Oligoglucide formate dintr-un numr mic (2-10) de resturi de monoglucide; Poliglucide formate dintr-un numr foarte mare de monoglucide. Acestea se clasific la rndul lor n homopoliglucide (formate dintr-un singur tip de monoglucid) i heteropoliglucide (formate din mai multe tipuri de monoglucide).

2.2. Principalele glucide din speciile horticole

2.2.1. Monoglucidele i derivaii lor Monoglucidele se clasific dup lungimea catenei de atomi de carbon n trioze, tetroze, pentoze, hexoze, heptoze, octooze i nonoze, iar dup natura gruprii carboxil (aldehidic sau cetonic) se clasific n aldoze i n cetoze.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

14

Biochimie horticol

Proprieti fizice Monozaharidele sunt substane solide, cristalizate, incolore, inodore, solubile n ap, mai puin solubile n alcool i insolubile n eter i cloroform. Au gust dulce, fructoza fiind etalonul de apreciere a acestei proprieti fizice, avnd valoare 1; valoarea indicelui de dulce al glucozei este 0,75. Cnd sunt nclzite, toate monozaharidele se descompun nainte de a se topi, n carbon i ap, reacie numit carbonizare. Configuraia spaial, izomeria i reprezentarea glucidelor Toate monozaharidele, cu excepia dihidroxiacetonei, conin unul sau mai muli atomi de carbon asimetrici (adic atomul de carbon are patru substitueni diferii), fiind considerate molecule chirale. Datorit asimetriei moleculare sunt optic active, adic au proprietatea de a roti planul luminii polarizate, atunci cnd sunt strbtute de acesta, i deci de a se prezenta sub forma a dou tipuri de izomeri optici: dextrogir care rotete planul luminii polarizate spre dreapta i se noteaz cu D sau (+) i levogir care rotete planul luminii polarizate spre stnga i se noteaz cu L sau (). De exemplu, forma obinuit sub care se gsete glucoza n natur este cea dextrogir ( = +52,7), iar cea a fructozei este levogir ( = 92,4). Pentru

zaharidele cu 3 sau mai muli atomi de C s-a adoptat convenia prin care prefixele D i L se refer la atomul de carbon asimetric cel mai ndeprtat fa de atomul de carbon carbonilic. Aa cum se observ din formulele de proiecie ale glucozei, forma D reprezint imaginea n oglind a seriei L. Dou glucide care difer prin configuraia unui singur atom de carbon se numesc epimere. Astfel, D-glucoza i D-manoza sunt epimere n raport cu atomul de carbon 2, iar D-glucoza i D-galactoza n raport cu atomul de carbon 4.

n soluie apoas, monozaharidele acioneaz ca i cum ar avea un centru de asimetrie n plus fa de cel prezentat anterior. Astfel, D-glucoza poate exista n dou forme izomere care difer prin rotaia specific: -D-glucoza cu = + 112,2 i -D-glucoza cu =+

18,7. Ambele forme au fost izolate n stare pur i s-a constatat c au proprieti fizice i chimice deosebite. Cnd izomerii i ai D-glucozei sunt dizolvai n ap, rotaia optic a
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

15

Biochimie horticol

fiecruia se modific treptat n timp, atingnd, la echilibru, valoarea de

= + 52,7, datorit

formrii unui amestec de 1/3 -D-glucoz i 2/3 -D-glucoz. Din diferite considerente chimice s-a dedus c izomerii i ai glucozei nu au o structur deschis, aa cum a fost prezentat n formulele de proiecie, ci un ciclic, format prin reacia prin reacia gruprii hidroxil de la carbonul 5 cu gruparea aldehidic de la atomul de carbon 1. Ciclul de 6 atomi format se numete ciclul piranozic, iar glucoza poate forma dup ciclizare -D-glucopiranoza sau -D-glucopiranoza.

La formarea structurii ciclice a glucozei, apare la fosta grup carbonil o nou grupare hidroxil, care se numete hidroxil glicozidic i care are o reactivitate mai mare dect celelalte grupe hidroxil din molecul. n acest caz, numerotarea carbonilor ncepe de la primul carbon de dup oxigenul din ciclu, n sens orar. Aldopentozele, precum i cetohexozele se ciclizeaz ntr-un ciclu cu 5 atomi numit ciclul furanozic, prezentnd i ele formele anomerice i .

Pentru a indica forma ciclic a monozaharidelor se pot utiliza formulele de proiecie Haworth. Ciclul piranozic exist n dou conformaii, scaun i baie, datorit rotaiei atomilor din molecul n jurul unei singure legturi.n soluiile apoase ale hexozelor predomin forma scaun, care este relativ rigid i mult mai stabil dect forma baie. Substituenii formei scaun nu sunt echivaleni chimic i geometric, unii fiind axiali, alii ecuatorial; gruprile hidroxil ecuatoriale ale piranozei sunt esterificate mai uor dect cele axiale.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

16

Biochimie horticol

Reprezentani Triozele, monoglucide cu trei atomi de carbon - C3H6O3 - de exemplu: aldehida gliceric i dihidroxiacetona. Se gsesc n plante sub form de esteri fosforici, constituind produii primari ai procesului de fotosintez la plantele cu tip fotosintetic C3.

CHO

CHOH

CH2OH

H2COH

CO

CH2OH

aldehida gliceric

dihidroxiacetona

Tetrozele C4H8O4 au fost foarte puin identificate n natur, n stare liber. Dintre aceste monoglucide cu 4 atomi de carbon, D-eritroza format n ciclul pentozo-fosfat, reprezint compusul iniial al ciclului acidului shikimic.
OH CHO CH OH CH CH2OH

Pentozele, dei foarte rspndite n natur, se gsesc n stare liber n cantiti relativ mici. n cantiti mai mari intr n alctuirea unor poliglucide, glicozide, esteri ai acidului fosforic, acizilor nucleici fiind n structura nucleotidelor, unor enzime i vitamine. Din punct de vedere biochimic, cele mai importante aldopentoze sunt: D-riboza, D-xiloza, L-arabinoza, iar dintre cetopentoze: D-ribuloza i D-xiluloza.
OH

OH CHO CH

OH CH

OH CH CH2OH

CHO

CH

CH OH

CH OH

CH2OH

D-riboza
OH CHO CH CH OH OH CH CH2OH

L-arabinoza
OH CHO CH OH C CH2OH

CH2OH

D-xiloza

D-apioza

Arabinoza i xiloza intr n alctuirea pereilor celulari, riboza este utilizat n sinteza acizilor nucleici, iar ribuloza este acceptorul dioxidului de carbon n procesul de fotosintez.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

17

Biochimie horticol

Hexozele (C6H12O6) sunt cele mai importante glucide fiind rspndite n stare liber, ct i sub form de esteri, glicozide, oligo- i poliglucide i numeroi ali derivai. Ele sunt utilizate n procesele de biosintez a celorlalte glucide, iar compuii intermediari ai metabolismului acestora sunt folosii n procesele de sintez a tuturor compuilor chimici existeni din plante. Cele mai rspndite hexoze sunt: D-glucoza, D-manoza, D-galactoza, Lrhamnoza i D-fructoza. Dintre acestea, D-glucoza i D-fructoza sunt larg rspndite n legume i fructe, n care se gsesc n proporie de pn la 7,3 % (tabelul nr. 1). Glucoza este produs n procesul de fotosintez i reprezint principala surs de energie biochimic n corpul plantelor. Prin glicoliz i prin reaciile ciclului acidului citric n procesul de respiraie aerob, glucoza este oxidat pentru a forma dioxid de carbon i ap, rezultnd energie biochimic, n principal sub form de ATP. n absena oxigenului glucoza intr n procesul de fermentaie din care rezult alcool etilic i dioxid de carbon, conform reaciei de mai jos:

n cazul plantelor zaharofile, aceste substane reprezint principalele substane de rezerv, care se acumuleaz n vacuolele celulelor. Glucoza este esenial n producerea proteinelor i n metabolismul lipidelor. De asemenea, la cele mai multe plante este un precursor pentru vitamina C (acid ascorbic), a oligozaharidelor (zaharoza) i a polizaharidelor (amidonul, celuloza, substanele pectice). Heptozele sunt prezente n legume i fructe n principal sub forma esterului difosforic al D-sedoheptulozei, care are un rol important n regenerarea ribulozei, n procesul de fotosintez. n fructele de avocado, au fost identificate i alte heptoze, cum sunt Dmanoheptuloza i D-glicero-D-galactoheptuloza. Att n legume ct i n fructe s-au determinat glucide cu 8 i 9 atomi de carbon cum sunt octozele: D-glicero-D-manooctuloza, D-glicero-L-galactooctuloza i D-glicero-Dtalooctuloza i nonozele: D-eritro-L-glucononuloza, al cror rol fiziologic este mai puin precizat. Tabelul nr. 1. Principalele monoglucide din legume i fructe
Denumirea 1 Hexoze
CHO OH CH

Formula 2
OH CH H C CH2OH

Rspndirea 3 Legume i fructe

D-Glucoza

CH2OH

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

18

.
OH OH CH CH2OH

Biochimie horticol

D-Manoza

CHO

CH OH
OH

CH OH

CH

mere, pere, piersici, portocale

OH CH OH CH OH CH CH2OH

D-Galactoza

CHO

CH

struguri, piersici, mere, pere, masline n legume si fructe sub forma de glicozide, mucilagii, gume

OH

OH CH CH OH OH CH OH OH CH CH2OH CH3

L-Rhamnoza

CHO

CH

D-Fructoza

H2COH

CO

CH OH

CH

legume si fructe

Heptoze
H2COH CO CH OH CH

OH CH2

OH CH CH2OH

avocado

D-Manoheptuloza
OH OH OH

OH CH CH2OH

D-Sedoheptuloza

H2COH

CO

CH OH

CH

CH

legume si fructe

D-Glicero-Dgalactoheptuloza Octoze D-Glicero-Dmanooctuloza D-Glicero-Dtalooctuloza D-Glicero-Lgalactooctuloza Nonoze D-Eritro-LGlucononuloza

OH CHO CH CH OH CH OH
OH H2COH CO CH OH H C OH CH

OH CH

OH CH CH2OH

legume si fructe

OH CH

OH CH CH2OH

avocado

OH H2COH CO CH OH H C OH
OH HOCH2 CO CH OH CH CH OH CH OH

OH CH CH2OH

CH2 + CH2 OH OH CH OH OH CH

CH

avocado

OH CH OH
OH CH OH CH CH2OH

HOCH2

CO

CH

CH2OH

avocado

avocado

Pe lng glucide, n legume i fructe se gsesc n stare liber i derivai ai acestora sub form de alcooli zaharidici (polioli), acizi zaharidici, deoximonozaharide i esteri.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

19

Biochimie horticol

Proprieti chimice a) reducerea. Prin reducerea gruprii carbonilice monozaharidele fixeaz 2 atomi de H formnd poliolii (alcoolii zaharidici) corespunztori. Poliolii (alcoolii zaharidici) sunt compui hidroxilai cu mai mult de dou grupri OH n molecul i care din punct de vedere fiziologic, pot ndeplini rolul de glucide de transport, datorit posibilitii lor de transformare enzimatic n glucide. Cei mai importani reprezentani sunt: D-glicerolul, D-ribitolul, D-manitolul i mezoinozitolul. D-Glicerolul, un triol aciclic, reprezint principala component a gliceridelor, alturi de acizii grai. D-Ribitolul este ntlnit sub form de derivai cum sunt: riboflavina i nucleotidele flavinice. D-Manitolul este un hexitol aciclic. D-Sorbitolul rezult din reducerea glucozei i reprezint principala form de transport al glucidelor n unele specii pomicole. De asemenea, a fost identificat n mai multe specii de fructe, coninutul acestora fiind de 0,03 % la cpuni, 0,58 % la mere, 1,40 % la pere, 0,31 % la piersici i 3,10 % la prune (Hulme, 1970). Mezoinozitolul este un hexapoliol ciclic prezent n unele specii de fructe, coninutul acestuia n 100 g suc ajungnd la 170 mg la portocale, 135 mg la tangerine, 112 g la grapefruit, 57 mg la lmi i 24 mg la mere (Hulme, 1970). Din punct de vedere fiziologic, mezoinozitolul are rolul unui stimulator de cretere, activeaz biosinteza proteinelor i a acidului ascorbic i este considerat ca un precursor n sinteza unor oligo- i poliglucide. Esterii fosforici ai acestui ciclitol, reprezint pentru legume i fructe o important rezerv de acid fosforic.
Polialcooli Formula
HOCH2
HOCH2 CH OH

Denumirea D-Glicerol D-Ribitol

CHOH
CH OH
OH

CH2OH
CH OH
OH CH CH2OH

Rspndirea masline mature legume si fructe

CH2OH

D-Manitol

HOCH2

CH OH

CH OH

CH

ananas,ceapa, morcovi

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

20

.
OH HOCH2 CH CH OH OH CH OH CH CH2OH

Biochimie horticol

D-Sorbitol

mere, pere, cirese, prune, caise, piersici, gutui, struguri, curmale, avocado

OH

OH CH CH OH
OH OH CH OH CH CH2OH

D-Perseitol

HOCH2

CH OH
OH

CH OH

CH

CH2OH

avocado

D-Eritrozo-DGalacto-octitol

HOCH2

CH

CH OH
OH

CH OH

CH

avocado

OH OH

Mezoinozitol
OH

OH

caise, piersici, mere pere, portocale, grapefruit, lamai

OH

b) oxidarea Acizii zaharidici rezultai din oxidarea glucidelor au fost identificai frecvent n legume i fructe, n special drept componente ale unor poliglucide. Dintre cei mai importani acizi identificai se menioneaz: acidul D-gluconic, acidul D-galacturonic i acidul mucic.
Denumirea
OH

Acizi uronici Formula

OH CH CH OH OH OH CH CH CH OH OH CH COOH COOH

Acid-Dgalacturonic

CHO

CH

Rspndirea tomate, morcovi, cartofi, mere, pere, piersici, capsuni capsuni, struguri, mere, prune

Acid-Dglucuronic

CHO

CH

OH
OH OH H C OH OH CH OH OH CH OH CH OH CH COOH CH COOH

Acid mucic

HOOC

CH

pere, caise, piersici, mure

Acid zaharic

HOOC

CH

pere, caise, piersici, ananas

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

21

.
OH OH CH OH CH OH CH CH2OH

Biochimie horticol

Acid-D-gluconic

HOOC

CH

mere, struguri

Datorit prezenei gruprilor hidroxilice, glucidele se pot esterifica cu acizii organici sau anorganici. c) esterificarea Esterii mai importani din legume i fructe sunt cei formai cu acidul fosforic. Aceti esteri fosforici ai glucidelor reprezint forma activ a monoglucidelor ce intr n procesele metabolice i au o larg rspndire, chiar dac, n unele cazuri, concentraia lor este foarte redus. Astfel, n fructe se gsesc n cantitate mai mare 6-fosfo-D-glucoza, 6-fosfo-D-fructoza i 1,6-difosfo-D-fructoza. Esterul hexafosforic al mezoinozitolului este prezent n plantele leguminoase ca sare dubl de calciu i magneziu, cunoscut sub denumirea de fitin. Esterii glucidelor cu acizii galic i n-galoil galic intr n alctuirea taninurilor, care se acumuleaz n vacuolele celulelor i au rol n realizarea gustului astringent al produselor horticole. Mslinele conin oleuropein, o substan cu gust amar, care din punct de vedere chimic este diesterul glucozei cu acidul protocatechic i acidul oleuropeinic (2,6-dimetil-1hidroximetil-1-carboxi-ciclohexen-2). Produsele horticole conin i ali derivai ai glucidelor cum sunt aminoglucidele. Un exemplu l constituie D-glucozamina ce intr n alctuirea sfingofosfatidelor i Dgalactozamina identificate n stare liber n struguri.
Esteri Formula
CHO CH OH OH CH OH HOCH2 CO CH
OH H2O3PO CH2 CO
OH H2O3PO CH2 CH CH OH

Denumirea Aldehida D-3fosfoglicerica 4-Fosfo-Deritroza 5-Fosfo-Dribuloza 1,5 Difosfo-Dribuloza 1 Fosfo-Dglucoza (esterul Cori)

Rspndirea
OPO3H2

CH2

legume si fructe legume si fructe legume si fructe

OH CHO CH

CH2 OH CH
OH CH
OH CH

OPO3H2

CH2

OPO3H3

CH

CH2
OH CH

OPO3H2

legume si fructe legume si fructe

CH2OH

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

22

Biochimie horticol

6 Fosfo-Dglucoza (esterul Robinson) 1,6-Difosfo-Dfructoza (esterul Harden Young) 6 Fosfo-Dfructoza (esterul Neuberg)

OH CHO CH CH OH

OH CH

OH CH CH2 OPO3H2

legume si fructe

OH H2O3PO CH2 CO CH OH CH

OH CH CH2 OPO3H2

legume si fructe

OH HOCH2 CO CH OH CH

OH CH CH2 OPO3H2

legume si fructe

OH

OH CH

OH CH CH 2 OPO3H2

1,7-Difosfo-Dsedoheptuloza

H2O3PO

CH 2

CO

CH OH
O

CH

legume si fructe

(HO)3P

P(OH)3 O O P(OH)3 O O O P(OH)3

Acidul fitinic (esterul hexafosforic al mezoinozitului)

O (OH)3 P O (HO)3P O O

in legume si fructe, ca sare de Ca si Na (fitina)

2.2.1. Oligoglucide Cele mai rspndite i importante oligoglucide din fructe i legume sunt cele formate din hexoze. Cel mai important reprezentant l reprezint zaharoza, diglucid cu caracter nereductor, C12H22O11, format din D-glucoz i D-fructoz, intrnd n diverse procese biochimice ce se desfoar n produsele horticole, pe parcursul creterii, dezvoltrii sau maturrii acestora. Aceasta reprezint principala form de transport a glucidelor produse n procesul de fotosintez spre toate organele plantelor.

n mod natural zaharoza este sintetizat doar n plante din precursorii glucozo 1-fosfat i fructozo 6-fosfat. La unele specii (ananas, caise, pepeni, banane) reprezint principalul glucid prezent n fructe, la celelalte specii coexist mpreun cu glucoza i fructoza n diferite proporii (tabel 4). Este cunoscut sub denumirea comercial de zahr, fiind obinut prin extracie din trestia de zahr (Saccharum spp.) i sfecla de zahr (Beta vulgaris), specii la care
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

23

Biochimie horticol

reprezint ntre 12% i 20% din cantitatea total de substan uscat. n perioada 2001-2002, producia mondial de zahr a fost de 134,1 milioane de tone. Se obine prin extracia materialului vegetal mrunit n ap firbinte, concentrarea extractului i formarea siropului, din care este cristalizat zaharoza. Maltoza, C12H22O11, este un diglucid reductor format din condensarea a dou molecule de glucoz i se gsete n cantiti mari n struguri i banane, reprezentnd pn la 0,5 % din partea edibil. Este produsul de hidroliz al amidonului n prezena amilazelor (tabel 2). n struguri s-a mai identificat n cantitate mic melobioza, iar n fructele tropicale lactoza. n afar de diglucidele menionate, n legume i fructe s-au mai identificat unele tri- i tetraglucide, cum sunt: rafinoza care se gsete n struguri sau prune i stahioza, n struguri, fasole i linte. Alte oligoglucide ca: rutinoza i geniobioza reprezint componente glucidice ale glucozidelor: hesperedin, rutin i amigdalin prezente n portocale, migdale, lmi etc. La nivelul peretelui celular s-au identificat -1,4-oligogalacturonide cu rol de inductori sau elicitori ai biosintezei unor antibiotice i ai ligninei, n apropierea locului de ptrundere a agentului patogen sau de rnire i, totodat, determin biosinteza unor inhibitori ai proteinazelor, la nivelul ntregii plante (Dinischiotu i Costache, 1998). Tabelul nr. 2. Principalele oligoglucide din legume i fructe
Diglucide
OH OH O CH3 CH2 O OH

fructe
HO O OH OH

Rutinoza

HO

H2COH O

H2COH O OH OH

Maltoza
OH

OH

struguri, banane

OH
H2COH O O HO OH OH
H2COH O O OH O OH H2COH

OH
CH2 O OH

Geniobioza
HO OH

in fructe, ca glicozida

OH
OH

Celobioza
OH

OH

legume si fructe
OH

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

24

.
H2COH OH O OH O OH OH OH H2COH OH O OH O OH OH OH
CH2OH OH H3 C O O OH OH OH OH O

Biochimie horticol
H2COH O

Lactoza

fructe tropicale
OH CH2 O OH OH

Melibioza

struguri

Triglucide

cartofi
O OH OH OH

Chacotrioza
CH2OH O OH OH O OH CH2OH O OH

O CH3

Solatrioza

OH

O OH OH O OH

tomate

CH2OH OH O O OH OH OH

CH2 O OH O OH OH CH2OH o HO CH2OH

Rafinoza

struguri, prune

CH2OH

CH2 O O OH OH OH O O

CH2 O OH O OH OH CH2OH o HO

Tetraglucide
Stahioza

OH OH

CH2OH

fasole, linte, soia, struguri

OH

OH

Tabelul nr. 4. Valoarea coninutului principalelor glucide din unele specii de legume i fructe (% parte edibil) (Dup Souci .a., 1981) Specia Glucoz Fructoz Zaharoz Specia Glucoz Fructoz Zaharoz Ardei 1,41 1,26 0,12 Afine 2,38 3,28 0,12 Castravei 0,88 1,00 0,05 Banane 3,80 3,80 10,60 Ceap 2,24 1,83 1,91 Caise 1,73 0,87 5,12 Conopid 1,16 1,05 0,23 Cpuni 2,00 2,10 1,10 Fasole verde 0,99 1,34 0,43 Ciree 6,10 5,50 0,22 Gulii 1,40 1,23 1,29 Coacze negre 2,69 3,57 0,73 Mazre verde 0,06 0,05 1,15 Coacze roii 2,27 2,67 2,67 Morcovi 1,61 1,45 1,76 Mere 1,73 5,91 2,58 Pstrnac 0,18 0,24 2,98 Pere 2,30 2,50 3,50 Pepeni 1,60 1,30 9,50 Piersici 1,16 1,27 5,38 Ridichi 1,33 0,73 0,11 Portocale 2,30 2,50 3,50 Salat 0,36 0,45 0,09 Prune 2,74 2,06 2,78 Spanac 0,13 0,12 0,21 Struguri 7,28 7,33 0,42 Tomate 0,90 1,42 0,01 Varz alb 1,60 2,02 0,10 Varz roie 1,20 1,67 0,29 Vinete 1,31 1,53 0,25
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

25

Biochimie horticol

2.2.3. Poliglucide Homopoliglucide. Pentozanii dintre care se evideniaz arabanii, ce intr n alctuirea pereilor celulari ai produselor horticole, fcnd legtura ntre moleculele de celuloz, hemiceluloze i pectine. Hexozanii, din care fac parte mananii, galactanii, fructanii i glucanii au o larg rspndire n produsele horticole, intrnd n compoziia pereilor celulari. M a n a n i i au o structur unitar i sunt alctuii din uniti alctuite din -manoz. G a l a c t a n i i au n constituia lor molecule de D-galactoz i L-galactoz, monoglucide care se gsesc foarte rar asociate cu alte glucide. F r u c t a n i i sunt alctuii din molecule de D-fructoz, unii avnd rol de glucide de rezerv. Astfel, n andive se gsete inulina, iar n sparanghel asparagozina. G l u c a n i i sunt poliglucide formate din molecule de D-glucoz, cei mai importani fiind amidonul i celuloza.

Amidonul reprezint principala form de depozitare a glucidelor n plante, n amiloplaste, sub form de granule cu forme i mrimi caracteristice fiecrei specii. Este format din amiloz i amilopectin. Amiloza este componenta liniar alctuit din molecule de D-glucoz legate 1,4-glicozidic, iar amilopectina este format din molecule de D-glucoz legate 1,4 --glicozidic alctuind

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

26

Biochimie horticol

lanuri liniare, de care se leag prin legturi -1,6-glicozidice ramificaii alctuite din moleculele aceleiai substane. Amidonul reprezint cea mai important substan de rezerv din plante, care se acumuleaz n organele de rezerv: rdcini, tuberculi, rizomi, semine, fructe etc.(tabelul nr. 5). n timpul intrrii n vegetaie amidonul este hidrolizat enzimatic, punnd la dispoziia organelor vegetative -D-glucoza necesar desfurrii respiraiei i n procesul de cretere. Tabelul 5. Coninutul de amidon din legume i fructe (dup Souci .a., 1981).
Specia Cartofi Conopid Fasole verde Spanac Tomate % 16,8 0,2 3,1 0,1 0,1 Specia Banane Castane Mere Nuci % 2,7 27,3 0,6 13,5

Celuloza este un poliglucid care intr n structura pereilor celulari. Macromoleculele filiforme de celuloz sunt formate din molecule de D-glucoz legate prin legturi 1,4--glicozidice. De obicei este nsoit i de hemiceluloze i substane pectice. n legume i fructe aceste substane se gsesc n cantiti mici (tabelul nr. 6). Heteropoliglucide. Substanele pectice constituie componentele principale ale lamelei mediane dintre pereii celulari. Acestea sunt formate din molecule de acid -D-galacturonic legate prin legturi 1,4--glicozidice, la care sunt asociate oligozaharide liniare sau ramificate formate din ca Dgalactoz, L-arabinoz, D-xiloz. Gruprile carboxilice ale lanului sunt esterificate cu alcool metilic. Aceast structur poligalacturonic este proprie tuturor substanelor pectice, indiferent de provenien, diferenele dintre ele fiind determinate de gradul de esterificare al gruprilor carboxilice, de caracteristicele substanelor nsoitoare etc. n grupa acestor substane intr protopectina care confer insolubilitatea lamelei mediane i fermitatea caracteristic fructelor i legumelor. Este insolubil n ap i prin hidroliz acid, alcalin sau enzimatic se formeaz acizi pectinici i pectici.
COOH O OH O OH COOH O OH O OH OH O OH O COOH COOH O OH O OH O

Structura acidului poligalacturonic Acizii pectinici sunt constituii din acizi poligalacturonici, cu un grad mai mare de esterificare a gruprilor carboxilice i dau cu apa soluii coloidale. Solubilitatea lor scade odat cu creterea numrului de grupri metoxi. Termenul general de substane pectice se folosete pentru acizii pectinici solubili n ap, cu un coninut de metilester i un grad de neutralizare variabil, capabili s formeze geluri cu soluiile de zaharoz i cu ionii de calciu, la un pH de 2,7 3,2. n cazul pectinelor slab metoxilate, gelul rezult din formarea unei legturi cu calciul, ntre dou legturi carboxilice a dou lanuri diferite, situate n

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

27

Biochimie horticol

contact unul cu altul. n cazul unui grad mare de metoxilare, legturile dintre pectine implic formarea de legturi de hidrogen i interaciuni hidrofobe ntre molecule (Thakur i colab., 1997). Coninutul de substane pectice al legumelor i fructelor variaz n medie ntre 0,2% 1,4% (tabelul nr. 6). Tabelul nr. 6. Coninutul n celuloz i substane pectice din unele legume i fructe Dup Gherghi .a., 1973
Specia Cartofi Castravei Ceap Conopid Fasole verde Morcovi Ridichi Sparanghel Salat Spanac Tomate elin Usturoi Varz alb Celuloz % 0,89 0,39 0,86 1,12 1,45 0,95 0,70 0,40 0,76 0,74 0,70 1,40 0,70 0,97 Substane pectice % 0,42 0,20 0,90 1,40 1,30 Specia Agrie Banane Caise Cpuni Ciree Coacze negre Coacze roii Mere Mure Pere Prune Piersici Struguri Viine Zmeur Celuloz % 1,19 2,37 0,33 1,38 0,88 0,76 0,67 0,23 Substane pectice % 0,70 0,60 0,56 0,40 0,36 0,90 0,43 0,78 0,70 0,53 0,76 0,54 0,28 0,20 0,40

1,05

Gumele vegetale sunt exudate vegetale care apar ca urmare a rnirii esuturilor, care sunt formate din pentoze, hexoze i acizi uronici, proporia acestora variind mult de la o specie la alta. Prezena gumelor vegetale a fost semnalat la ciree, migdale, prune, grapefruit, portocale, piersici etc. Hemicelulozele sunt substane neomogene care nsoesc celuloza n structura pereilor celulari i sunt formate dintr-un amestec complex de poliglucide. Cea mai mare parte a hemicelulozelor este constituit din xilani, pn la 30 %, alturi de manani, galactani, arabani i pectine. Hemicelulozele uor hidrolizabile constituie poliglucide de rezerv, iar cele greu hidrolizabile au rolul de substane plastice. Caracterizarea legumelor i fructelor, din punct de vedere al coninutului lor n glucide, se face prin aprecierea proporiei de glucide totale (mono- i diglucide) din substana proaspt edibil. Valoric, n funcie de specie, coninutul n glucide totale variaz ntre 2,2% - 28,0 % n cazul fructelor i ntre 1,2% - 27,5 % n cazul legumelor (tabelul nr. 7). n cadrul aceleiai specii, coninutul n glucide difer n funcie de soi. Astfel, la soiurile de mere Golden Delicious, Renet de Canada, Jonathan, Creesc, Frumos de Boskoop coninutul de glucide totale depete 10 %, n timp, ce la soiul Clar alb, ovari comun, Boiken, Renet Landsberg acesta este mai mic de 9 %. S-au dovedit a fi bogate n glucide totale (peste 10 %) soiurile de pere Passe Crassane, Contesa de Paris, Cure, Buna Luiza de Avranches etc. De asemenea sunt bogate n glucide totale (peste 11 %) soiurile de caise: Luizet, Reliable i Pasviot, soiurile de piersici: Flacra, Elberta i Frumos de Bneasa i soiurile de ciree: Pietroase Esperen, Hedelfinger, Germersdorf etc. n cazul cpunilor, cel mai ridicat coninut de glucide totale (peste 7 %) s-a determinat la soiurile: Fairfax,
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

28

Biochimie horticol

Pocahontas, Kovaliova 100 i Regina. Un coninut de peste 5% glucide totale s-a determinat la soiurile de zmeur: Golden Queen, Loyd George i Deutschland i la soiurile de mure Wilson timpuriu. Tabelul nr. 7. Coninutul de glucide totale din principalele specii de legume i fructe Dup Souci .a. (1975), Gherghi .a. (1979)
Specia Ardei Cartofi Castravei Ceap Conopid Fasole psti Gulii Mazre Morcov Pstrnac Ptrunjel Pepeni Praz Sfecl roie Spanac Sparanghel Tomate elin Usturoi Varz alb Varz roie Vinete Media % 3,0 1,2 1,9 8,4 2,5 2,0 4,2 3,6 6,9 11,2 9,5 7,0 6,3 5,6 3,1 2,3 3,8 3,6 25,0 4,5 4,0 2,5 Limite % 1,5 6,6 0,4 3,4 1,2 3,4 4,7 10,2 1,7 4,8 1,9 2,6 3,0 5,7 1,3 5,9 5,8 8,2 8,6 19,5 8,5 15,4 4,5 11,3 4,5 9,8 2,3 8,9 2,4 3,7 2,0 3,2 1,8 4,3 0,9 4,6 20,6 30,9 2,9 5,8 3,1 5,2 0,7 5,4 Specia Afine Agrie Banane Caise Castane Cpuni Ciree Coacze negre Coacze roii Grapefruit Gutui Lmi Mere Mure Nuci Pere Piersice Portocale Prune Struguri Viine Zmeur Media % 9,2 9,4 18,0 10,1 28,0 5,0 11,8 7,6 5,1 6,9 10,1 2,2 11,6 5,1 12,5 11,8 10,5 8,3 12,3 16,3 10,2 4,5 Limite % 6,2 11,9 8,5 10,0 11,4 27,0 9,6 13,8 26,0 29,0 6,4 15,3 6,4 15,3 6,9 7,9 4,0 6,3 6,0 8,0 6,5 12,9 0,9 3,6 6,0 16,7 3,9 7,3 7,8 16,2 6,5 14,9 6,3 12,4 5,5 10,0 7,2 14,9 5,2 19,4 6,0 14,0 3,0 9,3

Dintre legumele bogate n glucide totale menionm soiurile de varz Fornax i Falcone i cele de tomate de ser Aurora i Export II (peste 3 %), soiul Ardei lung (peste 4 %), soiul de morcov Chantenay (peste 7 %) i ceapa din soiul de Macu (10 %). Coninutul n glucide totale al legumelor i fructelor variaz i n funcie de condiiile agropedoclimatice. Astfel, din cercetrile efectuate de Gherghi .a. (2001) asupra mai multor soiuri de mr recoltate din 10 bazine pomicole, a rezultat c fructele provenite din zonele mai clduroase i cu precipitaii mai reduse, ca i cele provenite de pe soluri nisipoase sau din plantaii n care solul s-a meninut ca ogor negru, au un coninut mai mare de glucide totale.

Autoevaluare 1. Definiia i clasificarea glucidelor. 2. Definii i clasificai monoglucidele. Exemple. 3. Configuraia spaial, izomeria i reprezentarea glucidelor. 4. Proprieti fizice i chimice ale monoglucidelor. 5. Definii i clasificai oligoglucidele. Exemple. 6. Definii i clasificai poliglucidele. Exemple. 7. Precizai coninutul de glucoz, fructoz i zaharoz la 5 specii de legume i 5 specii de fructe prezentate n tabelul 5. 8. Factori care influeneaz coninutul de glucide la legume i fructe.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

29

Biochimie horticol

Bibliografie selectiv 1. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 2. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 3. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 4. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 5. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 6. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

30

Biochimie horticol

CAPITOLUL 3. LIPIDE Cuvinte cheie: lipide, glicerol, acizi grai, proprieti fizice, proprieti chimice, lipide complexe Rezumat Lipidele, cunoscute i sub denumirea de grsimi, reprezint esteri ai acizilor grai cu diferii alcooli, cel mai adesea glicerolul. Se clasific n fucnie de structur n lipide simple i complexe, iar n funcie de rolul lor n organismul vegetal n lipide de rezerv i lipide structurale (de constituie). Acizii grai sunt acizi carboxilici cu un numr mare de atomi de C (C4-C24), fiind saturai sau nesaturai, n funcie de numrul de legturi duble din caten. Acizii grai saturai cei mai rspndii n natur sunt: acidul caprinic C10, acidul miristic C14, acidul palmitic C15, acidul arahic C20. Acizii grai nesaturai pot avea o dubl legtur (ex. acidul oleic C18), dou duble legturi (acidul linoleic C18), cu trei duble legturi (acidul linolenic C18), cu patru duble legturi (acidul arachidonic C20). Alcoolii reprezint al doilea component al lipidelor naturale. Alcoolii aciclici monohidroxilici corespunztori acizilor grai superiori intr n structura cerurilor (ex. alcoolul cetilic corespunzator acidului palmitic, alcoolul stearilic corescpunzator acidului stearic). Glicerolul sau glicerina este alcoolul trihidroxilic care formeaz gliceridele i unele lipide complexe. Fitosterolii (stigmasterolul, sitosterolul) sunt alcooli superiori cu structur tetraciclic care au 29 de atomi de carbon sunt prezeni ndeosebi n seminele plantelor oleaginoase i leguminoase. Cerurile vegetale cu rol de protecie a organelor vegetale aeriene sunt formate din ceride (esteri ai acizilor grai cu alcooli superiori) hidrocarburi, alcooli i acizi superiori, rini, etc. Lipidele complexe sunt esteri ai acizilor grai la formarea crora particip pe lng alcool i acizi grai, acidul fosforic, aminoalcooli, aminoacizi, inozitol sau glucide. Fosfolipidele reprezint lipidele din structura membranelor celulare, fiind cele mai rspndite lipide complexe din plante. 3.1. Noiuni introductive Lipidele constituie o grup de compui organici naturali, rspndii n toate organismele vegetale, care au caracter hidrofob i sunt insolubile n mediu apos, dar solubile n solveni organici (eter, benzen, cloroform, etc.). Se acumuleaz mai ales n seminele plantelor constituind rezerve nutritive i energetice i intr n componena tuturor celulelor, fiind componentele eseniale ale membranelor celulare. Din punct de vedere chimic, lipidele sunt esteri ai acizilor grai saturai sau nesaturai cu diferii alcooli, cel mai adesea glicerolul (numite i lipide saponificabile). n structura anumitor lipide se gsesc i alte substane cum ar fi aminoalcooli i acidul fosforic. Analiza chimic elemental arat prezena C, H, O, iar la unele lipide mai exist N, P sau S.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

31

Biochimie horticol

Din punct de vedere biochimic, lipidele ndeplinesc urmtoarele funcii n organismele vegetale:

Au rol plastic, intrnd n structura membranelor plasmatice i ale tuturor organitelor celulare, mpreun cu proteinele asigurnd funcionalitatea acestora;

Au rol energetic, fiind ntlnite ca substane de rezerv n seminele plantelor oleaginoase, prin hidroliza lor eliberndu-se o cantitate mare de energie biochimic;

Constituie nveliul protector al organelor aeriene ale plantelor, sub form de cuticul sau cear, care mpiedic pierderea excesiv a apei din organismele vegetale;

Particip direct sau indirect la diferite procese metabolice ca activatori ai unor enzime, componente ale sistemului de transport al electronilor n cloroplaste i mitocondrii, etc;

Reprezint precursori importani pentru sinteza unor vitamine, hormoni, etc.

Clasificarea lipidelor n funcie de structur i compoziie este prezentat n scema de mai jos:

Proprietile lipidelor depind n mare msur de natura acizilor grai i a alcoolului din compoziie. 3.2. Acizii grai Acizii grai sunt acizi carboxilici cu urmtoarele proprieti:

au numr mare de atomi de carbon (ntre 4 i 32); au numr par de atomi de carbon; au caten liniar, fr ramificaii; sunt monocarboxilici;
32

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

pot fi saturai sau nesaturai. Acizi grai saturai i acizi grai nesaturai Acizii grai saturai sunt acizii grai care nu prezint duble legturi, avnd formula

general CnH2nO2 sau CH3-(CH2)n-COOH n care n este un numr par i are valori ntre 2 i 30. De aceea simbolul lor prezint, pe lng numrul atomilor de carbon, cifra 0. aa cum se poate observa mai jos. CH3-CH2-CH2-COOH (4:0) acidul butiric - C4 CH3-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH (6:0) acidul capronic - C6 CH3-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH (16:0) acidul palmitic - C16 Reprezentarea simplificat a acizilor grai se face printr-o linie n zig-zag ca n figura de mai jos:

Principalii acizi grai saturai sunt prezentai n tabelul de mai jos.

DENUMIRE

Numrul atomilor de C C4 C6 C8 C10 C12 C14 C16

SIMBOL

CONSISTENA (stare fizic la temperatura obinuit) - lichid - lichid - lichid - lichid - lichid - lichid - solid

Rspndire

Acid butiric Acid capronic Acid caprilic Acid caprinic Acid lauric Acid miristic Acid palmitic

(4:0) (6:0) (8:0) (10:0) (12:0) (14:0) (16:0)

- unt de vac - unt de capr - unt - ulei de cocos - unt de cocos - unt de laur - majoritatea lipidelor naturale - cocos - ulei de palmier - ulei de bumbac

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

33

Biochimie horticol

Acid stearic

C18

(18:0)

- solid

Acid arahic

C20

(20:0)

- solid

Acid behenic

C22

(22:0)

- solid

Acid lignoceric

C24

(24:0)

- solid

- majoritatea lipidelor naturale - seu - untur - slnin - carne gras - margarin - cacao - ciocolat - ulei de arahide - boabe de mutar - boabe de rapi - soia - arahide - ulei de arahide, sfingomieline i cerebrozide

Acizii grai nesaturai sunt acizii grai cu una sau mai multe duble legturi, majoritatea de consisten uleioas la tepmperatur obinuit, cu excepia acidului arachidonic C20. Acetia au catena lung, fiind formai din 18 sau mai muli atomi de carbon, cu excepia unor acizi mononesaturai (lauroleic C12, miristioleic C14, palmitoleic C16) mai rar ntlnii n natur, care au catena mai scurt. Dintre acizii grai nesaturai, compuii care posed o singur dubl legtur, poart numele de acizi grai mononesaturai, iar cei cu mai multe astfel de legturi duble, se cheam acizi grai polinesaturai. Cel mai cunoscut acid gras mononesaturat este acidul oleic care se gsete n lipide n proporie de pn la 80% din totalul acizilor prezeni i adesea este nsoit de acidul linoleic i palmitic. Acidul oleic reprezint izomerul cis, n timp ce forma trans este acidul elaidinic cu proprieti diferite de izomerul su. Se afl n cantiti mai mari n uleiul de msline, i are formula: CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH (18:1 sau 18:19) Simbolul, n cazul acizilor nesaturai, se mai completeaz cu poziia atomilor de carbon care realizeaz dubla legtur. Numrtoarea atomului de carbon care se leag de urmtorul prin puntea C=C , se poate face n 2 moduri: dinspre gruparea carboxil spre gruparea metil (se noteaz cu c). dinspre gruparea metil spre carboxil (se noteaz cu ).

n cazul acidului oleic, de oriunde se pornete, cifra va fi tot 9. Astfel avem: sens numerotare c CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH (9c-18:1) sens numerotare (acid -9)

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

34

Biochimie horticol

Acizii grai polinesaturai prezint 2 sau mai multe duble legturi i sunt considerai pentru om acizi grai eseniali (AGE) sau vitamine F. Lund ca exemplu acidul linolenic, acid gras cu 3 duble legturi, prezent mai ales n uleiul de in, acesta are formula i simbolul: CH3-(CH2-CH=CH)3-(CH2)7-COOH (9c, 12c, 15c-18:3 sau 18:39,12,15) (acid -3) Numerotarea omega (), n cazul acizilor polinesaturai, nu se mai continu dup atomul de carbon prin intermediul cruia se realizeaz prima dubl legtur. Respectnd unghiurile legturilor chimice, grafic, molecula de acid linolenic (acid omega 3) se poate reprezenta astfel:

Principalii acizi grai nesaturai sunt prezentai n tabelul de mai jos: Numrul atomilor de C - cu o dubl legtur Acid lauroleic C12 DENUMIRE Acid miristioleic C14 Formula SURSE

CH3-CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH CH3-(CH2)3-CH=CH-(CH2)7-COOH

Acid palmitoleic

C16

CH3-(CH2)5-CH=CH-(CH2)7-COOH

- lapte de capr - cocos - ulei de balen - n cantiti mici, n grsimile vegetale i animale

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

35

Biochimie horticol

Acid oleic (omega 9)

C18

CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH

Acid erucic

C22 - cu dou duble legturi

CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)11-COOH

- ulei de msline - semine de dovleac - ulei de rapi - ulei de conifere

Acid linoleic (omega 6)

C18

- ulei de in - ulei de CH3-(CH2)4-CH=CH- CH2-CH=CH-(CH2)7-COOH floarea soarelui - semine oleaginoase - in - peti - arahide CH3-(CH2)4-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH- - mac (CH2)4-COOH - semine de struguri i de coacze negre
CH3-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-CH=CH(CH2)7-COOH CH3-(CH2)3-CH=CH-CH=CH-CH=CH-(CH2)7COOH

- cu trei duble legturi Acid linolenic (omega 3) Acid -linolenic (omega 6) Acid elaeostearic
(izomer de tip omega 6 al acidului linolenic)

C18

C18

C18

-semine de dovleac - arahide - fosfolipide

- cu patru duble legturi Acid arahidonic C20 CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)4-CH2-CH2-COOH (omega 6)

Hidroxiacizi grai conin n molecula lor i funciunea hidroxil. n rinile multor conifere se ntlnesc urmtorii hidroxiacizi: acidul sabinic (hidroxilauric) i acidul iuniperic (hidroxipalmitic) II: H2C (CH2)10 COOH OH H2C (CH2)14 COOH OH 3.3. Alcooli Alcoolii reprezint al doilea component al lipidelor naturale. Pot fi aciclici sau ciclici, monohidroxilici sau polihidroxilici, cu sau fr azot. Alcoolii aciclici monohidroxilixi fr azot intr n compoziia cerurilor i adesea corespund acizilor grai superiori. - Alcool cetilic - Alcool stearilic - Alcool cerilic - Alcool miricilic CH3-(CH2)14-CH2-OH CH3-(CH2)16-CH2-OH CH3-(CH2)25-CH2-OH CH3-(CH2)30-CH2-OH corespunztor acidului palmitic corespunztor acidului stearic corespunztor acidului cerotic

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

36

Biochimie horticol

Aminoalcoolii sunt alcooli ciclici azotai care intr n constituia lipidelor complexe. Cei mai rspndii sunt colamina i derivatul su trimetilat colina, care intr n structura acestor lipide sub form de esteri fosforici. Sterolii sunt alcooli superiori cu structur tetraciclic ce au la baz nucleul ciclopentanperhidrofenantrenic:

Ciclurile din nucleu se noteaz cu literele A,B,C,D, iar atomii de C din cicluri, cu cifrele de la 1-17. n poziiile 10, 13, 17, atomii de H sunt nlocuii cu radicali, iar n poziia 3 se afl un hidroxil. n structura sterolilor pot fi i legturi duble (1-3) n ciclu, de obicei n B sau n catena din poziia 17. Sterolii se gsesc liberi n natur, dar i esterificai la hidroxilul din poziia 3 cu acizi grai, formnd steride. Sterolii din regnul vegetal (fitosterolii) se gsesc n mod obinuit n amestec format din mai muli reprezentani. Majoritatea conin 29 de atomi de carbon, iar cei mai importani sunt: sitosterolul, stigmasterolul i mai nou brasicasterolul. Se gsesc ndeosebi n seminele plantelor oleaginoase i leguminoase, unde se afl n concentraii de 0,2-0,6%, n seminele germinate de cereale, iar brasicasterolul la Brasicaceae. Din uleiul de soia s-a extras stigmasterolul, utilizat n industria medicamentelor

Sitosterol

Stigmasterol

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

37

Biochimie horticol

Brasicasterol

Ergosterol (provitamina D2)

Ergosterolul a fost izolat prima dat din cornul de secar i drojdii, fiind considerat un micosterol. Ulterior s-a dovedit a fi provitamina vitaminei D2, genernd dup iradierea cu raze UV vitamina D2 sau calciferolul, cu aciune puternic antirahitic la om. Glicerolul sau glicerina este alcoolul trihidroxilic component principal al gliceridelor i al multor lipide complexe. n stare anhidr este un lichid siropos, incolor, cu gust dulce, higroscopic i se amestec n orice proporii cu alcoolul sau acetona. Fiind un alcool manifest toate proprietile chimice ale funciei OH, ns acestea vor fi mai pronunate datorit vecintii grupelor alcoolice:

oxidarea menajat sau enzimatic a glicerolului duce la formarea de trioze:

la nclzirea glicerolului se formeaz acroleina care se recunoate prin mirosul neptor i aciunea sa lacrimogen:

cu acizii grai formeaz esteri n funcie de numrul i raportul moleculelor de glicerin i acid. Se pot forma mono, di i triesteri.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

38

Biochimie horticol

3.4. Lipide simple 3.4.1. Gliceride Gliceridele sunt lipidele simple cele mai rspndite, ele intrnd n componena tuturor celulelor i constituind forma de depozit al lipidelor de rezerv ndeosebi n seminele plantelor oleaginoase. Plantele oleaginoase conin n proporie mare acizii oleic i palmitic (80% n uleiul de msline) i n proporie mai mic acidul linoleic. Uleiul de floarea soarelui conine cca. 55-60% acid linoleic, 33-36% acid oleic i 5-10% acid palmitic. Marea majoritate a gliceridelor naturale sunt trigliceridele, care rezult prin esterificarea tuturor funciilor OH cu acizi identici sau diferii. Denumirea gliceridelor se face innd seama de natura acizilor grai componeni. O astfel de triglicerid mixt ce conine acid palmitic n poziia , acid oleic n poziia i acid stearic n poziia are urmtoarea structur:

Denumirea ei va fi palmit-oleo-stearina sau plmitiol- oleoil-stearoilglicerol. Proprietile fizice i chimice ale trigliceridelor sunt determinate de natura acizilor grai pe care i conin. Gliceridele naturale se pot afla n stare lichid (uleiurile vegetale) i solid sau semisolid (grsimile). Fiind amestecuri de gliceride mixte nu au temperaturi de topire fixe. Din punct de vedere al proprietilor chimice, trigliceridele vor da reacii caracteristice legturilor ester i dublei legturi, dac acizii grai constitueni sunt nesaturai.

Hidroliza poate avea loc fie n prezena acizilor tari (minerali), a bazelor tari sau n

prezena enzimelor lipaze, eliberndu-se treptat acizii grai constitueni i glicerolul.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

39

Biochimie horticol

Hidroliza enzimatic a lipidelor de rezerv n seminele aflate n curs de germinare determin formarea glicerolului i acizilor grai care sunt utilizai de planta tnr n procesul de cretere i n procesul de respiraie.

Hidroliza sub aciunea bazelor tari se numete saponificare decurge la cald i rezult

glicerol i spunuri (sruri de Na sau K ale acizilor grai).

Hidrogenarea este o proprietate caracteristic trigliceridelor de natur vegetal,

nesaturate, deoarece adiioneaz doi atomi de H la fiecare dubl legtur, rezultnd gliceride saturate. Pe aceast proprietate se bazeaz procesul industrial de obinere a margarinelor din uleiuri vegetale, care sunt mbogite ulterior cu vitamine, pigmeni cartenoidici, clorur de sodiu.

Oxidarea, polimerizarea i rncezirea. n contact cu oxigenul i vaporii de ap din

atmosfer, majoritatea gliceridelor vegetale sufer transformri chimice i biochimice cu apariia unui miros i gust neplcut, datorit acizilor -cetonici i aldehidelor formate din acizii grai constitueni. Fenomenul acesta de alterare se numete rncezire i este influenat de condiiile de obinere i de pstrare necorespunztoare. Acest proces poate fi prevenit cu ajutorul unor substane antioxidante naturale: tocoferolii, vitamina E, carotenii care inhib procesul de rncezire. 3.4.2. Ceride (ceruri vegetale) i etolide Ceridele sunt componente ale cerurilor lipide formate prin esterificarea acizilor grai cu alcooli superiori primari sau secundari, saturai sau nesaturai, cu 16-34 atomi de carbon. Cerurile vegetale sunt secreii naturale ale celulelor epidermice cu rol protector aflndu-se sub forma unui strat subire pe suprafaa tuturor organelor aeriene (frunze, flori, tulpini, fructe). n cerurile vegetale, pe lng ceride, se mai afl hidrocarburi, alcooli, acizi superiori, rini, etc. Cerurile de pe frunzele de varz i tutun, ca i de pe florile de trandafir sunt bogate n parafine
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

40

Biochimie horticol

superioare cu un numr impar de atomi de carbon. Ceara de Carnauba de pe frunzele palmierului Corypha este format n mare parte din cerotat de miricil. Se gsete i la bumbac, cnep, trestia de zahr, intrnd n compoziia cerurilor i masticurilor utilizate n pomicultur pentru ungerea locurilor de altoire sau a rnilor la pomii fructiferi. Cerurile de pe suprafaa organelor vegetale mpiedic pierderile prea mari de ap prin transpiraie i protejeaz planta de ageni duntori. Nu se recomand tergerea cerii de pe fructele puse la pstrare deoarece le scade rezistena i se pot deprecia rapid. Etolidele sunt ceride vegetale care formeaz componentul principal al cerurilor de la conifere. Au structur special fiind esteri ai unor hidroxiacizi superiori care se combin ntre ei, participnd de obicei 3-5 molecule la reacie de esterificare. Mai des ntlnii sunt acidul sabinic i acidul iuniperic.

3.5. Lipide complexe 3.5.1. Fosfatide (fosfolipide) Sunt lipide complexe formate dintr-un alcool, o baz azotat i acizi grai superiori. Alcoolii din constituia fosfatidelor sunt de obicei glicerina, inozitolul, aminoalcoolul, sfingozina sau dihidrosfingozina. Ca baze azotate particip colamina i colina, uneori aminoacidul serina. Fosfatidele se clasific n glicerofosfolipide, inozitolfosfolipide i sfingolipide. Glicerofosfolipidele sunt lipide complexe ce conin n molecul glicerin esterificat cu acizi grai i cu acid fosforic. Restul de acid fosforic este esterificat uneori cu un aminoalcool, aminoacid sau inozitol. Sunt lipide de structur intrnd n compoziia membranelor plasmatice, alturi de proteine i glicolipide. n funcie de natura celui de-al doilea alcool, glicerofosfolipidele se clasific n:

lecitine conin colin, cefaline conin colamin, seringlicerofosfolipide conin serin, inozitolglicerofosfolipide conin inozitol.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

41

Biochimie horticol

Cele mai rspndite sunt lecitinele i cefalinele. n seminele de soia se gsesc n concentraie de 0,8%. Acizii grai ntlnii mai frecvent n structura lor sunt acidul stearic, acidul palmitic i acidul oleic (acidul gras nesaturat se afl de obicei n poziia ). Aceast structur confer glicerofosfolipidelor att un caracter amfoter (sunt amfioni), ct i caracter amfipatic. Caracetrul amfipatic este determinat de prezena unei componente hidrofobe, liposolubil (catenele celor doi acizi grai) i a unei componente hidrofile, solubile n ap (fosforil-colina, fosforil-colamina sau fosforil-serina).

Datorit acestor dou componente, moleculele se pot orienta diferit n structurile celulare, formeaz straturi duble de fosfolipide n care sunt incluse proteine, steroli i glicolipide. Fosfolipidele sunt orientate cu gruprile hidrofile spre exterior i cu acizii grai, hidrofobi, spre mijlocul acestui bistrat. Printre moleculele de fosfolipide se gsesc molecule de glucide, steroli i proteine integrate parial sau total, cu rol de enzime, proteine receptoare i proteine transportoare, conform ipotezei mozaicului fluid a lui Singer i Nicholson (1972).

Datorit acestei structuri, membranele plasmatice sunt semipermeabile, permit trecerea apei prin osmoz, iar a substanelor dizolvate prin proteine transportoare. Proteinele din structura membranelor sunt n acelai timp biochimic i biologic active. Ele pot fi enzime sau complexe enzimatice specifice (ex. pentru sinteza celulozei n plasmalem), pot fi receptori pentru mesageri chimic de lumin, presiune sau ecitaii mecanice, pot fi proteine transportoare de tipul canalelor sau pompelor de ioni. Astfel, membranele i ndeplinesc rolul specific de compartimentare celular, transportul diferitelor substane n i din celule, precum i ntre citoplasm i organitele celulare. Fosfolipidele sunt scindate la nivel celular de fosfolipaze.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

42

Biochimie horticol

3.5.2. Sfingolipide Sunt lipide complexe ce conin n molecula lor n locul glicerolului substane cu caracter de aminoalcooli: sfingozina, dihidrosfingozina sau fitosfingozina: CH3-CH2- CH2(CH2)11-(CHOH)2-CH(NH2)-CH2OH. n sfingolipidele vegetale s-au identifiact acidul cerebronic (-hidroxi-lignoceric) i acid lignoceric n proporie de 65% (la porumb) din totalul acizilor grai. n sfingolipidele seminelor din soia, 95% din acizii grai sunt acizii palmitic i stearic, restul fiind acid cerebronic (5%). 3.5.3. Glicolipide Sunt lipide complexe n compoziia crora se afl un coninut mare de glucide, ndeosebi galactoz.Cele mai importante glicolipide vegetale sunt monogalactozildigliceridele i digalactozildigliceridele. Acidul gras care esterific gruprile OH ale glicerolului este de obicei acidul linolenic. Ambele glicolipide au fost gsite n fina de gru, n uleiul de crupe de ovz verde, n trifoi i n ierburile de furaj. 3.5.4. Sulfatide Conin sulf sub form SO3H legat n cele mai multe cazuri la atomul de C6 al unei oze (glucoz sau galactoz). Se gsesc de obicei n frunze sub form de glicosulfolipide. Printre sulfatidele care au fost izolate din multe plante se numr glicosulfolipidele cu legtur glicozidic: 6 sulfo-6 deoxi--D galactopiranozil 1,1 diglicerid i 6 sulfo-6 deoxi-D glucopiranozil 1,1 diglicerid. n aceste lipide glicerolul este esterificat cu un acid gras din seria C18.

Autoevaluare 1. Definiia, rolul i clasificarea lipidelor. 2. Definiia, reprezentarea i proprietile acizilor grai saturai. Exemple. 3. Definiia, reprezentarea i proprietile acizilor grai nesaturai. Exemple. 4. Alcoolii din compoziia lipidelor. 5. Proprieti fizice i chimice ale gliceridelor. Reprezentani. 6. Ceride i etolide. Exemple. 7. Fosfolipide structur i rol. 8. Sfingolipide, glicolipide, sulfatide.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

43

Biochimie horticol

Bibliografie selectiv 1. Bdulescu, L. 2009. Botanic i Fiziologia plantelor. Ed. Elisavaros, Bucureti. 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 5. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 6. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 7. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

44

Biochimie horticol

CAPITOLUL 4. AMINOACIZI I PROTEINE Cuvinte cheie: grupare amino, grupare carboxil, aminoacizi eseniali, peptide, proteine, proprieti, conformaie, metabolism, biosintez, biodegradare, interconversie. Rezumat Cei 20 de aminoacizi ntlnii n mod obinuit n plante se aseamn prin faptul c au o grupare -carboxil i una -amino, dar difer prin natura chimic a radicalului R substituit la atomul de carbon . Ei sunt clasificai pe baza structurii i polaritii radicalilor R. Clasa aminoacizilor nepolari (hidrofobi) include: alanina, leucina, valina, prolina, fenilalanina, triptofanul i metionina. Clasa aminoacizilor polari neutri include: glicina, serina, treonina, cisteina, tirozina, asparagina i glutamina. Clasa aminoacizilor ncrcai pozitiv (bazici) conine: arginina, lizina i histidina, iar clasa aminoacizilor ncrcai negativ (acizi) conine acidul aspartic i acidul glutamic. n natur se gsesc n stare liber sau integrai n proteine i ali aminoacizi: hidroxiprolina, acidul -aminobutiric, homoserina, -alanina. Aminoacizii prezint proprieti comune altor clase de compui organici (sunt optic active precum monozaharidele) i specifice datorit structurii particulare (sunt amfotere i formeaz sisteme tampon). Avnd dou grupri funcionale au o reactivitate crescut fie datorit prezenei gruprii carboxil (formeaz sruri, esteri, amide), fie datorit prezenei gruprii amino (formeaz amide i compui colorai), precum i datorit prezenei ambelor grupri aminoacizii pot condensa ntre ei cu formare de legturi peptidice (-CO-NH-) ntre gruparea amino a unui aminoacid i gruparea carboxil a altui aminoacid. Aceste proprieti stau la baza metodelor de separare, identificare i cuantificare a amestecurile complexe de aminoacizi prin cromatografie, pe coloane cu schimbtori de ioni, prin electroforez. Peptidele sunt moleculele care conin 2,3,4 sau chiar 10 aminoacizi condensai, fiind denumite dipeptide, tripeptide, tetrapeptide, respectiv decapeptide. n structura unui lan peptidic apare totdeauna un aminoacid cu gruparea amino liber (situat la captul N-terminal), ales prin convenie n stnga lanului i un aminoacid cu gruparea carboxil liber (situat la captul C-terminal), ales prin convenie cel din dreapta lanului. Peptidele au unele proprieti similare aminoacizilor datorit prezenei celor dou funciuni terminale i pot fi supuse reaciei de hidroliz acid sau enzimatic, proprietate util n vederea eliberrii aminoacizilor componeni i stabilirii secvenei catenei peptidice. Polipeptidele sunt molecule ce conin n structura lor mai mult de 10 aminoacizi condensai, iar proteinele sunt macromolecule cu mase moleculare mari (103-105) i un grad nalt de organizare structural. Fiecare protein are cel puin o conformaie tridimensional n care este stabil i activ fiziologic n condiii de temperatur i pH specifice. Proteinele fibrilare sunt formate din lanuri polipeptidice n form de spiral -helicoidal sau -pliat, stabilizat printr-un numr mare de legturi de hidrogen n interiorul lanului. Proteinele globulare sunt pliate compact, lsnd un spaiu mic n interior pentru moleculele de ap. n general gruprile R polare sunt orientate spre suprafaa proteinei globulare, fiind hidratate, iar resturile hidrofobe sunt orientate spre interior. n funcie de secvena lor de aminoacizi, proteinele globulare conin procente foarte diferite ale conformaiei -helicoidal i -pliat, iar resturile de prolin determin curbarea lanurilor -helicoidale. Unele proteine denaturate, depliate sau nou sintetizate revin spontan la conformaia lor iniial, nativ, datorit interaciilor de cooperare. Structura cuaternar a proteinelor oligomere (formate din mai multe subuniti monomere) este determinat de secvena primar de aminoacizi a lanurilor polipeptidice componente i de interaciile cooperante dintre subuniti. Ataarea liganzilor la proteinele oligomere determin modificri ale strii conformaionale datorit unor transformri secveniele ale subunitilor succesive sau transformri simetrice de tipul tot sau nimic ale ntregii molecule oligomere.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

45

Biochimie horticol

4.1. AMINOACIZI 4.1.1. Structur, clasificare i rol biochimic Aminoacizi sunt compui biochimici cu funciune mixt, deoarece conin o grupare funcional carboxil (-COOH) i o grupare funcional amin (-NH2), ambele grefate la acelai atom de carbon din poziia (sau C2).

n funcie de particularitile structurale ale radicalului R, aminoacizii se clasific astfel: 1. Aminoacizi aciclici: a. Aminoacizi monoaminomonocarboxilici cu radical alifatic: glicocol/glicina (Gly), alanin (Ala), valin (Val), leucin (Leu), izoleucin (Ile); b. Aminoacizi monoaminomonocarboxilici cu o grupare hidroxil

(hidroxiaminoacizi): serin (Ser), treonin (Thr); c. Aminoacizi monoaminomonocarboxilici cu sulf: cisteina (Cys), cistina (CysCys), metionina (Met); d. Aminoacizi monoaminodicarboxilici: acid aspartic (Asp), acid glutamic (Glu), asparagina (Asn), glutamina (Gln); e. Aminoacizi diaminomonocarboxilici: lizina (Lys), hidroxilizina (Lys-OH), arginina (Arg). 2. Aminoacizi ciclici: a. Aminoacizi homeociclici (cu nucleu aromatic): fenilalanina (Phe), tirozina (Tyr); b. Aminoacizi heterociclici: histidina (His), triptofan (Trp), prolina (Pro), hidroxiprolina (Pro-OH) n funcie de caracterul pe care-l manifest catenele laterale (R) aminoacizii se clasific astfel: a) aminoacizi cu catene apolare caracter neutru: glicin, alanin, leucin, izoleucin, metionin, fenilalanin, triptofan; b) aminoacizi cu catene polare: serina, treonina, cisteina, tirozina, asparagina, glutamina;
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

46

Biochimie horticol

Principalii aminoacizi din plantele horticole

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

47

Biochimie horticol

c) aminoacizi cu catene ionizabile caracter acid sau bazic: acidul aspartic, acidul glutamic, lizina, arginina, prolina. n afar de cei 20 de aminoacizi comuni exist peste 150 de aminoacizi liberi sau combinai n alte structuri, neproteice, care pot fi precursori importani sau intermediari ai metabolismului:

-alanina intr n compoziia acidului pantotenic; homocisteina i homoserina sunt

intermediari n metabolismul aminoacizilor; citrulina i ornitina sunt intermediari n sinteza argininei. Unii aminoacizi precum: arginina, fenilalanina, metionina, treonina, triptofanul, leucina, lizina, valina, constituie grupa aminoacizilor eseniali fiind indispensabili n alimentaia uman i a animalelor, deoarece nu pot fi asimilai dect din surse externe, respectiv hrana. Importana fundamental a aminoacizilor const n participarea lor n structura proteinelor. 4.1.2. Proprietile generale ale aminoacizilor 1. Sunt substane optic active cu excepia glicinei, deorece au n molecula lor cel puin un atom de carbon asimetric (C) la care sunt legate dou grupri funcionale: amino i carboxil. 2. Prezint o anumit solubilitate n ap, datorit celor dou grupri funcionale (-NH2 i -COOH) care determin n soluie apoas polarizarea aminoacizilor (amfiioni):

Gradul de solubilitate n ap variaz n funcie de natura radicalului R i de pH-ul soluiei. Totodat, aminoacizii sunt puin solubili n solveni organici, proprietate care st la baza separrii prin tehnica de cromatografie. 3. Sunt substane cu caracter amfoter, deoarece se gsesc n soluie sub form de amfiioni. Astfel, n mediu acid se comport ca baze (acceptori de protoni), iar n mediul bazic se comport ca acizi (donori de protoni). Ionii astfel formai migreaz sub aciunea unui cmp electric spre catod sau anod n funcie de valoarea pH-ului soluiei, proprietate care st la baza separrii prin tehnica de electroforez.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

48

Biochimie horticol

Pentru fiecare aminoacid exist o valoare de pH numit pH izoelectric (pHi), la care sarcina net a moleculei este zero (numrul sarcinilor pozitive este teoretic egal cu cel al sarcinilor negative) i drept urmare aminoacizii nu migreaz n cmp electric. Valoarea pHi depinde de structura aminoacidului i la aceast valoare solubilitatea aminoacidului este minim. 4. Constituie sisteme tampon (au aciune de tamponare), datorit caracterului lor amfoter, fiind foare eficiente pentru meninerea constant a pH-ului celular. 5. Sunt biomolecule cu reactivitate chimic mare datorit prezenei n structura lor att a gruprii carboxil, ct i a gruprii amino. a. Datorit gruprii carboxil aminoacizii reacioneaz cu: 1. 2. 3. 4. 5. bazele formnd sruri; alcoolii formnd esteri; amoniacul formnd amide; aminele formnd amide substituite; elimin CO2 (se decarboxileaz) formnd amine. Datorit

acestei reacii catalizat de enzime se formeaz aa-numitele amine biogene care pot fi precursori ai unor coenzime, hormoni, vitamine. Unele dintre ele sunt toxice pentru organismul vegetal (ex. putresceina) i apar n perioada de supramaturare a fructelor sau n perioada de senescen a plantelor. b. Datorit gruprii amino aminoacizii reacioneaz cu: 1. ninhidrina formnd compui colorai n marea lor majoritate n albastru intens; 2. cloruri acide formnd amide substituite; 3. CO2 formnd carbamino-derivai; c. Datorit prezenei ambelor grupri aminoacizii pot condensa ntre ei cu formare de legturi peptidice (-CO-NH-) ntre gruparea amino a unui aminoacid i gruparea carboxil a altui aminoacid, rezultnd compui numii peptide.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

49

Biochimie horticol

Moleculele ce conin 2,3,4 sau chiar 10 aminoacizi condensai se numesc dipeptide, tripeptide, tetrapeptide, respectiv decapeptide, iar la modul general oligopeptide. Polipeptidele sunt molecule ce conin n structura lor mai mult de 10 aminoacizi condensai, iar proteinele sunt macromolecule cu mase moleculare mari (103-105) i un grad nalt de organizare structural. n structura unui lan peptidic apare totdeauna un aminoacid cu gruparea amino liber (situat la captul N-terminal), ales prin convenie n stnga lanului i un aminoacid cu gruparea carboxil liber (situat la captul C-terminal), ales prin convenie cel din dreapta lanului.

4.2. PEPTIDE Denumirea peptidelor se stabilete prin indicarea succesiv a denumirii fiecrui aminoacid component al moleculei de peptid cu adugarea sufixului il, excepie fcnd aminoacidul C-terminal cu grupare carboxil liber care-i menine denumirea neschimbat. Ex. o tripeptid cu structura H2N-Ala-Asp-Cis-COOH va fi denumit alanil-aspartil-cistein. Legtura peptidic este singura legtur covalent dintre aminoacizi n structura liniar, de baz, a peptidelor. 4.2.1. Proprietile generale ale peptidelor 1. Sunt solubile n mediu apos peptidele formnd soluii propriu-zise, iar polipeptidele dispersii coloidale. 2. Au caracter amfoter, datorit celor dou grupri caoboxil i amino terminale proprietate care st la baza separrii prin tehnica de electroforez. Fiecare peptid are o anumit valoare de pH numit pH izoelectric (pHi), la care sarcina net a moleculei este zero i nu migreaz n cmp electric. 3. Formeaz sruri solubile cu acizii i cu bazele. 4. Avnd n componen cel puin 3 aminoacizi, deci minim 2 legturi peptidice, peptidele (att oligo, ct i polipeptidele), formeaz n prezena Cu2+ i n mediu alcalin un

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

50

Biochimie horticol

complex peptidic violet, care poate fi determinat cantitativ spectrofotometric. Este reacia biuretului, reacie de culoare specific peptidelor, nu i aminoacizilor. 5. Hidroliza peptidelor n mediu acid sau bazic, precum i n prezena enzimelor, const n desfacerea legturii peptidice prin intervenia apei i refacerea gruprilor COOH i NH2 ale aminoacizilor. n funcie de condiiile de reacie hidroliza poate fi total, rezultnd aminoacizii constitueni, sau parial, rezultnd un amestec de peptide mai mici. Aceast proprietate st la baza determinrii succesiunii aminoacizilor n lanul peptidic i descifrarea structurii proteinelor. 4.2.2. Peptide din plante n diferite organe vegetale se gsesc peptide i polipetide care ndeplinesc n unele cazuri anumite roluri fiziologice sau constituie produi intermediari n anabolismul i catabolismul proteinelor. Glutationul este una dintre primele peptide naturale cunoscute, fiind identificat la plante n 1936 de ctre Pett n numeroase organe vegetale, ndeosebi n semine n timpul germinrii. Ulterior s-a constatat c este o substan cu o larg rspndire n lumea vie (drojdii, plante, animale, om), datorit proprietilor sale biologice. Glutationul este o tripeptid rezultat din condensarea acidului glutamic, cisteinei i glicinei, primii doi aminoacizi fiind legai prin gruparea carboxil din poziia a acidului glutamic.

Glutationul se prezint n dou forme structurale distincte: glutation redus (G-SH) i glutation oxidat (G-S-S-G), care provine din dou molecule de glutation redus, oxidarea realizndu-se la nivelul gruprii tiol (-SH) cu formarea gruprii disulfurice caracteristic cisteinei:

Datorit gruprii tiol (-SH) liber, glutationul prezint urmtoarele proprieti biologice: particip la procesele redox din celul prin transfer de protoni (H+ i e-), meninnd potenialul redox;
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

51

Biochimie horticol

particip la reacii de reducere a unor compui toxici, precum apa oxigenat (H2O2) n ciclul glutation-ascorbat, alturi de acidul ascorbic, avnd rol antioxidant; este precursor al fitochelatinelor, compui care leag metale grele precum cadmiu, eliminnd efectul toxic al acestora n celule; protejeaz gruprile tiol din structura unor enzime contra oxidrii, activeaz unele enzime sau acioneaz ca o coenzim, fiind un donor de hidrogen; este esenial pentru rezistena plantelor la stresul biotic i abiotic. La fasole i alte legume s-au pus n eviden dipeptidele -glutamil-leucina i glutamil-S-metilcisteina i sulfoxidul acesteia, care ar putea constitui un sistem redox n seminele germinate i plantule. Printre polipeptidele naturale elaborate de microorganisme (bacterii i ciuperci) se numr antibioticele, printre care gramicidina, tirocidina, polimixina, bacitracina, etc. Ciupercile din genul Fusarium i Streptomyces produc peptide ciclice formate din hidroxiacizi i -aminoacizi, cuplai prin legturi amidice i esterice, numite depsipeptide, care au proprieti antibiotice. Faloidina este o heptapeptid format in dou resturi de alanin, treonin, cistein, hidroxiprolin, oxitriptofan i -hidroxileucin, izolat din ciuperca Amanita phalloides. Adesea este nsoit de faloin i amanitin, heptapeptide cu structur similar falodinei, ns cu alt compoziie de aminoacizi.

faloidin sau ceap.

-amanitin

-amanitin

Alte peptide au mai fost puse n eviden n seminele de in, frunzele de secar, spanac

4.3. PROTEINE Proteinele sunt macromolecule eseniale organismului vegetal, cu un nalt grad de organizare structural i cu rol fundamental n structura i funciile celulei. Sunt alctuite dintr-un numr mare de aminoacizi (legai prin legturi peptidice), a cror succesiune este
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

52

Biochimie horticol

determinat genetic. Imensa diversitate structural i funcional a proteinelor este determinat att de numrul, tipul i secvena aminoacizilor componeni, ct i de organizarea spaial, configuraional a moleculei de protein. 4.3.1. Structura proteinelor Proteinele sunt macromolecule cu structur complex, n care atomii i grupele de atomi constitueni sunt dispui conform unui aranjament spaial conformaional, n cadrul aceleiai configuraii a moleculei proteice. Configuraia indic aranjarea n spaiu a grupelor substituente din stereoizomeri, astfel de structuri avnd de suferit la modificarea, iar conformaia indic modalitatea dispunerii atomilor n spaiul tridimensional, ca o consecin a rotirii acestora n jurul unei legturi simple existente n molecula respectiv. Structura general a proteinelor este determinat de urmtorii factori: - caracterul legturii peptidice (caracter parial de dubl legtur datorit delocalizrii electronilor ai legturii C=O din vecintate); - geometria legturi peptidice (legtura peptidic avnd caracter parial de dubl legtur nu eprmite o rotaie liber a atomilor de C i N n jurul ei, fapt ce se repercuteaz asupra organizrii spaiale a proteinelor); - natura catenelor laterale (-R) ale aminoacizilor componeni care pot prezenta grupri polare (provenite din gruprile funcionale COOH, -NH2, -OH, -SH) sau nepolare; - conformaia (organizarea stereospecific). Structura global a macromoleculelor proteice reprezint rezultanta coexistenei i interaciunii mai multor nivele de organizare: 1. primar 2. secundar 3. teriar 4. cuaternar 1. Structura primar este structura de baz a fiecrei proteine i reprezint numrul, tipul, proporia i ordinea aminoacizilor n catena polipeptidic. Ea se caracterizeaz prin:

existena legturilor peptidice (-CO-NH-) ntre diveri aminoacizi; existena unei succesiuni (secvene) bine definite a aminoacizilor n catenele polipetidice, controlat genetic de informaia cuprins n ADN;

determin configuraia de ansamblu specific fiecrei proteine.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

53

Biochimie horticol

2. Structura secundar reprezint aranjamentul spaial al lanului polipeptidic, datorat multiplelor legturi de hidrogen intra- i intercatenare ce se stabilesc ntre gruprile NH i CO din legturi peptidice diferite. Formarea acestor legturi de hidrogen este posibil datorit distribuiei diferite a electronilor la nivelul legturii peptidice, legtur ce devine parial ionizat, deoarece atomul de O va avea un exces de electroni (-), iar atomul de N un deficit de electroni (+). Dei legturile de hidrogen sunt relativ slabe, structura secundar este totui stabil datorit numrului mare de astfel de legturi de hidrogen i de repartizarea lor uniform de-a lungul catenelor polipeptidice. Structura secundar este reprezentat n cele mai multe cazuri prin dou modele conformaionale: -helix i -pliere.

Modelul -helix rezult din spiralarea catenei polipetidice ntr-o elice orientat de la

stnga la dreapta (orientare care predomin n structura proteinelor native i este mai stabil din punct de vedere energetic). Aceast structur are urmtoarele caracteristici: pe fiecare spir sunt 3,6 aminoacizi; distana dintre dou spire este de 5,4 ; toate gruprile NH i CO formeaz legturi de hidrogen; radicalii R ai tuturor aminoacizilor sunt orientai spre exteriorul elicei, deasupra sau dedesubtul planului legturilor peptidice.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

54

Biochimie horticol

Modelul -pliere (planuri pliate): n aceast structur lanul polipeptidic sufer o

ndoire (pliere) la un unghi de 90, care se face n dreptul atomului de C, purttor al gruprilor COOH i NH2 implicate n legturi peptidice. Aceast pliere a lanului polipeptidic determin apariia de legturi de hidrogen intercatenare ntre dou sau mai multe lanuri polipeptidice (ntre atomii de h dintr-o legtur peptidic a unui lan polipetidic i atomii de o dintr-o legtur peptidic a altui lan polipeptidic), legturi care confer stabilitate acestei structuri. Modelul n planuri pliate este de tip paralel i antiparalel. Proteinele cu structur -pliat sunt flexibile, dar nu elastice i sunt n general proteinele sub form de filamente (proteinele fibrilare).

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

55

Biochimie horticol

3. Structura teriar este o organizare spaial complex rezultat prin nfurarea lanului polipeptidic ntr-o suprastructur tridimensional (globular cel mai adesea). Proteinele cu structur teriar, respectiv proteinele globulare, prin nfurarea lor formeaz un miez hidrofob, format din radicalii nepolari, i o parte extern hidrofil, cu grupri chimice disociabile ale aminoacizilor constitueni. Structura teriar a proteinelor globulare poate fi clasificat n funcie de secvenele zonelor cu structuri secundare ordonate, astfel: conformaia , care conine doar catene -helix antiparalele grupate cte dou; conformaia , care conine numai catene cu structur -pliat antiparalele; conformaia +, care conine att catene -helix, ct i catene cu structur pliat plasate n diverse pri ale moleculei. Planul -pliat este format din lanuri antiparelel, avnd la capete grupate catenele de -helix;

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

56

Biochimie horticol

conformaia /, n care segmente cu structur secundar orientate paralel ntrun plan -pliat alterneaz cu segmente cu structur secundar -helix, aflate de o parte i de alta a planului -pliat. Structura teriar este un stadiu avansat de organizare spaial a structurii proteinelor, a crei complexitate este detrminat de existena unor multiple interaciuni chimice intramoleculare, precum: legturi covalente formate prin puni disulfurice (-S-S-) ntre radicalii de cistein; legturi de tip eter sau de tip ester; legturi ionice stabilite ntre gruprile polare (-NH3+ i COO-) din diferii aminoacizi; legturi de hidrogen nepeptidice; legturi de tip dipol-dipol, stabilite ntre gruprile OH din serin i treonin, fore van der Waals sau interaciuni hidrofobe. Toate aceste legturi sunt ns legturi slabe (cu excepia celor covalente) care confer structurii teriare o anumit labilitate i care se pot desface sub aciunea unor factori fizici sau chimici, fenomen cunoscut sub denumirea de denaturarea proteinelor, proces nsoit de cele mai multe ori de pierderea proprietilor biologice. 4. Structura cuaternar reprezint cel mai nalt grad de organizare molecular a proteinelor, caracteristic proteinelor native, care exist ca agregate moleculare formate din mai multe catene polipeptidice unite n subuniti. Structura cuaternar reprezintasocierea unor catene polipetidice identice, numite protomeri (care au deja structur primar, secundar i teriar definit) ntr-un ansamblu (agregat) denumit oligomer. n funcie de numrul protomerilor (care pot fi identici sau diferii) proteinele oligomere pot fi dimeri, trimeri, tetrameri. Legturile dintre protomeri se manifest la suprafaa fiecrui protomer, sunt legturi de hidrogen i electrostatice cu rolul de a stabiliza agregatul molecular. Asamblarea proteinei oligomere are loc prin alturarea unor poriuni din suprafaa monomerilor, precizia cu care se realizeaz asamblarea i stabilitatea configuraiei proteinei oligomere fiind asigurate de principiul complementaritii subunitilor. Un exemplu de protein oligomer l constituie componenta proteic a clorofilei pigment verde care asigur absorbia radiaiilor luminoase n procesul de fotosintez. Structura cuaternar a acestei proteine este un tetramer alctuit din patru protomeri, respectivi patru catene polipeptidice: 2 catene H identice i 2 catene L identice. Cei patru
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

57

Biochimie horticol

protomeri se constituie ntr-un tetramer care leag n centrul su o molecul de clorofil, structura rezultat fiind integrat n membrana intern a cloroplastului.

n situaia n care anumii factori fizici sau chimici induc disocierea subunitilor, aceasta presupune totodat modificarea conformaional a proteinei i respectiv pierderea activitii ei biologice. Un alt exemplu de protein oligomer l constituie enzima RUBISCO care asigur fixarea CO2 n procesul de fotosintez. Structura cuaternar a acestei proteine este un octamer alctuit din patru dimeri, respectiv 16 catene polipeptidice: 8 catene L identice sintetizate n cloroplast, 8 catene S identice sintetizate n citoplasm i 4 ioni de Mg2+. O caten (subunitate) S sintetizat n citoplasm i care a ptruns prin porii membranei n cloroplast se leag de o subunitate L sintetizat n stroma cloroplastului formnd un dimer, care ulterior fixeaz un ion de Mg2+. Patru astfel de dimeri constituii se asociaz formnd un octamer, structura rezultat avnd opt situsuri pentru fixarea CO2.

4.3.2. Proprietile generale ale proteinelor Proprieti fizico-chimice 1. Starea de agregare n stare pur sunt substane solide, cristaline sau amorfe, stabile la temperatura obinuit, iar la temperaturi mai mari de 50C se denatureaz.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

58

Biochimie horticol

2. Masa molecular variaz de la cteva mii la milioane de daltoni (1Da este unitatea atomic de mas 1,67 10-24g). Masa molecular a unor proteine vegetale Amandin (din migdale) 346.000 Legumin (din semine de mazre) 330.000 Vicilin (din semine de mazre) 186.000 Ricin (din semine de ricin) 77.000 Zein (din cariopse de gru) 50.000 Gliadin (din cariopse de gru) 27.500 Nucleoproteide (din virusuri fitopatogene) 6.000.000 60.000.000 3. Solubilitatea proteinelor proteinele globulare sunt solubile n ap i soluii saline, iar cele fibrilare sunt insolubile. Solubilitatea proteinelor depinde de pH-ul i compoziia mediului. 4. Caracterul coloidal datorit configuraiei macromoleculare proteinele formeaz sisteme coloidale, heterogene, n care faza dispersat este proteina, iar dispersantul este apa fa de care proteina manifest o oarecare afinitate. Din acest motiv proteinele nu dializeaz prin membrane semipermeabile i se denatureaz reversibil. 5. Disocierea proteinelor fiind polielectrolii proteinele au caracter amfoter (n mediu acid se comport ca baze, iar n mediu bazic ca acizi). n funcie de structura primar a fiecrei proteine i pH-ul mediului pentru orice protein exist o valoare de pH, numit pH izoelectric (pHi), la care sarcina global a proteinei este zero, starea coloidal se destabilizeaz, iar proteinele manifest solubilitate minim. La pH mai mare dect pHi sarcina global a proteinei este negativ (se comport ca un anion), iar la pH mai mic dect pHi sarcina global a proteinei este pozitiv (se comport ca un cation). 6. Comportarea ca un sistem tampon datorit caracterului amfoter proteinele au capacitatea de a menine pH-ul fiziologic n interiorul celulei vegetale, asigurnd homeostazia acesteia. Proprieti chimice Reaciile chimice la care particip proteinele se pot clasifica n patru categorii: 1. Reacii datorate prezenei legturilor peptidice care pot fi clasificate la rndul lor n: a. reacii de hidroliz sunt reaciile de scindare hidrolitic a legturilor peptidice, n mediu acid, bazic sau sub aciunea enzimelor proteolitice, cu punerea n libertate a aminoacizilor componeni ai macromoleculei proteice. b. reacia biuretului este o reacie de culoare specific legturii peptidice de reacie cu ionii de Cu2+, n mediu alcalin, formnd combinaii complexe de culoare violacee.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

59

Biochimie horticol

2. Reacii datorate gruprii amino libere toi aminoacizii componeni ai proteinelor reacioneaz cu ninhidrina prin intermediul gruprii amino, care se elibereaz sub form de amoniac, i formeaz un compus de culaore albastr-violet. 3. Reacii de precipitare n funcie de natura reactivilor de precipitare, proteinele precipit reversibil sau ireversibil. a. precipitarea reversibil (salifierea) se realizeaz n prezena unor concentraii mari de electrolii tari, (NH4)2SO4 sau Na2SO4, fr modificarea structurii spaiale, iar dup ndeprtarea agenilor chimici de precipitare proteinele revin la starea lor nativ, fr modificarea proprietilor biologice ale acestora. b. precipitarea ireversibil este nsoit de modificri profunde ale structurii proteinelor, care se denatureaz i nu se mai pot redizolva, rmnnd n stare precipitat. Aceast reacie are loc n prezena acizilor minerali concentrai (HNO3, HCl), acizilor organici (acidul tricloracetic, acidul picric, acidul sulfosalicilic), cu sruri de metale grele (Pb2+, Hg2+) sau cu solveni organici (aceton, alcool). 4. Reacii datorate catenelor laterale sunt reacii chimice n care sunt implicai radicalii proveniti de la aminoacizii ce alctuiesc structura primar a unei proteine. Aceste reacii sunt diverse n funcie de natura catenei laterale, fiind de esterificare, alchilare, etc. 4.3.3. Proteine cu importan biologic Proteinele sunt substane macromoleculare n alctuirea crora pot intra fie doar aminoacizi (holoproteidele) sau conin i alte substane precum glucide, lipide, minerale, acizi anorganici, acizi nucleici, pigmeni, caz n care poart denumirea de heteroproteide. Dup form, proteinele sunt: globulare (sferice), fibrilare (alungite i uneori dure numindu-se i scleroproteide).

ntre cele dou tipuri, exist i forme intermediare (globulinele). Holoproteidele sunt denumite i proteine propriu-zise, avnd n compoziie doar aminoacizi, deci numai carbon, hidrogen, oxigen, azot i sulf. Toate holoproteidele sunt globulare. Din aceast grup de protide fac parte urmtoarele categorii: - albuminele, - globulinele, - prolaminele (gliadine),

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

60

Biochimie horticol

- gluteline, - histonele. Albuminele sunt proteine globulare cu caracter slab acid spre neutru i mas molecular relativ mic, uor solubile n ap, soluii saline, acizi i baze diluate. Au structur teriar, precipit numai n prezena soluiilor saturate de sulfat de amoniu i sulfat de sodiu, iar prin nclzire la 60-70 C coaguleaz. Albumine se gsesc n toate organele plantelor, de cele mai multe ori asociate cu globuline, de care se separ datorit solubilitii diferite. Spuma alb care apare la fierberea fructelor i legumelor se datorete prezenei albuminelor. Cele mai studiate sunt albuminele din seminele plantelor care asigur rezerva de aminoacizi necesar embrionului n timpul germinrii. Ex. legumelina din seminele leguminoaselor (mazre, linte, i soia), leucozina din seminele de cereale (gru, secar, ovz), ricinina din seminele de ricin, faseolina n seminale de fasole. Globulinele au un caracter mai acid dect albuminele, datorit coninutului mai mare de acizi aspartic i glutamic. Au mas molecular mai mare dect albuminele i cristalizeaz mai greu dact acestea. Sunt insolubile n ap, dar solubile n soluii slab alcaline; precipit n soluii de sulfat de amoniu 50% i se denatureaz termic mai greu dact albuminele. Prolaminele i gluteinele sunt proteine globulare de natur exclusiv vegetal, avnd un coninut ridicat de acid glutamic i acid aspartic. Se gsesc n cariopsele de gru, porumb, ovz, secar avnd rol de substane organice de rezerv. Heteroproteidele conin, pe lng aminoacizi, diferite alte substane, numite grupri prostetice. Principalele heteroproteide sunt: - Metaloproteinele (citocromul, clorofila, vitamina B12, etc.), care conin metale precum Fe2+, Fe3+, Mg2+, Zn2+, Cu2+, etc. Ionul metalic se leag de componenta proteic prin legturi covalente i covalent-coordinative, formnd o structur stabil de chelat. Metalul poate stabili legtura covalent-coordinativ cu diferite grupri chimice din structura lanului peptidic sau cu molecule mici care se afl n apropierea ionului metalic, numite liganzi. - Fosfoproteinele sunt heteroproteide a cror component prostetic este reprezentat de radicalul acidului fosforic (-PO3H2). Acest radical se leag de coponenta proteic prin intermediul aminoacidului serin (formnd fosforilserina) sau prin intermediul aminoacidului treonin (formnd fosforiltreonina). Prezena radicalului fosforil n molecula acestor proteide, le confer acestora caracter acid i deci proprietatea de a forma sruri de calciu sau potasiu. - Glicoproteinele sunt heteroproteide care conin o grupare prostetic format din resturi de glucide sau poliglucide cu rol de receptori membranali. Sunt macromolecule

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

61

Biochimie horticol

integrate n membrane sau solubile n ap sau, cu care formeaz soluii vscoase, pot fi acide sau neutre, se gsesc asociate cu enzime sau hormoni. - Lipoproteinele (ex. proteine de transport, care fixeaz lipidele, mpreun cu care circul prin vasele conductoare ale plantelor), sunt heteroproteide a cror component prostetic este de natur lipidic (fosfolipide, trigliceride, steroli) i care stabilete legturi ionice sau prin fore van der Waals cu apolipoproteina-componenta proteic. - Cromoproteine (ex. proteine cu clorofil, fitocromul) sunt heteroproteide a cror grupare prostetic este o substan colorat (pigment) care confer culoare ntregii molecule. Dup natura chimic a componentei prostetice, cromoproteidele se clasific n: a. cromoproteide porfirinice b. cromoproteide neporfirinice a. Cromoproteidele porfirinice au drept component prostetic de baz un nucleu tetrahidropirolic, numit protoporfirin IX, substituit cu radicali metil, vinil, carboxil. Aceasta chelateaz un ion de Mg2+ formnd clorofilida, iar dup esterificarea gruprilor carboxil cu metanol sau fitol, formeaz clorofila, un pigment de culoare verde care are rol n absorbia luminii n timpul procesului de fotosintez. b. Cromoproteidele neporfirinice sunt acele heteroproteide la care gruparea prostetic este format din pigemni colorai n galben-portocaliu sau rou, numii carotenoide. De aceea, cromoproteidele neporfirinice se mai numesc i caroteno-proteide. - Nucleoproteinele sunt heteroproteide la care gruparea prostetic este reprezentat de acizi nucleici, cu rol n stocarea, transmiterea i exprimarea informaiei ereditare, biosinteza proteinelor, diviziunea celular. n funcie de natura chimic a gruprii prostetice se clasific n: - ribonucleoproteide, a cror component prostetic este acidul ribonucleic (ARN) i sunt localizate n citoplasm, mitocondrii, plastide, avnd capacitatea de a se asocia cu ribozomii, dar i n nucleu celulelor; - deoxiribonucleoproteide, a cror component prostetic este acidul deoxiribonucleic (ADN), iar proteina o histon, acestea fiind localizate n nucleul tuturor celulelor i reprezint componentele structurale ale cromozomilor i genelor.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

62

Biochimie horticol

Autoevaluare 1. Structura, clasificarea i rolul aminoacizilor. 2. Proprietile generale ale aminoacizilor. 3. Peptide proprieti i reprezentani. 4. Proteine structura primar i secundar. 5. Proteine structura teriar i cuaternar. 6. Proprietile generale ale proteinelor. 7. Holoproteide. 8. Heteroproteide.

Bibliografie selectiv 1. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 2. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 3. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 4. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 5. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 6. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

63

Biochimie horticol

CAPITOLUL 5. ACIZI NUCLEICI Cuvinte cheie: acid dezoxiribonucleic, ADN, acid ribonucleic, ARN, baze azotate, nucleotide, dublu-helix, rol fiziologic, localizare. Rezumat Acizii nucleici, reprezentai de ADN (acid deoxiribonucleic) i ARN (acid ribonucleic) sunt macromolecule neramificate alctuite din lanuri de nucleotide legate covalent prin puni fosfodiesterice ntre gruparea 5-hidroxil a unei nucleotide i gruparea 3hidroxil a nucleotidei urmtoare. Nucleotidele reprezint unitile monomere ale acizilor nucleici i sunt formate dintr-o pentoz (riboz sau deoxiriboza), o baz azotat derivat a heterociclului pirimidinic (citozin, uracil sau timin) sau a ciclului purinic (adenin i guanin) i acidul fosforic. Nucleozidele sunt formate dintr-o pentoz i baz azotat caracteristic se gsesc n celule esterificate cu una, dou sau trei grupri fosfat, formnd astfel un nucleozid monofosfat (NMP), un nucleozid difosfat (NDP) sau un nucleozid trifosfat (NTP). Astfel n cazul adenozinei, nucleozidul rezultat din condensarea adeninei cu riboza, se formeaz prin esterificare cu acidul fosforic nucleotidele: adenozin 5-monofosfat (AMP), adenozin 5-difosfat (ADP) i adenozin 5-trifosfat (ATP). n structura acizilor ribonucleici (ARN) localizai n nucleu, plastide, mitocondrii i n citoplasm intr ribonucleotidele AMP, GMP, CMP i UMP, pe cnd n structura acizilor deoxiribonucleici (ADN) localizai n nucleu, mitocondrii i plastide intr deoxiribonucleotidele: dAMP, dGMP, dCMP i dTMP. n afara acestor nucleotide purinice i pirimidinice fundamentale n celulele vegetale sunt prezente i alte mononucleotide, cum ar fi: acidul adenozin 3,5ciclic fosfat (cAMP) sau guanozin 3,5ciclic fosfat (cGMP), cu rol de mesageri secundari n transmiterea i amplificarea la nivel celular a semnalelor chimice hormonale. Principalul rol fiziologic al acizilor nucleici l reprezint depozitarea i transferarea informaiei genetice fie n structura proteinelor, fie n transmiterea caracterelor ereditare. Derivaii 5-difosforici i 5-trifosforici ai nucleozidelor dein funcii importante n celul: de exemplu ADP i ATP au rol fundamental n stocarea, transportul i utilizarea energiei biochimice, UDP i GDP n transportul i activarea unor glucide, GDP n transportul unor grupri amino n reacii catalizate enzimatic. De asemenea, nucleotidele intr n alctuirea unor enzime (dehidrazele piridin- i pirimidin-nucleotidice) sau reprezint cofactori enzimatici. 5.1. Nucleotide Dup natura componentei glucidice coninut n molecul, acizii nucleici sunt de dou tipuri: a) acidul deoxiribonucleic (ADN), ce conine deoxiriboz; b) acidul ribonucleic (ARN), ce conine riboz. Unitatea chimic structural de baz a acizilor nucleici este reprezentat de nucleotid, format dintr-o baz azotat (purinic sau pirimidinic), o pentoz (-deoxiriboza sau riboza) i radicalul acidului ortofosforic (-PO3H2).

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

64

Biochimie horticol

Toate aceste componente structurale sunt legate covalent n ordinea: baz azotatpentoz-fosfat. Bazele azotate pirimidinice sunt reprezentate de adenin i guanin, care intr att n structura ADN, ct i a ARN, n timp de bazele azotate purinice sunt reprezentate de citozin (n structura ADN i ARN), timin (prezent doar n structura ADN) i uracil (prezent doar n structura ARN). Baze pirimidinice Adenina Guanina Citozina Baze purinice Timina Uracil

Nucleozidele sunt formate dintr-o pentoz i baz azotat caracteristic se gsesc n celule esterificate cu una, dou sau trei grupri fosfat, formnd astfel un nucleozid monofosfat (NMP), un nucleozid difosfat (NDP) sau un nucleozid trifosfat (NTP). Prin urmare, nucleotidele pot fi definite ca esteri fosforici ai nucleozidelor, care poart diverse denumiri n funcie de natura bazei azotate i natura pentozei..

Astfel n cazul adenozinei, nucleozidul rezultat din condensarea adeninei cu riboza, se formeaz prin esterificare cu acidul fosforic nucleotidele: adenozin 5-monofosfat (AMP), adenozin 5-difosfat (ADP) i adenozin 5-trifosfat (ATP), iar n cazul condensrii cu
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

65

Biochimie horticol

deoxiriboza i acidul fosforic: dAMP, dADP i dATP. Semnificaia biochimic a ATP, ADP i AMP este extrem de important, deoarece aceste nucleotide particip la procesele de formare, conservare i utilizare a energiei metabolice (motiv pentru care se mai numesc i compui macroergici) i acioneaz ca substane donatoare sau acceptoare de grupri fosfat n diferite reacii metabolice. Dintre ele ATP-ul este compusul macroergic universal al materiei vii, ce poate rezulta att n procesul de fotofosforilare caracteristic fazei de lumin a fotosintezei, transformnd energia solar n energie biochimic, ct i n procesul de respiraie din biodegradarea substanelor organice de rezerv. Prin hidroliza enzimatic a ATP-ului, n prezena ATP-azei, se elibereaz ntre 7 i 14 kcal/mol, n funcie de numrul de legturi macroergice desfcute, energie necesar reaciilor metabolice: ATP + H2O ADP + Pi ATP + H2O AMP + PPi G = 30.5 kJ/mol (7.3 kcal/mol) G = 45.6 kJ/mol (10.9 kcal/mol), ns n condiii

celulare tipice, G este aproximativ 57 kJ/mol (14 kcal/mol). Producerea ATP-ului se realizeaz prin concentrarea protonilor n lumenul membranei interne mitocondriale sau a cloroplastului, care genereaz la trecerea acestora prin ATPsintaz fora necesar sintezei ATP-ului din ADP i Pi (fosfor anorganic).

5.2. Structura, rolul i proprietile ADN Structura primar a ADN este tipul, numrul i secvena de baze azotate constituente ale nucleotidelor. Acestea (d-AMP, d-GMP, d-CMP i d-TMP) se unesc printr-o legtur fosfodiesteric ntre radicalul fosforic care esterific gruparea OH din poziia 5 a deoxiribozei din molecula unui nucleotid i gruparea OH din poziia 3 a deoxiribozei aparinnd nucleotidului adiacent. Se realizeaz astfel o structur simetric 3 5, n care nucleotidul terminal are gruparea hidroxil de la carbonul 3liber i gruparea hidroxil de la carbonul 5 fosforilat. S-a demonstrat c ntr-o molecul de ADN, indiferent de specie, suma bazelor purinice (A+G) este egal cu suma bazelor pirimidinice (T+C), iar rapoartele A/T i G/T sunt aproximativ egale cu 1, datorit complementaritii bazelor azotate care pot realiza perechi A=T i GC, cu ajutorul legturilor de hidrogen. Structura secundar reprezint organizarea n spaiu, respectiv configuraia tridimensional a ADN.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

66

Biochimie horticol

Pe baza datelor experimentale obinute prin metoda difraciei cu raze X, Watson i Crick au elaborat modelul dublu-helix al ADN-ului, care se caracterizeaz prin urmtoarele: - este constituit din dou catene polinucleotidice care se rsucesc n jurul unui ax comun, avnd forma unei spirale duble orientate spre dreapta, - catenele polinucleotidice sunt orientate antiparalel (respectiv, o caten este orientat pe direcia 53, iar cealalt pe direcia 35), fiind stabilizate prin legturile de hidrogen dintre bazele azotate complementare (A=T i GC) i prin interaciuni van der Waals ntre baze azotate vecine dintr-un lan polinucleotidic, - bazele azotate purinice i pirimidinice sunt orientate spre interiorul spiralei, crend un mediu hidrofob, iar radicalii fosforici i deoxiriboza sunt orientate spre exterior crend un mediu hidrofil, - o tur complet a dublu helixului are diametrul de 20 , lungimea de 34 i conine 10 perechi de baze azotate, - datorit perechilor de baze azotate fiecare din cele dou catene polinucleotidice devine replic complementar a celeilalte, - succesiunea nucleotidelor stocheaz informaia genetic care se transmite genereiei urmtoare,
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

67

Biochimie horticol

- raportul molar A+T/G+C este un indice caracteristic fiecrei specii (n general este supraunitar la animale i plante, iar la bacterii este cuprins ntre 0,36-2,70), - se cunosc trei forme similare de ADN A, B i Z forma B fiind biologic activ. n cromozomii celuleor procariote i eucariote, ADN-ul este mpachetat foarte compact, macromoleculele prezentnd un aspect pliat. Aceast structur superncolcit este mult mai bogat n energie liber i presupune disocierea legturilor de hidrogen i deschiderea dublului helix n momentul transcripiei ntr-o mic regiune a macromoleculei. Localizarea intracelular a ADN La plante aproximativ 98% din totalul ADN se afl localizat n nucleu (ADN nuclear), unde se afl cuplat cu proteine bazice (histone), formnd cromatina. La nivelul plastidelor i mitocondriilor se afl cte o molecul de ADN de tip procariot, dublu catenar supernfurat, care detine informaia genetic necesar sintezei unor proteine proprii. Proprietile generale ale ADN a) Datorit existenei bazelor azotate, ADN absoarbe puternic radiaiile din domeniul

ultraviolet, avnd un maxim de absorbie la 260nm, ns mai mic dect a bazelor azotate individuale (efect hipocrom = demascare a bazelor azotate). b) La temperaturi de 80-90 C macromolecula de ADN sufer un proces de denaturare care presupune separarea celor dou catene, scderea vscozitii, a masei moleculare i activitii optice, dar creterea absorbiei n domeniul UV (efect hipercrom) datorit desfacerii dublelor i triplelor legturi dintre bazele azotate. c) Rcirea lent a soluiei de ADN denaturat determin recombinarea celor dou catene complementare polinucleotidice, reconstituind structura bicatenar anterioar, cu conservarea proprietilor biologice ale acestora. Procesul se numete renaturare sau normalizare. Renaturarea st la baza procesului de hibridizare, n care una dintre catenele despiralizate ale ADN-ului denaturat termic se poate recombina, pentru scurt timp, cu o caten de ARN, rezultnd o molecul hibrid ADN-ARN. d) n prezena alcoolului concentrat macromelculele de ADN precipit, aceasta proprietate stand la baza procedeelor de separarii i purificare a acestuia din materialul vegetal. e) Biodegradarea moleculelor de ADN se poate realiza cu ajutorul unor endonucleaze, enzime care acioneaz n interiorul catenelor polinucleotidice formnd

oligodeoxiribonucleotide. Funciile biologice ale ADN ADN constituie baza molecular a conservrii i transmiterii din generaie n generaie a informaiei genetice;
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

68

Biochimie horticol

Asigur i controleaz sinteza proteinelor; Asigur diferenierea i reglarea celular, precum i constana replicrii celulare; Reprezint baza molecular a mutaiilor genetice naturale sau induse. 5.3. Structura, clasificarea i rolul ARN Structura primar a ARN este reprezentat printr-o singur caten polinucleotidic, constituit dintr-un numr variabil de uniti structurale fundamentale, numite ribonucleotide. Fiecare ribonucleotid este constituit dintr-o pentoz riboza, o baz azotat purinic (citozin sau uracil) sau pirimidinic (adenin sau guanin) i radicalul acidului ortofosforic (-PO3H2). Cele 4 ribonucleotide (AMP, GMP, CMP i UMP) sunt dispuse ntr-o secven specific prin stabilirea de legturi de legturi fosfodiesterice 35 ntre ele.

Localizare, tipuri de ARN i funciile lor ARN se gsete ndeosebi n nucleu, dar i n citoplasm, plastide i mitocondrii. Fiecare celul include cel puin trei tipuri majore de ARN: a) ARN ribozomal (ARNr) este localizat n cantitatea cea mai mare n ribozomi, unde dormeaz mpreun cu proteinele complexe nucleoproteice. Este implicat n biosinteza proteinelor citoplasmatice, mitocondriale sau plastidiale. b) ARN de transport (ARNt) sau ARN solubil (ARNs) reprezint 15% din totalul ARN din celule i este localizat n citosol, matricea mitocondrial sau plastidian. El leag specific fiecare din cei aproximativ 20 de aminoacizi care intr n structura proteinelor (fiind forma lor de transport) i i transfer la nivelul ribozomilor. c) ARN mesager (ARNm) sau ARN de informaie (ARNi) reprezint 2-4% din totalul ARN celular i este mesagerul informaiei din ADN-ul nuclear, mitocondrial sau plastidian.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

69

Biochimie horticol

Fiecare molecul de ARNm determin biosinteza unei singure molecule de protein, pe baza informaiei transmise de structura ADN, n procesul de transcripie i translaie. Autoevaluare 1. Structura nucleotidei. 2. Structura i semnificaia biochimic a nucleotidelor adenozinei. 3. Structura, rolul i proprietile ADN. 4. Structura, clasificarea i rolul ARN. 5. Localizarea acizilor nucleici. Bibliografie selectiv 1. 2. 3. 4. 6. 5. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. Burzo, I., Dobrescu, A., Bdulescu, L., Mihescu, D., Blan, D. - Fiziologia plantelor, Volumul VIII - Substanele utile din plante (2005) Ed. Elisavaros Bucureti Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5.

6. 7. 8.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

70

Biochimie horticol

CAPITOLUL 6. VITAMINE Cuvinte cheie: vitamine hidrosolubile, vitamine liposolubile, acid ascorbic, complexul de vitamine B, filochinona, mioinozitol, vitamina E, coninut de vitamine. Rezumat Vitaminele sunt compui organici care particip la procesele anabolice i catabolice din legume i fructe formnd numeroase sisteme oxidoreducatoare prin care se regleaza potentialul redox celular; au rol de activatori enzimatici i particip n procesele de transport de electroni. De asemenea, dein rol de biocatalizatori i constituie direct sau indirect coenzime ale altor sisteme enzimatice importante. De exemplu, n compoziia cocarboxilazei intr vitamina B1; n diaforaz, vitamina B2; n codehidrazele NAD+ i NADP+, nicotinamida; n codecarboxilaza aminoacizilor, vitamina B6, iar n coenzima A, acidul pantotenic. Vitaminele sunt indispensabile ntreinerii i dezvoltrii organismului uman care nu le poate sintetiza n totalitate i ca atare este obligat s le preia din lumea vegetal. Lipsa sau insuficiena acestora n organismul uman determin modificri metabolice care se evideniaz
prin avitaminoze.

Vitaminele identificate n plante sunt att vitamine hidrosolubile, cum sunt vitaminele complexului B, vitamina C, mioinzitolul, rutina, ct i liposolubile, ca vitaminele E i K. Vitaminele sunt denumite i dup natura lor chimic (acid ascorbic, filochinon, nicotinamid etc). sau dup bolile pe care le poate combate (antiscorbutic, antihemoragic, antipelagroas. 6.1. Vitamine hidrosolubile - structur, clasificare i rol biochimic Acidul L-ascorbic (vitamina C) este principala vitamina sintetizat de plante. Biosinteza acidului L-ascorbic are loc n esuturile plantelor printr-o succesiune de reacii fotochimice, plecnd de la D-glucoz sau D-galactoz. Acest proces se desfoar n mitocondrii i parial n fraciunile microzomale.Coninutul n acid ascorbic al legumelor i fructelor variaz n funcie de specie, soi i condiii agropedoclimatice ntre 3,0 mg/100 g (alune) i 139 mg/100 g (ardei).

Importana acidului ascorbic const n faptul c reprezint un cofactor enzimatic, care contribuie la descompunerea radicalilor liberi i particip la reaciile de oxido-reducere din organism, prin trecerea de la acid ascorbic, la acid dehidroascorbic. n lipsa vitaminei C, organismele animale sunt afectate de scorbut. Vitaminele complexului B Tiamina (vitamina B1) se sintetizeaz n frunzele plantelor dintr-un compus pirimidinic i unul tiazolic.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

71

Biochimie horticol

Tiamina este denumit i aneurin datorit activitii sale aneurinice. Carena acestei vitamine determin lipsa apetitului i oboseal muscular. n esuturile vegetale se gsete n cantiti ce variaz ntre 0,01 i 0,09 mg/100 g esut. Principalele vitamine din legume i fructe Denumirea Retinol (vitamina A) Acidul L-ascorbic (vitamina C) Formula chimic
HOCH2 CH OH H
OH O O

OH

Tiamina (vitamina B1)

H3C

N N

CH2

Riboflavina (vitamina B2)

H3CH3C-

NH2 S CH2-(CHOH)3-CH2OH N N O

CH3 CH2-CH2-OH

NH O

Acidul pantotenic (vitamina B5) Piridoxina (Vitamina B6)

CH3 HOCH2 C CHOHCONHCH2CH2COOH CH3 CH2OH HO CH2OH

H3C N

Acidul folic (vitamina B9)

N H2N

OH

N N

COOH

N
NH C NH

CH2CH2COOH
CH CH2 CH2 S CH2 CH2 CH2 COOH

Biotina (vitamina H) Filochinona (vitamina K1)

CH CH

O CH3 CH3 CH2-CH=C-(CH2)3-CH-(CH2)3-CH-(CH2)3-CH CH3 OH OH HO OH OH

OH -COONH2 N O O OH O

CH3

CH3

CH3

Mioinozitolul

Nicotinamida (Vitamina PP) Rutina (vitamina PP)

HO

OH OH

rutinoz

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

72

Biochimie horticol

Tocoferolul (vitamina E)
H3C HO CH3

CH3 CH3 CH3 CH3 O (CH2)3-CH-(CH2)3 -CH-(CH2)3-CH CH3

Riboflavina (vitamina B2) se gsete n toate legumele i fructele, liber sau sub form de coenzime: riboflavin-5'-fosfat i riboflavinadenindinucleotid. Este un important cofactor enzimatic fiind frecvent n esuturi ca flavinadenindinucleotid. Biosinteza riboflavinei este n ansamblu puin elucidat. n mod cert ns, nucleele pirimidinice i pirazinice ale riboflavinei se sintetizeaz din precursori purinici prin mecanisme similare cu cele ale biosintezei unor derivai ai acizilor nucleici. Coninutul n riboflavin din legume i fructe variaz ntre 0,02 i 0,62 mg/100g. Cele mai bogate produse horticole n riboflavin sunt migdalele, alunele, ciupercile i ptrunjelul. Riboflavina are un rol important n reaciile de oxido reducere i previne apariia la oameni a leziunilor cornei i a stomatitei angulare. Piridoxina (vitamina B6) este denumit i adenin. n afar de piridoxin (alcool), au rol de vitamine B6 i alte dou substane i anume: piridoxalul (aldehid) i piridoxamina (amin primar). Biosinteza piridoxinei din precursori aciclici nu este nc bine cunoscut; se pare ns c ntregul proces de biosintez parcurge cel puin 6-7 transformri distincte. Unele date sugereaz c precursorul iniial ar putea fi 3-fosfoserina (Dempsey, 1969), glicina sau glicolaldehida (Brown i Reynolds, 1963). Coninutul n piridoxin din legume i fructe variaz ntre 0,01 i 1,19 mg/100g, valorile cele mai mari determinndu-se n nuci, arahide, alune, fasole boabe, ardei verde, castane etc. Piridoxina i piridoxamina, sub forma de 5-fosfai funcioneaz ca grupe prostetice n numeroase sisteme enzimatice (transaminaza, codecarboxilaza etc). Piridoxina particip n procesele biochimice ca o coenzim, i anume, intervine n transmiterea, decarboxilarea i deshidratarea aminoacizilor. n caz de caren determin apariia la oameni a unei dermatite denumit i acrodinie. Nicotinamida (vitamina PP) sau niacinamida, este una din cele mai stabile vitamine care exista n alimente sub forma de acid, amida sau coenzima NAD i NADP. Biosinteza nicotinamidei n plante nu este nc bine precizat. Cercetrile cu atomi marcai au dovedit c se poate forma din degradarea oxidativ a triptofanului. Nicotinamida este rspndit n legume i fructe n cantiti ce variaz ntre 0,17 i 15,3 mg/ 100 g. Nicotinamida intr n compoziia codehidrazelor I i II care joac un rol vital n metabolismul celular. n organismele animale are aciune antipelagroas.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

73

Biochimie horticol

Coninutul mediu n principalele vitamine ale unor legume i fructe (mg/100g produs proaspt) (Souci i colab., 1981)
Specia 1 Ardei verde Arahide Cartofi Castravei Ceap Ciuperci Conopid Fasole boabe Fasole verde Gulii Mazre Morcovi Pstrnac Ptrunjel Pepeni Praz Ridichi Ridichi negre Salat Spanac Sparanghel Sfecl roie Tomate elina Usturoi Varz alb Varz roie Vinete Afine Agrie Alune Banane Caise Castane Cpuni Ciree Coacze negre Grapefruit Gutui Lmi Mandarine Msline Mere Migdale Mure Nuci Pere Piersici Struguri Portocale Prune Viine Zmeur Tiamina 2 0,06 0,90 0,11 0,02 0,03 0,10 0,30 0,46 0.08 0,05 0,30 0,07 0,08 0,12 0,05 0,10 0,03 0,03 0,06 0,11 0,11 0,02 0,06 0,04 0,20 0,05 0,07 0,04 0,02 0,02 0,39 0,05 0,04 0,20 0,03 0,04 0,05 0,05 0,03 0,05 0,07 0,03 0,04 0,22 0,03 0,34 0,03 0,03 0,05 0,08 0,07 0,05 0,02 Riboflavina 3 0,05 0,15 0,05 0,03 0,03 0,44 0,10 0,16 0,12 0,05 0,16 0,05 0,13 0,08 0,06 0,06 0,03 0,03 0,08 0,23 0,12 0,04 0,04 0,07 0,08 0,04 0,05 0,05 0,02 0,02 0,21 0,06 0,05 0,21 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,08 0,03 0,62 0,04 0,12 0,04 0,05 0,03 0,04 0,04 0,06 0,05 Piridoxina 4 0,27 0,30 0,21 0,03 0,13 0,06 0,28 0,28 0,12 0,16 0,09 0,11 0,20 0,11 0,25 0,06 0,06 0,05 0,22 0,06 0,05 0,10 0,20 0,11 0,15 0,09 0,06 0,02 0,45 0,37 0,07 0,35 0,06 0,05 0,08 0,01 0,06 0,07 0,02 0,05 0,06 0,05 0,87 0,02 0,03 0,07 0,05 0,04 0,08 0,08 Nicotinamid 5 0,33 15,30 1,20 0,20 0,20 5,20 0,60 2,10 0,60 1,80 2,40 0,60 0,09 2,00 0,05 0,50 0,20 0,40 0,30 0,60 1,00 0,20 0,50 0,90 0,60 0,32 0,43 0,60 0,40 0,25 1,35 0,65 0,77 0,87 0,51 0,27 0,28 0,20 0,20 0,17 0,20 0,50 0,30 4,18 0,40 1,00 0,22 0,85 0,23 0,30 0,44 0,40 0,30 Acid folic 6 0,02 0,05 0,01 0,02 0,02 0,05 0,13 0,04 0,01 0,03 0,01 0,06 0,04 0,20 0,02 0,04 0,08 0,09 0,09 0,04 0,01 0,08 0,04 0,03 0,01 0,07 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,02 0,05 0,08 0,01 0,01 0,02 Acid Acid FiloTocoferol Biotina pantotenic ascorbic chinona 7 0,23 2,60 0,40 0,24 0,17 0,10 1,01 0,98 0,50 0,10 0,72 0,27 0,50 0,03 0,40 0,18 0,18 0,11 0,25 0,62 0,12 0,31 0,26 0,32 0,23 0,16 0,20 1,15 0,23 0,29 0,50 0,30 0,19 0,40 0,21 0,27 0,02 0,10 0,22 0,82 0,06 0,14 0,06 0,24 0,18 0,30 8 139 0 17 11 8 5 70 3 20 63 25 8 18 35 9 30 29 26 13 52 21 10 24 8 14 46 50 5 22 35 3 12 9 27 64 15 177 45 13 53 31 12 17 3 5 10 4 50 5 12 15 9 0,65 20,20 0,09 0,20 0,20 0,08 0,09 2,30 0,28 3,00 0,70 1,00 1,80 0,10 2,00 0 0,39 2,50 2,50 0,10 0,49 2,60 0,10 0,02 2,50 0,03 1,00 28,00 0,45 0,50 7,50 0,22 0,27 1,00 0,25 0,80 0,57 9,70 24,70 0,43 0,60 0,24 0,80 1,40 10 0,05 0,01 0,02 0,01 0,02 0,02 0,08 0,20 0,35 0,04 0,63 0,10 0,15 1,50 0,01 11 0,034 0,001 0,016 0,001 0,007 0,005 0,005 0,002 0,007 0,002 0,004 0,002 0,001 0,005 0,002 0,004 0,002 0,004 0,020 0,002 0,002 -

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

74

Biochimie horticol

Acidul pantotenic (vitamina B5) se gsete n toate legumele i fructele liber sau combinat, sub forma coenzimei A. Biosinteza acidului pantotenic se bazeaz pe transformarea acidului -cetoizovaleric n acid pantoic i -alanina. Printr-o reacie enzimatic n prezena ATP, Mg2+ i K+, cei doi compui chimici sunt unii ntr-o molecul de acid pantotenic. Coninutul n acid pantotenic al produselor horticole variaz ntre 0,02 i 2,6 mg/100g. S-au dovedit a fi bogate n acid pantotenic arahidele, ciupercile, conopida, alunele, nucile, fasolea boabe, mazrea boabe, sparanghelul i migdalele. Acidul pantotenic este o component a coenzimei A sau coenzima acetilrii i acilrii (Bodea i colab., 1964). Acidul folic, denumit i acidul pteroilglutamic, se gsete n legume i fructe n cantiti foarte mici, alturi de alte vitamine ale complexului B, att sub form liber, ct i conjugat cu un numr mare de resturi de acid glutamic. Biosinteza acidului folic implic participarea unor purine sau purin-nucleotide utilizate n lanul de reacii enzimatice (Brenner si Lenthardt, 1961). Coninutul n acid folic din legume i fructe variaz ntre 0,01 i 0,13 mg/100g. Cel mai ridicat coninut s-a determinat n seminele de fasole, n sparanghel, sfecla roie, varza alb, alune, nuci, arahide, conopid i migdale. Particip n metabolismul purinelor, ribofavinei i al flavinelor. Acidul folic este o substan cu rol de vitamin, care n caz de caren determin anemia. Biotina (vitamina H), cunoscut i sub denumirea de Bios II b sau coenzima R, este un factor alimentar indispensabil. Biosinteza biotinei nu este elucidat pn n prezent. Au fost emise mai multe ipoteze privind reaciile de biosintez a acestei vitamine; nici una nu poate fi ns considerat ca valabil n ntregime. Se apreciaz c biotina este sintetizat din acid pimelic. Biotina este mai puin rspndit n esuturile vegetale (0,001-1,9 mg/100g), o cantitate mai mare fiind determinat n salat, soia, arahide i nuci. Se presupune c biotina particip ca o coenzim n decarboxilarea acizilor -cetonici, n dezaminarea aminoacizilor, n sinteza acidului asparagic etc. n caz de caren, determin la om i animale simptome i cderea prului. Mioinozitolul, denumit i mezoinozitol sau Bios I, este un factor de cretere i se gsete n numeroase esuturi vegetale, att n stare liber, dar mai ales esterificat cu acid fosforic. Biosinteza mezoinozitolului are ca punct de plecare hidroliza fitinei.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

75

Biochimie horticol

n cantiti mai mari s-a identificat n seminele de fasole i mazre, precum i n numeroase alte semine, sub form de esteri cu 6 molecule de acid fosforic (acid fitic). Rutina (vitamina P) acioneaz asupra permeabilitii capilarelor sanguine. Alturi de rutin, au rol de vitamina P i o serie de glicozide naturale, aparinnd flavonelor ca: hesperidina, quercetina, esculina etc. 6.2. Vitamine liposolubile - structur, clasificare i rol biochimic Tocoferolii (vitamina E) reprezint un grup de substane nrudite care sunt derivai metilai ai tocolului. Au fost identificai n natur i izolai prin distilare molecular sau cromatografie un numr de 7 tocoferoli. Cei mai raspndii sunt -, -, - i - tocoferolii.
3 3

CH3 H3C HO CH3

CH3 CH3 (CH2-CH2-CH2-CH)3-CH3 HO

CH

CH CH O (CH -CH -CH -CH) -CH

3 2 2 2 3

CH

-Tocoferol
3 3

-Tocoferol
3 3

CH
3

H C HO

CH CH (CH -CH -CH -CH) -CH

3 2 2 2 3

CH HO

CH CH O (CH -CH -CH -CH) -CH

3 2 2 2 3

-Tocoferol

-Tocoferol

Sunt rspndii n seminele plantelor oleaginoase sau de cereale. Au proprieti antioxidante, inhibnd biodegradarea vitaminei A i a acizilor grai din membrane de ctre radicalii liberi. Dintre acetia, activitatea cea mai ridicat o are -tocoferolul (-, - si tocoferolii prezint o activitate cu 40%, 20% i respectiv 1% mai mic fa de -tocoferol. Filochinona (vitamina K1) are aciune antihemoragic i este raspndit n frunzele plantelor verzi (spanac, varza). Are rol n fosforilarile oxidative ca transportor de electroni ntre dou coenzime i catalizeaz generarea legturilor fosfat, bogate n energie. Coninutul n vitamina K1 din legume i fructe variaz ntre 0,01 i 1,5 mg/100g. Koivu i colab. (1997) au constatat c legumele din Finlanda au un coninut mediu de filochinon ce depete 100 g/100 g. Ptrunjelul conine 360 g/100 g, n timp ce legumele de ser i fructele conin n medie 20 g/100 g. 6.3. Modificarea coninutului n vitamine n perioada creterii i maturrii legumelor i fructelor Pe parcursul perioadei de cretere i maturare a legumelor i fructelor are loc biosinteza vitaminelor, proces complex, influenat de condiiile pedoclimatice i de
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

76

Biochimie horticol

tehnologiile de cultur. (Gherghi i colab., 2001). Astfel, prin aplicarea ngrmintelor crete coninutul n acid L-ascorbic, tiamin i riboflavin din legume i fructe. Acelai efect l au i tratamentele prerecolt cu acid succinic i uree asupra coninutului n acid L-ascorbic din cartofi. O aciune contrar, de scdere a cantitii de acid L-ascorbic din legume i fructe se constat prin aplicarea erbicidelor de tip prometrin. Coninutul n tocoferoli din ardei crete ca urmare a aplicrii ngrmintelor azotoase sub form de azotat de amoniu. La legume, ndeosebi la cele frunzoase, n perioada de cretere se produce o acumulare de vitamine B, E, K, acid folic i niacina. Frunzele de salata, varz, spanac n cretere au un coninut mai ridicat n tiamin, riboflavon i acid ascorbic, dect frunzele mature. La

strugurii din soiul Merlot, n perioada de maturare (august-octombrie) coninutul n tiamin, nicotinamid i mezoinozitol crete relativ constant de la 228 la 450, de la 390 la 700 i respectiv de la 118 la 297 g/1000 bace, n timp ce coninutul n riboflavin, acid pantotenic i piridoxin, la sfritul lunii septembrie, prezint un maximum de 14, 960 i respectiv 240 g/1000 bace, iar cel de biotin prezint n aceeai lun un minimum de 1,3 g/1000 bace. n timpul maturrii merelor, se sintetizeaz -tocoferolul i din acesta, -tocoferolul. n perioada de sintez a tocoferolilor crete coninutul n acid linoleic, datorit efectului antioxidant pe care l au acetia. Tomatele cu pigmentaia roie pe 10-15 % din suprafa conin n medie 17,0 mg/100g acid ascorbic. Pe msur ce se matureaz i coloraia roie se extinde la 80-90 % din suprafa, coninutul n acid ascorbic din tomate crete pn la circa 24,0 mg/100g. Creterea coninutului n acid L-ascorbic s-a constatat i n cazul tomatelor recoltate la maturitatea n verde i care au fost postmaturate la temperaturi de 10C i de 20-22C. n primul caz creterea coninutului n acid L-ascorbic a fost de 8,1 mg/100 g, iar n cel de al, de 1,6 mg/100g. n cazul dovleceilor, acumularea acidului ascorbic are loc n faza cunoscut de dovlecel n floare, cnd se realizeaz circa 40 mg/100g. Pe msur ce dovleceii se matureaz, coninutul n acid ascorbic scade n medie la 23 mg/100g i apoi la 15 mg/100g cnd ajung la dimensiunea caracteristic soiului. Acidul ascorbic este prezent n mere att ca acid L-ascorbic ct i ca acid dehidroascorbic. n perioada maturrii fructelor pe pom, proporia de L-acid ascorbic crete, iar cea de acid dehidroascorbic scade. n faza de prga, n cazul merelor Jonathan, s-a stabilit un coninut de 10,2 mg acid ascorbic/100g, iar apoi n decurs de 18 zile, perioad n care se realizeaz maturitatea de consum, coninutul n acid ascorbic a sczut la 7,9 mg/100 g. Cercetrile efectuate cu acid ascorbic marcat cu
14

C au demonstrat c n timpul maturrii

strugurilor, acidul ascorbic este metabolizat n acid tartric.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

77

Biochimie horticol

La soiul de prune Vinete de Italia, n faza de prg, coninutul n acid ascorbic a fost de 6,7 mg/100g, iar dup 10 zile de maturare pe pom, valoarea acestuia a scazut la 5,7 mg/100g, datorit oxidrii acidului ascorbic, proces n care sunt implicate oxidazele (ascorbaze i fenolaze) sau dehidrazele care acioneaz n prezena chinonelor. Prezena unor compui ca: vitamina P, sau substanele tanoide au un rol protector, acestea acionnd n sensul frnrii vitezei de degradare a acidului ascorbic. Pe parcursul perioadei de pstrare, n legumele i fructele recoltate la maturitate, are loc diminuarea continu a cantitii de acid ascorbic, intensitatea scderii acestui coninut fiind dependent de specie, soi, temperatur etc. Astfel, din datele obinute de autori rezult c n cazul salatei, coninutul n acid ascorbic a sczut dup 2 zile de pstrare la temperatura de 3C, de la 32,2 la 22,8 mg/100g. La fasolea psti, dup 2 zile de pstrare la temperatura de 23-25C, coninutul n acid ascorbic s-a redus de la 18,8 la 12 mg/100 g. De asemenea, la merele din soiul Jonathan, dup 200 de zile de pstrare la 0C, coninutul n acid ascorbic a sczut de la 7,84 la 5,70 mg/100g. Scderea coninutului n acid ascorbic pe parcursul pstrrii are loc i n alte produse horticole ca: ardei, gogoari, ceap, morcovi, varz, caise, capuni, ciree, piersice, prune, struguri, viine etc. Cercetrile efectuate cu privire la pstrarea legumelor i fructelor n

atmosfer controlat au dovedit c n aceste condiii coninutul n acid ascorbic s-a meninut la un nivel mai ridicat, comparativ cu cel determinat n produsele pstrate n condiii frigorifice obinuite. Coninutul produselor horticole n vitaminele din grupa B este relativ mai stabil i n general, este puin afectat, dac pstrarea se face la temperaturi coborte. Coninutul n vitamine din produsele horticole se schimb relativ rapid sub aciunea factorilor de mediu n perioada de cretere, maturare i valorificare i din aceast cauz este utilizat ca un indicator de calitate al acestor produse. Autoevaluare 1. Clasificarea vitaminelor. 2. Vitamine hidrosolubile - structur, clasificare i rol biochimic. 3. Acidul ascorbic structur, biosintez i rol biochimic. 4. Vitaminele complexului B structur, biosintez i rol biochimic. 5. Vitamine liposolubile - structur, clasificare i rol biochimic. 6. Modificarea coninutului de vitamine pe parcursul creterii, maturrii i pstrrii legumelor i fructelor.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

78

Biochimie horticol

Bibliografie selectiv 1. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Dobrescu, A., Bdulescu, L., Mihescu, D., Blan, D. - Fiziologia plantelor, Volumul VIII - Substanele utile din plante (2005) Ed. Elisavaros Bucureti 5. Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti 6. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 7. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 8. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti. 9. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

79

Biochimie horticol

CAPITOLUL 7. HORMONI Cuvinte cheie: hormoni stimulatori de cretere, hormoni inhibitori de cretere, hormoni de maturare, auxine, gibereline, citochinine, acid abscisic, etilena, brasinosteroizi, acid jasmonic, acid salicilic, receptori hormonali, timp de rspuns. Rezumat Hormonii vegetali sunt substane bioactive cu rol specific n procesele de cretere i maturare. Aceste substane au situsuri specifice de biosintez de unde sunt transportate n alte organe, unde i manifest efectul lor caracteristic. n funcie de efectul lor asupra creterii, sunt grupai n substane stimulatoare (auxine, gibereline, citochinine) i substane inhibitoare (acidul abscisic), iar etilena reprezint hormonul de maturare al plantelor. Aceti hormoni au o greutate molecular mic care variaz ntre 28 Da (etilen) i 346 Da (gibereline). Ca i hormonii animali acetia sunt eficace n concentraii foarte mici, cuprinse ntre 10-6 i 10 -8 M. n afar de efectul specific pe care l au hormonii asupra plantelor i anume asupra procesului de cretere i de maturare, acetia influeneaz i alte procese ca: dormana, dominana apical, polaritatea, abscisia (cderea florilor, fructelor i frunzelor), raspunsul plantelor la factorii de mediu biotici i abiotici, unele micri ale plantelor etc. 7.1. Principalii hormoni vegetali Dintre substanele stimulatoare naturale, mai cunoscute sunt auxinele, giberelinele i citochininele. n afara acestora, n legume i fructe se formeaz etilena, hormonul de maturare, i acidul abscisic, o substan inhibitoare a creterii. 7.1.1. Auxine Din punct de vedere chimic auxinele fac parte din grupa compuilor indolici. Dintre acetia, cel mai rspndit este acidul 3-indolil-acetic, identificat n endospermul seminelor de mr, piersic, fragi, coacze negre, varz etc. n legume i fructe au mai fost identificai i ali derivai indolici, considerai ca produi intermediari n biosinteza acidului 3-indolil-acetic, avnd drept compus iniial triptofanul. Astfel, indolil-acetonitrilul, a fost identificat n varz, tomate i struguri, acidul-3-indolil carboxilic, n tomate i conopid; acidul-3-indolil-acetilaspargic, n mac, iar acidul-3-indolil-propionic i aldehida-3-indolilacetic, n conopid.
-CH2-COOH N H N H -CH2-CN N H

-CH2-C

O H

Acid-3-indolil acetic

Indolil acetonitril Aldehid-3-indolacetic

Auxinele se gsesc sub form liber sau conjugate cu diferii compui cu greutate molecular mic formnd esteri ai acidului indolil acetic cu glucoza sau mioinozitolul, compui conjugai cu amidele (aspartat) sau combinaii cu compui cu greutate molecular
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

80

Biochimie horticol

mare aa cum sunt combinaiile acid indolil acetic-glucani sau acid indolil aceticglicoproteine care au fost identificate n seminele cerealelor. Cea mai mare cantitate de auxine se gsete n situsurile de biosintez, dar n cantiti mai mici se gsesc n toate organele plantelor. Auxina se biosintetizeaz din aminoacidul triptofan, dar exist i specii de plante la care precursorul a fost triptamina. Biosinteza acestui hormon de cretere are loc n esuturile meristematice, n organele tinere ale plantelor, n semine, ovarul florilor, n pistil i n stamine. Giberelinele stimuleaz sinteza auxinei, n timp ce citochininele inhib acest proces. Transportul auxinei se face prin floem i este polar, adic se face ntr-o singur direcie, bazipetal. Acest transport unidirecional se datoreaz faptului c n plasmalema din partea bazal a celulelor se gsesc transportori de auxin-anioni. Modificarea ritmului de transport a auxinei poate s rezulte din lipsa receptorilor specifici, modificarea numrului receptorilor sau a afinitii acestora. Principalele funcii ale auxinelor constau n: - Stimularea procesului de cretere n concentraii mici i inhibarea acestui proces n cazul concentraiilor mari. - Determin procesul de dominan apical. - Stimuleaz formarea fructelor partenocarpice la unele specii de plante. - Determin polaritatea la plante. - Stimuleaz procesul de ieire din dorman. - Induc fototropismul i geotropismul la plante. 7.1.2. Gibereline n aceast grup de substane se includ diterpenoidele ciclice care au un sistem tetraciclic denumit giban i au caracter acid fapt pentru care sunt notate cu iniialele GA 1..... GA 125. Pn n prezent au fost identificate peste 100 de gibereline dintre care cea mai cunoscut este acidul giberelic. Dintre acestea mai mult 60 gibereline se gsesc n plantele supeioare. Giberelinele difer ntre ele prin modul de amplasare a gruprilor hidroxilice, metilice i carboxilice laterale.
O H OH N C CH2 N Zeatina N H O N OH CH3 Acidul abscisic COOH CH3 NHCH2CH C-CH2OH H3C CH3

O C HO

CH3 COOH Acid giberelic

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

81

Biochimie horticol

Giberelinele se gsesc n stare liber, dar n unele semine se gsesc i sub form glicozidic. Coninutul maxim de gibereline a fost determinat n seminele mature unde concentraia acestora este de circa 1.000 de ori mai mare comparativ cu celelalte esuturi ale plantelor. Coninutul de gibereline din mere are un maximum dup 60 de zile de la nflorit, iar n struguri, dup 40 - 45 zile de la fecundare. Giberelinele se biosintetizeaz din acetil coenzima A, n ciclul mevalonat, n frunzele tinere, mugurii apicali i n seminele n curs de germinare. Sinteza giberelinelor n rdcini este incert. Primele etape ale procesului de biosintez, pn la formarea ent-kaurenului au loc n proplastide, sinteza aldehidei GA12 are loc n reticulul endoplasmatic, iar interconversia giberelinelor are loc n citoplasm. Giberelinele biosintetizate n frunzele tinere se transport bazipetal prin floem, dar i acropetal prin xilem. Giberelinele au fost identificate n seminele mature de fasole, lupin, mazre, mr, etc., avnd o concentraie mai ridicat n endosperm i embrion. Activitatea biologic a giberelinelor variaz cu tipul acestora, fiind mai active cele 3-hidroxilate. Principalele funcii ale giberelinelor sunt: - Stimuleaz creterea tulpinii, germinarea seminelor, expresia sexelor, -Induc sinteza de novo a amilazelor i stimuleaz procesul de germinare a seminelor. - Au efect antagonist cu auxinele n procesul de dominan apical. - Stimuleaz ieirea din procesul de dorman. - Induc nflorirea la unele plante de zi lung sau care necesit vernalizare. - ntrzie senescena frunzelor i fructelor. - Determin formarea de fructe partenocarpice la unele specii de plante. 7.1.3. Citochinine Identificate n endospermul seminelor din fructele nematurate, citochininele sunt compui substituii ai adeninei, care stimuleaz procesul de diviziune celular fiind puse n eviden n urm cu trei decenii. Principalele citochinine sunt zeatina i kinetina. Dintre citochininele izolate din legume i fructe pot fi menionate: kinetina rspndit n citrice, zeatina n pepeni, mere i pere, difenilureea i zeatinribozidul n nucile de cocos. n meristemul apical al rdcinii i al tulpinii tomatelor se pot biosintetiza aceti hormoni, translocarea citochininelor realizndu-se mai ales din rdcin ctre organele aeriene, prin xilem. Citochininele au ciclul biosintetic dependent de cel al acidului ribonucleic (ARN), ARNt acionnd ca un intermediar sau ca un precursor al citochininelor libere, zeatina fcnd parte din anticodon.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

82

Biochimie horticol

Principalele funcii ale citochininelor sunt: - Stimuleaz procesul de diviziune celular, creterea rdcinilor i a frunzelor tinere. - Valoarea mare a raportului citochinine/ auxine iniiaz creterea rdcinilor. - Inhib senescena frunzelor. - Stimuleaz germinarea seminelor - Au aciune antagonist cu auxina n procesul de dominan apical. - Stimuleaz sinteza antocianilor. - Induc deschiderea stomatelor. 7.1.4. Acid abscisic Este principalul hormon vegetal ce inhib procesul de cretere a plantelor, aparinnd clasei sesquiterpenoidelor. Se biosintetizeaz n rdcini, frunze senescente, n pericarpul bacelor la Vitis etc., n aproape toate celulele plantelor care conin cloroplaste sau amiloplaste. Translocarea acidului abscisic se face din rdcin ctre organele aeriene acropetal prin xilem, iar acidul abscisic sintetizat n frunzele senescente se transloc bazipetal, prin floem. Se acumuleaz n muguri, semine, bulbi, tuberculi etc. unde determin starea de dorman. Principalele funcii ale acidului abscisic sunt: - Induce procesul de endodorman. - Inhib intrarea n vegetaie a seminelor i mugurilor. - Inhib procesul de cretere n condiii de stres hidric, asociat cu concentraii mari de acid abscisic. - Regleaz procesul de sintez i acumularea a proteinelor i a lipidelor de rezerv. - Induce tolerana seminelor la deshidratare. - Determin nchiderea stomatelor hidroactiv n caz de secet. - Iniiaz procesele de abscizie a frunzelor, florilor, fructelor. 7.1.5. Etilena (H2C = CH2) Este hormonul care stimuleaz procesul de maturare i de senescen, fiind biosintetizat n toate esuturile plantelor. Cantitatea de etilen produs de esuturile vegetale variaz cu specia i organul analizat, ntre 0,01 i 700 ppm. n cazul unor fructe cum sunt merele, perele, caisele etc., cea mai mare cantitate de etilen este produs n perioada de maturare. Pentru a putea induce modificri metabolice n plante, concentraia etilenei trebuie s depeasc o valoare minim de prag, care variaz n limite largi: 0,1-5,0 ppm, n funcie de specie i de procesul pe care l catalizeaz.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

83

Biochimie horticol

Etilena se biosintetizeaz din metionin, principalii intermediari fiind S-adenozil metionina (SAM) i acidul 1-ciclopropan-1-carboxilic (ACC) n rdcini, care este transportat prin xilem n organele aeriene, unde este convertit la etilen. Conversia ACC-ului la etilen are loc n mitocondrii, iar biosinteza etilenei din acizi grai este localizat la nivelul membranelor plasmatice. Etilena fiind o hidrocarbur gazoas este eliminat uor n mediul ambiant, proprietate care st la baza tratamentelor cu etilen n celulele de postmaturare, n scopul accelerrii maturrii fructelor i legumelor depozitate. Principalele funcii ale etilenei sunt: - Inhib procesul de cretere. - Stimuleaz procesul de abscisie. - Determin modificarea intensitii respiraiei fructelor, apariia mai timpurie a climactericului i, ca urmare, realizarea mai rapid a maturitii de consum. - Stimuleaz rspunsul plantelor la aciunea unui factor de stres. 7.1.6. Alte substane reglatoare de cretere i maturare Brassinosteroizii au fost identificai n anul 1960 n gruncioarele de polen, iar ulterior n semine i esuturile vegetative tinere. Pn n prezent au fost identificai 60 de brassinosteroizi, dintre care 31 au fost mai bine caracterizai. Cei mai importani brassinosteroizi sunt: brassinolidul, castasteronul,

campesteronul, teasteronul i tifasterolul. Brassinolidul stimuleaz procesul de diviziune i extensia celular, accelereaz senescena frunzelor i a cotiledoanelor, moduleaz rspunsul la aciunea factorilor de stres i regleaz expresia genelor i cu rol stimulator asupra creterii esuturilor vegetative, inhib creterea rdcinii, stimuleaz sinteza etilenei i epinastia, stimuleaz diferenierea xilemului, rezistena la condiii de mediu nefavorabile (nghe, boli, la stres hidric) i sinteza ADN-ului, ARN-ului i proteinelor. Principalele funcii ale hormonilor steroizi sunt urmtoarele: - Hormonii brassinosteroizi determin expresia genelor care induc creterea i sunt implicai n diferenierea vaselor lemnoase. - Intensific creterea tubului polinic. - Reorienteaz sensul de dispunere a microfibrilelor de celuloz. - Intensific sinteza etilenei i procesul de maturare a fructelor. Poliaminele alifatice sunt compui organici policationici, cu rol hormonal, fiind necesare pentru creterea plantelor, respectiv pentru diviziunea celulelor, i au rol n procesele de nflorire i de difereniere a sexelor. Principalele poliamine sunt: putresceina, spermina, spermidina i cadaverina.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

84

Biochimie horticol

Poliaminele se biosintetizeaz ca i etilena n ciclul metioninei, precursorul acestora fiind S-adenozil metionina decarboxilat. Rolul fiziologic al poliaminelor nu este bine precizat. - Stimuleaz creterea plantelor, dar au i rolul de a stabiliza membranele plasmatice, de control a procesului de fosforilare a proteinelor nucleare, iar complexul ADN-spermin protejeaz ADN-ul mpotriva denaturrii. - Stimuleaz diviziunea celulelor, creterea rdcinilor, inducia floral i stimuleaz formarea fructelor. - Iniiaz formarea tuberculilor. - n condiii de stres, poliaminele intervin n diviziunea celular, organogenez i senescen, n mod similar cu hormonii. Acidul jasmonic se biosintetizeaz n condiii de stres osmotic, mecanic sau ca urmare a aciunii elicitorilor, din acizii grai existeni n membranele celulare. Produii genelor DAD1 i PLD sunt fosfolipaza A1 i respectiv fosfolipaza D care catalizeaz reaciile de biodegradare a fosfolipidelor membranale, cu eliberarea acizilor grai. Biodegradarea acizilor grai cu formarea de hidroxiperoxizi, este catalizat de lipoxigenaz, a crei sintez este codificat de genele LOX2. Hidroxiperoxizii acizilor grai sunt biodegradai la rndul lor de enzimele codificate de genele AOS, AOC, OPR3 i JMT, rezultnd acid jasmonic. Acidul jasmonic are rol hormonal, influennd numeroase procese fiziologice: - Stimuleaz procesul de difereniere, formarea rdcinilor adventive, ntreruperea repausului vegetativ, maturarea i senescena fructelor, abscisia frunzelor, biodegradarea clorofilei, respiraia, biosinteza etilenei i regleaz acumularea proteinelor de rezerv n semine. - Inhib creterea n lungime a rdcinii, formarea micorizelor, embriogeneza, germinarea seminelor, formarea mugurilor floriferi, biosinteza carotenilor i a clorofilei i inhib expresia genelor implicate n fotosintez. - Activeaz expresia genelor implicate n sinteza proteinelor antifungice: tionin, osmotin i induce sinteza enzimelor implicate n formarea fitoalexinelor. - Are rol n aprarea activ la atacul patogen. Meir i colab. (2000) au constatat c metil jasmonatul stimuleaz mecanismele de aprare natural la atacul produs de ciupercile parazite, la grapefruit. - Acidul jasmonic din frunzele de Solanum tuberosum poate fi convertit prin hidroxilare i glucozilare n acid tuberinic-12-0--glucozid care se apreciaz c induce formarea tuberculilor. Acidul salicilic se presupune c se sintetizeaz din acidul trans-cinamic pe calea acidului benzoic.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

85

Biochimie horticol

Acidul salicilic reprezint un semnal transmis la distan, prin floem, de la esuturile afectate de patogeni, spre cele neafectate, pentru a stimula mecanismele de rezisten la atacul microorganismelor patogene. Are rol de asemenea n transducia ciclului de semnale legate de activarea genelor care codific sinteza proteinelor legate de patogenez. Alte funcii fiziologice ale acidului salicilic sunt: - Reduce rata de sintez a etilenei. - ntrzie senescena petalelor. - Regleaz procesul de termogenez la unele specii floricole, prin trecerea la respiraia cianidin sensibil. 7.2. Activitatea hormonilor Receptorii hormonali reprezint molecule specializate de care se leag hormonii, formnd complexe hormoni-receptori, care reprezint forma activ a acestora. Aceasta determin formarea unui mesager secundar care poate fi: AMP, GMP, 1,2-diacil glicerol, inozitol 1,4,5-trifosfat, acid jasmonic sau ionii de calciu. Inozitol trifosfatul este uor solubil n ap i difuzeaz uor n celule, determinnd deschiderea canalelor de calciu, creterea coninutului de calciu intracelular i formarea complexului calmodulin-calciu. Majoritatea receptorilor hormonali sunt situai n plasmalem, care reprezint interfaa dintre celul i mediul ambiant, dar se gsesc receptori i n citoplasm, nucleu i n organitele celulare. Giberelinele i acidul abscisic, care au structur sterolic, pot strbate uor membranele fosfolipidice, ajungnd astfel la receptorii situai la nivelul organitelor celulare. Etilena singurul hormon n stare gazoas, este moderat solubil n ap i strbate uor membranele plasmatice. Cealali hormoni sunt insolubili n lipide, din care cauz trecerea prin membranele plasmatice se face mai greu, fiind necesar intervenia transportorilor. Interaciunea dintre hormoni. n general, hormonii nu acioneaz individual, n esuturile plantelor, rezultatul aciunii lor comune fiind dependent de relaiile dintre hormoni (antagonism sau sinergism) i de raportul cantitativ dintre acetia. Scott (1984) a precizat existena unor relaii de antagonism ntre etilen i gibereline sau citochinine, n producerea senescenei fructelor. Relaii de antagonism s-au constatat i ntre acidul abscisic i kinetine, n cazul alungirii coleoptilului. Relaii de sinergism s-au constatat ntre kinetin i auxin, n procesul de biosintez a etilenei. Schimbarea raportului cantitativ dintre hormonii stimulatori i cei inhibitori, st la baza mecanismului de declanare a procesului de maturare a fructelor i a procesului de dorman.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

86

Biochimie horticol

Rspunsul la aciunea hormonilor nu poate fi explicat de modificarea concentraiei acestora, deoarece aceste modificri sunt relativ mici, ci n principal modificrii sensibilitii esuturilor la aciunea acestora. Timpul de rspuns la aciunea hormonilor, adic viteza de reacie a esuturilor la aplicarea hormonilor este diferit. Unele reacii de rspuns sunt foarte rapide, desfurndu-se n cteva secunde sau minute. Un astfel de exemplu l reprezint nchiderea stomatelor ca urmare a tratamentelor cu acid abscisic. nchiderea stomatelor n condiii de stres hidric, se datoreaz creterii concentraiei de acid abscisic din aceste celule de 15 - 50 ori, n 4 - 8 ore. Vitez de reacie mare se constat i n cazul extensiei celulare, determinat de tratamentele cu auxin. n cazul altor reacii declanate de hormoni, timpul de rspuns poate fi mare: ore sau zile. Un astfel de exemplu l constituie biosinteza amilazelor ca urmare a tratamentelor cu gibereline. Autoevaluare 1. Precizai principalii hormoni vegetali. 2. Auxinele structur i rol. 3. Giberelinele structur i rol. 4. Citokininele structur i rol. 5. Acidul abscisic i etilena structur i roluri. 6. Alte substane reglatoare de cretere i maturare. 7. Ce sunt receptorii hormonali? 8. Cum interacioneaz hormonii vegetali? 9. Care este timpul de rspuns la aciunea hormonilor? Bibliografie selectiv 1. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 5. Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti 6. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 7. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 8. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

87

Biochimie horticol

CAPITOLUL 8. PIGMENII VEGETALI Cuvinte cheie: pigmeni carotenoizi, pigmeni clorofilieni, flavone, antociani, taninuri. Rezumat Pigmenii vegetali sunt substane bioactive ce confer esuturilor vegetale culoarea caracteristic, aceasta fiind diferit n funcie de specie i soi. Sunt localizai la nivel celular n diferite organite: n cloroplast pigemnii clorofilieni i pigemnii carotenoizi, n cromoplaste pigmenii carotenoizi, n vacuol pigemnii antocianici i taninurile. La nivelul organelor plantelor pigmenii pot fi localizai n epicarp (mere, portocale, banane, vinete etc.) sau n toate esuturile prii edibile (la sfecla roie, morcovi, tomate etc.), n epiderm i primele straturi ale scoarei (pigmenii verzi din tulpinile tinere), n petalele florilor, etc. Pigmenii vegetali au structuri diferite, putnd fi tetraterpenoide oxigenate (xantofilele) sau nu (carotenii), substane fenolice din clasa flavonoidelor simple (antocianidine i flavone), glicozilate (flavanonele, flavonolii i izoflavonele) sau condensate (taninurile). Compui cu rspndire larg n legume i fructe, substanele fenolice au fost considerate ca produse secundare i aparent fr un rol vital. Recent s-a evideniat rolul lor n rezistena pasiv a plantelor fa de atacul microorganismelor parazite, iau parte la realizarea gustului i aromei legumelor i fructelor, contribuie la realizarea culorii caracteristice legumelor i fructelor, prezint activitate antioxidant, capacitatea de a reduce cantitatea speciilor active de oxigen, capacitatea de a inhiba formarea nitrozaminelor i de a modula activitatea unor enzime i au efect anticancerigen.

8.1. Substanele carotenoide Carotenii sunt pigmeni cu nuane de galben, care sunt localizai n cromoplaste i contribuie la realizarea culorii unor fructe i flori. Din punct de vedere al structurii chimice, carotenoidele sunt tetraterpenoide formate din 8 uniti izoprenice cu un numr mare de legturi duble conjugate. n structura carotenoizilor, la unul sau la ambele capete ale moleculei, pot exista i cicluri iononice sau pentaciclice. n grupa pigmenilor carotenoizi i a derivailor acestora sunt incluse circa 70 de compui care se gsesc n cromoplaste, n stare liber, dizolvai n lipide sau cristalizai i sub form de compui caroteno-proteici sau glicozide carotenoidice. Pigmenii carotenoizi cu 40 de atomi de carbon au cea mai mare pondere n legume i fructe i sunt reprezentai de: - hidrocarburi carotenoidice formate din carbon i hidrogen corespunztor formulei brute C40H56 (licopen, caroten); - compui carotenoidici cu oxigen, dintre care mai rspndii sunt cei care conin gruparea hidroxilic -OH (xantofile). Dintre pigmenii carotenoizi cu 40 de atomi de carbon identificai n legume i fructe, cel mai cunoscut i rspndit este -carotenul.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

88

Biochimie horticol

Denumirea 1 - Caroten

Principalii pigmeni carotenoizi din legume i fructe Structura chimica 2 Pigmeni carotenoizi cu 40 atomi de carbon Hidrocarburi carotenoide

Rspndirea 3 nsoete carotenul n majoritatea legumelor i fructelor Tomate

-Caroten

Fitoen

Fitofluen

Licopen

n toate esuturile care conin clorofil Tomate, piersici, pepeni

OH

Capsantina

Ardei

HO

Capsorubina
O

OH

Ardei gogoari

OH

Luteina

OH

Portocale i esuturile verzi

HO

-Carotenul (C40H56) este alctuit dintr-o caten cu 11 duble legturi conjugate i are
la ambele capete cte un ciclu cu dubl legtur (5:6) denumit ciclu -iononic. Se gsete n proporie mai ridicat n morcovi determinnd culoarea portocalie a acestora. Aste provitamina a i are aciune antiasmatic, antimutagen i antioxidant.

-Carotenul (C40H56) are la un capt al catenei ciclul -iononic, iar la cellalt capt
un ciclu -iononic. n felul acesta, -carotenul are n molecula sa 10 duble legturi conjugate i o dubl legtur izolat.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

89

Biochimie horticol

Culoarea acestui pigment este mai deschis dect a -carotenului. Licopen (C40H56) are catena atomilor de carbon aciclic, cu 13 duble legturi n molecul, din care numai 11 conjugate. Se gsete n proporie mare n tomate (2,8 - 4,3 mg/100 g parte edibil), ns a mai fost identificat n circa 70 de specii de plante. Licopenul are aciune antioxidant, anticancerigen, antitumoral, cancer preventiv i este un colorant pentru unele specii de fructe. Fitofluenul i fitoenul sunt incolore i cu un grad mai ridicat de nesaturare. Xantofilele sunt carotenoizi cu oxigen, cu cte o grupare hidroxilic la C3, respectiv la C3'. Cele mai cunoscute xantofile sunt: luteina, capsantina i capsorubina. Luteina (C40H56O2) este asemntoare -carotenului, dar spre deosebire de acesta, are dou grupri hidroxilice. Acest pigment este rspndit n toate plantele verzi alturi de clorofil i caroten. Luteina are aciune antioxidant, antisclerotic, anticancerigen i antitumoral. Capsantina (C40H56O2) reprezint pigmentul rou din ardei. Este o hidroxiceton care se termin cu un ciclu alctuit din 5 atomi de carbon rezultat din izomerizarea ciclului iononic. Are aciune antioxidant. Capsorubina conine dou grupri hidroxilice i dou grupri cetonice. Se gsete la ardeiul rou alturi de capsantin. Zeaxantina (C40H56O2) se gsete n fructele citrice. Coninutul total n pigmeni carotenoizi din legume variaz ntre 0,1 mg/ 100 g fasole verde i 25,0 mg/ 100 g ardei iar coninutul din fructe variaz ntre 0,1 mg/100 g coacze negre i 7,5 mg/100 g banane. 8.2. Pigmenii clorofilieni Pigmenii clorofilieni se gsesc n cloroplastele tuturor esuturilor verzi, fiind reprezentai n principal de clorofila a i clorofila b. mpreun cu pigmenii carotenoizi particip la faza de lumin a fotosintezei, motiv pentru care sunt denumii pigmeni asimilatori. Clorofila este alctuit din 4 nuclee pirolice care formeaz nucleul tetrapirolic (porfirinic), care are la centru un atom de magneziu. De nucleul porfirinic se leag fitolul (C20 H39 OH), care este alcoolul unei hidrocarburi superioare. Dintre clorofile cele mai rspndite sunt clorofila a (C55 H72 O5 N4 Mg ) i clorofila b (C55 H70 O6 N4 Mg).

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

90

Biochimie horticol

Clorofila a are o grupare metilic (CH3), n timp ce clorofila b are o grupare aldehidic (CHO). Raportul dintre clorofila a i b este de 3/1 i poate crete n cazul plantelor heliofile, iubitoare de lumin. Biosinteza pigmenilor asimilatori. Pigmenii clorofilieni se

biosintetizeaz n cloroplaste, n ciclul acidului -aminolevulinic. Pn nu de mult s-a considerat c prin

condensarea aminoacidului glicin cu succinil CoA (produs intermediar al ciclului Krebs), n prezena enzimei acid 5-aminolevulinic sintaz, se formeaz acidul -aminolevulinic. n prezent, s-a constatat c acidul

glutamic este activat prin legarea de ARMt, rezultnd glutamil-ARNt, care se reduce la glutamat 1-semialdehid. n prezena glutamatsemialdehid

aminotransferaz, din acest compus se formeaz acidul 5-aminolevulinic. Dou molecule de acid -aminolevulinic formeaz o molecul de porfobilinogen, iar patru molecule de porfobilinogen dau natere nucleului tetrapirolic al uroporfirinogenului. Prin legarea magneziului de nucleul tetrapirolic se formeaz Mg-porfirina, care se esterific cu fitolul, formnd clorofila a. Clorofila sufer un proces continuu de biosintez i biodegradare. Ca urmare a desfurrii acestor procese, clorofila se rennoiete permanent, ntr-un ritm de 40 % pe parcursul a 2-3 zile. Pigmenii carotenoizi se biosintetizeaz n cloroplaste i cromoplaste, prin ciclul mevalonat, din acetil CoA rezultat din biodegradarea glucidelor i lipidelor. Procesul de biosintez cuprinde numeroi compui intermediari, dintre care cei mai importani sunt: mevalonatul, izopentil pirofosfatul, geranil pirofosfatul, fitoenul, licopenul i carotenul. Proprietile pigmenilor asimilatori sunt urmtoarele: Absorb energia luminoas, care este utilizat n faza de lumin a fotosintezei. Sunt solubili n solveni organici ca: aceton, eter de petrol, benzen etc. Culoarea difer astfel: clorofila a are culoare verde albstruie, clorofila b are

culoare verde glbuie, carotenul are culoare portocalie i xantofila galben portocalie.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

91

Biochimie horticol

- Fluorescena este proprietatea clorofilei de a aborbi radiaii cu lungime de und mic i energie mare (UV i albastre), de a se excita, iar prin dezexcitare emit radiaii cu lungimea de und mai mare dect cea absorbit (roii). Extractul alcoolic de clorofile are culoarea verde cnd este privit prin transparen i culoare rou-rubiniu, cnd este privit prin reflexie. Fotooxidarea reprezint reacia de descompunere a moleculelor de clorofil sub

aciunea luminii. Din acest punct de vedere, pigmenii carotenoizi sunt mai stabili, comparativ cu pigmenii clorofilieni. Saponificarea reprezint procesul de descompunere a moleculelor de clorofil n

prezena bazelor, cu formare de acid clorofilinic, fitol i alcool metilic. n prezena acizilor minerali, magneziul din molecula de clorofil este nlocuit cu

hidrogenul, rezultnd feofitina de culoare brun. Carotenii pot absorbi radiaiile luminoase din zona albastr a spectrului (400-600 nm) i energia absorbit o pot transfera pigmenilor clorofilieni. n acelai timp au i rol n fotoprotecie, n absena carotenilor plantele sufer leziuni determinate de procesul de fotooxidare. Biosinteza pigmenilor asimilatori se realizeaz n cicluri biochimice diferite, funcie de compoziia lor chimic. Pigmenii clorofilieni se biosintetizeaz n cloroplaste, n ciclul acidului aminolevulinic. Pn nu de mult s-a considerat c prin condensarea aminoacidului glicin cu succinil CoA (produs intermediar al ciclului Krebs), n prezena enzimei acid 5aminolevulinic sintaz, se formeaz acidul -aminolevulinic. n prezent, s-a constatat c acidul glutamic este activat prin legarea de ARMt, rezultnd glutamil-ARNt, care se reduce la glutamat 1-semialdehid. n prezena glutamatsemialdehid aminotransferaz, din acest compus se formeaz acidul 5-aminolevulinic. Dou molecule de acid -aminolevulinic formeaz o molecul de porfobilinogen, iar patru molecule de porfobilinogen dau natere nucleului tetrapirolic al uroporfirinogenului. Prin legarea magneziului de nucleul tetrapirolic se formeaz Mg-porfirina, care se esterific cu fitolul, formnd clorofila a. Clorofila sufer un proces continuu de biosintez i biodegradare. Ca urmare a desfurrii acestor procese, clorofila se renoiete permanent, ntr-un ritm de 40 % pe parcursul a 2..3 zile. Pigmenii carotenoizi se biosintetizeaz n cloroplaste i cromoplaste, prin ciclul mevalonat, din acetil CoA rezultat din biodegradarea glucidelor i lipidelor. Procesul de biosintez cuprinde numeroi compui intermediari, dintre care cei mai importani sunt: mevalonatul, izopentil pirofosfatul, geranil pirofosfatul, fitoenul, licopenul i carotenul.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

92

Biochimie horticol

8.3. Substane flavonoide Flavonoidele reprezint o clas de substane fenolice care confer culoarea caracteristic la numeroase specii de flori i fructe. n mod frecvent, aceti pigmeni se gsesc n plante sub form glicozidic, n care una sau mai multe grupri hidroxilice ale fenolilor sunt combinate cu glucide reductoare. Flavonoidele particip la procese de oxido-reducere cu rol de vitamina P. Pratt (1992) a constatat c flavonoidele (flavonele, flavonolii, izoflavonele, i flavanonele) sunt cele mai importante substane antioxidante. Antocianidinele dau culoarea roie sau violet fructelor i unor legume (varz roie) reprezint din punct de vedere chimic glicozide ale antocianidelor. Principalele clase de pigmeni flavonoizi Clasa de pigmeni flavonoizi 1 Antocianidine
OH

Formula

Pigmenii

2
R O OH

OH OH

R1

Flavone
O HO

R OH R1 OH O
R1 HO
O R

3 Pelargonidina R=R1=H; Cianidina R=OH, R1=H; Delfinidina R=R1=OH; Peonoidina R=OCH3, R1=H; Malvidina R=R1=OCH3; Petunidina R=OH, R1=OCH3. Apigenina R=R1=H; Luteolina R=OH, R1=H, Tricina R=R1=OCH3.

Flavanone

Pinocembrina R=R1=H; Naringenina R=OH; R1=H; Eriodictiolul R=R1=OH; Hesperetina: R=OCH3, R1=OH. Campferol R=R1=H; Quercetin R=OH, R1=H, Izoramnetin R=OCH3, R1=H; Mircetin R=R1=OH. Genistein R=OH

OH

Flavonoli
O HO

R OH R1 OH OH O

Izoflavone

HO

O R OH O
R O R1 OH OH OH R2

Flavan-3,4-diol
HO

Leucocianidin R=R1=OH Leucodelfinidin R=R1=R2=OH

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

93

Biochimie horticol

Cea mai rspndit antocianid din fructe este cianidina n care componenta glucidic este D-glucoza, D-galactoza, L-ramnoza, rutinoza. Grupate dup natura agliconului, cele mai importante glicozide antocianice identificate n legume i fructe sunt: - Cianidin-3-glucozid n ciree, cpuni, struguri, coacze, zmeura, agrie, prune, piersici, portocale; - Delfinidin-3-glucozid n struguri, portocale, coacze; - Pelargonidin-3-galactozid, n cpuni, fragi; - Peonidin-3-glucozid sau oxicocianina, n ciree, struguri, prune; - Petunidin-3-glucozid, n struguri; - Malvidin-3-glucozid sau oenina, n struguri; Pigmenii antocianici sunt localizai n sucul vacuolar al esuturilor vegetale i n funcie de pH pot forma sruri de flaviliu, de culoare roie (pH=3), chinone, de culoare violet (pH=8,5) sau sruri complexe ale chinonelor de culoare albastr (pH=11). Un al doilea factor important n formarea culorii l reprezint structura antocianidinelor. Astfel, odat cu creterea gruprilor hidroxilice are loc nchiderea culorii albastre, n timp ce substituirea cu grupri metoxi are drept consecin intensificarea culorii roii. Culoarea pigmenilor antocianici este influenat i de efectul de copigmentare, adic de prezena altor pigmeni nsoitori sau chiar a unor substane incolore. Antocianidinele i antocianinele sunt substane antioxidante i au efect antiinflamator. Flavonele cele mai rspndite sunt apigenina i luteolina, precum i derivaii acestora. Aceste substane au aciune: antibacterian, anti HIV, hipotensiv, vasodilatatoare, antiinflamatoare, antiviral, antimetastatic, antimutagen, antioxidant, antimelanomic, antispasmodic, antitumoral, cancer preventiv i citotoxic. Flavonolignanii rezult din reacie de cuplare oxidativ dintre un compus flavonoid (taxifolin) i unul fenilpropanoid (ex. alcool coniferilic). Silimarina este un flavonolignan izolat din fructele de Sylibum marianum n concentraie de 0,7 %.

Aciunea acestei substane este foarte variat. Astfel se menioneaz faptul c poate s controleze alergiile, amelioreaz boala Alzheimer, are efect hepatoprotector, anticarcinogen,

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

94

Biochimie horticol

antidepresant, antioxidant, antiinflamator, i se utilizeaz pentru tratarea cancerului de piele i a bolilor de ficat. Flavanonele se gsesc n produsele horticole mai ales sub form de glicozide, dintre care se pot meniona: Naringina prezent n grapefruit, portocale, epicarpul bacelor de struguri etc. Se formeaz cu participarea ramnozei, glucozei i naringeninei. Glicozida contribuie la formarea gustului amar pronunat al citricelor. Aceast substan are efect: antibacterian, anticancerigen, antihepatotoxic,

antimutagen, antiHIV, antiinflamator, antioxidant, antiviral, cancer preventiv i pesticid. Hesperetina sau hesperetinrutinoza, este prezent n citrice i are aciune antibacterian, antiviral, pesticid, cancer preventiv i hepatoprotectoare. Flavonolii i izoflavonele formeaz legturi acetalice cu D-glucoza, L-ramnoza, Darabinoza, D-xiloza, acidul D-glucuronic etc., de obicei n poziia C7 i foarte rar n poziia C5, n timp ce flavonolii particip cu -OH din poziia C3. - Campferol-3- glucozid a fost identificat n struguri, cpuni, fragi etc. Campferolul are efect antibacterian, antioxidant, antialergic, antiinflamator, antimutagen i hipotensiv. - Quercitin-3-glucozid a fost identificat n mere, caise, coacze negre, struguri, pere, prune, cpuni; Quercetina are efect antialergic, antiasmatic, antibacterian, antidiabetic,

antiinflamator, antigripal i antitumoral. - Miricetin-3-glucozid i glucoronida sunt prezente n struguri; - Genisteina-7-glucozid sau genistina se gsete n struguri. Biosinteza substanelor flavonoide includ sinteza acidului shikimic din care se sintetizeaz fenilalanina i, n final, acidul cinamic i acidul cumaric. n general, biosinteza pigmenilor antocianici este n strns corelaie cu metabolismul glucidic i protidic. Astfel, n cazul n care condiiile de cretere i maturare a fructelor sunt favorabile pentru sinteza glucidelor, concentraia acidului shikimic crete, iar acesta este intens convertit n pigmeni antocianici. n cazul unor condiii nefavorabile pentru aceste biosinteze ca de exemplu, ngrarea excesiv a solului cu azot, acidul shikimic este utilizat n cea mai mare parte la sinteza proteinelor, n timp ce formarea pigmenilor antocianici se petrece ntr-un ritm foarte lent. Din aceste procese biosintetice se formeaz i leucoantociani, ce pot fi transformai ulterior n antociani. Sinteza este localizat n citoplasm pentru monomeri, dimeri i trimeri i n vezicule, denumite impropriu antocianoplaste, pentru produii finali. Antocianii formai sunt

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

95

Biochimie horticol

transportai din aceste vezicule n vacuol, printr-un proces de pinocitoz, iar membranele veziculelor pot fi ncorporate n tonoplast. 8.4. Substane fenolice Compui cu rspndire larg n legume i fructe, substanele fenolice au fost considerate ca produse secundare i aparent fr un rol vital. Recent s-a evideniat rolul lor n rezistena pasiv a plantelor fa de atacul microorganismelor parazite, iau parte la realizarea gustului i aromei legumelor i fructelor, contribuie la realizarea culorii caracteristice legumelor i fructelor, prezint activitate antioxidant, capacitatea de a reduce cantitatea speciilor active de oxigen, capacitatea de a inhiba formarea nitrozaminelor i de a modula activitatea unor enzime i au efect anticancerigen. Derivai ai acidului cinamic Acidul cinamic este o substan care n cantiti mici se gsete aproape n toate legumele i fructele. Reprezint un compus de baz n formarea a numeroi derivai fenolici: acizii ferulic, cafeic i p-cumaric sau esteri: acidul clorogenic [(HO)2-C6H3-CH=CH-COOHC6H7(OH3)-COOH), o depsida care rezult din esterificarea acidului cafeic cu acidul chinic, prezent n cartofi, pere, prune, piersici, cirese i afine; acidul p-cumaril chinic i esterul acidului hidroxicinamic cu acidul chinic, a carui concentraie n fructe variaz ntre 75 mg/100 g produs proaspt la piersici i 250 mg/100 g produs proaspt la ciree Derivaii acidului cinamic formeaz cu glucidele glicozide, substane identificate n legume i fructe, ca de exemplu, cafeic-glucozid i sakuchirina.
OCH3 O O glucoz HO H C CH COOH OH OH OH O CO CH CH OH CH2 O
CO CH

CH

OH

Acid cafeic-glucozid

Sakuchirin

Derivai ai acidului benzoic Dintre derivaii hidroxilai ai acidului benzoic n legume i fructe au fost identificai acizii: hidroxibenzoic, gentistic, protocatechic, vinilic i galic. Acidul galic ia parte la formarea galotaninurilor, iar acidul benzoic la formarea unor glicozizi cu sulf (glucobrasicina).
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

96

Biochimie horticol

Taninuri Aceste substane reprezint complexe de metabolii secundari solubili n ap, cu greutatea molecular de 500 3.000 Da. Taninurile contribuie la realizarea gustului astringent al produselor horticole, iar din punct de vedere chimic, sunt esteri ai acidului galic sau ai altor acizi fenolici cu glucidele, sau produi de condensare ai 3-hidroxiflavonelor (catechine). Taninurile pot fi: - hidrolizabile, n care caz se descompun prin hidroliz ntr-o glucid i acid fenolic - condensate (derivai ai catechinei) cnd nu conin glucide i pot fi descompuse numai prin topire alcalin. Taninurile hidrolizabile sunt n mare lor majoritate glicozide, n care componenta glucidic o reprezint D-glucoza, iar agliconul poate fi:
OH OH

Acid galic

HO COOH HO OH OH COO COOH OH O OC OH CO O OH

Acid m-galoil galic

HO HO

Acid elagic

HO

n general, coninutul total de taninuri din legume i fructe variaz mult n funcie de

specie sau organ. La struguri, cea mai mare cantitate de taninuri se gsete n semine (0,36%) i n epicarp (0,19%), n timp ce proporia acestor compui din suc i mezocarp este relativ mic (0,02%) i respectiv 0,004%.

Autoevaluare 1. Precizai principalii pigmeni vegetali. 2. Pigmenii carotenoizi structur i rol. 3. Pigmenii clorofilieni structur i rol. 4. Proprietile pigmenilor asimilatori. 5. Substanele flavonoide structur i rol. 6. Substane fenolice structur i roluri.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

97

Biochimie horticol

Bibliografie selectiv 1. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 5. Burzo, I., Dobrescu, A., Bdulescu, L., Mihescu, D., Blan, D. - Fiziologia plantelor, Volumul VIII - Substanele utile din plante (2005) Ed. Elisavaros Bucureti 6. Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti 7. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 8. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 9. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti. 10. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

98

Biochimie horticol

CAPITOLUL 9. METABOLISMUL PLANTELOR Cuvinte cheie: metabolism, anabolism, catabolism, compui macroergici, enzime, metabolismul glucidelor, lipidelor, proteinelor, metabolism energetic, ciclul Krebs Rezumat Metabolismul reprezint totalitatea reaciilor de schimb de substane, energie i informaie dintre celula vegetal i mediul nconjurtor, precum i ansamblul transformrilor care au loc n celula vie. Metabolismul are dou laturi opuse: anabolismul i catabolismul. Anabolismul reprezint totalitatea reaciilor de biosintez a substanelor proprii organismului care se realizeaz cu consum de energie, n timp ce catabolismul include totalitatea reaciilor de biodegradare a substanelor de rezerv, cu producere de energie. Metabolismul se prezint sub dou aspecte: metabolismul intermediar (al substanelor) i metabolismul energetic. Prin metabolism energetic se nelege schimbul de energie care are loc ntre organism i mediul nconjurtor, precum i transformrile energetice care au loc n metabolismul substanelor. Metabolismul intermediar (al substanelor) cuprinde totalitatea reaciilor de biosintez i biodegradare a substanelor organice, n care se formeaz molecule proprii organismului respectiv sau compuii macromoleculari sunt transformai n molecule simple. Aceste reacii se realizeaz n cicluri biochimice catalizate de enzime. 9.1. Noiuni de metabolism Metabolismul reprezint totalitatea reaciilor de schimb de substane, energie i informaie dintre celula vegetal i mediul nconjurtor, precum i ansamblul transformrilor care au loc n celula vie. Prin urmare celulele reprezint un sistem deschis care se afl ntr-un continuu schimb de energie i substane cu mediul ambiant i care tinde ctre un echilibru termodinamic, fr a ajunge ns la el. Metabolismul are dou laturi opuse: anabolismul i catabolismul. Anabolismul reprezint totalitatea reaciilor de biosintez a substanelor proprii organismului care se realizeaz cu consum de energie, n timp ce catabolismul include totalitatea reaciilor de biodegradare a substanelor de rezerv, cu producere de energie. Schimbul de substane cu mediul ambiant este nsoit ntotdeauna de schimbul de energie i informaii, astfel c raportul dintre cele dou laturi ale metabolismului se modific n decursul ontogenezei. Metabolismul se prezint sub dou aspecte: metabolismul intermediar (al substanelor) i metabolismul energetic. Prin metabolism energetic se nelege schimbul de energie care are loc ntre organism i mediul nconjurtor, precum i transformrile energetice care au loc n metabolismul substanelor. Aceste transformri se realizeaz prin intermediul unor substane chimice bogate n energie, numite compui macroergici, care au capacitatea de a stoca energia biochimic rezultat din procesele de fotofosforilare (n faza de lumin a fotosintezei) sau de fosforilare oxidativ (n respiraie) i de a furniza energie pentru procesele de biosintez (anabolism).
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

99

Biochimie horticol

Metabolismul energetic se realizeaz ca urmare a metabolismului substanelor organice prin care se introduce n organism energie sub forma de energie biochimic rezultat n etapa de lumin a fotosintezei sau din biodegradarea substanelor organice de rezerv, n funcie de etapa de dezvoltarea a acestora. Dup specific, transformrile bioenergetice din plante se pot clasifica astfel: a) transformarea energiei solare n energie biochimic (n procesul de fotosintez) i ulterior n energie chimic stocat n glucide, lipide, proteine; n faza de lumin, care se desfoar n tilacoidele cloroplastelor, se utilizeaz energia din radiaiile luminoase pentru fotoliza apei; electronii i protonii rezultai sunt utilizai pentru sinteza unei substane puternic reductoare (NADPH+H+), iar energia produs prin transportul protonilor prin pompa de protoni este folosit pentru biosinteza ATP-ului, care acumuleaz energia biochimic n legturile macroergice. n aceast faz se formeaz i O2 care se degaj. Procesul de fotosintez se realizeaz cu participarea a numeroase substane, care se gsesc n membranele tilacoidale i granale formnd structuri specifice: fotosistemul I, fotosistemul II, complexul citocrom b6-f i complexul ATP-sintetaza (Burzo .a., 2004). Pigmenii fotoreceptori din tilacoidele cloroplastelor i ale granei, sunt grupai formnd cele dou fotosisteme, fiecare fiind alctuit din antene fotoreceptoare i centre de reacie. Antenele fotoreceptoare sunt alctuite din molecule de clorofil a i b, din xantofil i carotin, care au rolul de a recepiona energia fotonilor din radiaiile luminoase i de a o transmite spre centrele de reacie. Randamentul de transmitere a energiei este de 95 % n cazul clorofilei a i b i de numai 40-45% n cazul pigmenilor carotenoizi. Antenele fotoreceptoare sunt n legtur cu centrele de reacie care sunt alctuite din moleculele de clorofil a700 (P700) pentru fotosistemul I i a680 (P680) pentru fotosistemul II, acesta fiind n legtur cu complexul productor de oxigen. n alctuirea centrelor de reacie mai intr i substane transportoare de electroni. ntre cele dou fotosisteme se gsete complexul citocrom b6-f. n complexul ATP-sintetaz are loc sinteza ATP-ului pe baza transportului transmembranar al protonilor, conform gradientului de concentraie, din lumenul tilacoidei n strom. Transportul electronilor ntre primele trei complexe menionate se realizeaz cu participarea unor substane transportoare de electroni i conduce la sinteza NADPH+H+ la nivelul ferredoxinei asociat fotosistemului I. Transportul electronilor ntre fotosistemul II i complexul citocrom b6 citocrom f se realizeaz eu ajutorul plastochinonei (PQ) care se
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

100

Biochimie horticol

deplaseaz liber n stratul de galactolipide, iar legtura dintre complexul citocrom b6-citocrom f i fotosistemul I este realizat cu participarea plastocianinei (PC) care se deplaseaz n lungul lumenului tilacoidei. Mecanismul fazei de lumin a fotosintezei Energia cuantelor de lumin este captat de pigmenii antenelor fotoreceptoare ale celor dou fotosisteme. n urma acestui proces pigmenii intr ntr-o faz de excitaie care se caracterizeaz prin trecerea unui electron de pe o orbit interioar pe o orbit exterioar. Durata fazei de excitaie este foarte scurt, dup care pigmenii revin la stadiul iniial prin transferul energiei de excitaie unei molecule de pigment nvecinate sau prin eliminarea ei sub form de cldur sau fluorescen.

Transferul energiei de excitaie de la o molecul de pigment la alta, pn la centrele de reacie ale celor dou fotosisteme, se realizeaz prin rezonan. Moleculele de clorofil din centrele de reacie primind energia de la antenele fotoreceptoare, intr n faza de excitaie i expulzeaz un electron (e-). Clorofila a din centrul de reacie a fotosistemului II primete electroni de la manganul din complexul productor de oxigen. Prin cedarea electronilor manganul se oxideaz:

Ionii de mangan ajuni la un nivel ridicat de oxidare determin descompunerea moleculelor de ap, care elibereaz 2 electroni, 2 protoni i O2 conform reaciilor de mai jos:

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

101

Biochimie horticol

Electronii rezultai din fotoliza apei sunt preluai de atomii de mangan, care se reduc i care i cedeaz ulterior clorofilei din centrul de reacie a fotosistemului II aflat n stare de excitaie dup expulzarea electronului ce i revine la starea iniial. Protonii se acumuleaz n lumenul tilacoidelor, iar oxigenul se degaj n mediul ambiant. Electronii expulzai de moleculele de clorofil a680 din centrul de reacie al fotosistemului II sunt transportai de plastochinone la complexul citocrom b6-f, apoi de plastocianine la fotosistemul I, fiind cedai moleculei excitate de clorofil a700 din centrul su de reacie, care i revine la starea iniial. Electronii expulzai de clorofil a700 din centrul de reacie al fotosistemului sunt transportai la ferredoxin care i cedeaz NADP-ului care n prezena protonilor formeaz o substan puternic reductoare NADPH + H+. Fotofosforilarea reprezint procesul prin care energia din radiaiile luminoase este transformat n energie biochimic care se acumuleaz n legturile macroergice ale ATPului. Fotoliza apei genereaz un aport permanent de protoni, ce se acumuleaz n lumenul tilacoidelor impermeabile pentru protoni, iar concentraia acestora ajunge s depeasc de 1000 de ori pe cea din strom. Diferena de concentraie a protonilor din lumenul tilacoidelor i stroma cloroplastului genereaz un flux de protoni prin complexul ATP-sintetizat, iar energia rezultat din transportul protonilor prin acest complex este utilizat de enzima ATP-sintetizat pentru fosforilarea ADP-ului cu fosforul anorganic, rezultnd ATP-ul. Formarea ATP-ului ca urmare a transportului protonilor prin complexul ATP-sintetaz constituie fosforilarea aciclic. n acest caz, fiecrui electron transportat prin lanul transportor de electroni i corespunde cte un proton transportat prin complexul ATPsintetaz, rezultnd cte un mol de NADPH + H+ i respectiv cte unul de ATP. Cercetrile au dovedit ns c n faza de lumin a fotosintezei se formeaz mai mult ATP comparativ cu NADPH + H+. Surplusul de ATP se formeaz n procesul de fosforilare ciclic, n care o parte din protonii transportai prin complexul ATP-sintetaz nu sunt utilizai pentru reducerea NADP-ului, ci efectueaz un nou circuit prin tilacoide, fiind transportai de plastochinonele mobile. n final trec din nou prin complexul ATP-sintetaz genernd ATP fr a avea loc fotoliza apei.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

102

Biochimie horticol

b) transformarea energiei chimice din moleculele organice n energie biochimic (n special ATP) n timpul respiraiei aerobe. Din oxidarea i dehidrogenarea acizilor piruvic, izocitric, -cetoglutaric, succinic i malic n Ciclul Krebs rezult substane puternic reductoare NADH+H+ i FADH2 care elibereaz electronii i a protonii la nivelul membranei mitocondriale interne n cea de-a doua etap a respiraiei aerobe. Transportul electronilor prin membrana mitocondrial se realizeaz cu participarea unui lan de substane oxido-reductoare care primind electroni se reduc, pentru ca apoi s l cedeze, oxidndu-se. Aceste substane formeaz 4 complexe: - complexul I este o NADH dehidrogenaz care oxideaz NADH+H+-format n ciclul Krebs i transfer electronii rezultai la ubichinon (UQ). Acesta are greutatea molecular de 600 kDa i este alctuit din FMN, 4 proteine cu fier i sulf i ubichinon. - complexul II conine succinat dehidrogenaza care oxideaz fumaratul, transfernd electronii rezultai moleculelor de ubichinon (UQ). Are greutatea molecular de 125 kDa i conine FAD, 2 proteine cu fier i sulf, citocrom b i ubichinon. Ubichinona primete separat electronii de la complexul I i de la complexul II i poate s-i cedeze complexului IV sau unei flavoproteine terminale care formeaz apa de respiraie, fr formarea de ATP (ciclul respirator alternativ).

- complexul III oxideaz ubichinona i transfer electronii rezultai citocromului c, care i cedeaz apoi complexului IV. Acest complex III (sau citocrom b citocrom c1) are greutatea

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

103

Biochimie horticol

molecular de 500 kDa i conine citocrom b560, citocrom b566, citocrom c1, o protein cu fier i sulf, 5 polipeptide i ubichinon. - complexul IV este citocrom c oxidaza, cu greutatea molecular de 125 kDa i este alctuit din citocrom a, citocrom a3 i din doi compui care conin cupru. Acesta este complexul terminal de transfer al electronilor, care cedeaz electronii oxigenului pe care l activeaz i care mpreun cu hidrogenul formeaz apa de respiraie (H2O). Protonii rezultai din dehidrogenarea substratului sunt transportai de complexele I, II i III din matricea mitocondrial n spaiul intermembranal, unde se acumuleaz. Acumularea protonilor n spaiul dintre cele dou membrane, genereaz un gradient pH, respectiv o for proton-motrice care determin transportul acestora prin pompele de protoni n matricea mitocondrial. Energia rezultat din acest proces este utilizat pentru sinteza ATP-ului din ADP i fosfor anorganic (Pi), n prezena ATP-sintazei. Acest proces este cunoscut sub denumirea de fosforilare oxidativ. Din biodegradarea celor 2 moli de acid piruvic rezultai dintr-o molecul de glucoz, rezult 8 moli de NADH+H+ care corespund cu 24 moli de ATP, 2 moli de FADH2 ce corespund cu 4 moli de ATP i 2 moli de GTP ce corespund cu 2 moli de ATP. Bilanul energetic total al acestui proces este de 30 moli ATP, care nmagazineaz 900 Kj energie biochimic. c) transformarea energiei biochimice n alte forme de energie (caloric, transport activ prin membrane, activarea enzimelor etc.) Metabolismul intermediar (al substanelor) cuprinde totalitatea reaciilor de biosintez i biodegradare a substanelor organice, n care se formeaz molecule proprii organismului respectiv sau compuii macromoleculari sunt transformai n molecule simple. Aceste reacii se realizeaz n cicluri biochimice catalizate de enzime. 9.2. Enzimele Enzimele sunt biocatalizatori ai reaciilor biochimice care au loc n plante. Din punct de vedere biochimic, enzimele sunt heteroproteide, alctuite dintr-o grupare proteic (apoenzima) care determin specificitatea de aciune i un cofactor enzimatic alctuit dintr-o grupare prostetic, ioni sau coenzime (vitamine, ex.B1, nucleotide, citocromi etc.). Apoenzima este macromolecula proteic a enzimei, sensibil la temperaturi ridicate, cu activitate catalitic. n structura este se afl situsul catalitic (zona distinct n care se leag specific substratul/substratele de reacie) i situsul allosteric (n cazul enzimelor reglatoare, n care se leag efectorul allosteric inhibitor sau activator).
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

104

Biochimie horticol

Situsul catalitic reprezint acea regiune intern constituit dintr-un grup de aminoacizi care difer prin funcia lor de ceilali aminoacizi componeni ai apoenzimei, la care se leag reversibil

substratul/substratele (S) pe care enzima l/i transform n produs/produi de reacie (P). Se caracterizeaz printr-o anume configuraie spaial i printr-o structur specific ce creaz o compatibilitate ntre situs i un anumit substrat ce se va ataa la acest situs catalitic.

E + S [ES] E + P
La enzimele bicomponente situsul catalitic mpreun cu regiunea din molecul la care se ataeaz cofactorul enzimatic formeaz centrul catalitic al enzime. La enzimele monocomponente centrul catalitic este identic cu situsul catalitic.

Enzimele care exercit pe lng funcia catalitic i rol reglator se numesc enzime allosterice. Acestea conin pe lng situsul catalitic un al doilea situs numit allosteric, la care se pot lega efectori allosterici (inhibitori sau activatori) tranziiile conformaii care enzimei posibile moduleaz ntre dou i

(activ

inactiv) prin care se permite sau nu accesul substratului la situsul catalitic.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

105

Biochimie horticol

Cinetica enzimatic studiaz viteza i ordinul reacilor catalizate de enzime, precum i factorii care influeneaz activitatea enzimatic. Viteza de reacie reprezint cantitatea de substrat care se transform n unitatea de timp sau cantitatea de produs care se formeaz n unitatea de timp. Creterea concentraiei substratului determin creterea vitezei de reacie pn la o valoare denumit Vmax (viteza maxim), dup care rmne constant. Constanta Michaelis Km este un

parametru specific fiecrei enzime, care exprim afinitatea enzimei fa de substrat i se calculeaz ca fiind acea concentraie de substrat la care viteza de desfurare a unei reacii enzimatice este jumtate din viteza maxim. Viteza reaciei enzimatice poate fi

influenat de concentraia enzimei, temperatur, pH, diferii efectori enzimatici (activatori sau inhibitori). n funcie de aciunea lor, enzimele sunt clasificate n: oxidoreductaze (catalizeaz reaciile de oxido-reducere), transferaze (catalizeaz transferul unei grupri funcionale de la un substrat donor la un substrat acceptor), hidrolaze (catalizeaz hidroliza unor legturi chimice), liaze (catalizeaz reacii de scindare a unei substane prin alte procedee dect hidroliza sau oxidare), izomeraze (catalizeaz reacii de izomerizare a unor molecule simple), ligaze (catalizeaz reaciile de legare a dou molecule prin legturi covalente, cu consum de ATP). Enzimele catalizeaz reaciile biochimice din celule, caracteristice pentru procesele anabolice sau catabolice. Aceste reacii se desfoar n diferite compartimente celulare i ca urmare se poate vorbi de o distribuie a enzimelor n celule. Astfel, enzimele implicate n procesul de fotosintez se gsesc n cloroplaste, cele ale ciclului Krebs n mitocondrii, enzimele ciclului glicolitic n citoplasm etc. Numrul enzimelor identificate n plante este mare, dar se consider c unele dintre ele au rol cheie adic activitatea enzimei respective poate fi corelat cu intensitatea procesului fiziologic n care este implicat. Dintre aceste enzime pot fi menionate urmtoarele: -Ribulozo-1,5-difosfat carboxilaza-oxigenaza (RUBISCO), care prin activitatea

carboxilazic catalizeaz procesul de reducere fotosintetic a dioxidului de carbon, iar prin activitatea oxigenazic, intervine n procesul de fotorespiraie. Aceast enzim este alctuit

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

106

Biochimie horticol

din 8 subuniti codificate de genele din cloroplast i din 8 subuniti codificate de genele din nucleu. -Fosfofructokinaza catalizeaz reacia de fosforilare a fructozei, care constituie o etap n procesul de biodegradare a hexozelor n ciclul glicolitic. Activitatea acestei enzime poate constitui un indicator pentru intensitatea acestui proces. -Fenilalaninamoniuliaza (PAL), reprezint enzima cheie a metabolismului fenilpropanoizilor n care se biosintetizeaz fenolii, antocianii, ligninele etc. Aceast enzim catalizeaz reacia de dezaminare a fenilalaninei i formarea acidului cinamic, constituind un indicator pentru ritmul de desfurare al acestui proces. -Fosfolipaza reprezint principala enzim implicat n biodegradarea fosfolipidelor din membranele plasmatice, iar lipoxigenaza catalizeaz biodegradarea acizilor grai rezultai din primul proces. -Enzimele pectice: poligalacturonaza, protopectinaza i pectinmetilesteraza

constituie enzimele cheie n procesul de biodegradare a substanelor pectice, proces ce se coreleaz cu diminuarea fermitii esuturilor fructelor. Pectinmetilesteraza catalizeaz demetilarea pectinelor ceea ce favorizeaz aciunea poligalacturonazelor, care catalizeaz reacia de scindare a acestor substane cu formarea de acizi galacturonici. Rhodes (1980) a constatat existena a dou poligalacturonaze: o exogalacturonaz care desprinde acizii galacturonici de la sfritul lanului de poliuronide i o endogalacturonaz, care rupe lanul n mod randomizat. -Clorofilazele catalizeaz reacia de descompunere a clorofilei, reacie ce poate fi corelat cu modificarea culorii. -Polifenoloxidazele catalizeaz reacia de oxidare a polifenolilor, determinnd brunificarea esuturilor. Perioada n care se manifest activitatea maxim a fenolazelor difer cu specia. Astfel n tomate, activitatea maxim a fenolazelor s-a nregistrat dup 47 zile de la cderea florilor (Frend i Rhodes, 1981), n cazul merelor n luna mai iar n struguri s-a identificat n primele etape ale formrii fructelor. -Ribonucleaza catalizeaz reacia de biodegradare a acizilor nucleici, fapt ce conduce la diminuarea procesului de biosintez a proteinelor i la apariia simptomelor de senescen. -- i - Amilaza catalizeaz reaciile de biodegradare a amidonului de rezerv. -Ascorbatoxidaza este o enzim implicat n modificarea potenialului oxidoreductor celular, prin transformarea acidului ascorbic n acid dehidroascorbic. Determinrile efectuate de Burzo i colab. (1987), au evideniat c activitatea maxim a acestei enzime se nregistreaz n primele etape ale creterii frunzelor i mugurilor.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

107

Biochimie horticol

-Superoxiddismutaza (SOD) catalizeaz transformarea radicalului superoxid (O2-), la peroxid de hidrogen i oxigen, ceea ce contribuie la diminuarea proceselor de oxidare din esuturi. -Catalaza reprezint una din enzimele care catalizeaz descompunerea apei oxigenate, care are un efect toxic asupra esuturilor. Acelai rol l are i peroxidaza care catalizeaz reacia dintre oxigenul peroxidic i un substrat acceptor de oxigen peroxidic sau donor de hidrogen. -Aminociclopropancarboxilaza (ACC-sintaza), reprezint enzima cheie pentru ciclul de biosintez a etilenei. Aceast enzim catalizeaz transformarea S-adenozil metioninei, n acid 1-aminociclopropan-1-carboxilic. Blocarea activitii acestei enzime prin tratamente cu aminoetoxivinilglicin, mpiedic formarea etilenei i n consecin inhib procesul de maturare al fructelor. -Malatdehidrogenaza i piruvatdehidrogenaza sunt considerate ca enzime a cror activitate se coreleaz cu intensitatea ciclului Krebs i respectiv cu maximum climacteric respirator (Hulme, 1970). Pe parcursul procesului de cretere i dezvoltare a plantelor, se constat modificri specifice a activitii enzimatice. Se consider c aceste modificri sunt datorate biosintezei de novo a enzimelor, creterii activitii enzimelor preexistente sau a biodegradrii inhibitorilor enzimatici existeni n celule. Activitatea enzimatic este influenat de asemenea i de prezena complexului calmodulin-calciu. n general transformrile biochimice care au loc n celule se desfoar n cicluri biochimice. Din aceast cauz aciunea enzimelor se desfoar ntr-o ordine riguroas, iar compusul chimic rezultat din prima reacie este utilizat n cea de a doua reacie, care este catalizat de o enzim corespunztoare. 9.3. Metabolismul glucidic 9.3.1 Biosinteza glucidelor Glucidele sunt primii compui organici sintetizai de ctre plante verzi autotrofe pornind de la substane anorganice CO2, H2O i substane minerale - n timpul fazei enzimatice a procesului de fotosintez. Aceast faz, denumit i ciclul Calvin, se desfoar n stroma cloroplastului, utilizeaz cele dou substane bogate n energie produse n faza de lumin (ATP i NADPH, H+) pentru fixarea CO2 de ctre enzima-cheie RUBISCO i ulterior pentru biosinteza triozelor, primii compui organici biosintetizai.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

108

Biochimie horticol

Ciclul Calvin se desfoar n stroma cloroplastelor, n trei etape distincte, catalizate de

enzime specifice, prima dintre ele fiind ribulozo-1,5-difosfat-carboxilaza/oxidaza sau RUBISCO. Etapele ciclului Calvin: - Fixarea dioxidului de carbon de ctre ribulozo-1,5-difosfat, n prezena enzimei ribulozo-1,5-difosfat carboxilaz/oxidaz i formarea unui compus instabil cu 6 atomi de carbon, care se scindeaz n dou molecule de acid 3-fosfogliceric. - Reducerea acidului 3-fosfogliceric, produsul primar al fotosintezei, pn la aldehida 3-fosfogliceric, n prezena ATP-ului i NADPH+H+-ului i a enzimelor glicerofosfat-kinaza i fosfoglicerilaldehid-3-dehidrogenaza. Printr-o succesiune de reacii sunt fixate 3 molecule de CO2 la 3 molecule de ribulozo-1,5difosfat formndu-se 6 molecule de aldehid 3-fosfogliceric.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

109

Biochimie horticol

- Regenerarea ribulozo-1,5-difosfatului se realizeaz cu participarea a 5 molecule de aldehid 3-fosfogliceric, ctigul net fiind de o molecul de aldehid 3-fosfogliceric, o trioz, prima substan organic biosintetizat din substane anorganice de ctre plentele fotoautotrofe. Aceast molecul de aldehid 3-fosfogliceric este utilizat n procesul de biosintez a hexozelor, care se realizeaz pe urmtoarea cale: aldehid-3-fosfogliceric dioxiacetonfosfat aldehid-3-fosfogliceric + dioxiacetonfosfat fructozo-1,6-difosfat fructozo-1,6-difosfat glucozo-1,6-difosfat glucozo-1-fosfat glucoz Aceast succesiune de reacii este catalizat de enzimele: trizofosfat izomeraz, aldolaz i kinaz. Procesul de fotosintez este puternic endergonic, pentru formarea unei molecule de hexoz fiind necesare 8 molecule de ATP i 12 (NADPH + H+) conform ecuaiei: 6CO2 + 8 ATP + 12 (NADPH + H+) Fructozo-1,6-fosfat + 18 ADP + 12NADPH+ Pentru fiecare molecul de glucoz format se nmagazineaz 675 kcal. Moleculele de aldehid fosfogliceric pot traversa membranele cloroplastului i ajungnd n citoplasm formeaz hexozele (cu 6 atomi de carbon). Prin condensarea a dou molecule de aldehid fosfogliceric rezult glucozo-1,6-difosfatul, iar prin condensarea unei molecule de aldehid fosfogliceric cu una de dioxiacetonfosfat, rezult fructozo-1,6difosfatul. Dintr-o molecul de glucoz i una de fructoz rezult zaharoza, care se depoziteaz temporar n vacuole la plantele zaharofile. Interconversia monoglucidelor i a derivailor lor. Plecnd de la hexozele fotosintetizate n etapa anterioar, cea mai important cale de formare a monoglucidelor i a derivailor lor este interconversia prin intermediul esterilor. Astfel, glucozo-1-fosfatul formeaz esteri cu acizii nucleozid-5-difosforici (UDP,
D-Glucoza ATP D-Glucozo-6-fosfat Mezoinozitol Acid D-glucuronic D-Glucozo-1-fosfat UDP UDP - l - RAMNOZA UDP-D-glucoza D-Glucuronat-1-fosfat UTP L-Ramnoza UDP-D-galactoza Acid glucuronic Acid UDP-D-glucuronic UDP-D-xiloza UDP-L-arabinoza Acid L-gulonic L-Arabinoza Mezoinozitol - 1-fosfat

D-Galactoza

Acid glucuronic

Acid UDP-D-glucuronic

D-Xiloza

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

110

Biochimie horticol

CDP, GDP), prin intermediul crora sunt sintetizate hexoze, pentoze, ciclitoli, acizi hexuronici, oligoglucide etc. De exemplu, din uridindifosfoglucoza prin epimerizare i reducere se formeaz UDP-L-rhamnoza, prin izomerizare, UDP-D-galactoza, prin oxidare, acid UDP-glucuronic, avnd loc urmtoarele reacii: Interconversia monoglucidelor i a derivailor lor are loc sub aciunea enzimelor. Astfel, n fructele de citrice, flavoproteinele catalizeaz oxidarea D-glucozei, D-galactozei, Dxilozei, celobiozei, lactozei i maltozei pn la acizii aldonici corespunztori; izomerazele prezente n legume i fructe sunt rspunztoare de convertirea D-xilozei i D-ribozei n Dxilulox i respectiv D-ribuloz, n timp ce D-glicero-L-galactooctuloza i D-eritro-L-glucononuloza din fructele de avocado se formeaz din dihidroxiacetonfosfat i D-xiloz, respectiv D-manoz; n prezena D-glucitol-dehidrogenazei are loc dehidrogenarea fructozei cu formare de sorbitol. Derivaii aminoglucidici, cum este D-glucozamina, se sintetizeaz prin aminarea Dfructozo-6-fosfatului cu glutamin sau asparagin. Esterii fosforici ai glucidelor sunt sintetizai n procesul de fotosintez i se pot transforma sub aciunea fosfoizomerazelor prin izomerizri de tip aldoz - aldoz sau aldoz cetoz. Ciclul acidului glioxilic se desfoar n glioxizomi i reprezint principala cale prin care lipidele din seminele plantelor oleaginoase pot sintetiza glucidele necesare pentru procesul de cretere.

Acetil CoA rezultat din -oxidarea acizilor grai reacioneaz cu acidul oxalacetic, formnd
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

111

Biochimie horticol

acid citric i coenzima A (CoA-SH). Acidul citric este transformat n prezena aconitazei n acid izocitric. n prezena izocitrat liazei, acidul izocitric se rupe ntr-o molecul de acid glioxilic i una de acid succinic. Acidul glioxilic mpreun cu o molecul de acetil CoA formeaz acidul malic, care regenereaz acidul oxalacetic, iniiindu-se astfel un nou ciclu. Acidul succinic poate fi transportat n mitocondrii, unde este metabolizat prin ciclul Krebs pn la acid oxalacetic. Transportat n citoplasm, acidul oxalacetic formeaz acid piruvic, care prin gluconeogenez genereaz glucoz, fructoz sau zaharoz. Biosinteza oligoglucidelor. Zaharoza se formeaz din uridindifosfo-glucoz i fructozo-6-fosfat sau fructoz, conform urmtoarelor scheme de reacii: UDP-glucoza + fructozo-6-fosfat
zaharozofosfatsintetaza fosfataz

UDP-zaharozofosfat

zaharoz + H3PO4 sau UDP-glucoz + fructoz

zaharozosintetaz

zaharoz + H3PO4

Ambele reacii enzimatice sunt reacii de transglicozilare ntre un donor de rest glicozil (UDP-glucoza) i un acceptor de rest glicozil (fructozo-6-fosfat, respectiv fructoza). Zaharoza reprezint principala form de transport a glucidelor n plante, glucoza i fructoza constituie substrat pentru procesul de respiraie i pentru interconversia monoglucidelor, iar compuii intermediari, rezultai din biodegradarea acestora, sunt utilizai pentru biosinteza celorlalte substane organice din plante. Rafinoza se formeaz prin transferul restului D-galactozil din UDP-D-galactoz la zaharoz: UDP-D-galactoz + zaharoz rafinoz + UDP.

Biosinteza poliglucidelor. Din monoglucidele fosforilate se formeaz poliglucidele: amidon, celuloz, substane pectice. Biosinteza amidonului are la baz glucoza care este fosforilat n citoplasm n prezena enzimei ADP-pirofosforilaz. Rezult ADP-glucoza care ptrunde n amiloplaste, unde n prezena enzimei amidonsintetaz sunt polimerizate prin legturi -1,4-glicozidice. Se formeaz astfel lanuri neramificate, alctuite din molecule de glucoz legate -1,4glicozidic, care reprezint moleculele de amiloz . Legturile -1,6-glicozidice se formeaz sub aciunea enzimei Q, rezultnd lanuri lungi alctuite din molecule de glucoz legate -1,4-glicozidic, care au lanuri laterale legate -1,6-glicozidic. Aceste lanuri ramificate reprezint moleculele de amilopectin. Prin depunerea moleculelor de amiloz i amilopectin sub forma unei spirale are loc formarea granulei de amidon.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

112

Biochimie horticol

Amidonul se sintetizeaz i depoziteaz temporar n frunze, unde, dup o prealabil hidroliz n prezena amilazei se scindeaz n moleculele componente ce se transform n zaharoz. Sub aceast form se transloc n fructe i alte organe de depozitare a plantelor, la nivelul crora se depoziteaz sub form de amidon substan de rezerv. Biosinteza celulozei se realizeaz la nivelul pereilor celulari cu ajutorul unui sistem enzimatic n form de rozet situat n plasmalem capabil s sintetizeze celuloza din UDPglucoz. Complexele n form de rozet sunt proteine hexamere, cu diametrul de aproximativ 25 nm, care conin n interior celulozo-sintaze ce formeaz catene individuale de celuloz. La trecerea UDP-glucozei prin aceste complexe enzimatice, are loc legarea -1,4glicozidic a moleculelor de glucoz rezultnd, pe faa extern a plasmalemei, lanuri de glucani (celuloz). Prin deplasarea complexelor n form de rozet n plasmalem, la nivelul peretelui celular se formeaz aceti glucani care dau natere microfibrilelor celulozice. Direcia de deplasare a complexelor n form de rozet este determinat de poziia microtubulilor situai de o parte i de alta a acestor complexe. Biosinteza substanelor pectice are la baza transformarea UDP-D-glucozei n acid glucuronic, care la rndul su se transform n acid galacturonic, precursor al acizilor pectici. n reaciile biochimice care au loc, la nivelul complexului Golgi, rezult acidul pectic

neesterificat. Includerea n lanul acizilor pectici a rhamnozei poate fi explicat prin urmtoarea succesiune de reacii:
UDP-D-glucoza UDP-D-galactozaa Galactan

UDP-D-glucuronisilpiranoza

UDP-D-galacturonisilpiranoza UDP-L-arabinoza

Acid pectic Araban

UDP-D-xiloza

UDP-L-ramnoza

Biosinteza substanelor pectice se realizeaz n dou etape. n prima etap care se desfoar n complexul Golgi, din glucoz se sintetizeaz acizi pectici i n final acizi galacturonici. Aceti precursori ai substanelor pectice sunt ncorporai n veziculele golgiene, cu rol de transportori. n timpul diviziunii celulare aceste substane sunt eliberate n zona fragmoplastului, unde n prezena enzimelor specifice formeaz acizii poligalacturonici ce
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

113

Biochimie horticol

intr n compoziia substanelor pectice ce formeaz lamela median. n timpul creterii celulelor, veziculele golgiene transport acizii galacturonici pn la nivelul plasmalemei, unde are loc un proces de exopinocitoz i astfel sunt eliberai la nivelul peretelui celular, unde are loc biosinteza substanelor pectice, n prezena enzimelor specifice. 9.3.2. Biodegradarea glucidelor Poliglucidele de rezerv din legume i fructe, de exemplu zaharoza, amidonul, se descompun prin degradare hidrolitic i fosforolitic n monoglucide care sunt utilizate n procesul de glicoliz. n aceast etap rezult o parte din energia necesar desfurrii proceselor celulare vitale. Poliglucidele de constituie (celuloza) din legume i fructe nu prezint un proces de biodegradare evident, coninutul acestora rmnnd relativ constant. Biodegradarea poliglucidelor. Biodegradarea amidonului are loc sub aciunea - i -amilazelor. -Amilazele acioneaz asupra ambelor componente ale amidonului : amiloz i amilopectin, produsele reaciei fiind dextrinele, maltoza i D-glucoza. -Amilazele catalizeaz reacia de hidroliz a legturilor 1,4--glicozidice cu ruperea succesiv a unitilor de maltoz, ncepnd cu captul nereductor al moleculelor de amiloz i amilopectin. Procesul de biodegradare a amidonului din legume i fructe are ca efect creterea coninutului n monoglucide, dei o parte din acestea sunt metabolizate n continuare. Biodegradarea substanelor pectice are loc pe cale enzimatic sub aciunea pectinesterazei, protopectinazei, poligalacturonazei etc., care au fost identificate n numeroase legume i fructe. Sub aciunea protopectinazei, protopectina se transform n pectin solubil. Acest compus este demetilat sub aciunea pectin-metilesterazei, rezultnd alcool metilic i acid pectic liber. Poligalacturonaza catalizeaz scindarea acidului pectic n acizi galacturonici. Biodegradarea oligoglucidelor. Biodegradarea zaharozei poate avea loc pe cale enzimatic, prin hidroliz, conform reaciilor: Zaharoza
invertaza

D-fructozil-enzima + D-glucoz; D-fructoza + enzim;

D-fructozil-enzim + H2O

Biodegradarea zaharozei este posibil i n prezena zaharozo-sintetazei, reacie care este specific fructelor tinere nematurate, care utilizeaz UDP-glucoza pentru biosinteza amidonului: zaharoza + UDP
invertaza

UDP-glucoza + fructoz.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

114

Biochimie horticol

Biodegradarea monoglucidelor. Monoglucidele din legume si fructe pot fi degradate n dou cicluri biochimice care se desfoar n citoplasm, i anume, ciclul glicolitic i ciclul pentozofosfat. Ciclul glicolitic, cunoscut si sub numele de ciclul Embden-Meyerhof-Parnas (EMP), reprezint calea anaerob de degradare a hexozelor, caracteristic procesului respirator al celulei vii, n care glucoza sufer o serie de transformri care au ca rezultat formarea acidului piruvic. Prima reactie din ciclul glicolitic const n formarea glucozo-6-fosfatului, fie din glucoz cu ajutorul hexokinazei, fie din glucozo-1-fosfat, ca urmare a aciunii catalitice a fosfoglucomutazei. Glucozo-6-fosfatul se transform n fructozo-6-fosfat, iar prin consumarea unei molecule de ATP, acesta este convertit n fructozo-1-6-difosfat. Prezena celor dou grupri fosfat n molecul, face posibil slbirea legturii C3 - C4, iar fructozo- 1,6-difosfatul se scindeaz ntr-o molecul de aldehid-3-fosfogliceric i o molecul de dihidroxiacetonfosfat.
Amidon Fosforilaz CH2OH O Glucozo-1-fosfat O P Fosfoglucomutaz CH2 O P O Glucozo-6-fosfat Hexokinaza Fosfopiruvatkinaza O C OH C O H3C

Acid piruvic

ATP ADP
O C OH C O P H2C

CH2OH O

Acid 2-fosfoenolpiruvic

ATP ADP Fosfohexoizomeraz CH2 O P Fructozo-6-fosfat O CH2OH

Glucoza

Enolaza O C OH Acid 2-fosfoenolgliceric H C O P HOH2C Fosfogliceromutaz O C OH Acid 3 fosfagliceric H C OH H2C O P ATP Fostaglicerokinaza ADP O NADH2 C O P H C OH H2C O P Acid 1,3-difosfogliceric

ATP Fosfofructokinaz CH2 O P O Fructozo-1,6-difosfat Aldolaz O + P C H C OH H2C O P Aldehida 3 fosfoglicerica H NAD ADP H2C O P

H2C O P C O CH2O Dixidroxiaceton-fosfat

Triozofosfat izomeraza

Biodegradarea glucozei n ciclul glicolitic.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

115

Biochimie horticol

Oxidarea aldehidei-3-fosfoglicerice se realizeaz n prezena gliceraldehid-3fosfodehidrogenazei, avnd loc concomitent reducerea unei molecule de NAD+ la NADH2 i fosforilarea n prezena H3PO4, produsul final al transformrii fiind acidul 1,3-difosfogliceric. In urmtoarea faz, 3-fosfoglicerokinaza catalizeaz transformarea acidului 1,3difosfogliceric, cu formarea unei molecule de ATP. Reaciile urmtoare conduc la formarea acidului 2-fosfoenolpiruvic care conine o legtura macroergic, prin hidroliza creia este furnizat suficient energie pentru sinteza ATP n etapa imediat urmatoare, din care rezult acidul piruvic. Pentru fiecare molecula de hexoz degradat prin ciclul glicolitic se formeaz 8 molecule de ATP, ceea ce corespunde la o cantitate de energie eliberat de circa 60 kcal. Acesta reprezint unica sursa de energie atunci cnd celulele sunt n condiii de anaerobioz. Ciclul pentozofosfat, cunoscut si sub denumirea de ciclul Dickens-Horecker, reprezint o alt cale de biodegradare a monoglucidelor. In acest ciclu are loc oxidarea glucozo-6-fosfatului pn la acid 6-fosfogluconic, n prezena enzimei glucozo-6fosfatdehidrogenaza. Acidul 6-fosfogluconic format sufer o decarboxilare la nivelul C1, concomitent cu o nou oxidare cu participarea NADP+-ului, rezultatul reaciei fiind ribulozo6-fosfatul.
CO2
CH2OPO3H2 O H OH

NADPH2 NADP+ Mg2+

CH2OPO3H2 O O

COOH H C OH C OH NADP C H H

H C OH C O C OH C OH CH2OPO3H2

H2O Mg2+

H HO H

Mg2+ H
H

Ribulozo-5 -fosfat

C OH CH2OPO3H2

Glucoza-6 -fosfat

Glucono-5 -lacton-6-fosfat

Acid-6 -fosfogluconic

TPP Mg2+
CHO H H C OH C OH OH H

CH2OH C O C H H H H

CHO C OH C OH C OH

C OH CH2OPO3H2 Xilozo-5 -fosfat

CH2OPO3H2 Ribozo-5 -fosfat

CH2OPO3H2 Erotrozo-4 -fosfat

TPP Mg2+ Sedoheptulozo-7 -fosfat

CH2OH

Aldehid-3-fosfogliceric
CHO H C OH CH2OPO3H2

CH2OH CHO H C OH CH2OPO3H2 HO H H C O C H OH H H H

C O C H

C OH C OH C OH CH2OPO3H2

C OH C OH

Aldehid-3-fosfogliceric

CH2OPO3H2 Fructozo-6 -fosfat

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

116

Biochimie horticol

Aceast pentoz, ribulozo-6-fosfatul, n urma reaciilor de transfer catalizate de transaldolaze i transcetolaze, sufer o serie de transformri care duc la formarea esterilor fosforici cu 3, 4, 6 i 7 atomi de carbon. Este foarte important de reinut faptul c, n cursul reaciilor biochimice, ia natere riboza (C5) necesar sintezei acizilor nucleici, eritrozo-4fosfatul (C4) care particip n biosinteza compuilor aromatici (acidul shikimic) i NADP+ + H+-ul necesar pentru numeroase reacii de reducere Contribuia relativ a celor dou cicluri de biodegradare a glucozei n procesul de cretere i maturare al produselor horticole este diferit. La tomate verzi, glucoza este metabolizat n proporie de 73% prin ciclul glicolitic i respectiv 27% prin ciclul pentozofosfat, iar la mere i pere maturate la temperatura de 15C, ciclul pentozofosfat este mai activ n preclimactericul fructelor, pentru ca n climacteric, glucidele sa fie mai intens metabolizate prin ciclul glicolitic. Fotorespiraia este un proces caracteristic plantelor verzi autotrofe considerat de unii specialiti considerat de unii specialiti o relicv evoluionar, care se desfoar concomitent cu fotosinteza. Att n procesul de fotosintez, ct i n cel de fotorespiraie intervine aceeai enzim-cheie: ribulozo-1,5-difosfat carboxilaza/oxidaza (RUBISCO), care n procesul de fotosintez are rol de carboxilaz, iar n cel de fotorespiraie acioneaz ca o oxidaz, cataliznd descompunerea ribulozo-1,5-difosfatului n acid fosfoglicolic i acid fosfogliceric, n cloroplast.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

117

Biochimie horticol

Acidul fosfoglicolic rezultat este defosforilat n cloroplast, apoi trece sub form de glicolat n peroxizomi unde este oxidat cu formare de acid glioxilic i ap oxigenat. Apa oxigenat este descompus n prezena peroxidazelor, iar acidul glioxilic este transformat n aminoacidul glicin printr-o reacie de transaminare. Glicina este transportat n mitocondrii, unde din dou molecule de glicin se formeaz un mol de amoniac i unul de serin. Serina este transportat din nou n peroxizomi, transformat n piruvat i glicerat, form sub care ajunge din nou n cloroplast, unde este fosforilat i intr n ciclul Calvin sub form de acid fosfogliceric. Biodegradarea ribulozo-1,5-difosfatului n procesul de fotorespiraie este caracteristic majoritii plantelor din zonele cu climat temperat. La aceste specii, intensitatea procesului de fotorespiraie reprezint n medie 25-50% din fotosinteza net i crete cu temperatura. Principalele procese de biosintez, biodegradare i interconversie a glucidelor n plante au fost ilustrate schematic n imaginea de mai jos:

Glucidele i intermediarii sau produii finali ai ciclurilor biochimice n care acetia sunt implicai reprezint precursorii tuturor celorlalte substane organice existente n plante.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

118

Biochimie horticol

9.4. Metabolismul lipidic 9.4.1. Biosinteza lipidelor Biosinteza lipidelor are la baz glicerolul i acizii grai. Glicerolul se formeaz din reducerea dihidroxiacetonfosfatului rezultat din procesul de glicoliz sau de fotosintez, iar acizii grai rezult din condensarea multipl a unitilor de acetil CoA, existente n cloroplaste n concentraie de 50 moli. Se consider c acetil Co A provine din mitocondrii i este transportat sub form de acetat liber sau sub form de acetil-carnitin. Procesul de biosintez a acizilor grai se desfoar n stroma cloroplastelor din frunze i n proplastidele din semine i rdcini. n prima etap a acestui proces acetatul liber este activat sub form de acetil CoA, n prezena enzimei acetil CoA sintetaz. Acetil CoA, n prezena dioxidului de carbon i a enzimei acetil CoA carboxilaz, formeaz o molecul activ de malonil-CoA. Aceasta se leag de o protein acil transportoare (ACP), cu greutatea molecular de 9 kDa, rezultnd malonil-ACP. n continuare malonil-ACP intr n reacie de condensare cu acetil CoA, rezultnd un compus cu 4 atomi de carbon. Prin condensri succesive se formeaz acizi grai cu 16 i 18 atomi de carbon, aceste reacii fiind catalizate de un sistem multienzimatic numit acid gras-sintaza format din 6 enzime: -cetoacil ACP sintaza, malonil-acetil transferaza, 3-hidroxacil-ACP dehidraza, enoil-ACP reductaza, cetoacil-ACP reductaza i o tioesteraz terminal.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

119

Biochimie horticol

Iniial se sintetizeaz acizi grai saturai, care ulterior sunt desaturai, astfel nct 75 % din acizii grai din plante sunt nesaturai. Desaturarea lipidelor are loc n membrana plastidelor i a reticulului endoplasmatic neted, n prezena unei desaturaze. Transportul acizilor grai se face sub forma acidului oleic. Acesta se leag de proteina acil-transportoare (ACP) formnd acid oleic-ACP care este transportat prin membranele cloroplastului, prin citoplasm, pn n reticulul endoplasmatic neted. n acest organit celular are loc formarea acizilor fosfatidici, n urma a dou reacii prin care se transfer acizii grai, la glicerol-3-fosfat. Tot n reticulul endoplasmatic se formeaz diacilglicerolul, fosfatidil colina i fosfatidil etanolamina i are loc interconversia acizilor grai, prin scurtarea sau alungirea lanului i prin modificarea numrului de duble legturi. Biosinteza acizilor grai, n principal a acizilor palmitic i oleic, este un proces care nmagazineaz o cantitate mare de energie. Pentru fiecare unitate de acetat convertit n acizi grai, se consum 2 moli de NADPH+H+ i 1 mol de ATP. Fosfatidil colina este utilizat este utilizat pentru formarea membranelor celulare i n procesul de biosintez a trigliceridelor, care se acumuleaz ntre cele dou straturi de fosfolipide ale membranei plasmatice din diverticulele reticulului endoplasmatic neted. Aceast acumulare provoac separarea bistratului lipidic n dou jumti, iar una din jumti va constitui membrana noii formaiuni, care se dilat i se tranguleaz formnd sferozomul (oleozomul) organitul de depozitare a lipidelor de rezerv. Gradul de saturare a lipidelor biosintetizate este dependent de temperatur. La temperaturi coborte se biosintetizeaz mai muli acizi grai nesaturai, iar la temperaturi ridicate mai mult acizi grai saturai. Acest proces de sintez a acizilor grai nesaturai, la temperaturi coborte, contribuie la creterea rezistenei plantelor la ger datorit posibilitii acestora de a-i modifica faza de la sol la gel, care se desfoar la temperaturi mai coborte. n cazul seminelor oleaginoase, lipidele de rezerv sunt utilizate n procesul de gluconeogenez n care se biosinteza glucidele necesare pentru procesul de cretere. 9.4.2. Biodegradarea lipidelor Lipidele de rezerv, depozitate n sferozomi, sunt descompuse n prezena lipazelor n glicerol i acizi grai. Aceste substane strbat membrana organitului ajungnd n citoplasm unde are loc etapa a doua de biodegradare: Glicerolul rezultat din descompunerea lipidelor poate fi fosforilat n citoplasm, de unde migreaz n cloroplaste, unde intr n ciclul fotosintetic. n lipsa clorofilei i n condiii de ntuneric, glicerolul poate fi descompus pe calea:
glicoliz Ciclul Krebs

Glicerol

aldehid-3-fosfogliceric

acid piruvic

CO2 + H2O + energie

120

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Biochimie horticol

Metabolizarea glicerolului n ciclul glicolitic pn la acid piruvic determin formarea a 6 moli de ATP. Modul de transport al acizilor grai din sferozomi n glioxizomi nu este bine precizat. S-a constatat c de multe ori sferozomii i glioxizomii se afl n contact direct, ceea ce favorizeaz transportul acestora dintr-un organit, n altul. Biodegradarea acizilor grai are loc n glioxizomi i numai ntr-o mic msur n peroxizomi i n mitocondrii. Acest proces se realizeaz prin -oxidare, care se desfoar sub forma unei spirale (numit spirala lui Linen), fiecare spir corespunznd cu formarea unui acid gras cu 2 atomi de carbon mai puin i cu eliberarea unei molecule de acetil CoA (CH3CO - S-CoA). Aceast secven genereaz 5 moli de ATP, iar dintr-un acid gras cu 18 atomi de carbon, rezult 9 moli de acetil CoA, care corespund cu 45 moli de ATP, respectiv 1.350 kJ energie biochimic.

Metabolizarea acetilcoenzimei A poate fi orientat i n direcia resintezei acizilor grai i a lipidelor, pentru sinteza glucidelor prin gluconeogenez, ca substrat n ciclul mevalonat etc. n seminele plantelor oleaginoase, procesul de -oxidare se poate desfura i n peroxizomi. Circa 10 % din acizii grai din celule sunt biodegradai n mitocondrii. Transportul acizilor grai prin membrana mitocondrial se face dup activarea acestora de ctre CoA-SH i legarea de o molecul de carnitin, cu formarea de acil-carnitin. n matricea mitocondrial, carnitina este eliberat, iar reziduul acil este transferat pe molecula de CoASH, rezultnd acil-CoA care este biodegradat prin -oxidare.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

121

Biochimie horticol

Biodegradarea fosfolipidelor din membranele plasmatice are loc n prezena fosfolipazelor. Acizii grai rezultai, sunt biodegradai n prezen lipoxigenazei, cu formare de hidroxiperoxizi ai acizilor grai.

Acetia sunt descompui n continuare, rezultnd malonil-aldehid, hidrocarburi volatile (etilen, etan, pentan), acid jasmonic i radicali liberi (superoxid, hidroxil). Acest proces se desfoar n citoplasm. Ciclul acidului glioxilic se desfoar n glioxizomi i prin acest ciclu se metabolizeaz o parte din acetil CoA rezultat din -oxidarea acizilor grai, fiind principala cale prin care lipidele de rezerv din seminele plantelor oleaginoase pot sintetiza glucidele necesare procesului de cretere.

9.5. Metabolismul proteinelor 9.5.1.Biosinteza i interconversia aminoacizilor Biosinteza aminoacizilor are la baz cetoacizii rezultai din procesul de biodegradare a glucidelor prin ciclul glicolitic i ciclul Krebs. Prin aminare reductiv, n prezena glutamat sintetazei identificat n citoplasma celulelor din rdcin i frunze i a glutamat dehidrogenazei localizat n cloroplastele frunzelor i mitocondriile celulelor rdcinii, se formeaz aminoacizi. Biosinteza aminoacizilor i interconversia acestora este prezentat mai jos remarcndu-se compuii iniiali utilizai, aminoacizii rezultai i localizarea biosintezei. Astfel: - Din piruvat se biosintetizeaz: valina, leucina i izoleucina, n cloroplaste. - Din glutamat se biosintetizeaz: arginina, prolina i ornitina, n cloroplaste. - Din fosfoglicerat se biosintetizeaz: glicina, serina i cisteina, n peroxizomi, mitocondrii i cloroplaste.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

122

Biochimie horticol

- Din fosfoenolpiruvat se biosintetizeaz: triptofanul, fenilalanina i tirozina, n cloroplaste.

- Din oxalacetat se biosintetizeaz acidul aspartic, lizina, homoserina, metionina i treonina, proces ce se desfoar n plastide, necesitnd un consum mare de energie (Brian, 1990). - Din ribulozo-5-fosfat se formeaz histidina. n procesul de biosintez a aminoacizilor din cloroplaste, se utilizeaz att amoniul rezultat din reducerea nitrailor, ct i cel produs n procesul de fotorespiraie, iar coordonarea procesului se realizeaz pe cale genetic. Astfel, n plantele Arabidopsis au fost identificate genele ASP-3 care codific sinteza aspartat aminotransferazei, genele GDH

pentru glutamat-dehidrogenaz, GLT pentru glutamat-sintaz i GLN-1 pentru glutaminsintaz. Lumina regleaz metabolismul

azotului prin modificarea expresiei genelor care codific sinteza enzimelor. Astfel, la lumin are loc represia genei ASN-1 care codific sinteza asparagin sintetazei. Se consider c aceast aciune a luminii se realizeaz prin intermediul fitocromilor, dar mecanismul nu este bine precizat.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

123

Biochimie horticol

Aminoacizii dintr-o serie, se pot transforma unii n alii, prin procesul de interconversie care are loc n citoplasm. 9.5.2.Biosinteza proteinelor Aminoacizii sunt utilizai pentru biosinteza proteinelor n procesul de translaie a informaiei genetice. Genele sunt purttoarele fiecrei informaii genetice a fiecrui caracter ereditar. Fiecare gen reprezint un fragment de ADN n care informaia genetic este codificat printr-o secven caracteristic de nucletide. O mutaie la nivelul unei gene se traduce printr-o protein modificat, a crei activitate biologic este alterat sau dispare. Uneori mutaia poate avea efect favorabil, conferind organismului un caracter benefic. Evoluia speciilor are la baz tocmai selecia naturala a mutaiilor favorabile. Biosinteza proteinelor are la baz transferul de informaie de la ADN la protein prin intermediul ARN i a codului genetic constituit din codoni. Un codon reprezint o succesiune de 3 nucleotide care codific un aminoacid. n biosinteza unei proteine aminoacizii se succed exact n ordinea n care se succed codonii n ARNm. Exist 64 de codoni, din care doar 61 codific cei 20 de aminoacizi, iar 3 sunt codoni non-sens, care indic sfritul mesajului, al informaiei genetice i prin urmare a biosintezei proteinei.
Tabel-Standard-Codon care arat cele 64 posibiliti de codificare a aminoacizilor. 2. Baz U C A G UUU Fenilalanina UUC Fenilalanina U UUA Leucina UUG Leucina CUU Leucin CUC Leucin C CUA Leucin CUG Leucin AUU Isoleucin AUC Isoleucin A AUA Isoleucin AUG Metionin/Start GUU Valin GUC Valin G GUA Valin GUG Valin UCU Serina UCC Serina UCA Serina UCG Serina CCU Prolin CCC Prolin CCA Prolin CCG Prolin ACU Treonin ACC Treonin ACA Treonin ACG Treonin GCU Alanin GCC Alanin GCA Alanin GCG Alanin UAU Tirosin UAC Tirosin UAA Stop UAG Stop CAU Histidin CAC Histidin CAA Glutamin CAG Glutamin AAU Asparagin AAC Asparagin AAA Lisin AAG Lisin GAU Acid aspartic GAC Acid aspartic GAA Acid glutamic GAG Acid glutamic UGU Cistein UGC Cistein UGA Stop/Selenocistein UGG Triptofan CGU Arginin CGC Arginin CGA Arginin CGG Arginin AGU Serin AGC Serin AGA Arginin AGG Arginin GGU Glicin GGC Glicin GGA Glicin GGG Glicin

1. Baz

Culoarea stabilit aminoacizilor:

hidrofob (nepolar) hidrofil neutru (polar) hidrofil se poate ncrca pozitiv = bazic hidrofil se poate ncrca negativ = acid

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

124

Biochimie horticol

Codul genetic este universal, de la virusuri i bacterii pn la plante i animale superioare, inclusiv om. Mecanismul codificrii se realizeaz prin transcripie i translaie.
transcripie translaie

ADN

ARNm

protein

n plante se afl trei situsuri de transcripie a informaiei genetice: n nucleu, mitocondrii i cloroplaste i patru situsuri de translaie: n citoplasm, cloroplaste, mitocondrii i reticulul endoplasmatic rugos. Prin transcripie are loc biosinteza ARNm pe baza informaiei din ADN prin transcrierea exact a succesiunii de codoni ai genei n macromolecula acestuia. Biosinteza proteinelor, respectiv asamblarea aminoacizilor n lanul de polipeptide se realizeaz n ordinea dictat de ARNm, n procesul de translaie.

Sinteza proteinelor implic urmtoarele componente moleculare:

Etapele biosintezei proteinelor: 1) Activarea aminoacizilor se realizez n prezena enzimei aminoacil-ARNt-sintetaza, caracteristic fiecrui aminoacid, care catalizeaz legarea aminoacidului de AMP, apoi transferul acestuia pe molecula de ARNt specific, care conine anticodonul ce va recunoate secvena de nucleotide din ARNm. Sub aceast form, fiecare aminoacid este transportat la polizomi, locul de biosintez a proteinelor. 2) Iniierea biosintezei lanului polipeptidic se realizeaz cu participarea unor factori de iniiere care asambleaz ribozomii pe ARNm, formnd polizomii, concomitent cu recunoaterea codonului de iniiere AUG a biosintezei de ctre metionin-ARNt, la captul 5 al ARNm. 3) Elongaia lanului peptidic conduce la biosinteza polipeptidei prin formarea treptat a legturilor peptidice ntre aminoacizi. Dup fixarea primului aminoacil-ARNt pe ribozomi la situsul P (peptidil) are loc selectarea urmtorului aminoacil-ARNt i fixarea acestuia la situsul A (aminoacil) pe baza recunoaterii specifice codon (al ARNm) anticodon (al ARNt), cu participarea GTP i a unor factori de elogaie.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

125

Biochimie horticol

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

126

Biochimie horticol

Formarea legturilor peptidice, catalizat de o peptidil-transferaz are loc ntre gruparea NH2 a aminoacidului nou adus i gruparea COOH a celui legat deja de lanul peptidic iniiat. Pe msur ce se formeaz, polipeptida rmne legat de ribozom prin ARNt specific ultimului aminoacid ataat, n situsul P. n continuare are loc translocarea peptidil-ARNt pe situsul P, iar ribozomul se deplaseaz fa de ARNm spre captul 3 pentru a permite codonului urmtor s fixeze n situsul A un aminoacil-ARNt cu anticodonul complementar. Dup realizarea legturii peptidice i ataarea aminoacidului la peptida existent procesul se reia pn la transducia ntregului mesaj nscris n molecula de ARNm. Moleculele de ARNt eliberate dup legarea aminoacizilor n lanul peptidic trec n citoplasm, matricea mitocondrial sau strom i particip la activarea i transportul altor molecule de aminoacizi la locul de sintez a proteinei respective. 4) ncetarea biosintezei proteice se realizeaz n momentul apariiei codonilor non-sens (UAA, UAG sau UGA) din molecula de ARNm pe ribozomul funcional. Aceti codoni pun punct mesajului, biosinteza lanului peptidic este sistat i n, acelai timp, se rupe legtura dintre peptid i ARNt care a transportat ultimul aminoacid. Proteina astfel sintetizat este pus n libertate n configuraia tridimensional caracteristic, dat de resturile de cistein sau de aminoacizii hidrofobi. Dup eliberarea proteinei native are loc i eliberarea ribozomilor de pe ARNm, precum i a ARNt, acetia putnd relua procesul de biosintez al altei proteine. n cloroplaste se biosintetizeaz proteine specifice i ndeosebi subuniti ale enzimei ribulozo-1,5-difosfat carboxilaza, n mitocondrii se biosintetizeaz proteinele mitocondriale, n citoplasm proteinele citoplasmatice i unele enzime, iar n reticulul endoplasmatic rugos proteinele de rezerv, cele care intr n constituia pereilor celulari i unele enzime specifice. n acest organit se sintetizeaz i protein enzimele din glioxizomi, peroxizomi, veziculele proteice i sferozomi. Proteinele din cloroplaste i din mitocondrii rezult din polipeptidele sintetizate n aceste organite i n citoplasm. Subunitile polipeptidice mici biosintetizate n citoplasm sunt transportate prin membranele cloroplastelor sau a mitocondriilor, iar i apoi sunt asamblate n aceste organite, n prezena unor enzime specifice. n plante se sintetizeaz mii de proteine; unele se acumuleaz i se depoziteaz la locul de sintez, n timp ce altele sunt transportate spre alte situsuri. Proteinele care sunt transportate au legate domenii-int care au rolul unor adrese legate de molecul. Aceste domenii-int sunt alctuite din polipeptide scurte sau aminoacizi care se gsesc situai la unul din capetele proteinei, sau la ambele capete.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

127

Biochimie horticol

Transportul proteinei prin membranele fosfolipidice se face prin pori sau prin canale. Proteinele care sunt transportate prin pori se leag de o molecul chaperon, care are greutatea molecular de 70 kDa. Proteinele sintetizate n reticulul endoplasmatic se acumuleaz ca proteine de rezerv n vezicule proteice sau intr n ciclul secretor n care este implicat i complexul Golgi, plasmalema i tonoplastul. Aceste proteine au domeniul de int alctuit din glicani care sunt legai de captul amino al lanului. Prezena acestuia permite polipeptidelor s se ansambleze n oligomeri. Proteinele sintetizate n citoplasm intr n alctuirea citoplasmei sau sunt transportate n plastide, mitocondrii, nucleu i peroxizomi. Peptidele transportate n plastide au la captul amino al lanului peptidic moleculesemnal alctuite din 4050 aminoacizi care au rolul de a recunoate transportorii membranari i locul de transport - porii care se formeaz n locurile n care membrana extern i cea intern ajung n contact. Este un transport transmembranal activ. Transportul peptidelor n mitocondrii se face activ prin dou proteine transportoare, deoarece membrana extern i cea intern nu ajung n contact. Polipeptidele destinate nucleului sunt transportate prin porii nucleari. Aceste proteine au un domeniu de int nuclear (NLSs). 9.5.3.Biodegradarea proteinelor Proteinele de rezerv, depozitate n veziculele proteice, sunt descompuse n prezena proteazelor n aminoacizii corespunztori. Proteazele sunt biosintetizate n reticulul endoplasmatic rugos i sunt transportate de veziculele derivate din acest organit pn la proteinozomi, transportul prin membranele veziculelor proteice realizndu-se prin pinocitoz. Aminoacizii rezultai din biodegradarea proteinelor, strbat membrana veziculei proteice i ajung n citoplasm unde sunt dezaminai. Rezult amoniac, care poate fi utilizat pentru biosinteza unor noi aminoacizi, i cetoacizi care pot ptrunde n mitocondrii unde sunt biodegradai prin ciclul Krebs. Utilizarea proteinelor ca substrat energetic are o importan redus n cazul plantelor. n general, aminoacizii rezultai din biodegradarea substanelor proteice sunt folosii pentru sinteza unor proteine noi, active sau de structur, care sunt necesare plantelor n etapa respectiv. Acest proces de rennoire a proteinelor se desfoar pe toat durata de via a plantelor i constituie una din cile de adaptare a metabolismului la condiiile mediului ambiant.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

128

Biochimie horticol

9.6. Ciclul Krebs Biodegradarea glucidelor, lipidelor i a proteinelor au o etap comun, etapa final care se desfoar n mitocondrii, i utilizeaz acidul piruvic i acetilCoA rezultate din etapele anterioare. Aceast etap final este cunoscut sub denumirea de respiraie aerob i se realizeaz n dou etape: ciclul Krebs i fosforilarea oxidativ din care rezult energie, dioxid de carbon i ap. Acest proces se desfoar n dou etape: prima etap - n matricea mitocondrial, unde substratul (acidul piruvic sau acetil CoA) este decarboxilat i dehidrogenat, rezultnd CO2 i substane puternic reductoare NADH+H+, FADH2 sau macroergice GTP. Reaciile biochimice care au loc n aceast etap sunt cunoscute sub denumirea de ciclul Krebs, ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul acidului citric. cea de a doua etap - n membrana intern mitocondrial (catena respiratorie), unde substanele puternic reductoare rezultate din etapa anterioar se oxideaz, elibernd H+ i e- care sunt transportai printr-un lan de complexe transportoare de electroni, i cedeaz O2 i formeaz apa de respiraie. Protonii transportai din spaiul intermembranal n matricea mitocondrial conform gradientului de concentraie prin ATP-sintaz genereaz ATP-ul. Prima etap a ciclului Krebs este reprezentat de decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic, n prezena coenzimei A, reacie din care rezult acetil CoA i CO2. Protonii provenii din dehidrogenare sunt acceptai de NAD+, rezultnd NADH+H+. Acetil CoA rezultat este fixat pe un acceptor: oxalacetatul, care o introduce n ciclul Krebs, prin formarea unei molecule de citrat, iar coenzima A este regenerat. Citratul este izomerizat n prezena enzimei aconitaz formnd o molecul de izocitrat care este decarboxilat la -cetoglutarat i dioxid de carbon, iar hidrogenul este transferat la NAD+, care se reduce la NADH+H+. -Cetoglutaratul este decarboxilat n prezena coenzimei A i a enzimei cetoglutarat dehidrogenaz, rezultnd succinil CoA, dioxid de carbon i NADH+H+, iar n etapa urmtoare succinil CoA este convertit la succinat i GTP n prezena enzimei succinil CoA sintetaz. Succinatul este dehidrogenat n prezena enzimei succinatdehidrogenaza cu formare de FADH2 i fumarat, care este convertit n malat de ctre enzima fumaraz. n ultima etap are loc dehidrogenarea malatului la oxalacetat n prezena enzimei malatdehidrogenaz, iar hidrogenul rezultat din aceast reacie este utilizat la reducerea NAD-ului la NADH+H+.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

129

Biochimie horticol

Prin urmare, CO2 se formeaz din decarboxilarea acizilor piruvic, izocitric i cetoglutaric, astfel dintr-o molecul de hexoz rezult 2 molecule de acid piruvic, prin metabolizarea crora se formeaz 6 molecule de dioxid de carbon.

Din oxidarea i dehidrogenarea acizilor piruvic, izocitric, -cetoglutaric, succinic i malic rezult substane puternic reductoare NADH+H+ i FADH2 care elibereaz electronii i a protonii la nivelul membranei mitocondriale interne n cea de-a doua etap a respiraiei aerobe. Ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul Krebs reprezint etapa final a procesului de biodegradare a substanelor organice, ce se desfoar n mitocondrii i din care rezult ntro prim etap dioxid de carbon i substane puternic reductoare, care prin oxidare, elibereaz H+ i e- ce sunt transportai printr-un lan de complexe transportoare de electroni i cedai O2, formnd apa de respiraie i ATP. 9.7. Biodegradarea anaerob Plantele superioare, n condiii nefavorabile de mediu (anoxie), i procur energia necesar pentru desfurarea proceselor vitale, prin biodegradarea anaerob a glucidelor de rezerv.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

130

Biochimie horticol

Pentru unele bacterii i ciuperci, aceasta reprezint principala cale de producere a energiei. Plantele verzi ns, utilizeaz biodegradarea anaerob n fazele avansate de

maturitate, n cazul n care proporia de oxigen din mediul ambiant scade la 5-10 % cnd se poate desfura n paralel i respiraia aerob i biodegradarea anaerob i n cazul unor concentraii ale oxigenului mai mici de 2%, cnd se desfoar aproape exclusiv biodegradarea anaerob. Respiraia aerob i biodegradarea anaerob a glucidelor, au o prim etap comun, n care glucidele sunt biodegradate prin ciclul glicolitic. n etapele urmtoare, se gsesc ns numeroase deosebiri care constau n urmtoarele: - Din respiraia anaerob nu rezult ap endogen, nu se produce dioxid de carbon sau cantitatea de dioxid de carbon este redus. - Energia rezultat din procesul de respiraie anaerob este de 24-33 de ori mai mic, comparativ cu cea produs n respiraia aerob. - Viteza de biodegradare a substratului respirator este mult mai mare, comparativ cu respiraia aerob, corespunztor cu o cantitate sporit de substrat metabolizat. - Produii finali ai respiraiei anaerobe sunt alcoolul etilic acidul lactic etc. Comparaie ntre respiraia aerob i biodegradarea anaerob
________________________________________________________________________________________________________________

Specificaia Substratul utilizat Etapa de desfurare I II III Compuii rezultai din etapa a II-a Compuii rezultai din etapa a III-a Energia rezultat Ritmul de desfurare Condiii de desfurare

Respiraia aerob Glucide, lipide, proteine Hidroliza amidonului (amiloplast) Ciclul glicolitic (citoplasm) Ciclul Krebs (mitocondrii) Acid piruvic 6 CO2 i 6 H2O 450 kJ/ mol acid piruvic Lent Aerobe

Biodegradarea anaerob Glucide Hidroliza amidonului (amiloplast) Ciclul glicolitic (citoplasm) Calea alcoolic i lactic (citoplasm) Acid piruvic 2 CO2 + alcool etilic/acid lactic 30 kJ/ mol acid piruvic Rapid Anaerobe

________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________

Biodegradarea anaerob a glucidelor din plantele superioare, care are loc n condiii de hipoxie, este similar cu cea produse de microorganismele saprofite (fermentaie).

Deosebirile constau n faptul c biodegradarea anaerob se desfoar n esuturile vii ale plantelor, iar reaciile caracteristice sunt catalizate de enzimele sintetizate de ctre celulele
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

131

Biochimie horticol

acestora, n momentul in care se manifest hipoxia. Fermentaiile se desfoar n esuturile vegetale moarte i sunt catalizate de enzimele provenite din microorganisme. Mecanismul biodegradrii anaerobe a glucidelor Att pentru respiraia aerob, ct i pentru biodegradarea anaerob, calea comun de biodegradare a glucidelor o reprezint metabolizat pe cale alcoolic sau lactic. Calea alcoolic de biodegradare a glucidelor, conduce la formarea a dou molecule de alcool etilic, dou molecule de dioxid de carbon i 100,5-138,2 kJ energie, din care circa 60 kJ se conserv sub form de energie biochimic n dou molecule de ATP. C6 H12 O6 2 CO2 + 2 C2 H5 OH + E ciclul glicolitic, iar acidul piruvic rezultat este

Reaciile caracteristice pentru biodegradarea pe cale alcoolic constau n decarboxilarea acidului piruvic la aldehid acetic, reacie catalizat de enzima piruvatdecarboxilaz. n continuare aldehida acetic este redus la alcool etilic, sub aciunea catalitic a enzimei alcooldehidrogenaz. Reaciile de biodegradare care au loc n acest proces pot fi schematizate astfel:
Ciclul glicolitic

C6 H12 O6
glucoz

2 COOH-CO-CH3
acid piruvic

2 CH3 - CHO

aldehida acetic

CH3 CH2 OH
alcool etilic

Formarea aldehidei acetice i a alcoolului etilic prin biodegradarea anaerob are loc n mod natural n esuturile cu un grad mai avansat de maturitate. Acumularea acestor dou substane pn la limita de toxicitate: 0,04 % pentru aldehida acetic i 0,3 % pentru alcoolul etilic, conduce la moartea celulelor i la brunificarea esuturilor. Biodegradarea anaerob a substanelor de rezerv se poate produce i n cazul unor accidente: inundarea ndelungat a solului determin desfurarea unor reacii anaerobe n rdcini, care conduc la formarea alcoolului etilic, lsarea cartofilor timpurii pe sol sub aciunea radiaiilor solare sau depozitarea cartofilor de iarn n spaii neventilate. Calea lactic de biodegradare a hexozelor conduce la formarea de acid lactic. Schema de desfurare a acestui proces este urmtoarea:
Glicoliz

C 6 H12 O6
glucoz

2 COOH-CO-CH3
acid piruvic

2 COOH-CHOH-CH3
acid lactic

NADPH+H+

NADP

Din aceast reacie nu rezult dioxid de carbon, deoarece acidul piruvic nu este decarboxilat. Formarea acidului lactic a fost constatat la fructele de tomate, n seminele care germineaz n condiii de exces de umiditate, precum i la tuberculii de cartof expui la condiii de anaerobioz.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

132

Biochimie horticol

Biodegradarea acidului piruvic cu formarea de acid lactic este produs i de unele bacterii i ciuperci. Microorganismele anaerobe sau parial anaerobe pot biodegrada glucidele i cu formare de acid propionic (fermentaie propionic), acid butiric (fermentaie butiric) sau acid acetic (fermentaie acetic). Aceste tipuri de fermentaii sunt utilizate n industrie pentru prepararea cacavalului, topirea inului i a cnepei i respectiv la obinerea oetului. Desfurarea procesului de biodegradare anaerob a glucidelor de rezerv din organele plantelor meninute n atmosfer cu coninut sczut de oxigen i ridicat de dioxid de carbon, care genereaz condiii de anaerobioz parial sau total, asigur supravieuirea acestora o perioad scurt de timp, prin utilizarea cantitilor reduse de energie biochimic, rezultat din aceste proces.

Autoevaluare 1. Ce este metabolismul? 2. Metabolismul energetic. 3. Enzime structur, mecanism de reacie, exemple. 4. Biosinteza glucidelor ciclul Calvin. 5. Biosinteza glucidelor ciclul acidului glioxilic. 6. Biosinteza oligoglucidelor i poliglucidelor. 7. Biodegradarea glucidelor. 8. Ciclul glicolitic. 9. Ciclul pentozofosfat. 10. Fotorespiraia 11. Biosinteza lipidelor. 12. Biodegradarea lipidelor. 13. Biosinteza i interconversia aminoacizilor. 14. Biosinteza proteinelor. 15. Biodegradarea proteinelor. 16. Ciclul Krebs. 17. Particularitile biodegradrii anaerobe.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

133

Biochimie horticol

Bibliografie selectiv 1. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 5. Burzo, I., Dobrescu, A., Bdulescu, L., Mihescu, D., Blan, D. - Fiziologia plantelor, Volumul VIII - Substanele utile din plante (2005) Ed. Elisavaros Bucureti 6. Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti 7. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 8. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 9. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti. 10. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5. 11. http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

134

Biochimie horticol

CAPITOLUL 10. TRANSFORMAREA SUBSTANELOR N PLANTE Cuvinte cheie: metabolism, anabolism, catabolism, compui macroergici, enzime, cicluri biochimice.

Rezumat Transformarea substanelor n plante se realizeaz n cicluri biochimice localizate la nivel celular n diverse organite. Ca urmare a desfurrii procesului de fotosintez, la plantele verzi se biosintetizeaz glucide (trioze i hexoze) care reprezint precursori pentru biosinteza celorlalte substane organice caracteristice plantelor autotrof fotosintetizante. O alt categorie de precursori sunt intermediarii rezultai din procesele de biodegradare a substanelor organice de rezerv, n oricare din cele trei etape. Substanele rezultate din aceste transformri au diferite roluri n viaa plantelor: ca substane plastice, de rezerv, substane active sau substane secundare. Multitudinea i complexitatea ciclurilor biochimice prin care substanele organice din plante sunt metabolizate explic numrul i varietatea deosebit de mare a acestora n regnul vegetal. Ca urmare a desfurrii procesului de fotosintez, la plantele verzi se

biosintetizeaz glucide: trioze i hexoze. Din aceste substane, la nivelul frunzelor se biosintetizeaz aminoacizi, hormoni, vitamine etc. care sunt transportate prin floem la toate celulele plantelor. Concomitent se sintetizeaz i zaharoza care este transportat la toate organele i celulele plantei unde este utilizat ca substrat energetic sau ca produs primar pentru biosinteza altor substane organice caracteristice plantelor autotrof fotosintetizante.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

135

Biochimie horticol

Substanele rezultate din aceste transformri au diferite roluri n viaa plantelor: ca substane plastice, de rezerv, substane active sau substane secundare. Biosinteza, interconversia i biodegradarea glucidelor, lipidelor i proteinelor au fost descrise pe larg n capitolul anterior, astfel c n acest capitol se vor face referiri cu precdere la ciclurile biochimice de biosintez i intertransformare a pigmenilor, hormonilor, terpenelor, n ciclul acidului -aminolevulinic, care se desfoar n cloroplaste, se biosintetizeaz pigmenii clorofilieni. Substanele care sunt utilizate n acest ciclu biosintetic sunt: aminoacidul glicin i succinil CoA, produs n ciclul Krebs.

Din aceti doi compui se formeaz acidul glutamic 5-aminolevulinat porfobilinogen uroporfobilinogen coproporfirinogen protopofirinogen din care se formeaz protoporfirina IX. Prin ncorporarea unui ion de magneziu, n prezena chelailor, rezult Mg-protoporfirina IX. Aceasta se transform n monovinil-protoclorofilida a, care n

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

136

Biochimie horticol

prezena luminii, a NADPH, H+ i protoclorofilid-oxidoreductaza formeaz clorofilida a. Dup esterificare cu fitolul (C20 H39 OH) formeaz clorofila a. Metabolismul terpenelor, se desfoar n ciclul mevalonat i are ca produs iniial acetil CoA. n acest ciclu se sintetizeaz monoterpene, sesquiterpene, diterpene, triterpene i tetraterpene, dintre care se pot meniona: linalool, limonen, gibereline, acidul abscisic, ubichinona, pigmenii carotenoizi etc. Biosinteza acestor substane este coordonat genetic, prin codificarea sintezei

enzimelor ce catalizeaz reaciile din acest ciclu: fitoen-desaturaza, fitoen-sintaza, hidroximetilglutaril- CoA reductaza, capsantin-capsorubin sintaza. n prima etap a biosintezei terpenelor are loc formarea 3-hidroxi-3-metilglutarilCoA, din trei molecule de acetil CoA, reacie catalizat de o enzim ce cofactor cu fier i chinon. n cea de a doua etap, catalizat de hidroximetil-glutaril CoA reductaza, se formeaz geranilgeranil- pirofosfat sintaza, licopen ciclaza,

mevalonatul. Prin decarboxilare i fosforilare, din mevalonat rezult izopentil pirofosfat (C5), din care se formeaz geranil pirofosfat (C10), farnesil pirofosfat (C15) i geranilgeranil Aceste pirofosfat (C20). substane reprezint

precursori pentru diferitele terpene. Astfel, din geranil pirofosfat se formeaz monoterpenele: linalool i limonen. Din farnesil-pirofosfat se formeaz sesquiterpenele i squalenul. pirofosfat Din se geranilgeranilsintetizeaz

diterpenele, kaurenul care este precursorul giberelinelor i a acidului abscisic i fitoenul, care este precursorul pigmenilor carotenoizi. Localizarea la nivel celular a diferitelor etape a procesului de sintez a terpenelor este dificil. Izopentil pirofosfatul poate fi biosintetizat n toate structurile celulare unde se
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

137

Biochimie horticol

sintetizeaz terpene. Situsul specific pentru sinteza monoterpenelor l constituie plastidele. Sinteza farnesil-pirofosfatului i a sesquiterpenelor derivate, precum i a triterpenelor incluznd fitosterolii, are loc n citoplasm i la nivelul reticulului endoplasmatic. Diterpenele se biosintetizeaz n plastide, unde a fost identificat activitatea gerenilgeranil-pirofosfat sintazei. n cloroplaste a fost identificat activitatea ent-kauren sintazei care catalizeaz sinteza ent-kaurenului, precursorul citochininelor. Tot n cloroplaste se biosintetizeaz pigmenii carotenoizi i tocoferolii, iar ubiquinona este biosintetizat n mitocondrii i microzomi. Biosinteza terpenelor are loc n toate celulele plantelor. n cazul speciilor care sintetizeaz cantiti mari de terpene, sinteza acestora are loc n celule specializate aa cum sunt canalele rezinifere din frunzele de pin sau celulele rezinifere izolate din Thuja . n cazul plantelor angiosperme, monoterpenele sunt sintetizate n peri glandulari de pe frunzele de Mentha, n petalele sau pistilul florilor (ex. linalool), iar latexul n laticifere. Numeroase terpene cu 10 sau 15 atomi de carbon, cu grad mare de volatilitate, sunt cunoscute sub denumirea de uleiuri volatile i confer aroma caracteristic pentru unele organe ale plantelor: flori, fructe, semine etc. Sterolii sunt alctuii din 5 uniti izoprenice, ca de exemplu: colesterolul, sitosterolul, stigmasterolul i campesterolul i se gsesc n compoziia membranelor plasmatice avnd rol n reglarea permeabilitii acestora. Unii compui izoprenoizi secretai de rdcinile plantelor sunt toxici pentru rdcinile altor plante, fiind considerate substane allelopate. Ciclul acidului shikimic are ca substrat eritrozo-4-fosfatul, produs n ciclul pentozofosfat. Rezult fenolii, ligninele, antocianii i aminoacizii fenolici aa cum este triptofanul din care se biosintetizeaz auxina. Se consider c n condiii normale aproximativ 20 % din carbonul fixat de plante este utilizat n ciclul shikimat. n acest ciclu, fosfoenolpiruvatul i eritrozo-4-fosfatul se condenseaz ntr-un compus cu 7 atomi de carbon: 3 deoxi-D-arabino-heptulosonat-7-fosfat (DHAP), din care rezult corismat, pe urmtoarea cale: DAHP 3 dihidrochinat 3 dihidroshikimat shikimat corismat. Corismatul reprezint compusul iniial pentru 3 cicluri: din primul rezult fenilalanina, ligninele i flavonoidele, din cel de al doilea triptofanul, auxinele, glucozinolaii, fitoalexinele i alcaloizii din cel de al treilea tirozina i melaninele.

Enzima-cheie a ciclului acidului shikimic este fenilalaninamoniu liaza (PAL), care este legat de membrana reticulului endoplasmatic, cloroplastelor, mitocondriilor i de
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

138

Biochimie horticol

membranele plasmatice.Leziunile mecanice i atacul patogen induc formarea ARNm care codific sinteza DAHP sintazei, stimulnd ciclul shikimat. Enzimele care catalizeaz reaciile din acest ciclu sunt sintetizate n ribozomii din citoplasm. Activitatea acestor enzime a fost pus n eviden n cloroplaste i identificarea acesteia n citoplasm este incert.

O parte din aminoacizii care se formeaz n acest ciclu reprezint la rndul lor precursori ai altor substane. Triptofanul este precursorul hormonului de cretere auxin, fenilalanina este precursorul pigmenilor flavonoizi i ai ligninelor, tirozina este precursorul ubichinonei, substan transportoare de electroni n procesul de respiraie. n ciclul acidului shikimic, care se desfoar n reticulul endoplasmatic i n citoplasm, se biosintetizeaz i acizii fenolici: p-cumaric, cinamic, cafeic, ferulic, clorogenic, precum i galotaninurile. Substanele fenolice pot stimula sau inhiba aciunea hormonilor, inhib sinteza ATP-ului n mitocondrii, precum i activitatea unor enzime, sau a curenilor citoplasmatici din celulele perilor absorbani. Unele substane fenolice (acidul ferulic, lunularic, clorogenic i catechinele) au efect inhibitor asupra germinrii seminelor. Prin oxidarea unor substane ca tirozina din tuberculii de Solanum tuberosum, dopamina din banane, acizii fenolici din mere, n prezena fenolazelor se formeaz melanine de culoare neagr, care confer culoarea caracteristic pentru fructele lezate mecanic sau senescente. Unii fenoli constituie substane allelopate: juglona produs de Juglans regia, acidul salicilic produs de Quercus falcata, acidul ferulic produs de Adenostoma etc.

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

139

Biochimie horticol

Derivaii acidului cinamic au fost identificai n vacuole i n cloroplaste. Enzimele implicate n biosinteza substanelor flavonoide: calcon-flavon izomeraz i flavonoid hidrolaz, au fost identificate n reticulul endoplasmatic i n cloroplaste, iar substanele flavonoide au fost identificate n vacuole, spaiul extraplasmatic i cloroplaste. Biosinteza substanelor flavonoide este coordonat genetic. Sinteza antocianilor se poate realiza n orice celul vegetal, fiind localizat n citoplasm pentru monomeri, dimeri i trimeri i n vezicule, denumite impropriu antocianoplaste, pentru produii finali. Antocianii formai sunt transportai din aceste vezicule, n vacuol, printr-un proces de pinocitoz, iar membranele veziculelor pot fi ncorporate n tonoplast. Acizii organici rezult din ciclul Krebs, iar substanele fenolice din ciclul acidului shikimic. Alcaloizii sunt substane heterociclice azotate , care se gsesc n peste 13.000 de specii Majoritatea alcaloizilor vegetali provin din amine sau din aminoacizi i numai o parte provin din precursori izoprenoizi n care azotul este ncorporat ntr-o etap trzie a ciclului biosintetic. Aa este cazul solaninei din Solanum tuberosum i a tomatidinei din Lycopersicon esculentum. Alcaloizii au fost identificai n vacuole, cloroplaste i spaiul extraplasmatic. Enzimele implicate n sinteza acestor substane au fost identificate n membranele reticulului endoplasmatic, n plasmalem i n tonoplast. Dintre alcaloizi, nicotina are ciclul biosintetic mai bine studiat. Compuii primari sunt arginina i ornitina care sunt decarboxilate i metabolizate la forma conjugat de putrescein. Biosinteza nicotinei are loc n vezicule mici, care provin din reticulul endoplasmatic sau din complexul Golgii i care conin enzimele implicate n acest proces. Membrana acestor vezicule este permeabil pentru compuii teriari care se pot sintetiza n alte situsuri. Compuii cuaternari formai sunt eliberai n vacuol, n urma fuziunii acesteia cu vezicule. Glicozidele cianogene ca amigdalina i prunasina au fost identificate n vacuolele celulelor, iar enzimele implicate n sinteza unor glicozide cianogene au fost identificate n membrana reticulului endoplasmatic. Glicozidele cianogene au fost identificate n peste 1.000 de specii, 500 genuri i 100 familii de plante. Dintre aceste substane, cele mai cunoscute sunt: amigdalina i prunasina din Rosaceae i sambunigrina din Caprifoliaceae. Aminele biogene sunt larg rspndite n plante att ca amine simple (primare, secundare, teriare), ct i ca amine cu diferite grupri funcionale (alcoolice, fenolice, carboxilice etc.).

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

140

Biochimie horticol

Dintre amine prezint importan putresceina, care se formeaz din ornitin (n Pisum, Nicotiana), cadaverina care se formeaz din lizin (n Lupinus, Pisum), triptamina care se formeaz din tirozin (n Hordeum, Lolium), dopamina care se formeaz din dihidroxifenil alanin. Putresceina, spermina i spermidina interacioneaz cu acizii nucleici i pot fi implicate n felul acesta n biosinteza proteinelor. Putresceina, cadaverina, spermina i spermidina n concentraie de 10-4 - 10-6 M, stimuleaz procesul de cretere, iar dopamina reprezint precursorul pentru formarea compuilor melanoizi la banane. Substanele volatile care confer aroma fructelor reprezint compui intermediari ai metabolismului: alcooli, aldehide, cetone, esteri, eteri etc., substane cu grad ridicat de volatilitate. Autoevaluare 1. Precizai principalele cicluri biochimice din plante. 2. Ciclul acidului -aminolevulinic. 3. Ciclul mevalonat. 4. Ciclul acidului shikimic 5. Ciclurile de biosintez a alcaloizilor, glicozidelor cianogene, aminelor biogene i substanelor volatile din plante. Bibliografie selectiv 1. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. 2003. Biochemie. 5. Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg Berlin , ISBN 3-8274-1303-6 2. Bodea, C. 1964. Tratat de biochimie vegetal. Partea I. Fitochimie. Vol.I. Ed Academiei RPR. 3. Burnea, I., Popescu, I., Neamu, G., Stancu, E., Lazr, t. 1977. Chimie i biochimie vegetal. EDP Bucureti. 4. Burzo, I., Voican, V., Dobrescu, A., Delian, E., Bdulescu, L. 1999. Curs de Fiziologia plantelor. AMC USAMV Bucureti. 5. Burzo, I., Dobrescu, A., Bdulescu, L., Mihescu, D., Blan, D. - Fiziologia plantelor, Volumul VIII - Substanele utile din plante (2005) Ed. Elisavaros Bucureti 6. Burzo, I., Delian, E., Dobrescu, A., Voican, V., Bdulescu, L. - Fiziologia plantelor de cultur - Volumul I Procesele fiziologice din plantele de cultur, ediie mbuntit, (2004), Ed. Ceres Bucureti 7. Gherghi, A., Burzo, I., Bibicu, M., Mrgineanu, L., Bdulescu, L. 2001. Biochimia i fiziologia legumelor i fructelor. Ed. II-a revzut i completat. Ed. Academiei Romne. 8. Ionescu, M. 1970. Biochimia agricol. Ed. Ceres Bucureti. 9. Lehninger, A.L. 1987. Biochimie. Vol.1. Ed. Tehnic Bucureti. 10. Voet, D., Voet, J.G. 2004. Biochemistry. 3. Auflage. John Wiley & Sons Inc., London, ISBN 0-471-39223-5.
____________________________________________________________________________________________________________________________________________

141