Gentica de Bactrias

Descrio de mutantes Mecanismos de recombinao Mapeamento de genes

Prof. Manoel Victor

Consideraes iniciais
Microrganismos no contexto da Gentica
1940 com Beadle & Tatum
mutantes auxotrficos em Neurospora crassa

1946 com Lederberg & Tatum

comprovao da transferncia de genes por conjugao bacteriana

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Pr-requisitos para estudos de Gentica

possibilidade de obteno e deteco de mutantes
mutantes auxotrficos mutantes morfolgicos mutantes resistentes a agentes inibidores de crescimento
antibiticos bacterifagos

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Pr-requisitos para estudos de Gentica

Ocorrncia de eventos de recombinao
transformao bacteriana conjugao bacteriana
sexoduo

II

transduo
generalizada restrita

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Mutantes bacterianos
auxotrficos
incapazes de crescimento em meio mnimo
meio mnimo 1 fonte de carbono (energia) e sais minerais ex: thr-, lys-, arg-, etc

morfolgicos
colorao de colnias formato das colnias,etc
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Mutantes bacterianos
II

temperatura sensveis (ts)

inativao de enzimas quando expostos a 37 ou 42 C, etc

resistentes a agentes inibidores de crescimento

antibiticos Apr, Kanr, Str, Cmr
(plasmideos)

bacterifagos - , P22, etc

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Crescimento bacteriano
tpica curva de crescimento

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Diluio em srie

10-3
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10-4

10-5

Clones bacterianos

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Transformao bacteriana
Griffith (1928)
D. pneumoniae

principio transformante termo-resistente

Avery et al. (1944) D. pneumoniae

uso de enzimas (DNAse, RNAse, etc)
DNA fator de transformao material gentico das clulas

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Transformao bacteriana

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Posicionamento de genes
genes E e F E e F
curva A ou B

E F
curva C

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Conjugao bacteriana
mutantes auxotrficos analisados em meio mnimo recombinantes prototrficos

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Davis tubo em U
necessidade de contato fsico entre as bactrias presena do filtro impede o surgimento de recombinantes

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Bactrias em conjugao

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Transferncia de material gentico

clulas F

clulas F

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Plasmideos bacterianos
plasmideos
autnomos X integrativos (epissomos) conjugativos X no conjugativos

operon tra

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Situao especial
Hayes (1953) HFR (AFR)
epissomo conjugativo

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Consequncias genticas
mobilizao de genes cromossomais para hospedeiras especiais
mapeamento de genes da doadora

sexoduo
transferncia especfica de determinados genes
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Exemplo de mapeamento
transferncia dos genes
azi ton lac gal
ton

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localizao dos genes

azi ton lac gal

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Generalizando

Mapa gentico do cromossomo da E. coli

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Transduo
eventos de recombinao envolvendo a transferncia de material gentico entre bactrias via bacterifagos

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Ciclo vital de um bacterifago

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Colnias de fagos (Placas de

Lise)

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Tipos de transduo
generalizada
fagos comuns Ex: M13, X174, etc

restrita
fagos especficos Ex; fago em E. coli

abortiva
situao anormal em que o cromossomo do fago impedido de agir normalmente
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Transduo generalizada

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Transduo restrita

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Mapeamento por transduo

os eventos de recombinao gentica via transferncia por fagos restringem-se s vizinhaas dos stios de insero do profago

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Mapeamento de regies muito especficas prximas ao ponto de insero dos profagos nos cromossomos das bactrias receptoras

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