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Materiales
Gradilla para tubos de ensayo 21 Tubos de ensayo de 1.5 x 10 cm
Reactivos
Cristales de Cafena Diclorometano Acetato de etilo n-butanol Etanol Metanol Agua destilada
Metodologa
De manera ordenada en una gradilla depositamos en 6 tubos de ensayo de 1.5 x 10 cm unos pocos cristales de cafena extrada del caf, en otros 6 tubos de ensayo al igual que en los anteriores depositamos cristales de cafena pero estos extrados del cacao. Hacemos lo mismo con los cristales obtenidos del t.
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Agregamos a cada tubo de ensayo un solvente (diclorometano, acetato de etilo, n-butanol, etanol, metanol y agua destilada) en la misma cantidad (de 2ml a 3ml). Agitamos fuertemente y observamos si han sido disueltos. IMAGEN
Resultados
Observamos que el grado de solubilidad (+: poco soluble, ++: soluble, +++: bastante soluble) de la cafena atiende a: CAF Diclorometano Acetato de etilo n-butanol Etanol Metanol Agua destilada + + + +++ ++ + CACAO ++ + ++ +++ +++ + T
MARCHA FITOQUMICA
Materiales
Gradilla para tubos de ensayo 25 Tubos de ensayo de 1.5 x 10 cm
Reactivos
Extracto de Caf, Cacao y T. Ninhidrina Rvo. Gelatina Tricloruro de hierro Rvo. Dragendorff Rvo. Mayer Hidrxido de sodio 5 % Rvo. Shinoda cido clorhdrico Rvo. Molish cido sulfrico
Metodologa
PREPARACIN DEL EXTRACTO Para preparar el extracto primero debemos conseguir la drogaya sea el caf, cafena o t. Las hojas o frutos que vamos a utilizar deben e star secos y reducidos hasta grnulos muy pequeos.
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Lo primero ser ubicar la droga por separado en un envase de vidrio mediano o pequeo de preferencia oscuro hasta llenar un tercio de ste para luego completarlo con alcohol de 96 recubriendo hasta dos dedos sobre la muestra. Este preparado debe dejarse macerarde unos 3 a 5 das en los que los metabolitos de la planta deben ser extrados a la solucin.
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Luego hay que separar los restos solidos del extracto aprovechando el tamao de los restos filtramos el macerado con unas capas de gasa (para que el tiempo de filtrado sea mnimo y ms sencillo)hacia un recipiente de porcelana (plato).
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Finalmente debemos dejar que el solvente del extracto se evapore para obtener los metabolitos y principios activos concentrados en el recipiente, esto lo hacemos a medio ambiente por unos das dependiendo de la droga o durante un da de secado en la estufa.
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MARCHA FITOQUMICA Las reacciones que vamos a realizar pertenecen al tipo de marcha fitoqumica general para reconocer cualquier metabolito ya sea primario o secundario. rimero debemos tener en P cuenta para qu clase de compuestos identifica (reacciona) cada reactivo.
Reactivo Reconocimiento Aminocidos libres Taninos Taninos y compuestos fenlicos Alcaloides Alcaloides Quinonas Flavonoides Carbohidratos o glicsidos flavonoides Medio para la Rx. En solucin acuoalcohlica. En solucin acuoalcohlica. En solucin acuosa cida (HCl 5%) En solucin acuosa cida (HCl 5%) En solucin acuoalcohlica. Con HCl y Mg (s) En solucin acuosa cida (H 2SO4) Reaccin positiva Coloracin violcea Coloracin amarilla y pp de protenas Coloracin marrnverdosa y pp de protenas Formacin de pp color rojo ladrillo Formacin de pp color blanco Coloracin rojiza Coloracin rojoviolcea Aparicin de un anillo violeta
Ninhidrina
Rvo. Gelatina Tricloruro de hierro (FeCl3) Rvo. Dragendorf Rvo. Mayer Hidrxido de sodio (NaOH 5 %) Rvo. Shinoda Rvo. Molish
Para el ensayo depositamos en8 tubos de 1.5 x 10 cm un poco de extracto de caf. En otros 16 tubos depositamos el extracto de cacao y t (8 para el cacao y 8 para el t). En un ltimo tubo de ensayo debemos hacer una prueba en blanco para notar los cambios que pod ran ser minsculos.
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Reacti o Ninhid ina Rvo. Gelatina Tricloruro de hierro (FeCl3 Rvo. Dragendorf Rvo. Mayer Hidrxido de sodio (NaOH 5 %) Rvo. Shinoda Rvo. Molish
Caf
Cacao
+++ + + + + +
+++ + + + + +
Se ev d e c a una mayor proporc n de compuestos fenlicos en la droga y una concentracin menor de otros compuestos como quinonas flavonoides y alcaloides (familia a la que pertenece la cafe na).
Se obse v
CONCLUSIONES
Tendra que leer los objetivos para aumentar las conclusiones pero weno ah van; El objetivo del proyecto de investigacin que hemos desarrollado pretende cuantificar los niveles de cafena en ciertas plantas como el caf, cacao y t para corroborar la informacin que se tiene de estas as como consolidar la informacin de los mtodos conocidos para su obtencin (recoleccin, desecado, extraccin, purificacin, etc.). La extraccin de esta metilxantina comprende muchos mtodos posibles para hacer efecto. Para su obtencin y purificacin en cantidades menores el mtodo aplicado de reflujo es el adecuado y eficiente con lo que respecta a cantidad y pureza obtenida. Para la obtencin a escala industrial (consumo como infusin) no se necesita de todo este proceso pues se expende el caf instantneo que son los granos de la planta de caf seco en polvo ogranulado, este se puededisolver rpidamente en agua caliente para ser consumido. El caf o t que se obtiene para consumo tipo instantneo al ser simplemente sometido a extraccin y secado, podemos asegurar que contiene no solo cafena sino otras sustancias con efectos semejantes como la teobromina y teofilina, nuestro estudio demuestra la presencia de otros metabolitos alcaloides, carbohidratos, flavonas, quinonas, e incluso compuestos fenlicos que por cierto se encuentran en mayor porcentaje.
BIBLIO Ensayos de Reconocimiento de Metabolitos Secundarios de Inters Farmacutico Alejandro . Martnez M. UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA-FACULTAD DE QUMICA FARMACUTICA Evans WC. Farmacognosia. Madrid: Interamericana-McGraw-Hill, 1986;519-40. Kuklinsi C. Farmacognosia. Barcelona: Omega, 2000.
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA - FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS Y FARMACIA. Tesis para optar ttulo de Qumico Farmacutica: Cuantificacin de cafena en caf nacional tostado y molido comercializado en la Ciudad de Guatemala .Yesenia del Rosario Daz Carrera