Captulo Uno EL CRECIMIENTO DE UN EMBRIN ES BASADO EN LA DIVISION REPETITIVA DE CELULAS PUEDE UNA FUERZA VITAL DIRIGIR EL DESARROLLO ANIMAL?

El desarrollo de un animal comienza cuando un espermatozoide, el cual es esencialmente un paquete mvil de genes masculinos, fertiliza un vulo. El vulo no solo contiene los genes femeninos, sino tambin una unin compleja de molculas necesaria para empezar el desarrollo. La transformacin de un vulo fertilizado a un animal maduro es un proceso muy complejo. Pueden todos estos cambios precisos ser el resultado de una interaccin de las molculas del componente de un vulo de acuerdo a las leyes normales de qumica? Hasta hace poco, muchos bilogos pensaron que la respuesta era no. Pensaban que una fuerza vital adicional debe o perar en las clulas vivientes. Hay que considerar las teoras de los vitalistas, pues estas estn fundamentalmente relacionadas c on el tema de este libro. Existen dos teoras de los vitalistas (teoras que posiblemente pueden ser comprobadas por un experimento) Una de ellas procede de Justus Von Liebeg, bioqumico alemn del siglo XIX. Est de acuerdo con los mecanicistas en que un organismo vivo es el resultado del emplazamiento correcto de las molculas de su componente y que un organismo vivo, en teora, puede ser creado en un laboratorio. Pero l crea tambin que cuando las molculas del componente estn en estas posiciones, una nueva fuerza de la naturaleza se manifiesta por s misma. Esta fuerza es inherente en todas la molculas sin embargo solo acta en la estructura compleja de la clula. La posibilidad de que haya una fuerza vital todava era considerada en 1945 por el granfsico, Erwin Schrodinger en What s Life? Este libro persuadi a varios fsicos para orientarse ms a la biologa con la esperanza de descubrir nuevas leyes naturales. Schrdinger hace una metfora de esta fuerza vital, tomando en cuenta a un fsico que si bien conoce la mquina de vapor (un tren), viene de encontrar el motor elctrico por primera vez. Se niega a creer que un tren pueda estar siendo conducido por un fantasma (referencia a la fuerza vital que da origen a un organismo vivo). Contrariamente, los vitalistas de la SEGUNDA teora s crean en una fuerza fantasma y que la base de la vida se encuentra fuera del reino normal de la ciencia. La segunda teora surge de Hans Driesch, embriologo alemn. Hizo aportes fundamentales al tema. Se convenci de que el desarrollo animal nunca seria explicado solamente por la interaccin de fuerzas de la naturaleza del tipo tpicamente investigado por cientficos. Crea que los organismos vivos son muy diferentes a los organismos inertes en la posesin de una fuerza vital, extraa a cualquier fuerza familiar a los cientficos. El propsito de dicha fuerza es hacer que un organismo vivo debera crecer hasta estar maduro y reproducirse. Acta direccionando las partes del componente del organismo por caminos que estos nos tomaran bajo la sola influencia de las fuerzas normales de la naturaleza y as provocando al organismo a desarrollarse y funcionar correctamente. Driesch afirma que la existencia de esta fuerza estaba comprobada mas all de toda duda razonable por ciertos experimentos realizados en embriologa.

Por ejemplo, cuando el vulo fertilizado de un erizo de mar se desarrolla hasta llegar a ser adulto, ste se divide primero en dos clulas; cada unas de estas clulas se dividen en otras dos para producir cuatro, y cada una de estas cuatro al seguir dividindose eventualmente dan origen a las diferentes partes del erizo adulto. Pero, si estas cuatro clulas son separadas y autorizadas a desarrollarse separadamente, cada parte forma, no diferentes fragmento del adulto, sino un erizo s de mar adulto respectivamente. Driesch concluye entonces que las cuatro clulas son idnticas y que las fuerzas normales de la naturaleza no podran dejar desarrollar diferentes partes de un adulto de cada una de cuatro clulas idnticas. La accin de la fuerza vital directiva de Driesch requiere la violacin de las leyes normales de la naturaleza solo en los organismos vivos y Driesch consideraba detalladamente cmo podra ocurrir tal violacin. Hasta los ms famosos embriologos experimentales de todos los tiempos tenan sus dudas sobre el vitalismo. Se puede experimentar cada una de estas teoras con el fin de descubrir si los organismos vivos pueden ser completamente explicados por la interaccin de las partes de su componentesegn las leyes normales de qumica y fsica. Durante ltimos 50 aos, bilogos moleculares han demostrado que los procesos fundamentales de las clulas vivas estn basados en la interaccin de macromolculas acorde las leyes normales de qumica. Ninguna fuerza natural nueva del tipo que sugieren Liebing o Schrodinger parece formar acto en estos procesos. Sin embargo recientemente se demostr con poca evidencia experimental que la fuerza directiva vital del tipo que sugiereDriesch no es requerida para el desarrollo del vulo fertilizado a la madurez. sta evidencia est siendo ahora provista por los experimentos en este libro. Como resultado el cerebro se est convirtiendo en la ltima parte del cuerpo donde no es completamente irrazonable sugerir una fuer vital operando. za

DIVISION DE CEULAS EMBRIONALES Los animales estn compuestos por clulas que se incrementan en nmero por la divisin de una clula en dos (mitosis). El desarrollo animal es la transicin desde una sola clula del vulo fertilizado a un adulto multicelular; por lo tanto la divisin celular es incluida fundamentalmente en el proceso de desarrollo. Imagen microscpica de una clula animal. Citoplasma Retculo endoplasmtico Ribosomas La doble membrana nuclear es atravesada en muchos punt por poros nucleares. Los poros os dejan entrar todo menos a las molculas mas grandes desde el citoplasma al ncleo. Distintas estructuras en la clula. Algo que no est en el diagrama de la imagen es el citoesqueleto desde el cual sus filamentos ramifican a lo largo de la clula y estn pegados a ciertas estructuras. Estos filamentos son importantes en dirigir la divisin celular y en causar cambios en los movimientos y forma de las

clulas, lo que ocurre repetidamente durante el desarrollo animal. Los 3 tipos de filamentos son: filamentos de actino o microfilamentos, microtubulos (se degradan pero se forman de nuevo) y filamentos intermedios (los ms estables). Los filamentos de actino estn puestos entre la clula por molculas conectivas de la protena actino hecha cadenas largas, las cuales son una molcula gruesa pero en forma de hlice. Cuando se asocia con filamentos compuestos por la protena miosina, grandes formaciones de filamentos de actino pueden contractarse en longitud, como pasa en las clulas de los msculos. Una red densa de filamentos de actino, asociados con otras protenas, se queda bajo la clula para formar el crtex, el cual le da fuerza a la clula y dirige los cambios de su forma y movimientos. Los filamentos de actino tambin se ramifican por todo el citoplasma. Los microtubulos estn formados por molculas conectivas de la protena tubulina en largos profilamentos; 13 de estos protofilamentos estn alineados lado a lado en un tubo vacio para formar el microtubulo. Los microtubulos son menos abundantes que los filamentos deactino y son formadas en el centrosoma al lado del ncleo se difunde desde el. Filamentos intermedios, los cuales estn compuestos por protenas fibrosas, se extienden desde alrededor del ncleo hasta la membrana celular y aparentemente estabiliza a la clula. El requerimiento esencial en la mayora de divisiones celulares es producir dos clulas hijas con el mismo nmero de cromosomas (por lo tanto tambin de genes) desde la clula primaria (la excepcin es la espematognesis y ovognesis). Los movimientos de la divisin celular esta controlados por el citoesqueleto, el cual tambin determina los tamaos relativos a las clulas hijas y la distribucin de los componentes de la celular entre ellas. La divisin es precedida por la desintegracin de la membrana nuclear y por la visibilidad y condensamiento de los cromosomas.--- revisar proceso de mitosis y componentes--Durante el desarrollo animal, una clula primaria debe dar origen a las clulas hijas, las cuales, a pesar de tener cromosomas similares a l mismo, se diferencian de ella en tamao y composicin molecular. El tamao, la composicin y posicin de las clulas hijas es determinada por la posicin del anillo contrctil. Este siempre se forma a la mitad entre los centrosomas, de los cuales su posicin es determinada por los filamentos de actino del corte celular. El periodo entre la formacin de una nueva clula por la divisin de su clula primaria hasta la divisin de la nueva clula en otras dos es conocido como ciclo celular. Los siguientes son diferentes tipos de ciclos celulares que ocurren animales en desarrollo. 1. El ciclo en el que la clula duplica su peso, as duplicando cada uno de sus componentes, seguido por una divisin equitativa dando origen a dos clulas hijas idnticas a la clula primaria. 2. El ciclo en el que la clula tambin aumenta de peso, pero tambin cambia su composicin molecular. Entonces esta se divide en dos clulas idnticas, pero diferentes a la clula primaria. 3. El ciclo en el que la clula tambin aumenta de peso, con o sin cambio en su composicin molecular, pero en este se da una divisin asimtrica. Los componentes de la clula estn divididos desigualmente para formar 2 clulas. Estas clulas hijas son diferentes en composicin molecular y en tamao. 4. El ciclo similar al ciclo 3 excepto que solo una de las clulas hijas es diferente a la clula primaria, por lo tanto conservando la misma poblacin de la clula original.

5. Un ciclo en el que se da origen a dos clulas idnticas, pero en el cual la divisin no es precedida por algn incremento de peso celular, aunque nuevos cromosomas y membranas nuclear y celular son formados al costo de otros componentes. Las clulas hijas tienen la mitad del volumen de la celular original y un radio mayor de superficie celular para los contenidos celulares. La primera divisin del ovulo fertilizado de muchos animales es de esta manera. 6. Similar al ciclo 5 en que no se aumenta el peso celular, pero en el cual la divisin es asimtrica, formando dos celular de diferente composicin, tales ciclos ocurren temprano en el desarrollo de muchos animales. 7. Un ciclo truncado en el que la celular cambia en su composicin pero no se divide. Tales ciclos ocurren hacia el final el desarrollo para formar clulas especializadas que nunca se dividirn de nuevo. Ej.: glbulos rojos.

DESTINO CELULAR Y LINEAJE Uno de los primeros requerimientos para estudiar el desarrollo es ordenar nuestro pensamiento sobre la divisin celular, y esto ha necesitado la creacin de cierta jerga. Por ejemplo, una poblacin de clulas formadas por la divisin de una clula individual, y la divisin de las clulas hijas de esta, es llamada clon. Por lo tanto todas las celular de un animal maduro son un clon descendente del vulo fertilizado; aproximadamente la mitad de estas clulas son un clon descendiente de una celular del embrin de dos clulas, aproximadamente un cuarto de estas clulas son un clon de una de las 4 clulas del embrin, y as sucesivamente. El clon ms pequeo en un animal es 2 clulas derivadas de la misma celular primaria. Estos clones ms pequeos son subclones. Las clulas de un subclon puede o no pueden ser adyacentes entre s en el adulto, pues muchas clulas migran y se separan despus de su formacin. Se dice que toda clula de un animal en desarrollo tiene un destino celular, el cual consiste en dar origen a un clon particular de clulas progenies, aunque in practica estas no pueden ser siempre identificadas. Por lo tanto l destino de un vulo es producir toda clula del embrin en cualquier etapa del desarrollo; el destino primario del espermatocito es producir cuatro celular espermticas maduras; el destino de un glbulo rojo inmaduro es producir un glbulo rojo maduro. En cambio, cada celular de un embrin o adulto tiene un linaje celular preciso. El linaje de cada celular rastrea de vuelta hasta el vulo fecundado a travs de una serie de clulas. La terminologa reciente clarifica nuestro pensamiento sobre las divisin celular y nos gua hacia hacer estudios precisos del destino celular y linaje celular, los cuales han aportado importantes pistas al mecanismo de desarrollo. Varios mtodos de estudio son usados, el ms simple es el de estudiar embriones completos o secciones del embrin bajo un microscopio en varios nivele del s desarrollo. Este mtodo lleva al descubrimiento de qu clulas dan origen a qu tejidos. Otro posible mtodo es destruir los grupos de clulas en un embrin mediante un rayo laser y buscar los tejidos faltantes en un nivel mas tarde de desarrollo. Tambin, una clula individual, o un grupo de clulas, puedes ser etiquetadas y sus clulas descendentes podrn ser identificadas en un nivel ulterior. Las clulas en la superficie del embrin puedes ser etiquetadas por colores, pero este color se vuelve invisible despus de unas cuantas divisiones celulares. Para ms xito, cierto fluorescente ties o enzimas pueden ser inyectadas en clulas individuales desde una aguja delgada de vidrio bajo un

microscopio, y las clulas descendientes puedes ser identificada por la fluorescencia o color producido por la accin de la enzima. DIVISION CELULAR EN EL OXIURO En la mayora de animales, la secuencia de divisin celular es ligeramente diferente de un individuo a otro. Esto limita la precisin de estudios sobre el destino de la clula y linaje de la clula. Pero es posible imaginar una especia de animal en el cual, a cada paso en el desarrollo de vulo a adulto, cada individuo tendr el mismo nmero de clulas de cada tipo emplazadas en exactamente la misma posicin relativamente (como un condominio de casas y su construccin). Afortunadamente, un animal, caenorhabditis elegans, se acerca a este tipo terico y provee un modelo para estudiar la divisin celular en desarrollo. C. elegans es un oxiuro, de aproximadamente 1mm de largo, el cual normalmente vive en la suciedad y se alimenta de microorganismos. Una poblacin puede mantenerse viva por el almacenamiento de glicerol en lquido nitrgeno y cuando es requerido, puede crecer y reproducirse a 20C en cultivos de bacterias escherichia coli. El C. elegans adulto tiene un largo cuerpo simtrico hecho de tejidos familiar como msculos, nervios, y una piel externa. Es transparente a travs del desarrollo y el ncleo celular puede ser visto en animales vivos bajo un microscopio. El ovulo fertilizado se desarrolla a adulto en dos etapas. Aproximadamente a 13 horas de la fertilizacin, se ha desarrollado un pequeo gusano con 556 clulas en el macho. De ah se separa del ovulo empezando el desarrollo a adulto. Todo adulto macho tiene exactamente 1031 clulas (aparte de alrededor de 1000 clulas espermas), y estas clulas estas emplazadas relativamente en las mismas posiciones en todo individuo, as como tambin los estn las clulas en cada etapa del desarrollo a adulto. (Para ser estrictamente preciso, el nmero determinado se refiere a clulas nucleares ms que a clulas, pues el ncleo ocasionalmente no est separado por membranas celulares.) Su estructura celular exacta a cada etapa del desarrollo ha sido laboriosamente deducida hace varios aos. Cada embrin fue puesto en un portaobjetos de microscopio y cubierto con un vidrio cubreobjetos. Despus de incubar, el gusano fue alimentado por a debajo del cubreobjetos con una suspensin de bacterias E. coli y pudo arrastrarse en la superficie de gel. Fue posible grabar a cada etapa las posiciones tomadas por la progenie de cada ncleo dividindose, y, excepto por la clula ncleo del esperma, estas posiciones son idnticas en cada individuo. Observaciones fueron grabadas por dibujos y fotografas y por video secuencial grabando para permitir fotos en movimiento del desarrollo. El destino de cada clula puede ser precisamente especificado por los cdigos de sus clulas progenie y su linaje por los cdigos de sus ancestros, gracias al rastro que se puede detectar por la clasificacin de cdigos particulares asignados a cada clula en cada etapa para su identific acin. Virtualmente son las mismas clulas. Como mencionado antes, la mayora de diferentes tipos de divisin que pueden tener las clulas ocurren en el linaje del C. elegans. Despus de la fertilizacin, la clula del ovulo se divide sin crecer para dar origen a clulas que se diferencian una de la otra y de la clula primaria. Hay puntos en el linaje de la clula esperma que una clula da origen a un clon idntico a esta por una serie de ciclos celulares en la que la clula suplica tu tamao y se divide en dos clulas idnticas a la original, manteniendo as la poblacin de clulas precursoras de espermas. Tambin se encontr un ciclo en

el que se da origen a dos clulas idnticas que se diferencian de su clula primaria y ciclos en el que una clula hija es idntica a la clula primaria y la otra clula hija no. Ciertas conclusiones importantes pueden ser sacadas sobre el desarrollo del c.elegans de su linaje. Primero, no hay un plan simple subyacente. Han sido hechas previamente sugerencias en las que toda clula adulta de un tipo particular, como clulas nerviosas (neuronas), son un clon derivado de un ancestro individual, pero esto no es verdad para este nematodo.Todas las clulas espermas y todas las clulas intestinales en el linaje son miembros de clones que no incluyen ningn otro tipo de clula, pero todos los dems tipos de clula son originados en varias ramas del linaje en general con clulas de diferente tipo. Algunas ramas incluso terminan en una divisin que produce dos clulas diferentes como musculo o nervio. Esto tiene implicaciones importantes para comprender las bases moleculares del desarrollo: concretamente, la teora es excluida que los genes peculiares a un cierto tipo de clula permanecen potencialmente activos solo en una rama del rbol de linaje. Otros rasgos interesantes incluyen muerte celular programada, apoptosis, en el que las clulas siempre mueren antes de que el desarrollo sea completado, siendo parte de un mecanismo para darte una c orrecta estructura al cuerpo. Tambin, el tiempo tomado para completa un ciclo celular es constante entre cada rama principal del linaje pero difiere de una rama principal a otra, un punto de inters para aquellos que intentan entender los mecanismos que controlan la divisin celular. Tales estudios de un gusano oscuro puede haber sido pensado tener poca relevancia para el desarrollo humano, pero esta perspectiva tiene poca justificacin. Hace casi 50 aos, para la sorpresa de bioqumicos, las interacciones moleculares que controlan la produccin de energa y herencia de las clulas vivas fueron encontradas remarcablemente similares de bacteria a humano. Se concluy que las todava no descubiertas interacciones moleculares que controlan el desarrollo animalserian tomadas como similares de un animal a otro. A medida que estas interacciones fueron descubiertas, diferencias inesperadas aparecieron cuyos significados fueron poco claros. Sin embargo, muchos mecanismos moleculares fundamentales ahora estn siendo tomados remarcablemente similares entre animales separados por millones de aos de evolucin. Claramente, cualquier animal que es especialmente adecuado para estudio experimental debera ser estudiado.

DIVISION CELULAR EN MOSCAS DE FRUTA

La divisin celular en la mayora de animales es menos ordenada que en el c. elegans. Animales ms altos tiene muchas ms clulas, y los adultos difieren ampliamente en el numero de cada tipo de clula y hasta cierto punto en el emplazamiento celular. Por los tanto, cada clula a cada etapa del desarrollo no puede incluso en teora ser nicamente identificada o asignada un destino exacto o linaje. Sin embargo, informacin menos precisa sobre el destino celular puede ser descubierta, la cual puede ser til. Lo que sigue son varios factores sobre la divisin celular en otros 3 embriones en los cuales se est concentrando investigacin: moscas de frutos, sapos y ratones. La mosca de fruta, drosophyla: es fcilmente criada en un laboratorio y tiene un ciclo corto de vida. Moscas mutantes con genes defectuosos son fcilmente producidas desde padres que han estado expuesto a radiaciones x o que han sido alimentadas con qumicos mutognicos, y

recientemente esto ha permitido descubrimientos importantes sobre el mecanismo de desarrollo que ser expuesto. Al principio de su desarrollo de la mosca, como en otros insectos, es diferente de otros animales en que su ncleo se prolifera pero no se crean nuevas clulas. Despus de la fertilizacin, el ncleo del esperma se une con el ncleo del ovulo para forman un ncleo individual del ovulo fertilizado, el cual despus se divide para dar origen a dos nucleocelulas hijas. Sin embargo, estas no son rodeadas por membranas celular para dar origen a celular separas como en la mayora de animales. En vez de eso, el ciclo de divisin nuclear es repetido 7 veces ms en sincrona para dar 256 ncleos distribuidos a travs del citoplasma de la clula ovular. Unos cuantos de estos ncleos dan origen a un grupo de aprox. 40 celulares polo ( o polares?) en la zona posterior del huevo (clula ovular) los cuales son los ancestros de los huevos adultos o celulares espermas. Despus de 3 horas fertilizacin, alrededor de 6000 ncleos forman una capa individual de clulas (blastodermo) debajo la superficie del huevo. Un da despus de la fertilizacin, una larva con forma de gusano incuba desde el huevo. Se alimenta y crece y despus de 4 das ms, secreta cutcula para formar la pupa inerte entre la cual la mosca adulta se desarrolla y emerge unos das despus. Los estudios de linaje y destino celular en la mosca son influenciados por el factor de desarrollo a adulto que ocurre en 2 etapas: 1. Desde huevo a pupa 2. De pupa a mosca adulta. La primera etapa es precisamente ordenada. El desarrollo es ordenado pues empieza con una capa individual de clulas de blastodermo. Las clulas adyacentes en el blastodermo tienen a dar origen a clulas progenies, las cuales yacen cerca una de la otra en la larva. El blastodermo primero se somete a la gastrulacin doblndose hacia adentro para formar dos capas celulares que estn cerca una de la otra: el ectodermo y el endodermo. Entre estas dos capas se forma una tercera, el mesodermo. A partir de estas tres capas, diferentes rganos de la larva se desarrollan. El resultado importante de la gastrulacin es este: las clulas que estn para formar diferentes tejidos se acomodan en donde deben estar posicionados y as donde los tejidos debern ser formados respectivamente. La epidermis de la larva es formada por pequeas reservas de celular epidrmicas larvales llamadas discos imaginales y canastas de histoblastos. Cada disco imaginal est compuesto por una capa de clulas similares-aparentes en la forma de un globo colapsado. Las clulas de la canasta de histoblastos se dividen para formar la epidermis del abdomen. Recombinacin mittica (Cross ovar) Despus de varios factores descubiertos gracias a la mosca, una comprensiva teora de mosaico de desarrollo animal fue construida a partir de ellos. Al proceder la divisin celular, las clulas por todo el embrin son satisfactoriamente divididas y subdivididas en compartimientos por la activacin a cada paso de un selector gentico particular en un subgrupo de celular y los compartimiento subsecuentemente desarrollan unidades parcialmente independientes. Cada gen selector activo producira 2 cambios. 1. Provocara a las clulas a adherirse para formar un compartimiento y 2. Rendira aquellos genes que son necesitados para formar las estructuras caractersticas del compartimiento accesible para inducir seales que aparecieran despus.

DIVISION CELULAR EN LAS RANAS Xenopus laevis es un tipo de sapo sudafricano con garras. Estos animales son fcilmente contenidos en tanques de agua y necesitan ser alimentados por unas bolitas compuestas 3 vecesa la semana, seguido por un cambio de agua. Por una inyeccin de gonadotropina corinica las , femeninas maduras pueden ser inducidas a poner huevos cada ciertos meses, y los masculinos puede ser inducidos a fertilizar los huevos por una inyeccin de la misma hormona. Pequeas cantidades de soluciones experimentales pueden ser fcilmente inyectadas a los huevos, los cuales miden aprox. 1.3 mm de dimetro, y para inyectarlo en celular de embrin temprano desde una aguja de vidrio manipulada por un micromanipulador. Pequeos fragmentos de embriones no maduros continan desarrollndose en soluciones salinas porque las clulas tienen reservas de nutrientes en forma de yema. Las clulas del huevo del xenopus son rodeadas por una membrana vitelina protectora, transparente y stas estn incrustadas en gel. La mitad superior de cada huevo a medida de q este ue flotando en agua es visiblemente diferente del fondo, y cada una da origen a diferentes partes de los cuerpos. La parte inferior, conocida como hemisferio vegetal, se convierte en la parte trasera del embrin. Es de color amarillo plido y sus citoplasma es empaquetado con grnulos de yema que alimentan al embrin hasta que este se incuba rompiendo avtravs de la membranas del huevo y as este ya est preparado para alimentarse. La mitad superior del huevo, el hemisferio animal, se convierte en la parte delantera del embrin. Tiene granos de color negro o marrn oscuro yaciendo cerca de la superficie, bajo la cual est el ncleo del huevo, y su citoplasma tiene menos grnulos de yema que la del hemisferio vegetal. A pesar de que las partes superior e inferior del huevo xenopus son visiblemente diferentes y forman diferentes partes del cuerpo, el huevo sin fertilizar es radialmente simtrico partir de una lnea imaginaria que pasa desde el polo animal al polo vegetal, queriendo decir que la biseccin a lo lardo de esta lnea siempre produce mitades idnticas. Esta simetra es rota por la entrada del espermatozoide, la cual ocurre adentro del hemisferio animal hacia el ecuador del huevo y deja un punto de entrada negro de esperma en la superficie del huevo. El punto de entrada est en la parte baja del embrin no maduro y determina el axis dorsal-ventral del embrin. La fertilizacin es seguida por la rotacin de la parte de afuera del huevo en relacin al interior. El huevo est compuesto por dos unidades rgidas: la membrana celular mas el crtex subyacente con su red de filamentos de actina y un centro largo esfrico. Esta rotacin es esencial para el desarrollo correcto subsecuente. 90 minutos despus de la entrada del espermatozoide, el huevo se divide en 2 clulas a lo lardo de un plano que pasa por los polos animal y vegetal y tambin por el punto de entrada del espermatozoide. Despus de otros 35 minutos, estas clulas se vuelven a dividir. Despus de otros 35 minutos estas clulas se dividen en 8 clulas por un plano que pasa a travs del ecuador del huevo entre los polos vegetal y animal para separar la parte trasera de la delantera del embrin. Eventualmente se forman 2048 celular agrupada en una blstula esfrica con una cavidad, el blastoscele, detrs del polo animal. Hasta este punto estas divisiones celulares se llaman divisiones de segmentacin, pues estas subdividen la masa preexistente esfrica del citoplasma sin crecimiento del embrin. Hasta despus de al menos 8 ciclos de divisiones celulares, el nmero y posicin de las clulas de cada embrin son

casi idnticos. Despus de 11 divisiones la sincrona termina, el ciclo celular se estira, y el numero, posicin y tamao de las clulas son diferentes entre s. La invaginacin es un movimiento hacia dentro de las clulas que da origen a 19000 clulas. Finalmente despus de desarrollos ulteriores al costo de la yema, el renacuajo sale del huevo en aprox 4 das despus de la fertilizacin para crecer y mediante metamorfosis convertirse en una rana adulta. Las clulas con destino se encargas de darle forma al cuerpo. La gastrulacin envuelve el movimiento de las clulas del hemisferio vegetal hacia el interior y el estiramiento del hemisferio animal para cubrir todo el embrin. La invaginacin empieza en el blastoporo. Un punto de fuga de sangre bajo del ecuador opuesto al punto de entrada del espermatozoide. La invaginacin esms extensa en el labio dorsal de esta fuga de sangre. Las clulas progenies del hemisferio animal de la blstula se convierten de clulas del ectodermo, incluyendo clulas de la epidermis, la cual cubre la superficie exterior del embrin y de las clulas nerviosas. Las clulas del hemisferio vegetal se mueven hacia adentro para dar origen a las clulas del endodermo, las cuales incluyen clulas del intestino y del aparato respiratorio. Pronto despus de la gastrulacin el ectodermo del lado dorsal se dobla para formar el tubo neural del cual se desarrollan el cerebro y la medula espinal. DIVISION EN EMBRIONES DE RATONES Para no estudiar en humanos, se ha utilizado el estudio en ratones pues estos son fciles de criar y tiene un periodo corto de gestacin de aprox 21 das. Los vulos en los ratones son pequeos y casi sin yema, pues los nutrientes son prov istos de del flujo sanguneo materno. Zona pelcida importante. El ovulo fertilizado da origen al embrin en s y a tejidos extraembrionarios como la placenta. En un momento dado del desarrollo las 8 clulas del blastocito se compactan. Y despus de 3 das y medio se forma una capa gruesa celular el trofectodermo?. En cual encierra una cavidad llena de fluidos (blastocele). Durante la manipulacin en el cultivo de embriones de ratones, muchas manipulaciones son posibles. Por ejemplo, dos embriones diferentes, o clulas tomadas de estos, pueden ser comprimidos y fusionados y desarrollados para un solo embrin. CAP2 COMO PUEDE UN EMBRION ADQUIRIR LA FORMA CORRECTA DURANTE LA DIVISIN DE SUS CELULAS LA FORMA EN QUE LAS CELULAS SE DIVIDEN PUEDE DETERMINAR EL TAMAO Y LA POSICIN DE SUS CELULAS HIJAS Y ASI INFLUENCIAR LA FORMA DEL EMBRIN La transformacin a un ser humano desde un cigoto, es el resultado de las divisiones celulares repetitivas durante las cuales cambios controlados en la composicin molecular son introducidos en las clulas correctas en el momento correcto. Estos cambios en la composicin alteran el comportamiento de las clulas de manera que esto determina la forma del desarrollo del embrin. Este proceso se conoce como morfognesis.

Un factor que influye en la forma de un animal es la posicin de la segmentacin rugosa en la divisin celular; esto determina el tamao relativo y las posiciones de las clulas hijas. Estudios de las primeras dos divisiones celulares del ovulo fertilizado han demostrado con las clulas resultantes adquieren su tamao y posicin correcta. Durante la divisin celular, el anillo contrctil de filamentos de actina detrs de la superficie de la clula, el cual da origen a la segmentacin rugosa, siempre se forma a medio camino entre los dos centrosomas esfricos del huso. (Ver imagen 2-1). En los vertebrados xenopus (ranas) el tamao y la posicin de las clulas cuando embrin se encuentra formado por 8 de estas, siempre son determinadas de esta manera. Pero los embriones mamferos son excepcionales,: las primeras 3 divisiones producen 8 celular similares, pero su emplazamiento varia de un embrin al otro. Sin embargo, la segmentacin rugosa en la cuarta serie de divisiones es similarmente emplazado en cada embrin y produce 8 clulas al exterior y 8 pequeas clulas en el interior. Experimento de crianzas han demostrado que la direccin del espiral en los caracoles es determinada nicamente por la madre del embrin y por lo tanto resulta de la estructura del ovulo no-fertilizado. Esta direccin es determinada por un par de genes homlogos, uno derivado de la madre del padre y otra por su madre. EL CAMBIO EN LA FORMA DE UNA CELULA, DIVISIN CELULAR LOCALIZADA Y MUERTE CELULAR PUEDE INFLUENCIAR EN LA FORMA DEL EMBRIN. Las clulas embrionales suelen cambiar de forma como resultado de un estmulo de afuera de la clula. Esto pasa en los epitelios, provocndolos a doblarse en estructuras complejas. El doblamiento del ectodermo dorsal en embriones de ranas y en tritones para formar el tubo neural, el cual es el precursor de la medula espinal y del cerebro, ha sido estudiado en detalle. ESTUDIAR CLASE DELA VIEJA PUTA DEL TUBO NEURAL. Los cambios de la forma de las clulas para formar del tubo neural(ectodermo) parecen ser originados adentro del a clula. Este cambio desde luego es producido por el tejido subyacente (mesodermo) . Ejemplos de rganos resultantes de la especializacin de clulas, partir de estudios son los siguientes: glndulas mamarias, glndulas salivales, pncreas y pulmones. Las clulas de los embriones tempranos son en su mayora agrupadas en los epitelios que estn estabilizados por adhesin a una matriz extracelular. ALGUNAS CELULAS MIGRAN PARA FORMAR TEJIDOS EN PARTES DISTANTES DEL EMBRION. Cerca de 40 clulas del mesodermo son liberadas en la cavidad central de la blstula del erizo de mar, y proceden a arrastrarse individualmente o en pequeas partes hacia la superficie interna. Este movimiento que producen para arrastrarse es equivalente el movimiento de las amebas unicelulares. vulos y espermas en todos los vertebrados son formados desde las clulas germinales primordiales.

En la parte superior del tubo neural es un embrin femenino temprano se encuentran clulas de la cresta neural, las cuales migran para dar origen a diferentes tipos de clulas en todo el embrin. La migracin de clulas de la cresta neural puede ser estudiada haciendo uso de clulas de codorniz. Codornices y pollos son emparentados de manera cercana, pero las clulas de codornices pueden ser distinguidas bajo un microscopio por un punto negro de la heterocromatina condensada en su ncleo. Existen varias maneras de marcar a las clulas con el fin de encontrarlas en etapas de desarrollo ulteriores y ver de donde surgen (linaje celular) y as tener ms conocimiento sobre la especializacin y linaje celular. Tal y como se hizo en los pollos, pues en esta se implanto clulas radioactivas de cresta neural en embriones tempranos de pollos. A lo largo del tubo neural estn grupos repetidos de clulas llamadas somitas, las cuales son los precursores de los tejidos muscular y conectivo. Fibroblastos, clulas de tejido conectivo, pueden ser aislados de los embriones, encubndolas brevemente con la enzima tripsina, la cual debilita la adhesin entre ellas. Cuando 2 fibroblastos en cultivo chocan, estos dejan de moverse. Al pasar esto, se forman protuberancias en sus bordes principales con el que chocan, para as separarse, sin embargo si estas son bloqueadas por otras clulas, pueden adherirse una a la otra de un amanera est ble. Este a fenmeno es muy importante en la formacin de tejidos animales. Solo ciertas clulas migran en cierto tiempo. Lo que provoca que estas clulas migren hacia la direccin correcta y paren en el lugar correcto es inconcluso. Ciertas bacterias se mueven por quimiotaxis; lo que quiere decir migran de una baja a una alta concentracin de un qumico en particular. Fibras nerviosas de tritones parecen moverse hacia concentraciones ms altas de un factor de crecimiento nervioso. En resumen, lo que hace que las clulas se muevan a ciertos espacios donde pertenecen es inconcluso as como lo que provoca parar en donde deben para cumplir con sus objetivos. Sin embargo se sugiere que las fibras extracelulares pueden guiar la migracin de clulas hacia su destino correcto. Desde experimentos en clulas cultivadas, tambin parece que las clulas migrantes puedes ser dirigidas a lo largo de caminos correctos a travs del embrin por gradientes de adhesin creciente. Se concluy entonces que las clulas que migran forman continuamente protuberancias en todas las direcciones, pero estas protuberancias son ms fuertes dependiendo a que base se estn adhiriendo (en el experimento se vio que las que estaban pegadas a un plstico eran ms dbiles que las que se pegaron a un metal llamado paladio). ADHESIONES CELULARES INFLUENCIAN LA FORMA DEL EMBRIN La adhesin entre celular no parece meramente estabilizar tejidos despus de su formacin, sin embargo estas parecen dirigir la unin de clulas para formar tejidos. Se dice que los diferentes tipos de clasificacin celular que sucede al momento de darle forma al embrin estn fundados en los diferentes tipos de adhesin y asemeja la separacin de dos

lquidos inmiscibles (que no se mezclan) de los cuales sus molculas se adhieren con diferentes concentraciones. La clasificacin celular por este mecanismo puede ser un resultado de la posesin de sitios de adhesin de tipo individual en la superficie de cada clula, la cuales se adhieren a sitios idnticos en otra clula, la cual sera diferente en nmero de sitios compatibles por unidad de rea de la membrana. Estos experimentos has sugerido que las adhesiones celulares son importantes para la unin de clulas para formar tejidos, y pues experimentos en embriones vivientes han confirmado esto. Por ejemplo un embrin en etapa temprana de gstrula es compuesto por tres tipos distintos de clulas: endodermo, mesodermo, ectodermo; la cuales forman tejidos corporales ulteriormente. TIPOS DE ADHESIN CELULAR Las adhesiones surgen de uniones celulares estables y de ms interacciones mviles entre molculas de adhesin celular individuales. Los cruces de clulas son formados entre clulas cultivadas, lo cual permite estudiar su estructura. Puede ser divididas en: uniones estrechas, desmosomas en banda (unin de ancla) y uniones gap. Las uniones estrechas son compuestas por hebras protenicas que rodean la parte superior de las clulas epiteliales y las ata juntas de cerca, ayudando as a mantener la estructura del epitelio. Durante el desarrollo estas uniones son encontradas en primer lugar en la blstula. Desmosomas en banda (uniones de ancla) ocurren en muchas clulas y estn compuestas por protenas que pasan a travs de la membrana celular. Dentro de la clula, se atan con microfilamentos (filamentos de actina) y afuera con la matriz extracelular, o a protenas similares a ellas mismas sobresaliendo de clulas vecinas. La funcin principal de estas uniones es estabilizar la estructura del tejido, y se encuentran por primera vez en la blstula avanzada. Las uniones gap son compuestas por molculas protenicas agrupadas en cilindros vacios que perforan la membrana celular. Cilindros de dos clulas adyacentes se juntan y forman un canal que permite el paso de pequeas molculas entre ambas clulas. Como resultado, las uniones gap puedes habilitar la accin sincrnica de clulas adyacentes, como clulas musculares cardacas, permitiendo a pequeas molculas reguladoras tener la misma concentracin en cada clula. Tambin contribuye significativamente en la estabilizacin de tejidos. Las primeras molculas de adhesin celular encontradas fueron la N-CAM y L-CAM. La neural cell adhesin molecule es una molcula individual en cadena formada por aprox. 1000 aminocidos, con molculas de azcar sujetas a algunos de estos aminocidos. La liver cell adhesin molecule fue descubierta en el hgado, y esta ocurre en toda clula epitelial de embriones y adultos. Entonces, las molculas de adhesin celular son protenas que sobresalen a travs de la membrana celular. La porcin sobresaliente puede atarse a otra (normalmente idntica) molcula en otra clula. La mayora de estas molculas caen en 2 grupos. Cadherinas, las cuales se adhieren a otra protena de estructura idntica en otra clula, pero solo si estn presentes iones de calcio por ah (lo

que explica porque la baja concentracin de calcio suele ayudar el aislamiento de celular de sus tejidos). La catenina es una protena y el nexo entre la cadherina y el citoesqueleto. La L-CAM es un tipo de catenina. Las cateninas forman tambin la superfamilia de inmunoglobulinas de molculas de adhesin. Adems, otras protenas de la superficie de la clula se adhieren a molculas de la matriz extracelular, como el colgeno, fibronectina y laminina. La ms claramente identificada es la integrina. Adentro de la clula estn asociadas con el citoesqueleto. LA IMPORTANCIA DE LAS MOLECULAS DE ADHESIN CELULAR. Todas las adhesiones celulares pueden ser el agente principal de la morforegulacin. Los diferentes tipos de molculas de adhesin son distribuidas extensamente,y cada tipo de tejido tiende a tener molculas de adhesin caractersticas. Al formarse nuevos tejidos en un embrin, ocurren cambios locales en las molculas de adhesin. Durante el desarrollo de rganos, las clulas expresan diferentes molculas de adhesin por lo que se separan en diferentes regiones. Por otra parte, cuando hay molculas de adhesin acercndose a conectarse a lugares donde no tienen una relacin o destino estructural, existen anticuerpos que interrumpen esta conexin. La vinculacin de molculas de adhesin en diferentes clulas es rpidamenteseguida por la formacin de uniones celulares. La adhesin de clulas suele cambiar la composicin de la clula, como el pH, y pues la evidencia propone que estos cambios podran activar la divisin celular y la actividad gentica, contribuyendo as a la formacin de la estructura del cuerpo. Las molculas de adhesin pueden ser importantes, segn experimentos, en la clasificacin de clulas distintas. Las clulas con diferentes nmeros de la misma molcula de adhesin en su superficie pueden clasificarse una de la otra. Lo que indica que los diferentes tipos de molculas de adhesin no siempre son requeridos para que clulas diferentes se unan en tejidos diferentes. CAPITULO 3 chuchaaaaaa COMO SE ORIGINAN LAS DIFERENCIAS EN COMPOSICIN MOLECULAR ENTRE LOS EMBRIONES DIVISION CELULAR ASIMETRICA Y SEALIZACIN ENTRE CELULAS Un humano adulto posee ms de 200 tipos de clulas que son visiblemente diferentes y por lo tanto difieren en su composicin molecular. Experimentos han demostrado que estas diferencias surgen en una de dos maneras: mediante la divisin asimtrica de una clula primaria que da origen que dos clulas de composicin diferente, o, sin divisin, en respuesta a un estmulo o seal recibida por una clula y normalmente emitida por otra clula. Tales seales son normalmente molculas que contacta a la clula y dan origen a una secuencia interacciones moleculares, o transduccin de seal, la cual resulta en el cambio requerido en composicin. A partir de un experimento realizado por Spemann, se sacaron 2 conclusiones. La primera, porque las clulas se desarrollaron de manera diferente, los componentes del ovulo fertilizado tuvieron que ser desigualmente distribuidos entre las clulas hijas por una divisin asimtrica. La segunda, pues una clula se desarrollo anormalmente, esta clula o su progenie tuvo la necesidad de seales de otra clula o su progenie para un desarrollo correcto.

Las divisiones del ovulo fertilizado llegan a un punto en que se forma un anillo de ocho clulas en el polo animal(mesmeros), un anillo de celular mas grandes a debajo del mesmero (macrmeros) y otro anillo de clulas aun ms pequeas en el polo vegetal (micromeros). Cada una de estas partes est encargada de formar clulas especializadas para formar diferentes tipos de tejidos en el organismo. A partir de un experimento hecho en un erizo de mar, se ha concluido que las mitades vegetales y animales del ovulo contienen diferentes molculas, las cuales son separadas por la tercera divisin y son responsables tambin de iniciar el desarrollo a lo largo de diferentes caminos. El desarrollo normal tambin requiere un intercambio de seales entre las dos mitades de un embrin. Se ha visto tambin que los micrmeros al ser separados se siguen dividiendo para formar sus estructuras normales, como las espculas esquelticas. Se entiende entonces que esta parte no requiere de ninguna seal de otra para su desarrollo normal. DIVISION ASIMTRICA Y SEALIZACIN CELULAR EN C. ELEGANS Experimentos en diferentes organismos simples dejan un poco de duda sobre la diferenciacin en ciertas clulas requiriendo molculas transmitidas a estas desde el ovulo fertilizado como una secuencia de divisiones asimtricas. Se dice que el desarrollo de este tipo de organismos como el c. elegans es en mosaico pero tambin regulativo. Experimentos han demostrado claramente que el embrin del c. elegans tiene un mecanismo para segregar ciertas molculas para un de las dos celular hijas de una divisin, como se requiere en un desarrollo en mosaico. Se indica que ocurre un desarrollo regulativo en la formacin de celular germinales. SUBDIVISN DESIGUAL DEL CITOPLASMA DEL HUEVO EN LAS MOSCAS DE FRUTA. Se ha demostrado que el citoplasma del huevo de la mosca no es uniforme en composicin y los ncleos luego son inducidos para formar diferentes clulas por medio de colocarse en un citoplasma de diferente composicin. Tal y como pasa con la formacin de clulas germinales las cuales van a la parte trasera del embrin. Otros experimentos indican que los ncleos que migran hacia la parte de atrs de la superficie del embrin de la mosca son tambin dirigidos a diferentes destinos por diferentes molculas en diferentes regiones del citoplasma. Se concluy tambin que los ncleos en el centro del embrin adquieren el patrn correcto de actividad gentica solo si el citoplasma posterior puede comunicarse con el citoplasma anterior.

DIVISIN ASIMTRICA DE SEALIZACIN CELULAR EN RANAS Diferentes regiones en el ovulo de la rana son asignadas a diferentes clulas por divisiones asimtricas segmentadas. Estudios del plasma germinal, una regin del citoplasma de una apariencia distintiva cerca del polo vegetal, indica que de esta manera las clulas pueden adquirir molculas que determinen sus diferentes destinos. Otros estudios han demostrado que la diferencia de composicin entre clulas formadas en las primeras 2 divisiones de segmentacin hacen que estas sigan diferentes caminos del desarrollo. Se ha demostrado que el vulo fertilizado se divide en dos mitades esencialmente de composicin idntica. Sin embargo, cuando se separan en pares aun embrin formado por 4clulas, ningn par se desarrolla como debe ser. Se dice que las molculas que dirige las clulas por los caminos correctos del desarrollo son distribuidas desigualmente en el ovulo y tambin desigualmente distribuidas entre las clulas de las segunda divisin. Las molculas que son distribuidas de forma desigual en el ovulo han sido descubiertas, llamadas ARN mensajero para factores de crecimiento protenico. Se ha demostrado que las clulas vegetales emiten ms de un tipo de seal e inducen ms de un tipo de clula del mesodermo. Se ha denominado el centro Nieuwkoop a lo que contiene las clulas C1 y D1. Las clulas dorsales del mesodermo que son producidas por el centro Nieuwkoop de una en una emiten otra seal que induce mas diferencias en la composicin hacia el lado abdominal en clulas mesodrmicas adyacentes. En resumen se ha concluido que estn activos 3 tipos de seales mesodrmicas inductoras. El primer tipo de seal es liberada por la mayora de las clulas de la regin vegetal y se transforma las clulas localizada encima de ella en un tipo de mesodermo. Sin embargo dos de las clulas vegetales del lado dorsal emiten una seal diferente (segundo tipo), la cual produce clulas mesodrmicas de otro tipo. Estas clulas mesodrmicas dorsales emiten entonces una 3era seal que se mueve hacia al lado abdominal y modifica el tipo de las clulas mesodrmicas formadas por la primera seal. EL ORIGEN DE LAS DIFERENCIAS EN LA COMPOSICIN CELULAR DE EMBRIONES RATONES El trofectodermo de un embrin ratn est formado por 48 clulas de 60 clulas en total de todo el embrin ratn. Las ultimas peculiaridades de los embriones ratones son compartidos con los embriones humanos y permite, para bien o mal, manipulaciones espectaculares (exanimacin de enfermedades hereditarias en una inseminacin artificial, etc.). En embriones de 8 clulas, hay regiones de composicin diferente que pueden ser detectadas en las clulas. La divisin asimtrica de estas regiones en las clulas hijas parece ser el origen de los diferentes destinos celulares. La adhesin celular depende largamente de la molcula de adhesin celular L-CAM. Si esto es desactivado, el cambio es retrasado y los ejes de asimetra son descolocados, indicando que esta molcula est envuelta en el inicio de la transformacin en el polo opuesto de la clula.