Universidad Nacional

“Pedro Ruiz Gallo”

Diseño de Bioprocesos y
Biotecnología Microbiana
PRODUCCIÓN DE ETANOL
Docente: Dr. Carlos E. Villanueva Aguilar.
Alumnos : Rómulo Aycachi Inga
Dany Luz Piscoya Purihuamán

Lambayeque – Setiembre 2008

PRODUCCIÓN DE
ETANOL
INTEGRANTES: - Dany Luz Piscoya
Purihuamán
- Rómulo Aycachi Inga
 ¿Qué es el etanol?
 Alcohol, líquido, incoloro e
inflamable
 También como alcohol etílico.
 CH3-CH2-OH
 Bebidas, combustible,
disolvente, anticongelante,
farmacéutica.
 P. E.: 78 ºC
 Hidratación de etileno.  P. F.: -144 ºC
 Fermentación  M. M.: 46.07 g/mol
 Act. Enz. sobre jarabesazuc.  Densidad: 0.789 g/mol
 Destilación y rectificación  LD50: 7.060 mg/Kg oral
del petróleo (MTBE)  Tº inflamab.: 13 ºC
 Gasohol

E10, E85 ETBE

Biocombustible
Alconafta

Fermentación
Alcohólica
(anaerobiosis)
BIOETANOL
Celulosa

Agricultura Biomasa Desechos

Azúcares
agrícolas

Caña azúcar

Maíz

Trigo
Importancia
Dependencia
Contaminación Petróleo
Económica
Derrames
Precios Crisis
Emisiones CO2
energética
Agotamiento
Calentamiento
Global
 Producción anual de etanol por país (2004-2006)[1]
Quince mayores países productores
(millones de galones internacionales, todos los grados de etanol)
Clasi 9  España 122 93 79
ficaci
ón País 2006 2005 2004 10  Sudáfrica 102 103 110
mund
ial 11  Tailandia 93 79 74

 Estados 12  Reino Unido 74 92 106

1 4.855 4.264 3.535
 Unidos
13  Ucrania 71 65 66
2  Brasil 4.491 4.227 3.989
14  Polonia 66 58 53
3  China 1.017 1.004 964
15  Arabia Saudita 52 32 79
4  India 502 449 462
Producción 
5  Francia 251 240 219 13.489 12.150 10.770
mundial total
 
6 202 114 71
Alemania
Brasil: Principal productor (caña)
7  Rusia 171 198 198 315 mill. TM (⅔ para OL)
300 destil. y + de 225 ingenios
8  Canadá 153 61 61
 Combustibles: Mezcla de gasolina con
etanol
OBLIGATORIA % Vehículos que
utilizan bioetanol:
Tailandia 10 Por ahora en Bangkok  Renault Megane
Suecia 5 Todo el territorio nacional  Ford Focus
China 5 Por ahora en 5 provincias  Ford Focus C-
Filipinas 5 Todo el territorio nacional Max
Francia 5 Se para el 2010  Volvo C30

Japón 3 Es opcional, pero le apuntan al 10%  Volvo S40

 Saab 9-5 BioPower
Bolivia 25 Sin fecha
Saab: 9-X
Argentina 5 Se espera para el 2011 BioHybrid (Concept
Car)
Ferrari F430 Spider
Bio Fuel
 Ventajas y desventajas de los
biocombustibles
VENTAJAS DESVENTAJAS
 No incrementa niveles de CO2 en  Costo de producción casi dobla al
la atmósfera. de la gasolina.
 Proporciona fuente de energía  Se necesitan grandes espacios
renovable. de cultivo.
 Revitalizan economías rurales,  Potenciación de monocultivos
generan empleo. intensivos (uso de pesticidas y
herbicidas)
 Se podrían reducir los  Combustible precisa de una
excedentes agrícolas. transformación previa compleja.
 Se mejora aprovechamiento de  Su uso se limita a un tipo de
tierras de poco valor agrícola. motor de bajo rendimiento y poca
potencia.
 Se mejora la competitividad al no
tener que importar fuentes de
energía tradicionales.
 Principales M.O. Productores de Etanol
Bacterias: Levaduras:
 Zymomonas mobilis  Saccharomyces cerevisiae
 Clostridium  Pichia stipitis
acetobutylicum  Pachysolen tannophilus
 Klebsiella oxytoca  Candida shehate
 Escherichia coli
 Bacilos Gram ( - ) Pares

Anaerobio facultativo Móviles (1 – 4 flagelos) Pérdida espontánea

Brillantes

Blancas o cremas
Colonias en ½
Ǿ 2 mm
Standar
Borde regular
Agua, suelo,
plantas Aroma “frutado”

No cápsula
Zymomonas mobilis Otras características
No espora
Glucosa
Fermentación Fructosa Oxidasa, Indol, RM,
NO3, Tween 80 Negativo
Sacarosa
 Características Bioquímicas:
 Vía Entner – Doudoroff
 Degradación de glucosa en
anaerobiosis
 Mol y ½ de OL/Mol glúcido
ferm.
 ↓ Ac. láctico, trazas
acetilmetilcarbinol.
 ½ con 2% de extr. levadura,
20% glucosa.
 pH óptimo: 7.3 (a 30 ºC).
 Actividad de catalasa.
 Pantotenato, biotina (indisp.)
Z. mobilis en agar LMDA
Vía de Entner - Doudoroff
Asimilación de Gluc. Con-
trolada por el balance ener-
gético de la célula
Fructoquinasa fuertemente
inhibida x Gluc.
↑[gluc.] inhibe la actividad de
Hidrólisis de la
sacarosa
Tipo competitivo
 x 1Mol de sust.
consumido → 2Mol
NADH.
 Rendimiento en ATP
→ 1 x Mol de hexosa
degradada.
 No posee sist. De
transp. (P- enol
piruvato glucosa P-
transferasa,
permeasa).
 Sí: sist. transp. x
difusión facilitada.
 Hábitat limitado a
entornos con
↑[azúcar].
 Influencia del O2 Inhibición por
Etanol
 Bact. no estrictamente  Tolerancia mayor al etanol.
anaerobia.
 Producción etanol a []s ↑ a
 Aireación disminuye 13% (p/v).
rendimiento en etanol.
 Glucoquinasa y
 ↓ [Ac. láctico] fructoquinasa no inhibidas
 qglucosa y producción de por etanol.
Ac. Acético.  Resistencia por rearreglo
 Efecto Pasteur ausente. en:
 Rendimiento Yx/s no – Membrana
en aerobiosis. – Fosfolípidos
– Hopanoides
– Proteínas
 Hongo unicelular Levadura

Levadura de cerveza
Invertasa Cerveza
Vino

Pan
Utilidades
Biomasa
Etanol

Reino : Fungi
No exigente
nutricionalmente Filo : Ascomycota

Clase : Hemiascomycetes

Orden : Saccharomycetales
↑ [azúcar]
Familia : Saccharomycetaceae
Saccharomyces cerevisiae Subfamilia : Saccharomycetaidae
Osmotolerante
Género : Saccharomyces
Tolera ↑ [etanol]
Especie : S. cerevisiae
 Necesidades nutricionales
mínimas para S. cerevisiae
Características generales
de las Levaduras Fnte. carbono: Azúcares
Fnte. Nitrógeno: sulfato amónico,
Úrea o aminoácidos
Dimensiones (micras) 4 – 8 Biotina (B8 o Vit. H)
Sales y elementos traza
Tiempo de duplicación 
1 – 3
(horas) Color: crema
o blanco
pH (rango óptimo) 4.5 – 5.5
Apariencia: húmedo
Nitrógeno (%) 7.5 – 8.5 y brillante
Proteína (%) 35 – 45 Bordes: irregu-
lares
Ácidos nucleicos (%) 6 – 12
25 a 30 ºC
Carbohidratos (%) 30 - 45
Producción de as-
cosporas
Si hay requer. nutr. adecuados
Ciclo sexual de S. cerevisiae
Bioquímica de la formación de Etanol
 Aerobiosis: oxidan azúcares
simples (G, F) → CO2 y H2O
 Vías: Embden Meyerhof Parnas,
luego Ciclo Krebs.
 70% de glucosa → piruvato
(Glicólisis).
 30% glucosa→ Vía Pentosa –P

 Anaerobiosis: Gluc. oxidada x vía

glicolítica y luego x Ferm. OL
 Producción: Etanol, CO2, 1 ATP
  Oxidación Gluc. x Vía
Glucólisis → Piruvato
 Piruvato descarboxilado x
1. → acetaldehído.
 Acetaldehído reducido a
Etanol x 2.
3. Dihidroxiacetona
P- reductasa
 También formación de
Glicerol x reducción de
dihidroxiacetona –P x 3.
4. Glicerol → glicerol 3 –P.
1 - fosfatasa
 Glicerol 3 –P hidrolizado
hasta Glicerol x 4.

1. Piruvato
2. OL deshi- descarboxilasa
drogenasa
 En presencia de O2 ó cuando no
hay más azúcar disponible:
Aldehído  Levaduras pueden oxidar
Deshidrog.
etanol → acetaldehído (x OL
Acetato
deshidrogenasa).
2H  Luego, nuevamente oxidado
hasta acetato (x aldehído
deshidrogenasa)
 Reacciones comprendidas en la
fermentación alcohólica

C6H12O6 + 2Pi + 2 ADP → 2CH3-CH2OH + 2CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal

Azúcar - Hexosa Etanol Anh. carbónico

180g 92g 88g Rx exergónica

0.511g Etanol
GAY LUSSAC
1g glucosa Rendimiento ideal de Pasteur
0.489g CO2

En realidad Yp/s Producción de otros Peso %

metabolitos
diferente del ideal Etanol  48.4
Mantenimiento
Anh. Carbónico 46.6
Rendim. Experim. Glicerol  3.3 
Rendim. Industrial
90 – 95% del teórico
87 – 93% del teórico Ac. Succínico 0.6
(0.469-0.485 g/g)
Materia celular 1.2
100 Kg azúcar-hexosa → 51.1 Kg Etanol + 48.9 Kg CO2. TOTAL 100.1
 Materia prima para producción de
bioetanol

Compuestos D- glucosa Trealosa

D- galactosa Rafinosa
carbonados Manosa Maltotriosa
utilizables por Fructosa Desoxirribosa
Sacarosa D- manitol
S. cerevisiae Maltosa Etanol
Melobiosa D- glucitol
Melecitosa Ac. láctico
Principales fuentes actuales
de producción de Bioetanol
a nivel mundial

Levaduras

Invertasa
Zimasa
 Efecto Pasteur
 Levaduras metabolizan
azúcares en aerobiosis y
anaerobiosis.
 Aerobiosis: > rend. celular.
 Para un mismo rendimiento
celular: consume < azúcar  Competencia entre piruvato
en aerob. q’ en anaerob. descarboxilasa (ferm. – baja
afinidad x piruvato) y piruvato
 Aerob. ↓ fermentación.
deshidrogenasa (resp. – gran
En S. cerevisiae este efecto o afinidad)
bien está ausente o tiene una azúcar en gr./l Alcohol formado en 2 meses
amplitud muy débil.
370 8.6
Se refiere a la inhibición de la 420 6.3
Glicólisis debido a la presen-
470 5.9
cia de oxígeno.
550 3.4

750 0
 Efecto Crabtree
 Se refiere a la inhibicion del
consumo de O2 x ↑[glucosa].
 Algunas levaduras fermentan
en presencia de O2, aun
teniendo cadena respiratoria.
 Para evitar producción de
etanol en condiciones aerobias
→ cultivo en Fed - Bach
Proceso de Producción de Bioetanol
Procesamiento de Diferentes Materias
Primas
Procedimiento para
la obtención de
etanol

 Acondicionamiento
de las materias
primas
 Hidrólisis.
 Fermentación de
azucares.
 Destilación
 BIOETANOL
 Es un alcohol elaborado de fuentes renovables que
sigue un procedimiento de fabricación similar al de
la cerveza:

 O mediante la fermentación directa de productos

azucarados:
 BIOETANOL
Los principales objetivos de la producción de bioetanol Son:
 Preparar mezclas con gasolina en lugar de otros aditivos 
como el ETBE (Etil terbutil éter) o el MTBE (Metil terbutil 
éter) en proporciones superiores al 5%.
 Usarlo como carburante en mezclas con gasolina hasta un 
85%.
 Suministrarlo como materia prima en la producción del 
ETBE.
 Materias Primas
 Las principales fuentes
actuales de producción de
bioetanol a nivel mundial
son:
– Maíz
– Yuca
– Remolacha
– Sorgo Dulce
– Caña de Azúcar
Producción de alcohol a partir
de Maíz
Producción de Etanol de Yuca
Producción de Etanol de Yuca
(continuación)
 Producción de Etanol de
Remolacha
 Francia es uno de los
países que ha
desarrollado tecnología
para obtener etanol de
remolacha, después de
establecido el Protocolo
de Kyoto.
 Se obtienen 0,2 litros de
etanol/kg de remolacha.
 Producción de Etanol de Sorgo
Dulce
 El grano de sorgo es
rico en almidón y es
uno de los cultivos
óptimos para otras
aplicaciones
industriales.
 Se obtienen 0,14 litros
de etanol/kg de sorgo
dulce.
 Producción de Etanol a partir de
la Caña de Azúcar
 Se obtienen 0,085 litros de
etanol/kg de
 caña de azúcar.
 Actualmente, Brasil es el
principal productor mundial
de etanol de caña de azúcar.
 Produce alrededor de 315
millones de toneladas de
caña , y cerca de 2/3 de esta
es utilizada para la
producción de etanol.
Rendimiento de Cultivos en la
Producción de Alcohol
 Principales Productores de
Bioetanol en el Mundo (2005)
Complejo Agroindustrial
Impacto Ambiental
 Proceso de Fermentación del
Etanol
Mecanismo de Conversión: Gay-Lussac
             C6H12O6            →              2C2H5OH + 2CO2

 100kg    =     51.1Kg    +      48.9Kg
   Hexosa           Etanol                CO2
Composición de la Melaza de Caña
COMPOSICION
COMPONENTE
(%)
Agua 20

Glucosa 35

Sacarosa 7

Levulosa 9

Otras sustancias reductoras 3

Otros carbohidratos 4.1

Cenizas 12

Compuestos nitrogenados 4.5

Compuestos no nitrogenados 5

Ceras, esteroides y esterofosfolípidos 0.4

 Propiedades Físico-Químicas de la
Melaza
 pH: Las melazas de cañas de
azúcar son ligeramente ácidas
5.5 – 6.5 Ácidos Alifáticos. 4.5
– Acido sulfúrico.
 Densidad: Grados Brix 24º
Brix.
 Nutrientes: = 85% del maíz en
grano.
 0.2g de Urea x 1L de melaza
 Saccharomyces cereviseae
 Levadura de excelencia para la producción de
 Etanol → Industrial → Fácil manipulación y
 Recuperación.
 Proceso Productivo del Etanol
• Etanol (alcohol etílico) producido 
x fermentación de azúcares que 
están en productos vegetales.
• Cereales, caña de azúcar, 
remolacha o biomasa 
(combinados en forma de 
sacarosa, almidón, hemicelulosa 
y celulosa).
• Dependiendo de su fuente de 
obtención, su producción implica 
fundamentalmente: 
• Proceso de separación de los 
azúcares.
• Fermentación y destilación de las 
mismas.
Cadena Productiva del Etanol
Biocarburante
Biorreactor
Instalación piloto de 100 L.
 LEYENDA
 A: Bioreactor de fermentación.
 B y C: Recipientes de
almacenamiento de ácido y de
base respectivamente.
 D Recipiente de recolección de
levaduras y vinasas para el
reciclaje.
 E: Decantador.
 Mn: Recipiente de
almacenamiento de melazas.
 F: Válvulas automáticas.
 G: Intercambiador de calor para
el calentamiento del caldo de
fermentación.
 H: Intercambiador de calor para
el enfriamiento de vinasas.
 J: Recipiente de recolección de
vinasas.
 K: Recipiente de recolección
del caldo de fermentación.
 L: Columna de destilación.
 M: Bomba para la crema de
levaduras.
 N: Bomba de alimentación a la
columna de destilación.
 O: Bomba de reciclaje de
levaduras.
 P: Bomba para el reciclaje de
vinasas.
 Fm: Flujo de melazas.
 Fe: Flujo de agua.
 Fair: Flujo de aire.
 CO2: Flujo de dióxido de
carbono.
 Fv: Flujo de vinasas.
 Pef: Flujo de etanol.
¡¡¡GRACIAS
POR SU
ATENCIÓN!!!
 REFERENCIAS:
 Apuntes Varios: Capítulo 14: Metabolismo de Glucosa. Obtenido el 12 de
agosto de 2008 en http://marc.pucpr.edu
/facultad/santos/Trabajos/611/bio611/capitulo_14.pdf
 Apuntes Varios: Leccion 9: Producción de Polialcoholes. Obtenido el 12
de agosto de 2008 en http://www1.us.es/pautadatos
/publico/asignaturas/40397/17341/BIOTEC_06-07_TEMA%209.pdf
 Bu’lock, J. y B. Kristiansen (1991). Biotecnología Básica. Edit. Acribia.
Zaragoza.
 Cuaderno de ciencias (2008). Etanol: Propiedades físicas y químicas.
Obtenido el 12 de agosto de 2008 en http://
cienciasabprikrdo.blogspot.com/2008/03/estudio-del-petroleo.html
 Fajardo C., E. E. y S. C. Sarmiento F. (2007). Evaluación de Melaza de
Caña como Sustrato para la Producción de Saccharomyces cerevisiae.
Pontificia Universidad Javeriana – Bogotá. Obtenido el 12 de agosto de
2008 en http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis26.pdf
 García C., J. M. y J. A. García L. (2006) Biocarburantes líquidos:
Biodiésel y Bioetanol. Informe de Vigilancia Tecnológica. Fundacion para
el conocimiento Madrid CEIM.
 La levadura y la producción de CO2. 2000. Obtenido el 12 de agosto de
2008 en http://usuarios.lycos.es/nachodiscosweb/articulo/levadura.htm
 Leveau, J. Y. y M. Bouix. (2000). Microbiología Industrial: Los
Microorganismos de Interés Industrial. Edit. Acribia. Zaragoza.
 Martínez J., A. (2008). La biotecnología Moderna en la Generación de
Biocombustibles: Combustibles Biológicos Renovables. Instituto de
Biotecnología – UNAM. Obtenido el 11 de agosto de 2008 en http://
www.icq.uia.mx/webicq/pdf/alfredo2.pdf
 Masera C., O. y otros. (2006). Potenciales y Viabilidad del Uso de
Bioetanol y Biodiesel para el transporte en Mexico. Secretaría de
Energía. pp. 151 – 300. Obtenido el 11 de agosto de 2008 en http://
www.sener.gob.mx/webSener/res/PE_y_DT/pub/
Biocombustibles_en_Mexixo_Estudio_Completo.pdf
 Metabolismo de Hongos (2005). Obtenido el 12 de agosto de 2008 en
http://mail.fq.edu.uy/~microbio/MGral/T2007/Metahongos.pdf
 Núñez G., J. y P. García T. (2006). Biocombustibles: Bioetanol y
Biodiesel. Universidad Santiago de Compostela. Obtenido el 12 de
agosto de 2008 en http://www.enciga.org/boletin/61/
resumo_biocombustibles_bioetanol_y_biodiesel.pdf
 Ochoa M., I. y G. Miranda H. (2006). Bioetanol: Alcohol Carburante.
Obtenido el 11 de agosto de 2008 en http://www.uninorte.edu.co
/extensiones/IDS/Ponencias/biocombustibles/
BIOETANOL_Ivan_Ochoa1.pdf
 Parés I., R. y A. Juárez G. (1997). Bioquímica de los
Microorganismos. Edit. Reverté. Barcelona.
 Prescott (1966). Microbiología Industrial. Edit. Acribia. Madrid.
 Vázquez, H. J. Y O. Dacosta (2006). Fermentación alcohólica. Una
opción para la producción de energía renovable a partir de desechos
agrícolas. Universidad Autónoma Metropolitana. FI – UNAM. México.
 Wikipedia: La enciclopedia libre. 2008. Etanol. Obtenido el 12 de
agosto de 2008 en http://es.wikipedia.org/wiki/Alcohol_etilico
 Wikipedia: La enciclopedia libre. 2008. Fermentación alcohólica.
Obtenido el 12 de agosto de 2008 en http://es.wikipedia.org/wiki/
Fermentaci%C3%B3n_alcoh%C3%B3lica
 Wikipedia: La enciclopedia libre. 2008. Saccharomyces cerevisiae.
Obtenido el 12 de agosto de 2008 en http://es.wikipedia.org/wiki/
Saccharomyces_cerevisiae
 Wikipedia: La enciclopedia libre. Etanol (combustible). Obtenido el 12
de agosto de 2008 en http://es.wikipedia.org/wiki
/Etanol_(combustible)