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Microbiologia de Alimentos: Practica Nº 05 -Determinacion de coliformes totales y fecales

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Descripcion para la determinacion de presencia de coliformes totales y fecales en alimentos, una prueba de rutina muy utilizada para determinar la contaminacion de un alimento por heces humanas.
Descripcion para la determinacion de presencia de coliformes totales y fecales en alimentos, una prueba de rutina muy utilizada para determinar la contaminacion de un alimento por heces humanas.

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 ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA 
PRÁCTICA Nº 05
Determinación de bacterias, ColiformesTotales y Fecales, Método de recuentopor dilución en tubo: NMP
ASIGNATURA:
Microbiología de los Alimentos I
DOCENTE:
Dra. Graciela Albino Cornejo
ALUMNO:
Rómulo Aycachi Inga
CICLO:
2007 - II
 Lambayeque, 14 de febrero de 2008.
1
 
PRÁCTICA Nº 05
DETERMINACIÓN DE BACTERIAS,COLIFORMES TOTALES Y FECALES. MÉTODODE RECUENTO POR DILUCIÓN EN TUBO: NMP.
I.Introducción:Existen diversos métodos para cuantificar el número de microorganismos presentes enmuestras líquidas y sólidas. Dentro de las técnicas más comunes se encuentra elrecuento directo por microscopia de fluorescencia, así como los procedimientos basadosen diluciones en serie, haciendo crecer microorganismos en medios de cultivo sintéticossólidos o líquidos, como el recuento en placa de Unidades Formadoras de Colonias(UFC) o la estimación por el método del Número Más Probable (NMP).El método del número más probable fue descrito por McCrady en 1915 y actualmentesigue siendo ampliamente utilizado. En un principio este método fue empleado paraestimar el número de microorganismos en muestras de alimentos y aguas. Sin embargo,se ha demostrado que tambn puede ser aplicado para la determinacn demicroorganismos aerobios y anaerobios en lodos, sedimentos marinos y sueloscontaminados, por tanto este todo es aplicable para estimar el mero demicroorganismos en muestras de suelo y agua, tanto para bacterias aerobias comoanaerobias.Los Coliformes Fecales son un subgrupo de los Coliformes totales, capaces defermentar la lactosa a 44º C en vez de 37 ºC como lo hacen los totales.Aproximadamente el 95% del grupo de los Coliformes presentes en heces estánformados por 
 Escherichia coli
y ciertas especies de
 Klebsiella
. Ya que los ColiformesFecales se encuentran casi exclusivamente en las heces de los animales de sangrecaliente, se considera que reflejan mejor la presencia de contaminación fecal. Éstosúltimos se denominan termotolerantes por su capacidad de soportar temperaturas máselevadas. Esta es la característica que diferencia a Coliformes Totales y Fecales. Lacapacidad de los Coliformes fecales de reproducirse fuera del intestino de los animaleshomeotérmicos es favorecida por la existencia de condiciones adecuadas de materiaorgánica, pH, humedad. Desde hace mucho tiempo se han utilizado como indicador ideal de contaminación fecal. Su presencia se interpreta como una indicación de que losorganismos patógenos pueden estar presentes y su ausencia indica que el agua o elalimento estudiado se hallan exentos de organismos productores de enfermedades.II.Objetivos:-Familiarizarse con los métodos de recuento, especialmente con el de NMP.-Detectar bacterias coliformes totales y fecales.-Detectar si la muestra traída es apta para el consumo humano. III.Materiales:-Muestra: Leche2
 
-Medios de cultivo: Caldo Brilla(presuntivo), agar MacConkey,agar Endo, EMB, CB.-Caldo EC-Tubos de dilución-Pipetas-Bombilla de aspiracn-Placas de Petri-Mechero Bunsen-Baño María-Estufa-Gradillas-Anzas microbiológicascalibradasIV.Procedimiento:a.Método para coliformes totales:-Preparamos diluciones hasta 10
-3
.-Sembramos dos, tres o cinco tubos por cada dilución, según sea el caso.-Los resultados se dan en por gr o mL-En el caso de agua se sigue de la otra forma:-Cuando se trate de aguas, los resultados se darán por 100 mL.3
10
-1
10
-2
10
-3
Diluciones3 mL de muestra+27 mL agua pept.
9 mL AP9 mL AP
Caldo Brila
1 mL1 mL1 mL
Método paraalimentosLíquidos
10
-1
1 mL1 mL10 mLMuestra deagua total
Aquí no serealizandiluciones

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