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MICROBIOLOGIA ORAL - TP

BACTÉRIAS
ANAERÓBIAS
ESTRITAS

Guilhermina Fragoso

• As bactérias anaeróbias estritas são mo que não podem


viver na presença de O2, uma vez que o O2 os inibe ou
mata.
• Possuem um escasso poder de síntese, de tal forma que
o seu crescimento em meios sintéticos quimicamente
definidos depende em boa medida do aporte de
diversos factores de crescimento, especialmente de
vitaminas.
• Podem ter diversas enzimas (lipases, proteases,
peptidases, etc) que lhes permitem actuar sobre
diversos produtos orgânicos.

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• A degradação e/ou fermentação de compostos
orgânicos conduz à formação de 3 tipos de substâncias:
¾ Compostos simples – utilizados em processos de
síntese
¾ Compostos intermédios – utilizados para a
obtenção de energia
¾ Compostos terminais ou catabolitos – que são
devolvidos ao meio
• A fermentação de glícidos determina a formação de
ácidos gordos de cadeia curta
• A descarboxilação de a.a. origina catabolitos fétidos ou
pútridos (aminas voláteis) e catabolitos sem odor
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PARTICULARIDADES DO ESTUDO
DE BACTÉRIAS ANAÉRÓBIAS

1. PODER PATOGÉNICO
As infecções provocadas pelas bactérias anaeróbias
são essencialmente de dois tipos
• Infecções específicas
• Infecções mistas ou polibacterianas– quando as
bactérias se associam a outras do mesmo ou
distinto tipo respiratório

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2. HABITAT
• Meio ambiente (germes telúricos)
• Flora de Veillon

3. TÉCNICA GERAL
3.1. Colheita e meio de transporte
• Deve-se evitar ao máximo o contacto das
amostras com o oxigénio do ar
• A colheita é executada por intermédio de cones
de papel
• Se necessário, colocar as amostras num meio de
transporte
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3.2. Exame directo da amostra


•Exame a fresco – mobilidade espiroquetas
bacilos móveis
•Exame corado – coloração de Gram morfologia
Gram + /Gram -

O exame directo de produtos patológicos permite também


observar o aspecto monobacteriano ou polibacteriano da
amostra

Escolha dos meios de cultura apropriados


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3.3. Meios de cultura
• Utilização de meios de cultura para bactérias anaeróbias

¾ Meios líquidos de enriquecimento


9 Rosenow (com ou sem cisteína)
9 Schaedler e Wikins-chalgren

¾ Meios sólidos não selectivos


9 Meio gelosado TYG
9 VF
9 Schaedlen

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3.3. Meios de cultura (cont)


Meios sólidos selectivos
9 Vancomicina (7,5µg/ml)
9 Kanamicina (100µg/ml)
9 Bilis (20%) – Bacteroides
9 Verde Brilhante - Fusobacterium

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3.4. Obtenção de anaerobiose
Dois procedimentos são geralmente efectuados:

A) Eliminação do oxigénio dos meios de cultura


(utilizam-se meios profundos regenerados)

B) Absorção do oxigénio na amostra de inoculação

• Jarras de anaerobiose (H2 + CO2) (1)


• Sacos de anaerobiose (2)
• Câmara de anaerobiose (3)

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(3)

(1)

(2)
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3.5. Métodos de identificação
A) Identificação presuntiva

B) Identificação definitiva
- Galerias bioquímicas (bactérias
fermentativas)
- Hidrólise da esculina
- Sensibilidade à vancomicina e colistina
- Provas de ADN
- Perfil proteico por PAGE

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¾ AQUANDO DO ESTUDO DOS ANAERÓBIOS


DEVE-SE EVITAR (SE POSSÍVEL):
ƒ Fazer a colheita com a zaragatoa
ƒ Contaminar a amostra com a flora comensal
ƒ Deixar a amostra várias horas, sem proceder à sua análise
laboratorial
ƒ Desprezar o exame microscópico directo
ƒ Utilizar meios de cultura que não sejam recentes e que não
tenham sido regenerados
ƒ Deixar as placas de Petri, depois de inoculadas, em contacto com
o ar
ƒ Não ter em atenção o controlo de anaerobiose nas jarras
utilizadas para esse fim
ƒ Deitar fora, as placas inoculadas, após 48 h de incubação
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¾ ESTUDO DE GÉNEROS BACTERIANOS
ANAERÓBIOS COM INTERESSE EM PATOLOGIA
ORAL

Atendendo à sua morfologia, os anaeróbios com interesse


clínico classificam-se em 2 grandes grupos:

1. Esporulados
2. Não esporulados

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1. Esporulados – constituídos por bacilos Gram +,


geralmente móveis, com esporo central, subterminal ou
terminal que pode ser ou não deformante. Dentro deste
grupo encontram-se os clostridios que são subdivididos
de acordo com o processo patológico que determinam.

2. Não esporulados – compreendem conjunto


heterogéneo de m.o., que inclui cocos e bacilos,
Gram(+) , Gram(-) e espiroquetas

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ANAERÓBIOS ESPORULADOS

ƒ BACILOS GRAM POSITIVOS


9 Clostridium

No quadro seguinte encontra-se a divisão deste grupo


de acordo com o processo patológico.

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ANAERÓBIOS NÃO ESPORULADOS

ƒ BACILOS GRAM NEGATIVOS –IMÓVEIS


™ Bacilos não fermentativos, com pigmento
9 Porphyromonas
9 Bacteroides
™ Bacilos fermentativos, com pigmento
9 Prevotella (P. meleninogenica, P.
intermedia)

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Porphyromonas spp.
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Bacteroides in Bacteroides Bile Esculin Agar (BBE)
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Prevotella melaninogénica
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ƒBACILOS GRAM NEGATIVOS –IMÓVEIS (cont)

™ Bacilos fermentativos, sem pigmento


9 Prevotella - P.buccalis, P. bivia
9 Bacteroides
B. tonsythus – Patogenicidade demonstrada
B. gracilis, B. ureolyticus
9 Mitsuokella - M. dentalis
9 Fusobacterium
F. nucleatum, F. periodonticum
F. alocis e F. sulci
9 Leptotrichia - L. buccalis
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ƒ BACILOS GRAM NEGATIVOS – MÓVEIS


9Selenomonas
9Centipeda
9Wolinella recta

ƒ BACILOS GRAM POSITIVOS


9Bifidobacterium
9Eubacterium

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ƒ COCOS GRAM POSITIVOS
9Veillonella - V. parvula, V. dispar, V. atypica

As espécies de Veillonella obtêm a sua energia pela fermentação de


ácidos orgânicos (piruvato e lactato). Os seus produtos finais incluem
acetato, propionato, CO2 e H2. Este metabolismo apresenta um grande
potencial protector em relação à formação de cáries (ác. láctico).

ƒ COCOS GRAM POSITIVOS


9Peptococcus
9Peptostreptococcus

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ƒ ESPIROQUETAS
9Treponema

T.pallidum

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¾ FACTORES A CONSIDERAR QUANDO SE
TRATA DE UMA INFECÇÃO PRESUNTIVA
DEVIDO A A BACTÉRIAS ANAERÓBIAS:

ƒ A maior parte destes m.o. é comensal, e poucos


causam doença (infecção endógena)

ƒ Para causarem doença, têm que se espalhar para


além das barreiras normais

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ƒ São necessárias condições favoráveis à propagação


como:
- trauma
- destruição dos tecidos
- aporte vascular comprometido
- complicação de uma infecção preexistente que
produza necrose
ƒ Geralmente são infecções mistas, formadas por
aeróbios e anaeróbios
ƒ Os organismos anaeróbios tendem a ser encontrados em
abcessos ou em tecidos necróticos
ƒ O tratamento não necessita ser dirigido a todos os mo
no local infectado.
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