Control de calidad interno de hematologia Objetivos: 1.

Asegurar que los resultados obtenidos son aceptables dentro de los lmites de variacin. 2. Evaluar la exactitud por medio de controles con valores conocidos 3. Detectar variaciones que permitan determinar errores en el procedimiento Aspectos metodolgicos Maneja de la muestra control Puede ser comercial o preparada en el laboratorio La muestra tienen valores conocidos en el primer caso los cuales son proporcionados por la casa comercial En el segundo caso, este puede ser de doble ciego, es decir , una muestra tomada al azar Es analizado por el profesional y los tcnicos Posteriormente se comparan los resultados tomando como base los obtenidos por el profesional Procedimientos: esto puede ser manual o automatizado. Los parmetros a medir son: Hemoglobina Hematocrito Recuento de leucocito Formula diferencial Seleccin de material de referencia Muestras de sangre humana o equina (caballo o de burro) Cuando las muestras controles pretenden usarse como calibrador, debe tener un valor asignado, despus deben dividirse en alcuotas pequeas, de las que por lo menos deben analizarse 10 veces como mnimo, seleccionadas aleatoriamente Anlisis estadstico Media Desviacin estndar Variacin intra-lote expresadas como coeficiente de variacin en % Precisin Exactitud Medidas que deben ponerse en prctica A) En todo momento: Formas de resultados acumulados Correlacin del aspecto del extendido con los recuentos celulares Correlacin de los recuentos celulares con los eventos clnicos B) Diariamente Exmenes duplicados en muestras de pacientes, usualmente 4-5 por lote Exmenes repetidos de muestra de pacientes de lotes anteriores 4-5 por lote Examen de un control con cada lote de muestras. Observacin: Este es el procedimiento ms sencillo de realizar; si el trabajo del da permite cada muestra debera ser analizada por duplicado; si la carga de trabajo lo hace impractico, debern procesarse por duplicado 4-5 muestras consecutivas a distintas horas del da. Calcular la desviacin estndar de la sumatoria de la diferencias al cuadrado entre los duplicados.

Interpretacin: Ninguno de los resultados duplicados deber diferir uno de otro en mas de 2DS calculada, si las pruebas se efectan incorrectamente en forma sistemtica, el valor de la Ds ser muy alto y no permitir la identificacin de errores individuales. Exmenes de comprobacin a intervalos (diarios o semanales) Verificacin de la calibracin e controladores y hemoglobinometros *Hemoglobina Preparacin de referencia de cianometahemoglobina Hemolisado *Eritrocitos: Sangre preservada Preparacin estabilizada de eritrocitos * Leucocitos Sangre humana estabilizada Sangre de ave estabilizada ( como sustituto de leucocitos) * Plaquetas: Preparacin de plaquetas humanas estabilizadas. Pruebas confirmadas Estas se procesan de manera semejantes a las pruebas duplicadas pero se emplean especimenes que fueron analizados originalmente en una corrida anterior. Interpretacin Los resultados deben ser semejantes entre si dentro del intervalo de +/- 2Ds Este procedimiento detectara el deterioro de aparatos o reactivos que pueda haber ocurrido entre las corridas, siempre que no exista el deterioro de las muestras durante su almacenamiento, por ello este procedimiento es apropiado para la Hba, en menor grado para el recuento de eritrocitos y leucocitos e inapropiado para hematocrito si existe un retraso d e 6 horas o mayor entre una y otra determinacin. Un valor mayor de la desviacin estndar de las pruebas confirmadas es indicacin clara de que existe un deterioro de aparatos o reactivos, siempre y cuando las muestras no hayan sufrido alteraciones. Pruebas repetidas en muestras control Las determinaciones repetidas en una sola muestra definirn el error de reproducibilidad (precisin) y constituyen un mtodo para evaluar la excelencia tcnica y/o la estabilidad o inestabilidad de un instrumento. Dado que todas las determinaciones se llevan acabo con las mismas pipetas y reactivos, el mtodo no detectara errores en esto. Este procedimiento puede llevarse acabo en cualquier muestra de sangre en buenas condiciones pero es til usar materiales de control. Cuando la Ds de las mediciones repetidas a sido obtenida, esta puede usarse para la grafica de control, para hemoglobina debe utilizarse hemolisado o sangre preservada. 4. CONTROL DE CALIDAD EN HEMATOLOGIA 4.1 FASE PREMETROLOGICA Esta comienza desde la solicitud de la prueba ms indicada para hacer el diagnostico, la comunicacin (que debe preceder a la toma de la muestra) con el paciente, el estado del paciente antes de la puncin, el procedimiento utilizado en la recoleccin de la misma, la hora de llegada de la sangre al laboratorio, el almacenamiento y las caractersticas finales de la muestra.

Para toda prueba que se realice en el laboratorio, el paciente debe recibir el da anterior las instrucciones por escrito sobre su preparacin y la hora de llegada. Es importante recordar que cualquier variacin en la proporcin de anticoagulante puede ser causa de error en los resultados. El uso prolongado del torniquete afecta los recuentos celulares y altera las pruebas de coagulacin entre otras. La experiencia del personal es otro factor importante, debido a que de la toma de la muestra, de una buena mezcla del espcimen, la preparacin del extendido y su coloracin depende la correlacin de las pruebas y, por tanto el diagnostico final. Es necesario evitar la formacin de los microcogulos de Fibrina que no son visibles al ojo humano y que se forman en la jeringa o aguja mientras se realiza la mezcla con el anticoagulante. La Fibrina formada interfiere con los volmenes celulares, lo que produce errores en los informes, tanto de blancos como de rojos y plaquetas. 4.2. FASE ANALITICA A partir de una buena muestra los procedimientos de hematologa se deben realizar dentro de los lmites de tiempo que garantizan estabilidad. MANUAL DE CALIDAD INTERNO Y EXTERNO Fecha 01-07-2010 Pagina 24 de 35 El control de calidad interno en hematologa se lleva a cabo a travs de controles de precisin ya que los contadores automatizados vienen con calibradores de nivel anormal bajo, normal y anormal alto; se corren diariamente y se verifica la linealidad del equipo, comparando los valores encontrados con un rango asignado. PROCEDIMIENTO Se retira el control del refrigerador y, antes de usarlo, se deja que alcance la temperatura ambiente (18-30 grados centgrados) durante 15 minutos. Para mezclarlo: Colocar el tubo horizontalmente entre las palmas de las manos y se hace rodar adelante y atrs durante 20-30 segundos. Mzclelo invirtindolo rpidamente para que las clulas se suspendan. Si los tubos han permanecido almacenados durante mucho tiempo puede que sea necesaria una mezcla adicional. Invierta los tubos con suavidad de 8-10 veces inmediatamente antes de usarlo. Aspirar una muestra del tubo. Limpiar el borde del tubo y la tapa con un pao sin hilachas.

Volver a tapar el tubo asegurndose que queda bien tapado. Se corren los otros dos tubos de la misma forma. Se guardan nuevamente en refrigeracin para garantizar la estabilidad de los mismos hasta su fecha de caducidad. Los datos de la corrida diaria son registrados en los formatos de control de calidad interno diseado para hematologa. Se tabulan los datos estadsticos y se construyen las graficas de LEVYS-JENNY guardando las mismas recomendaciones y formulas que para el anlisis de datos en qumica clnica.

PRUEBA DE REPRODUCIBILIDAD Semanalmente se corre una muestra 3 veces y se comparan los resultados, los cuales deben guardar la reproducibilidad pertinente. PRUEBA DE CORRELACION Semanalmente y al azar se corre un cuadro hemtico por el mtodo automatizado y se hace la verificacin manual de los datos. Se procede hacer los registros. CONTROL DE CALIDAD INTERNO DE LA COLORACION Cada nuevo lote de colorante se estandariza teniendo en cuenta la cantidad de colorante utilizado por lmina y el tiempo de accin as como del Buffer (PH 6.8 a 7.2). Filtrar el colorante de uso diario. Se realiza un extendido de aproximadamente 3 cms de largo, con una parte gruesa, una medianamente gruesa, y una delgada o cola. Un buen colorante hematolgico utilizado con un Buffer de Ph neutro y un procedimiento estandarizado, nos permitir observar los glbulos rojos de color rosado, el ncleo de los linfocitos morado intenso, las granulaciones de los monocitos de color rosado, la membrana de los neutrfilos bien definida, el estroma de las plaquetas ntido, sin presencia de artefactos ni precipitados. CONTROL DE CALIDAD INTERNO PARA LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR. Es importante recordar que este parmetro se puede alterar (aumentar) por la temperatura alta, por las vibraciones y por el desnivel. Montar muestras al azar permite evaluar la reproducibilidad. CONTROL DE CALIDAD DE PLAQUETAS Los mtodos automatizados son los ms precisos; sin embargo, es muy importante tener en cuenta que el anticoagulante EDTA pude inducir agregacin plaquetaria; p o r t a n t o , i n f o r m a r f a l s o s recuentos bajos de plaquetas. Este hallazgo debe ser confirmado por medio del extendido en donde se considera normal un recuento (en 1000 aumentos) entre 7 y 21 plaquetas (factor 21000). Semanalmente se escogen dos cuadros hemticos uno con un recuento inferior a 100.000 plaquetas y otro con un recuento superior

a 300.000 se leen manualmente y se aplica la formula descrita en el formato de control de calidad. CONTROL DE CALIDAD EXTERNO El control de calidad interno evala la precisin en el desempeo de un laboratorio en un momento determinado y aunque los resultados sean buenos es necesario compararse con otros laboratorios. El control de calidad externo mide la precisin de un laboratorio en el tiempo y a su vez lo compara con otros laboratorios con base a la desviacin con respecto a los dems participantes. MUESTRAS En hematologa se utilizan sangre humana o sangre de aves estabilizada para la lectura de hemoglobina. El material usado en este producto ha sido verificado por mtodos aprobados y encontrado no reactivo al Antgeno de superficie de Hepatitis B, anti HCV, y acs HIV. Manejar con precaucin como si fuera potencialmente infeccioso. Tambin se distribuyen lminas para recuento diferenciales, reticulocitos y Hemoparsitos. CARACTERISTICAS Se hacen envos bimensuales y se tienen los reportes al mes de la fecha del envo. Se evalan tems con un valor porcentual de 12.5% hasta alcanzar el 100%. Por encima del 85% ser ptimo Entre un 65-75% la calificacin ser aceptable. Por debajo de 65%, se considera Fuera de Rango. Para el anlisis de los resultados, al igual que en qumica clnica, se procede a la tabulacin estadstica para levantar las correspondientes graficas y hacer sus respectivos anlisis, estableciendo acciones correctivas ALERTA y ACCION