Universidad Católica de La Santísima

Concepción
Facultad De Medicina
Departamento de Bioquímica.

Alumnos: Paula Rozas

Karina Romero
Miguel Salgado
Felipe Sobrazo
Profesores Encargados: Dr. Reginald
del Pozo
BQ Javier Grandón
BQ Mirna Muñoz
QA German Rotter
Fecha del Práctico: 23/Mayo/2007
Fecha de Emisión: 06/Junio/2007
 Introducción

La orina como parte fundamental del organismo, ha sido considerada desde el siglo V antes de Cristo como
elemento diagnostico en múltiples enfermedades.
Ya Hipócrates, concentraba sus esfuerzos diagnósticos en el análisis de la orina. Por ejemplo si el paciente
orinaba sobre el suelo y al poco tiempo abundaban las hormigas, se le diagnosticaba una enfermedad
grave, y como tratamiento se le suprimían los alimentos dulces.

En los dibujos del hombre de las cavernas, en los jeroglíficos Egipcios y en el Papiro Médico de Edwin
Smith1 , se observa al médico elaborando su diagnóstico basándose en la orina del paciente, examinando
su sabor, color, turbidez, olor y volumen. En 1695 Frederick Dekkers, médico holandés, describió la
presencia de albúmina en la orina por medio del calor y el ácido acético; luego en el siglo XVII se descubrió
el microscopio, lo que posibilitó el examen a éste nivel de la orina centrifugada, lo que hoy en día se ha
constituido como una parte muy importante del examen de orina

El uroanálisis, permite reconocer los signos de tres importantes grupos de enfermedades: trastornos del
metabolismo de los carbohidratos, hepatopatías y enfermedades hemolíticas, y afecciones renales y del
tracto urinario.

Los principales factores que contribuyen a un examen falsamente alterado de orina son: recolección de la
muestra (la calidad de ésta y su transporte son factores decisivos en los resultados del análisis, y determina
en un 100 % la validez de los resultados de laboratorio), tiempo que transcurre entre la toma de la muestra y
su análisis (las muestras deben ser procesadas dentro de las 2 horas siguientes a la toma de la muestra) ,
limitaciones inherentes a los análisis que se practican con una tira reactiva (como interferencias debidas a
medicamentos, ya sea por su efecto farmacológico o tóxico, o porque impiden la lectura de los resultados y
pueden ser causa de resultados falsos positivos o negativos) y en relación al análisis microscópico de
sedimento urinario.

Hoy este examen, a pesar de su utilidad, es el ejemplo de la tecnología poco prestigiosa y relegada en el
laboratorio (es un examen poco costoso y accesible para el sistema de salud), pero es uno de los exámenes
más valiosos; si se ejecuta con habilidad, experticia y atención. Para que los resultados tengan todo el valor
posible, el clínico debe conocer bien cada prueba y saber que existe un sin número de factores que pueden
afectar los resultados. Además es responsabilidad de éste proporcionar al paciente la información sobre las
condiciones de recolección y transporte de la muestra y acompañar la solicitud de laboratorio con la
información clínica pertinente.

Por lo dicho anteriormente es indispensable que, como estudiantes de medicina, conozcamos este examen
a fondo, y así sacar el mayor provecho posible de él. Para esto, este práctico nº5 tiene como tema central
al examen físico-químico y microscópico de la orina.

1
Papiro Médico de Edwin Smith: Es un tratado de cirugía, elaborado en Egipto hace aproximadamente 4000 años. Su contenido,
constituye hoy día una de las obras bibliográficas de mayor valor en la historia de la especialidad médico-quirúrgica. Además de la
descripción de los métodos clínicos utilizados en la época de su elaboración, contiene observaciones de asombrosa exactitud sobre
Anatomía, Fisiología y Patología , en él están casi por completo ausentes la magia y el misticismo que caracterizan a la medicina
antigua. Debe su nombre al primer egiptólogo de origen norteamericano, quien adquirió el rollo en 1862 de un negociante nativo en la
ciudad egipcia de Luxor (Tebas).
 Objetivos
• Realizar un examen completo de orina
• Observar las diferencias entre una muestra normal y una patológica en la orina
• Medir cuantitativamente la concentración de glucosa en orina

Materiales

- Probeta de 50ml
- Micropipeta de 1ml
- Puntas para micropipeta
- Vaso precipitado de 25ml
- Tubos de ensayo
- Cubetas para espectrofotómetro.
- Guantes de procedimiento
- Gradillas para tubos de ensayo y para cubetas de Espectrofótometro.
- Tiras reactivas para el examen químico de orina.
- Espectrofótometro Metertek SP-830
- Cubeta maestra para calibrar el Espectrofótometro
- Toalla absorbente de papel
- Muestra problema nº5 para realizar el examen químico semi–cuantitativo
- Muestra de orina reciente (mañana del día del práctico), traída por los integrantes del grupo
- Muestra problema nº5 para realizar el examen cuantitativo de glucosa
- Estándar de glucosa 100 mg/dl
- Tampón fosfato, pH 7,3, 100mmol/l
- Fenol 16mmol/l
- 4-Aminoantipirina 0,25 mmol/l
- Glucosa oxidasa ≥20.000 U/l
- Peroxidasa ≥1.000 U/l
- Microscópio óptico de contraste de fases
- Vórtex
- Centrífuga
 Metodología

Se agregan 30
ml de orina a
una probeta

Examen Físico
• Color
• Aspecto
• Transparenc
Se observa

Examen químico

Mediante tiras reactivas

Indican

• Glucosa
Importante: no
dejar más de • Leucocitos
dos minutos la • Bilirrubina
tira dentro, ni • Acido ascórbico
que pase • Cuerpos cetónicos
mucho tiempo
para leer el • Proteínas
resultado, ya • pH
que el tiempo • Densidad
afecta la • Urobilinogeno
veracidad del
resultado. • Nitritos
• Sangre

• Luego realizamos el trabajo con la glucosa, mediante el método GOD-PAP.

• Nuestra muestra a analizar fue la Número 5

Blanco Estándar Muestra (5)

Estándar - 100 µL -
Muestra - - 100 µL
Reactivo 1 mL 1 mL 1 mL

Mezclar bien
Incubar por 15 minutos
Leer a 500nm en
espectrofotómetro.
 • Por ultimo se realiza el sedimento urinario.
• Se centrifuga la muestra por 7 minutos a 2000 rpm
• Luego con una pasteur se toma una gota de sobrenadante
y se coloca sobre un portaobjeto
• Luego se analiza al microscopio contraste de fase.

Puede aparecer
• Células
• Cristales
• Cilindros
• Otros: bacterias, tricomonas, piocitos,
espermatozoides y levaduras

Examen Químico Semi-Cuantitativo

Hoy en día con la aparición de tiras reactivas, bandas de plastico que tienen 11
pequeños espacios con diferentes reactivos, es posible determinar simultáneamente el
peso especifico, pH, presencia de glucosa, proteínas, cetonas, bilirrubina,
urobilinógeno, sangre oculta, leucocitos, nitritos y ácido ascórbico. Se imprimen de
forma automática en aproximadamente 60 segundos (depende de la marca utilizada),
en este práctico son 60seg para todo excepto leucocitos (90-120seg). Se obtiene así,
amplia información sobre el funcionamiento del tracto urinario que al proyectarse al
organismo, le ofrece al clínico múltiples elementos diagnósticos.

Resultados obtenidos

Sustancia a determinar Muestra traída por el grupo Muestra problema nº5

Leucocitos (leucocitos/µl ) 0 0
Nitritos Negativo Negativo
Proteína (mg/100ml) Negativo 100
Glucosa (mg/100ml) 2000 ≤ Negativo
Bilirrubina (mg/100ml) Negativo 1,0
Urobilinógeno (mg/100ml) Negativo Negativo
Cuerpos cetónicos (mg/100ml) Negativo Negativo
Sangre (RBC/µl) Negativo 50
pH 5 8
Peso específico 1,030 1,020
Ácido ascórbico Negativo Negativo

Resultados examen cuantitativo de glucosa

Al medir en el espectrofotómetro la absorbancia, se obtuvieron los siguientes datos:

Blanco Estándar Muestra Muestra

(promedio)* Problema Nº 5 traída
 Absorbancia 0 1,160 0,527 1,039

* Promedio del Estándar: (1,158 + 1,162) = 1,160

2
El cálculo de la concentración de glucosa en la muestra se realiza a partir de las absorbancias
promedio del estándar y de las muestras respectivas:

MUESTRA PROBLEMA Nº 5 MUESTRA TRAIDA

• Glucosa en mg/dl: • Glucosa en mg/dl:

Glucosa = Abs muestra x 100 mg/l Glucosa = Abs muestra x 100 mg/l
Abs estándar Abs estándar
Glucosa = 0,527 x 100 mg/dl Glucosa = 1,039x 100 mg/dl
1,160 1,160
Glucosa = 45,431 mg/dl Glucosa = 89,568 mg/dl

• Glucosa en mmoles/l: • Glucosa en mmoles/l:

Glucosa = Abs muestra x 5,55 mmol/l Glucosa = Abs muestra x 5,55 mmol/l
Abs estándar Abs estándar
Glucosa = 0,527 x 5,55 mmol/l Glucosa = 1,039 x 5,55 mmol/l
1,160 1,160
Glucosa = 2,521 mmol/l Glucosa = 4,971 mmol/l:

Por lo tanto:

Estándar Muestra Muestra

Blanco
(promedio)* Problema Nº 5 traída
Absorbancia 0 1,160 0,527 1,039
Concentración de glucosa
en mg/dl 45,431 89,568
concentración de glucosa en
mmol/l 2,521 4,971

Resultados examen microscópico del sedimento urinario

• Leucocitos
• Glóbulos Rojos (10 por campo focal)
• Bacterias
• Células descamativas poligonales
 Discusión
La orina es un líquido biológico que procede de la
filtración renal de la sangre, por lo que su análisis
proporciona información valiosa para la detección,
diagnóstico diferencial y valoración de
alteraciones nefro-urológicas y, ocasionalmente,
puede revelar elementos de enfermedades
sistémicas que transcurren silentes o generalmente se asocia a Sd. nefrótico,
asintomáticas.
El análisis de orina comprende tres tipos de
exámenes; el examen físico, químico (semi-
cuantitativo y cuantitativo de glucosa) y
microscópico (sedimento urinario).
1) Examen Físico: Es la forma más básica de
estudiar la orina.
Los 3 aspectos principales en el examen físico
son:
Color: La orina normal es semi-transparente
y de color amarillo claro.
Aspecto: La orina normal es limpia y
transparente, la turbidez de la orina puede
deberse a la presencia de sangre, moco o
pus.
Densidad: Se refiere a la densidad específica
de la orina en relación con el agua. La
variación normal va desde una orina
francamente diluida con cifras alrededor de
1.008 al grado máximo de concentración
urinaria que es de alrededor de 1.030.
2) Examen Químico: Para realizar este examen
se utilizan tiras reactivas, que al entrar en
contracto con la orina produce una serie de
reacciones de color en los diversos papeles
secantes que contiene ésta. Cabe mencionar que
el examen químico puede ser semi-cuantitativo
(tiras reactivas) o cuantitativo (método GOD-PAP)
para el caso de la glucosa.
Los parámetros que a evaluar son:
 Leucocitos: La presencia de leucocitos en la
orina es un dato valioso, aunque no siempre
indica infección. Piuria, es la presencia de
leucocitos o glóbulos blancos en la orina y,
generalmente, indica una respuesta
inflamatoria del urotelio a invasión bacteriana.
 Nitritos: Su presencia indica un origen
bacteriano. Si la orina se deja a temperatura
ambiente durante varias horas, puede tenerse
una falsa información, porque organismos
contaminantes pueden producir nitrito y
enmascarar los verdaderamente patógenos.
Proteína: Normalmente la excreción de
proteínas es menor de 150 mg al día, que
corresponde a la mucoproteína de Tamm-
Horsfall segregada por los túmulos distales.
Proteinuria se define como una concentración
de proteínas en la orina mayor a 300 mg/24
horas. Si es mayor de 3.5 g/24 horas,
donde sus causas más frecuentes son todo
tipo de glomerulopatías, enfermedades
sistémicas del tejido conectivo, diabetes
mellitus, mieloma múltiple, amiloidosis,
alteraciones circulatorias, como insuficiencia
cardíaca crónica, pericarditis, trombosis de la
vena renal; algunas infecciones bacterianas y
virales, tumores y linfoma, entre otros.
Glucosa: Normalmente el túbulo contorneado
proximal reabsorbe toda la glucosa filtrada, si
ésta se encuentra en concentraciones bajo
180 mg/dl. De esta forma, glucosuria puede
ocurrir como un hecho aislado (secundaria a
hiperglicemia) o como manifestación de daño
renal (glucosuria renal), donde es
comúnmente asociada a otras
manifestaciones en el caso de disfunción
tubular proximal, como hiperfosfatemia,
hipouricemia, aminoaciduria, acidosis tubular
aguda, etc.
Cabe mencionar el caso del análisis
cuantitativo, en el cual se utiliza una reacción
enzimática colorimétríca, de la misma forma
que en los prácticos anteriores; realizando
una blanco, un estándar y con nuestra
muestra problema Nº5.
 Bilirrubina: Se origina en la hemoglobina al
degradarse en el sistema retículo endotelial y
sólo la directa o conjugada es hidrosoluble,
capaz de eliminarse por la orina.
 Urobilinógeno: La bilirrubina que llega al
intestino es convertida, por acción de enzimas
bacterianas, en diversos compuestos
relacionados entre sí, denominados en forma
colectiva como urobilinógeno.
 Cuerpos cetónicos: Estos elementos son
producto de la oxidación de ácidos grasos, y
normalmente no aparecen en la orina.
 Sangre: En condiciones normales se
encuentra ausente, pero en caso contrario se
produce la denominada hematuria,
 manifestándose con cambios en el color y de
la transparencia en la orina.
pH: El pH urinario normalmente es alrededor
de 6.0, y varía dependiendo del estado ácido-
base sistémico, entre 4.5 y 8.0.
Peso específico y/o concentración
específica: La concentración urinaria es una
respuesta al control de la osmolalidad y
volemia plasmática. De esta forma, su mejor
forma de medición es la osmolalidad, y debe
ser correlacionada con el estado clínico.
 Ácido ascórbico: Es un importante indicador
ya que éste puede interferir o afectar la
lectura de los parámetros ya antes
mencionados, dando falsos positivos en los
reactivos oxidantes. El ac. Ascórbico puede
deberse a la ingesta de medicamentos.
3) Examen Microscópico: Es obtenido tras la
observación de una muestra de orina,
previamente centrifugada, al microscopio
(observación del sedimento). Actualmente existen
máquinas que dan automáticamente el resultado
del sedimento de orina.
• Cristales: El hecho que se formen cristales
en la orina dependen de muchos factores,
como el grado de sobresaturación de sus
constituyentes, pH, la presencia de
inhibidores de cristalización, etc. Hay muchos
tipos de cristales que pueden ser observados
en pacientes con distintas alteraciones:
- Cristales de ácido-úrico: se observan solo
en orinas ácidas,
- Cristales de fosfato de calcio u oxalato
de calcio: la formación de los cristales de
oxalato de calcio no depende del pH de la
orina, en cambio los de fosfato de calcio se
forman en orina alcalina.
- Cristales de fosfato de magnesio: cuando
aumenta el pH de la orina (en infecciones de
bacterias que producen ureasa como
Klebsiella o Proteus) disminuye la solubilidad
del fosfato lo que causa la cristalización del
fosfato de magnesio.
• Cilindros: Los cilindros son aglomeraciones
de proteínas que se forman en los túbulos
renales, y es por eso que tienen forma
cilíndrica con márgenes regulares.
- Cilindros hialinos: No son indicadores de
enfermedad, y se observan en personas post
ejercicio, fiebre, deshidratación, uso de
diuréticos y métodos de contraste.
- Cilindros hemáticos: Están formados por
eritrocitos o restos de ellos. Son diagnósticos
de glomerulonefritis aguda o vasculitis.
- Cilindros de glóbulos blancos: Se forman
por leucocitos principalmente.
- Cilindros de células epiteliales: Se
asocian a necrosis tubular aguda y
glomerulonefritis aguda en los cuales se
descaman las células epiteliales de los
túbulos renales.
- Cilindros grasos: Generalmente son
cilindros de células epiteliales que en sus
citoplasmas poseen gotas de colesterol o
colesterol ester, o se pueden ver libres en la
orina
- Cilindros granulosos: Son cilindros de
proteínas agregadas o de células antiguas
que se han desintegrado. Se ven
principalmente en necrosis tubular aguda.
- Cilindros céreos: Son la última etapa de
degeneración de los cilindros granulosos, y
de observa en nefrones con flujo muy
disminuido, por lo que se asocian a
insuficiencia renal avanzada.
 Bacterias: La presencia de bacterias en la
muestra se debe principalmente a infección
(ITU), a pesar que en numerosas veces se
debe a contaminación, especialmente en
muestras femeninas. Para identificar la (las)
bacteria (s) de la infección se solicita el cultivo
bacteriano llamado urocultivo.
 Leucocitos: Generalmente se ven neutrófilos
en infecciones, donde el urocultivo
generalmente es positivo.
 Células Epiteliales: Son producto del barrido
que hace la orina por el tracto urinario.
 Eritrocitos: La hematuria, en este caso
microscópica, se define como la presencia de
más de 5 eritrocitos por campo microscópico
de gran aumento.
Cabe resaltar que para que un examen de orina
sea analizado correctamente es necesario una
serie de normas y pasos que se deben cumplir:
Como la persona debe recoger una cantidad
limpia de orina("de la mitad de la micción"), los
hombres y los niños deben tener limpia la cabeza
del pene, mientras las mujeres y las niñas deben
lavar el área que hay entre los labios de la vagina
con agua y jabón y enjuagar muy bien. Cuando se
inicie el proceso de eliminación de la orina, se
debe dejar que una pequeña cantidad de ésta
caiga a la taza del baño (así se limpia la uretra de
sustancias contaminantes); posteriormente, en un
recipiente limpio, se recomienda recoger
aproximadamente entre 1 y 2 onzas de orina y
retirarlo. Finalmente, se debe entregar este
recipiente al médico o asistente. Los exámenes
se deben realizar dentro de los 30 minutos
posteriores a la recolección de la orina y se
pueden hacer varias pruebas de la muestra.
Conclusión
 Los exámenes de orina son muy utilizados en
la medicina como claros indicadores de
patologías que tienen a presentar los seres
humanos. Este tipo de examen es un método
fidedigno de diagnóstico, pues es una biopsia
sencilla y económica además de no ser invasiva y
dolorosa. Dentro de las patologías que podemos
diagnosticar por medio de un examen de orina
encontramos daños hepáticos, cálculos renales,
glomerulonefritis, pielonefritis, trombosis de vasos
renales, entre otras.
Los resultados del examen pueden ser falseados
por diversos factores, como una inadecuada
recolección de la muestra; el excesivo tiempo que
transcurre entre la toma de la muestra y su
análisis; interferencias en las tiras reactivas
debido a medicamentos, ya sea por su efecto
farmacológico o tóxico; y limitaciones en relación
al análisis microscópico de sedimento urinario.
Es importante recalcar que la orina debe ser la
primera muestra de la mañana, lo que asegura un
tiempo adecuado en la vejiga, la nula o casi nula
alteración de ésta por la ingesta de alimentos,
líquidos y/o esfuerzos físicos, además de una
escasa contaminación bacteriana en el caso de
una persona que no presentara esta anomalía.
Siendo todo estas variables fundamentales para
el correcto diagnóstico.
Como ya observamos los principales
elementos en el análisis de una muestra urinaria
son nuestra vista (examen físico), microscopio
(examen sedimentario), y tiras reactivas, que
participan en la detección de leucocitos, nitritos,
proteínas, glucosa, cuerpos cetónicos,
urobilinógeno, bilirrubina, sangre, pH, peso
específico y ácido ascórbico. Corroborando lo
rápido y sencillo del examen de orina, pero
teniendo en cuenta siempre, que se debe tener
una vasta experiencia y conocimiento para poder
señalar fidedigna y eficientemente un análisis
concreto.
Tal fue el caso, que pudimos observar
alteraciones en dos muestras analizadas en el
laboratorio, dándonos un presunto diagnóstico de
la patología que pudiése tener cada paciente:
Muestra traída por nosotros: Se obtuvo una
alteración en la concentración de la glucosa, con
un valor menor o igual a 2000 mg/100ml (examen
químico), lo que nos indica un paciente diabético.
Patología acertada o corroborada, debido a que
sabíamos que la orina traída era de un paciente
diabético (padre de Karina R.). En los demás
exámenes; físico y microscópico, no se
encontraron mayores alteraciones, salvo la
presencia de cristales. Probablemente por el
consumo de medicamentos del paciente.
Muestra problema Nº5: En esta muestra se
observaron alteraciones químicas y
microscópicas; Se encontraron proteínas,
bilirrubina, sangre (examen químico), además de
abundantes bacterias en el sedimento (examen
microscópico). Con esto podemos concluir que el
paciente padece de una infección urinaria. Falta
conocer el origen de la presencia de bilirrubina en
la orina, pero para esto se necesitaran mayor
cantidad de exámenes en este paciente X.
Por último, cabe mencionar que la presencia de
bacterias en un sedimento no siempre puede
significar el diagnóstico de una enfermedad, ya
que puede ser motivo simplemente de una mala
higiene, en donde con solo una bacteria al cabo
de horas se pueden encontrar millones. Es por
esto que se necesita de todos los exámenes,
físicos y químicos, para poder obtener un buen
diagnóstico, además de la experiencia ya antes
mencionada.
Bibliografía
• Grandón. J, Muñoz. M, Del Pozo. R, Rotter.
G, Guía de Trabajos Prácticos, Carrera de
Medicina 2007, Universidad Católica de la
Santísima Concepción, Facultad de Medicina,
Departamento de Bioquímica.
• Del Pozo. R, Texto guía de Bioquímica
Medicina, volumen I, Universidad Católica de
la Santísima Concepción, Facultad de
Medicina
• Nelson. D, Cox. M, Lehninger Principios de
Bioquímica, Tercera Edición, Ediciones
Omega, 2000, Barcelona, España.
• http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/
• http://escuela.med.puc.cl/Publ/ManualSemiolo
gia/Orinatext.html
• http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/e
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