Jaque mate a los agentes patgenos

por Thomas bttcher

En la actualidad los agentes patgenos agresivos de origen bacteriano se encuentran en pleno avance y estn adquiriendo cada vez ms resistencia a los tratamientos con antibiticos. Podramos decir que la carrera contra el tiempo ha comenzado. Un nuevo enfoque a este problema nos conduce a una sustancia, que, al contrario de los antibiticos, no aniquila las bacterias, sino que paraliza sus armas de ataque. De esta manera se reduce el riesgo de desarrollo de las temidas resistencias y el sistema inmunolgico retoma el control. Hace algunas dcadas, la lucha contra las enfermedades infecciosas pareca haber finalizado. Desde el descubrimiento de la penicilina por Alexander Fleming en 1928, comenz la campaa victoriosa del hombre contra los grmenes, y desde entonces, nuevos antibiticos fueron desarrollndose. As fue como operaciones arriesgadas y enfermedades amenazantes se convirtieron en tratamientos de rutina, y como consecuencia, la expectativa de vida se prolong. Pero el brillo de aquellas armas maravillosas est comenzando a opacarse. Ao tras ao mueren ms y ms personas como consecuencia de infecciones simples, a pesar de haberse iniciado a tiempo su tratamiento.

Segn el Profesor Harald Seifert del Instituto de Microbiologa mdica, Inmunologa e Higiene de Colonia, Alemania: "Cuantos ms antibiticos usemos, ms antibiticos perderemos." El problema est en su accin teraputica: los mismos destruyen las bacterias. Para las bacterias su propia supervivencia est en juego y harn lo posible para adaptarse. Algunos patgenos individuales, que se han tornado resistentes luego de un tratamiento, an se pueden propagar rpidamente y con facilidad por el organismo, ya que la flora natural en el mismo ha sido destruida por los antibiticos. Los blancos de ataque en las clulas de las bacterias, hacia donde estn dirigidos los antibiticos conocidos, son ms bien limitados. Es as como en la actualidad se estn lanzando cada vez menos sustancias nuevas al mercado. Como contrapartida, los grmenes estn recuperando terreno sin cesar y ya existen colonias contra las cuales fallan casi todas las sustancias activas. Las infecciones originadas por dichos patgenos son fatales y apenas tratables. Especialmente en los hospitales los grmenes se propagan de forma vertiginosa. Pero la transmisin de estos agentes patgenos peligrosos tambin ocurre en la calle entre personas sanas. Como consecuencia de esto, actualmente la tasa de crecimiento de infecciones graves a mortales es de carcter exponencial. El ncleo de mi investigacin radica en encontrar nuevas sustancias activas y blancos de ataque en la lucha contra las bacterias patgenas. Uno de los mayores grupos de antibiticos son los Antibiticos Beta-lactmicos. El ms conocido de ellos es la penicilina. Mientras estas cadenas reciben la mayor atencin desde la poca de Fleming sus parientes, las Beta-lactonas, han quedado en el olvido. Para analizar el potencial de las Betalactonas como arma contra bacterias patgenas, desarroll una biblioteca con diversas variaciones de cadenas de Beta-lactonas. Mediante un nuevo procedimiento, que apliqu por primera vez en bacterias, comenc a analizar los posibles blancos de ataque de las Beta-lactonas en las bacterias. Los primeros blancos de ataque son protenas que aceleran en la clula procesos metablicos actuando como biocatalizadores. Dichas protenas se denominan enzimas. Ellas reconocen las molculas en los substratos, cuyas reacciones ellas tienen que acelerar y transforman dichas molculas en su centro activo. Dependiendo de la variacin estructural de las Beta-lactonas, ciertas enzimas deberan errneamente tomarlas por sus substratos naturales. Entonces, en vez de transformarlas y liberarlas como suele ocurrir, las mismas quedaran hipotticamente adheridas a ellas. La idea es pues, que el centro activo de las enzimas se una firmemente a las Beta-lactonas reactivas y que no pueda catalizar ms reacciones. Este es exactamente el mismo mecanismo que los antibiticos utilizan para desactivar aquellas enzimas vitales para la supervivencia de las bacterias.

UN TIRO CERTERO!

Ahora restara ver si las Beta-lactonas realmente pueden unirse a las enzimas y exactamente cules de las miles de protenas diferentes presentes en la clula de la bacteria pueden ser desactivadas por ellas. Mi estrategia fue marcar las Beta-lactonas acopladas a las protenas con colorante fluorescente y clasificar las diversas y numerosas protenas segn su tamao. Mediante una excitacin con luz verde obtuve algunas bandas fluorescentes. Cada banda corresponda a una enzima que se haba acoplado firmemente a una Beta-lactona y a su respectivo color distintivo. El resultado fue un tiro certero, ya que las Beta-lactonas haban marcado protenas !

Para cada especie de bacterias obtuve solamente un puado de protenas marcadas, lo cual indica que las Beta-lactonas reaccionan de forma muy selectiva con slo algunas de las enzimas de la totalidad de todas las protenas de la clula. Dependiendo de la estructura de las Beta-lactonas, varias protenas fueron marcadas. Mejor imposible, ya que lo que se necesita son sustancias capaces de atacar un nico blanco de la forma ms selectiva posible. Pero, haba protenas interesantes en los blancos de ataque marcados? Para responder a esta pregunta, aisl las bandas fluorescentes y logr identificar las protenas mediante el anlisis de masa molecular, De esta forma pude descifrar unas 20 protenas diferentes en los interesantes, una protena saltaba a la vista: se trataba de la denominada ClpP, que es una

proteasa, es decir una enzima que disocia otras protenas. En las bacterias funciona como una especie de destructor de documentos; las protenas que la clula no necesita ms, se despliegan y ClpP las fragmenta. Dentro de las protenas degradadas tambin se encuentran aquellas responsables por el ataque coordinado de bacterias patgenas contra el ser humano. El patgeno Staphylococcus aureus se ha tornado famoso en los ltimos aos debido al aumento de su resistencia a los antibiticos y por su agresividad. Staphylococcus aureus existe en el 30 % de las personas y es un pacfico habitante de las mucosas y de la piel. Esta paz es sin embargo engaosa. La bacteria se esconde del sistema inmunolgico y espera su oportunidad para atacar. Si el organismo se encuentra debilitado o si la bacteria llega a la herida, comienza a reproducirse. An se comporta de manera silenciosa y comienza a enviar sustancias mediadoras y se detiene para "escuchar". Cuando suficientes bacterias han enviado su respuesta, su

oportunidad contra el hombre ha llegado. En ese momento comienza el simultneo ataque coordinado de millones de bacterias. Aqu es donde se activa la proteasa ClpP. La misma disocia una protena que est situada en los genes para las armas de ataque de Staphylococcus aureus y normalmente impide que estos genes sean "ledos". Recin cuando ClpP intervenga y desbloquee los genes pueden comenzar el proceso de armamento de las bacterias.

INOFENSIVO PARA LAS CLULAS HUMANAS

Si entonces logrsemos que las Beta-lactonas desactiven la proteasa ClpP, las bacterias no pueden ms atacar y tendramos muy buenas perspectivas para prototipos de un nuevo medicamento. Hasta ahora pude comprobar la marca en los extractos de bacterias muertas. El siguiente paso fue verificar si algunas de las Beta-lactonas podran vencer la membrana protectora y la membrana de la clula y si podran unirse a ClpP en clulas vivas. Tambin aqu apliqu el truco de la marca con colorante fluorescente. Lo que se produjo fue asombroso: para cada una de las tres Beta-lactonas de la biblioteca de variantes estructurales, se obtuvo una nica banda fluorescente. El anlisis fue inequvoco, ya que se trataba de ClpP. Estas lactonas pudieron penetrar en la clula y de forma sorprendente se unieron nicamente debido a su estructura especial a la protena ClpP como blanco principal en la clula viva. Se haban dado las condiciones ptimas para un medicamento. La pregunta es: Fue ClpP realmente desactivada ? Yo verifiqu esto aislando una enzima. Efectivamente, la proteasa enmudeci y ya no poda ms degradar otras protenas. Ahora solamente restaba saber, si de esta forma se podran desarmar las bacterias. Entonces analic las ms diversas enzimas y toxinas, que son emitidas por las bacterias y que pueden llevar a consecuencias devastadoras como por ejemplo sepsis, neumonas y shock txico. El resultado fue fantstico: las armas de ataque ms importantes fueron replegadas. Eso fue no fue todo, sino que adems las Beta-lactonas tuvieron xito contra colonias clnicas multi-resistentes y agresivas ! Al mismo tiempo las Beta-lactonas resultaron ser inofensivas para las clulas humanas. Qu significado tiene esto para la Medicina? Un medicamento basado en este nuevo concepto tendra ventajas decisivas: las bacterias seran desarmadas y no podran causar ms daos al ser humano y seran eliminadas por el sistema inmunolgico. Al mismo tiempo, estaran superados los tipicos efectos colaterales de los antibiticos, (tambin dirigidos hacia aquellas bacterias de las que dependemos) que destruyen nuestra flora intestinal y estomacal. Las bacterias dainas individuales que se tornan resistentes no tendran ms ventajas de seleccin, porque la nueva sustancia activa no las mata. Ellas solas no pueden causar ms daos y seran reconocidas dentro de la masa de patgenos tornados inofensivos y posteriormente aniquiladas por el organismo. De esta forma la manifestacin de resistencias sera minimizada. la nueva sustancia activa tambin podra imponerse en estudios clnicos. Tendramos a disposicin un arma adicional en la lucha contra la amenaza de agentes patgenos bacterianos.

El Dr. Thomas Bttcher naci en Munich, Alemania en 1982. Curs sus estudios de Qumica y Bioqumica entre 2003 y 2006 en la Universidad Ludwig-Maximilian de Munich. En 2006 obtuvo su Bachelor of Science en Qumica. Entre 2005 y 2006 obtuvo varias becas y realiz estudios de Astrobiologa. En 2009 obtuvo su Doctorado en la Universidad Ludwig-Maximilian de Munich y el 21 de diciembre de ese mismo ao fue nombrado Dr. rer.nat. Hasta mayo de 2010 realiz su Post-doctorado en la Universidad Tcnica de Munich y desde junio de 2010 dirige proyectos de transferencia de Investigacin AVIRU en Munich. Informaciones: edoc.uni-muenchen.de/11018/1/Boettcher.Thomas.pdf thomas.boettcher@cup.uni-muenchen.de

El Dr. Thomas Bttcher fue entrevistado por la revista cientfica alemana "Bild der Wissenschaft"

Dr.Bttcher: Ud. es naturalmente resistente, o cualquier patgeno lo puede derribar fcilmente? Soy naturalmente resistente, los patgenos tienen que cuidarse. Es Alexander Fleming su dolo? Siempre consider a Alexander Fleming como un cientfico extraordinario. l descubri un arma maravillosa en en el medio de un montn de cultivos en descomposicin. Un buen investigador tiene un buen ojo para todo lo que sea fuera de lo comn y utiliza resultados sorprendentes a modo de propulsor para posteriores indagaciones e investigaciones. Su inters por la Astronutica y los viajes espaciales tripulados, estn directamente vinculados a su trabajo? En cierta forma, s. Los agentes patgenos se tornan ms agresivos bajo condiciones de gravedad reducida y representan un riesgo para los viajes espaciales tripulados. Adems mis mtodos bioqumicos tambin son aptos para el anlisis de formas de vida extremas en la Tierra. De esta manera los mismos pueden contribuir para responder a cuestiones sobre los orgenes y la abundancia de vida en el Universo. En qu proyecto de investigacin Ud. est trabajando actualmente? Mis colaboradores y yo actualmente estamos intentando aprovechar nuestros conocimientos para encaminar un nuevo medicamento contra las infecciones.

Traduccin: Roberto J. Romero-Dutschmann