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Cap 26 - Bacterias - ANAEROBIOS

Cap 26 - Bacterias - ANAEROBIOS

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1
ANAEROBIOS
RivasORIGEN Y DEFINICION
La presencia de una atmósfera terrestre rica en O
2
hapermitido que los seres vivos hayan evolucionadodesarrollando un metabolismo aeróbico, el cual secaracteriza por ser una forma muy eficiente de obtenciónde energía. A nivel bacteriano las bacterias anaerobiasprecedieron largamente a las aeróbicas y sin dudapredominaron largamente en un mundo vivo quecomenzaba a desarrollarse.Los anaerobios generalmente poseen un metabolismode tipo fermentativo en el cual sustancias orgánicas sonlos aceptores finales de electrones. Las formasvegetativas mueren cuando son expuestos al O
2
molecular libre en la atmósfera, aunque el grado deresistencia bajo estas condiciones es variable(AEROTOLERANCIA); Los esporos bacterianos no sonafectados por tratarse de formas biológicasmetabólicamente inertes y con muy escasa proporción deagua en su composición.En consecuencia una definición simple de lasbacterias anaerobias sería: anaerobios son aquellosgérmenes que sólo pueden desarrollarse en ausencia decantidades significativas de Oxígeno (O
2
) y bajocondiciones de potenciales REDOX (Eh) muy reducidos.En el mundo microbiano existen especies capaces dealternar con sistemas metabólicos diferentes para crecery multiplicarse en muy diferentes condiciones deaerobiosis, total, reducida o ausente. Son gérmenesfacultativos. Otros solamente subsisten en rangosestrictos de gases tales como el O
2
y el CO
2
(microaerófilos). Los anaerobios son poseedores desistemas enzimáticos que solamente funcionan enausencia de O
2
por tanto son estrictos en cuanto a susexigencias de Medio Ambiente.De ahora en más el término Anaerobios se aplicarásolamente para este tipo de gérmenes.El conocimiento de estas bacterias es poco yrelativamente reciente ya que para poder lograrcondiciones de anaerobiosis en el Laboratorio senecesitaban, hasta los años 60, equipos costosos ytécnicas bacteriológicas muy dificultosas. A partir de laintroducción de sistemas simples para produciranaerobiosis con equipos y reactivos de bajo costo elconocimiento de los anaerobios se desarrollaintensamente. Aun así, no hay un gran número deMicrobiólogos que se dediquen al Tema, la taxonomíaestá en permanente revisión e infinidad de aspectos semantienen oscuros.
MORFOLOGIA Y TINCION
Como en casi toda la bacteriología, la morfología delos anaerobios se basa en la tinción de Gram. Unproblema adicional se plantea por la tendencia a tornarseGram negativos, sea por la poca estabilidad frente a ladecoloración (se prefiere el uso de alcohol a la mezclaalcohol-acetona) lo que los convierte en Gram inestablesal examen directo de los materiales, sea porque existeuna variación tintorial en los cultivos bacteriológicos.Dos aspectos a tener en cuenta en la tinción de Gramson:
a.
efectuar la decoloración solamentecon alcohol etílico prescindiendo de la acetona,y
b.
prolongar el tiempo de contacto conLugol hasta 1 minuto.La morfología celular, sobre las bases del Gram,permite distinguir formas variadas que incluyen toda lagama: Cocos Gram positivos, cocos Gram negativos,diplococos, estreptococos; bacilos Gram negativos,cocobacilos, fusiformes, bacilos rectos o curvos; bacilosGram positivos, esporulados o no esporulados,espiroquetas, etc.
EL METABOLISMO DE LOS ANAEROBIOSOXIGENO SENSIBILIDAD
Los anaerobios estrictos crecen y se multiplican enausencia total de Oxígeno molecular (O
2
) lograndoobtener energía libre y sintetizar todos sus componentesestructurales sin la ayuda del O
2
. Todos sabemos que lavía anaerobia posee un menor rendimiento energético yestá sujeta a potenciales REDOX bajos (algunas enzimassolamente operan en estas condiciones) y sin la presenciade elementos que interfieran el flujo normal deelectrones.Si bien el O
2
es potencialmente tóxico para cualquierforma de vida, los anaerobios son intolerantes al mismoaunque en diferentes grados. Existe un espectro que vadesde los extremadamente intolerantes (aerointolerantes)hasta los aerotolerantes moderados los cuales puedensobrevivir a la presencia de O
2
durante breves períodos.Varias son las causas de la Oxígeno toxicidad. En 1erlugar el Oxígeno es un poderoso oxidante, es decir, unávido receptor de electrones, por lo tanto su presencia ensolución es incompatible con potenciales REDOX bajos.En esta situación el flujo de electrones se ve interferidopor un receptor extraño al usual de los gérmenesprovocando shunts letales. En segundo lugar el Oxígenopuede interactuar directamente con enzimas o cofactorescausando inactivaciones irreversibles. En tercer lugar yaparentemente, la causa más importante de la Ox.toxicidad se atribuye a la producción de sustanciastóxicas derivadas de la reducción parcial de la moléculaO
2
. Simplificando se pueden dar las siguientesreacciones químicas:
 
2
O
2
+ 4H + 4e- --> H
2
O (reducción completa)O
2
+ 2H + 2e- --> H
2
O
2
(reducción parcial)O
2
+ e- --> O
2
.-La formación de Peróxidos de Hidrógeno (H
2
O
2
)puede ser catalizada por varias enzimas y su letalidadpara las bacterias está fehacientemente comprobada. Porotra parte el anión Superóxido (O
2
.-) es altamente tóxicopor su participación en la producción de hidroxilos libres(HO.-) agentes letales para los microorganismos.Aquellos anaerobios aerotolerantes poseen enzimascomo Catalasas y peroxidasas que descomponen losH
2
O
2
en H
2
O + O; otros poseen Superóxido-dismutasas(SOD) que actúan eliminando los O
2
.-; más aun las SODhan sido postuladas como factores de virulencia en losanaerobios ya que estas enzimas permitirían la sobrevidade las bacterias en tejidos oxigenados hasta que elconsumo de Oxígeno creará el ambiente adecuado parala multiplicación y desarrollo.
POTENCIALES REDOX
El potencial de Oxido Reducción (Eh) de una parejaREDOX es la medida en VOLTIOS de la tendenciaespontánea a donar o recibir electrones por parte de unode los integrantes de la pareja (flujo de electrones). Unapareja REDOX posee una forma reducida (dador deelectrones) y una forma oxidante (receptor de electrones)Reductor <---> oxidante + electrones. En consecuenciacuanto menor sea la cantidad de formas oxidantes menoro más bajo será el potencial REDOX. La presencia de O
2
en los cultivos o en el medio natural debe ser eliminadaimprescindiblemente del microclima de desarrollo (O
2
atmosférico y en solución. Aún mas el descenso de losEh debe afirmarse con la presencia en el medio desustancias reductoras que superen en gran número a lasoxidantes.
FLORA NORMAL ANAEROBIA
El hombre conjuntamente con los animales(mamíferos, aves, peces) es hospedero en sus epitelios,mucosas y aparatos de un gran número de Especies y deun gran número de individuos anaeróbicos. Estos sonmiembros de una FLORA NORMAL beneficiosa y hastaen algunos casos esencial para la vida. El conocimientode esta flora normal es importante desde varios ángulos.Si pensamos que muchas infecciones anaeróbicas sedesarrollan en la vecindad de las superficies mucosas enlas cuales estos gérmenes predominan como floraautóctona, el conocimiento de la misma se presenta degran utilidad para sospechar quienes estaríaninvolucrados en los procesos infecciosos. Estainformación ayuda al Clínico para establecer unaantibioticoterapia empírica racional y al microbiólogopara seleccionar los Medios de Cultivo más apropiadosal aislamiento e identificación bacterianos.La TABLA 1 muestra el predominio de las especiesmás comunes como flora normal humana segúndiferentes localizaciones.
 
3
TABLA 1
PielV.R.S.(#)BocaIntestinoGenitalesexternosUretraVaginaBacilos Gram(+) esporulados
Clostridia
0013-4011Bacilos Gram(+) no esporulados
 Actinomyces Bifidobact. Eubacterium Lactobac.
(*)
 Propionibact
.
00103-42010222221113-42100d0d00d100213-42Bacilos Gram(-) no esporulados
 Bacteroides Fusobact.
00223-43-422222221
Cocos G (+)
223-43-4212
Cocos G (-)
023-420d2(
#
) Vías Respiratorias Superiores; incluye vías nasales, nasofaringe, orofaringe y amígdalas.(
*
) Incluye anaerobios, facultativos y microaerófilos.(
d
= desconocido) (
0
= no encontrados o raros) (
1
= hallazgo irregular) (
2
= habitualmente presentes) (
3-4
presentesen gran número).
ESPOROS
Algunas especies de anaerobios (bacilos Grampositivos del Género
Clostridium
) poseen la capacidadde esporular, esto es, producir esporos. Se trata deestructuras biológicas genéticamente iguales a suantecesor vegetativo, metabólicamente inactivos yaltamente resistentes a condiciones medioambientalesadversas (Temperatura, humedad, radiaciones UV,agentes químicos).La germinación de los esporos conduce a la formavegetativa de la bacteria y puede suceder, en algunoscasos luego de varios años. La resistencia de los esporosa altas temperaturas -120ºC hasta 15 minutos-desecación, falta de nutrientes, presencia de sustanciasquímicas antisépticas, radiaciones. La resistencia al calorse explica por los escasos porcentajes de H
2
O en suconstitución (proceso de desecación paulatino del esporoen la maduración) y la presencia de Calcio y ácidodipicolínico como agentes quelantes, mientras que laresistencia a los otros agentes físico/químicos estaríadada por lo menos en parte por la presencia de proteínasde superficie ricas en cisteína.Esta propiedad de esporular le confiere a las especiesque la poseen una singular resistencia frente los agentesfísicos y químicos habitualmente usados para ladesinfección y una permanencia prolongada en el medioambiente. Sin duda la ubicuidad y la peligrosidad deestos gérmenes son resaltables y su permanencia en laecología microbiana está por demás asegurada.El proceso de esporulación comienza durante la fasede desarrollo estacionario luego de la falta de ciertosnutrientes, una vez que se inicia el proceso este esirreversible y una enorme cantidad de cambiosmetabólicos comienzan dentro de la célula con laproducción y almacenamiento de enzimas y proteínasdistintas a las de la forma vegetativa, que luego formaránparte del esporo.El factor desencadenante está constituido por lacarencia de fuentes de Carbono y Nitrógeno,concretamente la falta de concentraciones adecuadas detrifosfato de guanosina (GPT) intracelulares inicia laesporulación y se sabe que todas las deficienciasnutricionales que conducen a una disminución del pool

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