DESORDENES DEL ALMACENAMIENTO LISOSOMAL

Los desórdenes de almacenamiento lisosomal, de los cuales más de 40 son conocidos, son
causados por una actividad defectuosa de proteínas lisosomales; que resulta en la acumulación
intralisosomal de metabolitos no degradados. A pesar de los años de estudio de las bases
genéticas y moleculares de los desórdenes de almacenamiento lisosomal, poco se sabe en
relación a los eventos que produce esta acumulación intralisosomal patológica. Aquí
resumimos la bioquímica de los desórdenes de almacenamiento lisosomal, luego discutimos
desde las vías que son potencialmente afectadas en estos desórdenes y que ayudan a delinear
sus mecanismos patológicos.

La existencia de un nuevo grupo de partículas con propiedades líticas- las llamadas bolsas de
suicidio-posteriormente llamadas lisosomas-fueron descubieras por de Duve y colegas. Desde
que comenzó a haber gran interés en relación su rol en las enfermedad, en particulart en los
padecimientos que devienen de la disfunción de las enzimas lisosomales. Duve aclara
bastamente los defectos enzimáticos lisosomales congénitos pero a pesar de ello, esto ha sido
poco optimista.
Es verdad que un gran número de deficiencias metabólicas de enzimas lisosomales y de
proteínas integrales de membrana han sido descritas y que las bases genéticas y molefculares
han sido determinadas para muchas de ellas.
Sin embargo, la literatura científica no ha llegado a descifrar las vías bioquímicas y celulares
que están afectados en estas enfermedades y como resulta en disfunción celular y tisular
(alteración de células y tejidos). En otras palabras, ¿por qué la acumulación de partículas no
metaolizadas causan disfunción celular, con una aparente correlación pequeña entre el tipo de
sustrato acumulado y el curso de la enfermedad?
En este artúculo se trata de responder esta pregunta. Primero, tratamos de esbozar las
principales causas bioquímicas de los desórdenes de almacenamiento lisosomal y, en particular
dar las nuevas luces de descubrimientos inexplicables recientes. Se discute como la
acumulación lisosomal de metabolitos no digeridos pueden impactar vías metabólicas y causar
patología.

La bioquímica de los desórdenes de almacenamiento lisosomal

Las partículas líticas que fueron decritas por primera vez por Duve-los lisosomas- son organelas
membranosas que consiste en una membrana externa limitante y vesículas intralisosomales.
Los lisosomas contienen enzimas digestivas que son activas dentro del pH ácido de los
lisosomas y la mayoría de estas enzimas son solubles y localizadas en el lumen lisosomal.
Estudios recientes, incluyendo analisis proteómico ha identificados nuevas proteínas solubles
lisosomales, incluyendo hidrolasas y al menos 7 proteínas integrales de membrana en los
lisosomas. En principio, mutaciones en los genes que codifican cualquiera de estas proteínas
puede causar un desorden de almacenamiento lisosomal (DAL). Más de 40 DAL que
envuelvenhidrolasas solubles son conocidas y, recientemente, un número de enfermedades
que envuelven proteínas integrales de membrana han sido identificadas. Probablemente un
defecto genético será descubierto para cada DAL.
Los DAL pueden ser agrupados de acuerdo a varias clasicaciones, sin embargo, tal vez, la más
usada está basada en la caracterización del defecto enzimático o la proteína más que en el
sustrato acumulado.
La clasificación de muchos DAL pueden ser hechos en base al tipo de sustrato acumulado. Pero
, en mucopolisacádidos y glicosaminglianos acumulados están presentes en alteración de la
función de cualquiera de las 11 enzimas que incluyen las exoglicosidasas, sulfatasas y una
transferasa no hidrolítica.; estas enzimas lisosomales se requieren para la degradación
secuencial de los glicosaminoglicanos. En la esfingolipidosis, esfingolípidos no metabolizados
resulta de la actividad defectuosa de una de varias proteínas. Y, en la oligosacaridosis se
acumulan oligosacáridos. En algunos casos, en los que más de una molécula puede ser el
sustrato porque existe un determinante común, una deficiencia en una enzima en particular
puede resultar en la acumulación de diferentes sustratos. Por ejemplo, la gangliosidosis GM1 y
la enfermedad de Morquio-B, son causadas por defectos en la beta dalactosidasa, pero ellas
resultan en la acumulación de gangliósido y keratan sulfato respectivamente y cada una tiene
un patrón clínico y bioquímico particular. Similarmente, defectos enla degradación de
oligosacáridos puede resultar en la acumulación de glicolípidos, glicoproteínas o
proteoglicanos.
Los DAL son normalmente monogenéticos, pero, para muchos DAL, numerosas mutaciones han
sido descritas en el mismo gen en diferentes pacientes; las mutaciones incluyen perdida,
ganancia o cambio en la secuencia de nucleótidos. Sin embargo no se ha encontrado una
correlación genotipo-fenotipo en la mayoría DAL y la predicción del curso clínico de esta
enfermedad usualmente no puede ser hecho en base al analisis mutacional. En muchas
enfermedades es típico una neuropatología severa que puede llevar a la muerte temprana de
los pacientes; sin embargo en otras los síntomas están restringidos a tejidos periféricos. En
algunas enfermedades puede no haber síntomas en unos pacientes y en otros tener síntomas
graves.
En resumen, la severidad de la enfermedad debe ser relaconada con el tipo de sustrato que se
acumula, sus niveles, los tejidos y células en las que se acumula. Las predicciones acerca de la
severidad de la enfermedad, su patología y progresión, aún cuando la mutación ha sido
documentada, no es posible.

Desórdenes del almacenamiento lisosomal con una base molecular unexpected:

La deficiencia múltiple de sulfatasa fue la primera en ser escrita en 1960. en la DMS los 13
miembros conocidos de la familia de los genes de sulfatasa tienen una actividad reducida. La
enfermedad que envuelve diversas enzimas fue causada por mutaciones simultanean en cada
una de las enzimas individuales. Es conocido que la DMS resulta de la falla postranslacional
convirtiendo un residuo de cisteína que se encuentra en el centro catalítico de la sulfatasa en
un C alfa formaglicin residuo; estos residuos son generados en el lumen del retículos
endoplasmático. Pro la acción de una enzima específica y, mutaciones en este gen resulta en
actividad defectuosa.
Otro DAL raro es la galactosialidosis, también asociado con la actividad defectuosa de más de
una enzima que es la beta galactosidasa y sialidasa. En esta enfermedad un complejo
multienzimático en el que la carboxi peptidasa de la catepsina A es el principal componente.
Durante su síntesis la catepsina A se dimeriza y asocia con los precursores de la sialidasa y
beta galactosidasa. Esta asociación es esencial para proteger estas glicosidasas de la
proteólisis rápida intralisosomal y es también necesarira para su correcta acumulación
intracelular y su proteólisis. Numerosas mutaciones en el gen que codifica la catepsina A son
la base molecular de este DAL, elmismo que pude ser corregido por sobreexpresión de la
catepsina A en las células de la galactosialidosis.

Lipofuccinosis, muchos genes, una enfermedad?

En las enfermedades tratadas en el punto anterior diversos defectos enzimáticos son causados
pr la ausencia de una proteína funcional que se requiere para la estabilidad o actividad de más
de una u otra enzima. Y, en el caso de los lipofuccinoides cerebrales , defectos en más de 8
distintos genes resulta en enfermedades que están caracterizadas por una patología similar.
Los síntomas incluye neurodegeneración progresiva y acumulación de un material
autofluorescente (ceroides y lipofuccina) u la subunidad c de la ATP sintetasa en los lisosomas
de neuronas y otras células. La lipofuccinosis comprende el grupo más común de
enfermedades neurodegenerativas en la población pediátrica.
En este grupo de enfermedades además de estar implicadas varias hidrolasas también,
alteraciones genéticas de proteínas integrales de membrana están involucradas en su génesis.

DAL causados por proteínas de membrana defectuosas

Los lisososmas tienen proteínas de membrana con funciones conocidas, la más conocida de
ellas es su función como transportadores de metabolitos solubles hacia el exterior de los
lisosomas. Dos de éstas han sido implicadas en DAL desde hace tiempo, sialina y cistoniocina.
La sialina, que es un transportador anionico está defectuoso en la cistonosis. Como muchos
otros aminoácidos son transportados fuera de los lisosomas, es de suponerse que otros DAL
que son causados por defectos en transportadores de aminoácidos no conocidos serán
descubiertos. Similarmente, defectos en otras proteínas de membrana lisosomales
presumiblemente deben producir otros DAL. Mutaciones en abuntandes proteínas lisosomales
de membrana asociadas a membrana tipo 2, causan la enfermedad de Danon. Esta
enfermedad fue formalmente conocida como una enfermedad de defecto de almacenamiento
lisosomal de glucogeno y caracterizada por la acumulación de vacuolas que contenían bebris
citoplamático en células musculares esqueléticas y cardíacas.

Otras causas potenciales de los defectos de almacenamiento lisosomal

Adicionalmente a los defectos mencionados anteriormente existen numerosos otros defectos
en proteínas lisosomales que pueden o podrían causar DAL. Por ejemplo, algunas formas de
esfingolipidosis son causadas por mutaciones en la proteína activadora de esfingolípidos que
se requiere para la hidrólisis óptima de los esfingolípidos, que son responsables de muerte
temprana en los pacientes que las padecen. Mucolipidosis como la pseudopolidistrofia, son
causadas por el transporte defectuoso de enzimas lisosomales que provienen de defectos en el
gen que codifica la enzima lisosomal UDP N acetil glusomanina; esta enzima cataliza el primer
paso en la formación de la manosa 6 fosfatasa en el aparago de golgy, una marca para el
reconocimiento de hidrolasas lisosomales. Defectos en otros componentes de las vías de
transporte desde o hacia los lisosomas podrían causar DAL.

La biología celular de los desórdenes de almacenamiento lisosomal

La principal pregunta abierta de la biología de los DAL es la delineación de los caminos
bioquímicos y celulares que causan la patología. Los DAL están caracterizados por
acumulación intralisosomal de sustratos no metabolizados que es la primera causa de la
enfermedad, pero la gran cantidad de enfermedades y sintomatología indica que mucos
caminos secundarios bioquímicos y celulares pueden también ser activados. Como dos
enfermedades no comparten la misma patología, diferentes vías deben ser activadas en
diferentes enfermedades.
La acumulación primaria del metabolito afecta a vías secundarias bioquímicas y celulares que
subsecuentemente causan la patología tisular, la expresión genética alterada y la activación
de vías bioquímicas terciarias; cualquiera de estos eventos puede ser la causa principal del
daño tisular y la muerte en los DAL,l pero se conoce poco la identidad de esas vías o su
regulación en los DAL.

Estabilidad lisosomal: una explicación de la patología de los DAL podría ser la estabilidad
lisosomal, si la integridad o permeabilidad están comprometidas, las que podrían alterar las
hidrolasas y resultar en la acumulación de metabolitos en el citosol, pero desafortunadamente
hay poca evidencia que soporte esta idea. El almacenamiento intraceluar de material fue
visualizado en DAL, innumerables estudios han reportado la acumulación de lamacenamiento
de material dentro de los compartimentos membranosos lo que son presumiblemente los
lisosomas. La posibilidad de que algunos componentes lisosomales como la acumulación de
materiales e hidrolasas no puede ser excluida y ello puede ser suficiente para causar la
patología. Hay evidencia que proteínas lisosomales pueden ser vertidas dentro del citosol bajo
varias condiciones fisiológicas y farmacológicas. Por ejemplo, proteasas lisosomales como las
catepsinas son encontradas en el citosol durante la apoptosis y la expresión de ciertas proteias
resultan en la aparición de proteínas lisosomales en el citosol.
Los lisosomas también contienen un número de proteínas integrales de membrana con función
desconocida, y algunas de ellas podrían funcionar como bombas de metabolitos hacia fuera de
los lisosomas, particular interés se tiene sobre los transportadores ABC, los miembros de la
familia ABC se cree que tienen un rol en la traslocación de lípidos y la ABC2 ha sido propuesto
como regulador del transporte lipídico transmembrana neuronal, específicamente del
transporte de colesterol y galactosilceramida, sin embargo no hay datos que soporten esta
idea. Los lisosomas se pueden fusionar con la membrana plasmática en un mecanismo
regulado por Ca lo que resulta en la secreción de varias proteínas dentro del espacio
extracelular, por ejemplo la catepsina B. ¿podría la fusión de los lisosomas también ocurrir con
las organelas intracelulares?, nuevamente no hay evidencia para esto. Si esto ocurre, entonces
esto podría tener consecuencias desastrosas para las organelas al fusionarse con los
lisosomas.

Tráfico intracelular defectuoso

Otra explicación para la patología de los DAL podría ser la acumulación de metabolitos no
degradados en los bloques lisosomales de transporte intracelular de o hacia los lisosomas.
Cambios en los niveles de colesterol son observados en los DAL que son causados por una
alteración en la hidrólisis de esfingolípidos.
El colesterol y los esfingolípidos tienen un rol importante en la función neuronal y síntomas
neuronales son vistos en los DAL con estas alteraciones.
La mucolipina 1 ha sido recientemente sugerida de ser un canal catiónico no selectivo que
puede tener un rol en el normal funcionamiento endosomal.
Vías bioquímicas secundarias
La identificación de metabolitos secundarios en los DAL ha sido frecuentemente el resultado de
la búsqueda de marcadores sexológicos que pudieran ser usados par el eguimietno de la
progresión de la enfermedad, en particular para esas enfermedades que se caracterizan
principalmente por síntomas periféricos. Algunos estudios han indicado que una homeostasis
de calcio defectuosa puede ser la responsable de la neuropatofisiología de algnos DAL, como la
enfermedad de Gaucher. Los roles cruciales del calcio en la fisiología del cerebro normal hace
esta atractiva proposión.

Expresión Genética Alterada

Estudios genéticos han proveído de la primera información sobre los cambios que ocurren en
varios DAL. Los cambios en la expresión genética no siempre pueden por si mismos proveer
información acerca de la patología. El estudio genético luego de que la enfermedad se ha
desarrollado no provee información acerca de la secuencia y la infra o sobre expresión y por lo
tanto no puede proveer información acerca de la causa primaria de la patología de la
enfermedad. Se requiere una base de datos que documente los cambios en la expresión
genética que ocurre en los diferentes estados de la progresión de la enfermedad, en diferentes
tejidos y en diferentes enfermedades que muestran patología similar o divergente.

Terapias
Los tratamientos para los DAL pueden ser divididos en aquellos que se dirigen a los síntomas y
en aquellos que abordan la causa.
De los tratamientos para la sintomatología, la esplenectomía, cuyo uso es relativamente
común, puede reducir los síntomas como la trombocitopenia y anemia que están presentes en
algunos DAL, pero ello no cura la enfermedad.
El transplante de médula ósea solamente es utilizada en casos específicos; logrando que
células normales secreten enzimas normales y estas enzimas sean internalizadas en células
afectadas.
Hay tratamientos específicos para algunas enfermedades, por ejemplo la hemodiálisis y el
transplante renal para la enfermedad de Fabry ya que la insuficiencia renal es una
complicación común.
Es estresante que no haya tratamiento para los DAL raros y que las opciones médicas sen
limitadas. Sin un entedimiento detallado de los mecanismos precisos que participan y sin un
fácil y temprano diagnóstico tratamientos nuevos no serán viables.
En adición de estos tratamientos para los síntomas hay varias opciones terapéuticas que
abordan directamente la causa de la enfermedad; ya sea por el remplazo de los genes
defectuosos o de enzimas o directamente en los sistemas afectados por la acumulación de
metabolitos no degradados.