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培养基
培养基是人工配制的适合于不同微生物
生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
它是进行科学研究,发酵生产微生物制
品等的基础 。
一、培养基的类型
万种
不同的分类方法
按培养基的物理状态分类
液体、固体、半固体培养基
液体培养基
微生物实验:
麦芽汁、营养肉汤
大规模工业生产:
发酵培养基
液体培养基
菌体在液体培养基中的分布
实验室用作各种生理、代谢研究和获得
大量菌体
工业发酵应用
液体培养基-举例
豆芽汁培养基
黄豆芽 ,蔗糖(或葡萄糖) ,蒸馏水 ,
自然
, 灭菌
固体培养基
凝固培养基
~ %琼脂; ~ %明胶
非可逆凝固培养基
硅胶平板 ( :化能自养
天然固体培养基
滤膜
醋酸纤维素膜:水样
实
验
室
平板 斜面
琼脂与明胶的若干特性比较
化学 营养 融化 凝固 常用 来 透明 特点
成分 价值 温度 点 浓度 源 度
琼 聚半 无 ~ ~ ~ 海 高 反复凝
脂 乳糖 % 藻 融;酸
的硫 水解;
酸酯 耐加压
灭菌
明 蛋白 氮源 ~ ~ ~ 兽 高 胰蛋白
胶 质 % 骨 酶水解
工
土豆、麸皮 木屑
业
米糠 胡萝卜条
固体培养基
多用于微生物的分离、鉴定;计数;保
藏;抗生素等的生物测定
微生物产品生产
固体培养基-举例
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
牛肉膏 ,蛋白胨 , ,
琼脂 ~ ,水 , 。
, 灭菌
半固体培养基
含琼脂 ~
用于细菌的动力观察、趋化
性研究;
厌氧菌培养;
双层平板法的上层培养基
半固体培养基-举例
缓冲葡萄糖肉汤半固体培养基
蛋白胨 , ,葡萄糖 , ,牛肉膏 ,蒸馏水
,琼脂 ,
灭菌
培养基的组成成分分类
天然、合成、综合培养基
天然培养基
以天然有机物配制而成
配制方便、营养丰富但化学成分复杂难以确定
精细实验
基本培养基、种子培养基、
发酵培养基
天然培养基
常用天然培养基成分
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、血清、
鱼粉、玉米粉、麸皮等
天然培养基-举例
肉汤蛋白胨琼脂培养基
麦芽汁琼脂培养基
合成培养基
配料成分均为已知的化学物质
成分精确、重复性好;但价格较高,配置繁琐
用作定量要求较高的精细
实验,如分类鉴定、生理
生化、育种、遗传分析
合成培养基-举例
察氏培养基(霉菌)
, , , , ,蔗糖 ,琼脂 ~ ,水 ,
自然。
灭菌
综合培养基
部分天然材料+已知化学药品
应用最多,如牛肉膏-蛋白胨培养基;
马铃薯蔗糖培养基等
严格来说,凡含有未经处理的琼脂的任何合成
培养基均为综合培养基。
按培养基的功能分类
鉴别、选择、加富、种子、发酵培
养基
鉴别培养基
依据代谢特点,培养基中加入指示用化
学试剂,以鉴别不同微生物
如伊红美蓝乳糖培养基( ):蛋白胨 ,乳
糖 ,蔗糖 , ,伊红 ,美蓝 ,蒸馏水 ,
抑制 +,低酸度时,伊红+美蓝- 沉淀
常应用于饮用水、牛乳等食品等细菌学检验
E.coli
选择培养基
根据特殊营养要求、或对理化因子抗性
设计
投其所好、取其所抗
功能:使混合菌样中劣势菌变成优势菌
,用于菌种筛选
投其所好
主要是一些特殊的碳源和氮源,如纤维
素可被用来富集纤维素分解微生物,甘
露醇用来富集自生固氮菌,石蜡油用来
富集分解石油的微生物,以及用较浓的
糖液来富集酵母菌
取其所抗
用于抑制它种微生物的选择性抑制剂有染料
(结晶紫等)、抗生素和脱氧胆酸钠等;有
利于选择培养的理化因素有温度、氧气、 或
渗透压等。
青霉素-
马丁氏培养基(孟加拉红,链霉素)- 细菌
中性、碱性- 霉菌
无氮源- 自生固氮菌
无氧- > 乳酸菌等
种子培养基
氮源、维生素丰富,原料精细, 稳定,保证
菌种的正常生长与繁殖
发酵培养基
数量大,原料粗放,来源充足,价格低廉,
且利于下游的分离提取。
一般碳源丰富;如果产物含氮量高,则增加
氮源。
二、培养基的配制及选用
微生物学研究与生产实
践中最基本的
如何选用?如何设计?
四大原则
营养协调
营养物质满足微生物的需要( 表
自养微生物:简单的无机物;异养:有机物
营养物的浓度及配比适当
碳氮比( / )
牛肉膏蛋白胨琼脂
细菌
高氏一号培养基
放线菌
马铃薯蔗糖琼脂
酵母菌 察氏培养基
霉菌 麦芽汁培养基
理化条件适宜
水活度及渗透压
氧化还原电位
各大类微生物的生长 范围
酵母菌
霉菌
细菌
放线菌
的控制
内源调节
;
+ +
+ +
外源调节
外加酸 碱
水活度
~
满足培养目的
培养菌体?种子培养基, 低
发酵?发酵培养基, 高于种子培养基
实验室 大规模发酵?
经济节约
以粗代精、以野代家、以废代好、以简
代繁,以烃代粮,以纤代糖、以氮代朊
、以国产代进口
三、培养基配制一般流程
计算
不耐高温试剂
称量
过滤除菌
溶解
高温灭菌
使用
营养物质的跨膜运输
四种运输方式
单纯扩散
促进扩散
主动运输
基团转位
小结
液体、固体、半固体培养基特点及应用
鉴别培养基
选择培养基的原理及举例
种子、发酵培养基的区别
培养基配制的四大原则
四大类微生物常用培养基
四类运输方式的特点