Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Save to My Library
Look up keyword
Like this
203Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
Guia de Tecnicas

Guia de Tecnicas

Ratings:

4.8

(5)
|Views: 18,999 |Likes:
Published by api-3699670

More info:

Published by: api-3699670 on Oct 18, 2008
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

03/18/2014

pdf

text

original

 
- GUIA DE TECNICAS INMUNOLOGICAS 2006 -
INDICE
 
 
 
 
 
 
 
 
Interacción antígeno-anticuerpo Página 1Interacción Secundaria Ag-Ac Página 1Reacciones de precipitación Página 1Técnicas inmunológicas basadas en reacciones de precipitación. Página 2Inmunodifusión Radial Página 2Inmunoelectroforesis Página 3Reacciones de aglutinación Página 4Concepto de título Página 7Interacción primaria Ag-Ac Página 9Inmunomarcación Página 10Inmunomarcación con Acs conjugados a ENZIMAS Página 11Inmunomarcación con Acs conjugados a FLUOROCROMOS Página 12Citometria de Flujo Página 12Radioinmunoanálisis (RIA) Página 16Técnicas radioinmunométricas (PRIST, RAST) Página 17ELISA (Enzime Linked ImmunoadSorbent Assay) Página 18Western blot Página 19Técnicas de tipificación de antígenos de histocompatibilidad Página 21Técnicas serológicas Página 21Técnicas moleculares Página 23Cross match Página 28Técnicas inmunológicas para estudiar la funcionalidad de los fagocitos Página 29Proteíograma electroforético Página 31
 
 
INTERACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO 
La unión antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una interacción reversible en la que están involucradosenlaces no-covalentes. En la interacción
in vitro
de un antígeno (Ag) con su correspondienteanticuerpo (Ac) se distinguen dos etapas, la
interacción primaria
no visualizable y la
interacciónsecundaria
, que sigue a la anterior y se caracteriza por la aparición de un fenómeno visible comola aglutinación o la precipitación. Por otro lado, no siempre que se produce la interacción primariaAg-Ac, se produce la interacción secundaria, ya que, para conseguir fenómenos visibles, sonindispensables determinadas concentraciones y características de los Ags y Acs.
INTERACCIÓN SECUNDARIA ANTIGENO-ANTICUERPO.
Las técnicas inmunológicas que evidencian la interacción Ag-Ac a través de una reacciónsecundaria (precipitación ó aglutinación) son, generalmente, más económicas y sencillas queaquellas que permiten visualizar la interacción primaria (ver más adelante).
Reacciones de precipitación
Al mezclar cantidades suficientes de Ag soluble con Acs específicos, la interacción Ag-Ac puededar lugar a una red capaz de ser visualizada como un precipitado. Esa red de la que hablamos, noes otra cosa que grandes complejos inmunes (CI) formados por la interacción Ag-Ac. Tal como seobserva en la figura, cuando se agregan concentraciones crecientes de
Ag soluble
a unacantidad fija de suero conteniendo Acs específicos, a medida que la cantidad de Ag agregadoaumenta, la cantidad de precipitado se incrementa hasta alcanzar un máximo, luego del cualdeclina.En un extremo de la curva de precipitación, cuando se agregan pequeñas cantidades de Ag, losCI se forman en
exceso de Ac
. En el otro extremo, al agregar grandes cantidades de Ag, los CIse forman en
exceso de Ag
siendo pequeños y probablemente constituidos por una molécula deAc y dos de Ag. Entre estas dos situaciones extremas se encuentra la
zona de equivalencia
, endonde la relación Ag-Ac permite la formación de grandes redes de CI que precipitan.1
 
Cantidad de Ag agregadoExcesoEquiva-Exceso
 
 
La reacción de precipitación depende de la
VALENCIA
del Ac y del Ag. La valencia del Ac da ideadel número de sitios que posee para reconocer al Ag. De esta manera, un Ac bivalente posee dossitios capaces de reconocer al Ag. Del mismo modo, la valencia de un Ag nos habla del máximonúmero de epitopes que posee. Para que se pueda producir la interacción secundaria Ag-Ag conla consecuente formación del precipitado, tanto el Ag como el Ac deben ser, al menos, bivalentes.La asociación entre Ac bivalentes y Agmonovalentes (un único epitope no repetido)no permite la formación de CI precipitantes.La asociación entre Ac bivalentes y Agmultivalentes permite la formación de CIprecipitantes. El Ag multivalente puedepresentar un sólo epitope repetido o variosepitopes distintos.
Técnicas inmunológicas basadas en reacciones de precipitación.1- Inmuno Difusión Radial (IDR)
Esta técnica permite cuantificar de manera sencilla y económica inmunoglobulinas de isotipoG, M y A ó antígenos solubles (C3, C4, transferrina, etc) presentes en muestras biológicas. Latécnica se basa en la difusión de la muestra conteniendo el antígeno a medir (inmunoglobulinas ó antígenos solubles) en una matriz semisólida de agar en la que seencuentra disuelto el Ac específico. La muestra biológica se introduce en los orificioscilíndricos excavados en el agar y a medida que el antígeno difunde en forma radial, sealcanza la relación Ag-Ac que permite la formación precipitados visibles. Una vez finalizada ladifusión se mide el radio (R) de los precipitados que es proporcional a la concentración deantígeno (C). La concentración de proteína en la muestra biológica (Cx) se calcula realizandouna curva de calibración utilizando muestras patrones de concentración conocida.2

Activity (203)

You've already reviewed this. Edit your review.
1 hundred reads
1 thousand reads
Estefania Landi liked this
mikisime liked this
Ingrid Sarai Mc' liked this
Jomi's Inlovee liked this
Jazz-m Man liked this

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->