MANUAL DE FUNCIONAMIENTO Y MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO UNIDAD DE LABORATORIOS

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INDICE
1. Objetivo 2. Responsabilidad de aplicacin y alcance 3. Introduccin 4. Descripcin 4.1 Descripcin tcnica 4.2 Ubicacin 4.3 Partes del equipo 4.4 Funcionamiento 4.5 Mtodo de limpieza 4.6 Mantenimiento 4.7 Calibracin 4.8 Precauciones y otros datos de inters 5. Definiciones 6. Registros

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1. OBJETIVO Describir el funcionamiento y el mantenimiento del microscopio ptico.

2. RESPONSABILIDAD DE APLICACIN Y ALCANCE La responsabilidad de aplicacin y alcance de este procedimiento recae sobre todo el personal (estudiante y/o auxiliar) que proceda a observar cualquier muestra o elemento.

3. INTRODUCCIN El microscopio es un equipo que consta de un juego de lentes que permiten la observacin de detalles que a simple vista no se pueden ver con el ojo humano. El microscopio es un instrumento de precisin conformado por subsistemas pticos lentes, filtros, prismas, condensadores-; mecnicos elementos para controlar la posicin de la muestra en el espacio tridimensional X, Y, Z-; elctricos transformadores y sistemas de iluminacin-, y electrnicos cmaras, sistemas de televisin, etc.-, que interactan entre s para amplificar y controlar la formacin de imgenes de objetos de tamao reducido.

4. DESCRIPCIN (Grafica del equipo)

Figura No 1. Partes del microscopio (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento de equipos de laboratorio OPS)

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Figura No 2 Esquema lateral del microscopio y sus componentes (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento de equipos de laboratorio OPS)

4.1 Descripcin tcnica (ver figura 3) Marca comercial (nombre, direccin y telfonos): ____________ Proveedor: ____________ N Inventario: ____________ Fecha de entrada: ____________

4.2 Ubicacin 4.2.1 Condiciones del Ambiente 1. Asegurarse que el ambiente o rea en que se instale el microscopio est protegido de polvo y humedad. El ambiente ideal debe disponer de un sistema de aire acondicionado que garantice aire libre de polvo o partculas, control de humedad y control de temperatura de manera permanente. 2. Verificar que el ambiente disponga de seguridad, y se encuentre alejado de lugares como pocetas de agua o donde se trabajen sustancias

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qumicas que puedan salpicar y afectar el equipo. Tambin se deben evitar sitios que tengan luz solar directa. Verificar que el sitio de instalacin cuente con una toma elctrica en buen estado, cuyo voltaje est ajustado en magnitud y frecuencia con los cdigos y normas elctricas y que resulte compatible con el del sistema de iluminacin del microscopio. Instalar el microscopio sobre una superficie nivelada de estructura rgida, bajo la cual exista espacio suficiente para que el usuario coloque sus piernas y como consecuencia pueda acercar el cuerpo hacia el microscopio y la cabeza hacia los oculares, sin forzar la columna vertebral. Para facilitar la manipulacin del microscopio, se debe contar con una silla de altura variable, que le brinde un buen soporte lumbar; tambin se puede proveer un apoyo para los pies al frente del sitio del trabajo, pero no en la silla. El propsito es lograr que la columna vertebral est lo mas recta posible y se reduzca la flexin de los hombros y el cuello. Evitar que en sitios cercanos al lugar de instalacin del microscopio haya equipos que produzcan vibraciones como centrfugas o refrigeradores. Procurar no mover el microscopio de su sitio de instalacin y con mayor razn si el mismo se utiliza intensamente cada da. Cubrir el microscopio con un protector de polvo si no se usa por largos perodos de tiempo. El protector puede ser de plstico o de tela que no suelte pelusa. En zonas de alta humedad guardar el microscopio durante la noche, en una cabina provista de un bombillo de mximo 40 W, verificando que hayan orificios que permitan la ventilacin del interior.

4.3 Partes del equipo

Figura No 3 Microscopio marca Olympus con cmara (Fotografa del microscopio utilizado en labores de postgrado e investigacin Laboratorio de Limnologa)

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Las partes del microscopio estn referenciadas en la siguiente tabla (figura 4) y cuyos componentes estn especificados en las primeras figuras (figuras 1 y 2)

Figura No 4. Tabla de las partes del microscopio (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento de equipos de
laboratorio OPS)

4.4 Funcionamiento Una fuente luminosa enva rayos de luz a una primera lente, llamada condensador, que concentra los rayos de luz sobre el objeto a observar. Estos rayos atraviesan el objeto y una lente denominada objetivo da una imagen aumentada de este. Un segundo lente, el ocular, vuelve a aumentar la imagen dada por el objetivo. Esta ltima imagen es la que ser recibida por el observador.

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EL AUMENTO DEL MICROSCOPIO Tanto el objetivo como el ocular llevan marcados unos nmeros, cada objetivo lleva un numero diferente. Para saber con qu aumento (A) se esta observando se deben multiplicar los dos nmeros. A= aumento del objetivo x aumento del ocular Ejemplo: si se utiliza el objetivo de 45 aumentos y un ocular de 10, el aumento de observacin ser de: A= 45 x 10 = 450 Con este aumento una clula de 50 m (50 micras = 50 milsimas de milmetro) tendr un tamao aparente de: 50 m x 450 = 22500 m = 22`5 mm Se debe tener en cuenta que 1000 m = 1 mm MANEJO DEL MICROSCOPIO 1. Se debe sacar el microscopio de su embalaje con cuidado y colocarse frente al observador, sobre una superficie plana y firme. 2. realizar una revisin general para ver cualquier anormalidad e informarla a la persona encargada de los equipos. 3. conectar el microscopio a travs de un estabilizador de voltaje, si el voltaje de alimentacin no es estable. 4. girar el revolver hasta situar el objetivo de menor aumento (el mas corto) en lnea con el ocular. 5. accionando el tornillo macromtrico, se subir la platina hasta el tope. No forzar nunca ninguno de los elementos mecnicos. 6. colocar la preparacin sobre la platina y sujetarla con las pinzas. Debe procurarse que el objeto a observar quede centrado. 7. encender la luz mediante el interruptor. 8. mirando por el ocular, cerrar el diafragma lo mas posible, accionando su palanca en sentido contrario a las agujas del reloj. Debe observarse el campo iluminado con una luz ni muy brillante ni demasiado tenue. 9. mirando por el ocular, accionar el mando de enfoque lentamente en el sentido de las agujas del reloj para hacer bajar la platina, alejando la preparacin del objetivo, hasta que el objeto se observe. Ajustar el enfoque mediante el tornillo micromtrico. 10. moviendo la preparacin, buscar una zona de observacin adecuada. 11. para observar con un objetivo de mayor aumento, girar el revolver al objetivo. Para enfocar, normalmente, ser necesario girar unas pocas vueltas el tornillo micromtrico en un sentido o en el otro. Si el campo se muestra muy oscuro, abrir un poco el diafragma.

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MICRMETRO: para medir objetos que se observan en el campo visual de un microscopio se utiliza un micrmetro ocular. Este consiste de una placa de cristal con una escala grabada, que se inserta en un ocular microscpico, quedando la escala enfocada por encontrarse en el plano de la imagen real intermedia. Es preferible contar con un ocular micromtrico con la placa permanentemente instalada el cual reemplaza al ocular visual para hacer mediciones. Para mayor precisin se puede utilizar un tipo de ocular micromtrico que tiene una escala exterior adicional en un tornillo micromtrico que en cada vuelta completa desplaza un trazo perpendicular un intervalo de la escala grabada. Los micrmetros de platina son similares a una lmina portaobjetos y tienen grabadas escalas que representan medidas exactas y convencionales. Comnmente se utiliza un micrmetro de platina cuya escala mtrica es de un milmetro (1000 micras), dividida en 10 unidades con 10 subunidades de 10 micras cada una. 4.5 Mtodo de limpieza La limpieza del microscopio es una de las rutinas mas importantes y debe considerarse un procedimiento rutinario. Para realizar la rutina de limpieza se requiere lo siguiente: Materiales: 1. Una pieza de tela limpia, de textura similar a la de los pauelos. 2. Una botella de lquido para limpieza de lentes. Se consigue en las pticas. Normalmente no afecta los recubrimientos de los lentes y tampoco afecta los pegantes o cementos utilizados para el montaje de los mismos. Entre los lquidos de limpieza ms utilizados se encuentran el etil ter, el xileno y la gasolina blanca. 3. Papel para limpieza de lentes. Se consigue normalmente en las pticas. Si no es posible conseguir este material, se puede sustituir con papel absorbente suave o con algodn tipo medicinal. Tambin puede utilizarse un trozo de seda suave. 4. Una pieza de gamuza muy fina. Se puede conseguir en peletarias. 5. Una pera de caucho para soplar aire. Se puede fabricar en el laboratorio un dispositivo con este propsito, acoplando una pipeta tipo Pasteur, con la pera de caucho. 6. Una cubierta plstica. Se utiliza para proteger el microscopio del ambiente externo cuando no est en uso. Tambin podra utilizarse una bolsa de tela de textura similar a la de los pauelos. 7. Un pincel suave de pelo de camello o un pincel fino para pintura. Lo importante es que el pelo del pincel sea natural, de longitud uniforme, textura muy suave, est seco y libre de grasa. En los almacenes que

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distribuyen artculos de fotografa, es posible conseguir este accesorio. Tambin es posible encontrar un equivalente en tiendas especializadas en suministro de cosmticos. 8. Un paquete 250 g de material desecante (silica gel). Este material se utiliza para mantener controlada la humedad en la caja de almacenamiento del microscopio, si la misma es hermtica. Este material cambia de color cuando se encuentra saturado de humedad, aspecto que permite detectar si requiere ser sustituido o renovado. Cuando est en buen estado, por lo general es de color azul; cuando se encuentra saturado de humedad es de color rosado. 9. Bombillos y fusibles de repuesto. De la clase instalada por el fabricante o un equivalente de las mismas caractersticas del original. 4.6 Mantenimiento Entre las rutinas ms importantes para mantener un microscopio en condiciones adecuadas de operacin, se encuentran las siguientes: 1. Verificar el ajuste de la plataforma mecnica. La misma debe desplazarse suavemente en todas las direcciones (X-Y) y debe mantener la posicin que selecciona o define el usuario. 2. Comprobar el ajuste del mecanismo de enfoque. El enfoque que selecciona el usuario debe mantenerse. No se debe variar la altura asignada por el usuario. 3. Verificar el funcionamiento del diafragma. 4. Limpiar todos los componentes mecnicos. 5. Lubricar el microscopio de acuerdo a las recomendaciones del fabricante. 6. Confirmar el ajuste de la ua fijalminas. 7. Verificar el alineamiento ptico. 4.7 Calibracin Seguir las instrucciones del Manual del fabricante. 4.8 Precauciones y otros datos de inters 1. Los lentes no deben tocarse con los dedos y se debe procurar que el objetivo no choque contra el objeto a observar, pues podra romperse o romper la preparacin. 2. El diafragma debe estar lo mas cerrado posible, siempre y cuando la preparacin tenga la suficiente claridad, pues en caso contrario, el exceso de luz har que los objetos a observar no se vean o estn poco contrastados.

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3. Evitar dejar el microscopio sin los oculares. Colocar los tapones si requiere retirar los oculares para evitar el ingreso de polvo o partculas a la cabeza binocular. 4. No se debe enfocar subiendo la platina. Se enfoca con el macromtrico y cuando se observe la preparacin se ajustar el enfoque con el tornillo micromtrico. 5. Evitar limpiar los componentes pticos con etanol, debido a que este liquido afecta los elementos pticos. La platina y la base deben mantenerse lo mas limpia posible, pero no se debe utilizar xileno o acetona en esta actividad. 6. Utilizar las dos manos para levantar el microscopio. Con una mano sostenerlo por el brazo y con la otra sostener su base. 7. Evitar tocar con los dedos la superficie de la bombilla cuando se cambia. Las huellas digitales disminuyen la intensidad lumnica. 8. No se debe fumar cerca del microscopio ya que los lentes pueden cubrirse con una capa de material no combustible, mezclado con residuos de carbn, lo que produce decoloracin y un campo borroso. 9. Cuando se utilice aceite de inmersin con el objetivo de 100x no deben ser cantidades exageradas, ya que si este no se retira cuando se termina el trabajo, se secar sobre los lentes y producir problemas en la observacin. En la mayora de casos es suficiente usar una gota de 5 mm de dimetro. 10. Algunos fabricantes recomiendan no utilizar alcoholes o acetonas, debido a que pueden afectar disolver- los cementos o pegantes utilizados para fijar los lentes. 11. Todos los materiales requeridos para efectuar la limpieza deben mantenerse limpios y guardados en recipientes que los protejan del entorno externo. Cuidados especiales para climas hmedos. En climas hmedos, por lo general calurosos, los microscopios suelen ser afectados por hongos, que se forman principalmente sobre la superficie de los lentes, en las ranuras de los tornillos y bajo la pintura protectora. En caso de no protegerse el equipo de forma adecuada, podra quedar inservible en muy corto plazo. Los cuidados que se detallan a continuacin ayudan a prevenir la formacin de hongos:

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1. Almacenar el microscopio durante la noche en una caja dotada de un bombillo elctrico que no exceda los 40 W de potencia. El bombillo debe estar instalado en la parte superior de la caja, cerca de la cabeza binocular y debe disponer de orificios para permitir la circulacin del aire. Se debe evitar que la temperatura del interior de la caja no exceda los 50 C, para que no se afecten las propiedades de los lubricantes del microscopio. 2. Si no es posible utilizar la caja con el bombillo elctrico, como alternativa se puede utilizar un material desecante como la silica gel o arroz. Cuando use el agente desecante verificar que el microscopio est guardado en una caja o protegido con una cubierta protectora que puede ser fabricada en tela de caractersticas similares a la de los pauelos. Verificar que el agente desecante est en buenas condiciones; caso contrario, sustituirlo o regenerarlo. 3. Limpiar el microscopio estereoscopio de forma peridica. Usar guantes de ltex si tiene que tocar los lentes. Esto evita que las huellas digitales se adhieran a la superficie y disminuye los riesgos o probabilidad de crecimiento de hongos donde quedaron impresas las huellas digitales. 4. Si ninguna de las alternativas mencionadas es factible, ubicar el microscopio en un lugar que tenga buena circulacin de aire. Cuando el microscopio estereoscopio no est en uso, podra colocarse bajo la luz solar de forma directa, por periodos cortos de tiempo. Esto reduce la humedad y el riesgo de que crezcan hongos en las superficies del equipo. 5. El aire acondicionado evita significativamente el crecimiento de los hongos en los microscopios. Sin embargo, esta no es una opcin que disponga una gran cantidad de laboratorios. Si el servicio de aire acondicionado no es continuo en el rea donde se encuentra instalado el microscopio estereoscopio, se deben tomar precauciones para controlar la humedad. Remocin de la pelcula de hongos 1. Revisar y limpiar con frecuencia el microscopio estereoscopio, utilizando los procedimientos mencionados en el presente captulo. Controlar las condiciones de humedad donde se usa y almacena el microscopio. Si se mantiene una ventilacin adecuada, disminuye la posibilidad de que se inicie la formacin de hongos en el equipo. 2. Si se detecta un crecimiento de hongos, utilizar una mota de algodn humedecida en una solucin limpiadora de hongos que normalmente es ter o xilol. Frotar suavemente siguiendo un movimiento circular, a lo largo de toda la superficie del lente. Tambin puede realizar un movimiento oscilatorio, hacia adelante y hacia atrs o izquierda-derechaizquierda, ejerciendo sobre la superficie del lente una presin muy moderada. Si es necesario repetir el procedimiento con una nueva mota de algodn.

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3. Cuando se termine la remocin de la pelcula de hongos, limpiar con una mota de algodn limpio. 4. Los hongos solo pueden ser removidos cuando su crecimiento se limita a la superficie de los lentes. Si dicho crecimiento no se atiende a tiempo, el hongo puede penetrar el cuerpo del lente. Si este es el caso, el lente se pierde, all ya es imposible removerlo.

5. DEFINICIONES Apertura numrica. Medida de la habilidad que tiene un objetivo para concentrar la luz y distinguir pequeos detalles de un objeto. Normalmente, el valor de la apertura numrica se encuentra grabado en el costado del cuerpo del objetivo. Mayores valores de apertura numrica permiten que un mayor nmero de rayos oblicuos de luz pase por los lentes frontales del objetivo, produciendo una resolucin ms alta de la imagen. Campo de visin. Dimetro del campo de visin en milmetros, medido en el plano intermedio de la imagen. El dimetro del campo en un microscopio ptico se expresa por el nmero del campo de visin, o sencillamente como nmero de campo. Diafragma. Dispositivo que controla el flujo de luz a travs del microscopio. Hay diafragmas de dos tipos: el diafragma de apertura que ajusta el ngulo de apertura en el microscopio, y el diafragma de campo que regula el tamao de la imagen del instrumento. El propsito de los diafragmas en los microscopios pticos es prevenir que lleguen, a los planos de formacin de imgenes, rayos de luz con aberraciones severas y asegurar una adecuada distribucin de luz, tanto en la muestra como en el espacio de la imagen. Foco. Lugar donde, como resultado de la refraccin de la luz, se concentran los rayos que atraviesan un lente. Si los rayos de luz convergen en un punto, el lente es positivo y el foco real; si los rayos de luz divergen, el lente es negativo y el foco virtual. ndice de refraccin. Valor que se calcula comparando la velocidad de la luz en el vaco, con la velocidad de la luz en un segundo medio de mayor densidad. Se representa normalmente por la letra [n] o [n], en la literatura tcnica o en las ecuaciones matemticas. Ocular. Conjunto de lentes diseado para proyectar una imagen real o virtual, dependiendo de las relaciones que existan con otros conjuntos de lentes del microscopio. Como su nombre lo indica, a travs del mismo, el microscopista observa la imagen. Profundidad de campo. Grosor del espcimen o muestra que es razonablemente claro a un determinado nivel de enfoque. Profundidad de foco. Rango sobre el cual el plano de la imagen puede ser movido, manteniendo una claridad estable.

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Resolucin. Habilidad para distinguir los detalles finos de una placa o muestra particular. Entre los factores que ms influyen para lograr una buena resolucin, se encuentran la apertura numrica, la clase de muestra, la iluminacin, la correccin de aberraciones y el tipo de contraste utilizado. Es una de las caractersticas ms importantes de un microscopio. Revlver portaobjetivos. Dispositivo mecnico diseado para montar los objetivos y permitir su intercambio rpido, a travs de un movimiento rotatorio. Su capacidad depende del tipo de microscopio. En general vara entre tres y cinco objetivos.

6. REGISTROS 6.1 Formatos de registro y cronograma de mantenimiento A-FT-10.002.003 6.2 Formato uso de equipos fijos A-FT-10.001.001 ANEXO I MANUAL DE INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE

ELABOR

Emerson Corredor Administrativo Unidad de Laboratorios 24 de Septiembre de 2010

REVIS

Equipo Tcnico SIMEGE Contratistas /Analistas

APROB

Fernando Franco

CARGO

CARGO

CARGO

Director de Sede

FECHA

FECHA

24 de Septiembre de 2010

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