Microbiologia – 1º Teste

1 – História
1 - Qual a importância da invenção do microscópio?
- Invenção do microscópio no séc. XVII ( Hook e Leeuwenhoek)
- Tornou possível a observação de seres de dimensões microscópicas, sendo,
portanto, um instrumento fundamental para a microbiologia.
- Leeuwenhoek observou diferentes bactérias e observou e descreveu diferentes
morfologias de vários tipos comuns de bactérias.

2 – Geração espontânea:

2.1 – Qual o pressuposto dos defensores da geração espontânea?

-Presumiam que havia formação espontânea de vida (de pequenos
microorganismos a partir da matéria morta (inerte), em decomposição.

2.2 – Qual a controvérsia desta teoria? Abiogénese vs Biogénese:

- Os defensores da biogénese defendiam que todos os seres, mesmo os mais
minúsculos, nasciam de outros iguais a si próprios, o que colidia com as ideias de
abiogénese.

2.3 - Quais foram os cientistas que se destacaram nesta polémica e o que

defendiam?

Geração espontânea:
Defensores
Aristóteles (sec. III A.C):
Invertebrados simples surgiam por
geração espontânea.
John Needham (sec XVIII)
fez experiências com caldo nutritivo
fervido em frascos rolhados; após a
destruição de microrganismos pela
fervura, estes voltavam a aparecer quando
a carne era exposta ao ar: a matéria
orgânica possuía uma força vital que
conferia vida à matéria morta
Opositores
Francesco Redi (sec XVII)
Se se colocasse gaze sobre carne e se
expusesse ao ar e a calor, os vermes
formavam-se sobre a gaze e não sobre a
carne
Lazzaro Spallanzani (sec XVII)
sela o frasco antes da fervura e mantém a
infusão no frasco selado; não ocorria
crescimento enquanto o frasco se
mantivesse fechado; propõe que o ar
transporta germes mas comenta que o ar
também pode ser necessário para o seu
crescimento.

Schwann (sec. XIX)

o contacto de uma solução de nutrientes
esterilizada com o ar, após passagem por
um tubo ao rubro, não conduzia a
crescimento de microrganismos

Schroder e Dusch:
o contacto com o ar de uma solução de
nutrientes esterilizada, após passagem por

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 lã de vidro estéril, não conduzia ao
crescimento de microrganismos

Pouchet sec. XIX) Louis Pasteur (sec XIX)

Afirmou ter provado que o crescimento refutou definitivamente a teoria da geração
microbiano podia ocorrer sem espontânea e mostrou adicionalmente
contaminação pelo ar. como proceder para manter as soluções
Último defensor da teoria da GE. estéreis.
Tyndall (sec XIX)
demonstrou que o pó continha
microrganismos e que se estivessem
ausentes do ar era possível manter meios
de cultura estéreis. Confirmou as
investigações de Pasteur.

2.4 - Quem teve um papel determinante em refutar a teoria da Geração

Espontânea? Que experiências levou a cabo?

Louis Pasteur (1861): solução nutritiva fervida

contida em frascos abertos ao ar mantinha-se estéril;
os frascos tinham a forma de “pescoço de cisne”
(frascos de Pasteur); os microrganismos existentes
no ar ficavam retidos na dobra do tubo e não
conseguiam chegar até ao caldo.

2.5 - Que implicações relevantes surgiram na

sequência deste acontecimento?
Além de ter destronado a teoria da geração
espontânea, levou ainda:
- Pasteur Fundou as bases dos processos de
esterilização pelo calor (contributo importante para
a conservação de alimentos);
- Descobriu-se que as fermentações são
produtos da actividade metabólica microbiana;
- descoberta de vida em anaerobiose

3 - Que evidências indirectas existiam na época

de que os microrganismos podiam provocar
doenças no Homem?
- Gilramo Fracostoro afirma que um
organismo invisível causa varias doenças; no séc.
XIX vários estudos ligam as causas de doenças a
material médico mal limpo, a água (ex.: cólera).
Joseph Lister estabelece regras de esterilização de material médico e assim aparecem as
primeiras provas indirectas de microrganismos como causadores doenças infecciosas.

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4 - Qual foi a primeira demonstração directa? Quem conduziu esse estudo e quais
foram os postulados?
- Robert Koch (1876 - 1910): Koch e os seus colaboradores descobriram os agentes
causadores de numerosas doenças infecciosas do homem.
- Compreendeu a importância da obtenção de culturas puras;
- Possibilidade da presença simultânea de vários microrganismos numa mesma
amostra;
- Foi o 1º a crescer bactérias em meio sólido (inicialmente utilizou fatias de
batata);
- Observou em meio sólido a formação de massas de células (colónias) visíveis a
olho nu com formas e cores distintas;
- Inferiu que uma vez que o meio sólido impedia o movimento das células cada
colónia correspondia a uma célula isolada que se multiplicava e produzia uma massa
visível de células;
- Assumiu que colónias diferentes correspondiam a microrganismos diferentes
- Percebeu que tinha encontrado uma técnica simples de isolar e obter
microrganismos em cultura pura.

Postulados de Koch

1. O microrganismo patogénico suspeito deverá estar presente em todos os

animais doentes e ausente nos animais saudáveis.

2. Deverá ser possível isolar e cultivar o microrganismo suspeito em cultura

pura.

3. Células de uma cultura pura do microrganismo suspeito deverão causar

doença num animal saudável

4. Deverá ser possível isolar o microrganismo do animal injectado que contraiu a

doença e provar-se ser o mesmo que o original.

5 - Que dificuldades técnicas enfrentou para comprovar as suas hipóteses? Como

foram ultrapassadas?
Necessidade: isolar culturas puras.
Problemas: - meio sólido utilizado (batata cozida) não permitia o crescimento de
certos microrganismos;
- meios de cultura líquida não permitem isolar culturas puras.
Solução: - Koch opta pela gelatina, como solidificante dos meios líquidos.

6 -Importância do conceito de cultura pura e da utilização de meios sólidos/placas

de Petri
- Substituição da gelatina por àgar (polissacaridio extraído de algas, que funde
apenas a altas temperaturas) como meio de cultura sólido.
- Vantagens das placas de petri:
- fácil manuseamento e esterilização separada do meio de cultura
- tampa impedia a contaminação
- Desenvolvimento de técnicas de coloração específica.

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7 - Qual a relevância dos estudos conduzidos por Beijerinck e Winogradsky?
Martinus Beijerinck (1851-1908) e Dmitri Ivanowsky (1892) isolaram
o primeiro vírus, o vírus da doença do mosaico da planta do tabaco.
Vírus são entidades biológicas capazes de atravessar filtros bacterianos
Sergei Winogradsky (1887): estuda as bactérias nitrificantes e o processo de
Nitrificação, bem como os Ciclos do N e S. desenvolve o conceito de litoquimiotrofia
associado a autotrofia e técnicas de enriquecimento dos solos.

8 - Qual o interesse do estudo da Microbiologia?

8.1 - A nível da Saúde?
- Diminuição drástica no número de mortes causadas por doenças
Infecciosas:
- identificação de microrganismos patogénicos e desenvolvimento de agentes
que combatam esses microrganismos;
- melhoria das condições sanitárias;
- Desafios actuais:
- combate à sida e doenças infecciosas que atingem os países menos
desenvolvidos (malária, cólera,..) e ainda a novas estirpes multi-resistentes.
- produção de novos produtos farmacêuticos através de modificação genética
em microrganismos.

8.2 - A nível da Agricultura?

- microrganismos causadores de doenças em plantas (fitopatogénicos) e animais;
desenvolvimento de insecticidas bacterianos ou víricos;
- diminuição da utilização de fertilizantes químicos modificando geneticamente
as plantas pela introdução de genes de bactérias fixadoras de N2 atmosférico;
- dependência da digestão, em animais ruminantes, da presença de
microrganismos: preparação de forragens para gado;
- reciclagem de nutrientes importantes para a nutrição de plantas e sua conversão
em formas assimiláveis.

8.3 - A nível da produção/deterioração de alimentos?

- produção de biocombustíveis (a partir de resídus/subprodutos da indústria
agrícola ou alimentar);
- processos de biorremediação (ex. remoção de produtos tóxicos do ambiente,
derramento de crude, …);
-processos de biolixiviação (extracção de minérios).

8.4 - A nível da Produção/Deterioração de Alimentos

- produção de alimentos tais como pão, produtos lácticos (queijo, iogurte),
bebidas alcoólicas (vinho, cerveja); pickles, azeitonas, charcutaria, café, cacau
- causadores de perdas económicas graves como consequência da deterioração
de alimentos;
- utilização na produção de aditivos alimentares (ex. ácido cítrico, …);
- utilização como agentes probióticos

8.5 - A nível da Biotecnologia: área de aplicação mais promissora no futuro

- exploração de microrganismos geneticamente manipulados para produção em
grande escala de produtos de elevado valor acrescentado;

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 - clonagem de genes humanos e sua expressão em microrganismos (p ex.
produção de proteínas humanas).

9-Microbiologia como ciência:

9.1 - Como se define Microbiologia?
A Microbiologia estuda os microrganismos e utiliza técnicas de esterilização e
de cultura pura necessárias ao seu isolamento e crescimento (adequação da definição
clássica ao contexto actual).
9.2 - Que tipo de organismos são objecto de estudo?
Vírus, bactérias, fungos, algas unicelulares, protozoários e parasitas.

9.3 - Quais as principais áreas da Microbiologia?

Virologia; Bacteriologia; Micologia; Ficologia; Protozoologia; Parasitologia

2 - Nutrição e cultura de microrganismos

1 - Quais os nutrientes essenciais aos microrganismos?

Àgua, C, O, H, N, S, Mg, P. – macronutrientes.(Ver folhas anexas)

2 - Como se define macronutriente, micronutriente e factor de crescimento?

- Macronutrientes: nutrientes que são exigidos em quantidades relativamente

elevadas e que desempenham papeis fundamentais no metabolismo e estrutura da célula.
- Micronutrientes: nutrientes exigidos em pequenas quantidades, mas
funcionalmente, muito importantes (geralmente são cofactores).(exs: Mn, Co, Cu, Zn,
Mo)
- Factores de crescimento (apenas em organismos auxotróficos): compostos
orgênicos que, fazendo parte da célula, não podem ser sintetizados por estas: aa.,
purinas, vitaminas, ....

3 - Como se definem os microrganismos ditos auxotróficos e prototróficos?

-Prototróficos: microrg que não requer factores de crescimento para o seu
crecimento.
-Auxotroficos: microrg. mutantes que têm exigências acessórias (partem dos
prototróficos).

4 - O que são vitaminas?

Compostos orgânicos que funcionam como coenzimas; os microrganismos diferem na
capacidade de síntese de algumas vitaminas. Ex’s ver pdf prof

5 - Que factores determinam a utilização de um dado nutriente?

- Disponibilidade:
– nutrientes necessitam de estar presentes numa forma utilizável pelos
microrganismos
– uma forma usada por uma espécie pode não ser indicada para outras;
– aumento da biodisponibilidade pode simplesmente significar um
aumento na concentração de nutrientes

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 - “Preferência”:
– certas formas químicas de um nutriente serão consumidas mais
rapidamente do que outras, mesmo quando ambas estão disponíveis
(aa-N > NH4+ > NO3-)
– formas que gerem um maior rendimento em energia, ou requeiram
menos energia no transporte serão “preferidas”.

- Tranferência do meio extracelular para o interior da célula

- Transporte membranar:
– Não mediado (difusão simples)
– Mediado (difusão facilitada (passiva); transporte activo primário ou
secundário; translocação de grupo)
-Endocitose

6 – Meios de cultura
- Deve conter os nutrientes indispensáveis ao crescimento do microrg em causa,
mas em concentreções não tóxicas;
- Deve ser estéril, ie, não deve conter nenhum microg vivo. Deve-se esterelizar o
meio de cultura após a sua preparação, para eliminar os organismos contaminantes;
- Devem ser incubados a temperaturas adequadas (bem como pH e outros
factores adequados).