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Table Of Contents

INTRODUCCIÓN
HISTORIA Y DESARROLLO
Componentes de la reacción
Primers
Especificidad
Contenido de G/C
Secuencia de los extremos 3'
Temperatura de Asociación
Cálculo de la temperatura de fusión (Tm)
Programas de Diseño de Primers
Templado
La polimerasa
Concentración de Magnesio
Otros componentes de la reacción
Parámetros de la reacción
Desnaturalización
Alineamiento
Termocicladores
Identificación de los productos de PCR
RT PCR
PCR EN TIEMPO REAL
Técnicas de detección
SYBR greenTM
Hairpin probes (Molecular BeaconsTM
Hybridization probes
Scorpions
Cuantificación
Genes estándares
El efecto de limitar los reactivos
PCR competitivos cuantitativos
Máquinas para PCR en tiempo real
Ventajas del tiempo Real
PRIMERS DEGENERADOS
Uso de los primers degenerados
Diseño de los primers degenerados
Alineación de la secuencia
Información de la secuencia terminal de aminoácidos
Degeneración de primers
La Reacción de PCR
El cóctel de PCR
Problemas Comunes
Secuenciación
Controles
Aspectos Generales
Programa genérico para Long PCR para el Perkin Elmer 9600
Hot Start
PCR in situ
Nested PCR
CLONACIÓN DE PRODUCTOS DE PCR
Clonación TA
Clonación de extremos romos
Clonación direccional a través de primers modificados
Clonación de fragmentos largos de DNA
MUTAGÉNESIS POR PCR
Mutagénesis con PCR-extensión solapada
Mutagénesis sitio dirigida
APLICACIONES ESPECIALES DE LA PCR
BIBLIOGRAFÍA
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Published by: Kukulkan Gomez Gomez on Nov 28, 2011
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