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Fotossensibilizao hepatgena em eqinos pela ingesto de Brachiaria humidicola (Gramineae) no Estado do Par1
Jos Diomedes Barbosa2*, Carlos Magno C. de Oliveira2, Carlos Hubinger Tokarnia3 e Paulo Vargas Peixoto3
ABSTRACT.ABSTRACT Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Tokarnia C.H. & Peixoto P.V. 2006. [Hepatogenous Hepatogenous photosensitization in horses caused by Brachiaria humidicola (Gramineae) in the State of Par.] Par Fotossensibilizao hepatgena em eqinos pela ingesto de Brachiaria humidicola (Gramineae) no Estado do Par. Pesquisa Veterinria Brasileira 26(3):147-153. Escola de Medicina Veterinria, . Campus Castanhal, Universidade Federal do Par, Rua Maximino Porpino 1000, Castanhal, PA 68743080, Brazil. E-mail: diomedes@ufpa.br Data on the clinical-pathological aspects and on the epidemioloy of a disease in horses, characterized by phototsensitization, which occurs in northeastern of Par, Brazil, are presented. Of a total of 40 horses examined clinically, post-mortem examination was performed on seven. Due to the characteristic lesions found on the non-pigmented skin, the macroscopic and histological alterations in the liver, and knowing that Brachiaria grasses contain saponins with toxic properties, which cause liver lesions and photosensitization in cattle and sheep, it is concluded that this disease in horses is caused by grassing exclusively Brachiaria humidicola.
INDEX TERMS: Poisonous plants, Brachiaria humidicola, plant poisoning, photosensitization, saponins, horses.

RESUMO.RESUMO So apresentados os aspectos clnico-patolgicos e epidemiolgicos de doena, caracterizada por fotossensibilizao, que ocorre em eqinos no nordeste do Estado do Par. De um total de 40 animais examinados clinicamente, sete foram necropsiados, e tiveram fragmentos de rgos examinados microscopicamente. Em virtude das leses caractersticas encontradas, sobretudo nas partes despigmentadas da pele, das leses hepticas macro e microscpicas, e sabendo-se que as brachirias, de uma maneira geral, encerram saponinas com propriedades txicas, que causam alteraes hepticas e fotossensibilizao em bovinos e ovinos, conclui-se, que essa doena fotossensibilizante foi determinada pelo pastoreio de Brachiaria humidicola, alimentao exclusiva dos animais enfermos.
TERMOS DE INDEXAO: Plantas txicas, Brachiaria humidicola,, intoxicao por planta, fotossensibilizao, saponinas, eqinos.

INTRODUO
No Brasil, surtos de fotossensibilizao em bovinos e ovinos que pastejam em espcies do gnero Brachiaria, em especial B. decumbens, so muito freqentes (Tokarnia et al. 2000). Em eqinos, todavia, h raros registros desse tipo de ocorrncia. At o momento, sobre o assunto, s encontramos o estudo de Schenk et al. (1991), no qual estes autores avaliaram, experimentalmente, a viabilidade de utilizao de Brachiaria humidicola para pastejo de eqinos no Mato Grosso do Sul. De 24 potrancas colocadas na pastagem com essa gramnea, sete evidenciaram fotossensibilizao e uma morreu ao cabo de cinco meses. De significativo, necropsia desse animal, observaram-se escaras pelo corpo, mucosas acentuadamente ictricas, fgado aumentado de volume e emagrecimento. O exame microscpico revelou congesto e necrose centrolobular no fgado. No Nordeste ocorrem surtos de fotossensibilizao em eqinos, regionalmente conhecidos como sarna, que, de acordo com Riet-Correa (2003), so de natureza primria, isto , de fotossensibilizao direta. Os animais no apresentam outro sinal clnico, alm da dermatite e se recuperam rapidamente se forem retirados dos pastos onde ocorre a enfermidade e colocados sombra. Suspeita-se que a causa desses surtos seja uma planta identificada como Croton hirtus L. Aevit. Nos ltimos sete anos tivemos oportunidade de diagnosticar, na regio nordeste do estado do Par, diversos casos de fotossensibilizao em eqinos, com caractersticas epidemio-lgicas semelhantes.
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Recebido em 4 de fevereiro de 2006. Aceito para publicao em 8 de fevereiro de 2006. 2 Escola de Medicina Veterinria, Campus Castanhal, Universidade Federal do Par, Rua Maximino Porpino 1000, Castanhal, PA 68743-080. *Autor para correspondncia: diomedes@ufpa.br 3 Depto Nutrio Animal e Pastagem, Instituto de Zootecnia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropdica, RJ 23890-000, RJ.

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No presente estudo tem-se por objetivo apresentar os dados clnico-patolgicos, bem como observaes epidemiolgicas e alguns parmetros bioqumicos observados nesses surtos determinados pela ingesto de Brachiaria humidicola.

MATERIAL MATERIAL E MTODOS

Em todas as ocorrncias de fotossensibilizao observada nos eqinos no nordeste do Par, aps a colheita do histrico, fazia-se um levantamento sobre a alimentao e inspecionavam-se as pastagens. A seguir, os animais afetados eram submetidos a exame clnico; em um surto foi colhido sangue de eqinos enfermos ou no para

realizao de hemograma e determinao de bilirrubina total, direta e indireta e a GGT (glutamil gama transferase). Os valores hematolgicos foram avaliados atravs de contador automtico de clulas (CELM-CC-550) e os nveis de bilirrubina e GGT por meio de espectrofotmetro (BioPlus-Bio-2000). Sete animais afetados que morreram pela doena ou sacrificados, foram necropsiados, colhendo-se fragmentos dos diversos rgos em formol a 10% para realizao de exames histopatolgicos no Setor de Anatomia Patolgica do Convnio Projeto Sanidade Animal Embrapa/ Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro.

RESULTADOS RESULT
Epidemiologia Em geral eram registrados casos isolados de fotossensibilizao em eqinos. Apenas em duas propriedades, a doena
Fig.1. Leve fotossensibilizao crnica nas reas despigmentadas dos membros e da face. Fig.2. Separao (fenda) entre a pele e a camada crnea do casco com congesto da muralha. Fig.3. Ulcerao da borda da plpebra e da conjuntiva em eqino com fotossensibilizao subaguda. Fig.4. Espessamento da pele com perda de plos nas reas despigmentadas dos membros.

Fig.5. Ulcerao nas reas despigmentadas da pele da poro inferior dos membros.

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Fig.7. Valores da bilirrubina direta no sangue de eqinos em pastagem de Brachiaria humidicola. Fig.6. Valores da Gama-glutamiltransferase (GGT) no soro de eqinos em pastagem de Brachiaria humidicola Valores Quadro 1. Valores hematolgicos e de funo heptica de eqinos em pastagem de Brachiaria humidicola
Parmetros Unidades Valores normais (n=13) Animais sem leso de pele (n=43) Animais com leso de pele

Funo heptica GGT UI/L 4,3-13,4 26,69 22,14 199,81 129,30 Bilirrubina total mg/dL 1-2 1,26 0,39 1,77 066 Bilirrubina direta mg/dL 0-0,4 0,86 0,33 1,29 054 Bilirrubina indireta mg/dL 0,2-2 0,43 0,13 0,52 024 Valores hematolgicos Hematcrito % 24-44 38,37 7,05 31,12 6,20 5,5-9,5 7,08 1,12 5,93 1,10 Hemcias x 10 6 Hemoglobina g/% 15,2-18,6 13,04 2,15 10,70 2,20 Leuccitos totais x10 3 6-12 11,28 1,21 20,97 7,60 Neutrofilos % 35-75 38,62 7,03 56,92 15,70 Eosinfilos % 2-12 2,23 1,88 2,88 2,00 Linfcitos % 15-50 54,31 6,77 36,67 16,10 Moncitos % 2-10 2,31 0,95 2,29 1,30 Basfilos % 0-3 0 0

Fig.8. Valores dos leuccitos no sangue de eqinos em pastagem de Brachiaria humidicola.

ocorreu em um maior nmero de animais. Os aproximadamente 40 casos ocorreram em seis estabelecimentos localizados nos municpios de Castanhal, Santa Maria do Par, Terra Alta, IgarapAu e So Francisco do Par e Mosqueiro, no perodo de 19982005. A maioria dos casos se iniciava 20-30 dias aps o incio do perodo de maior precipitao (dezembro-janeiro) (Quadro 2).

Quadro 2. Principais dados sobre os eqinos necropsiados com fotosssensibilizao determinada por ingesto de Brachiaria humidicola no Par
Procedncia/ Identificao do animal necropsiado Idade/Sexo Perodo N de enfermos/ N total de animais 10/30 Evoluo e desfecho 15 dias Sacrificado Leses macroscpicas

Castanhal, Faz. Sidergil 2 anos Fmea FC 142 (SAP 29630) Castanhal, Faz. Sidergil 7 anos Fmea FC 244 (SAP 29603, 29631) Mosqueiro 12 anos Fmea FC 251 (SAP 29662) Castanhal, Santa Terezinha 10 anos Fmea FC 279 (SAP 30107) Castanhal Cidade Idoso Macho FC 350 (SAP 30451) So Francisco do Par 2 anos Macho FC 357 (SAP 30490) Castanhal FC 358 (SAP 30491)

1999-2000

1999-2000

10/30

2003

1/6

Crnica Morreu de doena intercorrente Crnica Fgado moderadamente endurecido Sacrificado Mais de um ano Sacrificado Crnica Sacrificado 15 dias Sacrificado Carcaa amarelada + Fgado moderadamente endurecido

Carcaa amarelada + Fgado esverdeado com desenho de arborizao esbranquiada Fgado com desenho esbranquiado de arborizao

2004

3/10

2005

1/1

Carcaa amarelada ++ Fgado com manchas um pouco mais claras Carcaa amarelada + Fgado com superfcie de corte levemente esverdeada

2005

1/5

2 anos Fmea

2005

9/11 5 animais morreram da doena

20 dias Sacrificado

Carcaa amarelada + Fgado com consistncia levemente aumentada e superfcie de corte esverdeada Pesq. Vet. Bras. 26(3):147-153, jul./set. 2006

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Fig.9. Hepatcitos com aspecto de clulas vegetais pela marcada tumefao; presena de hepatcitos bi e trinucleados (setas). HE, obj.40. Fig.11. Necrose coagulativa de hepatcito (seta). HE, obj.100.

A maioria dos animais era da raa Mangalarga Paulista e de mestios Mangalarga Mineiro com Quarto de Milha, com pelagem, em geral, alaz com extremidades brancas ou, por vezes, tordilha. Aspectos clnicos e evoluo O aspecto clnico da doena foi muito uniforme em todos os casos, variando apenas em intensidade. As leses eram mais observadas nas partes com pelagem branca, geralmente no chanfro e nas extremidades dos membros (Fig.1). A pele desses locais, de incio, tornava-se avermelhada, depois havia exsudao de um lquido citrino que coagulava e formava crostas. Nos casos mais graves, as leses afetavam tambm reas pigmentadas na regio da garupa, do pescoo e das narinas (FC 358, SAP 30491). Havia necrose e desprendimento das partes superficiais da pele e separao (fenda) entre a pele e a camada crnea do casco, que se apresentava, junto com a muralha, intensamente vermelha (Fig.2). Parte dos animais evidenciava ulcerao na borda da plpebra e na conjuntiva (Fig.3), por vezes com opacidade de crnea. Nos casos mais graves, os animais emagreciam e a doena terminava
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Fig.10. Hepatcitos com aspecto de clulas vegetais; invaginao citoplasmtica no ncleo de um hepatcito (seta). HE, obj.100. Fig.12. Corte histolgico de fgado evidenciando pequena cmara de digesto com macrfagos e pigmento marrom fagocitado. HE, obj.100.

com a morte, em seis a oito semanas. Nos casos menos acentuados, com curso clnico de muitos meses, havia um progressivo espessamento da pele nas partes afetadas das extremidades, que se mostravam rugosas, com perdas de plos (Fig.4); pelo aparecimento de pequenos ferimentos, a pele tinha aspecto mido e superfcie ulcerada (Fig.5), irregular determinada pela proliferao de tecido de granulao. Receitava-se medicao base de corticides, antibiticos e bacteriostticos e aplicao de ungento base de vitamina A nas feridas. Tambm se recomendava que os animais fossem colocados sombra. Esse tratamento surtia poucos efeitos. Finalmente os animais morriam ou eram descartados. Achados laboratoriais As alteraes hematolgicas observadas nos eqinos mantidos em pastagem de Brachiaria humidicola, enfermos ou no, encontram-se no Quadro 1 (Fig. 6, 7 e 8). Achados de necropsia Os principais achados de necropsia constam no Quadro 2.

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Fig.13. Hepatcito com ncleo bizarro (seta); tumefao celular difusa. HE, obj.100. Fig.15. Hepatcitos binucleados (seta); hepatcito com ncleo em fase final de diviso; tumefao celular difusa (cabea de seta). HE, obj.100.

Fig.14. Hepatcitos binucleados (setas); hepatcito com reentrncia bipolar na carioteca (cabea de seta; fase inicial de diviso celular); tumefao celular difusa. HE, obj.100. Fig.16. Hepatcito trinucleado (cabea de seta); tumefao celular difusa. HE, obj.100.

Alteraes histolgicas O estudo histolgico revelou tumefao celular dos hepatcitos, que adquiriam aspecto de clulas vegetais (Fig. 9 e 10), com limites celulares bastante ntidos e ncleos vesiculares; esse achado foi constante, variando apenas o grau da intensidade. Em parte dos fgados havia modificaes na morfologia nuclear, observando-se megalocitose, numerosos hepatcitos bi ou trinucleados ou com evidente anisocariose (ncleos bizarros ou, por vezes, encarquilhados, com carioteca indentada, irregular, hipercromtica e nuclolos evidentes). A marcada reentrncia da carioteca observada em alguns hepatcitos sugere diviso celular por amitose (Fig.13-16); havia, adicionalmente, alguns hepatcitos com citoplasma invaginado no ncleo (Fig.10). No fgado de um animal (FC 358, SAP 30491) verificaram-se diversos hepatcitos conhecidos como em vidro fosco e presena de macrfagos que lembram as foam cells. Aleatoriamente distribudos pelo parnquima havia necrose coagulativa (Fig.11) ou lise de hepatcitos isolados ou de pequenos grupos, cujos restos, em outras reas eram fagocitados por macrfagos, dando origem a formao de pequenas cmaras de digesto preenchidas, em adio, por pig-

mento marrom (Fig.12); nesses locais, em um caso, verificaram-se pequenas fendas que sugerem imagem negativa de cristais. Nos espaos-porta observaram-se, por vezes, leve proliferao de fibroblastos com deposio de colgeno, associada a leve infiltrao inflamatria mononuclear, a leve proliferao de clulas epiteliais das vias biliares e numerosos macrfagos que fagocitavam pigmento marrom, homogneo, com aspecto de lipofuscina ou ceride; observam-se ainda variveis graus de reteno biliar (pigmento dentro de hepatcitos e clulas de Kupffer). Pormenores sobre a quantificao individual das leses no fgado dos animais com fotossensibilizao constam no Quadro 3. Na pele de um eqino que desenvolveu a doena subaguda verificou-se marcada acantose com formao de rete ridges, acentuada multiplicao de fibroblastos com deposio de colgeno na derme, acompanhada de proliferao de pequenos vasos, incontinncia pigmentaria nas reas de necrose e ulcerao da epiderme. Em um dos casos crnicos observaram-se edema e fibrose da derme, dilatao de glndulas sudorparas e exuberante proliferao vascular.
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Quadro 3. Alteraes histolgicas no fgado dos animais com fotossensibilizao

Procedncia/ Hepatcitos Reteno Proliferao dos Identificao Tumefaco Vacuolizao Necrose Megalocitose Bi ou trinucleados Anisocariose biliar dutos biliares Castanhal FC 142 (SAP 29630) FC 244 (SAP 29603, 29631) Mosqueiro FC 251 (SAP 29662) Castanhal FC 279 (SAP 30107) Castanhal FC 350 (SAP 30451) So Fr. Par FC 357 (SAP 30490) Castanhal FC 358 (SAP 30491)
a

Fibrose (+)

Outros achados -

++a

(+) (individual) +(+) (e lise)

+++

(+)

+(+)

++

+(+)-

++

+(+)

(+)

++

+ (portal)

+(+)

(+) (individual) + ( e lise)

+(+)

Focos de esteatose + -

++

(+)

(+)

+++

+ (e lise)

+(+)

(+)

+++

+ (individual)

+++

Foam cells +

+++ Leso acentuada, ++ moderada, + leve, - ausente.

DISCUSSO E CONCLUSES
O diagnstico de fotossensibilizao dos eqinos, no presente estudo, no apresentou maiores dificuldades. As leses, confinadas, quase sempre, s regies de pelagem branca, so tpicas. A correlao com o agente etiolgico, da mesma forma, pode ser feito de forma direta, uma vez que os animais enfermos pastejavam em Brachiaria humidicola, sabidamente capaz de induzir fotossensibilizao em bovinos (Barbosa, dados no-publicados) e bfalos (Tokarnia & Langenegger 1983). O aparecimento de leses oculares, como as observadas nesse surto, tambm tem sido mencionado, por outros autores, em casos de fotossensibilizao em eqinos (Stannard 1994). Em se tratando de eqinos, difcil estabelecer, at que ponto a colorao amarelada verificada nos tecidos de alguns animais possa ter significado clnico, porm a observao de colorao esverdeada no fgado de alguns animais associada elevao dos nveis de bilirrubina direta indicam que, realmente, parte dos animais estava ictrica. As variaes nos valores de bilirrubina e da GGT justificam o quadro clnico e demonstram claramente que se trata de fotossensibilizao de origem hepatgena No que se refere aos aspectos antomo e histopatolgicos h algumas consideraes a fazer. Em primeiro lugar, deve-se levar em conta que os tpicos macrfagos espumosos (foam cells), encontrados no fgado de bovinos que ingerem B. decumbens e B. brizantha (Driemeier et al. 1998, 1999) e de bfalos que pastejam em B. humidicola (Peixoto & Tokarnia, dados no-publicados) pelo menos at o momento, no foram observados nos casos de intoxicao por B. humidicola em eqinos; apenas em um caso encontramos aglomerados de macrfagos dentro das chamadas cmaras de digesto, que lembram foam cells. Esse um ponto fundamental que deve ser levado em conta no diagnstiPesq. Vet. Bras. 26(3):147-153, jul./set. 2006

co de fotossensibilizao hepatgena determinada por ingesto de saponinas em eqinos, uma vez que esse tipo de ocorrncia pode estar passando despercebido, se os aspectos clnico-patolgicos e epidemiolgico no forem considerados. De resto, as outras leses histolgicas, por enquanto, no devem ser consideradas caractersticas, a menos que a imagem negativa de cristais (por sinal de difcil visualizao, nesses casos) seja bem evidente. Por outro lado, possvel que, com o avano dos estudos sobre fotossensibilizao em eqinos que pastejam em capins que contm saponinas, a repetio do quadro microscpico, possa facilitar o diagnstico. O significado de hepatcitos bi ou trinucleados, bem como a manifesta anisocariose (Fig.13-16) mais difcil de determinar, uma vez que no encontramos descries detalhadas do efeito das saponinas na morfologia do fgado. possvel, porm, que as saponinas esteroidais ajam diretamente sobre o ncleo, estimulando a produo de nucleoprotenas e a diviso nuclear, sem entretanto favorecer a diviso dos hepatcitos. importante estar atento e verificar em futuros casos de fotossensibilizao determinados por saponinas em eqinos, se essas alteraes dos hepatcitos so importantes para fechamento do diagnstico histolgico. Fenmeno semelhante (clulas sinciciais) ocorre na intoxicao por Lantana camara em bovinos (Tokarnia et al. 1984, 2000), na qual, contudo, no ocorre a marcada anisocariose presente nos hepatcitos de eqinos que ingeriram B. humidicola. A patogenia do marcado espessamento da pele nas pores afetadas e, mesmo, a ulcerao dessas reas pode ter relao dificuldade de drenagem linftica determinada pela fibrose e retrao cicatricial da derme e do tecido celular subcutneo. Em virtude das tpicas leses cutneas encontradas em eqinos, que s ingeriam Brachiaria humidicola, planta sabida-

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mente capaz de produzir leso heptica e fotossensibilizao em bovinos, e em face da acentuada distrofia do fgado dos eqinos afetados, pode-se concluir que os casos de fotossensibilizao, motivos deste estudo, foram determinados pela ingesto dessa planta. Dentro das medidas profilticas para evitar esse tipo de enfermidade sugere-se ter disponvel outro tipo de pastagem, pelo menos na poca de incio das chuvas na regio.

Riet-Correa F. 2003. Fotossensibilizao primria em eqinos, p.77-78. In: Riet-Correa F. et al. (ed.) Semi-rido em Foco. Vol. 1. Universidade Federal de Campina Grande, PB, Patos, PB. Schenk M.A.M., Nunes S.G. & Silva J.M. 1991. Ocorrncia de fotossensibilizao em eqinos mantidos em pastagem de Brachiaria humidicola. Comunicado Tcnico, Embrapa-CNPGC, Campo Grande, MS. 3p. Stannard A.A. 1994. Fotossensibilizao, p.1258-1286. In: Smith B.P. (ed.) Tratado de Medicina Interna de Grandes Animais. Vol. 2. Manole, So Paulo. Tokarnia C.H. & Langenegger J. 1983. Relatrio de viagem realizada no per[ioodo de 1 a 10.2.1983 para estudar doena de etiologia obscura em bfalos no UEPAE de Manaus. Embrapa, 8p. (Datilografado) Tokarnia C.H., Dbereiner J., Lazzari A.A. & Peixoto P.V. 1984. Intoxicao por Lantana spp. (Verbenaceae) em bovinos nos Estados de Mato Grosso e Rio de Janeiro. Pesq. Vet. Bras. 4(4):129-141. Tokarnia C.H., Dbereiner J. & Peixoto P.V. 2000. Plantas Txicas do Brasil. Editora. Helianthus, Rio de Janeiro.

REFERNCIAS
Driemeier D., Barros S.S., Peixoto P.V., Tokarnia C.H., Dbereiner J. & Brito M.F. 1998. Estudos histolgico, histoqumico e ultra-estrutural de fgados e linfonodos de bovinos com presena de macrfagos espumosos (foam cells). Pesq. Vet. Bras. 18(1):29-34. Driemeier D., Dbereiner J., Peixoto P.V. & Brito M.F. 1999. Relao entre macrfagos espumosos (foam cells) no fgado de bovinos e ingesto de Brachiaria spp no Brasil. Pesq. Vet. Bras. 19(2):79-83.

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