Libro de Resúmenes: Sesiones Orales Farmadrid XX

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FARMACOLOGA Y TOXICOLOGA
2011
Vol. 1 No. 1:2
doi: 10:3823/601
Libro de resmenes:
Sesiones orales Farmadrid XX
Comit Organizador: Emilio Ambrosio Flores, Alejandro Higuera Matas,
Javier Ibias Martn, Nuria del Olmo Izquierdo, Miguel Miguns Vzquez,
Santiago Morales Coria, M Amparo Assis Duart, David Roura Martnez,
Gonzalo Lpez Montoya, Departamento de Psicobiologa. Facultad de
Psicologa. UNED
Departamento de Psicobiologa. Facultad de

Psicologa. UNED
Sesin de Apertura
Fecha: 4 de Julio de 2011
Veinte aos de Farmadrid
Lugar
Facultad de Psicologa
Saln de Actos
C/ Juan del Rosal, 10
Ciudad Universitaria
28040 - MADRID
Pgina web: http://www.farmadrid.org.es
Antonio G. Garca y Luis Ganda

Instituto Tefilo Hernando, Universidad Autnoma de Madrid
En octubre de 1991, un puado de farmaclogos decidimos iniciar reuniones peridicas para intercambiar puntos de vista sobre las distintas lneas de investigacin
farmacolgica que se desarrollaban en las universidades, hospitales y laboratorios
farmacuticos de la Comunidad de Madrid. La primera tuvo lugar en octubre de 1991,
y adopt el nombre de Reunin de Farmaclogos de la Comunidad de Madrid; en los
ltimos aos, su nombre se cambi a Farmadrid. Las primeras reuniones se basaron
en ponencias. Cuando aument el nmero de comunicaciones, la jornada incluy
comunicaciones orales y paneles, cuyo nmero se refleja en la siguiente figura:
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Las sedes y organizadores de las sucesivas jornadas se resumen

en la siguiente tabla:
1. Fac. Medicina, Univ. Complutense de Madrid (Santos Barrign,
1992)
2. Fac. Medicina, Univ. Autnoma de Madrid (Antonio R. Artalejo,
1993)
3. Fac. Medicina, Univ. Alcal de Henares (Federico Gago Bdenas,
1994)
4. Laboratorios Glaxo (Federico Gmez de las Heras, 1995)
5. Fac. Farmacia, Univ. Complutense de Madrid (Jos Angel Fuentes Cubero, 1996)
6. Fac. Medicina, Univ. San Pablo-CEU (Luis Fernando Alguacil
Merino, 1997)
7. Instituto Cajal, CSIC (Mara Lpez de Ceballos, 1998)
8. Fac. Medicina, Univ. Autnoma de Madrid (Luis Ganda Juan,
1999)
9. Fac. Farmacia, Univ. Alcal de Henares (Enrique Glvez Ruano,
2000)
10. Escuela de Optica, Univ. Complutense de Madrid (Jess Pintor
Just, 2001)
11. Hospital Univ. La Princesa, Univ. Autnoma de Madrid (Francisco
Abad, 2002)
12. Laboratorios Lilly (Luis Emilio Garca Prez, 2003)
13. Fac. Medicina. Univ. Alcal de Henares (Teresa Martn-Lucinda
Villaescusa, 2004)
14. Fac. Veterinaria, Univ. Complutense de Madrid (Antonio R. Artalejo, 2005)
15 -Fac. Ciencias de la Salud, Univ. Rey Juan Carlos (Carlos Goicoechea- M. Jess Alonso, 2006)
16. Fac. Medicina. Univ. Complutense de Madrid (Angela AlsasuaFrancisco Prez Vizcaino, 2007)
17. Instituto de Qumica Mdica, CSIC (Jos Luis Marco, 2008)
18. Instituto de Investigaciones Biomdicas, CSIC (Carmen Valenzuela, 2009)
19. Facultad de Farmacia, UCM (Marisol Fernndez, 2010)
20. Facultad de Psicologa, UNED (Emilio Ambrosio, 2011)
En conclusin, durante sus 20 aos de vida Farmadrid ha tenido

altibajos. Sin embargo, gracias al entusiasmo de los organizadores y al apoyo continuado de la Fundacin Tefilo Hernando
(FTH, UAM), Farmadrid parece haberse consolidado como un
foro de debate de ideas farmacolgicas, favoreciendo el establecimiento de colaboraciones cientficas entre los distintos
grupos de farmaclogos de la Comunidad de Madrid. Adems,
contribuye tambin a la formacin de los jvenes investigadores que presentan sus primeras comunicaciones en Farmadrid.
Sesin Oral I: Sistema Nervioso Central
O.1.La expresin endgena de pleiotrofina modula los efectos reforzadores de la anfetamina y
el dficit cognitivo transitorio causado por el
tratamiento crnico con anfetamina durante
la adolescencia.
Esther Gramage, Nuria del Olmo, Alberto Fole, Yasmina B. Martn, Gonzalo Herradn. Universidad San Pablo-CEU. Boadilla
del Monte, Madrid.
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La Pleiotrofina (PTN) es un factor neurotrfico que ejerce importantes funciones en la supervivencia y diferenciacin de
neuronas dopaminrgicas, as como en la modulacin de la
potenciacin a largo plazo (LTP) hipocampal. La PTN se sobreexpresa en distintas reas cerebrales en respuesta a distintas
drogas de abuso como la anfetamina, lo que sugiere que la
PTN podra modular los efectos neuroadaptativos y farmacolgicos inducidos por esta droga. Para probar esta hiptesis,
estudiamos los efectos de la anfetamina en ratones knockout
de PTN (PTN-/-) y en ratones wyld type (PTN+/+). En estos estudios, observamos que una dosis intermedia de anfetamina (3
mg/Kg) induce un condicionamiento preferencial al sitio (CPP)
similar en ratones PTN-/- y PTN+/+. Adems, los ratones PTN/- mostraron un significativo aumento en el comportamiento
de bsqueda de la droga comparado con los PTN+/+ despus
de 5 das de la ltima administracin de anfetamina. Una dosis
menor de esta droga (1 mg/Kg) caus un mayor CPP en ratones
PTN-/- y, de nuevo, los ratones PTN-/- continuaron mostrando
un llamativo comportamiento de bsqueda de la droga comparado con los ratones PTN+/+ 5 das despus de la ltima
administracin de anfetamina.
Por otra parte, se conoce que la administracin de anfetamina
durante la adolescencia en ratas provoca deficiencias cognitivas en el animal adulto. En este sentido, tratamos de averiguar
si la PTN puede ser uno de los factores implicados en los dficits cognitivos observados en el adulto despus de la administracin de anfetamina durante la adolescencia (3 mg/Kg i.p./
da, durante 10 das). Veinticuatro horas despus de la ltima
administracin de la droga, los ratones PTN+/+ mostraron una
retencin de memoria significativa en el ensayo de evitacin
pasiva independientemente del tratamiento recibido. Por el
contrario, en los ratones PTN-/- encontramos un dficit significativo en la fase de retencin inducido por anfetamina en el
test de la evitacin pasiva, as como 6 das despus de la ltima
administracin de la droga en el test del laberinto en Y. Sin
embargo, 13 y 26 das despus de la ltima administracin de
anfetamina, no se encontraron diferencias significativas en el
laberinto en Y entre los ratones PTN-/- pretratados con anfetamina y con salino (control). Adems, observamos un aumento
significativo de la LTP hipocampal en rodajas de ratones PTN/- pretratados con salino comparados con PTN+/+. Curiosamente, el tratamiento con anfetamina durante la adolescencia
aument significativamente la LTP en ratones PTN+/+ adultos,
pero no produjo ningn efecto en ratones PTN-/-, lo que sugiere mecanismos de saturacin de LTP en ratones PTN-/-. Estos
datos sugieren que el tratamiento con anfetamina durante la
adolescencia provoca un dficit cognitivo transitorio dependiendo de la expresin endgena de PTN, as como una aumento a largo plazo de la LTP en ratones normales (PTN+/+).
O.2.Efecto de la metanfetamina en la activacin
de las metaloproteinasas: Implicacin en la
neurotoxicidad.
A. Urrutia, A. Rubio-Araiz, MD Gutierrez-Lpez; A El Ali, DM Hermann, E. OShea, MI Colado. Departamento de Farmacologa.
Facultad de Medicina. UCM
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(+)-Metanfetamina (METH) induce, inmediatamente despus

de su administracin, una respuesta hipertrmica y un proceso de estrs oxidativo/nitrosativo que estn implicados en la
neurotoxicidad dopaminrgica inducida por la droga (Krasnova and Cadet, 2009). En diversos modelos experimentales ambos factores aumentan la actividad de las metaloproteinasas
(MMPs) (Alam et al, 2011; Rosenberg, 2009). El objetivo es evaluar el efecto de METH sobre la expresin y actividad de MMPs
y su relacin con la neurodegeneracin dopaminrgica producida por la droga. Ratones C57BL/6J recibieron METH (4mg/kg,
i.p cada 3 horas, 3 veces consecutivas) a 22C y a 4C y se sacrificaron 1h, 3h, 24h y 7 das despus. Un grupo de animales fue
inyectado con el inhibidor de la actividad de MMPs Batimastat
(50mg/kg, i.p. 30 min antes de la primera y ltima inyeccin de
METH). En estriado se cuantific la expresin de MMP-9, su actividad (zimografa en gel) y localizacin (zimografia in situ) as
como la fosforilacin de JNK1/2. Se cuantific la concentracin
de dopamina (HPLC) y la densidad de su transportador (DAT)
([3H]-WIN 35,428). METH aument la expresin y actividad
estriatal de MMP-9 1h despus del tratamiento nicamente.
Simultneamente se observ un aumento en la fosforilacin
de JNK1/2. Cuando METH se administr a animales mantenidos a 4C, el aumento en la actividad de MMPs fue sustancialmente menor. Una semana despus de la administracin de
METH se observ una reduccin en la concentracin estriatal
de dopamina y en la densidad de DAT, efectos que no fueron
modificados por la administracin de Batimastat. METH induce
un incremento en la actividad y expresin de MMP-9 que es
parcialmente dependiente de la respuesta hipertrmica que
induce la droga pero que parece no estar implicado en la neurotoxicidad dopaminrgica.
Referencias:
1. Krasnova I and Cadet J. 2009. Methamphetamine toxicity and
messengers of death. Brain Res Rev, 60, 379-407.
2. Alam M, Mohammad A, Rahman S, Todd K, Shuaib A. 2011.
Hyperthermia up-regulates matrix metalloproteinases and
accelerates basement degradation in experimental stroke.
Neurosci Lett, 495, 135-139.
3. Rosemberg GA. 2009. Matrix metalloproteinases and their
multiple roles in neurodegenerative diseases. Lancet Neur, 8,
205-216.
Agradecimientos:
MICINN (SAF2010-21529; RD06/0001/006), PNSD (PR47/10-17826),
UCM (910258), FEDER y RTA
O.3.Posible participacin del factor de transcripcin Nrf2 en la depresin.

Mara Dolores Martn-de-Saavedra, Josiane Budni, Mauricio P.
Cunha, Silvia Lorrio, Isabel Lastres, Laura del Barrio, Vanessa Gmez, Ignacio Melgar, Adriana Morgado, Laura G. Curull, Izaskun
Buenda, Esther Parada, Ana Lcia S. Rodrigues, Antonio Cuadrado/ Manuela G. Lpez. Instituto Tefilo Hernando de I+D del
Medicamento y Departamento de Farmacologa y Teraputica.
Facultad de Medicina. Universidad Autnoma de Madrid.
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Existe cada vez mayor evidencia de una relacin entre depresin e inflamacin. Adems, el hecho de que existan entre un
30 40 % de pacientes que no responden a los tratamientos
con antidepresivos hace necesario encontrar una nueva diana
teraputica o un tratamiento farmacolgico alternativo. Nrf2
es un factor de transcripcin que juega un papel fundamental en defensa celular frente a dao oxidativo y electroflico.
Adems se ha descrito que est implicado en la atenuacin de
procesos patolgicos relacionados con inflamacin. Con estos
antecedentes nos planteamos la hiptesis de si Nrf2 podra
estar relacionado con la fisiopatologa de la depresin y por
lo tanto constituir una diana teraputica frente a dicha enfermedad. As, realizamos distintos test predictivos de comportamiento depresivo en ratones salvajes y ratones knock out
para Nrf2. Los tres tests realizados mostraron que los ratones
Nrf2 (-/-) presentan un fenotipo depresivo por observarse un
aumento del tiempo de inmovilidad en el test de natacin forzada, en el test de suspensin de la cola y una disminucin
del tiempo de lamido en el test de sacarosa. No se observaron
alteraciones en la actividad motora. Las alteraciones a nivel de
comportamiento se vieron acompaadas de alteraciones a nivel de plasticidad sinptica (BDNF, VEGF y sinaptofisina) y otros
parmetros alterados en pacientes de depresin mayor como
son la fosforilacin de GSK3 en la Ser9 o los niveles de receptor glucocorticoide (medidos mediante western blot). Adems
se observ mediante qrt-PCR que la microgla se encuentra
activada en los ratones Nrf2 (-/-). Al administrar rofecoxib,
un antiinflamatorio no esteroideo, durante 7 das el fenotipo
depresivo de los ratones Nrf2 (-/-) se vio revertido. Con estos
resultados podemos concluir que Nrf2 podra estar implicado
en la fisiopatologa de la depresin por un mecanismo relacionado con la inflamacin ya que al eliminar esta protena los
ratones muestran un comportamiento depresivo acompaado
de alteraciones a nivel molecular de distintos parmetros relacionados con neuroplasticidad y resistencia a glucocorticoides.
O.4.Estimulacion del ncleo medial del rafe
(NMR) modula el status epilepticus (se) inducido por pentilentetrazol (PTZ) en ratas
jvenes.
Julin. Javela1, Pablo Bascuana1, Eduardo D. Martn2, Miguel
A. Pozo1 1. Unidad de Cartografa Cerebral, Instituto Pluridisciplinar, Universidad Complutense de Madrid; 2. Grupo de Neurofisiologa y Plasticidad Sinptica, Centro Regional de Investigaciones Biomdicas, Universidad Castilla-La Mancha.
En los ltimos aos se ha incrementado la evidencia que vincula la neurotransmisin serotonrgica con la modulacin de
una gran variedad de modelos experimentales de epilepsia.
Si bien esta modulacin se ha relacionado con la activacin
de receptores postsinpticos serotonrgicos tipo 5-HT1A, los
mecanismos circuitales que subyacen a este control no han
sido claramente determinados. El objetivo del presente trabajo ha sido investigar los circuitos serotonrgicos implicados
en la modulacin de las crisis epilpticas del lbulo temporal,
en particular la va Rafe-Hipocampo, utilizando un modelo de
status epilepticus (SE) inducido por pentilentetrazol (PTZ). Ratas
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Sprague Dawley macho (17030 g) fueron anestesiadas con

isoflorano (al 5% para induccin y al 2% para mantenimiento)
y el crneo trepanado para introducir un electrodo bipolar de
estimulacin en el Ncleo Medial del Rafe (NMR), un electrodo
monopolar de estimulacin en las colaterales de Schaeffer y un
electrodo de registro en la capa piramidal de CA1 de hipocampo de acuerdo con las coordenadas estereotxicas. Todos los
experimentos se llevaron a cabo en animales despiertos. Para
la induccin del SE se utiliz PTZ, un antagonista de receptores
GABAA, aplicado intraperitonealmente a dosis repetidas de 40,
20, 10 mg/kg cada diez minutos hasta desencadenar el SE. Se
registraron los cambios electrofisiolgicos y conductuales y finalmente se evalu la muerte neuronal en cortes histolgicos
con la tincin de Nissl. Los datos fueron analizados mediante
un anlisis de varianza de un factor (ANOVA) seguido de un una
prueba post-hoc Dunnett. La aplicacin de PTZ, segn el protocolo establecido, provoca crisis tnico-clnicas (70-80 mg/
kg) que posteriormente desencadena un SE (100 mg/kg). La
estimulacin repetida del NMR (1 tren de 20Hz, 150 A durante
1s), en el momento de inicio de los espasmos (estadio 2), fue
capaz de disminuir significativamente tanto el nmero como
la duracin de las crisis, aumentando el intervalo de tiempo
entre crisis. Igualmente, la estimulacin del NMR impidi el establecimiento del SE inducido PTZ en el 100% de los animales
tratados. Los estudios histolgicos mostraron que los animales
estimulados no presentaron muerte neuronal. Estos resultados
indican La estimulacin elctrica del NMR sincronizada con el
inicio de las crisis es capaz de abolir el SE inducido por PTZ
en animales jvenes y de esta manera demostrando la participacin del circuito rafe-hipocampo en la modulacin del SE.
Financiado por SAF2009-09020.
O.5.La adquisicin de nuevas estrategias de
aprendizaje espacial en el laberinto radial de
ocho brazos depende de la carga gentica de
los individuos: efectos de la administracin
crnica de cocana.
Fole A.1,2, Miguns M.1, Higuera-Matas A.1, Ambrosio E.1, Del
Olmo N.2. 1. Departamento de Psicobiologa. Facultad de Psicologa. UNED; 2. Departamento de Ciencias Farmacuticas y
de la Alimentacin, Facultad de Farmacia. Universidad San Pablo CEU, Boadilla del Monte, Madrid.
Experimentos previos realizados en nuestro laboratorio demostraron la existencia de importantes diferencias en la plasticidad sinptica hipocampal entre las razas de ratas Lewis y
Fischer344 razas tras la administracin crnica de cocana.
Debido a que los mecanismos fisiolgicos que subyacen a los
procesos de aprendizaje y memoria parecen estar ntimamente relacionados con los implicados en la adiccin a las drogas,
nos planteamos conocer si las diferencias encontradas en la
plasticidad sinptica en ambas razas se correlacionaban con
cambios en los procesos de aprendizaje y memoria espacial.
Para ello, hemos realizado experimentos conductuales en el
laberinto radial de ocho brazos (RAM) con el fin de evaluar si
la administracin crnica de cocana afecta a la adquisicin
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de nuevas estrategias de aprendizaje. Se administr cocana

(15mg/kg) o salino a ratas macho y adultas de las razas Lewis
(LEW) y Fischer-344 (F344) desde siete das antes de iniciar los
ensayos conductuales hasta la finalizacin de los mismos. Se
utiliz un protocolo del entrenamiento de los animales en la
tarea de bsqueda y localizacin de refuerzos de comida que
se dispusieron en cuatro de los ocho brazos del laberinto y una
vez que los animales hubieron consolidado esta conducta, se
cambi la localizacin del alimento a cuatro brazos distintos.
Los animales F344 presentaron una menor capacidad para la
adquisicin de nuevas tareas de aprendizaje espacial que pueden relacionarse con su menor plasticidad sinptica hipocampal. Adems, la administracin crnica de cocana empeor la
capacidad de los animales para la adquisicin de nuevas estrategias espaciales siendo este efecto ms significativo en la raza
F344. Estos datos revelan que la cocana influye en el aprendizaje espacial en funcin de la carga gentica de los individuos.
Investigacin financiada por el Instituto de Salud Carlos III (Red
de Trastornos Adictivos, RTA, Proyecto nmero RD06/001/0029),
el Plan Nacional sobre Drogas (Proyecto nmero 2008-I-070 de
2008-2010) y el Ministerio de Ciencia e Innovacin (Proyectos
nmero SAF2007-064890 y SAF2008-02902).
O.6.Efectos a largo plazo de la administracin de
cocana durante la edad adolescente sobre
receptores cannabinoides cb1 y cb2 en un
modelo animal de separacin materna temprana. dimorfismos sexuales.
A. Llorente-Berzala, M.A. Assisb, T. Rubinoc, E. Zamberlettic,
E. M. Marcoa, D. Parolaroc, E. Ambrosiob and M. P. Viverosa.
aDepartamento de Fisiologa (Fisiologa Animal II), Facultad
de Ciencias Biolgicas, Universidad Complutense de Madrid,
Instituto de Investigacin Sanitaria del Hospital Clnico San Carlos (IdISSC), Madrid; bDepartamento de Psicobiologa, Facultad
de Psicologa, UNED, Madrid; cDBSF y Centro de Neurociencia,
Universidad de Insubria (Italia).
La cocana es una de las drogas ilcitas ms consumidas en Europa, principalmente en edad juvenil. La exposicin a situaciones de estrs en edades tempranas del desarrollo parece contribuir al desarrollo de diversas enfermedades neuropsiquitricas, que frecuentemente aparecen en la edad adolescente.
De hecho, en estudios recientes, hemos descrito importantes
alteraciones conductuales, neuroendocrinas, y bioqumicas
como consecuencia de la exposicin a un episodio prolongado de separacin materna temprana (SM, 24h el da 9 de vida
postnatal, PN) en ratas. Adems, se han observado importantes alteraciones a nivel del sistema cannabinoide endgeno
(SCE), que contina su desarrollo y maduracin en la edad
adolescente, y que juega un papel crucial en los procesos de
adiccin y dependencia. Por ello, en el presente estudio investigamos los efectos a largo plazo de la administracin crnica
de cocana durante la edad adolescente en nuestro modelo
de SM. Analizamos la expresin y funcionalidad de receptores
cannabinoides cerebrales de tipo 1 (CB1), as como las variaciones en la expresin de receptores cannabinoides de tipo 2
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(CB2) en la periferia, bazo y mdula sea, dado el importante

papel del SCE en la respuesta inmunitaria y como consecuencia de la comorbilidad observada entre el consumo de drogas
de abuso y la aparicin de enfermedades infecciosas. Ratas
Wistar de ambos sexos sometidas al protocolo de SM o mantenidas en condiciones estndar (control) fueron administradas con cocana (8 mg/kg/da, i.p.) o salino durante el periodo
adolescente (15 das, desde el da 28 al 42 de vida PN). En edad
adulta (PN 85), se evalu la expresin y la funcionalidad de los
receptores CB1 en diversas reas cerebrales mediante tcnicas
de autorradiografa con [3H]-CP55,940 y [35S]-GTP
S estimulada con WIN55,212-2, respectivamente. Tanto la administracin
de cocana en edad adolescente como la SM provocaron notables cambios sexo-dimrficos a nivel de los receptores CB1,
principalmente en relacin a la funcionalidad del mismo. Entre
los resultados ms interesantes cabe destacar que la cocana
produjo, exclusivamente en animales macho control, una disminucin significativa en los niveles de expresin de CB1 en la
corteza prefrontal, as como un aumento en la actividad del receptor en el caudado-putamen y el rea tegmental ventral, no
observndose dichos efectos ni en machos SM ni en hembras.
Por otro lado, la expresin de receptores CB2, medidos por
Western blot, se vio afectada por ambos tratamientos. Tanto en
machos como en hembras, la SM aument significativamente
los niveles de CB2 en bazo, mientras que la administracin de
cocana pareci contrarrestar tal efecto. En mdula sea, la
expresin de CB2 pareci disminuir como consecuencia de la
administracin de cocana en edad adolescente. El consumo
de cocana entre los jvenes es un grave problema de salud
pblica que puede ir acompaado de importantes complicaciones neuroinmunolgicas y cuya gravedad podra depender
de la exposicin previa a situaciones de estrs, siendo particularmente relevantes los episodios de estrs sufridos en etapas
tempranas del desarrollo. El empleo del presente modelo animal permite analizar en profundidad las consecuencias a largo
plazo de estos dos fenmenos (estrs neonatal y consumo
adolescente de cocana), y apunta al SCE como posible diana
en la mediacin de algunos de sus efectos.
Financiado por el Instituto de Salud Carlos III, Redes temticas de Investigacin Cooperativa en salud (ISCIII y FEDER):
RD06/0001/1013 y RD06/0001/0029. GRUPOS UCM-BSCH
(951579) y Plan Nacional sobre Drogas del Ministerio de Sanidad y Poltica Social (SAS/125/2009 y 2008-I-070).
Sesin Oral II: Mecanismos de sealizacin
0.7.La mutacin P86L-CALHM1, ligada a la enfermedad de Alzheimer, altera la sealizacin de
calcio nuclear.
Ana J. Moreno Ortega1,2,3,4, Javier Egea1,2, Elba Alonso1,3,4, Antonio G. Garca1,2,3,4, Manuela G. Lpez1,2, Ana Ruiz Nuo1,3,4 y
Mara F. Cano Abad1,2,3,4. 1 Instituto Tefilo Hernando de I+D
del Medicamento y 2 Departamento de Farmacologa y Teraputica, Universidad Autnoma de Madrid 3 Instituto de Investigaciones Sanitarias La Princesa y 4 Servicio de Farmacologa
Clnica, Hospital Universitario La Princesa.
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Vol. 1 No. 1:2
doi: 10:3823/601
La mutacin P86L del nuevo canal de calcio (Ca2+) CALHM1

(acrnimo ingls CALcium Homeostasis Modulator 1) parece estar implicada en la progresin de la EA espordica (Lambert y
col., 2010). Se ha visto que este polimorfismo (P86L-CALHM1),
adems de alterar la homestasia del Ca2+ citoslico, incrementa la produccin del pptido beta-amiloide (A) (Dreses-Werringloer y col., 2008). Datos de nuestro laboratorio demuestran que P86L-CALHM1 no solo altera la homeostasia de Ca2+
en el citosol, sino que tambin lo hace en la mitocondria, lo que
podra originar una sobrecarga de Ca2+ mitocondrial y muerte celular (Moreno-Ortega y col., 2010). Sin embargo poco se
sabe de la homeostasia de Ca2+ en el ncleo, ya que CALHM1
se expresa en el retculo endoplsmico (RE) (y por ende en la
envuelta nuclear) y podra influir en la homeostasia del Ca2+
en este compartimento, clave en el control de la transcripcin
de genes regulados por Ca2+. El objetivo de nuestro trabajo
fue estudiar la influencia de CALHM1 sobre la concentracin
de Ca2+ nuclear ([Ca2+]nu). Para ello, cotransfectamos en clulas HeLa: i) un vector vaco (control), ii) el canal nativo (WTCALHM1), iii) P86L-CALHM1, junto con ecuorina nuclear (una
sonda bioluminiscente sensible a Ca2+, dirigida genticamente
a ncleo). La expresin de CALHM1 y P86L-CALHM1 aument
la [Ca2+]nu basal y alter la [Ca2+]nu inducida por un pulso de
histamina (100 M). Estos experimentos sugieren que CALHM1
y P86L-CALHM1 estn influyendo en la [Ca2+]nu per se o a travs de los receptores de inositol 1,4,5-trisfosfato (InsP3Rs). Para
confirmar nuestra hiptesis, empleamos el bloqueante de los
InsP3Rs, 2-aminoetoxidifenil borato (2-APB). Observamos que
en presencia de 2-APB no hay una reduccin significativa de
la [Ca2+]nu basal; sin embargo, se ve parcialmente reducida la
[Ca2+]nu mediada por pulsos de histamina. Estos resultados sugieren que CALHM1 podra actuar como una canal tipo goteo
(leaky-channel) y que alterara la [Ca2+]nu con consecuencias en
la transcripcin de genes regulados por Ca2+.
Referencias:
1. Dreses-Werringloer, y col.., 2008. Cell. 133:1149-1161.
2. Lambert y col., 2010. J Alzheimers Dis., 22: 247-55.
3. Moreno-Ortega, y col., 2010. Biochem. Biophys. Res. Commun, 391:
722-726.
O.8.Concentraciones nanomolares de ouabana

activan la va intrnseca de la apoptosis en
las clulas HeLa.
Elba Alonso, 1,3 Mara F. Cano-Abad, 1,3 Ana J. Moreno-Ortega,
1,3 Jess Novalbos, 1,3 Juan Milla, 1,2,3 Antonio G. Garca y 1,3
Ana Ruz-Nuo. 1Instituto Tefilo Hernando, 2Departamento
de Farmacologa y Teraputica, Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Madrid. 3Servicio de Farmacologa Clnica,
Instituto de Investigaciones Sanitarias, Hospital Universitario
de la Princesa, Universidad Autnoma de Madrid.
Concentraciones nanomolares de ouabana (OUB), no inhibitorias de la Na+K+ ATPasa (NKA) de la membrana celular, activan
diversas seales intracelulares. Nosotros hemos estudiado algunas de estas seales tras la incubacin con concentracio-
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nes nanomolares de OUB durante 24h en clulas HeLa. Tras

la estimulacin con histamina, hemos observado una rpida
elevacin del calcio citoslico ([Ca2+]c) en clulas cargadas con
fura-2 que se reduce a la mitad tras incubar con 300 nM del
digitlico. Adems se produce dao y redistribucin de las mitocondrias y una disminucin de los niveles de ATP del 40% y
un 30% de la viabilidad celular. Las caspasas 3/7 y 9 quintuplican su actividad mientras que la caspasa 8 no se ve afectada.
Z-LEHD-FMK evita la activacin de la caspasa 9 y disminuye
a la mitad la apoptosis ouabanica. Esto podra explicarse del
siguiente modo: (i) la unin de la OUB a la NKA produce un
dao mitocondrial; (ii) este dao conduce a la despolarizacin
de la mitocondria y a una disminucin del ATP; (iii) se produce
la activacin de la caspasa 9 seguida de la activacin de las caspasas 3/7; (iiii) la caspasa 3 daa el receptor de 1, 4, 5-inositoltrifosfato del RE provocando un goteo constante de calcio hacia el citosol. Ya que hay una concentracin nanomolar de OUB
endgena en mamferos, nuestros resultados podran apuntar
a un posible papel regulador de la apoptosis de los esteroides
cardiotnicos en los procesos fisiolgicos.
O.9.La liberacin de xido ntrico neuronal disminuye en arteria mesentrica de hembras
adultas en periodo de lactancia.
Esther Sastre, Javier Blanco-Rivero, Miriam Granado, Gloria
Balfagn. Departamento de Fisiologa, Facultad de Medicina.
Universidad Autnoma de Madrid.
Ha sido sugerido que la lactancia puede estar contraindicada en algunas mujeres con presin arterial lmite, o franca
hipertensin, puesto que aumenta la resistencia vascular. El
tono vascular de la arteria mesentrica est regulado, entre
otros factores, por los distintos tipos de inervacin, entre otras,
adrenrgica y nitrrgica. Por lo tanto, el objetivo del presente
estudio fue analizar si la lactancia afecta la respuesta vasomotora inducida por estimulacin elctrica (EE) en arteria mesentrica de rata, as como la participacin de las inervaciones
adrenrgica, y nitrrgica en estas posibles modificaciones. Se
utilizaron ratas hembra adultas Sprague-Dawley divididas en
dos grupos experimentales: 1) en fase estro, y 2) madres tras un
periodo de lactancia de 21 das. Se analizaron las variaciones
de la respuesta vasoconstrictora a EE (200 mA, 0.3 ms, 116 Hz,
30 s) en presencia/ausencia de 1 mmol/L del antagonista de los
receptores a-adrenrgicos fentolamina, o de 0.1 mmol/L del
inhibidor inespecfico de la xido ntrico sintasa (NOS) L-NAME.
Se analiz la respuesta vasoconstrictora a noradrenalina (NA) y
vasodilatadora al donante de xido ntrico (NO) DEA-NO. Asimismo, se midi la liberacin de NA y de NO, y la expresin
proteica de la NOS neuronal fosforilada (P-nNOS).
La respuesta contrctil inducida por EE fue significativamente
mayor en madres lactantes. La fentolamina redujo la respuesta a EE en igual medida en ambos grupos. Tanto la liberacin
cmo la respuesta vasoconstrictora a NA fueron similares en
ambos grupos. L-NAME increment la contraccin inducida
por EE en ambos grupos, pero en mayor medida en hembras
en estro. La respuesta a DEA-NO fue similar en ambos grupos
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experimentales. Tanto la liberacin de NO como la expresin

de P-nNOS se vieron disminudas en arterias de madres lactantes. El incremento en la respuesta vasoconstrictora inducida
por EE en madres lactantes ha podido ser debido a una disminucin en la liberacin deNO de origen neuronal, lo cual puede
contribuir a un aumento en la resistencia vascular perifrica.
Subvencionado por el Ministerio de Ciencia e Innovacin
(SAF2009-10374)
O.10.Funcin de la mitocondria en la regulacin
de la homeostasia intracelular del calcio y
su papel en la secrecin de catecolaminas en
las clulas cromafines bovinas.
Juan-Fernando Padn(1,2); Afonso Caricati-Neto(4), Edilson-Dantas Silva-Junior(4), Antonio M. G. de Diego(1,2), Aron Jurkiewicz(4), Antonio G. Garca(1,2,3). 1Instituto Tefilo Hernando (ITH);
2Departamento de Farmacologa y Teraputica; 3Servicio de
Farmacologa Clnica, Hospital Universitario de la Princesa. Facultad de Medicina, Universidad Autnoma de Madrid. 4Departamento de Farmacologa, Universidad Federal de So Paulo
(Brasil).
Estudios previos realizados en nuestro laboratorio con clulas
cromafines bovinas (CCBs) han demostrado que la liberacin
de catecolaminas inducida por acetilcolina (ACh), altas concentraciones de K+ o con cafena, se potencia cuando se bloquea
con protonforos la captacin del Ca2+ mitocondrial (Montero
et al, Nature Cell Biology 2000; Cuchillo-Ibz et al., J. Physiol.,
2004). Sin embargo, todava se desconoce si los bloqueantes
ms selectivos del uniportador mitocondrial (MUP) como el
RU360 (RU), o los inhibidores del intercambiador de Na+/Ca2+
(MNCx) como el CGP37157 (CGP), afectan a estas respuestas
secretoras. En el presente estudio mostramos los efectos de los
compuestos: RU, CGP, el protonforo FCCP, y la combinacin
de oligomicina y rotenona (O/R) (para bloquear la respiracin
mitocondrial), sobre la respuesta secretora, y tambin sobre
los cambios en la concentracin de Ca2+ citoslico ([Ca2+]c)
inducidos por ACh, en las CCBs. Los resultados que hemos obtenido son que RU aument tanto el pico de secrecin (PS)
(95%) como el tiempo de la constante de aclaramiento de la
[Ca2+]c (tiCa) (49%). En contraste, el CGP redujo el PS (19%) pero
aument tiCa (64%). La combinacin de RU/CGP aument ambos, el PS (71%) y tiCa2+ (47%). Por otra parte, el FCCP (110% y
248%) y O/R (148% and 58%) incrementaron tanto el PS como
la tiCa, respectivamente. Por lo tanto, parece que todas las
manipulaciones farmacolgicas de los movimientos de calcio
mitocondrial producen un incremento en la tiCa, mostrando
un enlentecimiento en el aclaramiento del calcio cuando se
altera la funcin mitocondrial. Como consecuencia de esta mayor disponibilidad de Ca2+ en el citosol, el transporte vesicular,
el acoplamiento de las vesculas en la membrana, y la exocitosis
tambin aumentan. Estos resultados confirman y amplan el
conocimiento de la gran importancia que tiene la mitocondria
en la fina regulacin de la homeostasia celular del calcio, y su
funcin en la respuesta secretora de catecolaminas, tras la activacin por el neurotransmisor endgeno ACh.
iMedPub Journals
O.11.Los antagonistas de los canales calcio de

bajo umbral de activacin tambin bloquean
los canales de calcio de alto umbral.
Jos C. Fernndez-Morales1 , Juan Fernando Padn1, Marcos
Maroto1, Enrique Calvo1, Antonio G. Garca1,2 , Antonio M.G.
De Diego1. 1Instituto Tefilo Hernando, Departamento de
Farmacologa y Teraputica, Facultad de Medicina. Universidad Autnoma de Madrid. 2Servicio de Farmacologa Clnica,
Hospital Universitario de la Princesa. Universidad Autnoma
de Madrid.
El Ni2+, mibefradilo y el NNC 55-0396 (NNC) son ligandos ampliamente utilizados para la caracterizacin farmacolgica de
los canales de calcio voltaje-dependientes (CCVD) de bajo umbral de activacin (tipo T). Sin embargo, a las concentraciones
empleadas habitualmente en la literatura, hemos observado
que estos ligandos carecen de la selectividad para bloquear
las corrientes de tipo T. Con el objetivo de conocer en profundidad sus propiedades farmacolgicas, hemos estudiado sus
efectos sobre las corrientes de Ba2+ (IBa), la respuesta secretora y las variaciones en la concentracin de Ca2+ citoslico
([Ca2+]c) en cultivos primarios de clulas adrenales cromafines
(CC) de tres especies animales distintas. Hemos empleado la
rata adulta (CCRA), el ratn (CCRT) y la vaca (CCB), por estar
descrito que slo expresan los CCDV de alto umbral N, L y
P/Q, y carecer de los de tipo T, y hemos realizado un estudio
comparativo con las CC de rata embrionaria (CCRE), ya que
expresan tanto canales de tipo T como de alto umbral. Estos
estudios se realizaron mediante las tcnicas de patch-clamp,
amperometra y microscopa de fluorescencia con la sonda
fluorescente Fura-2. En las CCB, el Ni2+ bloque de forma
concentracin-dependiente la IBa (5 mM extracelular) producida por despolarizaciones de 50 ms a intervalos de 15 s
desde -80 mV a diferentes potenciales (de -60 a +60). Su IC50
en la mxima corriente (-10 mV) fue de 50 M en CCRE y de
70 M en CCB (+0 mV). Adems, tambin bloque en CCB de
forma concentracin-dependiente los incrementos de [Ca2+]
+
c, producidos por tres despolarizaciones de K (5 s, 45 mM)
aplicadas a intervalos de 3 min. La IC50 fue de (4,27 x 10 -5
0,04) M, (3,59 x 10 -5 0,07) M y de (6,91 x 10 -6 0,37) M tras 1,
4 y 7 min de perfusin del Ni2+. El bloqueo mximo se produjo
de forma independiente del tiempo, y fue del 70 %. Adems,
en las CCRT observamos una inhibicin de la secrecin cuantal
de catecolaminas evocada por K+ (75 mM) del 30% y del 70% a
25 M y 50 M de Ni2+, respectivamente. En cuanto al mibefradilo, en CCB bloquea el aumento de la [Ca2+]c con una IC50 de
(1,10 x 10 -7 0,21) M, (4,87 x 10 -8 0,44) M, y (8,77 x 10 -8 0,13)
M tras 1, 4, y 7 min de perfusin, respectivamente. Adems,
a concentraciones mximas de mibefradilo, este bloqueo es
tiempo-dependiente, siendo del (42,17 0,19) %, (68,75 7,57)
% y (82,58 4,58) % tras 1, 4 y 7 min de perfusin, respectivamente. De manera similar, el mibefradilo (10 M) bloque
la IBa en un 55 %, tanto en CCRE como en CCB. Por ltimo, el
NNC, un nuevo antagonista derivado del mibefradilo, redujo
en CCB la IBa un 30 % a 1 M y prcticamente la abole a 50 M.
El bloqueo del transiente de [Ca2+]c tras 7 min de perfusin
fue de (89,21 10,79) % a 0.1 M y de (90,13 1,24) % a 1 M.
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En conclusin, mostramos en este trabajo que la farmacologa

existente para el aislamiento y estudio de los CCVD de bajo
umbral es deficiente, como demuestra el que 2 de los antagonistas ms empleados (Ni2+ y mibefradilo) y uno desarrollado
recientemente (el NNC) bloqueen de manera importante la
IBa, los incrementos de de [Ca2+]c y la secrecin cuantal de
catecolaminas en tipos celulares que no expresan CCVD de
bajo umbral. Por lo tanto, se debe de proceder con extrema
cautela cuando se pretende disecar la funcin de los distintos
subtipos de CCVD en clulas que expresan CCVD tanto de alto
como de bajo umbral de activacin.
Sesin Oral III: Inflamacin/estrs oxidativo
O.12.Propiedades antiamiloidognicas in vitro de
1,4-naftoquinonas.
Ortega A2, Rincn A1, Roscales S1, Jimnez-Aliaga KL2, Bermejo-Bescs P2, Martn-Aragn S2, Buxaderas E1, Csk AG1 1. Departamento de Qumica Orgnica, Facultad de Ciencias Qumicas. Universidad Complutense de Madrid. 2. Departamento de
Farmacologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense
de Madrid.
Se han estudiado las propiedades antiamiloidognicas de una
serie de 1,4-naftoquinonas (1,4-NQ) en cuanto a su interaccin
con el procesamiento de la protena precursora del -amiloide
(APP) por la va amiloidognica. Particularmente se ha ensayado: la inhibicin de -secretasa (BACE), la inhibicin de
la agregacin del pptido -amiloide, y la desagregacin del
mismo una vez agregado. Los compuestos con grupos hidroxilos en el anillo quinnico (2) o bencnico (5, 6), as como 2- y
3-aril derivados (11-15) han mostrado actividad inhibitoria de
BACE sin efecto en la agregacin o desagregacin del pptido
-amiloide. Los compuestos halogenados 8 y 10 fueron selectivos en la inhibicin de la agregacin del pptido -amiloide.
Por otro lado, 1,4-naftoquinona (1), 6-hidroxi-1,4-naftoquinona
(4) y 2-(3,4-diclorofenil)-1,4-naftoquinona (26) no mostraron
actividad inhibitoria de BACE, sin embargo fueron activos frente a la agregacin y desagregacin del pptido -amiloide. La
yuglona (5-hidroxi-1,4-naftoquinona) (3) y la 3-(p-hidroxifenil)5-metoxi-1,4-naftoquinona (19) fueron activas en las tres dianas estudiadas. Por tanto, los derivados de 1,4-NQ estudiados,
especialmente 3 y 19, pueden ser potenciales candidatos para
el desarrollo de frmacos que prevengan la agregacin del
pptido -amiloide y la neurotoxicidad de la enfermedad de
Alzheimer.
O.13.Nuevo mtodo de sntesis de cannabinol y
anlogos. Usos potenciales en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.
David M. Solano1, Maria Fernandez1,A. Agis2,Wilma Villaro2, J.V.
Sinisterra y J.M. Snchez Montero1. 1. Departmento de Qumica
y Farmacutica. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid. 2. Departamento de Fisiologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid.
iMedPub Journals
El uso teraputico de los cannabinoides ha sido ampliamente demostrado a lo largo de la historia, como analgsicos,
antiinflamatorios, antiemticos y actualmente como agentes
neuroprotectores para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas como el Alzheimer. En la actualidad el uso
de estos frmacos est limitado por sus efectos psicotrpicos.
Existen ms de 84 cannabinoides en Cannabis sativa algunos
de los cuales carecen de efectos psicoactivos, entre ellos est
el cannabinol (CBN). Se trata del producto primario de la degradacin del THC y no se suele encontrar demasiado en la
planta. Es un psicoactivo muy leve cuya afinidad es superior
en el caso del receptor CB2 y baja en el CB1. En base a esto y
a los nuevos descubrimientos en la actividad neuroprotectora de los cannabinoides, hemos diseado una nueva ruta de
sntesis de CBN y estructuras anlogas diseadas mediantes
tcnicas de docking molecular con el objetivo de inhibir a la
acetil colinesterasa y desarrollar un potencial frmaco para el
tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.La nueva ruta de
sntesis que hemos desarrollado consigue la sntesis total del
CBN y otras estructuras anlogas en 5 pasos. Se basa en una
primera condensacin de 2 ciclos mediante una adicin aromtica a un carbonilo, seguida de la isomerizacin del correspondiente alcohol benclico y posterior ciclacin obteniendo
el sistema de cromeno caracterstico de los cannabinoides. Se
ha realizado un estudio de las propiedades QSAR de los compuestos sintetizados mediante tcnicas computacionales as
como las Ki tericas para cada anlogo con el fin de encontrar
un cabeza de serie y correlacionar los resultados con los ensayos de inhibicin in vitro.
O.14.Derivados de hispanolona suprimen la va
de sealizacin inflamatoria JAK-STAT en
clulas de microglia estimuladas con interferon-g.
Florencia Cidre1, Sandra Herranz1, Beatriz de las Heras2, Eva
Cano3, Sonsoles Hortelano1. 1.Unidad de Inflamacin y Cncer.
Centro Nacional de Microbiologa. Instituto de Salud Carlos III.
Madrid. 2. Departamento de Farmacologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid. 3. Unidad de Neuroinflamacin. Centro Nacional de Microbiologa. Instituto de
Salud Carlos III. Madrid.
La bsqueda de nuevos agentes antiinflamatorios derivados
de productos naturales se ha incrementado enormemente
en los ltimos aos. Recientemente se ha descrito que derivados de la hispanolona como la dehidroisohispanolona (T4)
o el 8,9-dehidrohispanolona-15,16-lactol (T11) ejercen efectos
anti-inflamatorios en macrfagos peritoneales. Las acciones
anti-inflamatorias de los derivados de la hispanolona parecen
estar relacionados con la inhibicin de la liberacin de mediadores inflamatorios como el xido ntrico (NO) y las prostaglandinas, as como de citoquinas como TNF-a e IL-6 a travs
de un mecanismo que implica la inhibicin de la activacin
del factor de trancripcin NF-kB. Sin embargo, no se conocen
los efectos de estos compuestos en otros tipos celulares implicados en la inflamacin como la microgla. As, en este trabajo
hemos evaluado los efectos anti-inflamatorios de los derivados
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de hispanolona en clulas BV2 y en cultivos primarios de microgla tras estimulacin con IFN-g. Nuestros datos muestran que
ambos compuestos son capaces de inhibir la liberacin de NO,
a nivel transcripcional, siendo el compuesto T11 el ms activo
de los dos. Utilizando tcnicas de microarray y anlisis de PCR
cuantitativa comprobamos que el compuesto T11 ejerce una
clara inhibicin de genes regulados por IFN-g tales como las
quimioquinas CXCL-10 (IP-10) y CXCL-9 (MIG). Los efectos inhibitorios del T11 parecen estar mediados por la inhibicin de la va
de sealizacin JAK-STAT. En definitiva, nuestros resultados indican un nuevo mecanismo por el cual los derivados de hispanolona ejercen sus efectos anti-inflamatorios actuando como
reguladores negativos de la va JAK-STAT. As, la inhibicin de la
activacin de la microglia por parte de los derivados de hispanolona puede constituir una nueva estrategia teraputica para
numerosas enfermedades neuroinflamatorias. Este trabajo se
ha llevado a cabo gracias a las ayudas del FIS PI08/0070 y eI
ISCIII MPY1410/09 para S.H. y del FIS PI09/0218 y dele ISCIII
MPY1415/09 para E.C.
O.15.Efectos neuroprotectores de la combinacin
de fitocannabinoides del Sativex en modelos experimentales de la enfermedad de
Huntington.
Sara Valdeolivas1,2,3, Valentina Satta1,4, M. Ruth Pazos1,2, Javier
Fernndez-Ruiz1,2,3 y Onintza Sagredo1,2,3. 1. Departamento
de Bioqumica y Biologa Molecular, Instituto Universitario de
Investigacin en Neuroqumica, Universidad Complutense,
Madrid, Espaa; 2. Centro de Investigacin Biomdica en Red
sobre Enfermedades Neurodegenerativas (CIBERNED); 3. Instituto Ramn y Cajal de Investigacin Sanitaria (IRYCIS); 4.
Department of Neuroscience, University of Cagliari, Cagliari
(Italia).
La manipulacin farmacolgica del sistema cannabinoide
puede servir como estrategia neuroprotectora en diferentes
trastornos neurodegenerativos, entre los cuales se encuentra
la enfermedad de Huntington, una patologa hereditaria de
transmisin autosmica dominante causada por la expansin
del triplete CAG localizado en el exn 1 del gen IT15 que codifica la protena huntingtina. La enfermedad se caracteriza por
la degeneracin progresiva de las neuronas GABArgicas de
proyeccin estriatal y tambin de diferentes subpoblaciones
de neuronas piramidales de la corteza cerebral, las cuales son
altamente susceptibles a la toxicidad causada por la huntingtina mutada. Mltiples evidencias han demostrado que entre
los diferentes mecanismos citotxicos implicados en esta enfermedad se encontraran el estrs oxidativo, la excitotoxicidad
y la inflamacin. Para estudiar estos mecanismos y el potencial de los cannabinoides frente a ellos, hemos trabajado con
distintos modelos experimentales de la enfermedad de Huntington, generados tanto en ratas como en ratones, utilizando
neurotoxinas tales como el malonato, el 3-nitropropionato o el
quinolinato. Hemos observado que la administracin de Sativex, una mezcla de extractos botnicos ricos en 9-THC y CBD
combinados en proporcin 1:1, redujo el dficit de GABA que
se produce en el estriado en el modelo de 3-nitropropionato
iMedPub Journals
y la prdida neuronal identificada mediante tincin de Nissl en

cualquiera de estos modelos. Los resultados obtenidos tambin demuestran que el Sativex redujo el volumen de edema
(medido mediante NMR in vivo) producido en el estriado por
la lesin con malonato o quinolinato, as como se produjo una
disminucin de la astrogliosis (identificada mediante inmunotincin para GFAP) y de la microgliosis (identificada mediante
inmunotincin para OX-42) en ambos modelos. La administracin de Sativex tambin redujo la cada de la expresin del
receptor CB1, de IGF-1 y de SOD-1, as como el incremento en
la expresin de calpana, en el modelo de ratas lesionadas con
3-nitropropionato. Por consiguiente, estos resultados permiten
afirmar que hay datos claros a nivel preclnico en apoyo a un
efecto beneficioso del Sativex como posible agente neuroprotector en la enfermedad de Huntington, algo que deber
ser estudiado cuanto antes en pacientes dada la ausencia de
tratamientos eficaces en esta patologa.
Financiado por CIBERNED (PI2010/06), MICINN, Espaa, y GW
Pharmaceuticals Ltd., UK
Sesin Oral IV: Farmacologa Clnica
O.16.Efecto de los polimorfismos de CYP2C9 y
CYP2C8 sobre la farmacocintica de candesartn y telmisartn.
Aneta Wojnicz, Manuel Romn Martnez, Mara Talegn Garca,
Dolores Ochoa Mazarro, Francisco Abad Santos, Teresa Cabaleiro Ocampo. Servicio de Farmacologa Clnica. Hospital Universitario de la Princesa. Madrid.
Los antagonistas de los receptores de angiotensina II (ARA-II)
son frmacos utilizados en el tratamiento de la hipertensin,
pero no todos los pacientes responden favorablemente al tratamiento. Por este motivo hemos estudiado los polimorfismos
de los genes CYP2C8 y CYP2C9 para comprobar la posible asociacin con la farmacocintica de candesartn y telmisartn. De
cada muestra de sangre de los voluntarios sanos se ha extraido
el ADN en un extractor automtico de cidos nucleicos MagnaPure (Roche). Los anlisis de mutaciones de los genes CYP2C8
y CYP2C9 se han realizado mediante PCR a tiempo real en Light
Cycler (Roche). El anlisis estadstico se realiz con el programa SPSS. En el ensayo clnico de candesartn (una nica dosis
de 32 mg) han participado 36 voluntarios sanos y se genotiparon 27 (14 hombres, 13 mujeres) y en el de telmisartn (una nica dosis de 80 mg) han participado 48 voluntarios sanos y se
genotiparon 43 (18 hombres, 25 mujeres). Se han identificado
los polimorfismos de un solo nucletido de CYP2C8: CYP2C8*2,
CYP2C8*3, CYP2C8*4, y de CYP2C9: CYP2C9*2, CYP2C9*3. Los portadores del alelo CYP2C9*3 presentan una mayor vida media
de candesartn que los metabolizadores normales (10,87 h vs
10,14 h; p0,05). La vida media de candesartn en los voluntarios con el genotipo CYP2C8 *1/*4 es 1,56 veces mayor que
en los sujetos con el genotipo *1/*1 (13,99 h vs 8,99 h; p0,05).
Los voluntarios que son metabolizadores lentos para el CYP2C8
(*2/*3 y *3/*4) tienen un aclaramiento mayor del frmaco que
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los metabolizadores intermedios (CYP2C8 *1/*2, *1/*3, *1/*4)

(15,10 h vs 9,42 h; p0,05). Para telmisartn no se encuentra
ninguna diferencia significativa. Estos resultados sugieren una
asociacin entre polimorfismos del CYP2C8 y CYP2C9 y la farmacocintica del candesartn, pero no del telmisartn.
O.17.Pueden ser los receptores TLR-4 una diana interesante para el tratamiento del dolor
neuroptico? Resultados preliminares en un
modelo de neuropata por paclitaxel en rata.
David Pascual, Andrea Rincn, Mara Isabel Martn, Carlos Goicoechea. Departamento de Farmacologa y Nutricin. Facultad
de Ciencias de la Salud. Universidad Rey Juan Carlos. Alcorcn.
Madrid
Los receptores Toll-like (TLR) son unos receptores relacionados
con la inmunidad innata y cuando son activados producen la
liberacin de citoquinas. Recientes evidencias sugieren que el
TLR-4 aumenta la expresin de citoquinas en microglia y astrocitos, iniciando y propagando cuadros como el dolor crnico,
lo que los convierte en dianas teraputicas para el estudio de
nuevos analgsicos. Por otro lado el paclitaxel en un agente
antineoplsico efectivo en el tratamiento de muchos tipos de
tumores. Uno de sus efectos secundarios ms frecuentes es la
neuropata perifrica que en muchas ocasiones obliga a suspender el tratamiento y que se suele manifestarse con alodinia
e hiperalgesia. El objetivo de este estudio ha sido determinar
la posible implicacin de los receptores TLR-4 en la neuropata
inducida por paclitaxel en ratas. El paclitaxel (PTX) fue administrado por va intraperitoneal (i.p.) (1 mg/kg) en cuatro das
alternos (1, 3, 5 y 7). El inhibidor de la sealizacin de TLR-4,
CLI-095 (0.5 mg/kg), se administr en los mismos das que el
PTX. Se organizaron tres grupos de animales a los que se les
aplic PTX, PTX y vehculo y PTX + CLI095. Para comprobar el
desarrollo de neuropata perifrica, se valor la hiperalgesia
trmica mediante el plantar test (Hugo Basile) y la alodinia mecnica mediante un von Frey electrnico (Bioseb-Panlab) en los
das 0, 7, 14, 21 y 28. El PTX produjo hiperalgesia trmica (umbral trmico: 58.4 % 2.8 vs 100% respuesta basal)y alodinia
mecnica (umbral a estmulos mecnicos: 46.9 % 1.5 vs 100%
(respuesta basal) en ambas patas. El CLI095, impidi de manera
estadsticamente significativa el desarrollo de la hiperalgesia
trmica (117.2% 7) y de alodinia mecnica (96.5% 5.3), inducida por paclitaxel vs el da 0. El tratamiento con CLI095 previno
tanto la alodinia mecnica como la hiperalgesia trmica en los
animales tratados con paclitaxel. Estos resultados preliminares,
sugieren que la modulacin farmacolgica de los receptores
TLR-4 podra ser til para el tratamiento del dolor neuroptico.
O.18.Sntesis de nuevos bloqueantes del intercambiador Na+/Ca2+ mitocondrial con potencial neuroprotector: el caso del ITH505.
J.Martnez-Sanz1 Laura Gonzlez-Lafuente2 Antonio M.G. de
Diego1 Rafael Len1 Cristbal de los Ros2 Mercedes Villarroya1.
1. Instituto Tefilo Hernando, Departamento de Farmacologa
y Teraputica, Facultad de Medicina, Universidad Autnoma
iMedPub Journals
de Madrid. 2. Instituto Tefilo Hernando, Fundacin de Investigaciones Biomdicas, Hospital Universitario de la Princesa.
Madrid.
En el Instituto Tefilo Hernando (ITH) nos hemos embarcado
en la bsqueda de potenciales frmacos que prolongue la supervivencia de neuronas vulnerables en enfermedades neurodegenerativas e ictus. La alteracin de los movimientos de
Ca2+ en la neurona en general, y en la mitocondria en particular, desencadena la apoptosis y la muerte de estas neuronas.
Recientemente, hemos descubierto que el compuesto CGP
37157, una benzotiazepina que bloquea inespecficamente el
intercambiador Na+/Ca2+ mitocondrial (INCm), protege clulas
cromafines y neuronas de hipocampo de rata frente a un estmulo de estrs por sobrecarga de Na+ y Ca2+(Nicolau y col,
2009 y 2010) . Estos datos sugieren que el INCm podra convertirse en una nueva diana para el desarrollo de frmacos neuroprotectores, mitigando la excesiva circulacin neuronal y mitocondrial del Ca2+. Para ello hemos emprendido un proyecto de
investigacin para sintetizar nuevos derivados del CGP 37157,
con estructura general como la que se muestra en la Figura 1.
R2
Cl
Cl
S
R1
N
H
FIGURA 1. Posibles derivados basados en el CGP 37157
Me
Cl
S
N
H
FIGURA 2. TH505
Presentamos aqu el perfil farmacolgico inicial de uno de estos derivados, al que denominamos ITH505, cuya estructura
qumica aparece representada en la Figura 2. El ITH505 produjo
una proteccin significativa cuando se ensay en un modelo
de estrs oxidativo sobre clulas de neuroblastoma humano
SH-SY5Y, sometidas al cctel txico de rotenona 30 mM y oligomicina A 10 mM, a las concentraciones de 0.3, 1 y 3 mM. Adicionalmente, mostr perfil neuroprotector en un modelo de
rodajas de hipocampo de rata sometidas tanto a la incubacin
10
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con glutamato 1 mM, con una mxima proteccin de 52 % a 30

mM, como a la sobrecarga de calcio inducida por veratridina
30 mM, donde fue capaz de reducir la prdida de viabilidad del
tejido desde 3 mM, con un mximo de 35 % de proteccin a
30 mM. Estos resultados son comparables, y en algunos casos
mejores, a los obtenidos en nuestro laboratorio para el cabeza
de serie CGP 37157 lo que, unido al hecho de que ITH505 se
puede considerar un isster modificado para mejorar el perfil farmacocintico de CGP 37157, nos lleva a pensar que este
compuesto podra ser candidato a un estudio preclnico ms
exhaustivo, para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas y/o ictus.
Referencias:
1. Nicolau y col. Biochem. Biophys. Res. Comm. 2010, 400, 140-144.
2. Nicolau y col. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2009, 330, 844-854.
O.19.Efecto neuroprotector de la melatonina y

nuevos derivados de la melatonina en modelos relacionados con la patologa de la enfermedad de Alzheimer.
Izaskun Buendia, Esther Parada, Javier Egea, Laura Gonzlez,
Laura Gonzlez C, Adriana Morgado, MI Rodriguez Franco, S.
Conde y Manuela G. Lpez. Instituto Tefilo Hernando. Departamento de Farmacologa y Teraputica. Facultad de Medicina.
A pesar de la gran prevalencia de la enfermedad de Alzheimer
(EA) en nuestra sociedad, aun no existen tratamientos eficaces
para estos pacientes ni tampoco buenos modelos experimentales in vitro que nos ayuden a evaluar nuevos medicamentos
en etapas preclnicas. El objetivo principal de este trabajo ha
sido poner en marcha modelos in vitro en los que se combine la patologa beta amiloide y la hiperfosforilacin de tau
para evaluar el potencial teraputico de dos nuevos hbridos
de melatonina en la EA. Hemos empleado cultivos organotpicos de rodajas de hipocampo de rata de 8-10 das ya que este
modelo nos permite realizar un tratamiento ms crnico con
los txicos b y cido okadaico. La viabilidad se ha evaluado
mediante la tincin con ioduro de propidio/ Hoescht.Tambin
hemos empleado la lnea celular de neuroblastoma humano
SH-SY5Y y, en este caso, la viabilidad celular se midi mediante
la reduccin de la sal de tetrazolio MTT. En el caso de las clulas SH-SY5Y, las concentraciones subefectivas seleccionadas
para los txicos fueron las de 1 M de A y 3 nM de AO, cuya
asociacin caus un 40 % de muerte celular; un valor significativamente mayor al ocasionado por los estmulos por s solos. En estas condiciones experimentales, hemos evaluado el
potencial efecto neuroprotector de los compuestos ITH12290
e ITH12291 en comparacin con melatonina y donepezilo. La
melatonina a la concentracin de 10 nM y los compuestos
ITH12290 e ITH12291 a la concentracin de 0,1 M ofrecieron
una proteccin superior al 50% frente a la toxicidad inducida
por la combinacin de Ab + AO; el donepezilo no ofreci proteccin significativa. Siendo as, analizamos los mecanismos
de accin de los compuestos ITH12290 e ITH12291 utilizando
iMedPub Journals
los antagonistas luzindol (antagonista de los receptores de

melatonina), queleritrina (inhibidor de PKC), LY 294002 (inhibidor selectivo de PI3K/AKt), PD 98059 (inhibidor de MEK/ERK)
y mecamilamina (antagonista no selectivo de nAChR). Para la
puesta en marcha del modelo citotxico en cultivos organotpicos, inicialmente realizamos curvas concentracin-respuesta
con A (0,5, 1 y 5 M) y AO (1, 3 y 10 nM). Las concentraciones
seleccionadas fueron las de 0,5 M de A y 1 nM de AO; esta
combinacin ocasion un incremento sinrgico de la toxicidad
celular que alcanz un 200 % respecto a la basal. En conclusin
podemos decir que hemos puesto en marcha modelos in vitro
que combinan la patologa Ab y la hiperfosforilacin de tau en
cultivos organotpicos de hipocampo y en clulas SH-SY5Y con
el objeto de poder remedar de una forma ms fisiopatolgica
la EA y as poder evaluar nuevos compuestos con potencial
teraputico en esta enfermedad.
O.20.Propiedades neuroprotectoras de quercetina y rutina en la lnea transgnica SH-SY5Y
APPswe.
K.L. Jimnez, P. Bermejo-Bescs, S. Martn-Aragn, J. Bened.
Departamento de Farmacologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid.
La doble mutacin sueca (KM670/671NL) de la protena precursora de amiloide (APPswe) est asociada con la aparicin
temprana de un tipo de Alzheimer familiar que se transmite de
forma autosmica dominante. Como resultado de esta mutacin se incrementa la produccin del pptido b-amiloide de 3
a 6 veces, ejerciendo un importante efecto neurotxico. En el
presente estudio se evalu la actividad antioxidante y antiamiloidognica de quercetina y rutina utilizando clulas SH-SY5Y
transfectadas con el gen APPswe como modelo experimental.
Se determinaron diferentes marcadores de estrs oxidativo y
de procesamiento de la APP mediante tcnicas de western blot
y RT-PCR. El tratamiento de las clulas con quercetina o rutina,
a las concentraciones de 25, 50 y 100 hM ejerce un importante efecto antioxidante y antiamiloidognico, sugiriendo una
potencial actividad neuroprotectora en el modelo celular en
estudio.
O.21.Fluoxetina modula la epileptognesis inducida por pentilentetrazol.
Tishwant Kanwarjit, Pablo Bascuana, Hctor Plaza Daz, Rubn
Fernndez de la Rosa Jos Julin Javela, James Kelly, Miguel A.
Pozo, Mercedes Delgado, Luis Garca-Garca.
CAI de Cartografa Cerebral, Instituto Pluridisciplinar. Universidad Complutense de Madrid. Instituto Tefilo Hernando. Departamento de Farmacologa y Teraputica. Facultad de Medicina. Universidad Autnoma de Madrid.
El pentilentetrazol (PTZ) es un bloqueante GABArgico que
administrado repetidamente a dosis subconvulsivas induce la
aparicin de crisis epilpticas espontneas (kindling). Aunque
el desequilibrio Glutamato/GABA es la causa neuroqumica
de la hiperexcitabilidad neuronal responsable de la epilepsia,
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poco se conoce del papel de otros neurotransmisores, en especial de la serotonina. El objetivo de nuestro trabajo consisti en
estudiar el papel de la transmisin serotonrgica en la epileptognesis inducida por PTZ. Para ello, se administr de forma
subcrnica fluoxetina (FLX), frmaco inhibidor del transportador de serotonina. Se evalu la eventual modulacin que dicho frmaco ejerce sobre los efectos comportamentales, electrofisiolgicos, metablicos y neuroqumicos inducidos por la
administracin repetida de PTZ. Se emplearon ratas macho
Sprague-Dawley de 250 g. El paradigma empleado consisti
en la administracin diaria durante 16 das de FLX (10 mg/Kg
i.p.), perodo durante el que se administr PTZ (40 mg/Kg i.p.) 6
veces, evalundose el comportamiento (escala modificada de
Racine) durante 20 minutos despus de la inyeccin del PTZ,
adems de obtener el registro electrofisiolgico en hipocampo. Tres das despus de la ltima administracin, se midi la
actividad metablica cerebral in vivo mediante tomografa por
emisin de positrones (PET), determinndose la captacin de
fluordesoxiglucosa (FDG) en distintas reas cerebrales. Finalizado los estudios in vivo, los animales fueron sacrificados y los cerebros extrados para la realizacin de estudios histolgicos y
autorradiogrficos. En nuestras condiciones experimentales, la
FLX fue capaz de modular la actividad convulsivante inducida
por la administracin PTZ, reduciendo la severidad de las crisis
as como la actividad epileptiforme en el registro. Adems, el
tratamiento con FLX disminuy significativamente la actividad
metablica, medida mediante el SUV (standard uptake value)
en diversas reas cerebrales.La FLX al contrarrestar diversos
efectos inducidos por PTZ, revela un posible papel protector
de la transmisin serotonrgica en la epileptognesis.
Sesin Oral V - Diabetes/obesidad
O.22.Papel de la AMPK en la regulacin de la funcin vascular en ratas sensibles y ratas resistentes al desarrollo de obesidad.
Danila Del Rio2, Concha F. Garca-Prieto1, Marisol FernndezAlfonso2, Beatriz Somoza1, Mariano Ruiz-Gayo1. 1Departamento de Ciencias Farmacuticas y de la Alimentacin. Facultad de
Farmacia Universidad San Pablo-CEU. 2Instituto Pluridisciplinar
y Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid.
La quinasa dependiente de AMP (AMPK) se expresa a nivel arterial tanto en clulas endoteliales como en clulas musculares.
Tiene un papel protector de la funcin vascular a travs de la
estimulacin de la formacin de xido ntrico. El objetivo principal de este trabajo es determinar si la funcin de la AMPK vascular se ve alterada durante el desarrollo de obesidad. Para ello
se han utilizado ratas macho de la cepa Sprague Dawley de12
semanas de edad, que se dividieron en dos grupos alimentados
con una dieta control (n=5) que aporta un 10% de Kcal a partir
de grasa animal y con una dieta grasa (n=10), que aporta un
45% de Kcal a partir de grasa animal (D12451; Research Diets,
EEUU), durante 8 semanas. Tras la primera semana de dieta, las
ratas sometidas a la dieta grasa se subdividieron en dos grupos
en funcin de su peso corporal: ratas sensibles a la obesidad
11
iMedPub Journals
(SO) y ratas resistentes a la obesidad (RO). Antes del sacrificio

se determin la resistencia a insulina mediante la realizacin
de una sobrecarga de glucosa. Los animales RO mostraron un
peso corporal similar al de las ratas control, mientras que el
peso de las ratas SO fue significativamente superior (p<0.001).
El dimetro de los adipocitos fue asimismo significativamente
superior en el grupo SO (p<0.001). Ninguno de los grupos desarroll resistencia a insulina. Los estudios de funcin vascular
se realizaron en la aorta y en el lecho vascular mesentrico perfundido. En la aorta se observ una disminucin en la relajacin a acetilcolina (ACh, 10 -9 -10 -4M) en ambos grupos de ratas
obesas (Emax control= 88.871.53% vs Emax SO = 78.15 2.46%
vs Emax RO = 74.41 1.7, p<0.001), siendo mayor en el grupo RO
en comparacin con el grupo SO (p<0.001), mientras que en el
lecho mesentrico slo se redujo la relajacin a ACh en el grupo RO (Emax control= 73.68 5.47% vs Emx SO = 79.97 4.64%
vs Emax RO = 51.88 11.81, p<0.05). En presencia del inhibidor
de la AMPK (compuesto C, 1 M) la relajacin a ACh (10 -9 -10 4M) disminuy significativamente en todos los grupos, aunque
fue menor en las ratas RO y SO (p<0.001). Estos datos sugieren
que el consumo de dietas grasas favorece la disminucin en
la actividad de AMPK y la aparicin de disfuncin endotelial.
Financiado por SAF-2008-02703; GR921641, FUSP-CEU y SESCAMET. CF es becaria de FUSP-CEU.
O.23.Anakinra, un inhibidor de los receptores
para Interleuquina-1 (IL-1) restaura la funcion endotelial alterada por la Diabetes Mellitus Tipo I experimental.
E. Palacios, S. Vallejo, E. Cercas, F. Alvarez Snchez, C. Peir, C.F.
Snchez Ferrer. Departamento de Farmacologa. Facultad de
Medicina. Universidad Autnoma de Madrid.
Estudios de nuestro laboratorio indican que la interleuquina
1-b (IL-1b; 1, 2,5 y 10 ng/ml) induce disfuncin endotelial en
microvasos mesentricos de rata, que se potencia cuando la
concentracin de D-glucosa extracelular asciende a 11 22
mmol/L. Estos efectos son inhibidos mediante el bloqueo de
los receptores para IL-1 con anakinra (AK, 10 100 g/mL). En
el presente trabajo se ha utilizado este agente para analizar el
posible papel de estas citoquinas pro-inflamatorias en la disfuncin endotelial asociada a la diabetes mellitus. Asimismo, se
ha analizado el papel de la enzima NADPH oxidasa como productora de aniones superxido, utilizando un inhibidor de la
enzima (apocinina) y un barredor de aniones superxido (tempol). Se estudi la relajacin endotelio-dependiente inducida
por acetilcolina (ACh, 0,1 nmol/L a 10 mol/L) en microvasos
aislados de la tercera rama de la arteria mesentrica, obtenidas
de ratas Sprague-Dawley con diabetes inducida dos semanas
antes, mediante la inyeccin i.p. de estreptozotocina (60 mg/
kg). Algunos grupos de animales se trataron con AK durante
los das previos al estudio (AK, 100 mg/kg cada 24 h durante 3
7 das ; AK, 160 mg/kg cada 24 h durante 3 das). En algunos
casos, antes de la curva a ACh, los vasos se preincubaron durante 30 min con 100 mol/L de tempol o 10 mol/L de apo-
12
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cinina. El deterioro de la relajacin inducida por ACh (P<0,003)

a partir de la segunda semana de induccin de la diabetes se
revirti parcialmente (P<0,01) cuando los animales recibieron
previamente 100 mg/kg de AK. Este efecto no se modific por
la duracin del tratamiento (3 7 das antes del estudio). El
tratamiento de los animales diabticos con 160 mg/kg de AK (3
das antes del estudio) restaur totalmente (P<0,001) la funcin
endotelial de los microvasos de animales diabticos, que fue
entonces similar a la de los animales no diabticos. Las relajaciones no dependientes de endotelio, inducidas con nitroprusiato sdico (1 nmol/L to 10 mmol/L), no se alteraron en los
animales diabticos con o sin tratamiento con AK. Cuando los
microvasos mesentricos obtenidos de ratas diabticas (no tratadas con AK) fueron pre-incubados con 100 mmol/L de tempol
o 10 mol/L de apocinina, la disfuncin endotelial se redujo de
forma significativa (P<0,001), lo que sugiere la participacin de
estos mecanismos, posiblemente activados por las citoquinas
pro-inflamatorias circulantes. La disfuncin endotelial asociada
a la diabetes mellitus, inducida experimentalmente en ratas,
parece estar mediada por citoquinas inflamatorias del tipo de
la IL-1b, ya que la funcin endotelial se restaura totalmente en
animales tratados durante tres das con 160 mg/kg de anakinra,
un bloqueante de los receptores para IL-1. Adems, el mecanismo estimulado por estas citoquinas puede incluir la activacin
de la enzima NADPH oxidasa vascular y el consiguiente aumento en la produccin de aniones superxido.
O.24.Effects of omega-3 fatty acids on Kv7.1 channels.
Cristina Moreno, Anna Oliveras, lvaro Macas, Nria Comes,
ngela Prieto, Alicia de la Cruz, Teresa Gonzlez, Antonio
Felipe, Carmen Valenzuela. Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols (CSIC-UAM) Madrid.
Dietary polyunsaturated fatty acids (PUFAs) exhibit antiarrhythmic properties that have been attributed to their ability to modulate ion channels. In this work we analyzed the
effects of EPA and DHA on the current, expression and traffic
of KCNQ1+KCNE1 channels expressed in COS-7 cells by using
patch-clamp, Western blot, and immunocytochemistry techniques. EPA and DHA (20 M) increased IKs (236% vs. 9324,
P<0.05). This effect was not observed when KCNE1 was not
transfected. The increasing effect was accompanied by an acceleration of the deactivation kinetics in the presence of both
EPA and DHA. EPA slowed the activation kinetics, whereas DHA
accelerated this process. Both PUFAs shift the activation curve
of the IKs. When cells were incubated with EPA for 48h, IKs magnitude was smaller than under control conditions. Both fatty
acids decreased the protein expression of KCNQ1 but not that
of KCNE1, in a concentration-dependent manner when cells
were incubated for 48h with either PUFA; which can explain
the chronic effects produced by EPA incubation. This decrease in the KCNQ1 protein expression was not observed when
cells were incubated with the proteasome inhibitor MG132 (2
M), suggesting that these PUFAs activate the degradation of
iMedPub Journals
KCNQ1 via proteasome. Finally, we analyzed possible changes

induced by PUFAs in channel traffic and in its localization in the
membrane. Neither EPA nor DHA modified KCNQ1 traffic. Under
control conditions, KCNQ1 were located in lipid rafts and EPA
and DHA treatment impaired the localization of these channels that can account with the increase in the current. Indeed,
methyl-beta-cyclodextrin partially prevents the increase of IKs
produced by PUFAs. Therefore, our results demonstrate that
both EPA and DHA increase the IKs magnitude, induce KCNQ1
degradation via proteasome and modify the membrane localization of this channel subunit. All these effects can account for
the antiarrhythmic properties observed of these PUFAs.
Granted by SAF2010-14916 (CV), BFU2008-00431 (AF), CSD200800005 (AF) and FIS (RD06/0014/0006, CV).
O.25.La diabetes tipo 1 y la hipoxia moderada inducen diferentes patrones de enfermedad
vascular pulmonar en ratas.
Enrique Moreno, Javier Moral-Sanz, Jos G. Lopez-Lopez, Carmen Menndez, Bianca Barreira, Lucia Escolano, Pilar Fernndez-Segoviano, Eduardo Villamor, ngel Cogolludo, Francisco
Prez-Vizcano y Laura Moreno. Departamento de Farmacologia, Facultad de Medicina, Universidad Complutense de Madrid. Instituto de Investigacin Sanitaria del Hospital Clnico San
Carlos (IdISSC) de Madrid. Ciber de Enfermedades Respiratorias
(CIBERES). Instituto de Fisiologia, Benemrita Universidad Autonoma de Puebla, Mexico. Servicio de Anatomia Patologica,
Hospital Universitario de Getafe, Madrid. Department
of Pediatrics, Maastricht University Medical Center (MUMC+), School

for Oncology and Developmental Biology (GROW), Maastricht,
the Netherlands.
Aunque tanto la diabetes tipo 1 como la tipo 2 se han asociado con una morbilidad sistmica cardiovascular, su relacin
con la enfermedad vascular pulmonar no ha sido analizada en
profundidad. Datos epidemiolgicos recientes sugieren que la
diabetes es un factor de riesgo para el desarrollo de hipertensin pulmonar. El objetivo del presente estudio fue analizar
en un modelo animal la relacin entre la diabetes tipo 1 y enfermedad vascular pulmonar. Se usaron ratas Wistar-Kyoto macho que fueron aleatoriamente divididas en un grupo control
(salino) y en uno diabtico (inyeccin intraperitoneal de 70 mg/
Kg de estreptozotocina) durante 4 semanas y expuestas bien
a normoxia o a una hipoxia normobrica moderada (14%) durante otras 2 semanas. La diabetes unida a la hipoxia provoc
un moderado aumento tanto en la presin pulmonar diastlica
como en la presin arterial pulmonar media as como en el
peso del ventrculo derecho, sin embargo los dos factores por
s solos no modificaron significativamente ninguno de estos
parmetros. Ambos factores aumentaron de manera independiente la muscularizacin de las arterias pulmonares y redujeron la expresin del receptor de la protena morfogentica
de hueso tipo 2 (BMPR2) a nivel pulmonar. La hipoxia, pero no
la diabetes inhibi las corrientes generadas por los canales de
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potasio dependientes de voltaje (Kv); mientras que la diabetes

pero no la hipoxia indujo una disfuncin endotelial y aument
la actividad mieloperoxidasa en pulmn. La hipoxia moderada
y la diabetes inducen un patrn de cambios diferente en los
marcadores de hipertensin pulmonar y slo la combinacin
de ambos factores es capaz de inducir un aumento moderado
de la presin arterial pulmonar. Nuestros resultados fortalecen
an ms la relacin entre diabetes y enfermedad vascular pulmonar.
O.26.Alteracin de la va de la COX-1 en la respuesta a la vasopresina en la aorta de ratas
Zucker obesas.
Sara Benedito, Rosa M Pagn, Medardo Hernndez, Albino
Garca-Sacristn, Dolores Prieto y Ana Cristina Martnez.
Seccin Departamental de Fisiologa Animal. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid.
Las concentraciones plasmticas de vasopresina (AVP) se encuentran incrementadas en los individuos que padecen diabetes mellitus (DM) tipo II. Este hallazgo no es sorprendente,
puesto que la AVP es una hormona vasoactiva pero tambin
presenta un importante carcter osmorregulador y durante la
DM se produce una alteracin de la osmorregulacin. El objetivo del presente trabajo fue determinar la existencia de una relacin entre el comportamiento vascular de la AVP y el desarrollo
de DM, es decir, en un estado prediabtico, representado por
la ratas obesas Zucker. Si conocemos su efecto sobre la funcin
vascular en una fase inicial de la enfermedad podremos hacer
frente con una mayor eficacia a las serias complicaciones cardiovasculares que pueden sufrir los individuos diabticos. Se
aislaron segmentos de aorta torcica de ratas Zucker controles
(RZC) y obesas (RZO) y se montaron en migrafos vasculares
para el registro de la tensin isomtrica. Se realizaron curvas
concentracin-respuesta de AVP. La sensibilidad y la mxima
contraccin de la aorta a la vasopresina fueron significativamente menores en RZO que en RZC. La retirada mecnica del
endotelio no modific la respuesta inducida por AVP en ninguno de los dos grupos estudiados. La inhibicin de la sntesis
de prostaglandinas con indometacina (3 M) y con el inhibidor
selectivo de la COX-2 (NS 398, 3 M) provoc una reduccin
significativa de la respuesta de la AVP en ambos grupos de
ratas. Sin embargo, la administracin del inhibidor selectivo
de la COX-1 (SC 560, 1 M) solamente influy en la respuesta
vasopresinrgica de las RZC. Por tanto, podemos concluir que
el efecto contrctil de la vasopresina en la aorta de RZC se encuentra mediado por prostanoides contrctiles sintetizados a
travs de la COX-1 y la COX-2, mientras que en las RZO la afectacin de la va de la COX-1 produce como consecuencia que
la COX-2 se convierta en la nica enzima de sntesis de prostanoides que interviene en el efecto contrctil de la AVP incluso
en condiciones de pre-diabetesEste estudio ha sido financiado
por los proyectos n SAF2006-09191 y SAF2009-10448 del Ministerio de Ciencia e Innovacin.
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iMedPub Journals
Sesin Oral VI: Cardiovascular

O.27.Papel de la esfingomielinasa neutra en tejidos vasculares sensibles a cambios en la
presin parcial de oxgeno.
Luca Escolano1, Laura Moreno1, Javier Moral1, Enrique Moreno1, Carmen Menendez1, Bianca Barreira1, Eduardo Villamor2,
Francisco Perez-Vizcaino1, Angel Cogolludo1. 1. Departamento
de Farmacologa. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid. 2. Departamento de Pediatra, Grow School,
Universidad de Maastricht (Holanda).
Recientemente hemos descrito que la ceramida generada a
travs de la esfingomielinasa neutra desempea un papel crucial en la vasoconstriccin pulmonar hipxica (Cogolludo et al.,
2009). En el presente estudio hemos analizado su papel en la
sensibilidad de diversos territorios vasculares de pollo a cambios en la presin parcial de oxgeno. Para ello se estudiaron las
respuestas inducidas por normoxia (21% O2) e hipoxia (0% O2)
en los lados artico (aDA) y pulmonar (pDA) del ductus arterioso y en las arterias pulmonares (AP) y corioalantoideas (AC) de
embriones de pollo (20 das de gestacin y 2 das tras eclosin).
La exposicin a normoxia produjo una contraccin de los pDA,
pero no de los aDA. Por el contrario, las AP y AC mostraron una
respuesta vasoconstrictora en condiciones de hipoxia. Las respuestas vasoconstrictoras inducidas por normoxia (en pDA) e
hipoxia (en AP y AC) se inhibieron en presencia de un inhibidor
de la esfingomielinasa neutra (GW-4869 10 mM) y de un anticuerpo frente a ceramida (xxx). En concordancia con estos resultados, los niveles intracelulares de ceramida aumentaron en
pDA expuestos a normoxia y en AP y AC expuestas a hipoxia.
La administracin de esfingomielinasa de Bacillus cereus relaj
los aDA y contrajo los dems vasos, mimetizando los efectos
de la normoxia en pDA y aDA y de la hipoxia en AP y AC. Estudios de expresin por PCR cuantitativa revelaron la presencia
de la esfingomielinasa neutra tipo 2 (gen SMPD3) en todos los
tejidos, sin que existieran diferencias significativas entre ellos.
Nuestros datos indican un papel central de la ceramida generada por la esfingomielinasa neutra en las respuestas vasoconstrictoras observadas en tejidos vasculares sensibles a cambios
en la presin parcial de oxgeno.
Financiado por SAF2010-22066-C02-02.
O.28.La adipoquina visfatina deteriora la relajacin dependiente de endotelio en microvasos humanos y de rata mediante su actividad nicotinamida fosforribosil transferasa.
Vallejo S, Tanya Romacho, Angulo J, Villalobos LA, Leivas A,
Rodrguez-Gallego S, Bermejo E, Carraro R, Snchez-Ferrer CF,
Peir C. Departamento de Farmacologa. Facultad de Medicina.
La visfatina, tambin conocida como PBEF (pre-B cell colonyenhancing factor) o Nampt (nicotinamida fosforibosil transferasa), es una nueva adipoquina secretada principalmente por
el tejido adiposo, cuyos niveles se encuentran elevados en des-
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rdenes metablicos tales como obesidad y diabetes mellitus.

Se ha comprobado que los niveles circulantes de visfatina se
correlacionan positivamente con dao vascular y disfuncin
endotelial. Por ello, en este trabajo se ha investigado la capacidad de la visfatina para deteriorar la reactividad vascular en microvasos mesentricos de ratas Sprague-Dawley machos y en
muestras de epiplon humano procedentes de pacientes sometidos a ciruga abdominal no urgente y no sptica. La preincubacin de los microvasos de rata con visfatina (50 y 100 ng/ml)
no modific la respuesta contrctil a noradrenalina (1pmol/L
a 30 umol/L), analizada mediante un migrafo para vasos de
pequeo calibre. Sin embargo, la visfatina (10 a 100 pmol/ml)
deterior de manera concentracin-dependiente la relajacin
producida por acetilcolina (ACh; 100 pmol/l a 3 mol/l), sin
interferir en la relajacin endotelio-independiente producida
por el nitroprusiato sdico (1 nmol/l a 3 umol/l). En cultivos
de clulas endoteliales procedentes de vena de cordn umbilical humano (HUVEC), la visfatina (10 a 100 ng/ml) estimul de
manera concentracin- dependiente la actividad nicotinamida
adenina dinucletido fosfato (NADPH) oxidasa, que fue determinada por quimioluminiscencia. La relajacin producida por
ACh, deteriorada por la visfatina (50 ng/ml), se recuper con el
inhibidor de la actividad NADPH oxidasa Apocinina (10 mol/l).
Asimismo, el inhibidor de Nampt APO886 (10 nmol/l) previno
la estimulacin de la NADPH oxidasa endotelial y el deterioro
de la relajacin producidos por la visfatina, mientras que un
anticuerpo bloqueante del receptor de insulina no tuvo ningn efecto. En concordancia con estos resultados, el producto
de la actividad Nampt, el mononucletido de nicotinamida
(100 nmol/l a 1 mmol/l) estimul la actividad NADPH oxidasa
endotelial y deterior de manera concentracin-dependiente
la vasodilatacin producida por ACh (10 nmol/l a 1 mmol/l).
En microvasos humanos mesentricos que fueron contrados
previamente con 35 mmol/l KCl, la vasodilatacin endoteliodependiente producida por bradiquinina (1 noml/ a 3 mol/)
se deterior anlogamente por visfatina y fue asimismo restaurada por APO886. En conclusin, nuestros datos indican
que la adipoquina visfatina deteriora la relajacin endoteliodependiente a travs de un mecanismo que implica estimulacin de la actividad NADPH oxidasa, y que est basado en
su actividad enzimtica Nampt. Asimismo, proponemos que
la visfatina puede tener un papel potencial en el desarrollo
de disfuncin endotelial asociada a la obesidad o al sndrome
metablico.
O.29.La fibrilacin auricular potencia los efectos
de la estimulacin b-adrenrgica sobre las
corrientes de K+ auriculares humanas.
Ricardo Caballero, Marta G. de la Fuente, Ricardo Gmez, Irene Amors, Adriana Barana, Pablo Dolz, Lourdes Osuna, Juan
Tamargo, Eva Delpn.
Departamento de Farmacologa. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid.
Dado que la estimulacin b-adrenrgica favorece la gnesis y
el mantenimiento de la fibrilacin auricular crnica (FAC), hemos analizado los efectos producidos por isoproterenol (Iso,
iMedPub Journals
1 nM), un agonista de receptores b-adrenrgicos sobre la corriente transitoria de salida (Ito), los componentes ultrarrpido
(IKur) y lento (IKs) de la corriente rectificadora tarda, y sobre la
corriente con rectificacin interna (IK1). Las corrientes se registraron utilizando la tcnica de patch-clamp en miocitos disociados enzimticamente a partir de muestras de las orejuelas de
las aurculas derecha (AD) e izquierda (AI) de pacientes en ritmo
sinusal (RS) y con FAC sometidos a ciruga cardiaca. En miocitos
de pacientes en RS, el Iso apenas inhiba la Ito (14.73.3% a
+30 mV). La inhibicin de la Ito producida por Iso en miocitos
procedentes de pacientes con FAC aumentaba significativamente alcanzando un 28.72.6% en la AD y un 41.16.4% en
la AI (P<0.05 vs AD). El Iso no modificaba la IKur en los miocitos
procedentes de pacientes en RS y con FAC. En miocitos de pacientes en RS la amplitud de la IKs era muy pequea (25.04.5
pA a +30 mV) y el Iso la aumentaba en un 36.06.5% a +30 mV.
Tal y como habamos demostrado previamente, la amplitud
de la IKs aumentaba marcadamente en miocitos de pacientes
con FAC (59.78.3 pA a +30 mV, P<0.05) y en estos miocitos
el Iso aumentaba la amplitud de la IKs significativamente ms
en los procedentes de la AI (87.86.8%) que en los de la AD
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(52.15.4%) (P<0.05 vs RS). Por ltimo, el Iso inhiba la IK1 en

miocitos de pacientes en RS (18.45.1% a -100 mV), siendo
este efecto significativamente ms marcado en miocitos procedentes de pacientes con FAC (28.13.6%). Experimentos de
PCR cuantitativa en tiempo real demostraron que la expresin
de ARNm del receptor b1-adrenrgico aumentaba significativamente en las muestras procedentes de pacientes con FAC,
siendo este aumento mayor en la AI que en la AD (P<0.05).
Por ltimo, el Iso prolongaba significativamente la duracin de
los potenciales de accin (PA) registrados en los miocitos de
pacientes en RS, mientras que la abreviaba significativamente
en miocitos de pacientes con FAC. En conclusin, la FAC potencia los efectos b1-adrenrgicos sobre las corrientes de K+ que
participan en la repolarizacin por producir un aumento en el
nmero de receptores b1, que es mayor en la AI que en la AD.
Como consecuencia, el estmulo b1 acorta la duracin de los
PA registrados en miocitos de pacientes con FAC, lo cual puede
contribuir a la gnesis y al mantenimiento de la arritmia.
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Farmacologa y Toxicologa es una revista internacional para la
distribucin de informacin cientfica en espaol en relacin con estas
disciplinas, con un nfasis especial en sus frecuentes interrelaciones.
Se considerarn para su publicacin artculos de investigacin originales, revisiones, ensayos, comunicaciones cortas o cartas al editor en
cualquiera de los campos de la Farmacologa y la Toxicologa bsica y
clnica: molecular, celular, animal, ensayos clnicos, teraputica, y
nuevos mtodos y tecnologas en medicina veterinaria y humana.
La distribucin de la informacin podr hacerse bajo la modalidad de
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Libro de Resúmenes: Sesiones Orales Farmadrid XX

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Departamento de Psicobiologa. Facultad de

Fecha: 4 de Julio de 2011

Veinte aos de Farmadrid

Pgina web: http://www.farmadrid.org.es

Antonio G. Garca y Luis Ganda

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Las sedes y organizadores de las sucesivas jornadas se resumen

En conclusin, durante sus 20 aos de vida Farmadrid ha tenido

(+)-Metanfetamina (METH) induce, inmediatamente despus

O.3.Posible participacin del factor de transcripcin Nrf2 en la depresin.

Sprague Dawley macho (17030 g) fueron anestesiadas con

de nuevas estrategias de aprendizaje. Se administr cocana

Under License of Creative Commons Attribution 3.0 License

(CB2) en la periferia, bazo y mdula sea, dado el importante

La mutacin P86L del nuevo canal de calcio (Ca2+) CALHM1

O.8.Concentraciones nanomolares de ouabana

nes nanomolares de OUB durante 24h en clulas HeLa. Tras

experimentales. Tanto la liberacin de NO como la expresin

Under License of Creative Commons Attribution 3.0 License

O.11.Los antagonistas de los canales calcio de

En conclusin, mostramos en este trabajo que la farmacologa

y la prdida neuronal identificada mediante tincin de Nissl en

los metabolizadores intermedios (CYP2C8 *1/*2, *1/*3, *1/*4)

This article is available from: http://www.farmatoxicol.com/

FIGURA 1. Posibles derivados basados en el CGP 37157

con glutamato 1 mM, con una mxima proteccin de 52 % a 30

O.19.Efecto neuroprotector de la melatonina y

los antagonistas luzindol (antagonista de los receptores de

(SO) y ratas resistentes a la obesidad (RO). Antes del sacrificio

cinina. El deterioro de la relajacin inducida por ACh (P<0,003)

Under License of Creative Commons Attribution 3.0 License

KCNQ1 via proteasome. Finally, we analyzed possible changes

of Pediatrics, Maastricht University Medical Center (MUMC+), School

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potasio dependientes de voltaje (Kv); mientras que la diabetes

Sesin Oral VI: Cardiovascular

rdenes metablicos tales como obesidad y diabetes mellitus.

(52.15.4%) (P<0.05 vs RS). Por ltimo, el Iso inhiba la IK1 en

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