Nurul Wiqoyah

Living state: Wet Mount Method

Hanging drop Preparat

Fixed state: pewarnaan Fiksasi:

Melekatkan spesimen pada obyek glass Membunuh kuman tanpa merubah morfologinya Mencegah enzym yang dapat merusak morfologi sel Sebagai intensifier sehingga kuman mudah di cat

Macam fiksasi: Secara phisic: pemanasan Secara chemis: methyl/ethyl alkohol, formalin, asam asetat

 Sifat cat:
Mempunyai : struktur cincin benzena gugus chromofor menentukan warna cat gugus auxochrome menentukan sifat elektrolit dissosiasi/ kemampuan membentuk salt linkages dengan protein jaringan dll.

Macam cat:
Basic dyes: garam-garam cat yang chromofor (ion-ion cat)nya kation dengan anion: Cl, SO4, asetat, oksalat ex. Methylen blue, safranin, crystal violet Acid dyes: khromofornya anion dengan kation: Na+, K+, Ca+, NH4+ Ex. Fuchsin, acid fuchsin, congo red dll

 Preparasi smear:
Smear: lesi, exudate, darah, jaringan atau koloni kuman yang terisolir

Smear

fiksasi

pewarnaan

Types of stain

Simple stains Differential stains Special stains General stains

Pewarnaan sederhana
Menggunakan satu macam zat warna Kuman terwarnai zat warna Ex. Methylen blue Safranin kuman berwarna biru kuman berwarna merah

Pewarnaan negatif
Zat warna Iodin Ink Kuman tidak terwarnai dengan bakcground gelap Kapsul jernih

Pewarnaan differensial

1. Pewarnaan Gram:
Paling umum digunakan Tehnik pengecatan diagnostik

Cat: crystal violet (primary stain) Lugol (mordan) Alkohol Safranin (counter stain) Bakteri Gram positif Bakteri Gram negatif purple merah

primary stain

mordant

decolorization

counterstain

positive negative

Kuman Gram positif

Kuman Gram negatif

2. Pewarnaan tahan asam

ZEIHL-NEELSON METHOD Pewarnaan differensial untuk bakteri tahan asam kelompok kuman ycobacterium Prinsip: tergantung pada ketahanan bakteri terhadap dekolorisasi alkohol asam dinding sel mengandung asam mikolat yang berikatan dengan polisakarida yang mencegah karbol fuchsin dari sel Acid fast cells merah

Non Acid fast

counter stain

Pewarnaan khusus
Pewarnaan kapsul Congo Red METHOD MUIRS METHOD Carbol Fuchsin Ethanol MUIRS Mordant Counterstain: Loefflers methylen blue

ANTHONY METHOD: Crystal violet 20% CUSO4

Pewaranaan spora
Types: Moeller Modified Method Carbol Fuchsin, Ethanol, Loeffers Methylen Blue Vegetative cell biru, spora merah

Pewarnaan Schaeffer fulton Bahan malachite green, safranin Spora kuman hijau Vegetative cell merah Pewarnaan Bartolomev dan Mittwer

Pewarnaan NEISSER
Zat warna Neisser AB Neisser C Melihat granula metakhromatik Granula metakhromatik Vegetatif sel biru gelap kuning coklat

 Pewarnaan flagella Pewarnaan Leiffson Pewarnaan Bailey mordan Asam tannin