CUESTIONARIO No. 10 MULTIPLICACIN BACTERIANA (REQUERIMIENTOS FISICOQUMICOS) 1. Cules son los requerimientos fsicos para el crecimiento microbiano?

Temperatura, pH, dixido de carbono, tensin de oxgeno, presin osmtica y humedad 2. Cules son los requerimientos qumicos para el crecimiento microbiano? Nutrimentos: Carbono, Nitrgeno, Oxgeno, Fsforo, Azufre y Elementos traza Factores de crecimiento orgnico: Aminocidos, Purinas, Pirimidinas, cidos grasos y Vitaminas 3. Describa las fases de la curva de crecimiento bacteriano e indique la velocidad de crecimiento en cada una de las etapas

1) Fase de latencia o de adaptacin al medio: tambin se le conoce como fase logartmica. Puede durar de minutos a varias horas, periodo en el cual aumenta la actividad metablica de la sntesis de protenas (RNA). Velocidad de crecimiento: cero 2) Fase de crecimiento exponencial: el crecimiento o proliferacin bacteriana se lleva a cabo en esta fase, aumenta el metabolismo, el requerimiento de nutrientes, la presencia de oxgeno o dixido de carbono, se incrementa la sensibilidad bacteriana a los antibiticos y a otros antispticos. Velocidad de crecimiento: constante 3) Fase estacionaria: o estacionamiento equilibrado bacteriano, se inicia en forma gradual al disminuir el crecimiento, multiplicacin y tamao bacteriano, esta fase se puede prolongar tanto como los nutrientes estn presentes en el medio de cultivo e iniciarse el uso de los uso de los sustratos por la lisis bacteriana. Velocidad de crecimiento: Cero 4) Fase de muerte o lisis bacteriana. La falta de nutrientes y la presencia de productos txicos del metabolismo bacteriano, ocasionan que estas mueran

con rapidez; pudiendo llevar horas o das la desintegracin total de las bacterias. 4. Indique como podra modificar cada una de las fases de la curva de crecimiento bacteriano 5. Mencione que sustancias son usadas como buffer en los medios de cultivo Carbonatos a base de fosfato unibsicos y bibsicos, carbonatos insolubles, citratos y aminocidos como la glicicina. 6. Mencione que microorganismos pueden desarrollarse mejor en condiciones de acidez Las bacterias acidfilas (amantes del cido) que viven en un ambiente extremadamente cido, algunas crecen en valores de pH = 1,0. Un ejemplo de bacterias acidfilas son las del genero Thinbacillus sp, las cuales se pueden encontrar en el estmago. 7. Qu caractersticas tiene el agar bacteriolgico que permite que sea usado para el crecimiento de bacterias termofilicas? 8. Qu es la plasmolisis y que utilidad tiene? 9. Indique el rango en que un microorganismo se considera un halofilo extremo o halofilo facultativo Halofilo extremo: los que slo crecen cuando la concentracin de NaCl se acerca a la saturacin (15-30% NaCl) Halofilo facultativo: crecen en una solucin de NaCl pero no la necesitan (1-6% NaCl) Halofilo obligado: necesita NaCl para su crecimiento (7.5% NaCl) 10. Qu sustancias son consideradas elementos traza en los medios de cultivo y que utilidad tienen? Determinados elementos inorgnicos que son esenciales para la vida, pero que se requieren en pequeas cantidades, algunos actan como cofactores. Potasio (K+) mantienen la presin de turgencia; cofactor de ciertas enzimas Calcio (Ca+2) cofactor de ciertas enzimas Hierro (Fe+2/Fe+3) cofactor en citocromos y ciertas enzimas Magnesio (Mn+2) cofactor de algunas enzimas Molibdeno (Mo+2) presente en la coenzima de varias enzimas Cobalto (Co+2) presente en la vitamina B12 y coenzimas relacionadas Cobre (Cu+2) presente en varias enzimas Zinc (Zn+2) presente en varias enzimas

CUESTIONARIO No. 11 CONTROL MICROBIOLGICO I (EFECTO DE LOS FACTORES FSICOS) 1. Qu factores influyen en la determinacin del periodo trmico mortal y del punto trmico mortal? Periodo trmico mortal: es el mnimo tiempo requerido para destruir una suspensin de bacterias con una temperatura predeterminada en un medio especifico y esta relacionada con el nmero de microorganismos en suspensin. Punto trmico mortal: es aquella temperatura a un tiempo variable en la cual una suspensin de bacterias es destruida en un medio especifico. 2. Cul es la importancia de determinar el periodo trmico mortal y el punto trmico mortal en las bacterias? 3. Por qu las esporas bacterianas son resistentes a las temperaturas y que relevancia tiene esto? Las esporas son altamente resistentes a condiciones fsicas extremas y permiten que incremente su valor de supervivencia. Las esporas son resistentes por las mltiples capas que protegen el genoma son permeables semejantes a una esponja y lo que le confiere esta resistencia es la formacin de un gel insoluble. 4. Completar el siguiente cuadro, respecto al uso de diversos factores fsicos como control microbiolgico 5. Cmo se clasifican las bacterias de acuerdo a su temperatura ptima de crecimiento y cuales son sus rangos de temperatura? Psicrfilos o crifilos: Crecen mejor en temperaturas bajas. Temperatura: 0 a 15C; la ptima es de 10C Mesfilos: Crecen a temperaturas medias. Temperatura: 15 a 40C, la ptima 37C Termfilas: Crecen a temperaturas relativamente altas. Temperatura: 40 a 70C; la ptima es de 60C Hipertermfilas: Crecen en temperaturas altas. Temperatura: 70 a 120C; la ptima es de 110 6. Esquematice el proceso de exploracin bacteriana Es necesario conocer su forma (observarla al microscopio con diferentes mtodos) Realizar tinciones, as conoceremos si es Gram ( ), BAAR positivo, si se tien con plata o con algn otro mtodo especial. Para conocer sus caractersticas metablicas se hacen cultivos en diferentes condiciones. Se realizan estudios de serotipificacin y fagotipcacin

Se clasifica a la bacteria de acuerdo a sus caractersticas

7. Mencione el mecanismo de accin del congelamiento, como control microbiano En el congelamiento de las bacterias, la formacin de cristales de hielo fuera de la clula causan la salida del agua desde el interior dando como resultado un aumento de la concentracin intercelular de electrolitos y una desnaturalizacin de protenas, se lesiona la membrana celular y se produce una filtracin de compuestos orgnicos intercelulares. 8. Cules son los valores del periodo trmico mortal y punto trmico mortal reportados en la literatura de las bacterias usadas en la prctica? Punto trmico mortal Escherichia coli 5 70C Bacillus subtilis 15 120C Punto trmico mortal E. coli 60C B. subtilis 120C

9. Mencione brevemente el control de calidad para la realizacin del periodo trmico y el punto trmico mortal 10. Explique el mecanismo de accin de las radiaciones UV como control microbiolgico y que factores le afectan Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies. Llevan cargas de energa de entre 3 y 100 e V, suficiente para arrancar electrones de las orbitas de los tomos de las molculas, causando que estas se inocen positivamente, desarticulando las molculas, principalmente los cidos nucleares; causando mutaciones a veces letales dependiendo de la magnitud del dao.

CUESTIONARIO No. 12 CONTROL MICROBIOLGICO II (EFECTO DE LOS FACTORES QUMICOS) 1. Defina el coeficiente fenlico, su utilidad y como se determina Utilidad: Es un parmetro para medir si un producto es ms o menos eficiente para destruir microorganismos (fenol al 5%) Determinacin: consiste en poner dos series de tubos de ensaye diluciones del desinfectante, del que va a probarse su capacidad antimicrobiana. Se ponen cantidades medidas de un cultivo bacteriano de Staphylococcus aureus (u otra bacteria de importancia medica) en las dos series de tubos. Se obtienen muestras de cada tubu a los 2, 10 y 15 segundos. Se determina entre la ms alta dilucin que inhibe el crecimiento bacteriano. Si al final inhibe a la bacteria a una dilucin de 1:100 y el producto a probar lo inhibe a 1:200 quiere decir que es doble de fuerte que el fenol: mayor a uno son ms activos, menor a uno son ms dbiles que el fenol. Un buen desinfectante debe tener ndice fenlico superior a uno. 2. Qu diferencias existen entre los jabones y detergentes, y cul es el ms efectivo como desinfectante? Detergente: son humectantes y emulsivos, disminuyendo la tensin de dos lquidos no miscibles para formar una emulsin. Los detergentes aninicos son bactericidas, pero los catinicos son excelentes bactericidas (entre los cuales estn los cuaternarios de amonio). Los jabones son poco germicidas, disueltos en agua reducen la tensin superficial, emulsionan y dispersan la grasa, su poder ms importante es la limpieza por frote. Por lo tanto los detergentes son mejores desinfectantes. 3. Mencione dos formas farmacuticas cuyo principio activo sea un ion metlico 4. De qu factores fsicos y qumicos depende la accin desinfectante de las diversas sustancias qumicas? Concentracin, pH, tiempo de exposicin, temperatura. 5. Explique porqu es ms efectivo como desinfectante una solucin de etanol al 75% que el etanol absoluto? 6. Mencione las diferencias entre antisptico y desinfectante Antisptico: sustancias qumicas que pueden ser aplicadas para que su accin ejerza sobre los microorganismos sin daar los tejidos. Es una sustancia que puede matar la vida de una bacteria o virus puede aplicar en superficies vivas.

Desinfectante: es la destruccin o eliminacin de microorganismos peligrosos mediante agentes qumicos. Es un agente que destruye o elimina microorganismos en superficies inanimadas. 7. Explique en que consiste el efecto ya se bactericida o bacteriosttico de un agente qumico Bactericida: agentes qumicos que al actuar sobre las bacterias las destruyen, sus acciones son irreversibles. Ejemplos. xido de etileno y -propiolactona agente qumico para esporas. Bacteriosttico: no matan a las bacterias pero inhiben impidiendo su multiplicacin, su acciones son reversibles. 8. Qu factores condicionan el fenmeno de desinfeccin? 9. Por qu las esporas bacterianas son difciles de eliminar con agentes qumicos? 10. Describa el mecanismo de accin de cada uno de los principales grupos de agentes qumicos mencionados en la introduccin de la prctica