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Medios de Cultivo
y
Pruebas Bioquímicas
Medios
de
Cultivo
INTRODUCCIÓN
D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseño el crecimiento
específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de
gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población
microbiana mixta.
También, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para
preparar el medio agar chocolate.
Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para
obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y
otras especies de bacilos Gram negativos.
Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o
rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras.
Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes
Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en
las colonias, y la precipitación de las sales biliares.
Resultados
Microorganismos Colonias
Escherichia coli Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium Incoloras, transparentes
Shigella flexneri Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis Diminutas, incoloras, opacas
Características del medio
Medio preparado: rojo púrpura
Estafilococo 110 Agar
Las ventajas de este medio por sobre los otros mencionados anteriormente,
es que permite, en la misma placa, obtener pruebas de identificación
presuntiva de especie como ser: desarrollo de pigmentos, fermentación de
manitol e hidrólisis de la gelatina.
Resultados
Resultados
Microorganismo Pigmento Fermentación de Hidrólisis de Prueba de la
manitol la gelatina coagulasa
S. aureus + + + +
S. aureus + + + +
S. epidermidis - - + -
Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, es útil para realizar las
pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en especies de estreptococos.
Resultados
Los nutrientes de este caldo son muy apropiados para los hemocultivos, ya
que en esta infusión desarrollan todas las especies de estreptococos excepto
los tiol y piridoxal dependientes.
Los estafilococos que crecen en esta infusión suelen dar mejores reacciones
en la prueba de la coagulasa.
Examinar los tubos para evaluar el crecimiento por turbiedad. Cuando sea
necesario, subcultivar en medios sólidos apropiados y realizar la identificación
bioquímica.
Microorganismos Crecimiento
Neisseria meningitidis Bueno a excelente
Neisseria gonorrhoeae Bueno a excelente
Streptococcus pyogenes Bueno a excelente
Streptococcus pneumoniae Bueno a excelente
왼왼
: uninoculated tube
왼왼
: Neisseria meningitidis
왼왼왼
: Strepcococcus pyogenes
Tetrationato Caldo.
El medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes necesarios para
el desarrollo bacteriano, y carbonato de sodio que neutraliza y absorbe
metabolitos tóxicos.
Microorganismos Crecimiento
Salmonella typhi Escaso
Salmonella typhimurium Bueno-excelente
Salmonella enteritidis Bueno-excelente
Escherichia coli Escaso
Enterotube II
Kligler Hierro Agar
1- Decarboxilación de la lisina:
-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.
-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.
2-Desaminación de la lisina:
Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género
Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp.
La reacción positiva a la ornitina está dada por un color púrpura del medio.
Debido a la fermentación de la glucosa se reduce el pH produciendo una
condición ácida y originando que el indicador de pH púrpura de bromocresol
vire al amarillo.
Las cepas móviles pueden apreciarse en este medio, por la turbidez que
producen alrededor de la punción de siembra, mientras que aquellas cepas
productoras de sulfhídrico se distinguen por la formación de un precipitado
negro de sulfuro de hierro a partir del tiosulfato siempre que el medio se
mantenga a un pH mayor a 7.2.
Resultados
Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas
allá de la línea de siembra.
Urea 20.0
Suspender 3, 87 g del medio
Fosfato monopotásico 9.1
deshidratado por cada 100 ml de
agua destilada. Disolver sin calentar
Fosfato disódico 9.5
y esterilizar por filtración. Distribuir
Extracto de levadura 0.1 en tubos pequeños estériles, entre
0,5 y 2 ml.
Rojo fenol 0.01
Resultados