Prof. Dr.

BBEANU ILEANA CRISTINA

BIOCHIMIE
Manual universitar pentru nvmntul la distan.

CRAIOVA, 2010

CUPRINS

Tema nr. 1 GLUCIDE........................................................................ 1.1 Monoglucide: structur, proprieti, rol metabolic. ....................... 1. 2. Oligoglucide naturale.................................................................... 1.3 Poliglucide: clasificare, structur, rol biochimic............................ Rezumatul temei.................................................................................... Tema nr. 2 LIPIDE ........................................................................... 2.1 Acizi grasi...................................................................................... 2.2 Lipide simple: clasificare, structur, rol biochimic........................ 2.3 Lipide complexe.............................................................................. Rezumatul temei.................................................................................... Tema nr. 3 PROTIDE...................................................................... 3.1. Aminoacizi; Structur general, clasificare, proprieti chimice.. 3.2 Proteine; structur i proprieti....................................................... 3.3 Holoproteine i heteroproteine........................................................ Rezumatul temei.................................................................................... Tema nr. 4 ACIZI NUCLEICI.......................................................... 4.1 Structura bazelor azotate. Structura nucleozidelor si nucleotidelor 4.2 Tipuri de acizi nucleici .................................................................. Rezumatul temei.................................................................................... Tema nr. 5 VITAMINE .................................................................... 5. 1 Vitamine liposolubile ................................................................... 5.2 Vitamine hidrosolubile.................................................................... Rezumatul temei.................................................................................... Tema nr. 6 ENZIME.......................................................................... 6.1 Generaliti despre enzime, structura i specificitatea enzimelor.......................................................................................... 6.2 Mecanisme generale de actiune i clasificarea enzimelor.......................................................................................... Rezumatul temei.................................................................................... TEST RECAPITULATIV................................................................... BIBLIOGRAFIE.................................................................................

5 5 10 11 14 15 15 17 21 25 26 26 31 35 38 39 39 44 47 48 49 52 56 57 57 61 63 64 67

Tema nr. 1 GLUCIDE

Uniti de nvare: Monoglucide: structur, proprieti, rol metabolic. Oligoglucide naturale Poliglucide: clasificare, structur, rol biochimic Obiectivele temei : Cunoaterea aspectelor biochimice privind structura, izomeria, proprietile si rolul metabolic al glucidelor Studiul principalelor oligoglucide naturale, structura si rolul lor biochimic Studiul structurii si al proprietilor fizico-chimice ale poliglucidelor. Utilizarea de metode, tehnici i procedee specifice laboratorului de biochimie pentru determinarea cantitativa si calitativa a glucidelor Timpul alocat temei : 6 ore 1. 2. 3. 4. 5. Bibliografie recomandat : Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova Glodeanu E., 1997 - Biochimie Metabolica, Ed Gorjeanul Marinescu G., Glodeanu E., 1995- Biochimie General, Ed. Universitaria, Craiova Neamu G., Cimpeanu Ghe., Socaciu C., 1993- Biochimie Vegetal, Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti.

1.1. Monoglucide: structur, proprieti, rol metabolic. Clasificarea glucidelor Dup reacia de hidroliz, glucidele se mpart n dou grupe: n oze i ozide. Ozele se mai numesc i monoglucide. Ozidele sunt substane formate din mai multe resturi de monoglucide prin eliminare de ap. Dup structura molecular, ozidele se mpart, de asemenea, n dou grupe: n oligoglucide i n poliglucide. Dup natura compuilor care intr n constituia lor, ozidele se clasific n holozide i heterozide. Holozidele sunt formate numai din resturi de monoglucide (aceleai sau diferite), iar heterozidele conin n molecula lor pe lng resturi de monoglucide i alte resturi de substane neglucidice (alcooli, fenoli, alcaloizi, pigmeni, etc) numite agliconi. Monoglucidele sunt compui cu funciuni mixte ce conin n molecula lor o grupare carbonil i grupri hidroxil alcoolice. Dup natura grupei carbonil se clasific n: aldoze i cetoze. Dup numrul atomilor de carbon din molecul se clasific n: trioze, tetroze, pentoze, hexoze, etc. Cele mai simple glucide sunt aldehida gliceric, ca reprezentant al polihidroxi-aldehidelor i dihidroxi-acetona, ca reprezentant al polihidroxicetonelor.

HC=O | H C OH | CH2OH

CH2 OH | C=O | CH2 OH

aldehida gliceric

dihidroxiacetona

Retinem: monoglucidele prezint mai multe tipuri de izomerie: Izomeri datorit gruprii carbonilice; Acesti izomeri sunt determinai de natura gruprii carbonilice. Se ntlnesc aldoze i cetoze. Izomeri datorit activitii optice i stereoizomeria D i L ; Monoglucidele avnd n molecula lor atomi de carbon asimetrici prezint izomerie optic. Ele pot roti planul luminii polarizate spre dreapta (dextrogire) se noteaz cu (+) sau pot roti planul luminii polarizate spre stnga, sunt levogire i se noteaz cu (-). Din motive de sistematizare, glucidele s-au mprit n dou serii D i L dup configuraia lor nrudit cu Dgliceraldehida sau L gliceraldehida. Se consider c ozele care au configuraia atomului asimetric cel mai ndeprtat de gruparea carbonil, identic cu cea a carbonului asimetric din Dgliceraldehida aparin seriei D, iar cele avnd configuraia ultimului atom de carbon asimetric cel mai ndeprtat de gruparea carbonil din molecula identic cu cea a atomului de carbon asimetric din L gliceraldehid, aparin seriei L. Izomerii optic activi au aceleai proprieti cu excepia sensului de rotire a luminii polarizate. Amesctecul n pri egale, din enentiomerul dextrogir i cel levogir al aceleiai substane se numete amestec racemic i este optic inactiv prin compensaie Izomeri datorit structurii moleculare. Monoglucidele prezint dou structuri: aciclic i ciclic. Forma ciclic ia natere printr-o reacie de semiacetalizare (adiie de alcool la gruparea carbonil) intra-molecular. Semiacetalizarea are loc ntre grupa carbonil i hidroxilul alcoolic din molecula respectiv, care conduce la formarea unui ciclu fr tensiune. Astfel iau natere formele semiacetilice, heterociclice, cu ciclu de 6 atomi ce deriv de la heterociclul piran, numite forme piranozice i formele cu ciclul de 5 atomi ce deriv de la heterociclul furan, numite forme furanozice.
H H HO H H OH C C OH C C C OH OH H O H HO H H HC C C C C O OH H OH OH OH OH H C OH H OH O H C HO H H C C C OH

-D-glucofuranoza
H2 C C HO H H C C C OH H OH OH

H2C

D-glucoza
H2 C C HO O H H C C C OH O H OH OH OH

H2 C

H2 C

-D-glucopiranoza
H2 C C HO H H C C C H OH O OH OH

H2 C

H2 C

H2 C

D-fructofuranoza

D-fructoza

D-fructopiranoza

CH 2OH H OH HO H OH

O
H

H OH

D-glucofuranoza
HO H2C H H OH H

D-glucopiranoza
H H HO OH H HO

O
OH

CH 2 OH OH

O
OH

CH 2OH H

D-fructofuranoza

D-fructopiranoza

Izomeri datorit hidroxilului semiacetalic. Dup poziia hidroxilului semiacetalic din molecula monoglucidelor ciclice, se cunosc doi stereoizomeri. Cnd hidroxilul semiacetalic se gsete n partea dreapt a catenei de carbon (in partea de jos la formulele perspectivice) se obine izomerul , iar cnd hidroxilul semiacetalic se gsete n partea stng (n partea de sus la formulele perspectivice) se obine izomerul . Trecerea izomerilor n izomeri se face prin intermediul formei carbonilice. Aceti izomeri i se numesc anomeri.
CH 2OH H OH HO H OH CH 2OH H OH H OH HO H OH

O
H

O
H

OH H

-D-glucopiranoza
HO H2C H H OH H

-D-glucopiranoza
HO H2C H

O
OH

CH 2 OH OH

O
OH

OH CH 2OH

H OH H

-D-fructofuranoza

-D- fructofuranoza

Epimeria Epimeria const n modificarea configuraiei la un atom de carbon asimetric. Se menioneaz ca structuri epimere: D-riboza i D-arabinoza; Dglucoza, D-galactoza, D-manoza. Observatie Monoglucidele prezint proprietile chimice caracteristice gruprii funcionale carbonil si hidroxil. Reacia de hidrogenare Aldozele i cetozele prin hidrogenare formeaz polialcooli. Prin reducerea fructozei se obine un amestec de doi polioli diastereoizomeri: D-sorbitol i D-manitol.
H2 C H HO H H C C C C OH OH H OH OH OH
+2H

H2 C C HO H H C C C

OH O H OH OH OH
+2H

H2 C HO HO H H C C C C

OH H H OH OH OH

H2 C

H2 C

H2 C

D-sorbitol

D-fructoz 7

D-manitol

Reacia de oxidare. Produii de oxidare ai monoglucidelor depind de natura oxidantului. Folosind oxidani slabi, energici sau prin oxidare protejt rezult: acizi aldonici, acizi zaharici i acizi uronici. Oxidare blnd Oxidanii slabi n mediu alcalin oxideaz gruparea carbonil obinndu-se acizi aldonici sau onici. Cetozele sunt stabile la oxidare.
COOH H HO H H C C C C OH H OH OH OH H HO HO H C OOH C C C C OH H H OH OH HO HO H H C OOH C C C C H H OH OH OH

H2 C

H2 C

H2 C

acidul D-gluconic

acidul D-galactonic

acidul D-manonic

Oxidare energic; Oxidanii energici formeaz acizi zaharici.

COOH H HO H H C C C C OH H OH OH H HO HO H C OOH C C C C OH H H OH HO HO H H C OOH C C C C H H OH OH

C OOH

C OOH

C OOH

Acid D-glucozaharic

Acid galactozaharic

Acid manozaharic

Oxidarea protejat. Dac funcia aldehidic este blocat (prin reacii de esterificare sau condensare a hidroxilului semiacetalic), oxidarea are loc la funcia alcool primar rezultnd acizi uronici.
COOH H H OH HO H OH COOH COOH

O
H

H OH

H H OH HO H

O
OH

H OH

HO H OH H H

O
H

H OH

OH

Acidul glucuronic

Acidul galacturonic

Acidul manuronic

Reacii ale gruprilor hidroxil; In molecula monoglucidelor ciclice se pot afla o grupare OH glicozidic i mai multe grupri OH alcoolice, fiecare dintre aceste grupri avnd proprieti caracteristice. Derivai ai monoglucidelor; ntre derivaii glucidelor se menioneaz dezoxiglucidele, metilglucidele, tioglucidele i aminoglucidele. Se pot considera derivai ai glucidelor i acizii uronici, produii de eterificare. Dezoxiglucide Sunt derivai ai monozaharidelor care au o grup OH nlocuit cu un atom de hidrogen. Dintre acestea mai importante pentru organismele vii sunt: 2Dezoxi--riboza, 6-Dezoxi-Galactoza i 6-Dezoxi-L-Manoza. Dezoxiriboza intr n structura ADN.

H
HO H2C H H OH H

C C C C C

O H OH OH H

H C H H HO HO C C C C

O OH OH H H

O
H

OH H

HO H H HO

C H3

C H3

2-dezoxiriboza

6-dezoxi-L-galactoza TEST DE EVALUARE

6-dezoxi-L-manoza

Ce compui rezult la oxidarea glucidelor ? Rspuns: Glucidele formeaz la oxidare blnd acizi aldonici, la oxidare protejat acizi uronici si la oxidare energic acizi zaharici. Ce tipuri de izomerie prezint glucidele ? Rspuns

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Prin reducerea fructozei se obine: a) D- glucoz b) Acid aldonic c) D-sorbitol i D-manitol d) D- glucoz si D galactoz e) -D-glucopiranoza Rezolvare : c De rezolvat: 2. Ce reprezint urmtoarea formul? a) -D-fructofuranoza b) -D- fructofuranoza c) -D-glucopiranoza d) -D- glucofuranoza e) acid glucuronic

Rezolvare: 9

1.2. Oligoglucide naturale Oligozidele sunt produi de condensare a 2 pn la 8 molecule de oze. ntre resturile de monozaharide este o legtur eteric numit legtura glicozidic. Reinem: n funcie de felul grupei OH glicozidic care particip la reacie se pot forma legturi i -glicozidice. Oligozidele se clasific dup numrul resturilor de oze din molecul: dioligozide (dizaharide), trioligozide, etc. Dup caracterul chimic se mpart n oligozide reductoare i nereductoare, iar dup felul ozelor constituente n oligozaharide omogene i heterogene. Diglucide Diglucidele sunt alctuite din dou resturi de monoglucide identice sau diferite, unite prin legturi de tipul -; -; - i - glicozidice. . Diglucide reductoare Celobioza; 4-[-D-glucopiranozil]-D-glucopiranoza este un diglucid format din dou resturi de -glucopiranoz, legate 1-4 glicozidic. Frecvent se ntlnete sub form policondensat (celuloz).
CH 2OH H H OH HO H OH H OH H OH H H CH 2OH H

O
H H

HO

Maltoza 4-[-D-glucopiranozil]-D-glucopiranoza, este format din dou molecule de D-glucoz unite prin legtura 14 glicozidic. Se gsete n seminele germinale ale cerealelor, ca produi de hidroliz a amidonului.
CH 2OH H H OH HO H OH CH 2OH H H H OH H

O
H

O
H

HO OH

Lactoza; 4-[-D-galactopiranozil]-D-glucopiranoza (zahrul din lapte) este format din resturi de -D-galactopiranoz i de -D-glucopiranoz, legate 1-4 glicozidic. Se gsete n laptele mamiferelor
HOCH 2 CH 2OH HO H H OH H H H OH H

O
H

O
H H OH

HO OH

Diglucide nereductoare Zaharoza Zaharoza 2-[ -D-glucopiranozil]--D-fructofuranoza, este rspndit n multe organe vegetale (fructe, semine, frunze). Este un dizaharid nereductor, constituit dintr-o molecul de -D-glucopiranoz i una de -D-fructofuranoz unite printr-o legtur - 1-2 dicarbonilic.
CH 2OH HO H H OH H

O
H

O
OH HO H2 C H

O
H OH

CH 2 OH H

OH

10

TEST DE EVALUARE 1. Ce grupare funcional din molecul confer caracterul reductor sau nereductor la oligoglucide. Rspuns: Caracterul reductor este dat de gruparea OH glicozidic liber. Dac OH glicozidic este blocat in legtur eteric de tip glicozidic aceast proprietate nu se manifest, molecula are caracter nereductor. 2. Ce compui rezult la hidroliza zaharozei? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care dintre urmtoarele oligoglucide au caracter reductor ? a) maltoza si lactoza, b) maltoza si celobioza c) zaharoza si celobioza d) maltoz i zaharoz e) lactoz i celobioz Rezolvare : a, b, e De rezolvat: 2. Ce substane se formeaz la hidroliza maltozei ? a) 2 molecule de glucoz b) 2 molecule de glucoz c) o molecula de glucoz si o molecul de glucoz d) 2 molecule de fructoz e) o molecula de glucoz si o o molecul de fructoz Rezolvare: 1.3 Poliglucide: clasificare, structur, rol biochimic Poliglucidele sunt compui macromoleculari constituii dintr-un numr mare de resturi de monoglucide legate ntre ele prin legturi glicozidice. Au proprietatea de a hidroliza n mod treptat, formnd produi intermediari cu un grad de polimerizare din ce n ce mai mic. Prin hidroliz total se obin monoglucidele componente. Clasificarea poliglucidelor se face dup structura lor n: homopoliglucide (poliglucide unitare sau omogene) i heteropoliglucide (poliglucide mixte, complexe sau neomogene). Homopoliglucide Amidonul este un poliglucid foarte rspndit n regnul vegetal, reprezentnd o important surs de glucide alimentare pentru om i animale. Este insolubil n ap rece iar n ap cald formeaz o dispersie coloidal care prin rcire se transform n gel (coca).

11

Reinem: Amidonul nu este o substan unitar. Granulele sale sunt formate din dou componente: amiloz i amilopectin care se gsesc uniform repartizate. Aceste componente se deosebesc ntre ele att sub aspect structural ct i prin proprietile fizice i chimice. Amiloza este alctuit dintr-un numr mare de molecule de -D(+) glucoz, unite ntre ele -glicozidic n poziiile 14. Are o structur liniar. Masa molecular variaz n funcie de natura plantei, fiind cuprins ntre 10000 i 100000. Amiloza se dizolv uor n ap rece. Cu apa cald formeaz coca caracteristic amidonului. Cu iodul d o coloraie albastru-nchis care dispare la cald i reapare la rece.

rest terminal

resturi interne

rest terminal

amiloza (fragment macromolecular) Amilopectina reprezint 70-80% din totalul amidonului avnd gradul de polimerizare de 1000-6000 i greutatea molecular 200000-1000000. Are o structur ramificat. Macromolecula amilopectinei prezint caten format din resturi de -D(+) glucoz legate -glicozidic n poziiile 14 i conine i cteva laterale formate din 25-30 resturi de -glucoz legate -glicozidic de catena liniar n poziiile 16. Raportul dintre amiloz i amilopectin n granule de amidon variaz n funcie de plant. Cu iodul amilopectina d o coloraie rou-violet.

rest terminal

resturi interne

rest terminal

amilopectina (fragment macromolecular) Observaie: Cea mai important reacie a amidonului este hidroliza. Hidroliza, acid sau sub influenta enzimelor, se produce treptat, rezult iniial produi macromoleculari nedefinii, dextrinele, apoi maltoza i n final glucoza. Produii intermediari ai hidrolizei se pot pune n eviden prin reacii de culoare. Hidroliza enzimatic a amidonului este realizat de amilaze si amilaze.

12

Celuloza Celuloza este constituentul principal al pereilor celulelor vegetale. Este cea mai rspndit substan organic n natur. Celuloza n general se afl sub form de fibre amestecate cu alte substane ca: lignina, hemicelulozele, materiile pectice, lipide, rini, taninuri, pigmeni, sruri minerale i alte substane ncrustante. Reinem: Celuloza este format prin policondensarea unui numr mare de molecule de -glucoz, gradul de policondensare este diferit n funcie de provenien. n macromolecula celulozei resturile de -glucoz sunt unite glicozidic n poziiile 1 4.
CH 2OH H H OH H OH H H H OH CH 2OH H OH H OH H H H OH H H

O
H H H OH

O
H

O
H

OH H

O
CH 2OH

O
CH 2OH

fragment din molecula de celuloz Masa molecular a celulozei variaz mult cu proveniena sa. Hidroliza enzimatic se produce sub aciunea celulazei, care duce la celobioz i apoi celobiaza o hidrolizeaz pn la -glucoz. Observaie: Cu toate c organismul uman nu posed enzimele necesare hidrolizei, prezena celulozei n hran, n cantiti foarte mici este necesar, avnd un rol important n peristaltismul i tranzitul intestinal. TEST DE EVALUARE 1. Care este cea mai important reacie chimic a amidonului? Rspuns Cea mai important reacie a amidonului este hidroliza. Hidroliza, acid sau sub influenta enzimelor, se produce treptat, rezult iniial produi macromoleculari nedefinii, dextrinele, apoi maltoza i n final glucoza. 2. Ce compus rezult la hidroliza total a amidolului? Rspuns

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Din ce molecule este format amiloza? a) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 14. b) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 14. c) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 16. d) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 16. e) -glucoz i -glucoz unite glicozidic n poziiile 11. Rezolvare : b

13

De rezolvat: 2. Din ce molecule este format celuloza? a) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 14. b) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 14. c) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 16. d) -glucoz unite -glicozidic n poziiile 16. e) -glucoz i -glucoz unite glicozidic n poziiile 11. Rezolvare : Rezumatul temei Glucidele sunt biomolecule, universal rspndite n lumea vie. Cu excepia unor derivai azotai glucidele sunt substane ternare formate din carbon, hidrogen i oxigen. Dup reacia de hidroliz, glucidele se mpart n dou grupe: oze i ozide. Ozele se mai numesc i monoglucide iar ozidele sunt substane formate din mai multe molecule de monoglucide prin eliminare de ap. Dup structura molecular, ozidele se mpart n dou grupe: oligoglucide i poliglucide. Oligoglucidele sunt formate dintr-un numr mic de resturi de monoglucide (2-8) iar poliglucidele sunt formate dintr-un numr mare de resturi de monoglucide. Ozele sau monoglucidele sunt compui cu funciuni mixte care conin n molecula lor o grupare carbonil i grupri hidroxil alcoolice. Monoglucidele prezint mai multe tipuri de izomerie. Se prezint n form ciclic sau aciclic. Monoglucidele coninnd n molecul grupri carbonil i hidroxil (alcoolic sau glicozidic) vor prezenta proprietile chimice caracteristice acestor grupri funcionale. Dintre reaciile specifice gruprii carbonil amintim: reaciile de hidrogenare, oxidare, condensare. Gruparea carbonil din oze prezint i o serie de reacii prin care se poate identifica i doza. Oligozidele sunt produi de condensare a 2 pn la 8 molecule de oze. n funcie de felul grupei OH glicozidic care particip la reacie se pot forma legturi i -glicozidice. Dintre diglucidele reductoare cele mai raspndite amintim celobioza, maltoza i lactoza iar dintre cele nereductoare zaharoza. Poliglucidele sunt compui macromoleculari constituii dintr-un numr mare de resturi de monoglucide legate ntre ele prin legturi glicozidice. Clasificarea poliglucidelor se face dup structura lor n: homopoliglucide i heteropoliglucide. Amidonul este un poliglucid foarte rspndit n regnul vegetal si din punct de vedere structural nu este o substan unitar. Granulele sale sunt formate din dou componente: amiloz i amilopectin. Aceste componente se deosebesc ntre ele att sub aspect structural ct i prin proprietile fizice i chimice. Raportul dintre amiloz i amilopectin n granule de amidon variaz n funcie de plant. Celuloza este format prin policondensarea unui numr mare de molecule de -glucoz, gradul de policondensare fiind diferit n funcie de provenien. n macromolecula celulozei resturile de -glucoz sunt unite glicozidic n poziiile 1 4.

14

Tema nr. 2 LIPIDE

Uniti de nvare : Acizi grasi. Lipide simple: clasificare, structur, rol biochimic. Lipide complexe: clasificare, structur, rol biochimic. Obiectivele temei : Cunoaterea aspectelor biochimice privind clasificarea, structura i proprietile lipidelor. Inelegerea conceptelor i analizarea corelatiei structur, proprieti, rol biochimic. Cunoaterea principalilor reprezentani ai lipidelor simple si ai lipidelor complexe. Dezbaterea metodelor si procedeelor de caracterizare calitativ i cantitativ a lipidelor Timpul alocat temei : 6 ore Bibliografie recomandat : 1. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 2. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 3. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 4. Cristea Popa E., Popescu A., Truia E., Dinu V., 1991, Tratat de biochimie medical, Ed Medical, Bucuresti, 5. Grban Z., 1999, Biochimie Tratat comprehensiv, vol I, ediia 2, Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti 6. Leninger A.L., 1987, Biochimie, vol. I, Ed. Tehnic, Bucureti

1.1. Acizi grai Lipidele reprezint o clas de biomolecule organice, larg rspndite n natur att n regnul vegetal ct i n cel animal. Ele se caracterizeaz prin heterogenitatea structurii i proprietilor. Comun tuturor lipidelor le este insolubilitatea n ap i solubilitatea n solveni organici. Clasificarea general a lipidelor Natura chimic a lipidelor este foarte variat. Lipidele se pot clasifica dup mai multe criterii. Astfel dup rolul lor biologic se pot grupa n lipide de rezerv i lipide de constituie. n funcie de compoziia chimic, lipidele se clasific n trei grupe: lipide simple, lipide complexe, lipide derivate. Acizi grai. Acizii organici care intr n constituia lipidelor se numesc n mod curent acizi grai. Reinem: Majoritatea acizilor grai din lipide sunt acizi monocarboxilici, cu caten normal, cu numr par de atomi de carbon n molecul, saturai sau nesaturai. Proprietile lipidelor sunt determinate de felul, lungimea i configuraia catenei de carbon a acizilor grai, de felul i numrul legturilor interatomice, de felul i numrul gruprilor funcionale. Majoritatea acizilor grai din organismele vegetale se gsesc sub form de esteri i sruri. Puini 15

acizi grai se gsesc n celule i esuturi n stare liber, fiind disociai la pHul optim al mediului. n plantele superioare predomin cantitativ acizii lauric, miristic, palmitic i stearic. n uleiurile vegetale acizii grai saturai se gsesc n cantitate mult mai redus, dect acizii grai nesaturai. Principalii acizi grai saturai liniari, aciclici Denumirea acidului gras Structura Obinuit sistematic Butiric n-butanoic CH 3 (CH 2 ) 2 COOH Caproic n-hexanoic CH 3 (CH 2 ) 4 COOH Caprilic n-octanoic CH 3 (CH 2 ) 6 COOH Caprinic n-decanoic CH 3 (CH 2 ) 8 COOH Lauric n-duodecanoic CH 3 (CH 2 )10 COOH Miristic n-tetradecanoic CH 3 (CH 2 )12 COOH Palmitic n-hexadecanoic CH 3 (CH 2 )14 COOH Stearic n-octodecanoic CH 3 (CH 2 )16 COOH Arachic n-eicosanoic CH 3 (CH 2 )18 COOH

Acizii grai nesaturai sunt acizi monocarboxilici, cu caten liniar care conin n molecula lor una sau mai multe duble legturi. Difer ntre ei prin lungimea lanului i prin numrul i poziia dublelor legturi. Prezena dublei legturi se noteaz cu litera greceasc care se aeaz dup atomul de carbon de la care ncepe dubla legtur. Observaie: Acizii grai nesaturai cu una sau mai multe duble legturi ndeplinesc un rol foarte important n organismul animal. Cei mai importani sunt acidul linoleic, linolenic arahidonic. In organismul uman i animal aceti acizi care au un rol foarte important nu pot fi sintetizai n cantitile necesare i se impune un aport alimetar, numindu-se acizi grai eseniali. Acizii linoleic i linolenic nu sunt sintetizai n organismul mamiferelor, ci numai n plante. Carena n acizii grai eseniali conduce la unele tulburri cum sunt oprirea creterii, perturbarea proceselor de circulaie, determin o fragilitate a capilarelor ct i alte dereglri.

TEST DE EVALUARE 1. Ce sunt acizii grai? Rspuns Acizii grai din lipide sunt acizi monocarboxilici, cu caten normal, cu numr par de atomi de carbon n molecul, saturai sau nesaturai. 2. Ce sunt acizii grai eseniali? Rspuns

16

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care sunt cei mai importani acizi grai eseniali? a) acid stearic si acid oleic b) acid stearic si acid palmitic c) acid oleic si acid palmitic d) acid stearic, acid lauric si acid palmitic e) acid linoleic si acid linolenic Rezolvare : e De rezolvat: 2. In structura acidului stearic intlnim: a) 20 atomi de carbon in molecul si o dubl legtur b) 16 atomi de carbon in molecul c) 18 atomi de carbon in molecul d) 18 atomi de carbon in molecul si o dubl legtur e) 16 atomi de carbon in molecul si dou duble legturi Rezolvare:

2.2 Lipide simple: clasificare, structur, rol biochimic. Clasificare Lipidele simple se clasific n funcie de natura alcoolului din structura lor n: gliceride, steride, ceride, etolide. Gliceride (Acilgliceroli) sau grsimi neutre Sunt lipidele cele mai abundente din natur. Sunt componente ale grsimilor vegetale de rezerv din esuturi. Sunt esteri ai glicerolului (propantriol) cu acizi grai, acilgliceroli. Dup numrul gruprilor alcoolice din glicerol esterificate se mpart n monoacilgliceroli (monogliceride), diacilgliceroli (digliceride) i triacilgliceroli (trigliceride). Mono i digliceridele nu apar ns dect n cantitate foarte mic.
O CH2 CH CH2 O OH OH C R
R O C O CH2 C CH2 H OH OH

-monoacilglicerol

-monoacilglicerol
O

O O R C O CH C CH2 O H OH C R
CH2 HO C CH2 H O O

C O C

-diacilglicerol

'-diacilglicerol

17

CH2 CH

O O

CO CO CO

R1 R2 R3

CH2 O

Triglicerid mixt

Grsimile de rezerv sunt alctuite aproape exclusiv din trigliceride. Mono i digliceridele sunt intermediari n cursul sintezei i degradrii trigliceridelor i se gsesc n esuturi n cantiti mici. Cele mai rspndite sunt trigliceridele mixte. Trigliceridele mixte pot exista sub numeroase forme de izomerie de poziie. Observaie: n uleiurile vegetale predomin gliceridele cu un coninut ridicat n acizi grai nesaturai. Proprietile fizice i chimice ale gliceridelor sunt determinate n mare msur de natura acizilor grai din compoziie. Starea de agregare a triacilglicerolilor depinde de compoziia n acizi grai: cele bogate n acizi saturai inferiori sau acizi nesaturai sunt lichide; cele cu un coninut ridicat n acizi saturai superiori sunt solide. Grsimile naturale sunt amestecuri de diveri triacilgliceroli, ele nu au un punct de fierbere sau de topire net. Gliceridele vegetale sunt solubile n eter de petrol, eter, cloroform, sulfur de carbon i ali solveni organici. Cea mai important reacie chimic a gliceridelor este hidroliza. nclzite cu ap sub presiune trigliceridele sunt hidrolizate cu formare de glicerol i acizi grai. Hidroliza are loc n etape, se formeaz mai nti o diglicerid, apoi o monoglicerid i n final glicerol liber. Reacia este catalizat de ctre acizi minerali tari, ca HCl, H2SO4 i n special de acizi sulfonici.
CH2 O CH O CO CO CO R1 R2 R3

CH2 OH
+ 3 H2 O

R1COOH
+

CH

OH

R2COOH

R3COOH CH2 OH Hidroliza gliceridelor are loc i sub aciunea enzimelor specifice, numite lipaze. Reinem : Dac reacia de hidroliz are loc n mediu bazic, cu hidroxizi alcalini Ca(OH)2, Mg(OH)2 sau cu oxizi ai metalelor grele se formeaz glicerol i sruri ale acizilor grai i se numete reacie de saponificare. Srurile acizilor grai sunt numite spunuri. Pentru caracterizarea calitativ i cantitativ a uleiurilor i grsimilor se utilizeaz indicele de saponificare care reprezint numrul de mg KOH necesar saponificrii unei cantiti de 1g ulei sau grsime. Gliceridele care conin n molecul acizi grai nesaturai se pot halogena. Pentru caracterizarea unei gliceride se folosete i "indicele de iod" care reprezint cantitatea de iod adiionat de 100g ulei sau grsime, i care ne d indicaii privind gradul de nesaturare al acizilor grai din constituia gliceridei. Gliceridele care conin n molecul acizi grai nesaturai adiioneaz i hidrogen n prezen de catalizatori. n urma hidrogenrii gliceridele nesaturate de consisten uleuioas sau grsimile uor fuzibile sunt transformate n grsimi consistente.

CH2 O

18

n contact cu oxigenul i vaporii de ap din atmosfer, gliceridele naturale sufer o serie de transformri nedorite, complexe care duc la rncezirea acestora.

Steride Steridele sunt esteri ai sterolilor cu acizii grai. Alcoolii din steride sunt alcooli policiclici numii steroli. Ei sunt esterificai de obicei cu acizii palmitic, stearic sau oleic. Sterolii sunt monoalcooli secundari care deriv de la hidrocarbura numit steran.
12 11 1 2 3 9 10 5

C
8 7

13 14

D
15

17 16

A
4

B
6

Steran Sterolii difer prin gruprile funcionale i catenele laterale grefate pe nucleul steranic, prin prezena unor duble legturi i prin existena unui numr foarte mare de stereoizomeri. n aceeai surs vegetal se gsesc de obicei mai muli fitosteroli. Ei se gsesc n plante att n stare liber, ct i sub form de fitosteride, glicozide cardiotonice, saponine, alcaloizi steroidici, etc. Conin n molecul 29 atomi de carbon i prezint importan biologic important n biosinteza hormonilor steroidici, a vitaminelor D, acizilor colici, etc.

C2H5
HO HO

C2H5

Sitosterol

Stigmasterol

HO

Colesterol

Retinem Dintre zoosteroli cel mai important din punct de vedere biologic este colesterolul. Predomin n organismele animale dar a fost identificat i n plante. El are un rol structural, este prezent n majoritatea membranelor celulare i n acelai timp este precursorul tuturor celorlali compui steroidici. Ceride Ceridele sunt esteri naturali ai acizilor grai cu monoalcooli superiori. n regnul vegetal se gsesc sub form de cutin pe suprafaa fructelor, frunzelor, florilor, constituind un nveli protector mpotriva evaporrii apei, a cldurii i luminii excesive i ca un strat protector mecanic. ndeprtarea cerurilor de pe suprafaa fructelor la recoltare micoreaz foarte mult rezistena lor la pstrare. Cerurile animale se gsesc att la mamifere ct i la insecte i psri. Ceara de albine este format din ceroat de ceril i palmitatul de miricil (33%). Formula general a unei ceride este
19

O CH3 (CH2)n C O CH2 (CH2)n1 CH3

Etolide Etolidele sunt esteri intermoleculari ai unor hidroxiacizi superiori. Se gsesc numai n regnul vegetal, predominant n cerurile unor conifere. n structura unei etolide se gsesc dou resturi de molecule ale aceluiai hidroxiacid, dar la formarea etolidelor particip i 3-5 molecule de hidroxiacid.
O O C CH2 (CH2 )n C CH2 O O

(CH2 )n

TEST DE EVALUARE 1. Ce rezult la hidroliza bazic a unei gliceride (triacilglicerol) ? Rspuns In urma hidrolizei bazice a unei gliceride se formeaz glicerin si sruri ale acizilor grai (spunuri). 2. Care este cel mai rspndit si cel mai important sterol din organismul animalelor superioare ? Rspuns

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care este starea de agregare a triacilglicerolilor in funcie de compoziia in acizi grai? a) cele in care predomin acizi saturati sunt solide b) cele in care predomin acizi saturati sunt lichide c) cele in care predomin acizi nesaturati sunt lichide d) cele in care predomin acizi nesaturati sunt solide e) cele in care predomin acizi saturati sunt att lichide ct si solide Rezolvare : a, c De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele reacii sunt date de trigliceride? a) aditie de hidrogen daca in molecul exist resturi de acizi grai nesaturai b) reacie de hidroliz (bazic, acid sau enzimatic) c) aditie de hidrogen daca in molecul exist resturi de acizi grai saturai d) reacie de oxidare e) aditie de halogen daca in molecul exist resturi de acizi grai saturai Rezolvare :

20

2.3 Lipide complexe

Lipidele complexe sunt esteri ai acizilor grai la constituia crora mai particip pe lng alcooli fr azot i aminoalcooli, acidul fosforic, serina, un rest de acid sulfuric, iar n unele cazuri inozitolul, una sau mai multe monolucide. Acidul fosforic fiind un component al marii majoriti a lipidelor vegetale complexe ele sunt denumite i fosfatide sau fosfolipide. Proporia de lipide complexe n regnul vegetal este relativ mic, predominnd n regnul animal. Lipidele complexe se gsesc n constituia membranelor cloroplastelor, n mitocondrii, reticul endoplasmatic, n membrane celulare. Ele nu se depun sub form de lipide de rezerv. n ap formeaz emulsii i sunt solubile n aceton, deosebindu-se n acest fel de lipidele simple. n organismele vii lipidele complexe mai apar asociate cu proteinele formnd lipoprotein, substane cu rol fiziologic important. n funcie de natura alcoolului din structura lor se clasific n: glicerofosfolipide i sfingolipide. Lipidele complexe care conin n molecul un rest de acid fosforic au fost denumite i fosfatide sau fosfolipide iar cele care nu conin acid fosforic n molecul au fost denumite glicolipide.

Fosfatide sau fosfolipide Majoritatea fosfatidelor vegetale sunt esteri ai glicerolului cu acizi grai i cu acid fosforic; la rndul su acidul fosforic este esterificat cu un aminoalcool, un aminoacid sau un inozitol. Reinem: Fosfatidele corespund deci urmtoarelor formule generale, care se deosebesc prin poziia acidului fosforic n molecul.
CH2OCOR
CH2OCOR

CHOCOR" CH2OP
OH OR" O

CHOP

OH OR" O

CH2OCOR
Fosfatida

Fosfatida

n care R i R reprezint resturi de acizi grai saturai sau nesaturai, iar R restul de aminoalcool, aminoacid sau inozitol. Toate fosfatidele vegetale sunt optic active. Principalii aminoalcooli care intr n compoziia fosfatidelor vegetale sunt: colamina, colina, sfingozina i fitosfingozina.

Glicerofosfolipide Glicerofosfolipidele la hidroliz formeaz glicerin, dou molecule de acid gras, acid fosforic, aminoalcool sau inozitol. n cadrul glicerofosfolipidelor se include: acizii fosfatidici, etanolaminfosfatide (cefaline), colinfosfatide (lecitine), serinfosfatide, inozitolfosfatide, acetalfosfatide (plasmologenii) i fosfatidiglicerolii. Glicerofosfolipidele sunt cele mai rspndite lipide complexe, se gsesc n plante n cantitate mare n cloroplaste i semine.

21

Acizii fosfatidici Acizii fosfatidici sunt cele mai simple lipide complexe i sunt substana de baz a glicerofosfolipidelor. Acizii fosfatidici conin n molecula lor glicerin esterificat cu dou molecule de acizi grai, cea de-a treia grup hidroxil a glicerinei fiind esterificat cu acid fosforic.
CH2 O CO R1 | R2 OC O CH O | CH2 O P OH | OH Acid fosfatidic

Observaie: S-a dovedit c acizii fosfatidici reprezint produi intermediari n sinteza unor fosfatide mai complexe, cum sunt lecitinele, sau produi de hidroliz enzimatic ai fosfatidelor complexe. n urma hidrolizei acizilor fosfatidici s-au gsit urmtorii acizi grai: lauric, miristic, palmitic, stearic, oleic, linolic i linolenic. Acizii fosfatidici naturali fac parte din seria L. Colinfosfatidele (lecitinele) Colinfosfatidele (lecitinele) sunt cele mai rspndite lipide complexe. n plante se gsesc n embrionii seminelor de leguminoase i de cereale, n proporie de 2%. Reinem: Sunt formate dintr-un rest de acid fosfatidic legat de aminoalcoolul colin [OH CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 3 ]OH Lecitinele sunt substane cu caracter bipolar
CH2 O CO R | R - OC O CH O | CH2 O P - O CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 3 ] OH | OH

Fosfatil colina
CH2 O CO R | R - OC O CH O | CH2 O P - O CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 3 | O

Structura amfionic a fosfatidil colinei Lecitinele se prezint ca o mas ceroas, unsuroas, de culoare glbuie sau, n stare pur, brun. Lecitinele perfect pure sunt cristalizabile. n solveni organici, cu excepia acetonei, lecitinele sunt solubile. Ele se solv de asemenea n grsimi. Cu ap puin se gonfleaz, cu ap mult dau emulsii stabile. 22

Observaie: Comportarea fa de ap i grsimi se explic prin caracterul hidrofil al componentului fosforic i caracterul hidrofob al restului moleculei. Lizolecitine - Prin lizolecitine se neleg lecitine, cu puternic aciune hemolitic, care se obin prin hidroliza enzimatic parial a lecitinelor, cauzat de lecitinaza A.
CH2OCOR | CHOH | O CH2OP OCH2CH2N(CH3) 3 || O Lizolecitin

Etanolaminfosfatide (Cefaline) Etanolaminfosfatidele sunt esteri ai acizilor fosfatidici cu restul de acid fosforic esterificat cu colamin HO-CH2CH2NH2 (etanolamin). Ele nsoesc lecitinele n organismele vegetale i animale.
CH2 O CO R | R - OC O C - H O | CH2 O P - O CH 2 CH 2 NH 2 | OH Etanolaminfosfatida

CH2 O CO R | R - OC O CH O | CH2 O P - O CH 2 CH 2 NH 3+ | O Structura amfiionica a cefalinei S-au identificat i n germenii de gru, semine de floarea soarelui, in, lupin, soia. ntre proprietile lor se remarc caracterul amfiionic al acestora molecula devenind bipolar. Cefalinele prezint proprieti fizicochimice asemntoare lecitinelor iar rolul lor n organism este asemntor lecitinelor.

Serinfosfatide Serinfosfatide sunt compui cu molecula format din acid fosfatidic n care restul de acid fosforic este esterificat cu serin. Similar cefalinelor i lecitinelor, esterificarea se poate face n poziia sau .

23

CH2 O CO R | R - OC O CH O | CH2 O P O CH2 CH COOH | | O + NH3

Serinofosfatida Serinfosfatidele nsoesc celelalte fosfatide, de exemplu cele din arachide i din soia. Proprietile fizico-chimice sunt similare cu ale celorlalte lipide complexe.

Inozitolfosfatide Inozitolfosfatidele sunt lipide complexe n structura crora se afl resturi de acid fosfatidic i inozitol. Aceste lipide complexe se afl n cantiti mici n diferite esuturi, n cantiti mai mari gsindu-se n lipide din creier i muchi. Fosfatide vegetale coninnd inozitol au fost gsite n fasolea soia, germenii de gru, arahide, pere, mazre, fasole, boabe de porumb, bacterii acidorezistente. Sfingolipidele Sfingolipidele sunt lipide complexe n constituia crora intr un aminoalcool, un acid gras, acid fosforic, baz azotat sau un glucid. Aminoalcoolii pot fi sfingozina sau derivai ai acestuia: sfinganina (dihidrosfingozina) sau fitosfingozina (4hidroxisfingozina). n sfingolipide acidul gras este legat amidic la grupa NH2- a sfingozinei.

TEST DE EVALUARE 1. Ce sunt din punct de vedere structural acizii fosfatidici? Rspuns: Acizii fosfatidici conin n molecula lor glicerin esterificat cu dou molecule de acizi grai, cea de-a treia grup hidroxil a glicerinei fiind esterificat cu acid fosforic. 2. Care este aminoalcoolul din structura unei lecitine? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Prin ce tip de legtur este legat acidul gras in structura unei sfingozine? a) legtur eteric de tip alcoolic b legtur eteric de tip glicozidic c) legtur amidic d) legtur esteric e) legtur de hidrogen Rezolvare: c
24

De rezolvat: 2. Care este aminoalcoolul din structura unei cefaline? a) colin b) etanolamin c) serin d) inozitol e) sfingozin Rezolvare:

Rezumatul temei
Lipidele reprezint o clas de biomolecule larg rspndite n natur caracterizate prin heterogenitatea structurii i proprietilor. Sunt insolubile n ap i solubile n solveni organici. n plante, lipidele se gsesc att libere, predominat ca substane de rezerv ct i asociate cu proteinele i glucidele sub forma unor compui numii lipoproteine respectiv lipoglucide, care se gsesc n cantitate mai mare n constitueni celulari cu activitate fiziologic intens. Lipidele se pot clasifica dup mai multe criterii. Dup rolul lor biologic se pot grupa n lipide de rezerv i lipide de constituie. n funcie de compoziia chimic, lipidele se clasific n: lipide simple, lipide complexe, lipide derivate. La rndul lor lipidele simple se clasific n funcie de natura alcoolului din structura lor n: gliceride, steride, ceride, etolide. Lipidele complexe se clasific n: glicerofosfolipide i sfingolipide. Acizii grai sunt acizi monocarboxilici, cu caten normal, cu numr par de atomi de carbon n molecul, saturai sau nesaturai. Majoritatea acizilor grai din organismele vegetale se gsesc sub form de esteri i sruri. Acizii grai nesaturai ndeplinesc un rol foarte important n organismul animal, numindu-se acizi grai eseniali (nu pot fi sintetizai de organismul animal). Cei mai importani sunt acidul linoleic, linolenic arahidonic. Gliceridele sunt esteri ai glicerolului cu acizi grai, steridele esteri ai sterolilor cu acizii grai, ceridele esteri naturali ai acizilor grai cu monoalcooli superiori iar etolidele sunt esteri intermoleculari ai unor hidroxiacizi superiori. Lipidele complexe sunt esteri ai acizilor grai la constituia crora mai particip pe lng alcooli fr azot i aminoalcooli, acidul fosforic, serina, un rest de acid sulfuric, iar n unele cazuri inozitolul, una sau mai multe monoglucide. Avnd acid fosforic in molecul lipidele vegetale complexe sunt denumite i fosfatide sau fosfolipide. n funcie de natura alcoolului din structura lor se clasific n: glicerofosfolipide i sfingolipide. Acizii fosfatidici sunt cele mai simple lipide complexe i sunt substana de baz a glicerofosfolipidelor. Acizii fosfatidici conin n molecula lor glicerin esterificat cu dou molecule de acizi grai si cu un rest de acid fosforic. Cele mai rspndite lipide complexe sunt lecitinele i cefalinele. Ele sunt formate dintr-un rest de acid fosfatidic legat de aminoalcoolul colin respectiv etanolamin.

25

Tema nr. 3 PROTIDE

Uniti de nvare : Aminoacizi; Structur general, clasificare, proprieti chimice. Peptide. Proteine; structur i proprieti Holoproteine i heteroproteine. Obiectivele temei : Cunoaterea aspectelor biochimice privind structura proteinelor Inelegerea conceptelor i analizarea corelatiei structur, proprieti, rol biochimic. Dezbaterea metodelor si procedeelor de separare, identificare i dozare a proteinelor Timpul alocat temei : 6 ore Bibliografie recomandat : 1. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 2. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 3. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 5. Dinu V., Trutia E., Cristea Popa E., Popescu A., 2002, Biochimie medical, Mic tratat, Ed Medical, Bucuresti, 6. Garban Z. 1981, Tratat elementar de biochimie, Ed Mirton Timisoara

3.1. Aminoacizi; Structur general, clasificare, proprieti chimice. Consideraii generale i clasificare Aminoacizii sunt unitile constituente ale proteinelor. Dei se cunoate un numr mare de aminoacizi naturali, exist doar 20 aminoacizi prezeni n toate organismele vii, de la cele mai simple pn la om. Alturi de aceti 20 aminoacizi fundamentali, n proteine se mai ntlnesc ali civa, care rezult de fapt prin modificri chimice ale acestora dup ncorporarea n lanurile polipeptidice. Aminoacizii naturali au formula : R
CH NH2

COOH

Toi aminoacizii care intr n structura proteinelor sunt aminoacizi, cu excepia prolinei care are o grupare aminic secundar. Diversitatea aminoacizilor naturali este dat de natura radicalului R. Clasificarea aminoacizilor naturali se face dup mai multe criterii: Dup criteriul biologic aminoacizii naturali se clasific n: a) aminoacizi proteici i neproteici ; b) aminoacizi eseniali i neeseniali 26

Observaie: Nu toi aminoacizii proteici sunt sintetizai de ctre organismul animal. Dintre aminoacizii proteici, 8 aminoacizi sunt absolut necesari organismului animal i uman, dar ei nu pot fi sintetizai de aceste organisme, sunt sintetizate doar n organismele vegetale. Aminoacizii eseniali sunt: valina, leucina, izoleucina, lisina, metionina, treonina, fenilalanina i triptofanul. Reinem: Dup structura chimic aminoacizii pot fi clasificai astfel: Aminoacizi monoaminomonocarboxilici alifatici
CH2 NH2 COOH

CH3

CH NH2

COOH

Acid aminoacetic Glicocol (glicina) (Gly)

CH3 CH CH3 CH NH2 COOH
CH3

Acid -aminopropionic Alanina (Ala)

CH CH3 CH2 CH NH2 COOH

Acid -aminoizovalerianic Valina (Val)

CH3 CH2 CH CH3 CH NH2 COOH

Acid -aminoizocapronic Leucina (leu)

Acid -amino- metil- valerianic (Izoleucina - Ile)

Aminoacizi monoaminodicarboxilici Acidul aspartic i acidul glutamic sunt aminoacizii iar asparagina i glutamina sunt amidele lor.
HOOC CH2 CH NH2 COOH

HOOC

CH2

CH2

CH NH2

COOH

Acid aminosuccinic Acid aspartic (Asp)

H2NOC CH2 CH

Acid aminoglutaric Acid glutamic (Glu)

H2NOC CH2 CH2

COOH

CH NH2

COOH

NH2

Asparagina (Asn)

Glutamina (Glu)

Aminoacizi diaminomonocarboxilici:
H2N CH2 (CH2 )2 CH

COOH

H2N

CH2

(CH2 )3

CH NH 2

COOH

Acid , -diaminovalerianic Ornitina

HN C HN (CH2)3

NH2

Acid , -diaminocapronic Lisina (Lis)

COOH

CH NH 2

HN

NH2

NH2

NH2

Acid -amino- -guanidivalerianic guanidin Arginina (Arg) Arginina conine o grupare guanidil derivat de la guanidin. 27

Aminoacizi cu alte grupe functionale:

CH2 OH CH NH2 COOH

CH3

CH OH

CH NH2

COOH

Acid -amino--hidroxipropionic Serina (Ser)

CH2 CH2 S CH3 CH NH2 COOH

Acid -amino--hidroxibutiric Treonina (Thr)

CH2 SH CH NH2 COOH

Acid -amino--tiometilbutiric Metionina (Met)

CH2

Acid -amino-- tiopropionic Cisteina (Cys)

N CH2 N H CH NH2 COOH

S NH2

CH2

CH

CH

NH2

COOH

COOH

Cistina

Acid -amino-imidazolil propionic Histidina (Hys)

OH

CH2

CH NH2

COOH

CH2

CH NH2

COOH

Acid -amino--fenil propionic Fenilalanina (Phe)

H2C H2C N H CH2 CH COOH

Acid -amino-(parafenil)propionic Tirozina (Tyr)

HO HC H2C N H CH2 CH COOH

Acid pirolidin -2-carboxilic Prolina (Pro)

CH2 N H CH NH2 COOH

Acid 4-hidroxipirolidin -2-carboxilic Hidroxiprolina (Pro-OH)

Acid -amino--indolil propionic Triptofan (Trp)

Proprieti chimice ale aminoacizilor Aminoacizii au caracter amfoter. Avnd n molecul o grupare -NH2 bazic i o grupare -COOH acid ntre acestea poate avea loc transferul de protoni:
R CH NH2 R CH COO + NH3 -

COOH

Ion bipolar (amfion) 28

La pH-ul fiziologic, ca i n stare cristalin, aminoacizii prezint o astfel de structur amfiionic. Datorit caracterului lor amfoter, aminoacizii se comport n mediu acid ca baze iar n mediu bazic ca acizi.
R H C + NH3 + H3O+ H R C + NH3 + H2O

COO-

COO H

R H C + NH3 + HO H

R C NH2 + H2O

COO-

COO -

Observaie: Proprietatea aminoacizilor de a reaciona att cu ionii hidroxil ct i cu ionii de hidroniu permite utilizarea lor ca substane tampon. Punctul izoionic se definete ca PH-ul pentru care sarcina electric net a moleculei de aminoacizi este nul. n funcie de sarcina electric net la un anumit pH, aminoacizii se deplaseaz sub influena unui cmp electric, manifest proprieti electroforetice. Punctul izoelectric (pHi) este pH-ul la care aminoacizii nu migreaz ntr-un cmp electric, ei se afl disociai ca anioni i cationi n proporii egale. Solubilitatea lor este redus la acest pHi datorit atraciei electrostatice dintre anionii i cationii existeni. Reinem: Aminoacizii avnd n molecula lor gruparea -NH2 i gruparea -COOH prezint proprietile chimice ale acestor grupri funcionale, precum i proprieti chimice specifice, datorate prezenei radicalului R de la carbonul C. Reacii chimice caracteristice gruprii carboxil: 1) Ca i acizii organici, aminoacizii formeaz sruri cu bazele: 2) Aminoacizii reacioneaz cu alcoolii formnd esteri. 3) Aminoacizii reacioneaz cu pentaclorura de fosfor. Clorurile aminoacizilor sunt deosebit de reactive i sunt folosite n sinteza peptidelor. 4) Prin decarboxilare aminoacizii formeaz amine, multe dintre ele au proprieti fiziologice i farmacologice importante. Decarboxilarea are lor n organism sub aciunea unor enzime specifice (decarboxilaze) i aminele obinute se numesc amine biogene. 4) Prin reducere energic aminoacizii se transform n aminoalcooli Reacii chimice caracteristice gruprii amino 1) Aminoacizii formeaz sruri cu acizii minerali ca i aminele. 2) Aminoacizii se alchileaz, de exemplu prin metilare, n prezena iodurii sau sulfatului de metil, formnd sruri cuaternare de amoniu. 3) Prin acilare rezult N-acilderivai. De exemplu, prin tratarea glicocolului cu clorura de benzoil, n mediu alcalin, se formeaz acidul hipuric. Acidul benzoic este un produs toxic, este cuplat sub form de acid hipuric i astfel este eliminat pe cale renal. Reacii datorate catenelor laterale n funcie de natura catenelor laterale unii aminoacizi reacioneaz cu anumii reactivi, formnd compui specifici (colorai sau precipitate) care servesc la identificarea lor.

29

Reacii datorate ambelor grupri funcionale Aminoacizii particip la reacii de condensare i policondensare formnd peptide i protide. Peptidele sunt produi de policondensare a dou sau mai multe molecule de aminoacizi. Resturile de aminoacizi sunt legate prin legtur amidic, numit legtur peptidic. Sunt substane naturale care se gsesc n plante n stare liber sau apar ca intermediari la hidroliza proteinelor. Structura i funciile peptidelor sunt determinate de secvena de aminoacizi din molecul. Peptidele se clasific n:oligopeptide i polipeptide Oligopeptidele se formeaz din condensarea a 2 pn la 10 molecule de aminoacizi (dipeptide, tripeptide, etc.) iar polipeptidele prin condensarea unui numr mai mare de 10 molecule de aminoacizi. Din dou molecule de aminoacizi se formeaz o dipeptid:
R CH NH2 COOH + R CH NH2 COOH - H2O R CH NH2 CO NH CH R COOH

Datorit posibilitilor de legare a acelorai aminoacizi n secvene diferite, peptidele pot prezenta fenomenul de izomerie de structur. n diferitele organe vegetale se gsesc peptide i polipeptide, care indeplinesc anumite roluri fiziologice sau constituie produi intermediari n anabolismul i catabolismul proteidelor. Una din primele peptide naturale cunoscut, izolat din drojdia de bere este glutationul. Glutationul se gsete i n numeroase organe vegetale, ndeosebi n semine, unde cantitatea lui sporete n cursul ncolirii. Glutationul este o tripeptid format din acid glutamic, cistein i glicocol.
NH2 HOOC CH (CH2)2 CO NH CH2 CH SH CO NH CH2 COOH

Glutamil

Cistenil

Glicocol

n celule glutationul se poate gsi sub form redus G-SH, ca tiol ct i sub form oxidat, ca disulfur G-S-S-G. Trecerea glutationului din forma redus n forma oxidat este un proces reversibil i constituie unul din cele mai importante siteme de oxidoreducere din celule.
-2 H G SH +2 H G S S G

30

TEST DE EVALUARE 1. Cum se explic comportarea ca soluii tampon a soluiilor de aminoacizi? Rspuns: In soluie apoas aminoacizii se gsesc sub form de amfiioni i prezint caracter amfoter, comportndu-se ca solutii tampon (in mediu acid se comport ca baze iar in mediu bazic se comport ca acizi) 2. Cum se clasific aminoacizii naturali dup criteriul biologic? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Ce fel de reacii chimice prezint aminoacizii? a) reacii de alchilare b) reactii de acilare c) reacii de hidroliz d) reacii de condensare e) reacii de decarboxilare Rezolvare : a, b, d, e De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele reacii chimice sunt datorate gruprii amino? a) reactia de hidroliz b) reactia de esterificare c) reactia de decarboxilare d) reactia cu ninhidrina e) reactia de acilare Rezolvare : 3.2. Proteine; Structur si proprieti
Proteinele sunt macromolecule care exist ntr-o varietate foarte mare i care au o structur deosebit de complex. Au o structur polipeptidic care asigur proteinelor diversitate molecular i specificitate. Structura proteinelor. Cu ajutorul celor 20 aminoacizi proteici se pot obine combinaii multiple, deosebite prin numrul i secvena resturilor de aminoacizi. Lanurile polipeptidice, unidimensionale i flexibile, se aeaz spontan n arhitecturi moleculare, edificii cu trei dimensiuni, cu forme caracteristice pentru o anumit secven de aminoacizi. Reinem: Complexitatea proteinelor a impus introducerea mai multor trepte de organizare structural denumite structur primar, secundar, teriar i cuaternar astfel c structura de ansamblu a unei proteine este dat de existena i interaciunea acestor structuri. ntre aceste nivele de organizare

31

structural exist interdependen i mpreun determin particularitile structurale i proprietile funcionale specifice fiecrei proteine. Structura primar Structura primar este dat de numrul, felul i secvena resturilor aminoacizilor din molecul. n legtura peptidic exist efectul de rezonan care conduce la un caracter parial de dubl legtur pentru legtura dintre azot i carbon.
H C O N R -O C + N H R

Acest caracter se explic prin urmtoarele structuri limit de rezonan ale legturii peptidice. Ca o consecin a caracterului parial de dubl legtur al legturii peptidice este apariia izomeriei cis-trans. n proteine, ca i n peptide catena este n zig-zag, atomii implicai n legtura peptidic sunt coplanari, iar resturile aminoacizilor R sunt aezai alternativ deasupra i dedesuptul planului legturilor peptidice.
R2 HO C N H C R1 C N C H H O C N H H C R3

Structura secundar Structura secundar definete orientarea spaial a lanului polipeptidic. Pauling i Corey (1951) au postulat dou structuri secundare pentru lanurile polipeptidice: modelul elicoidal (-helix) i structura (planuri pliate). O structur elicoidal distinct de cea descris de Pauling este ntlnit la colagen, care are o compoziie aminoacidic particular. Modelul -helix. Acest model prevede dobndirea de ctre o caten polipeptidic a unei conformaii elicoidale numit -helix, rezultat i stabilizat prin legturi de hidrogen intracatenare. Legturile de hidrogen sunt dispuse aproape perfect paralel cu axa -helixului. Radicalii R ai aminoacizilor constitueni ai -helixului sunt aezai alternativ, deasupra i sub planurile legturii peptidice i proiectate radial n jurul elicei.

Figura 1. Structura secundar de helice a unui lan polipeptidic

Modelul planurilor pliate (foaie pliat) i acest model reprezint o conformaie ordonat i stabilizat prin legturi de hidrogen dar intercatenare, dispuse aproape perpendicular pe axa catenei polipeptidice.
32

Lanurile polipeptidice se aeaz n foi. Structura secundar n foaie pliat este ntlnit n proporie de aproape 100% n proteina din mtase, fibroina.

Figura 2. Structurain foaie pliat

Structura teriar Aceast structur reprezint un stadiu avansat de organizare spaial a proteinelor i const n replierea catenelor polipeptidice elicoidale asupra lor nile. Catena polipeptidic sufer o nfurare spontan, avnd loc o repliere ordonat combinat cu plieri care nu sunt regulat ordonate n spaiu. Structura teriar se constituie pe baza unor legiti i este meninut prin stabilirea unor legturi i interaciuni diferite. Aceste legturi sunt de urmtoarele tipuri: - Legturi covalente disulfurice-S-S-, sunt legturi care se stabilesc ntre dou resturi de cistein, la nivelul gruprilor tiolice -SH - Legturi ionice - aceste legturi se stabilesc ntre grupri polare de sens contrar. - Legturi de hidrogen- Interaciuni dipol-dipol. - Fore Van der Waals i interaciuni hidrofobe. Acestea sunt stabilite ntre radicalii hidrocarbonai ai aminoacizilor. Structura teriar prezint un grad mare de labilitate n raport cu diferii factori fizici i chimici, desfacerea legturilor implicate n organizarea structurii teriare determin denaturarea proteinelor, proces nsoit de regul de pierderea proprietilor biologice. Structura cuaternar Structura cuaternar a unei proteine oligomere indic modul n care lanurile polipeptidice individuale, se asociaz, se asambleaz pentru a realiza structura proteinei date, structura sa funcional. Structura cuaternar este un nivel de organizare care rezult prin interaciunea dintre lanurile polipeptidice independente care au deja o structura primar, secundar i teriar bine definit. Suprastructura cuaternar reprezint asocierea unor catene polipeptiodice numite protomeri ntr-un ansamblu sau agregat numit oligomer. Interaciunile prin care se asambleaz agregatul molecular nu sunt de natur covalent, ci sunt legturi de hidrogen i legturi electrostatice. Un exemplu tipic pentru organizarea structurii cuaternare este globina din hemoglobin (Hb) care are o molecul tetramer format din patru lanuri polipeptidice, fiecare cu structura sa primar, secundar i teriar bine definit, legate ntre ele prin legturi de hidrogen, fore Van der Waals i legturi polare. Funcia specific a unei proteine oligomere se manifest numai la nivelul structurii cuaternare, protomerii separai sunt inactivi.

33

Proprietile proteinelor Proprieti fizice Solubilitatea Proteinele fibrilare sunt insolubile n ap, pe cnd cele globulare prezint grade diferite de solubilitate. Soluiile apoase ale proteinelor sunt soluii coloidale n care diametrul particulelor variaz ntre 5-100 milimicroni. Proteinele au caracter amfoter. Aceasta se datoreaz gruprilor acide sau bazice din resturile de aminoacizi monoaminodicarboxilici sau diaminomonocarboxilici. La pH-ul fiziologic toate aceste grupri acide sau bazice sunt ionizate i proteina apare ca un poliamfolit. n soluie apoas, n funcie de pH proteina migreaz n cmp electric i pe aceast proprietate se bazeaz separarea i purificarea proteinelor prin electroforez. Observaie: Exist un pH la care proteina apare cu sarcin electric nul, numit punct izoelectric sau pH izoelectric cnd numrul sarcinilor negative este egal cu numrul sarcinilor pozitive i proteina nu mai migreaz n cmp electric. Datorit caracterului lor amfoter proteinele ndeplinesc n organism rol de soluii tampon. Ele contribuie la meninerea echilibrului acido-bazic. Precipitarea. Conformaiile native ale proteinelor pot fi uor perturbate sub aciunea unei multitudini de ageni care afecteaz interaciunile necovalente din cuprinsul moleculei. Precipitarea unei proteine este provocat de diferii factori fizici i diferii ageni chimici. Precipitarea poate fi reversibil i ireversibil. Proprieti chimice Proteinele dau numeroase reacii chimice datorit gruprilor amino i carboxil libere ale aminoacizilor constitueni, legturii peptidice i diferiilor radicali din molecul. Pe baza unora dintre proprietile chimice ele se pot identifica i determina cantitativ. Proteinele sunt substane macromoleculare care hidrolizeaz n mediu acid, bazic sau sub aciunea enzimelor proteolitice. Hidroliza proteinelor poate fi total sau parial. Hidroliza total duce la obinerea de aminoacizi iar hidroliza parial la obinerea de fragmente polipeptidice.

TEST DE EVALUARE 1. Cum se definete structura primar a unei proteine ? Rspuns: Structura primar este dat de numrul, felul i secvena resturilor aminoacizilor din molecul. Cum se definete structura secundar a unei proteine ?

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care sunt tipurile de legturi si interaciuni care menin stabilitatea structurii teriare a unei proteine? a)legturi covalente disulfurice b) legturi ionice
34

c) legturi de hidrogen d) legturi prin fore Van der Waals e) interactiuni dipol-dipol Rezolvare : a, b, c, d, e

De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate? a) proteinele prezint caracter amfoter b) proteinele nu migreaz in cmp electric c) proteinele prezint proprieti imunologice d) proteinele precipit reversibil sau ireversibil e) proteinele sunt molecule mici foarte solubile in ap Rezolvare :

3.3. Holoproteide si heteroproteide Clasificarea holoproteidelor Datorit complexitii structurii lor, clasificarea proteinelor nu se poate face dup un criteriu unic. La baza clasificrii stau de obicei dou criterii: conformaia tridimensional (globulare i fibrilare) i constituia lor chimic. Reinem: Dup solubilitate i caracterul lor chimic proteinele globulare se clasific n: albumine, globuline, prolamine, gluteline, histone i protamine. Albumine. Albuminele sunt proteine cu caracter acid, solubile n ap i n soluii diluate de electrolii. Globuline Globulinele sunt proteine cu caracter acid mai pronunat datorit prezenei acidului aspartic i acidului glutamic n structura lor. Sunt insolubile n ap dar se dizolv n soluii diluate de electrolii. Prolamine. Prolaminele au fost identificate numai n seminele de graminee, sunt proteine vegetale cu caracter acid pronunat datorit coninutului ridicat n prolin, acid glutamic i acid aspartic. Prolamine sunt insolubile n ap, n soluii neutre de electrolii salini i n alcool absolut. Sunt uor solubile n soluii apoase alcaline i alcool 70%. Gluteline. Glutelinele sunt proteine cu caracter acid pronunat datorit coninutului ridicat n acid glutamic i acid aspartic. Sunt insolubile n ap, alcool i soluii de sruri neutre. Se dizolv n soluii bazice si precipit din aceste soluii la acidulare. Histone. Histonele sunt proteine cu caracter bazic care predomin n regnul animal. Au un coninut ridicat de arginin i lizin. Se dizolv uor n soluii diluate de acid sulfuric. Protamine Protamine sunt proteine cu caracter bazic pronunat datorit coninutului n aminoacizi bazici: lizin, histidin i mai ales arginin. Protaminele sunt proteine care se gsesc numai n regnul animal. Scleroproteine Scleroproteinele sunt proteine fibrilare, alctuite aproape exclusiv din aminoacizi monoaminomonocarboxilici. Ele au proprieti mecanice bune i un rol plastic i de susinere n organismele animale., sunt de consisten solid, sunt insolubile n ap, soluii acide sau bazice i sunt stabile fa de aciunea enzimelor proteolitice.

35

Heteroproteide Heteroproteidele sunt proteide complexe formate dintr-o holoproteid i o grupare de natur neproteic numit grupare prostetic. Observaie: Gruparea prostetic se leag de componenta proteic prin legturi covalente, ionice, legturi de hidrogen sau fore Van der Waals, legturi care sunt mai slabe dect legturile peptidice. Prin hidroliz total pun n libertate aminoacizi i diferite grupri prostetice. Heteroproteidele se clasific n funcie de natura gruprii prostetice n - Fosfoproteide; - Glicoproteide; - Lipoproteide; - Cromoproteide; - Metalproteide; - Nucleoproteide; Fosfoproteide- sunt heteroproteide n care componenta prostetic este acidul ortofosforic legat esteric cu gruparea -OH din serin (cel mai frecvent) sau din treonin. CH2 O PO3H2

HN CH CO Observaie: Fosfoproteidele au un caracter acid datorit restului fosforic din molecul. Sunt substane solide, insolubile n ap i n acizi. Se dizolv n baze diluate. Sunt substane care se gsesc n organismele animale i n microorganisme, in plante neientificndu-se dect n polenul de porumb. Cele mai importante fosfoproteide sunt cazeina din lapte i vitelina din glbenuul de ou. Glicoproteide- sunt heteroproteide n care componenta prostetic este format din glucide, de obicei poliglucide complexe. Ele sunt proteide caracteristice regnului animal, dar s-au identificat i n plante. Lipoproteide -sunt heteroproteide n care componenta prostetic este format din lipide (acizi grai, gliceride, lecitine, cefaline, etc.) se gsesc n toate organismele vegetale i animale. n lipoproteide legturile stabilite ntre lipide i partea proteic sunt de obicei de natur ionic i se stabilesc ntre grupe -COO- libere din proteine i grupe -NH3+din colin sau restul fosforic al fosfolipidelor i -NH3+ din protein. Lipoproteinele sunt substane de constituie ale celulelor, mitocondriilor, membranelor celulare. Metaloproteide- sunt heteroproteide care au ca grupare prostetic metale (Fe, Cu, Mg, Zn, Mn, etc.) Ele au un rol nsemnat n depozitarea i transportul diferitelor metale. Metalul sub form ionic este legat complex prin stabilirea unor legturi coordinative ntre metal i anumite grupri din componenta proteic. Dintre metalproteide cele mai importante sunt cele cu rol enzimatic. n cloroplaste se afl feredoxina, enzim care conine fier n molecul i are rol important n reaciile de oxido-reducere. Cromoproteide- sunt heteroproteide care au ca grupare prostetic o substan colorat. Se gsesc n toate organismele animale i vegetale, fiind universal rspndite n lumea vie. Dup structura gruprii prostetice cromoproteidele se mpart n - a) cromoproteide porfirinice, care au drept grupare prostetic un nucleu porfirinic - b) cromoproteide neporfirinice

36

Dup rolul pe care l ndeplinesc n organism ambele grupe se mpart n cromoproteide cu funcie respiratorie i cromoproteide fr funcie respiratorie. a) Cromoproteide porfirinice Aceast clas de cromoproteide are drept component prostetic un nucleu porfirinic. Din punct de vedere biochimic sunt importante cromoproteidele cu funcie respiratorie: hemoglobina, citocromii, catalazele, peroxidazele. La plante cromoproteidele feroporfirinice s-au identificat n boabele de gru, ovz, migdale, n drojdia de bere. Grupa cromoproteidelor porfirinice fr funcie respiratorie cuprinde cloroplastinele, ficoeritrinele i ficocianinele. Toate cromoproteidele porfirinice au in gruparea prostetic un inel porfirinic, care se formeaz din patru nuclee pirolice unite prin grupri metinice. Prin introducerea unui atom de metal n interiorul porfirinelor se obine gruparea prostetic. Cromoproteidele se deosebesc ntre ele prin natura componentei proteice i prin atomul de metal din gruparea prostetic. Dintre cromoproteidele porfirinice fac parte i hemoglobina i cloroplastina. B) Cromoproteide neporfirinice Sunt cromoproteide care conin o grupare prostetic colorat de natur neporfirinic. Din grupa cromoproteide neporfirinice cu funcie respiratorie fac parte hemocianinele, flavinenzimele. Hemocianinele conin cupru n molecul. Din grupa cromoproteide neporfirinice fr funcie respiratorie fac parte carotenoproteidele i flavinproteidele. Nucleoproteide- sunt heteroproteide formate dintr-o protein cu caracter bazic i o grupare prostetic constituit din acizi nucleici. Deoarece componenta proteic are in majoritatea cazurilor caracter bazic iar gruparea prostetic caracter acid pronunat, nucleoproteidele pot fi considerate sruri ale acizilor nucleici. Nucleoproteidele se clasific dup tipul acidului nucleic din constituia sa n ribonucleoproteide i deoxiribonucleoproteide. Se gsesc n toate celulele vegetale i animale, n protoplasm i n lichidele biologice, formeaz masa principal a nucleelor celulare i a materialului cromatic.

TEST DE EVALUARE 1. Cum se clasific heteroproteidele dup natura gruprii prostetice? Rspuns: Dup natura gruprii prostetice heteroproteidele se clasific n: fosfoproteide, glicoproteide, lipoproteide, cromoproteide, metalproteide i nucleoproteide; 2. Cum se clasific holoproteidele dup caracterul lor chimic i dup solubilitate? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate?

37

a) n fosfoproteide componenta prostetic este acidul ortofosforic legat esteric de gruparea -OH din serin b) fosfoproteidele au caracter bazic c) glicoproteidele au drept component prostetic glicerolul d) globulinele sunt proteine cu caracter bazic foarte uor solubile in ap e) globulinele sunt proteine cu caracter acid, greu solubile in ap Rezolvare : a, e

De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate? a) albuminele sunt proteine cu caracter acid solubile in ap b) globulinele sunt proteine cu caracter acid, solubile in soluii de sruri c) glutelinele sunt proteine cu caracter acid i au coninut ridicat de acid glutamic d) nucleoproteidele au drept component prostetic acizi nucleici e) nucleoproteidele au drept component prostetic nuclee aromatice Rezolvare : Rezumatul temei
Protidele sunt cele mai rspndite biomolecule din celulele vii. Ele sunt eseniale pentru toate aspectele structurii i funciilor celulare. Cea mai mare parte din informaia genetic este exprimat prin proteine. Structura moleculelor proteice i relaia structurii cu funcia lor biologic i cu activitatea lor sunt probleme centrale ale biochimiei. Proteinele au o structur polipeptidic. Complexitatea proteinelor a impus introducerea mai multor trepte de organizare structural denumite structur primar, secundar, teriar i cuaternar astfel c structura de ansamblu a unei proteine este dat de existena i interaciunea acestor structuri. ntre aceste nivele de organizare structural exist interdependen i mpreun determin particularitile structurale i proprietile funcionale specifice fiecrei proteine. Structura primar este dat de numrul, felul i secvena resturilor aminoacizilor din molecul. Structura secundar definete orientarea spaial a lanului polipeptidic. Structura teriar reprezint un stadiu avansat de organizare spaial a proteinelor i const n replierea catenelor polipeptidice elicoidale asupra lor nile. Structura teriar se constituie pe baza unor legiti i este meninut prin stabilirea unor legturi i interaciuni diferite. Structura cuaternar a unei proteine oligomere indic modul n care lanurile polipeptidice individuale, se asociaz, se asambleaz pentru a realiza structura proteinei date, structura sa funcional. Proteinele dau numeroase reacii chimice datorit gruprilor amino i carboxil libere ale aminoacizilor constitueni, legturii peptidice i diferiilor radicali din molecul. Datorit complexitii structurii lor, clasificarea proteinelor nu se poate face dup un criteriu unic. La baza clasificrii stau de obicei dou criterii: conformaia tridimensional (globulare i fibrilare) i constituia lor chimic.

38

Tema nr. 4 ACIZI NUCLEICI

Uniti de nvare : Structura bazelor azotate. nucleotidelor. Tipuri de acizi nucleici

Structura

nucleozidelor

si

Obiectivele temei : Cunoaterea si studiul principalilor componeni ai acizilor nucleici Cunoaterea aspectelor biochimice privind proprietile si rolul metabolic al acizilor nucleici Explicarea si interpretarea corecta a structurii lanului polinucleotidic Timpul alocat temei : 4 ore

Bibliografie recomandat : 1. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 2. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 3. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 4. Dumitru I. F., Biochimie, 1980, Ed Didactic si Pedagogic, Bucuresti 5. Marinescu G., Glodeanu E., 1995- Biochimie General, Ed. Universitaria, Craiova 4.1 Structura bazelor azotate. Structura nucleozidelor si nucleotidelor.
Acizii nucleici sunt din punct de vedere chimic, produi de policondensare ai nucleotidelor. Se cunosc dou tipuri de acizi nucleici: acizi dezoxiribonucleici (ADN) i acizi ribonucleici. Att ADN ct i ARN sunt macromolecule informaionale care permit stocarea, transmiterea i exprimarea informaiei genetice. Molecula de ADN reprezint baza molecular a ereditii, ea conine informaia genetic cu privire la biosinteza proteinelor. Coninutul informaional al ADN, nscris n secvena nucleotidelor, permite specificarea fiecrei proteine, determin individualitatea organismului. Reinem: Acizii nucleici sunt substane macromoleculare a cror unitate de baz este nucleotidul. Hidroliza acid a acizilor nucleici formeaz baze azotate, pentoze i acid fosforic. Pentoza din structura acizilor ribonucleici este D- riboza, iar cea din structura acizilor dezoxiribonucleici este D-2dezoxi riboza. n structura acizilor nucleici pentozele se gsesc sub form ciclic, furanozic.

39

HO

H2C

OH
HO H2C

OH

OH

OH

OH

-riboza

2-dezoxi--riboza

Bazele azotate din structura acizilor nucleici Bazele azotate care intr n structura acizilor nucleici deriv din dou structuri heterociclice: purina i pirimidina.
N N N N H

N N

Pirimidin Purin Bazele purinice din structura acizilor nucleici sunt adenina (6 aminopurina) i guanina (2-amino-6-hidroxipurina) Ca baze pirimidinice s-au identificat trei baze majore: uracilul (2,4-dihidroxi-pirimidin), timin (2,4dihidroxi-5-metil-pirimidin) i citozin (2-hidroxi-4amino- pirimidin)
OH
NH2 N HO N
HO N N OH

N HO N

CH3

Citozina
NH2 N N N H N

Uracil
N H2N N

Timina
OH N N H

Adenina

Guanina

Bazele purinice i pirimidinice prezint fenomenul de tautomerie. Bazele azotate prezint tautomerie lactam-lactim. Observaie: La pH-ul fiziologic predomin forma lactam. Bazele azotate care nu conin OH prezint i ele tautomerie imino-amino, dar echilibrul este deplasat spre forma amino, mai stabil.
O C NH OH C N

forma lactam

forma lactim

40

Nucleozide Nucleozidele sunt compui care rezult prin stabilirea unei legturi N-glicozidice ntre hidroxilul semiacetalic (de la C1) al pentozei i atomul de azot din poziia 9 a unei baze purinice sau din poziia 3 a unei baze pirimidinice. Bazele azotate se leag glicozidic de pentoz. Ribonucleozidele conin ca pentoz riboza iar dezoxiribonucleozidele conin 2-dezoxiriboza. n structura nucleozidelor atomii de carbon ai pentozei se noteaz cu 1'-5' pentru a se deosebi de cei ai bazelor azotate.

Adenozina

Guanozina

Uridina

Citidina

Dezoxitimidina

n funcie de structura bazei azotate componente se cunosc urmtoarele nucleozide: citidina, uridina, timidina, adenozina, guanozina. Observaie: Denumirea nucleozidelor provine de la denumirea bazei azotate la care se adaug sufixul idin pentru derivaii pirimidinici i ozin pentru cei purinici. Dezoxiribonucleozidele se denumesc adugnd prefixul dezoxi la numele ribonucleozidului corespunztor. Nucleozidele libere se gsesc doar n urme, ca produi de hidroliz ai nucleotidelor. Hidroliza enzimatic a ambelor tipuri de nucleozide are loc sub aciunea nucleozidazelor.

Nucleotide Nucleotidele sunt esteri fosforici ai nucleozidelor n care acidul fosforic este esterificat la gruparea alcool de la C5', C3' sau C2' ai ribozei sau C5' sau C3' ai dezoxiribozei. n structura acizilor nucleici intr predominant nucleozid 5' fosfai.

Dezoxiguanozin- 5'-monofosfat (dGMP) Guanozin- 5'-monofosfat (GMP) (Acid dezoxiguanilic) Acid guanilic 41

Adenozin -5'-monofosfat (AMP) (Acid adenilic)

Observaie: Deoarece nucleotidele conin un rest de acid fosforic, ele au caracter acid i se mai numesc acizi nucleozid-5'-monofosforici. Principalele nucleotide care intr n structura ARN sunt: citidin-5'-monofosfatul, uridin5'-monofosfatul, adenozin-5'-monofosfatul, i guanozin-5'-monofosfatul. Principalele dezoxiribonucleotide din structura ADN sunt dezoxicitidin-5'monofosfatul(dCMP),dezoxitimidin-5'-monofosfatul(dTMP) dezoxiadenozin-5'-monofosfatul (dAMP), i dezoxiguanozin-5'monofosfatul(dGMP).

Dezoxicitidin 5'-monofosfatul (dCMP) Acid dezoxicitidilic

Citidin 5'-monofosfatul (CMP) Acid citidilic

Uridin 5'-monofosfatul (UMP) Acid uridilic

Dezoxitimidin 5'-monofosfatul (dTMP) Acid dezoxitimidinic

42

Dac un nucleozid sau un dezoxinucleozid este di sau trifosforilat se obin nucleozid sau dezoxinucleozid di i trifosfai. De exemplu n cazul adeninei se obin adenozin-difosfatul (ADP) i adenozin-trifosfatul (ATP).

Resturile de acizi fosforici sunt unite prin legturi macroergice (legturi cu energie ridicat). Nucleotidele rezult prin hidroliza parial a acizilor nucleici dar se gsesc i libere n celule unde ndeplinesc funcii biochimice importante. Alturi de nucleozid 5'-fosfaii descrii mai exist i nucleotide care conin grupri fosfat n alte poziii. Astfel exist ribonucleozid 2',3' fosfai ciclici i ribonucleozid 3'- fosfai cu rol biochimic important. Acidul adenozin 3', 5' monofosforic ciclic (AMPc) i acidul guanozin 3', 5' monofosforic ciclic (GMPc) au roluri importante n n mecanismele de aciune ale hormonilor la nivel celular. La plante este nc controversat rolul regulator al AMPc i GMPc, prin analogie cu celula animal. Nucleotidele intr i n constituia unor coenzime cum sunt nicotinamid-dinucleotidele (NAD+, NADH+H+, NADP+) sau flavinadenin-dinucleotidele (FAD, FADH2) implicate n procesele oxidoreductoare ale respiraiei celulare.

TEST DE EVALUARE Care sunt compuii care se formeaz la hidroliza nucleotidelor? Rspuns: La hidroliza nucleotidelor rezult baze azotate, pentoze i acid fosforic.

2. Care sunt substanele care intr n constituia nucleozidelor? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care dintre urmtoarele substane intr n constituia acizilor nucleici? a) uracil si timin b) timin si riboz c) ribuloz i dezoxiriboz d) adenin si guanin e) citozin si dezoxiglucoz
43

Rezolvare: a, b, d De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate? a) acizii nucleici sunt produi de policondensare ai nucleotidelor b) pentoza din structura acizilor ribonucleici este fructofuranoza c) bazele purinice din structura acizilor nucleici sunt adenina i guanina d) bazele azotate se leag amidic de pentoz. e) bazele azotate se leag glicozidic de pentoz. Rezolvare :

4.2 Tipuri de acizi nucleici

Acizii nucleici sunt polinucleotide rezultate din policondensarea nucleotidelor, care se succed n lan. Gruparea 5' hidroxi a unui nucleotid este legat la gruparea 3' hidroxi a nucleotidului urmtor prin legtur fosfat diesteric. Orice caten polinucleotidic are o direcie specific, n sensul c toate legturile internucleotidice au aceeai orientare de-a lungul lanului. Fiecare caten polinucleotidic va avea dou capete: captul 5', la care gruparea -OH de la C5' este liber i captul 3', la care gruparea -OH de la C3' nu este angajat ntr-o legtur internucleotidic. Lanurile de dezoxiribonucleotide legate covalent formeaz acidul dezoxiribonucleic (ADN) iar lanurile de ribonucleotide legate covalent formeaz acizii ribonucleici. Acizii Dezoxiribonucleici ADN-ul conine patru baze azotate i anume: adenina, guanina, timina i citozina. n secvena nucleotidelor din molecula de ADN este nscris informaia genetic pe care acestea o cuprind, astfel nct succesiunea a trei baze din structura ADN codific includerea unui anumit aminoacid n biosinteza proteinelor. Structura primar a ADN este reprezentat de lanul de polidezoxiribonucleotide, caracterizat prin natura, proporia i secvena nucleotidelor constituente.
HO P O H2C H H O HO P O H2C H H O HO P O H2C H H O HO P O H2C H H OH H O H O H O H O

O
H

Baza H

O
H

Baza H

O
H

Baza H

Figura 3. Structura primar a unui lan polinucleotidic dezoxiribonucleic. (fragment de ADN)

O
H

Baza H

44

I.D.Watson, F. Willkins i F.H.C.Crick, n 1953, pe baza unor date experimentale privind spectrometria cu raze X propun pentru ADN structura de dublu helix. Modelul este confirmat ulterior de numeroase date experimentale fapt pentru care aceti cercettori au primit premiul Nobel. Reinem: Analiza cromatografic efectuat pe molecule de AND stabilete o anumit relaie cantitativ ntre cele patru baze azotate. n toate tipurile de ADN studiate s-a demonstrat c bazele purinice i pirimidinice se gsesc n cantiti echimoleculare, A+G=T+C i A/T=1, G/C=1. Molecula de ADN este format din dou lanuri polinucleotidice complementare i antiparalele, rsucite elicoidal spre dreapta n jurul unei axe comune de simetrie.

Figura 4. Structura dublu helicoidal a ADN

Baze complementare unite prin legturi de hidrogen

Stabilitatea dublului helix este asigurat att de interaciunile hidrofobe dintre bazele azotate ct i de legturile de hidrogen ce se stabilesc ntre bazele azotate de pe o caten i cele complementare de pe cealalt caten. Legturile de hidrogen se stabilesc, invariabil, ntre o baz azotat purinic de pe o caten i una pirimidinic de pe cealalt caten fiind de tipul A=T, G=C. Cuplarea a dou baze purinice este exclus ntruct s-ar depi spaiul oferit de dublul helix, iar cuplarea a dou baze pirimidinice ar face imposibil stabilirea legturilor de hidrogen, bazele fiind prea departe una de alta. Bazele pereche sunt adenina-timina i guanina-citozina, ntruct numai acestea pot stabili numrul maxim de legturi de hidrogen, asigurnd astfel conformaia cu energia liber cea mai mic, deci cea mai stabil, moleculei de ADN: Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen iar guanina de citozin prin trei legturi. Cele dou catene nu sunt identice ci complementare. Succesiunea bazelor azotate dintr-o caten dicteaz succesiunea bazelor azotate din cea de a doua caten, o caten este replica celeilalte. Stabilitatea sistemului este suplimentat i de fore Van der Waals, dipol-dipol sau hidrofobe ntre cele dou catene. Bazele azotate 45

sunt plasate spre interiorul dublului helix cu planurile ciclurilor n poziii orizontale, reciproc paralele i perpendiculare pe axa helixului.

Acizii ribonucleici Sunt produi macromoleculari rezultai prin policondensarea ribonuceotidelor. Ribonucleotidele care alctuiesc molecula de ARN stabilesc legturi fosfat diesterice ntre gruparea OH din poziia 3' a unui nucleotid i gruparea OH din poziia 5' a nucleotidului succesiv. ARN conine guanina, citozina, adenina i uracilul. Pe lng aceste baze, ARN conine i baze aa-zise "minore" rezultate prin metilri sau tiolri ale bazelor "majore". Componenta glucidic din ARN este riboza. n lanul ribonucleotidic al moleculei de ARN, raportul A/U i G/C nu mai este 1, ntruct nu exist un lan complemantar ca i la AND. Cantitatea de ARN spre deosebire de cea de AND, variaz de la o celul la alta i chiar n cadrul aceleiai celule, n funcie de intensitatea procesului de biosintez a proteinelor la un moment dat.
HO P O H2C H H O HO P O H2C H H O HO P O H2C H H O HO P O H2C H H OH OH O OH O OH O OH O

O
H

Baza H

O
H

Baza H

O
H

Baza H

Figura 5. Structura primar a unui lan polinucleotidic ribonucleic. (fragment de ARN) Baze azotate: guanina, citozina, adenina i uracil.

O
H

Baza H

Observaie: Exist diferite tipuri de ARN n celule: ARN ribozomal (ARNr), ARN de transfer (ARNt), i ARN mesager (ARNm), cu structuri caracteristice. Toi au n comun aceeai structur primar iar structura secundar i teriar este specific fiecrui tip de ARN, i anume difer prin masa molecular, coeficieni de sedimentare, stabilitate. Moleculele de ARN sunt monocatenare dar pe anumite poriuni, acolo unde o permite complementaritatea bazelor se organizeaz n structuri dublu elicoidale, formate prin rsucirea catenei n jurul propriului ax i formarea de legturi de hidrogen conform principiului complementaritii bazelor. Poriunile de baze necomplementare sunt expulzate ca bucle n afara zonelor de dublu helix.
Figura 6. Structura secundar a ARN monocatenar coninnd poriuni cu baze complementare asociate prin legturi de hidrogen i poriuni cu baze necomplementare

46

ARN-mesager (ARNm) se sintetizeaz n nucleu prin procesul de transcripie, prin care secvena bazelor dintr-o caten de ADN este copiat enzimatic (ARN-polimeraz) realizndu-se o caten complementar. Funcia biochimic a ARNm este de a transmite informaia preluat de la ADN la nivelul ribozomilor unde are loc biosinteza proteinelor. ARN de transfer (ARNt) are rolul de a transporta aminoacizii la ribozomi unde are loc procesul de biosintez al proteinelor i este localizat n citoplasm. Fiecruia dintre cei 20 aminoacizi care intr n structura proteinelor i corespunde cel puin un ARNt specific. n general exist mai multe tipuri de ARNt pentru un aminoacid. ARN ribozomal (ARNr), sunt molecule flexibile i deformabile, care conin zone dublu catenare ntrerupte de zone monocatenare. ARNr este o component esenial a ribozomilor i constituie 75-80% din totalul ARN celular i cel mai stabil metabolic. ARNr se deosebesc ntre ei prin masele lor moleculare i prin coeficienii de sedimentare. ARNr nu se gsesc n stare liber ci combinai cu proteine diverse, constituind particule ribonucleoproteice denumite ribozomi. La nivelul ribozomilor are loc biosinteza proteinelor, acetia permind conlucrarea ARNt, ARNm, i ARNr n vederea desfurrii acestui proces. TEST DE EVALUARE 1. Care este funcia biochimic a ARNm? Rspuns: Funcia biochimic a ARNm este de a transmite informaia preluat de la ADN la nivelul ribozomilor unde are loc biosinteza proteinelor. 2. Care sunt bazele azotate din structura ADN ? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate? a) ADN are structura de dublu helix. b) ADN are structura monocatenar c) Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen iar guanina de citozin prin trei legturi. d) Adenina se leag de timin prin trei legturi de hidrogen iar guanina de citozin prin dou legturi. e) Bazele pereche sunt adenina-timina i guanina-citozina Rezolvare : a, c, e De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele afirmaii sunt adevrate? a) In ARN raportul A/U i G/C este 1 b) In ARN raportul A/U i G/C este diferit de 1 c) ARN conine guanina, citozina, adenina i uracilul. d) ARN conine guanina, citozina, adenina i timin.
47

e) In ADN bazele purinice i pirimidinice se gsesc n cantiti echimoleculare Rezolvare :

Rezumatul temei
Acizii nucleici sunt din punct de vedere chimic, produi de policondensare ai nucleotidelor. Se cunosc dou tipuri de acizi nucleici: acizi dezoxiribonucleici (ADN) i acizi ribonucleici. Att ADN ct i ARN sunt macromolecule informaionale care permit stocarea, transmiterea i exprimarea informaiei genetice. Acizii nucleici sunt substane macromoleculare a cror unitate de baz este nucleotidul. Hidroliza acid a acizilor nucleici formeaz baze azotate, pentoze i acid fosforic. Pentoza din structura acizilor ribonucleici este D- riboza, iar cea din structura acizilor dezoxiribonucleici este D-2dezoxi--riboza. n structura acizilor nucleici pentozele se gsesc sub form ciclic, furanozic. Bazele azotate care intr n structura acizilor nucleici deriv din dou structuri heterociclice: purina i pirimidina. Bazele purinice din structura acizilor nucleici sunt adenina i guanina iar ca baze pirimidinice s-au identificat trei baze majore: uracilul, timin i citozin. Nucleozidele sunt compui care rezult prin stabilirea unei legturi Nglicozidice ntre hidroxilul semiacetalic (de la C1) al pentozei i atomul de azot din poziia 9 a unei baze purinice sau din poziia 3 a unei baze pirimidinice. Bazele azotate se leag glicozidic de pentoz. n funcie de structura bazei azotate componente se cunosc urmtoarele nucleozide: citidina, uridina, timidina, adenozina, guanozina. Nucleotidele sunt esteri fosforici ai nucleozidelor, n structura acizilor nucleici intrnd predominant nucleozid 5' fosfai. Nucleotidele rezult prin hidroliza parial a acizilor nucleici dar se gsesc i libere n celule unde ndeplinesc funcii biochimice importante. Acizii nucleici sunt polinucleotide rezultate din policondensarea nucleotidelor, care se succed n lan. Lanurile de dezoxiribonucleotide legate covalent formeaz acidul dezoxiribonucleic (ADN) iar lanurile de ribonucleotide formeaz acizii ribonucleici. ADN-ul conine patru baze azotate i anume: adenina, guanina, timina i citozina. ADN are structura de dublu helix. Bazele purinice i pirimidinice se gsesc n cantiti echimoleculare, A+G=T+C i A/T=1, G/C=1. Molecula de ADN este format din dou lanuri polinucleotidice complementare i antiparalele, rsucite elicoidal spre dreapta n jurul unei axe comune de simetrie. ARN conine guanina, citozina, adenina i uracilul. n lanul ribonucleotidic al moleculei de ARN, raportul A/U i G/C nu mai este 1, ntruct nu exist un lan complemantar ca i la AND. Cantitatea de ARN spre deosebire de cea de AND, variaz de la o celul la alta i chiar n cadrul aceleiai celule, n funcie de intensitatea procesului de biosintez a proteinelor la un moment dat. Exist diferite tipuri de ARN n celule: ARN ribozomal (ARNr), ARN de transfer (ARNt), i ARN mesager (ARNm), cu structuri caracteristice. Toi au n comun aceeai structur primar iar structura secundar i teriar este specific fiecrui tip de ARN, i anume difer prin masa molecular, coeficieni de sedimentare, stabilitate.

48

Tema nr. 5 VITAMINE

Uniti de nvare : Vitamine liposolubile Vitamine hidrosolubile Obiectivele temei : Cunoaterea aspectelor biochimice privind clasificarea, structura i proprietile vitaminelor Analizarea corelatiei structur, proprieti, rol biochimic. Cunoaterea principalelor vitamine naturale Timpul alocat temei : 4 ore Bibliografie recomandat : 1. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 2. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 3. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 4. Leninger A.L., Biochimie, 1992, vol. II , Ed. Tehnic, Bucureti 5. Marinescu G., Glodeanu E., 1995- Biochimie General, Ed. Universitaria, Craiova

5.1. Vitamine liposolubile

Vitaminele sunt o categorie de substane care se gsesc n organism n cantiti foarte mici i sunt indispensabile pentru reglarea proceselor metabolice. Vitaminele sunt sintetizate de organismele vegetale i numai n mic msur de cele animale. Animalele i procur vitaminele din hran. Deoarece vitaminele nu se pot depozita, organismele animale au nevoie permanent de vitamine. Acestea nu au rol plastic sau energetic ci regleaz i stimuleaz principalele procese metabolice. Majoritatea vitaminelor alctuiesc coenzime sau cofactori ai unor enzime. Lipsa sau insuficiena vitaminelor din organism determin tulburri metabolice i apariia unor boli (avitaminoze, hipovitaminoze) care constituie boli careniale. n plante i animale s-au identificat unele substane organice care au o aciune fiziologic i biochimic opus vitaminelor. Aceste substane se numesc antivitamine i acioneaz n dou moduri: sunt analogi structurali ai vitaminelor dar nu posed activitatea biologic a vitaminelor sau au structur diferit dar acioneaz asupra vitaminelor inactivndu-le. Reinem: Vitaminele au structuri chimice foarte variate. Din aceast cauz ele nu s-au clasificat conform structurii i s-a fixat drept criteriu de clasicare solubilitatea. Din punct de vedere al solubilitii, vitaminele se grupeaz n vitamine hidrosolubile (cele cu molecule polare, solubile n ap) i vitamine liposolubile (cele cu molecule nepolare) solubile n grsimi. Vitamine liposolubile Vitaminele liposolubile sunt substane solubile n grsimi, n solveni organici i insolubil n ap. Din aceast grup fac parte vitaminele A, D, E, K i F. 49

Vitamina A (Retinol) Vitaminele A se gsesc n natur att ca atare ct i ca provitamine. Reinem: Se cunosc vitaminele A1 (retinol) i A2 (dehidroretinol). Cea mai important este vitamina A1, vitamina antixeroftalmic sau vitamina creterii. Vitamina A2 se gsete frecvent n petii de ap dulce. Vitamina A1 pur este o substan de culoare galben, cristalizat iar vitamina A2 este un ulei galben.. i vitamina A1 i vitamina A2 sunt autooxidabile, termostabile n absena aerului, sensibile la aciunea oxidanilor i a luminii n special a radiaiilor UV. n regnul vegetal, vitaminele A se gsesc predominat sub form de provitamine. Provitaminele A sunt carotenoizii , i din care la nivelul peretelui intestinal are loc formarea vitaminelor A printr-o scindare oxidativ n prezena enzimei carotinaz. Observaie: Vitaminele A au un rol important n creterea organismelor tinere, n protejarea esuturilor epiteliale i n procesul vederii. n avitaminoz A se oprete creterea organismelor tinere, se produc dereglri ale esuturilor epiteliale, din tubul digestiv, din aparatul respirator i aparatul urogenital. Se produc tulburri oculare i apare xeroftalmia (orbul ginilor) Lipsa vitaminei A n organismul omului determin incapacitatea de regenerare a rodopsinei (purpura retinian) urmat de tulburri oculare specifice, cum sunt pierderea vederii crepusculare sau tulburri de adaptare a vederii la ntuneric. Vitamine D Ca i vitaminele A, vitamina D are mai multe vitamine i mai multe provitamine D. Ele se gsesc n natur mai ales n regnul vegetal. Reinem: Din punct de vedere structural, provitaminele D sunt steroli care difer ntre ei prin catena lateral fixat n poziia 21. Transformarea sterolilor n vitamine D se face n piele i esutul subcutanat sub aciunea energiei solare, a radiaiilor UV (256-313nm) printr-un proces fotochimic cu consum de energie. Vitaminele D sunt termostabile i rezistente la aciunea oxigenului. n cantitate mai mare se gsesc n uleiul de pete, ficat, unt, ou, lapte, piele, drojdie de bere. Observaie: Vitaminele D se mai numesc i antirahitice, deoarece previn i vindec rahitismul. Vitaminele D favorizeaz absorbia calciului i a fosforului i formarea sistemului osos. n avitaminoze D apare rahitismul la copii i osteoporoza i osteomalacia la aduli. Osteomalacia se manifest prin nmuierea oaselor, micorarea lor n volum i deformarea lor. Osteoporoza se caracterizeaz prin rarefierea sitemului osos. Excesul de vitamine D duce la demineralizare oaselor i apariia calculilor (renali, hepatici, etc) Vitamine E (Tocoferoli) Vitamina E se mai numete i tocoferol. Aceste nume este legat de principala ei funcie biologic de a favoriza fertilitatea (n grecete tokos = natere i pherin = a purta) . Tocoferolii sunt sintetizai n plante i se gsesc n frunze, uleiuri vegetale, semine n stare de germinaie. Reinem: Tocoferolii sunt derivai ai benzopiranului, numit croman. Se cunosc mai muli tocoferoli, notai cu litere greceti , , , etc., toi avnd ca structur de baz tocolul. Tocoferolii intervin n n procesul de fertilitate, asigurnd la masculi formarea spermatozoizilor iar la femele influeneaz favorabil procesul de gestaie. Se mai numete vitamina antisterilitii deoarece la animale lipsa vitaminei E duce la sterilitate. Vitamina E stimuleaz biosinteza proteinelor i manifest activitate antioxidant,
50

protejnd mpotriva oxidrii acizii grai nesaturai, carotenoizi, retinolii. Avitaminoza E determin la om i animale scderea capacitii de reproducere, sterilitate, dereglri metabolice, decalcefiere, slbirea rezistenei organismului la infecii, stri nervoase. De asemenea apar tulburri la nivelul ficatului i al glandelor suprarenale. Vitamine K Vitaminele K se mai numesc vitamine antihemoragice sau vitamine pentru coagularea sngelui. Lipsa lor din organism, la om i animale duce la hemoragii. Vitaminele K sunt sintetizate numai de plante i de microorganismele din tubul digestiv. Aceast flor intestinal constituie o surs important de vitamina K pentru organismul animal. Reinem: Nucleul de baz al vitaminelor K este format din 1,4naftochinon substituit. Ca i celelalte vitamine liposolubile, vitamina K are mai multe vitamine cu structuri chimice asemntoare. Mai importante sunt vitaminele K1, izolat din vegetale i K2 izolat din esuturi animale i bacterii intestinale. Cea mai important funcie a vitaminei K n organism este implicarea ei n procesul coagulrii. Este implicat n biosinteza protrombinei i a altor factori de coagulare, biosintetizai n ficat sub forma unor precursori inactivi, care sunt activai prin intervenia vitaminei K.

TEST DE EVALUARE 1. Care sunt provitaminele A naturale? Rspuns Provitaminele A sunt carotenoizii , i din care la nivelul peretelui intestinal are loc formarea vitaminelor A printr-o scindare oxidativ n prezena enzimei carotinaz. 2. Ce sunt provitaminele D din punct devedere structural? Rspuns

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care este numele dat vitaminei K datorit aciunii sale? a) vitamina antixeroftalmic sau vitamina creterii. b) antirahitice c) vitamina antisterilitii d) vitamine antihemoragice e) vitamina antipelagroas Rezolvare: d De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele proprieti sunt prezentate de vitamina D? a) au un rol important n creterea organismelor tinere i n procesul vederii. b) favorizeaz absorbia calciului i a fosforului i formarea sistemului osos.
51

c) in avitaminoze D apare rahitismul la copii i osteoporoza i osteomalacia la aduli. d) intervin n n procesul de fertilitate, e) cea mai important funcie n organism este implicarea ei n procesul coagulrii. Rezolvare:

5.2 Vitamine hidrosolubile Complexul B n grupul vitaminelor B intr mai multe substane cu structur chimic diferit. Vitaminele B intr ca atare sau puin modificate n structura enzimelor alctuind coenzime sau grupri prostetice. Din grupa vitaminelor B fac parte: vitamina B1, B2, B12, acidul pantotenic, nicotinamida, acidul paraaminobenzoic, acizii pteroilglutamici, biotina, mezoinozitolul, etc. Drojdia de bere i cortexul cerealelor conin n cantitate mare vitamine din complexul B. . Vitamina B1 (tiamina) Vitamina B1 se mai numete tiamin, aneurin sau vitamin antiberiberic. Majoritatea microorganismelor sunt capabile s o sintetizeze total iar cteva specii vegetale primesc tiamina de la organismele simbiotice. Vertebratele, ciupercile i unele microorganisme sunt incapabile de sintez. Vitamina B1 se gsete n drojdia de bere, seminele cerealelor i leguminoaselor, n cojile de orez, frunze, flori, polen, etc. Reinem: Vitamina B1 este format dintr-un nucleu pirimidinic i unul tiazolic unite printr-o grupare metilenic. Principala funcie a vitaminei B1 este cea de coenzim, sub form de tiaminpirofosfat (TTP), pentru enzimele participante la metabolizarea -cetoacizilor i -cetolilor. Lipsa vitaminelor B1 din hran produce la animale polinevrit iar la om se manifest prin tulburri ale sistemului nervos, pierderea apetitului, oboseal, tulburri gastrointestinale. Boala beri-beri apare n cazul avitaminozelor prelungite. Ea se manifest prin tulburri pshihice, digestive, nervoase, cardiace. Vitamina B2 (lactoflavina, riboflavina) Vitamina B2 se mai numete i riboflavin datorit structurii sale de flavin (pigment galben). Reinem: Vitamina B2 este format dintr-un nucleu izoaloxazinic i din ribitol. n organism riboflavina formeaz cu ATP dou flavinnucleotide numite flavinmononucleotid (FMN) i flavinadenindinucleotid (FAD). Vitamina B2 se gsete n aproape toate celulele vegetale i animale att n form liber ct i sub forma celor dou coenzime nucleotidice. La mamifere ficatul, rinichiul, inima, splina i creierul sunt organele n care riboflavina se gsete n cantitate mare. De asemenea cantiti importante se gsesc n ficatul petilor, retin, glandele lacrimale i lacrimile mamiferelor. n cazuri de avitaminoz, organismele au o slab rezisten la infecii, se produc dereglri ale epidermei, cderea prului, conjunctivite. Nicotinamida (Vitamina PP) Vitamina PP este vitamina antipelagroas (pellagra preventiae). Numele de niacin corespunde structurii chimice de niacin, acid nicotinic. Aceeai aciune vitaminic antipelagroas o are i amida acidului nicotinic, nicotinamida sau niacinamida. Vitamina PP se gsete n trele cerealelor, ciuperci, lapte, ficat. Ambele substane sunt vitamine PP. Formele active ale

52

vitaminei PP sunt cofactorii NAD + i NADP+ implicai n marea majoritate a reaciilor de oxido-reducere din organismele vii. Carena de vitamin PP duce la simptome caracteristice bolii numite pelagr. Pelagra apare n urma unui consum ndelungat de porumb sau in urma unui consum excesiv de alcool i melas. Simptomele acestei boli cuprind leziuni ale pielii, mucoaselor, afeciuni ale sistemului nervos central i periferic i degenerescen hepatic gras. Ca simptome caracteristice sunt dermatita, diareea i demena, simptomele celor trei "D". Necesarul zilnic de vitamina PP este de 15 mg. Vitamina B6 Numele de piridoxin corespunde structurii chimice a vitaminei B6 deoarece ea este un alcool cu inel piridinic. Se mai numete adermin sau vitamina antipelagroas a obolanului. Reinem: Cele mai importante sunt piridoxina, piridoxalul i piridoxamina. Aceste trei substane sunt mult rspndite n natur, de obieci mpreun i se pot transforma reciproc una n alta. Toate formele vitaminei B6 sunt fotosensibile. Vitaminele B6 sunt larg rspndite n organismele vegetale i animale. Ca toate vitaminele complexului B se gsete n cantiti mari n drojdia de bere. Cantiti importante se afl i n coaja bobului de orez, polen, seminele cerealelor, ficatul animalelor, pete, glbenuul de ou. Lptiorul de matc este foarte bogat n piridoxin (5000g/g) i n alte vitamine ale complexului B. n stri careniale se produc modificri cutanate, tulburri nervoase, anemie. In cauza abundenei vitaminei n alimente i a biosintezei acesteia de ctre flora intestinal, stri de caren se evidenaiz rar. Pentru unele microorganisme vitaminele B6 constituie factori de cretere. Vitamina B12 Vitamina B12 ndeplinete rol de vitamin antipernicioas pentru om i este factor de cretere pentru microorganisme. Are o importan deosebit n cretere, hematopoez i funcionarea celulei nervoase. Reinem: Se mai numete cianocobalamin, datorit structurii chimice, fiind format dintr-un nucleu porfirinic care conine central un atom de cobalt i o grupare cian, grupri metilice i amidice legate de nucleii pirolici, un nucleu dimetilbenzoimidazolic, riboz, acid fosforic i alcool izopropilic. Rolul biochimic i fiziologic al vitaminei B12 este ndeplinit de coenzima B12. Aceasta particip drept coenzim n procesele de carboxilare, la biosinteza hemului, la biosinteza ADN, n biosinteza proteinelor i lipidelor. Carena n vitamina B12 produce anemia pernicioas, demineralizri ale sistemului nervos i ntrzieri n creterea organismelor tinere. Necesarul zilnic de vitamina B12 este de 30mg. Acidul pantotenic (Vitamina B3) Acidul pantotenic poart acest nume (n grecete, pan = tot, peste tot) pentru c este foarte rspndit n esuturile vegetale i animale cu toate c nu este sintetizat dect de plante i microorganisme. n cantitate mai mare se gsete n lptilorul de matc, fina de fasole, soia, drojdia de bere, arahide, migdale. Observaie: Principalul rol al acidului pantotenic este cel de component al coenzimei A. Coenzima A particip la numeroase procese biochimice fundamentale, att de biosintez ct i de degradare. La om nu a fost evideniat o avitaminoz provocat de acidul pantotenic, aceasta explicndu-se probabil prin faptul c se gsete n aproape toate alimentele i pentru c este sintetizat i n organism de flora 53

intestinal. Strile de hipovitaminoz care se pot instala, sunt de cele mai multe ori datorate unei policarene generale sau alterrii capacitii de absorbie intestinal. Necesarul zilnic pentru omul adult este de 4-5mg. Biotina Unele organisme necesit n mediul de cultur prezena unor factori de cretere denumii bios. Ulterior s-a constatat c biosul este alctuit din mai multe substane printre care i un grup de trei vitamine hidrosolubile: mezoinozitolul, biotina i acidul pantotenic. Aceste trei vitamine sunt i factori de cretere pentru animalele superioare. n structura biotinei intr un ciclu tetrahidrotiofenic substituit. Exist dou biotine naturale i cu activitate vitaminic. Biocitina reprezint forma vitaminic natural cea mai activ i mai rspndit. Biotina are un rol important n creterea i funcionarea normal a organismelor animale i vegetale, intervenind n metabolismul glucidelor, lipidelor i proteinelor, precum i n metabolismul energetic, face parte din structura unor sisteme enzimatice implicate n biosinteza acizilor grai i a unor aminoacizi i glucide. Este factor de cretere pentru drojdii i numeroase microorganisme. Biotina are capacitatea de a lega peptide i proteine, formnd complexe stabile care nu se absorb la nivelul intestinului. Observaie: Un exemplu este complexul inactiv biotinavidin format cu avidina din albuul de ou. Hipovitaminoza cauzat de insuficiena alimentar a biotinei este foarte rar. Strile de caren biotinic sunt bine descrise i sunt cunoscute sub numele "sindromul deficitului carboxilazic", manifestate prin: dermatite, leziuni cutanate, micri insuficient coordonate. Acizii folici (acizi pteroilglutamici) Acizii folici sunt cofactori eseniali hidrosolubili, produi de organismele vegetale. Grupul generic al "acizilor folici" este constituit dintrun complex de vitamine, corelate din punct de vedere structural cu acidul pteroilglutamic. Au aciune hematopoetic i leucopoetic dar se difereniaz prin aciunea specific pe care o au asupra diferitelor specii de animale i microorganisme. Din acest grup fac parte acidul folic i derivaii si acidul folinic, acidul tetrahidrofolic, acidul dihidrofolic, vitaminele U. Acidul folic este larg rspndit n natur, att n esuturile vegetale ct i animale. Simptomul deficienei n folai este anemia megaloblastc care se caracterizeaz prin apariia de celule gigantice i a unor eritrocite imature, n mduva spinrii. Ca efecte secundare apar ulceraii, infecii, tulburri gastrointestinale, neuropatii periferice. Dintre toate acestea cele mai caracteristice sunt modificrile hematologice. Acidul para-aminobenzoic (PABA) Acidul para-aminobenzoic se numete i vitamina H. Este un factor de cretere pentru numeroase microorganisme. Este sintetizat de flora intestinal n cantiti suficiente pentru om. Se gsete liber sau combinat cu anumii aminoacizi sau n structura acizilor folici. Acidul p-aminobenzoic la animale previne depigmentarea pielii i a prului. Se presupune c are o aciune antiinfecioas general. Vitamina C Vitamina C, acidul ascorbic este una din cele mai cunoscute vitamine. Are o larg rspndire n natur fiind biosintetizat att de organismele vegetale, animale (cu excepia omului, maimuei i cobaiului) ct i de numeroase microorganisme. Se gsete n stare liber i asociat cu proteinele, formnd un complex protein-acid ascorbic, numit ascorbigen, care servete ca

54

rezerv. Se gsete n toate plantele, iar n cantitate mai mare se afl n fructele citrice, mcee, coarne, coacze negre, ctin, nuci necoapte, mere. Reinem: Acidul ascorbic este lactona acidului 2,3-dienol-L-gulonic, are formula brut C6H8O6, i are 4 atomi de hidrogen mai puin dect o hexoz. Este o substan optic activ, dextrogir. Vitamina C are activitate antiinfecioas activnd sistemul imun al organismului. Acidul ascorbic stimuleaz rspunsul imun al leucocitelor i aprarea antibacterian prin creterea mobilitii acestor celule i prin protecia membranei acestora fa de ageni oxidani. Acidul ascorbic i acidul dehidroascorbic formeaz n celule un sistem redox foarte important, care ia parte n numeroase procese metabolice din organism.
O HO C C O -2H + O C O C C C CH CH2OH O

HO C HC HO CH CH2OH

+2H + O O HO

Acid L ascorbic

Acid dehidro-L-ascorbic

Acest sistem regleaz potenialul de oxidoreducere celular i contribuie la transportul hidrogenului pe cale neenzimatic. Vitamina C are un rol important n stimularea sau inhibarea unor sisteme enzimatice, n lanul oxidrilor celulare. Are o aciune antioxidant de aprare a vitaminelor liposolubile i a glutationului. Observaie: n avitaminoz se produce la om boala numit scorbut, caracterizat prin hemoragii la nivelul gingiilor, apariia de hematoame, tulburri digestive, anemie, stare de subfebrilitate, etc. n stadiu mai avansat al scorbutului apar cangrene, hemoragii viscerale, necroze osoase. Necesarul zilnic de vitamina C pentru un adult este de 50-100mg.

TEST DE EVALUARE 1. Care este, n celule, rolul sistemului redox acid ascorbic/acid dehidroascorbic? Rspuns Acest sistem ia parte n numeroase procese metabolice din organism, regleaz potenialul de oxidoreducere celular i contribuie la transportul hidrogenului pe cale neenzimatic.

2. Care este principalul rol al acidului pantotenic? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care este numele dat vitaminei B1 datorit aciunii sale?
55

a) se mai numete tiamin, aneurin sau vitamin antiberiberic. b) este vitamina antipelagroas (pellagra preventiae) c) se mai numeste piridoxamina sau piridoxal. d) este vitamina antipernicioas e) vitamina antixeroftalmic Rezolvare: a

De rezolvat: 2. Care dintre urmtoarele proprieti sunt caracteristice vitaminei C? a) principala funcie este aceea de coenzim, sub form de tiaminpirofosfat (TTP) b) formele active ale vitaminei sunt cofactorii NAD + i NADP+ c) formeaz n celule un sistem redox foarte important, d) se gsete n stare liber i asociat cu proteinele, formnd un complex protein-acid ascorbic e) protejeaz diferite substane contra agentilor oxidani Rezolvare Rezumatul temei
Vitaminele sunt o categorie de substane care se gsesc n organism n cantiti foarte mici i sunt indispensabile pentru reglarea proceselor metabolice. Vitaminele sunt sintetizate de organismele vegetale i numai n msur foarte mic de unele specii animale. Animalele i procur vitaminele din hran, fie n stare liber, fie sub form de provitamine, care n organism sunt transformate n vitamine. Acestea nu au rol plastic sau energetic ci intervin n reglarea i stimularea principalelor procese metabolice. Majoritatea vitaminelor alctuiesc coenzime sau cofactori ai unor enzime. Lipsa sau insuficiena vitaminelor din organism determin tulburri metabolice i apariia unor boli numite avitaminoze sau hipovitaminoze, care constituie boli careniale. n plante i animale s-au identificat unele substane organice care au o aciune fiziologic i biochimic opus vitaminelor, antivitamine care acioneaz n dou moduri: sunt analogi structurali ai vitaminelor dar nu posed activitatea biologic a vitaminelor sau au structur diferit dar acioneaz asupra vitaminelor inactivndu-le. Vitaminele au structuri chimice foarte variate, din aceast cauz s-a fixat drept criteriu de clasicare solubilitatea. Din punct de vedere al solubilitii, vitaminele se grupeaz n vitamine hidrosolubile (cele cu molecule polare, solubile n ap) i vitamine liposolubile (cele cu molecule nepolare) solubile n grsimi. O alt clasificare a vitaminelor se face dup mecanismul lor de aciune n vitamine cu funcie de coenzime i vitamine fr funcie de coenzime. Nomenclatura vitaminelor se poate stabili dup trei criterii: dup nomenclatura veche, dup rolul fiziologic i dup structura chimic. Vitaminele liposolubile sunt substane solubile n grsimi, n solveni organici i insolubil n ap. Din aceast grup fac parte vitaminele A, D, E, K, i F. Dintre vitaminele hidrosolubile amintim complexul B. Din grupa vitaminelor B fac parte: vitamina B1, B2, B12, acidul pantotenic, nicotinamida, acidul paraaminobenzoic, acizii pteroilglutamici, biotina, mezoinozitolul, colina, etc. Drojdia de bere i cortexul cerealelor conin n cantitate mare vitamine din complexul B. . 56

Tema nr. 6 ENZIME

Uniti de nvare : Generaliti despre enzime, structura i specificitatea enzimelor. Mecanisme generale de actiune i clasificarea enzimelor Obiectivele temei :
Cunoaterea aspectelor biochimice privind structura si specificitatea enzimelor; Studiul mecanismelor de actiune i criterii de clasificare a enzimelor; Utilizarea de metode i procedee specifice pentru determinarea activitii enzimatice

Timpul alocat temei : 2 ore Bibliografie recomandat : 1. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 2. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 3. Babeanu C., 2006, Biochimie metabolic, Editura Universitaria, Craiova 4. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 5. Dinu V., Trutia E., Cristea Popa E., Popescu A., 2002, Biochimie medical, Mic tratat, Ed Medical, Bucuresti, 6. Neamu G., Cimpeanu Ghe., Socaciu C., 1993- Biochimie Vegetal, Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti

6.1 Generaliti despre enzime, structura i specificitatea enzimelor.

Enzimele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice. Enzimele au un rol fundamental n reglarea proceselor metabolice din organism. Din punct de vedere chimic enzimele sunt proteine sau proteide cu rol funcional foarte important. Dup locul unde i manifest activitatea, enzimele se pot clasifica n exoenzime i endoenzime. Reinem: Enzimele au toate proprietile catalizatorilor utilizai n reaciile chimice: acioneaz n cantiti extrem de mici; nu se consum i nu se transform n reacia catalizat; catalizeaz reacii termodinamic posibile; nu modific starea final de echilibru a reaciilor ci doar orienteaz i mresc viteza reaciilor biochimice. Structura enzimelor Structura chimic de ansamblu a enzimelor reprezint un aranjament spaial macromolecular complex determinat de nivelurile de organizare structural ale proteinelor. Dup structur enzimele se clasific n dou categorii: - enzime de natur exclusiv proteic formate numai dintr-o holoproteid - enzime de natur heteroproteic, formate din dou componente, una de natur proteic, numit apoenzim i alta de natur neproteic numit coenzim. mpreun cele dou pri alctuiesc holoenzima. 57

Enzime cu structur proteic Enzime cu structur proteic sunt relativ puine. n cazul acestor enzime att legarea substratului ct i cataliza se realizeaz de ctre gruprile funcionale ale resturilor de aminoacizi. Se caracterizeaz, sub aspect structural prin existena anumitor zone, denumite situsuri, caracterizate printr-o anumit secven de aminoacizi i o conformaie caracteristic, zone care sunt eseniale pentru manifestarea activitii catalitice (situs catalitic) sau pentru funcia de reglare (situs alosteric). Observaie: n structura molecular a enzimelor exist anumite regiuni sau zone, formate dintr-un numr restrns de aminoacizi care se numesc situs catalitic sau situs activ. Substratul enzimelor (S) reprezint un compus chimic care se poate lega specific, la o enzim (E) . n urma aciunii enzimei substratul este transformat n produi (P)
E+S [ES] E+P

Substratul trebuie s prezinte o dispunere spaial bine definit care s-i permit accesul la molecula de enzim, s prezinte o complementaritate structural i conformaional, cu situsul catalitic al enzimei. Enzimele au capacitatea de a aciona preferenial numai asupra unor anumite substraturi, proprietate numit specificitate enzimatic. Unele enzime cu rol de reglare enzimatic, denumite enzime allosterice conin n molecula lor pe lng situsul catalitic i un al doilea situs numit situs allosteric. n aceste mecanisme prin interaciuni allosterice intervine un efector allosteric (activator sau inhibitor) care se leag la situsul allosteric i moduleaz tranziiile moleculei de enzim ntre diferite conformaii posibile pe care le poate lua, realizndu-se efectul de reglare Enzime de natur heteroproteidic Aceste enzime necesit pentru activitatea lor catalitic, prezena unor cofactori enzimatici (coenzime, grupri prostetice, metale) Centrul catalitic reprezint ansamblul gruprilor chimice active care particip efectiv la reacia catalizat. n cazul enzimelor holoproteice centrul catalitic este sinonim cu situsul catalitic. n cazul enzimelor heteroproteidice, care necesit pentru activitatea lor catalitic, prezena unor cofactori, centrul catalitic include situsul catalitic i regiunea din molecul la care se ataeaz cofactorul (coenzima i/sau metal). Centrul activ = situs catalitic + coenzim + metal Apoenzime i cofactori enzimatici Pentru funcia catalitic a enzimelor sunt determinante structura i organizarea spaial a moleculei proteice care poart situsul catalitic. La unele enzime, proprietile catalitice sunt date de interacia i cooperarea dintre componenta proteic i anumite micromolecule sau ioni metalici numii cofactori. Apoenzima sau cofactorul separat sunt inactive catalitic. Ele formeaz un complex molecular enzim-cofactor denumit holoenzim, complex cu activitate catalitic. Cofactorul este indispensabil activitii catalitice a enzimei iar n unele cazuri o poteneaz. S-a observat c specificitatea este determinat n totalitate de apoenzime n timp ce coenzimele sunt gruprile responsabile n cea mai mare parte de transformarea chimic. Apoenzim + cofactor = holoenzim 58

Cofactori enzimatici Reinem Termenul cofactor se utilizeaz pentru totalitatea compuilor neproteici din structura heteroenzimelor. Termenul coenzim se utilizeaz numai pentru componentele neproteice de natur organic care se leag prin legturi foarte slabe, labile de apoenzime i care sunt uor disociabile de aceast.Termenul de grupare prostetic se utilizeaz tot pentru cofactori de natur organic dar care se leag de apoenzime prin legturi puternice, inclusiv covalente. Sisteme multienzimatice n cazul unor ci metabolice toate enzimele care catalizeaz reacii individuale sunt asociate n form de complexe multienzimatice. Enzimele sunt fixate prin legturi slabe, ntr-o ordine corespunztoare intrrii lor n aciune, pe o protein central. Se asigur pe ansamblu o vitez mai mare dect cea corespunztoare aciunii enzimelor neasociate. Izoenzime Reinem: O parte din enzimele care au structur cuaternar se prezint sub mai multe forme moleculare. Pentru o enzim dat, formele moleculare sub care ea apare se numesc izoenzime. Toate izoenzimele unei enzime catalizeaz aceeai reacie i i au originea n aceeai celul, esut sau lichid biologic dintr-un anumit organism. Izoenzimele prezint configuraii spaiale diferite i se deosebesc ntre ele printr-o serie de proprieti fizicochimice (mobilitate electroforetic, compoziie n aminoacizi, cinetic de reacie, tipuri de inhibiie). Observaie: Izoenzimele apar din diferene determinate genetic, n structura primar a enzimei respective. Nu pot fi considerate izoenzime acele forme moleculare rezultate prin modificarea aceleiai structuri primare. Specificitatea enzimelor O proprietate remarcabil a enzimelor este nalta lor specificitate. O enzim are capacitatea de a selecta numai un substrat sau un numr limitat de substraturi asupra crora acioneaz condiionnd o reacie bine definit. Enzimele prezint o specificitate dubl: specificitate de substrat i specificitate de aciune. Specificitatea de substrat Specificitatea de substrat este o proprietate caracteristic enzimelor i const n capacitatea lor de a aciona preferenial numai asupra unui anumitor substraturi. Aceast specificitate include mai multe tipuri: Specificitate absolut Enzima acioneaz strict asupra unui anumit substrat: de exemplu enzima ureaza acioneaz numai asupra ureei ca substrat. Ca variante ale specificitii absolute sunt stereospecificitatea i specificitatea geometric. Specificitate relativ de grup Enzima acioneaz asupra unui grup de substane care au o constituie chimic asemntoare i care conin acelai tip de legtur chimic. Specificitate absolut de grup Enzimele care prezint acest tip de specificitate catalizeaz reacia unui grup de substrate care conin acelai tip de legtura dar i o anumit structur a unei pri din substrat. Specificitate de aciune Enzimele, n funcie de specificitatea lor pentru substrat i de modul de aciune asupra acestuia, catalizeaz un anumit tip de reacie, bine

59

determinat. Un substrat sub aciunea unor enzime care catalizeaz reacii diferite formeaz produi diferii de reacie.

TEST DE EVALUARE 1. . Cum se clasific enzimele dup structura lor chimic? Rspuns: Dup structur enzimele se clasific n dou categorii: enzime de natur exclusiv proteic formate numai dintr-o holoproteid; enzime de natur heteroproteic, formate dintr-o component de natur proteic si o component de natur neproteic numit coenzim. 2. Ce este specificitatea enzimatic? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care dintre urmtoarele proprieti aparin izoenzimelor? a) toate izoenzimele unei enzime catalizeaz aceeai reacie b) i au originea n aceeai celul, esut sau lichid biologic c) se deosebesc ntre ele printr-o serie de proprieti fizico-chimice d) izoenzimele apar din diferene determinate genetic, e) forme moleculare rezultate prin modificarea aceleiai structuri primare. Rezolvare: a , b, c, d De rezolvat: 2. Ce reprezinta centrul catalitic in cazul unei enzime? a) n cazul enzimelor holoproteice centrul catalitic este sinonim cu situsul catalitic. b) reprezint ansamblul gruprilor chimice active care particip efectiv la reacia catalizat. c) centrul catalitic include situsul catalitic i regiunea din molecul la care se ataeaz cofactorul (coenzima i/sau metal) d) n cazul enzimelor heteroproteidice centrul catalitic este sinonim cu situsul catalitic. e) reprezint apoenzima sau cofactorul care separat manifest activitate catalitic Rezolvare:

60

6.2 Mecanisme generale de actiune i clasificarea enzimelor Mecanisme implicate n cataliza enzimatic
S-au emis diferite ipoteze cu privire la mecanismele de interaciune dintre enzim i subtrat. n orice reacie catalizat enzimatic formarea intermediarului enzim substrat, [ES] este obligatorie. Reinem: S-au elaborat dou modele implicate in cataliza enzimatic: Modelul clasic- lact-cheie consider c potrivirea substratului cu centrul activ al enzimei este analoag cu potrivirea "lact-cheie". Acest model presupune o rigiditate a structurii enzimei n zona centrului activ. Modelul centrului activ indus presupune o flexibilitate a zonei n care acesta se afl. n enzima liber centrul activ are o configuraie spaial uor diferit de cea necesar fixrii substratului. Apropierea substratului induce o modificare conformaional a zonei centrului activ realizndu-se configuraia optim fixrii. Observaie: Activatori enzimatici - Activatorii enzimatici influeneaz pozitiv activitatea enzimatic. Ei i pot exercita aciunea pe diferite ci n funcie de natura lor. Inhibitori enzimatici - Activitatea multor enzime este inhibat de compui chimici diveri. n sistemele vii asemenea compui pot fi de origine endogen (diferii metabolii) sau de origine exogen. Inhibiia enzimelor poate fi reversibil i ireversibil, aceasta din urm numindu-se inactivare. Inhibitorii enzimatici pot afecta fie situsul catalitic fie alt regiune a moleculei de enzim, n ambele cazuri legarea substratului fiind influenat.

Clasificarea i nomenclatura enzimelor Uniunea Internaional de Biochimie a decis la cel de-al III-lea Congres Internaional de Biochimie (Bruxelles, 1955) nfiinarea unei Comisii Internaionale de Enzimologie a crei sarcin era printre altele elaborarea unei clasificri i nomenclaturi a enzimelor i coenzimelor. n 1964 a fost adoptat oficial clasificarea i nomenclatura enzimelor. Reinem: n funcie de tipul de reacie pe care l catalizeaz, enzimele se clasific n ase mari clase: 1.oxidoreductaze 2. transferaze 3. hidrolaze 4. liaze 5. izomeraze 6.ligaze sau sintetaze Enzimele reunite ntr-o anumit clas sunt ulterior clasificate n subclase, i subsubclase n funcie de unele detalii privind gruprile chimice asupra crora acioneaz, cofactorii implicai n reacia respectiv. Fiecare enzim este caracterizat de un cod numeric format din patru cifre, care conine informaii despre enzima respectiv. Prima cifr din cod indic apartenena la una din cele ase mari clase de enzime. A doua cifr din codul enzimei indic subclasele care sunt alctuite dup criterii caracteristice fiecrei clase (natura substratului transformat, tipul legturii scindate, natura gruprii transferate, etc. Pentru unele enzime se utilizeaz denumiri empirice, uzuale. Astfel denumirea multor enzime rezult prin adugarea sufixului az la numele substratului, exemplu: maltaz are ca substrat maltoza, ureeaza are ca substrat ureea.
61

TEST DE EVALUARE 1. Ce sunt activatorii enzimatici? Rspuns Activatorii enzimatici influeneaz pozitiv activitatea enzimatic i i pot exercita aciunea pe diferite ci n funcie de natura lor. 2. Care este clasificarea enzimelor n funcie de tipul de reacie pe care l catalizeaz? Rspuns:

Exerciii. Exemplu rezolvat: 1. Care din urmtoarele afirmaii privitoare la modul de actiune al enzimelor sunt adevrate ? a) n orice reacie catalizat enzimatic formarea intermediarului enzim substrat, [ES] este obligatorie. b) modelul clasic: lact-cheie presupune o rigiditate a structurii enzimei n zona centrului activ. c) modelul clasic: lact-cheie presupune o flexibilitate a structurii enzimei n zona centrului activ. d) modelul centrului activ indus presupune o flexibilitate a zonei n care acesta se afl e) inhibitorii enzimatici pot afecta fie situsul catalitic fie alt regiune a moleculei de enzim, n ambele cazuri legarea substratului fiind afectat Rezolvare: a, b, d, e De rezolvat: Care dintre afirmaiile urmtoare sunt adevrate in cazul mecanismului centrului activ indus? a) n enzima liber centrul activ are o configuraie spaial uor diferit de cea necesar fixrii substratului. b) apropierea substratului induce o modificare conformaional a zonei centrului activ realizndu-se configuraia optim fixrii. c) formarea complexului ES se realizeaz prin legarea esteric a substratului la la situsul alosteric al enzimei d) mecanismul se bazeaz pe complementaritatea structural reciproc intre molecula de substart si enzim e) potrivirea riguroas a substratului la situsul catalitic in enzima liber conduce la formarea complexului ES Rezolvare:

62

Rezumatul temei
Enzimele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice. Dup structur se mpart n dou categorii: enzime de natur exclusiv proteic i enzime de natur heteroproteic . Enzimele de natur exclusiv proteic se caracterizeaz prin existena anumitor zone (situsuri) caracterizate printr-o anumit secven de aminoacizi i o conformaie caracteristic, care sunt eseniale pentru manifestarea activitii catalitice (situs catalitic) sau pentru funcia de reglare (situs alosteric). Enzimele de natur heteroproteic necesit pentru activitatea lor catalitic, prezena unor cofactori enzimatici. Enzimele au capacitatea de a aciona preferenial numai asupra unor anumite substraturi, proprietate numit specificitate enzimatic. O enzim are capacitatea de a selecta numai un substrat sau un numr limitat de substraturi asupra crora acioneaz condiionnd o reacie bine definit. Enzimele prezint o specificitate dubl: specificitate de substrat i specificitate de aciune. S-au emis diferite ipoteze cu privire la mecanismele de interaciune dintre enzim i substrat. n orice reacie catalizat enzimatic formarea intermediarului enzim substrat, [ES] este obligatorie. S-au elaborat dou modele implicate in cataliza enzimatic: Modelul clasic-lact-cheie consider c potrivirea substratului cu centrul activ al enzimei este analoag cu potrivirea "lact-cheie". Modelul centrului activ indus presupune o flexibilitate a zonei n care acesta se afl. n enzima liber centrul activ are o configuraie relaxat, diferit de cea necesar fixrii substratului. Apropierea substratului induce o modificare conformaional a zonei centrului activ realizndu-se configuraia optim fixrii. n funcie de tipul de reacie pe care l catalizeaz, enzimele se clasific n ase mari clase: 1.oxidoreductaze; 2. transferaze; 3. hidrolaze; 4. liaze; 5. izomeraze; 6.ligaze sau sintetaze Enzimele reunite ntr-o anumit clas sunt ulterior clasificate n subclase, i subsubclase n funcie de unele detalii privind gruprile chimice asupra crora acioneaz.

63

TEST RECAPITULATIV 1. Monoglucidele prezinta izomerie: a) geometric b) de caten c) optic d) de functiune e) anomerie 2. Dezoxiglucidele sunt derivati ai monozaharidelor care au : a) o grupare OH inlocuit cu NH2 b) o grupare OH inlocuit cu H c) o grupare H inlocuit cu OH d) o grupare OH inlocuit cu COOH e) o grupare C=O inlocuit cu NH2 3. Amidonul este: a) substan cu rol informaional b) substan de rezerv c) substan de structur d) eter al glucozei cu alcooli e) ester al glucozei cu acizi 4. Oxidarea blnd a glucozei formeaz: a) amestec de acizi zaharici b) acizi uronici c) acizi aldonici d) acizi nucleici e) amestec de acizi grasi 5. Lipidele simple sunt: a) gliceride, fosfatide, etolide, cerebrozide b) ceride, fosfatide, gliceride, etolide, c) gliceride, etolide, steride, ceride d) gliceride, fosfatide, sfingolipide e) gangliozide, gliceride, ceride 6. Apartenena la seria D i L se refer la: a) sensul de rotatie al luminii polarizate b) configuraia atomului de carbon asimetric cel mai indepartat de gruparea carbonil c) att in funcie de sensul de rotatie al luminii polarizate ct i de configuraia atomului de carbon asimetric cel mai indepartat de gruparea carbonil d) configuratia fiecrui atom de carbon asimetric e) ) configuraia atomului de carbon asimetric cel mai apropiat de gruparea carbonil 7. Dintre cele trei structuri prezentate mai jos structura D(-) fructofuranozei este:
H2 C C HO H H C C C H2C OH H OH HO O H H OH H2 C C C C C H2 C OH O H OH OH OH HO H H H2 C C C C C H2C H OH O OH OH

64

a) 1 si 3

b) 2 si 3

c) 1 si 2

d) 1

e) 3

8. Urmtoarea structur reprezint:

CH 2OH H H OH HO H OH H OH H OH H H CH 2OH H

O
H H

HO

a) maltoz b) celobioz c) zaharoz d) lactoza e) galactoza 9. La hidroliza bazic a grsimilor alturi de glicerin rezult: a) spun b)amestec de sruri de sodiu ale acizilor grai c) acizi grai liberi d) lipide complexe e) lecitine 10. Monoglucidele sunt compusi care au in molecula lor: a) o grupare carbonil si o grupare alcool b) o grupare carbonil si mai multe grupri carboxil c) mai multe grupri hidroxil i o grupare carbonil d) o grupare aldehidica sau cetonica si mai multe grupari hidroxil e) mai multe grupri hidroxil i o grupare amino 11. Structura secundar a unei proteine : a) este determinat de numrul, felul, proporia i secvena aminoacizilor constitueni; b) arat conformaia lanurilor polipeptidice c) reprezint formula chimic a proteinei d) este determinat de tipul fortelor care stabilizeaza protomerii e) arat conformaia lanurilor polinucleotidice 12. Din punct de vedere chimic acizii nucleici sunt formai din: a) o baz anorganic, o pentoz i acid fosforic b) o baz azotat si o pentoz c) o baz azotat, o pentoz i acid fosforic d) o baz anorganic, o molecula de glucid cu 6 atomi carbon i acid fosforic e) o baz organic, o molecula de glucid cu 6 atomi carbon i acid fosforic 13. O baz purinic de pe o caten ADN stabilete legturi de hidrogen intercatenare: a) numai cu o baz purinic de pe celalalt caten; b) numai cu o baz pirimidinic de pe celalalt caten; c) att cu o baz purinic ct i cu o baz pirimidinic de pe cealalt caten d) numai cu o pentoza de pe celalalt caten; e) att cu o baz purinic ct i cu o pentoza de pe cealalt caten 14. Molecula de ARN are: a) structur monocatenar b) structur dublu catenar c) structur n straturi pliate d) structura helicoidala e) structura care prezinta izomerie geometrica (cisd-trans) 65

15. Molecula de ADN are: a) structur monocatenar b) structur dublu catenar c) structur n straturi pliate d) structura helicoidala e) structura care prezinta izomerie geometrica (cisd-trans) 16. Urmatoarea formula reprezinta:
CH2 O COR | R -OCOCH O | CH2 OP OCH2 CHCOOH | | O + NH3

a) lecitina b) cefalina c) serinfosfatida d) acid fosfatidic e) sfingozina 17. Urmatoarea formula reprezinta:
CH2 OCOR | R OCO C- H O | CH2 O P - O CH 2 CH 2 NH 2 | OH

a) lecitina b) cefalina c) serinfosfatida d) acid fosfatidic e) sfingozina 18. Principalele nucleotide din structura ARN sunt: a) citidin-5' monofosfat (CMP) uridin 5'monofosfat (UMP), adenozin 5'-monofosfat (AMP) i guanozin-5' monofosfat (GMP) b) uridin-5'-monofosfat (UMP), adenozin-5'-monofosfat (AMP) i guanozin-5'-monofosfat (GMP) c) citidin-5' monofosfat (CMP) uridin 5'monofosfat (UMP), adenozin 5'-monofosfat (AMP) i timidin-5'-monofosfat (TMP) d) dezoxiuridin-5'-monofosfat (dUMP), dezoxiadenozin-5'-monofosfat (dAMP) i dezoxiguanozin-5'-monofosfat (dGMP) e) dezoxicitidin-5' monofosfat (dCMP) dezoxitimidin-5'monofosfat (dTMP), dezoxiadenozin-5'-monofosfat (dAMP) dezoxiguanozin5'monofosfat (dGMP) 19. Vitaminele sunt: a) substante de origine exogen indispensabile pentru cresterea si dezvoltarea vieuitoarelor b) substane care intervin in stimularea i reglarea principalelor procese metabolice c) substante care exercit rol de coordonare si reglare la nivelul intregului organism d) substante care in anumite conditii anuleaz sau suprim activitatea unei enzime e) substante care indeplinesc rol plastic si energetic

66

BIBLIOGRAFIE

6. Babeanu C., 2003, - Biochimie vegetal, Ed Universitaria, Craiova 7. Babeanu C., 2010, Biochimie. Manual universitar pentru nvmntul la distan. Editura Universitaria, Craiova 8. Babeanu C., 2006, Biochimie metabolica, Editura Universitaria, Craiova 9. Campbell P.N, Smith A. D., 2004- Biochimie ilustrat, Ed. Academiei Romane, Bucuresti 10. Cristea Popa E., Popescu A., Truia E., Dinu V., 1991, Tratat de biochimie medical, Ed Medical, Bucuresti 11. Dinu V., Trutia E., Cristea Popa E., Popescu A., 2002, Biochimie medical, Mic tratat, Ed Medical, Bucuresti 12. Dumitru I. F., Biochimie, 1980, Ed Didactic si Pedagogic, Bucuresti 13. Grban Z., 1999, Biochimie Tratat comprehensiv, vol I, ediia 2, Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti 14. Garban Z. 1981, Tratat elementar de biochimie, Ed Mirton Timisoara 15. Glodeanu E., 1997 - Biochimie Metabolica, Ed Gorjeanul 16. Leninger A.L., 1987, Biochimie, vol. I, Ed. Tehnic, Bucureti 17. Leninger A.L., 1992, Biochimie, vol. II , Ed. Tehnic, Bucureti 18. Marinescu G., Glodeanu E., 1995- Biochimie General, Ed. Universitaria, Craiova 19. Neamu G., Cimpeanu Ghe., Socaciu C., 1993- Biochimie Vegetal, Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti.

67