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TITULO: EXTRACCIN DE ADN NIVEL: ESO OBJETIVOS

Utilizar tcnicas sencillas de laboratorio, para extraer el ADN de un tejido animal. Comprobar la estructura fibrilar del ADN. Comprender las propiedades de ADN para su extraccin.

IDIOMA: CASTELLANO

FECHA:.

MATERIALES
-Higaditos de pollo -Mortero -Pipeta -Alcohol 96 -SDS (utilizaremos detergente concentrado) -Colador de tela -Eosina -Microscopio -Varilla de vidrio - Vasos de precipitado. - Probeta - Cloruro sdico 2M - Arena - Embudo - Agua - Portaobjetos y cubre.

METODOLOGA 1. Triturar medio higadito de pollo en un mortero. Aadir una cucharadita arena para que al triturar se puedan romper las membranas y queden los ncleos sueltos. 2. Aadir al triturado, 20 ml de agua. Remover hasta hacer una especie de papilla o pur. 3. Filtrar varias veces para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper. 4. Medir el volumen del filtrado con una probeta. 5. Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro sdico 2M. Con esto conseguimos producir el estallido de los ncleos para que queden libres las fibras de cromatina. 6. Aadir 1 ml de SDS. La accin de este detergente es formar un complejo con las protenas y separarlas del ADN. As nos quedar el ADN libre de las protenas que tiene asociadas. 7. Aadir mediante una pipeta 50 centmetros cbicos de alcohol de 96. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita el ADN. 8. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma direccin. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupacin de muchas fibras de ADN. 9. Tomar una pequea muestra de las fibras y teir con eosina, aadiendo una gota del colorante y dejndolo reposar durante 10 minutos. Observar al microscopio. CUESTIONES
1. 2. 3. 4. 5. De qu est formada la cromatina? Para qu aadimos arena al triturado? Por qu crees que estallan los ncleos al aadir el cloruro sdico? Qu accin tiene el SDS sobre la cromatina? Realiza un dibujo de la observacin de las fibras al microscopio.

Juan Carlos Barber Luna

Dpto. Biologa y Geologa