BIOLOGIE DU VIH ___________________________

H. Faye-Kett

PLAN ___________________________
Des virus aux Rtrovirus
1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Les virus VIH

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Des virus aux Rtrovirus ___________________________

1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Dfinition ___________________________
Virus = structure entre lanim et linanim Parasite intracellulaire obligatoire des cellules eucaryotes ou procaryotes 1 seul type dacide nuclique Se reproduisant uniquement partir de linformation contenu dans leur gnome (rplication) Particule infectieuse : VIRION

Des virus aux Rtrovirus ___________________________

1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Structure ___________________________
Gnome : ARN ou ADN porte lintgralit de linformation gntique Capside : nature protique, coque qui protge le gnome, porte les sites antigniques chez les virus nus Enveloppe : nature lipido-glucidoprotique, sensibles aux dtergents, porte les sites antigniques chez les virus nus

Des virus aux Rtrovirus ___________________________

1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Caractres physico-chimiques ___________________________

Virus nus : rsistants dans le milieu extrieur = pidmiologie particulire Virus envelopps : fragiles, transmission particulire contact troit, direct, rapproch entre les individus, sensibles eau de Javel

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1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Caractres antigniques ___________________________

Antignes : substances qui dclenchent la rponse immunitaire quelle soit de type cellulaire ou de type humorale (AC+++) Antignes viraux : Capside : protines Enveloppe : Glucido-protique Protines non structurales

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1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Multiplication ___________________________
Virion : site au rcepteur cellulaire Cellule : permissivit, tropisme, spcificit dhte et de tissus = rcepteur spcifique Adhsion, pntration, dcapsidation, rplication/traduction, assemblage, libration ARN (cytoplasme), ADN (noyau)

Multiplication ___________________________
Interaction virus-cellules : virus ADN latence, infection chronique, oncognse Etapes de la multiplication : cibles pour les molcules antivirales Traitement antiviral : virus ADN (ADN polymrase) aucun effet sur le virus intgr sur le virus latent

Des virus aux Rtrovirus ___________________________

1 - Dfinition 2 - Structure 3 - Caractres physico-chimiques 4 - Caractres antigniques 5 - Multiplication 6 - Applications

Applications ___________________________
Structure : diagnostic direct (isolement, antignes viraux, gnome par PCR), diagnostic indirect (srologie, AC+++) Caractres physico-chimiques : pidmiologie, transmission Multiplication : Antiviraux Caractres antigniques : Vaccination

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Historique ___________________________
1981 : 5 cas de pneumonie P. carinii dcrit par le CDC 1983 : isolement du virus partir de ganglions de malades (VIH 1, groupe M) 1986 : Identification du VIH-2 en Afrique de louest 1991 : Identification du VIH-1 groupe O 1998 : Identification du VIH-1 groupe N (Cameroun)

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Taxonomie ___________________________
Famille : Retroviridae (Reverse transcriptase) Genre : Spumavirus Oncovirus (HTLV1 et HTLV2) Lentivirus (VIH1 et VIH2) SIV CPZ

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1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

VIH au microscope lectronique

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Structure ___________________________
Gnome : ARN 2 copies, accompagn de la rverse transcriptase Capside : symtrie cubique, Protines internes p24 Enveloppe : Gp120/Gp40

Structure du VIH

Gnome des VIH

Antignes ___________________________
Capside : protines internes p24/p25 Enveloppe : Gp120/Gp40 (Gp 160) anticorps recherchs au cours du dpistage Glycoprotine denveloppe Gp120 - Rgions constantes - Rgions variables (Boucle V3 pitope majeur de neutralisation impliqu dans le tropisme des virus pour les cellules cibles)

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Cycle de rplication du VIH

Cibles des antiviraux

Attachement Dcapsidation * Rverse transcriptase Dgradation ARN en ADN Intgration Transcription gne viral * Assemblage Libration CD4 solubles Aucune Analogues de nuclosides Inhibiteur de la Rnase H Inhibiteur intgrase Inhibiteur Tat Rev Antiprotases Interfrons

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Effets cytopathiques ___________________________

Cellules cibles * Lymphocytes T CD4/Monocytes macrophages * Tropisme macrophagique : cellules nerveuses, autres tissus * Macrophage : Rcepteur CCR-5 (chimiokines: Rantes, MIP1) * NSI : non syncitia inducing SI : synticia inducing

Effets cytopathiques ___________________________

Apoptose des cellules infectes et puisement du systme immunitaire = immunodpression SIDA Evolution variable : Long Term Non Progressors 10% des sujets infectes (gntiques, biologiques, sociaux, ge)

Biologie du VIH ___________________________

1 - Historique 2 - Taxonomie 3 - Morphologie 4 - Structure et antignes 5 - Multiplication et application 6 - Effets cytopathiques 7 - Variabilit

Variabilit du VIH ___________________________

Type (srotypage) : VIH1 VIH2 VIH1 : Groupes M sous types A J, recombinants (CRFO2-AG, CRF01-AE) O N VIH2 : sous types A - F

Patterns of HIV-1 subtypes in Africa

Senegal Mali Ivory Coast Niger Benin
G A A

Nigeria

Uganda Kenya Tanzania Ethiopia

D A C D C A

Chad Cameroon Gabon DRC

South-Africa Zambia
C C

Variabilit et diagnostic ___________________________

Variabilit de sous - groupe VIH 1 M O N Variabilit de sous types Tests diagnostiques : Sous types B et autres sous types

Variabilit et vaccin ___________________________

Difficults : Candidats vaccins (types de variabilit gographique et intrapatient .) Priode dessais (phase 1, phase 2, phase 3) Problmes thiques etc .

Mutants rsistants aux antiviraux ___________________________

Frquence dapparition * leve chez les virus ARN cause des erreurs de la polymrase * Utilisation dune seule molcule do association de molcules (Trithrapie) * Mauvaise observance du traitement Variabilit?

Diagnostic biologique _____________________________

Diagnostic direct :
Produits biologiques lymphocytes circulants (sang) : le sang est prlev dans un tube hparin et centrifug dans un gradient de Ficoll. GR dans le fond et plasma en surface.rcuprer les GB linterface GR plasma Sperme ou scrtions vaginales

lait maternel

Diagnostic biologique _____________________________

isolement viral. diagnostic de linfection chez les nouveau-ns de mre Sropositive dans un but de recherche (dterminer les phnotypes) * Coculture avec des lymphocytes de sujets sains. * Mise en vidence du virus ou de la multiplication virale par recherche de leffet cytopathogne (ECP) (syncitia) ou par dtection de lantigne P24 en ELISA : recherche de protine interne en ELISA) ou ADN polynerare ARN dpendant PCR

Diagnostic biologique _____________________________

Diagnostic direct Mise en vidence des antignes viraux Elle repose essentiellement sur la mise en vidence de lantigne P 24 (antignemie P 24) Sa sensibilit nest pas trs bonne. Elle met en vidence les virus libres. Elle ne permet pas de mettre en vidence les virus cellulaires. Elle ne permet pas non plus de mettre en vidence les virus complexs aux AC.. Techniques molculaires Mise en vidence du gnome viral PCR, RT PCR, NESTED PCR indications : nouveau-n de mre sropositive, charge virale, dtection des mutants rsistants

Diagnostic biologique _____________________________

Diagnostic indirect Diagnostic srologique tests de dpistage tests de confirmation tests de discrimination * Tests de dpistage : tests ELISA, 1ere, 2me et 3me gnration, 4me gnration * Test de confirmation : utilis est le Westtern-Blot NB : A lheure actuelle, on utilise les tests de 2me et 3me gnration qui sont beaucoup plus spcifique. Et ils peuvent permettre dviter lutilisation de tests de confirmation en zone de haute endmicit. * Tests de discrimination : pour distinguer le VIH1 du VIH2.

Diagnostic biologique _____________________________

STRATEGIE NATIONALE utiliser car la prvalence de laffection est > 10 % Transfusion sanguine
1 seul test suffit Objectifs : test trs sensibles qui va tous les positifs, y compris les faux +

Sujet symptomatique
1 seul test suffit Objectif : test trs spcifique

sujet asymptomatique
2 tests le premier est sensible et le 2me spcifique

Chez le nouveau-n, de mre sropositive

3 tests dont le premier sensible et les autres spcifiques, jusqu 2 ans.

Conclusion ___________________________
Pathognie : Multiplication pidmiologie : structure du virus Thrapeutique : Multiplication Diagnostic : Diversit gntique Vaccination : Type dantignes, Type de vaccin Virus le mieux connu == Espoir ++++