CONCEITOS CIENTFICOS

EM

DESTAQUE

Wilmo Ernesto Francisco Junior e Welington Francisco

A Bioqumica uma rea interdisciplinar que possui muitas interfaces com a Qumica. Entretanto, temas associados a ela dificilmente so abordados nas aulas de Qumica no ensino de nvel mdio. Um dos principais objetos de estudos da Bioqumica so as protenas, as biomolculas mais abundantes nos seres vivos. Com base nisto, neste artigo apresenta-se uma introduo aos conceitos bsicos sobre protenas, bem como um experimento simples para auxiliar a discusso de diversos conceitos qumicos, alm de sugestes de temas para debates em sala de aula. Bioqumica, protenas, experimentao

Recebido em 19/1/06, aceito em 9/10/06

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diferentes a cada aminocido, as cabastasse isso, as protenas assumem deias laterais so tambm responsuma diversidade de funes biolgiveis por foras estabilizadoras, advincas, com propriedades e atividades das de interaes fracas (ligaes de fantasticamente distintas, como em hidrognio, hidrofbicas, eletrostticas msculos, cabelos, unhas, penas de etc.), que mantm as pssaros, anticorpos Protenas so polmeros estruturas conformae uma srie de outros cujas unidades constituintes cionais enoveladas exemplos, cada qual fundamentais so os das protenas. exibindo um papel aminocidos. Os Os aminocidos biolgico caracteaminocidos, por sua vez, presentes nas molrstico. so molculas orgnicas culas de protenas so As protenas so que possuem ligadas ao ligados covalentepolmeros cujas unimesmo tomo de carbono mente uns aos outros dades constituintes um tomo de hidrognio, por uma ligao defundamentais so os um grupo amina, um grupo nominada de ligao aminocidos. Os carboxlico e uma cadeia peptdica. Essa ligaaminocidos (Figura lateral o formada por 1), por sua vez, so uma reao de conmolculas orgnicas densao entre o grupo carboxlico de as quais possuem ligadas ao mesmo um aminocido e um grupo amina de tomo de carbono (denominado de Os aminocidos e a constituio das outro aminocido (Figura 2). Vale carbono ) um tomo de hidrognio, protenas tambm ressaltar que, essencialmente, um grupo amina, um grupo carboxlico apenas 20 aminocidos, representae uma cadeia lateral R caracterstica As protenas, cujo nome vem da dos no Quadro 1, so responsveis por para cada aminocido. Essa cadeia lapalavra grega protos, que significa a produzir todas as protenas, seja qual teral o que difere os aminocidos em primeira ou a mais importante, so for a forma de vida. Alm disso, com sua estrutura, tamanho, cargas elas biomolculas mais abundantes nos exceo da glicina, todos os aminotricas e solubilidade em gua. Alm de seres vivos, estando presentes em cidos so estereoismeros. Os esteconferir propriedades fsico-qumicas todas as partes de uma clula. No reoismeros so compostos qumicos A seo Conceitos cientficos em destaque tem por objetivo abordar, de maneira crtica e/ou inovadora, conceitos de mesma frmula molecular nos quais cientficos de interesse dos professores de Qumica. Neste nmero a seo apresenta dois artigos. os tomos constituintes esto ligados Bioqumica possui, como objetivo bsico, mostrar como molculas destitudas de vida conseguem interagir entre si e perpetuar a vida como se conhece, isto , mostrar em termos qumicos a vida em suas diferentes formas. Entretanto, embora a Bioqumica seja por si s uma rea interdisciplinar, e tenha potencial para ser utilizada no ensino de Qumica, ainda pouco explorada pelos professores de Qumica no Ensino Bsico (Correia et al., 2004). Por esses motivos, este artigo discute alguns conceitos bsicos sobre protenas e apresenta um experimento simples, com o intuito de auxiliar a discusso de conceitos qumicos relacionados s protenas, bem como o debate de temas associados.
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Figura 1: Estrutura geral dos aminocidos com destaque para o carbono e para a cadeia lateral R caracterstica para cada aminocido.

Figura 2: Reao de condensao entre duas molculas do aminocido glicina, demonstrando a formao da ligao peptdica.

na mesma seqncia, diferindo somente pela disposio dos tomos no espao.

Estrutura e funes das protenas

As protenas podem ser classificadas quanto ao nvel conformacional adquirido. A seqncia de aminocidos de uma protena denominada de estrutura primria. O termo estrutura secundria refere-se conformao local de alguma poro de um polipeptdeo, ou seja, o arranjo tridimensional de aminocidos localizados mais prximos dentro da estrutura primria. As estruturas secundrias mais comuns so a -hlice e a folha beta (Figuras 3 e 4, respectivamente). As estruturas secundrias -hlice e folha beta geralmente aparecem concomitantemente numa mesma protena, constituindo partes da estrutura terciria de um polipeptdeo enovelado. J a estrutura terciria, por sua vez, o arranjo espacial ou enovelamento de toda uma cadeia polipeptdica. A estrutura terciria inclui interaes de aminocidos bem mais distantes na cadeia

primria. A disposio de mais de uma cadeia polipeptdica denominadas subunidades na composio de uma mesma molcula de protena chamada de estrutura quaternria. Essas estruturas esto ilustradas na Figura 5. As protenas podem tambm ser divididas em dois grupos principais: as protenas globulares e as protenas fibrosas (Figura 6). As protenas fibrosas apresentam propriedades que conferem resistncia mecnica, flexibilidade e suporte s estruturas nas quais so encontradas. Essas protenas possuem cadeias polipeptdicas arranjadas em feixes, consistindo tipicamente um nico tipo de estrutura secundria, alm de serem insolveis em gua, devido elevada ocorrncia de aminocidos hidrofbicos tanto na parte externa como interna da protena. Por sua vez, as protenas globulares, que incluem enzimas, protenas transportadoras, motoras e regulatrias, se apresentam em formas esfricas ou globulares. A ocorrncia de aminocidos hidrofbicos nas protenas globulares maior na parte interna das protenas, enquanto na parte externa predomina a presena de aminocidos hidroflicos. Geralmente, possuem mais de um tipo de estrutura secundria.

A proposta experimental

Material
Soluo de amaciante de carne (filtrado resultante da suspenso de 7,5 g de amaciante em 10 mL de gua) Medicamento digestivo1 (medicamento lquido ou sobrenadante obtido aps triturao, solubilizao e filtrao de um comprimido) Extrato de suco de abacaxi concentrado (bata no liquidificador 6 fatias de abacaxi e filtre em papel de filtro o extrato resultante, o qual apresentar atividade enzimtica estvel por cerca de uma semana, se mantido congelado) Soluo saturada de sal de cozinha (dissolva aproximadamente 2 g em 50 mL de H2O) lcool (etanol comercial 92%) Folha de gelatina em p Clara de ovo

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Procedimento
Prepare nove tubos de ensaio contendo folha de gelatina como substrato (dissolva aproximadamente 0,5 g de gelatina em 2,5 mL de gua) e outros trs contendo clara de ovo como

Figura 3: Estrutura secundria helicoidal -hlice das protenas. Destaque para a hlice orientada direita e para as ligaes de hidrognio intracadeia.
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Figura 4: Vista superior da estrutura secundria de folhas paralelas das proteinas, cujas cadeias so estendidas lado a lado para formar estruturas semelhantes a pregas. Esse arranjo estabilizado por ligaes de hidrognio entre segmentos adjacentes da cadeia. Nas folhas paralelas, a orientao aminoterminal e carboxiterminal das cadeias a mesma.
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Quadro 1
Representao estrutural dos 20 aminocidos responsveis pela composio das molculas proticas dos seres vivos.

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Figura 5: Esquema representativo dos diferentes nveis de estrutura protica da molcula de hemoglobina.

Figura 6: Estrutura geral das protenas fibrosas (esquerda) e globulares (direita).

substrato (2,5 mL). Coloque os tubos contendo gelatina em banho-maria para facilitar a solubilizao. Adicione aos tubos 2,5 mL dos reagentes, conforme apresentado na Tabela 1. Aps a adio dos reagentes, resfrie os tubos contendo gelatina em banho de gelo. Observe e compare os resultados.

Hidrlise da gelatina por enzimas proteolticas: Explicaes

A gelatina um derivado alimentar do colgeno composta por uma mistura de polipeptdeos. Sua obteno realizada pela hidrlise parcial do colgeno. Uma das principais caractersticas da gelatina sua capacidade de gelatinizao. Em temperaturas no muito elevadas, a gelatina apresenta a propriedade de reter molculas de gua, formando assim um gel. Como mostra a Tabela 2, a gelatinizao observada nos experimentos 1, 3, 5 e 7, onde incuba-se gelatina com a gua e com as solues fervidas de amaciante de carne, do medicamento digestivo e do extrato de suco de abacaxi. Por outro lado, nos demais ensaios (experimentos 2, 4, 6, 8 e 9) a gelatinizao no verificada.
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Nos experimentos 2, 4 e 6 a gelatinizao no mais verificada devido hidrlise enzimtica das ligaes peptdicas da gelatina. As enzimas so protenas que atuam com grande especificidade acelerando a reao qumica de determinadas molculas, denominadas de substratos, para a manuteno e regulao de todo o metabolismo dos seres vivos. A importncia das enzimas no se restringe apenas manuteno da vida, mas tambm em processos industriais e tecnolgicos como a produo de be-

bidas, alimentos, vacinas, dentre outros (Lima et al., 2001). As enzimas encontradas no abacaxi (bromelina), no amaciante de carne (papana) e nos medicamentos digestivos (pepsina) so enzimas classificadas como proteases. As proteases so enzimas que catalisam especificamente a clivagem hidroltica de ligaes peptdicas, causando a quebra das protenas em fragmentos menores (peptdeos). A hidrlise de uma protena faz com que esta perca sua estrutura e, conseqentemente, suas propriedades e caractersticas (formao do gel). Em contrapartida, quando se utiliza os reagentes fervidos, as enzimas neles presentes so desnaturadas pela temperatura, fato que impede as mesmas de catalisarem a hidrlise das ligaes peptdicas da gelatina. A desnaturao, tambm chamada de denaturao, a perda total ou parcial da estrutura tridimensional de uma protena, a qual resulta, quase invariavelmente, em perda da atividade biolgica. Este um processo familiar que ocorre quando um ovo frito ou cozido. No caso da temperatura, a desnaturao provocada pelo rompimento de interaes fracas devido ao aumento da vibrao dos tomos com o aquecimento. A desnaturao pode ocorrer no s pelo aquecimento, mas tambm pela ao de outros fatores como pH, solventes orgnicos etc.

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Precipitao de protenas
No caso da adio de etanol, o que se observa a precipitao das

Tabela 1: Substratos e respectivos reagentes a serem adicionados em cada experimento. Experimento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Substrato gelatina gelatina gelatina gelatina gelatina gelatina gelatina gelatina gelatina clara de ovo clara de ovo clara de ovo Reagente gua (branco) extrato de abacaxi extrato de abacaxi fervido medicamento digestivo medicamento digestivo fervido soluo de amaciante de carne soluo de amaciante de carne fervida soluo de sal de cozinha etanol gua (branco) etanol soluo de sal de cozinha
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Tabela 2: Resultados obtidos em cada um dos experimentos realizados. Experimento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Resultado observado gelatinizao nenhum gelatinizao nenhum gelatinizao nenhum gelatinizao leve turvao precipitao nenhum precipitao leve turvao

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protenas da gelatina e da clara de ovo (Tabela 2). Essa precipitao ocasionada pela desnaturao das protenas devido adio do etanol, o que causa o rompimento das interaes fracas. A adio da soluo de sal de cozinha provoca o chamado efeito salting out, que consiste na diminuio da interao das protenas com a gua, devido solvatao dos ons presentes na soluo salina. Essa diminuio de interao entre a gua e as protenas provoca a coagulao das mesmas, originando uma leve turvao da soluo (Tabela 2).

bastante explorada na atuao farmacolgica de medicamentos (Coelho, 2001). O conceito de solues tampes pode ser tambm abordado com o estudo das estruturas dos aminocidos, pois os mesmos comportam-se como tampes em valores de pH prximos (1) aos dos de seus pKas. Foras intermoleculares tambm so fundamentais, pois alm de estabilizarem as estruturas proticas, so responsveis pelas interaes de um frmaco com seu stio de ao no sistema biolgico (Fraga, 2001). Outrossim, o professor de Fsica pode aproveitar o efeito da temperatura na desnaturao das protenas para abordar a dilatao dos corpos e/ou processos de troca de calor.

em processos industriais. Qual o efeito da adio do lcool aos tubos de reao? E do sal de cozinha?

Nota
1. Medicamento que contenha a enzima pepsina, nica enzima presente no estmago capaz de digerir o colgeno. Alguns exemplos de medicamentos cujo princpio ativo a pepsina so o Peptopancreasi e o Primeral.
Wilmo Ernesto Francisco Junior (wilmojr@bol.com.br), bacharel e licenciado em Qumica e mestre em Biotecnologia pela Unesp, professor de Qumica do Senac, em Araraquara - SP Welington Francisco . (welington@grad.iq.unesp.br) aluno do curso de bacharelado em Qumica do Instituto de Qumica da Unesp em Araraquara - SP .

Consideraes finais
Com base nos aspectos aqui discutidos, espera-se que o presente trabalho provoque discusses e desperte a ateno em relao importncia da Bioqumica para o ensino de diversos conceitos qumicos, bem como a discusso de temas relacionados ao cotidiano e, sobretudo, a respeito do seu carter interdisciplinar. O experimento de simples execuo e de fcil visualizao, alm de permitir uma discusso pautada no dia-a-dia dos alunos, com uma introduo em nvel fenomenolgico e posterior abordagem terica, sempre levando em conta as relaes intercambiveis entre teoria e prtica.

Referncias bibliogrficas
COELHO, F.A.S. Frmacos e quiralidade. Em: TORRES, B.B. e BARREIRO, E.J. (Eds.). Cadernos Temticos de Qumica Nova na Escola, n. 3, p. 2332, 2001. CORREIA, P.R.M.; DAZZANI, M.; MARCONDES, M.E.R. e TORRES, B.B. A Bioqumica como ferramenta interdisciplinar: Vencendo o desafio da integrao de contedos no Ensino Mdio. Qumica Nova na Escola, n. 19, p. 1923, 2004. FRAGA, C.A.M. Razes da atividade biolgica: Interaes micro- e biomacro-molculas. Em: TORRES, B.B. e BARREIRO, E.J. (Eds.). Cadernos Temticos de Qumica Nova na Escola, n. 3, p. 33-42, 2001. LIMA, U.A.; AQUARONE, E.; BORZANI, W. e SCHMIDELL, W. Biotecnologia industrial: Processos fermentativos e enzimticos. So Paulo: Edgard Blcher, 2001.

Sugestes para possveis discusses

A introduo dos conceitos de protenas pode auxiliar a discusso de aspectos de seu metabolismo. Temas como alimentao, hbitos alimentares e a importncia de uma dieta balanceada so assuntos interessantes de serem explorados com o auxlio do professor de Biologia. O papel cataltico das enzimas e o estudo de aspectos sobre cintica qumica tambm podem ser complementados a partir de experimentos descritos por Correia et al. (2004). Aspectos sobre isomeria, sobretudo isomeria ptica, podem ser introduzidos a partir da estrutura dos aminocidos. A assimetria molecular uma propriedade

Questes para discusso

Por que os amaciantes de carne so utilizados para amolecer as carnes? Por que se pode utilizar abacaxi para amaciar carnes em churrascos? Qual a relao do abacaxi com os amaciantes de carne? Explique o motivo pelo qual o uso dos reagentes fervidos provoca a gelatinizao. Discuta a importncia das enzimas no corpo humano, bem como

Para saber mais

NELSON, D.L. e COX, M.M. Lenhinger: Princpios de Bioqumica. 3a ed. Trad. A.A. Simes e W.R.N. Lodi. So Paulo: Sarvier, 2002. VOET, D.; VOET, J.G. e PRATT, C.W. Fundamentos de Bioqumica. Trad. A.G. Fett Neto. Porto Alegre: Artmed, 2000.

Abstract: Proteins: Hydrolysis, Precipitation and a Theme for Chemistry Teaching Biochemistry is an interdisciplinary area that has many interfaces with chemistry. Nevertheless, themes associated to it are seldom covered in the high-school chemistry classes. Proteins, the most abundant biomolecules in living beings, are one of the main subjects of study in biochemistry. Taking this into account, in this paper an introduction to the basic concepts on proteins is presented, as well as a simple experiment to help with the discussion of the several chemical concepts, beside suggestions of themes for debates in the classroom. Keywords: biochemistry, proteins, experimentation

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