FOTOMETRIA DE EMISIN

Una sustancia absorbe energa para excitarse y al efectuar el proceso de desexcitacin o relajamiento emite esta energa en forma de calor, de energa radiante o en ambas formas. Si en la desexcitacin la sustancia emite radiaciones electromagnticas estas se pueden utilizar para caracterizar y cuantificar dichas sustancias. Para los tomos el espectro de emisin es igual al de absorcin. La emisin de radiaciones de los tomos de los elementos ocurre al bajar los electrones de los orbitales excitados a los basales

E3 V1 E2 ENERGA V2 V4 E1

V3

E0

Figura 26. Procesos de excitacin (

) y desexitacin (

) de electrones.

La energa de excitacin puede ser elctrica (chispa, descarga, arco elctrico), Trmica o (llama) o radiante (radiacin electromagntica) y segn estas se tienen diferentes tcnicas de anlisis con base en la emisin de radiaciones.

Excitacin Arco elctrico Llama Radiacin

Tcnica Analtica Espectrometra o espectrografa de emisin Fotometra de llama Fluorometra, fosfometra

La espectrofotometra y espectrografa de emisin se utilizan principalmente para el anlisis de sustancias minerales slidas y su aplicabilidad al anlisis clnico es casi ninguna,

FOTOMETRIA DE LLAMA
La excitacin por corriente elctrica se utiliza para sustancia que requieren alta energa. Otras sustancias en solucin requieren menos energa que puede ser suministrada por una llama, como los metales alcalinos y alcalinotrreos. Las llamas mas utilizadas son aquellas que usan combustibles como propano, acetileno o hidrogeno y como comburente oxigeno o aire. Las llamas con aire son menos calientes que aquellas que usan oxigeno.

LLAMA Acetileno - 02 Propano- 02 Hidrogeno- 02

TEMPERATURA APROXIMADA C 1200 2200 2800

FLUOROMETRIA Si una sustancia se excita con radiaciones electromagnticas, esta en el proceso de relajacin puede emitir la energa absorbida en forma de radiaciones de frecuencias diferentes a la de la excitacin; este fenmeno de emisin se denomina luminiscencia. La luminiscencia se clasifica como: fosforescencia, si el fenmeno de emisin perdura despus de eliminar la excitacin y fluorescencia, si la luminiscencia desaparece al eliminar la excitacin. La fluorescencia es instantnea con la excitacin.

La potencia de la radiacin fluorescente se representa par F o Ff y es proporcional a la concentracin de la sustancia fluorescente en forma similar a la emisin en llama. Poder fluorescente, E concentracin. F Pf C Pf = kC o F = kC

En un determinado rango de concentraciones esta proporcionalidad es directa (Rango de linearidad). El rango en el cual el poder fluorescente aumenta al incrementarse la concentracin de la sustancia fluorescente es el rango ptimo y es en este rango en el que se puede utilizar la fluorescencia como una tcnica cuantitativa de anlisis (FLUOROMETRIA)

En el fango de linearidad de una tcnica fluoromtrica puede utilizarse el metodo del patrn para buscar la concentracin de una muestra. Cx ! PfxCp PFP

Donde P y X refieren al patrn y desconocido respectivamente. Algunas veces las muestras y los patrones presentan fluorescencias de fondo (Fluorescen sin adicionar los reactivos especficos), PFxo y PFpo respectivamente, en estos casos la ecuacin anterior se convierte en

Cx !

Pfx  Pfxo PFp  PFpo

Cp

EJEMPLOS: 1. Para determinar el sodio contenido en el agua de la llave se prepar un patrn de 100 mg/ 1 el cual se diluy 1/20 Y se ley su emisin a 589 nm contra desionizada como blanco, obtenindose con un valor de 40 a determinadas condiciones de sensibilidad, el agua de la llave produjo una lectura de 36 a iguales condiciones. Si el patrn y la muestra estn en el rango de linearidad encuentre la concentracin de Na+ en el agua. Solucin: Como patrn y muestras estn en el rango de linearidad, se debe aplicar: Cx = Cp Px / Pp La concentracin del patrn ledo es:

Cp=C stock x fd = 100mg/l x Cp= 5 mg/l Cx ! 5mg / l v

1 5mg / l 20

36 ! 4,5mg / l 40

La concentracin de Na+ en el agua de la llave es de 4.5 mg/l

2. Un suero se diluye 1 a 100 y se lee su emisin a 589 nm en un fotmetro de llama obtenindose un valor de 70, usando agua desionizada para ajustar el cero. Un patrn de sodio 40 mg/l produjo un valor de 80 al leerse en iguales condiciones. Encuentre los miliequivalentes de sodio par litro en el suero. Solucin. Suponiendo que las lecturas fueron hechas en el rango de linearidad, encontraramos los mg/l de Na en el suero y luego convertiramos estos a meq/l as: Cx= Cp . Px / Pp . 40mg x70 / 80 l Cx = 35 mg/l; pero esta Cx es la muestra que se ha ledo y esta diluida 1/100 con respecto al suero, as que la concentraci6n en suero (Cs ) es: Cx ! Cs ! Que en meq/l es: meq / l ! 3500mgNa / l v 1meqNa ! 152meq / l 23meqNa Cx 35mg / l 3500mg / l ! fd 1 / 100

La concentraci6n de sodio en el suero es 152 meq/l.