Professional Documents
Culture Documents
Fundamento
La esterilización es el proceso físico o químico que destruye todas las formas de vida:
esterilidad es la condición de estar libre de microorganismos. La esterilización es un
procedimiento esencial de la microbiología, ya que la preparación de medios, el aislamiento y
mantenimiento de cultivos puros depende de la esterilidad de recipientes, artículos de vidrio
o instrumentación.
Hay dos métodos principales de esterilización: químicos y físicos.
Métodos químicos:
Se cree que diversos productos químicos sirven para esterilizar pero realmente son
desinfectantes o antisépticos. Los desinfectantes son los que comúnmente se utilizan para
limpiar material de laboratorio, como son mesas de trabajo, pisos e instrumentos y los
antisépticos se utilizan para desinfección de los tejidos corporales aunque la mayoría son
tóxicos.
Los desinfectantes y antisépticos solo matan las células vegetativas y no afectas a las
formas como las esporas por lo que no se pueden utilizar confiablemente como
esterilizadores.
Métodos físicos
Los métodos físicos más utilizados para la esterilización son: la radiación. Filtración y calor.
Calor.- Este método pude ser seco o húmedo. El calor seco requiere generalmente
más tiempo y mas temperatura de esterilización que el calor húmedo y por esto se usa para
materiales que se carbonizarían o destruirían, como pueden ser los medios de cultivo.
Calor seco
El calor seco se puede aplicar de diferentes maneras:
Flameado: se usa para esterilizar las bocas de los frascos y tubos ce cultivos, porta
objetos, cubreobjetos y varios instrumentos.
Quemado: Se usa para esterilizar espátulas y asas de inoculación manteniendo en la llama
del mechero de gas hasta que tomen un color al rojo vivo.
Calor húmedo: La esterilización completa por medio de calor húmedo se logar
aplicándolo con temperaturas mayores de 100°C usando vapor saturado bajo presión en la
autoclave durante un tiempo fijado a una temperatura determinada. El vapor a presión
atmosférica tiene una temperatura de 121°C, hasta las esporas mas resistentes mueren,
mientras que en el horno de calor seco requieren una hora a 160°C. Este tipo de
esterilización es el mas utilizado en el laboratorio de microbiología.
Manejo de la autoclave
1. Verificar que el nivel del agua sea el adecuado.
2. El material a esterilizar se debe colocar en la canastilla de la autoclave y se introduce
en ella.
3. Se enciende el autoclave, las llaves se cierran en parejas, una sola persona debe
realizar esta operación para que la fuerza sea la miasma en cada una de las llaves, y
se debe dejar abierta la válvula de escape.
4. Cuando el vapor comience a salir por la válvula, esta se cierra y la presion y
temperatura comenzara a aumentar. Debe verificarse frecuentemente de que el
autoclave no rebase las condiciones adecuadas.
5. Cuando se ha llegado a las condiciones de presión, temperatura y tiempo adecuados,
el autoclave se desconecta y se abre lentamente
la válvula para que el vapor escape lentamente.
Solo se puede abrir la tapa cuando ya se haya
bajado por completo la presión.
Observaciones
Al terminar de realizar esta practica creo que aprendimos como se debe utilizar la
autoclave, aunque sea algo nuevo para nosotros, creo que entendimos y llevamos acabo
la esterilización lo mejor que nos fue posible para ser nuestra primera vez.
Aprendimos a colocar en la boca de un matraz un sombrerito de papel Manila para
evitar que el tapón de algodón se dispare cuando este dentro de la autoclave.
Aprendimos hacer hisopos que también colocamos en el autoclave para su
esterilización.
Resultados
Obtuvimos el material esterilizado un poco húmedo, para ser utilizado después
Conclusiones
Ese día aprendimos las técnicas asépticas que debemos seguir al momento de entrar en el
laboratorio, como es:
♣ El manejo de la autoclave
♣ Manejo del horno de calor seco
♣ Manejo del mechero
♣ Satanización del área de trabajo
♣ Manejo de los desinfectantes.
La plática que nos dio la maestra nos impartió el sentido de responsabilizarnos de cuidar
nuestra área de trabajo, ya que de esto dependerá nuestro desempeño en este laboratorio,
y de la capacidad de cuidarnos a nosotros mismo y al medio ambiente lo mejor que sea
posible. Realmente aprendimos a usar la autoclave bien, a usar la cinta testigo c en los
utensilios que vamos a utilizar.
Actividades
¿Qué es autoclave?
Es un aparto que realiza una esterilización completa por medio de calor húmedo y se
logar aplicando temperaturas mayores a los 100°C usando vapor saturado.
Elabora una lista de materiales que se deben esterilizar en un horno de calor seco en
vez de autoclave.
♣ Frascos ♣ Espátulas
♣ Asa bacteriológica ♣ pinzas
Fundamento
Los patrones de calor, a través del reino animal, son otra indicación de la importancia
de la relación entre el receptor y la luz; y están relacionados con funciones de protección y
de apareamiento.
Los colorantes vitales penetran en las células y dan color a sus estructuras, sin
causar un gran daño. El verde B Janus tiñe las mitocondrias selectivamente, y el azul de
metileno tiñe el aparato de golgi. Los colorantes vitales no son totalmente inocuos, pero solo
matan después de la exposición prolongada. Aunque útil, la técnica de coloración vital tiene
poca aplicación, por que muchos organelos son tan pequeños que no se tiñen. Los agentes
fijadores, como formol, alcohol, ácidos, sales de metales pesados o mezclas de estos,
vuelven insolubles las proteínas.
En las tinciones simples se utiliza un solo colorante que siempre es de tipo básico.
Las tinciones diferenciales se utilizan par distinguir entre tipos de microorganismos; esta
técnica consta de dos partes: tinción primaria y tinción de contraste. Y entre estas se
encuentran las siguientes tinciones:
1. Tinción de Gram, esta utiliza dos colorantes y distingue las bacteria gram positivas y
gram negativas.
2. La tinción de acido-alcohol resistencia.- actualmente se utiliza la tinción de Ziel-
Nieelsen, esta sirve para teñir bacterias del genero Mycobacterium, el resto de las
bacterias se tiñen de azul por el colorante de contraste. Aquí todas las bacterias se
tiñen de rojo y se decolora brevemente con HCl. Después se tratan con le colorante
de contraste azul de metileno.
Observaciones
Cocos lanciolados
Estreptococo neumonae Gram + 100 X
Gram +
Resultados
Observamos que las tinciones son muy útiles para identificar los microorganismos,
como bacterias, parásitos, helmintos, protozoos, en fin; una gran gama de organismos
patógenos para el hombre. Pero también se han descubierto microorganismos que son
benéficos para el hombre.
Conclusiones