You are on page 1of 58

TUGAS EMBRIOLOGI HEWAN

SPERMATOZOA MAMALIA : STRUKTUR DAN KUMPULAN TEMPORAL

Disuusun Oleh : Dyah Cipta N. Erni Kusumawati Habsari Asna K. Isthika W. (K4309026) (K4309028) (K4309033) (K4309044)

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2012

SPERMATOZOA MAMALIA : STRUKTUR DAN KUMPULAN TEMPORAL


I. PENGANTAR Pada spermatozoa, sel yang rumit dan sangat terpolarisasi, telah berkembang secara struktural dan secara fungsional untuk memastikan transmisi yang efisien dari genom ayah ke oosit pada fertilisasi. Untuk transfer DNA, sel germinal primordial mengalami pertumbuhan yang luas dan diferensiasi. Sel-sel progenitor berkembang biak untuk memberikan jumlah yang memadai sperma di tempat fertilisasi. Kompleks Synaptonermal asamble antara pasangan homolog kromosom untuk enabre rekombinasi urutan DNA dan karenanya mempromosikan keragaman genetik. Inti mengubah mengembun dan melindungi unik, berbagai haploid gen. Motilitas diperoleh oleh masing-masing formasi berikut sel dari ekor dengan komplemennya mitokondria. Sebuah formingover akrosom kutub apikal inti adalah paket dengan berbagai hydrolyticenzymes yang kemudian memungkinkan sperma menembus investasi telur. Struktur ini berbagai sel sperma dirakit selama spermiogenesis meiosis, dan pematangan epididyrnal, biogenesis mereka melibatkan integrasi precisetemporal peristiwa transkripsi dan translasi (untuk tinjauan, lihat Bellve, 1979, 1982) II. Organisasi Molekuler Pada Spermatozoa Mamalia Sperma mamalia yang topografi disusun dalam kepala yang berbeda dan segmen ekor (Gambar 1). Kepala terdiri dari inti kental dan akrosom atasnya, yang keduanya dibutuhkan untuk mengirimkan genom haploid pada saat pembuahan. Ekor, berisi unsur-unsur axoneme, mitokondria, dan struktural, bertanggung jawab untuk motilitas sel. A. Struktur Molekul Pada Kepala Sperma Inti sperma mamalia lebih kental dan memanjang daripada mereka atau sel somatik dan memiliki bentuk yang merupakan ciri khas untuk setiap spesies. Kromatin umumnya seragam di desity tapi mungkin berisi area mal sesekali jelas (Fawcett, 1975a). Inti sperma manusia, pengecualian, sering mengandung spasi jelas lebih besar, sering disebut vakuola nuklir meskipun mereka tidak membran terbatas (Bedford et al., 1973). Spesies ini juga menunjukkan differencesin daerah tingkat kondensasi kromatin (Zambon; et al, 1971;. Bedford et al, 1973).

Gambar 1
GAMBAR 1. Diagram skematik dari spermatozoa mamalia yang menggambarkan unsurunsur pokok ini sel terpolarisasi. Kromatin padat dikelilingi Beasiswa dan dilindungi oleh amplop nuklir dan teka perinuklear capping kutub anterior inti adalah dengan enzim akrosom penyusunnya. Ekor menonjol berisi terletak di pusat i axoneme dengan serat terkait padat luar. Mitokondria formulir tanah double helix midpiece, sedangkan selubung fibrosa menyelubungi bagian utama dari ekor. (Direproduksi Bloom dan Fawcett, dengan izin dari Bank Dunia pubtisher Sirunders Perusahaan).

Susunan kromatin dalam inti sperma belum didefinisikan secara memadai. Kromatin dalam nukleus sperma dari unggas domestik tampaknya berorientasi secara acak (Walker, 1971). Dalam invertebrata banyak kromosom mungkin diselenggarakan dengan serat DNA mereka berorientasi sejajar dengan sumbu panjang sperma, meskipun mereka mungkin

sekunder digulung (Inoue dan Sato, 1962; Mello dan Vidal, 1973). Demikian juga sperma mamalia telah sangat teratur kromatin. Beku-facture studi sperma dari beberapa spesies mamalia, mengungkapkan serat kromatin diatur dalam pola pipih ditumpuk yang konsisten dengan substruktur platelike diamati pada sperma banteng dengan birefrigence bentuk (Bendet dan Bearden, 1972). Beberapa parameter fisik menunjukkan molekuler DNA dari sperma kuda jantan juga terjadi pada struktur yang sangat teratur yang selaras dalam pesawat paralel (Sipski dan Wagner, 1977) Sebaliknya, manusia dan sperma tikus mungkin pengecualian di antara mamalia karena bukti menunjukkan morfologi nukleoprotein mereka dikemas dalam pola fibrogranular (Koehler, 1972; Bellve, 1982). Konformasi padat dari inti sperma matang menyingkirkan studi morfologi yang berarti pada sifat insitu struktur kromatin. Akibatnya, peneliti sebagian besar dimanfaatkan agen mengurangi sulfhidril, protease, dan / atau denaturans kimia untuk membubarkan kromatin untuk observasi. Kromatin dari kedua manusia dan sperma banteng pada paparan thioglycolate alkali dan pameran kritis menunjukkan pengeringan, menunjukkan jaringan yang tidak teratur dari serat dengan diameter berkisar antara 14 sampai 24 nm (Paru, 1968,1972). Serat ini dapat tersebar lebih lanjut dengan pengobatan dengan dithiothreitol (DTT) dan sarkosyl, sebuah deterjen onic, untuk menghasilkan mesh 2 sampai 3 fibril nm bisa interkoneksi tubuh bulat dan cordlike lebih besar. (Evenson er al., 1978). Para fibril 2-3 nm bisa mewakili untai DNA telanjang. Namun, kondisi ini denaturing tidak dapat mengungkapkan kromatin di "pribumi" konfigurasi, khususnya sejak protamines yang dipicu oleh reagen seperti SDS dan sarkosyl. Upaya terakhir telah berfokus pada penggunaan DTT dan Ca2+ . Mg2+ (3:2 rasio molar) sebagai protokol non denaturing dalam penyebaran nukleoprotein (Bellve, 1982). Ketika digunakan dalam kombinasi, kedua kation divalen preferentially menggantikan protamine dari inti sperma tikus dengan cara konsentrasi tergantung (Hirtzer dan Bellve 1979). Inti ini, ketika diperiksa oleh mikroskop fase kontras, muncul untuk mempertahankan ukuran biasa dan bentuknya, meskipun protamines pengungsi terdiri lebih dari 90% protein nuklir total. Namun, setelah terpapar etidium bromida, DNA-terinterkalasi fluorochrome, inti protaminehabis menunjukkan halo jelas dari DNAfibers (Bellve, 1982). Struktur nuklir terdiri dari bundel intermeshed serat kromatin kasar dengan jaringan percabangan fibril halus (Gbr. 2). Sebuah meshwork ini frbrils lebih halus juga menembus perforasi di teka perinuklear buncit untuk membentuk halo membungkus DNA. secara signifikan, struktur bahan nuklir adalah sebanding dengan kondensasi kromatin di spermatid (bdk. Loir dan Courtens, 1979). Tidak

ada indikasi, besar bulat, "Badan kromatin" yang terlihat setelah perawatan dari manusia (Evenson et al, 1978).

Gambar 2
Gambar 2. Mouse inti sperma mengikuti perpindahan protamine dengan kation divalen. Inti diinkubasi dengan DTT dan PMSF selama 30 menit dan kemudian terkena 250 nM Ca2+ . Mg2+ (3:2 molar rasio). Protokol ini efektif dalam menggusur protamine tipe-2. Ini juga sebagian menyebarkan kromatin padat untuk mengungkapkan struktur fibrogranular kasar interkoneksi oleh meshwork dari lebih halus, percabangan fibril. Sebuah jaringan dgn urat saraf serupa tampaknya tumpah melalui lubang dalam bahan perinuklear untuk membentuk awan yang mengelilingi DNA inti. Panah rreads. perforatorium panah, perinuklear teka (x32, 000).

Dan tikus sperma inti dengan sarkosyl. Mayat yang terakhir ini mungkin mencerminkan agregasi artifaktual dari polimer nucleoprotamine. Karena perpindahan progresif protamines oleh kation divalen muncul untuk menghasilkan struktur asli, protokol ini mungkin berharga untuk menjelaskan peran protamines dalam kondensasi kromatin.

Kondensasi ekstrim dan bentuk yang tidak biasa inti sperma telah dikaitkan dengan kehadiran, protein kromosom unik. Pada vertebrata dan spesies invertebrata histon somatik diganti selama spermatogenesis oleh protamines atau dengan histon spesies unik (untuk diperiksa, lihat Bellve, 1979). Protamines, pertama kali diidentifikasi dan ditandai pada ikan oleh Miescher (1979) dan Kossel (1928), sekarang telah diisolasi dari sperma mamalia beberapa (Coelingh dkk, 1972;. Kistler dkk, t978, Ig76;. Monfoort dkk. , lgTB; Beliv | et al, 1975; Kolk dan Samuel; Calvin, tahun l976; Balhorn dkk, 1977). Protein ini lebih kecil dan lebih mendasar dari histon dan memiliki struktur dasar yang berbeda. Meskipun tidak filogenetis dilestarikan, protamines mamalia berbagai mengandung beberapa faktor penentu struktural umum. Sebagian urutan analisis protamine dari banteng (Coelingh et al., 1972), kuda jantan itu, babi, dan domba jantan (Monfoort et al., 1973), tikus (Kistler et ai., 1976) dan (manusia Kolk dan Samuel , 1975;. Gaastra et al, 1928) menunjukkan wilayah aminoterminal segera mungkin cukup invarian. Adapun protamines ikan, jumlah dan posisi dari domain arginyl mungkin adalah fitur umum dari protamines mamalia. Tapi, karena tidak ada protamine eutherian selain protein banteng belum telah diurutkan secara keseluruhan, ini akan menjadi sebuah kesimpulan prematur. Selain itu, sementara sperma paling mamalia hanya berisi satu mouse protamine spesies (. Bellve et al, 1975) dan inti sperma manusia (Kolk dan samuel, 1975) masing-masing berisi dua berbeda arginin kaya protamines: tipe 1 protamine khas dan jenis dominan 2 protamine yang memiliki kandungan histidin tinggi (Kolk dan samuel, 1975) dengan demikian, setiap model protamine-DNA interactiois harus memungkinkan untuk kemungkinan tipe 2 protamines memiliki struktur dasar yang sangat unik. Interaksi protamine dengan DNA telah diperiksa dengan berbagai fisik, teknik biokimia, dan morfologi. Studi inti sperma nonmarnmalian dan disusun kembali DNAprotaminekompleks menyarankan protamines menstabilkan DNA dalam konformasi dimodifikasi yang tahan transisi struktural. Selanjutnya, arginin kaya protamines dari beberapa spesies air sama-sama efektif dalam menstabilkan DNA (Suau dan Subirana, 1977). Berdasarkan data tersebut, beberapa model organisasi nucleoprotamine telah diusulkan. Salah satu model menggambarkan protamine dalam bentuk yang diperpanjang, berkelok-kelok di sepanjang alur kecil dari helix ganda DNA, dengan kelompok arginyl berturut-turut secara bergantian berinteraksi dengan gugus fosfat dari dua untai DNA (Feughelman et ar, 155;. Suau dan suuirana, 1977). Dalam kasus protamines mamalia ekstensi amino-terminal bisa lebih dihemat lipat kembali dan berinteraksi dengan domain dalam dari peptida seperti digambarkan dalam (1992) model elegan Balhorn ini (Gambar 34)

Wilayah karboksil-terminal variabel mengandung sisteinil beberapa tyrosinyl kelompok (Monfoort et al., 1973) bisa berinteraksi dengan molekul lain protamine tumpang tindih dalam alur kecil yang sama (Gambar 3B dan 4A). Penyesuaian dekat kelompok sisteinil mungkin memfasilitasi pembentukan ikatan disulfida antarmolekul yang lazim di kromatin sperma mamalia. Atau, karboksil-terminal, dimana juga sering mengandung gugus arginyl beberapa (Monfoort et al, 1973), dapat berinteraksi dengan DNA heliks ganda yang berdekatan untuk memastikan dekat, kemasan paralel dari untaian kromatin. Hubungan disulfida kovalen mungkin harus terjadi antara molekul protamine ada pada heliks DNA apposed untuk membuat tahan kromatin untuk dispersi oleh garam tinggi, urea, dan hidroklorida guanidin. Sementara model ini memungkinkan untuk kondensasi kromatin sperma tertib, tidak kompatibel dengan semua bukti yang tersedia. Studi menggunakan laser Raman spektroskopi (Mansy et al., I976) memberikan bukti yang menunjukkan bahwa protein ini terletak di alur utama dari helix ganda. Analisis kinetik dari aiso metilasi DNA menunjukkan bahwa interaksi dari protamine dengan DNA perferentially perisai ~ 1,5%) N-7 guanin dalam alur utama dari metilasi, bukan. dari N-3 dari adenin dalam alur kecil (Mirzabekov et al., 1977). Menurut satu interpretasi, observasi ini tidak konsisten dengan mengikat protamine dalam alur kecil dari helix ganda DNA. Namun, aksesibilitas berkurang dari kelompok guanin ke agen methylating mungkin hanya mencerminkan interaksi dengan molekul protamine terletak di alur kecil dari sebuah untai DNA yang berdekatan dan saling erat (Gambar 4B). Dengan demikian, data dapat ditafsirkan untuk mendukung mengikat protamine baik dalam kecil atau alur utama. Model kedua, diusulkan oleh Waran dan Kim (1978), menunjukkan protamine ada dalam konfigurasi heliks, membentuk silinder tersegmentasi yang dapat menempati baik besar atau alur kecil dari helix ganda DNA. Banteng protamine mungkin berisi dua domain heliks, satu membentang dari asam amino 13-28 dan yang lain dari posisi 31-36,

Gambar 3
Gambar 3. Sebuah model yang menggambarkan interaksi protamine banteng dengan DNA. (A) sequenee N-terminal dari protamine tipe-1 ditunjukkan dengan tiga domain arginyl (R) dalam alur kecil, berinteraksi (bar) dengan gugus fosfat lingkaran padat kecil) di sepanjang giliran tunggal dalam heliks ganda DNA . Segmen N-terminal dapat diaktifkan kembali molekul, sehingga memungkinkan ikatan disulfida kovalen untuk membentuk antar kelompok, sisteinil 5 dan 22. (B) sistein pada posisi 14 dapat membentuk ikatan disulfida dengan sistein 38 di terminal C-tumpang tindih dari molekul protamine berdekatan. Demikian juga, sebuah jembatan disulfida ketiga dapat membentuk antara eysteine 6 dari daerah N-terminal dengan sistein 44 di daerah Cterminal dari protamine tumpang tindih. Segmen C-terminal dari molekul yang berdekatan dapat disejajarkan awalnya oleh hidrogen antarmolekul dan obligasi hidrofobik (paralel bar). Interaksi disulfida akan mengunci tumpang tindih molekul protamine sekitar DNA. Asam amino tata nama: A, alanin, C, sistein, F, fenilalanin; G, glisin; H, histidin, saya, isoleucine, L, leusin, e, glutamin; R, arginin, S, serin; T, treonin, V, valin; Y, tirosin. (Direproduksi Balhorn 1982, dengan izin dari editor, Jurnal Sel Bioloet).

Gambar 4
Gambar 4. Skema presentasi tumpang tindih molekul protamine berinteraksi dengan DNA dalam alur kecil (A), dan kemasan paralel polimer nucleoprotamine (B). (A) protamine terfosforilasi mengikat DNA dengan domain arginyl menyelesaikan giliran tunggal di dalam double helix. Setelah defosforilasi dari serin dan treonin kelompok. Segmen N-lerminal dapat melipat kembali untuk membentuk cystienyl lintas link. Demikian pula, ini urutan N-terminal dapat membentuk ikatan disulfida dengan kelompok sisteinil terletak di urutan C-terminal dari sebuah molekul protamine tumpang tindih (lihat Gbr. 38B). (B) kompleks nucleoprotarnine, dengan tulang punggung fosfodiester RHE sepenuhnya dinetralkan, sekarang sejajar dengan bentuk menonjol protamine alur kecil dari satu fitting untai DNA ke dalam alur utama untai paralel. Interaksi ini dapat distabilkan oleh ikatan hidrogen dari C-terminal kelompok arginyl dalam alur alur utama. Atau, sendi-phenylalanyl glycyl fleksibel pada posisi 29 dan 30 memungkinkan domain arginyl ketiga untuk berinteraksi dengan alur kecil dari sebuah untai DNA yang berdekatan. Hal ini dapat memungkinkan pembentukan ikatan disulfida antarmolekul untuk mengunci untai DNA yang berdekatan bersama-sama, sehingga rendering tahan kromatin untuk

disosiasi oleh hidroklorida guanidin dalam ketiadaan DTT. (Direproduksi Balhorn 1982.. Dengan izin dari editor, Journal of Cell Biology).

dengan campur-Phe-Gly-urutan menyediakan fleksibel bersama. Ini modus interaksi juga bisa memungkinkan molekul protamine untuk saling berinteraksi pada heliks DNA ganda berdekatan, sehingga memudahkan sebuah kondensasi tertib dan ikatan silang kovalen untai kromatin. Atau, dua a-heliks domain mungkin terletak sepenuhnya dalam alur utama dari helix ganda DNA yang sama dan efek amino dan karboksil-Termini yang interstrand lintas link. Model ini, didasarkan pada difraksi sinar-X dan studi dichroism melingkar protamine-tRNA kompleks, adalah menarik tetapi mungkin tidak berlaku pada DNAprotamine interaksi (Bradbury et di, I962.). Dalam bentuk heliks pendek, panjang protamine jumlah mungkin cukup untuk mengikat hanya setengah total panjang DNA haploid. Kedua model menunjukkan bahwa serat kromatin halus percabangan mungkin dibentuk oleh kemasan untaian sejajar nucleoprotamine oi, dengan tulang punggung yang menonjol dari pas molekul protamine ke dalam alur utama dari heliks DNA yang berdekatan ganda (Gambar 4B) (Suau dan subirana, 1977 ; Bode dan Leseman, 1977; Kierszenbaum dan Tres, 1978; B alhorn, 1982). Konsep konformasi nucleoprotamine tidak kompatibel dengan keberadaan nukleosom dalam kromatin sperma. Ya, studi morfologi beberapa melaporkan mengamati seperti struktur nukleosom (12-15 nm) dalam kromatin dari dogfish, banteng, manusia (Gusse anfl chevaillier, 1980), dan sperma jantan (Tsanev dan Avramova, 1981). Dalam hal ini, menarik untuk dicatat bahwa protease pencernaan kromatin sperma dari beberapa spesies mamalia, menghasilkan fragmen batas yang berbeda dari protamines (Marushiie dan Marushige, 1974;. Zirkin et al, 1980). Produk-produk proteolitik yang mengingatkan pada polipeptida yang tersisa setelah hidrolisis enzimatik nukleosom somatik. Dalam hal ini amino-terminal diakses daerah 2A histon, 2P, 3, dan 4 dicerna, sedangkan bagian yang lebih besar dari protein masing-masing dilindungi oleh struktur tersier dari nukleosom (Weintraub, 1975). Pertanyaan pokok, tentu saja adalah apakah situs pembelahan enzim sepanjang urutan utama dari protamines masing dapat digunakan untuk membedakan antara model hipotetis protamine-DNA interaksi. Cross-linking studi menggunakan reagen bifunctional juga dapat menghasilkan informasi yang berharga pada protamine-protamine interaksi. Studi tersebut diperlukan untuk memperjelas konsep organisasi saat

nucleoprotamine dalam sperma mamalia.

Protein kromosom nonprotamine (NPCPs) inti sperma terbatas dalam jumlah dan nomor. Awal penelitian tentang inti sperma ikan mengidentifikasi kelas kaya triptofan, protein yang nonbasic comprise15 sampai 40% dari berat kering sperma (Stedman dan Stedman, 1947; untuk ditinjau, melihat Mann, 1964). NPCPs sperma mamalia telah baik telah terdeteksi (Platz et di, 1975;.. Balhorn dkk, 1977) atau terdeteksi hanya dalam jumlah rendah dan dalam kompleksitas terbatas (Bellve et al, 1975;. Kolk dan Samuel, 1975; O'Brien dan belive, 1980a). Protein ini dapat termasuk komponen struktural dari inti sperma, seperti histon sisa (Kolk dan Samuel, 0,1925; Puwaravutipanich dan panyim, l975; Pongsawasdi, dan Svasti, 1976; O'Brien dan Bellve, 1980a) dan konstituen dari teka perinuklear (O'Brien dan Bellve, I980a; Bellve, 1982). Juga banyak termasuk polymierase enzim DNA (Philippe dan Chevaillier, 1976;. Witkin et ar, 1977). RNA polimerase (Fuster et al., 1977) dan protease kromatin yang terikat mungkin (Marushige dan Marushige, l975). Amplop nuklir sperma mamalia, yang mengelilingi dan diterapkan secara erat dengan kromatin padat, memiliki beberapa fitur struktural yang tidak biasa. Ini terdiri dari dua membran spasi 7 sampai 10 nm terpisah (Fawcett, 1975a), masing-masing memiliki pola yang berbeda partikel intramembranous (Stackpole dan Devorkin, 1924). Dekat kutub ekor kepala sperma, membran nuklir dan sekring plasma untuk membentuk cincin posterior (Teman dan Fawcet 1974), yang tampaknya bertindak sebagai segel untuk memisahkan kepala dan kompartemen ekor (Koehler, 1970, 1972). Di bawah cincin posterior, amplop nuklir menganggap penampilan yang lebih khas sebagai dua membran, sekarang dipisahkan oleh 40 sampai 60 nm, meluas ke daerah leher jauh dari kromatin terkondensasi (Wooding dan O'Donnell, 1971; Zamboni, 1975a). Daerah ini yang terakhir dari "amplop berlebihan" mengandung pori-pori nuklir (Koehler, l970, 1972; Pedersen; 1972a; Teman dan Fawcett, 1974) disusun dalam pola, dekat heksagonal (Pedersen, 1975a; Mortimer dan Thompson, 1976). Ini belum ditentukan apakah wilayah ini amplop nuklir berlebihan fungsional dalam sperma matang (Wooding dan O'Donell 1971;. Zamboni et al, 1971) atau hanya mencerminkan pengurangan ditandai volume nuklir yang terjadi selama spermiogenesis (Fawcett, l965 ). Fossa implantasi, tempat perlekatan ekor, terletak pada reses di dasar inti. Di wilayah ini pori-pori nuklir lagi tidak hadir (Teman dan Fawcett, 1974) dan dua membran amplop nuklir apposed erat (6-7.nm) (Pedersen, 1972a). Kepadatan periodik reguler melintasi celah sempit ini, mungkin melayani untuk memperkuat amplop nuklir di wilayah yang berdekatan dengan ekor motil (Pedersen, 1972b; Stackpole dan Devorkin, 1974).

B. Struktur dan Fungsi Theca Perinuklear Para teka perinuklear terletak pada ruang subacrosomal erat apposed ke inti. Ini terdiri dari dua struktur yang berbeda, bahan perinuklear (PNM) dan lamina padat postacrosomal (PDL). PNM membentuk lapisan amorf meliputi hampir seluruh inti (Jones, 1971;. Courtens dkk, I976). PDL menyelubungi hanya tiang ekor inti dan tampaknya struktural berdekatan dengan PNM yg terletak di bawah (Lalli dan Clermont, 1981). Kedua struktur ini tahan terhadap ekstraksi detergen, tetapi dapat dilarutkan dengan adanya disulfida mengurangi agen (Koehler, 1973; Bedford dan Calvin, 1974b). Dalam spesies mamalia yang paling PNM biasanya membentuk sebuah amplop tipis yang menutupi seluruh inti di atas cincin posterior. Penebalan lebih jelas terjadi di wilayah apikal nukleus dan di perbatasan anterior segmen khatulistiwa ini (Nicander dan Bane, 1966; Bernstein dan Teichman, 7972;. Courtens et al, 1976). Dalam sperma tikus PNM yang membentuk perforatorium, struktur pyrimidal menonjol menempel pada bagian depan ujung nukleus (Clermont et al, 1955;. Austin dan Uskup, 1958a). Struktur apikal kaku sebelumnya dianggap bermain baik peran mekanik (Yanagimachi dan Noda, 1970a) atau enzimatik (Austin dan Bishop, 1958b) dalam pembuahan. PDL, membungkus wilayah ekor inti, segera mendasari dan berjalan sejajar dengan plasmalemma pada jarak 15 sampai 20 nm sampai mengakhiri di cincin posterior (Fawcett, 1975a). PDL telah menerima banyak perhatian, karena terletak tepat yg terletak di bawah ke daerah membran sperma yang sekering pertama dengan telur (Piko, 1969; Stefanini et al 1969; Yanagimachi dan Noda, 1970a, b; Lalli dan Clermont, 1981). Dua daerah yang berbeda dapat dilihat dalam lamina padat banteng (Koehler, 1966), kelinci (Koehler, 1970), dan manusia (Koehler, 1972; Pedersen, 1972a, b). Dalam kepadatan daerah anterior rutin periodik, 12 nm terpisah, memperpanjang dari PDL menuju membran plasma atasnya (Wooding dan O'Donnell, 1971; Zamboni dkk, I971:. Pedersen, 1972a, b). Ini kepadatan yang berorientasi melingkar dalam manusia tetapi longitudinal dalam monyet Macaca dan mungkin banteng (Pedersen, 1972a). Permukaan replika membran bebas sperma tikus menunjukkan bahwa struktur periodik mewakili pegunungan merata spasi pada PDL (Phillips, 1975a). Dalam beberapa spesies daerah posterior dari lamina padat ditandai oleh striations basal, kabel berorientasi obliqueiy mengakhiri pada cincin posterior (Koehler, 1966, 1970, 1972; Pedersen, 1972a, b). Fungsi struktur ini saat ini tidak diketahui. Para teka perinuklear dapat diisolasi sebagai unsur integral dari matriks nuklir sperma. Paparan inti tikus sperma ke - 200 mM Ca2+ . Mg2+ (3:2 ratio), DTT, dan DNase I (~ 100 pg / ml) menggantikan protamine dan menghidrolisis DNA (Hirtzer dan Bellve, 1979). Ini

plotocol meninggalkan komponen nuklir yang sesuai dengan ukuran asli dan bentuk inti sperma (Gbr. 5). Dalam beberapa hal struktur menyerupai matriks nuklir sel somatik, yang terdiri dari kompleks pori-lamina, matriks berserat internal, sisa nukleolus, dan bahan interchromatinic (Berezny, 1929; pembentuk et al, 1979;. Agutter dan Richardson, 1980 ; Franke dkk, 1981). Matriks nuklir sperma, yang dapat memberikan integritas struktural dengan inti, terdiri dari teka perinuklear jelas dan jaringan internal dari bahan berserat. Namun, berbeda dalam hal-hal lainnya. Pertama, komponen teka perinuklear dari matriks nuklir terletak eksternal daripada internal untuk segera amplop nuklir. Pori-pori annular kedua tidak hadir; mungkin mereka pori-pori terlokalisasi di wilayah berlebihan dari nuklir amplop dikeluarkan selama prosedur isolasi. Ketiga, tidak ada bukti struktur sisa nuklir. Akhirnya, matriks nuklir sperma terdiri dari beragam populasi polipeptida dengan itu Bapak mulai dari ~ 8000-80000, dengan band-band besar jelas pada 25.000, 16.500 15.000, dan 13.000 dalton (Bellve, 1982). Triplet protein asam, yang Bapak 65,000-75,000, yang konstituen menonjol dari somatik nuklir matriks (Franke et al, 1981) tidak terdeteksi di antara protein dari sperrn perinuklear teka. Fitur struktural yang berbeda dari sperma perinuklear teka menunjukkan bahwa mungkin melayani fungsi yang tidak biasa. Namun, ada hanya sedikit informasi yang tersedia mengenai identitas dan fungsi unsur teka. studi sitokimia menunjukkan bahwa PDL memiliki afinitas untuk perak (Krimer dan Esponda, 1979) dan asam fosfotungstat (Nicander dan Bane, 1966), menunjukkan itu terdiri dari protein dasar. Pengamatan serupa menunjukkan bahwa PNM dapat mengandung lisin yang kaya protein (Courtens et al, 1976). Para perforatorium diisolasi dari sperma tikus dilaporkan terdiri dari protein sistein kaya tunggal Bapak ~ 13.000 (Olson et al, l976b.,), Menunjukkan bahwa struktur asli sangat dipolimerisasi dan distabilkan oleh ikatan kovalen antarmolekul. Tidak diketahui apakah protein ini juga terletak di posterior PNM untuk perforatorium tersebut. Asam fosfatase activify (Teichman dan Bernstein, 1971) dan mungkin kolin plasmarogen (Teichman et al, 1972., 1974) telah terdeteksi di wilayah perinuklear postacrosomal spesies mamalia beberapa. Secara signifikan, beberapa penelitian telah terdeteksi aktin di wilayah

postacromosomal dengan menggunakan probe antibodi, berat meromyosin (Clmpaneila et al, 1979;.. Baccetti et al, 1990), dan DNase saya mengikat (Tamblyn, 1980). Penelitian ultrastruktur menunjukkan bahwa ini aktin, dan mungkin myosin, terlokalisir terutama dalam teka perinuklear (Baccuitt dkk, 980). Observasi ini harus dipertimbangkan dengan hati-hati, namun, karena mereka belum dikonfirmasi oleh penyelidikan biokimia (Franke et al, 1978;.. Strauch et al, 1980). Keberadaan aktin di wilayah postacrosomal akan memiliki implikasi

yang cukup besar. Aktin filamen membungkus dan melintasi inti bisa mempromosikan perubahan bentuk nuklir selama spermiogenesis, menentukan vektor arah motilitas sperma, dan memfasilitasi penetrasi sperma pada saat pembuahan. Dengan demikian, pertanyaan apakah aktin hadir dalam teka perinuklear adalah sangat penting untuk penjelasan fungsi sperma. C. Konstituante Enzim akrosom Akrosom, yang bervariasi dalam ukuran dan bentuk antara spesies, adalah struktur membran dipisahkan capping kutub anterior inti sperma (Fawcett, 1958; Fawcett dan Phillips, 1969a). Pada mamalia paling akrosom adalah organel terus menerus, meskipun pada tikus dan mencit ada vesikel kecil terpisah yang terletak berdekatan dengan permukaan ventral perforatorium tersebut (Piko, 1969; Lalli dan Clermont, 1981). Akrosom memainkan peran aktif dalam pembuahan. Setelah 1947 demonstrasi Swyer itu) dari hyaluronidase dalam sperma, disarankan bahwa enzim ini dapat diasingkan di akrosom dan dilepaskan pada fertilisasi untuk membubarkan malrix asam hialuronat dari selsel kumulus membungkus oosit (Schrader dan Leuchtenberger, 1951). Hipotesis ini didukung oleh Austin dan Uskup (1958b) yang mencatat akrosom yang hilang dari sperma hanya pembuahan sebelum lo. Ini "reaksi akrosom" adalah proses di mana exocytotic membran akrosom luar dan sekering plasmalemma untuk membentuk vesikel kecil banyak (Bedford, 1968, 1972; Franklin et al, 1970;. Yanagimirchi dan Noda 1970a). Para inembrane akrosom bagian dalam dan segmen khatulistiwa dari akrosom bertahan selama proses vesiculation. Sementara hyaluronidase beberapa tetap terkait vesikel tersebar, sebagian besar enzim dapat dipulihkan dalam bentuk larut dari sekitarnya.

Gambar 5
GAMBAR 5 . Elektron mikrograf dari sperma tikus inti ancli i ts terkait perinuklear teka dan matriks. (A) Nukleus disusun oleh, paparan singkat spermat ozoa untuk SDS 1%. diikuti dengan sentrifugasi gradien densitas sukrosa (Bellve et al, 1975). Protokol ini decapitates sperma dan menghilangkan amplop acorsome dan nuklir dari inti. Para teka perinuklear (panah kepala) tetap erat terkait dengan inti padat. (B) Ketika inti ini terkena 50 mM, ~ 190 mM Ca2+. Mg2+ (3:2 rasio molar) dan 100 ag DNase / ml. yang protamines dan DNA dihapus.

Lingkungan pergaulan (Primakoff et.al., 1980a) dan oleh karena itu tersedia pemisahan cumulus oophorous dan corona radiata. Varietas dari enzim hidrolitik lainnya telah diidentifikasi sebagai unsur utama akrosomal (McRorie dan Williams, 1974). Diantaranya terdiri dari asam fosfatase,

arylsulfatase,

F-N-acetyilglukosaminidase,

phospholipase A,

dan aktivitas protease

(Srivastava et al., 1965; Stambaugh dan Buckley, 1970; Allison dan Hartree, 1970). Lokalisasi dari hyaluronidase dan protease spesifik di dalam akrosom telah diterima dengan teknik immunohistochemical (Gould dan Breinstein, 1975; Morton, 1975; Garner dan Eatson, 1977; Allison dan Hartree; 1970). Ditemukan bahwa penambahan karakteristik zat warna yang sama dan golgi asal yang umum, membawa Allison dan Hartree (1970) untuk menyatakan bahwa akrosom adalah lisosom yang terspesialisasi. Anggapan ini seharusnya dipertimbangkan dengan hati-hati. Reaksi akrosom mempunyai mempunyai syarat terhadap Ca+. Telah disimulasikan dengan pemasukan K+, dan terlihat membutuhkan Na+ aktif, K+ATPase (Mrsny dan Meizel, 1981). Ciri-ciri ini sama dengan semua sekretori eksositosis, menganjurkan bahwa akrosom memiliki karakteristik yang membedakannya dari lisosom. Misalnya, alkalin phosphatase (Gordon et al., 1978) dan protease dengan perbedaan pH optimal yang luas (Yanagimachi dan Teichman, 1972; Zaneveld et al., 1972a; Beirnstein dan Teichman, 1973) telah diidentifikasi dalam akrosom. Juga, asam fosfatase pada mulanya berasal dari akrosom mungkin terlokalisasi secara primer dalam subakrosomal dan daerah postakrosomal dari sperma kelinci dan kerbau (Teichman dan Bernstein, 1971). Meskipun demikian, Gonzales dan Meizel (1973) telah mengidentifikasi bentuk multiple dari asam fosfatase dalam sperma kelinci, dua diantaranya mungkin adalah akrosomal. Hyaluronidase yang diisolasi dari testis atau spermatozoa merupakan sebuah isoenzim yang membedakannya dari lisosomal hyalurnidase (Zaneveld et al., 1973; Yang dan Srivastava, 1974). Enzim ini tidak mempunyai karakteristik secara komplit, tetapi nampaknya telah mempunyai empat subunit (Khorlin et al., 1973) dan Ph optimum yang rendah (Yang danSrivastava, 1974). Akrosin, konstituen akrosom yang lain, merupakan serin protease yang unik pada sperma mamalia (Polakoski dan Parrish, 1977; Tobias dan Schumacher, 1977; Brown dan Harrison, 1978; Mukerji dan Meizel, 1979). Meskipun perbedaan interspesifik terjadi, akrosin yang bervariasi mempunyai sifat yang sama (untuk tinjauan, lihat McRorie dan Williams, 1974; Stambaugh, 1978; Meizel, 1978). Seperti tripsin, akrosin

memperlihatkan aktivitas yang optimal pada pH 8 dan dapat menghidrolisa substrat tripsin sintetik (Stambaugh dan Buckley, 1969). Sekarang enzim ini mempunyai sesuatu yang mencirikan enzim ini dari tripsin, termasuk Mr yang lebih tinggi dan substrat yang unik dan inhibitor yang spesifik (Zaneveld et al., 1972). Akrosin ada tanpa akrosom sebagai prekursor zymogen yang inaktif, proakrosin (Meizel, 1972; Mukerji dan Meizel, 1975; Polakoski dan Parrish, 1977; Tobias dan Schumacher, 1977; Brown dan Harrison, 1978; Mukerji dan

Meizel, 1979), yang mungkin diinaktifkan dan distabilkan dengan inhibitor yang spesifik dengan konsentrasi lokal (Zaneveld et al., 1972b; Fink et al., 1973; Brown dan Hartree, 1975; Goodpasture et al., 1980). Enzim mungkin terjadi dalam multiple, bentuk enzim yang aktif, beberapa dari enzim tersebut bisa jadi ikatan membran (untuk tinjauan, lihat Parrish dan Polakoski, 1979). Meskipun teori tersebut telah diterima bahwa akrosin memungkinkan sperma untuk penetrasi zona pellusida (Stmabaugh dan Buckley, 1969), dukungan terhadap fakta tersebut tidak meyakinkan (cf. Hartree, 1977; Shams-Borhan et al., 1979). Variasi dari enzim tambahan dideteksi pada sperma mamalia mungkin berlokasi dalam akrosom. Beberapa dari hal tersebut memiliki aktivitas proteolitik termasuk arylaminidase (Meizel dan Chotam, 1972), akrolisin (McRorie et al., 1976) kolagen semacam peptidase (Koren dan Milkovie, 1973) dan cathepsin D semacam protease (Erickson dan Martin, 1974). Potensial enzim akrosomal lainnya termasuk neuraminidase (Srivastava et al., 1970), arylsufatase (Seiguer dan Carstro, 1972), dan esterase nonspesifik (Bryan dan Unnithan, 972). Yang menarik, membran plasma paling luar dan/atau membran akrosomal terluar dari sperma hamster mungkin terdiri dari Mg2+ -ATPase porton memompa untuk menjaga keasaman pH akrosom (Working dan Meizel, 1981, 1982). Enzim akrosomal mungkin dikemas dalam pola yang terorganisasi, secara teliti dalam kelinci guinea dan chinchilla (Fawcett dan Hollenberg, 1963; Fawcett dan Phillips, 1972a) terjadi dalam wilayah yang berlainan. Batas membran akrosom juga mengandung partikel yang tidak biasa dikemas dengan rapat dalam susunan parakristalin (Koehler, 1972; Friend dan Fawett, 1974; Phillips, 1977a). Penelitian sitokimia menganjurkan alkalin fosfat spesifik yang berlokasi antara membran akrosomal luar (Gordon et al., 1978). Sementara beberapa enzim akrosomal, seperti hyaluronidase, menghilang dengan mudah, enzim yang lain memerlukan prosedur ekstraksi yang tepat. Pada akrosin dasar (Brown dan Hartree, 1974; Srivastava et al., 1974) dan neuraminidase (Srivastava dan Abou-Issa, 1977) menunjukkan konstituen integral dari membran dalam akrosom pada daerah ekuator (cf. Shams-Borhan et al., 1979). D. Struktur ekor sperma Ekor sperma pada mamalia memiliki empat bagian yang berlainan: leher (neck), bagian tengah (midpiece), bagian utama (principal piece), dan bagian akhir end piece) dan (gambar 1). Bagian leher sperma pendek, daerah morfologi yang kompleks berlokasi dekat posterior ke kepala sperma. Selanjutnya yang memanjang secara distal adalah bagian tengah yang tebal, yang terkarakteristik dengan susunan mitokondria seperti sekerup mengelilingi aksonema dan serabut luar yang tebal. Bagian utama, adalah bagian yang paling panjang pada

ekor sperma, juga terdiri dari aksonema dan serabut luar yan tebal. Pada bagian ini, bagaimanapun, mitokondria berbentuk sekerup digantikan dengan selubung fibrous (gambar 1). Bagaian paling distal, bagian akhir, terdiri dari daerah less-devel-oped selubung fibrous dan aksonema, yang mana tipe berorientasi dari perubahan mikrotubulus (Phillips, 1975b). 1. Daerah leher

Garis lapisan basal pada implantation fossa dan juga nukleus terdapat pada leher yang berflagel. Struktur tambahan diwarnai dengan tebal dengan asam phosphotungstic, bersifat protein yang utama (Nicander dan Bane,1962). Antara lapisan basal dan sisa dari struktur leher berupa zona yang terbatas, dilintasi oleh filamen tipis yang nampaknya untuk melindungi lapisan basal pada bagian penghubungnya. Penelitian ultrastruktural pada daerah leher telah membuat beberapa kontroversi mengenai morfologi dari bagian penghubung (Fawcett dan Phillips, 1969b; Zamboni dan Stefanini, 1971). Pada bagian terakhir distal leher, bagian penghubung terdiri atas sembilan segmen atau striated columns. Kolom-kolom tersebut berorientasi secara longotidunal dan terdiri dari arus yang padat dan ikatan tipis. Mirograf dengan resolusi yang tinggi dari kenampakkan kolom menunjukkan sebuah kecenderungan yang teratur sama dengan yang terlihat dalam ciliary rootlets dan struktur seperti sentriol lainnya ( Fawcett dan Phillips, 1969b; Phillips, 1975b). Fawcett dan Phillips (1969b) menyarankan bahwa struktur itu menstabilkan dasar dari apparatus motil. Pada beberapa spesies rodentia, termasuk tikus, segmen kolom secara berangsur-angsur bergabung dan terhubung dengan daerah articular proximal dari bagian penghubung, disebut kapitulum (Fawcett dan Phillips, 1969b). Sebaliknya, Zamboni dan Stefanini (1971) tidak meneliti pembelahan anterior dari kolom yang bersegmen dalam spermatozoa dewasa pada kelinci, manusia, dan monyet, dan disarankan bahwa kapitulum tidak nampak selama spermatogenesis. Mungkin perbedaan yang tercatat dalam kedua penelitian menunjukkan variasi spesies. Struktur lainnya dalam daerah leher termasuk bagian yang berlebihan dari nuclear envelope, satu atau dua mitokondria memproyeksikan bagian posterior dari bagian tengah, segmen inisial dari serabut luar yang tebal, dan perpanjangan anterior dari axonemal pusat pasangan microtubulus (Fawcett, 1975a). Pada daerah distal dari leher, Sembilan segmen kolom masing-masing berdempetan dengan kuat ke bagian akhir anterior pada serabut luar yang tebal (Fawcett dan Phillips, 1969a,b; Phillips, 1975b; Zamboni dan Stefanini, 1971). Bagian tengah dari sepasang mikrotubulus memanjang dari axonom tepat melewati rongga pusat dari bagian penghubung ke permukaan proksimal sentriol (Fawcett dan Phillips, 1969b; Zamboni dan Stefanini, 1971). Pada kebanyakan spesies mamalia proksimal sentriol,

berorientasi antara 45 sampai 90 ke flagel axis, berlangsung dalam sperma dewasa (Nicander dan Bane, 1962; Fawcett, 1965; Illison, 1966; Zamboni dan Stefanini, 1971; Pedersen, 1972b). Struktur ini mungkin fungsional selama tahap awal diferensiasi ekor, meskipun, karena diferensiasi itu tidak diteliti dalam sperma tikus motil (Wooley dan Fawcett, 1973). Informasi biokimia pada bagian leher tidak cukup. Bagian basal dan bagian penghubung dapat larutkan dengan deterjen hanya dengan kehadiran DTT (Bedford dan Calvin, 1974a; Bellve et al., 1975), Disarankan bahwa kedua struktur telah stabil dengan rantai disulfida intermolekuler. 2. Elemen Axonemal Axonema adalah yang bertanggung jawab terhadap kemotilan sperma. Seperti cilia dan flagella pada semua spesies (Fawcett dan Porter, 1954), axonema pada sperma memiliki tipe 9+2 simetri radial dengan Sembilan peripheral tersusun atas sepasang mikrotubulus,

masing-masing dua tangan, dan dua pusat mikrotubulus dengan sarung yang menyelimutinya (Fawcett, 1975a; Amos et al., 1976; Bacceti dan Afzelius, 1976; Linck et al., 1981). Sepasang peripheral terhubung oleh jembatan nexin dan tergabung dengan selubung pusat dengan sembilan jari-jari atau rantai radial. Setiap pasangan peripheral tersusun atas tubulus sirkuler A berdempet dengan tubulus berbentuk C, B yang lebih besar. Tubulus A terdiri dari 13 protofilamen yang paralel, di mana salah satu dari protofilamen tersebut 10 atau 11 sama dengan protofilamen berbentuk subfiber B. tubulus A yang lain memiliki dua tonjolan atau tangan yang mana memanjang ke arah tubulus B pada pasangan peripheral selanjutnya. Interkoneksi yang lain antara mikrotubulus juga muncul dari tubulus A, termasuk jembatan nexin dan penghubung radial. Pusat mikrotubulus C1 dan C2, yang masing-masing adalah sirkuler pada bagian menyilang dan tersusun atas 13 protofilamen, juga terhubung oleh jembatan. Selubung pusat, sering ditafsirkan sebagai gulungan filamen seperti sekerup, yang tersusun atas sepasang jajaran penonjolan yang berkaitan dengan masing-masing pusat tubulus. Olson dan Linck (1977) telah mengkonfirmasi bahwa struktur elemen dari axonema sperma tikus nampak berlawanan dan cenderung cilia dan flagella bertipe renggang dari yang lebih sederhana. Beberapa peneliti juga mendeskripsikan struktur barb-shaped berkaitan dengan pusat tubulus C2 yang mungkin berinteraksi dengan penghubung radial. Axonemal mikrotubulus tersusun secara primer dari tubulin - dan F-, dua protein mempunyai komposisi asam amino yang jelas secara berturut-turut Mrs ~56000 dan 54500 dalton (Stephens, 1970a; Fine, 1971; Bryan dan Wilson, 1971). Microheterogeneity dalam

dua subkelas dapat diteliti mengikuti fokus isoelektrik dan resolusi tinggi gel elektroforesis SDS-polyacrylamide (Feit et al., 1971; Witman et al., 1972). Berdasarkan pemetaan peptida dan sekuensing data, Luduena dan Woodward (1973) telah mendemonstrasikan bahwa tubulin - dan F- keduanya diawetkan secara filogenetik. Meskipun susunan molekuler dari tubulin dalam axonemal mikrotubulus tidak dipisahkan seluruhnya Stephans (1974) telah mengusulkan sebuah model untuk substruktur mikrotubulus. Dalam model tubulin

heterodimer ini, masing-masing tersusun dari satu subunit - dan F-, yang terangkai secara vertical pada masing-masing protofilamen dengan penggabungan head-to-tail, sementara heterodimer dalam protofilamen yang berdekatan diatur bergiliran ke bentuk kesatuan seperti sekerup (lihat juga Linck dan Langevin, 1981; Linck et al., 1981). Dynein, kelas dari flagellar ATPase, terbagi dalam generasi pergerakan axonemal. Protein ini, pertama diisolasi oleh Gibbons dan Rowe (1965), ada dalam komponen multipel dengan Mr s 300000 (Linck, 1973; Gibbons et al., 1976; Gibbons, 1981). Dynein untuk ATP spesifik dan membutuhkan kation dwivalensi untuk aktivitas enzimatik (Gibbons, 1966; Ogawa dan Mohri, 1972). Flageller ATPase yang besar, dynein 1, dapat tetap dalam bentuk multipel (Gibbons et al., 1976; Gibbons, 1981) dan berada dalam pembentukan tangan luar tubulus A dari pasangan peripheral (Ogawa et al., 1977, 1982). Protein axonema lain yang diisolasi telah terkarakteristik dengan gel elektroforesis SDS polyacrylamida. Yang paling mencolok dari semuanya adalah nexin, Mr 165000, sebuah protein yang berada dalam jembatan nexin (Stephens, 1970b). Penelitian baru-baru ini menggunakan 2-dimensi gel elektroforesis polyacrylamida telah teridentifikasi > 100 polipeptida yang ada dalam struktur axonemal Chlamydomonas (Piperno et al., 1977; Adams et al., 1981; Huang et al., 1982; Brokaw et al., 1982). Ekspresi mutan dari variasi disfungsi motilitas membuktikan nilai yang tidak terhingga untuk pemotongan hubungan strukturfungsi dari komponen flagellar. Meskipun penelitian perbandingan genetik tidak mungkin dalam mamalia, sedapat mungkin banyak informasi dapat diperoleh dengan pemanfaatan penyelidikan antibodi monoklonal pada unsur pokok flagellar spesifik dalam konjugasi dengan biokimia dan teknik morfologi. Konsep dari gerakan flagelar dibangkitkan oleh diferensiasi pasangan peripheral umumnya diterima (Afzelius, 1959). Model potongan mikrotubulus didukung oleh Satir (1965, 1968) yang pertama kali mendemonstrasikan perbaikan jarak dari masing-masing pasangan dan perpindahan relatifnya selama pergerakan silia. Sejak saat itu telah dikonfirmasi lebih definitif dengan penelitian yang menambahkan ATP ke perlakuan tripsin

meningkatkan peluncuran aktif axonema antara pasangan peripheral, seperti yang didemonstrasikan dengan timun laut (Summers dan Gibbons, 1971) dan sperma kerbau (Summers, 1974; Lindemann dan Gibbons, 1975). Gerakan meluncur nampaknya dinaikkan dengan tangan dynein, yang berbentuk jembatan menyilang sementara antara pasangan mikrotubulus yang berdekatan (Gibbons et al., 1976). Mekanismenya bertanggung jawab untuk mengubah peluncuran interdoublet ke dalam bengkokan flagellar tidak didefinisikan dengan baik, mekipun interaksi antara jari-jari radial dan selubung psangan sentral memiliki implikasi (Warner, 2976; Olson dan Linck, 1977). Penelitian terkini dari penekanan mutasi dalam Clamydomonas fungsional kekurangan jari-jari radial demonstrasi bahwa strukturnya mungkin bertanggung jawab untuk mengubah gerakan flagellar simetrik ke dalam sebuah gerakan asimetrik yang efisien (Brokw et al., 1982). Kiranya, sistem jari-jari radial, mungkin setuju dengan serabut luar yang tebal, juga mungkin mengatur gerakan flagellar pada sperma mamalia. 3. Struktur Tambahan Flagella Ekor sperma mamalia memiliki struktur elemen yang rumit (Gambar 1). Yaitu lapisan basal, bagian penghubung, fiber luar yan tebal, membran luar mitokondria, dan selubung fibrous. Struktur itu dapat diisolasi seperti sebuah unit integral mengikuti pembongkaran sperma tikus sampai 1% SDS (Bellve et al., 1975; OBrien dan Bellve, 1980a). Elemen ekor ini, ketika diteliti dengan 2-dimensi polyacrilamida gel elektroforesis, menampakkan sebuah pembatasan keanekaragaman dari polipeptida spesies (<29) dengan Mrs berkisar antara 10000-75000 dan pIs antara 4,0-7,0 terdapat karboksimetilanin (Bradley et al., 1981). Lima di antara sedikit protein dengan hanya beban unit tunggal, mengusulkan bahwa mereka mungkin varian polipeptida atau menunjukkan modifikasi posttranslational. Kemudian, struktur elemen ekor tersebut mungkin terdiri hanya 25 polipeptida. Menariknya, sebagai modifikasi postranslasional seperti phophhorilasi, asetilasi, metilasi, glikosilasi, dan ADP ribosilasi biasanya mencerminkan perbedaan fungsi dari polipeptida native. Serabut luar yang tebal dan selubung fibrous adalah komponen yang paling mencolok dari ekor sperma. Kedua struktur itu distabilkan oleh ikatan kovalen disulfida dan terkunci dengan axonema ke bentuk unit tunggal yang fungsional (Olson et al., 1976a; Olson dan Linck, 1977). Dalam peneilitan komparatif, Phillips (1972b) telah meneliti sebuah hubungan antara ukuran fiber tebal luar dan radius dari lekukan karena pukulan flagella. Pendapat bahwa fiber tebal luar dan mungkin selubung fibrous, mungkin bertindak menjadikan ekor sperma menjadi kaku, dengan demikian pengubahan pukulan flagella dan fasilitas pergerakan di muka selesai merekatkan sekresi genital.

Keistimewaan ultrastruktur yang utama dari serabut luar yang tebal adalah sama di antara mamalia, meskipun mungkin bervariasi dalam ukuran dan panjang (Fawcett, 1970, 1975a). Setiap Sembilan serabut luar yang tebal berlokasi dekat dengan satu pasangan peripheral axonema, dengan demikian pembentukan karakteristik pola cross-sectional 9+9+2 pada sperma mamalia (gambar 1). Pada daerah leher, setiap serabut luar yang tebal berdempetan ke satu kolom yang terbagi. Serbut meruncing seperti memanjangkan ekor dan berakhir pada level yang berbeda selama bagian utama (Telkka et al., 1961). Serabut 1, 5 dan 6 umumnya lebih besar dan lebih panjang daripada dengan yang lainnya. Daerah berselaput tipis dari setiap serabut dapat dibedakan dengan pengurangan kerapatan elektronnya dan tambahan warna yang unik (Gordon dan Bensch ,1968; Fawcett, 1975a; Olson dan Samsons, 1980). Serabut luar yang tebal berupa cross-striated dengan periodisitas yang umum lebih kompleks dalam korteks daripada serabut interior ( Pedersen, 1972b; Woolley, 1970; Baccetti et al., 1973; Olson et al., 1977). Pola striated mungkin hasil dari pengemasan lateral dari subunit seperti protofibril (Bacceti et al., 1976b; Olson dan Sammons, 1980). Baru-baru ini, serabut luar yang tebal dari tiga spesies mamalia yang diisolasi dan terkarakteristik per-bagiannya (Bacceti et al., 1973, 1976a; Price, 1973; Calvin, 1976b; Olson et al., 1976a; Olson, 1979). Komponen proteinnya ketika dipisahkan dengan SDS-PAGE, ternyata memiliki profil yang sama dengan kebanyakan spesies. Pada tikus, kerbau dan manusia, serabut luar yang tebal terutama terdiri dari lima protein, Mr s ~ 14000, 28000, 38000, 44000, dan 87000. Tiga protein terkecil kaya akan sistein, leusin, prolin, dan serin (Olson dan Sammons, 1980). Kelebihan komponen lisin sebanyak 87000 dalton mungkin berlokasi dalam korteks luar dari serabut. Proporsi besar dari zink dalam isolasi ekor terasosiasi dengan serabut luar yang tebal (Calvin et al., 1975 Bacceti et al., 1976a,b), mungkin dalam konformasi ligand dengan grup sistein dari protein 38000 dan 41000 dalton (Calvin, 1979). Dua laporan berpendapat bahwa serabut tersebut kaya akan trigliserida dan mungkin karbohidrat (Bcceti et al., 1973; Prica, 1973). Selubung fiber merupakan secara jelas terbagi secara silinder menunjukkan batas proximal dan distal dari bagian utama. Bagian itu tersusun dari dua kolom longitudinal berlokasi berlawanan sisi dari axonema, dan rangkaian bagian yang dekat, rusuk semisirkuler yang bergabung dengan kolom longitudinal (Fawcett, 1970, 1975a). Pada tikus dan beberapa mamalia lainnya, rusuk bercabang dan bergabung secara ekstensif, membentuk sebuah

jaringan irregular dari berkas sirkumferential besar ( Fawcett, 1970). Orientasi sirkumferential dari rusuk mungkin memfasilitasi pembengkokan planar dari ekor sperma motil (Phillips, 1975b). Kedua elemen dari selubung fibrous nampaknya mempunyai

substruktur filamentous, meskipun subunit polimer dari kolom longitudinal lebih besar dan terbungkus dengan bebas daripada rusuknya. Pada akhir proksimal dari selubung fibrous, kolom longitudinal berdempet dengan fiber tebal luar 3 dan 8. Distal ke termini dari kedua fiber tebal, kolom longitudinalnya berdempet dengan punggung yang kecil yang terbentuk dari korespondensi pasangan axonemal. Selubung fibrous sperma tikus, ketika diisolasi mempunyai ciri-ciri struktural yang nyata, yang terutama tersusun dari protein tunggal Mr 80000 (Olson et al., 1976a; Olson, 1979). 4. Mitokondria yang berbentuk sekerup Mitokondria sperma tersusun pada pertengahan ekor, dari akhir ke akhir dalam bentuk seperti sekerup bersatu mengelilingi serabut luar yang tebal. Terdapat variasi lebar pada beberapa mamalia dalam bentuk dari mitokondria menyerupai sekerup (Phillips, 1977b) dan pada lebar bagian tengahnya (Fawcett, 1975a). pada tikus, bagian tengahnya memiliki

panjang 21Qm dan tersusun atas 85 mitokondrial gyres tersusun dobel helix, meskipun beberapa bagian tripel helix juga ada (Phillips, 1977b). kecuali pada beberapa spesias, mitokondria memiliki panjang tidak sama jadi pertemuan antara keduanya terjadi secara acak sepanjang helical gyre. Mitokondria pada sperma mamalia, seperti pada sel somatik, bisa diidentifikasi adanya membran luar dan dalam dan sebuah matriks internal (Favard dna Andre, 1970; Fawcet, 1975a). Bagaimanapun, mereka juga terlihat sebagai ciri-ciri ultrastruktural yang tidak biasa, termasuk spesialisasi yang khas pada membran luar (Friend dan Heuser, 1981), matriks yang tebal, dan krista yang tersusun longitudinal (Fawcett, 1970; Phillips, 1975b). Permukaan mitokondria bagian luar dari sperma babi guinea terlihat struktur partikulat yang luar biasa juga ada dalam baris yang rapi (Friend dan Heuser, 1981). Permukaan konveks terdiri dari plasmalemma tersusun secara acak tersebar masing-masing terdiri dari dua sampai empat 7-8 nm partikel, 2 nm ruang yang terpisah. Kebalikannya, permukaan konkaf apposing serat luar yang tebal memiliki batang yang sama strukturnya tersusun secara parelel ke bentuk konfigurasi jenjang, terpisah 8nm, dengan jarak rangkaian permukaan 45ke axis mitokondria. Susunan partikel tertinggi mungkin enzim memiliki peran penting dalam metabolisme sel dan atau kemotilan. Membran luar dari mitokondria sperma secara partikular bersifat resisten terhadap gangguan dan solubilitas. Membran ini menahan ukurannya dan bentuk sekerup tetap mengikuti pengukuran larutan hipotonik (Keyhani dan Storey, 1973), Triton X-100 (Wooding, 1973) atau SDS (Bedford dan Calvin, 1974a; Bellve et al., 1975). Ini tersusun

secara prodominan dari tiga polipeptida: Mrs 20000, 29000 dan 31000 dengan muatan pertama dengan menarik perbandingan molar yang tinggi dari sistein dan prolin (Pallini et al., 1979). Kemudian, struktur yang tidak biasa mungkin stabil, pada bagainnya, karena ikatan intermolecular disulfide, meskipun membran luar mitokondria menahan bentuknya bahkan setelah inkubasi dengan 10 mM DTT (Bartoov dan Messer, 1976). Struktur ini resisten juga mungkin tergantung pada adanya ligand intermolekuler sisteinil-selenium (Pallani dan Bacci 1979) dan interaksi hidrofobik yang kuat. Struktur tambahan yang khas dari mitokondria adalah mempunyai fasilitas isolasi dari spermatozoa biri-biri dan kerbau (Bartoov dan Messer, 1976;Hrudka, 1978; Pallini et al., 1979). Mitokondria yang terisolasi menampakkan kemampuan menahan integritas struktur normal (Pallini, 1979) dan mungkin berguna untuk assessment metabolik tambahannya. Beberapa menemukan pendapat bahwa mitokondria sperma mempunyai tipe metabolik kapabiliti. Kemudian, sperma terdiri enzim yang mampu secara aerobik memetabolisme gula glikolisabel, gliserol, sorbitol, laktat, piruvat, asetat, asam lemak lainnya, dan beberapa asam amino (Mann dan LutwakMann, 1981). Sitrokrom, termasuk spesifik tes sitokrom ct (Wheat et al., 1977), dan beberapa enzim dari siklus Krebs telah dilokalisasi ke bagian tengah sperma atau mitokondria telah diisolasi (lihat Morhi et al., 1965; Bartoov dan Messer, 1976; Pallini, 1979). Mitokondria sperma terdiri dari polymerase yang tepat (Hecht, 1974; Fuster et al., 1977) dan DNA dan RNA sintesis yang dapat diamati (Premkumar dan Bhargava, 1972, 1973). Akhirnya, mitokondria sperma biri-biri terdiri dari DNA sirkuler dengan tipikal fisika dan kimia tambahan pada sel somatik (Fisher et al., 1977). Satu keistimewaan yang membedakan mitokondria sperma dari mitokondria yang ditemukan dalam sel somatik adalah kemampuan mereka untuk mengoksidasi laktat secara langsung (Storey dan Kayne, 1977). Secara tidak langsung, seperti malat/kumparan aspartat, berguna untuk transfer reduksi NADH ekuivalen dari sitosol ke mitokondria dalam jaringan somatik. Sebalikanya, porsi dari laktat dehidrogenase sperma (LDH-C4) mungkin berlokasi dalam mitokondria (Montamat dan Blanco, 1976; Storey dan Kayne, 1977, 1978; Van Dop et al., 1977; Hutson et al., 1977). Karakteristik isoenzim LDH-C4 sperma (Mr ~ 34000) telah selesai dipurifikasi dan dikristalkan, strukturnya telah pecah ke dalam resolusi dari 2,9 A untuk - asam hidroksi dan dapat mengoksidasi laktat ke piruvat, dengan demikian

memungkinkan untuk selanjutnya prosuksi energy via siklus Krebs (Mita dan Hall, 1982; cf. Storey dan Kayne, 1977, 1978).

5. Topografi Regional dari Membran Plasma Sperma Polarisasi sangat tinggi pada spermatozoon adalah diselebungi oleh plasmlemma terlihat jelas daerah fungsionalnya. Kemudian, membran plasma menutup daerah anterior kepala mengikutasertakan dakan reaksi akrosom, sementara permukaan postakrosomal dipertimbangkan bertanggung jawab untuk pembelahan inisial pada gamet jantan dan betina. Penelitian freeze-fracture dari sperma eutherian menyatakan daerah terdiferensiasi dalam ukuran, distribusi, dan kerapatan relatif partikel intramembran (Flechon, 1974; Friend dan Fawcett, 1974; Stackpole dan Devorkin, 1974; Olsen et al., 1977). Susunan partikel berkisar antara kesatuan kristal yang acak berubah dengan sangat diantara spesies (Friend dan Fawcett, 1974; Fawcett, 1975a; Suzuki, 1981). Tiruan permukaan dari sperma rodentia juga menampakkan daerah spesialisasi dari membran plasma, termasuk penyusun dari tubulus yang kecil dan pembuluh berbatasan dengan akrosom (Phillips, 1975a). Sama halnya dengan mantel glikokaliks yang terdistribusi secara asimetris pada permukaan ekor dan sperma kelinci yang diejakulasi (Flechon, 1975), dan mempunyai perpanjangan daerah ultrastruktural pada babi guinea (Friend dan Fawcett, 1974). Satu keistimewaan pada sperma mamalia umumnya adalah sebuah tarikan, kesatuan linear dari partikel yang bergerak ke bawah bagian utama dalam membran plasma serabut 1 paling luar yang tebal (Friend dan Heuser, 1981). Fawcett (1975a) berpendapat tarikan ini mungkin mengikatkan membran plasma ke rusuk subjacent dari selubung fibrous, dengan demikian memfasilitasi koodinasi pergerakan. Komponen permukaan berupa topografi berada di membran plasma sperma. Daerah permukaan terlihat nyata pentingnya untuk mengijinkan pengikatan lektin (Edelman dan Millette, 1971; Gordon et al., 1974; Nicolson dan Yanagamachi, 972,1974; Schwarz dan Koehler, 1979; untuk tinjauan ulang, lihat Koehler, 1978, 1981) dan antibody heterogen (Koehler dan Perkins, 1974; Koehler, 1975; Millette dan Bellve, 1977, 1980; Tung et al., 1982). Penyelidikan molekuler menunjukkan distribusi spesifik spesies (Koehler, 1981), berpendapat bahwa unsur pokok permukaan tidak diawetkan secara filogenetik. Apalagi, motilitas lateral dari lektin dan reseptor antibodi dalam membran plasma nampak berbatasan dalam sperma (Koehler, 1975; ORand, 1977), secara partikel dalam daerah lain daripada permukaan postakrosomal dari kepala (Nicolson dan Yanagamachi, 1974). Pembatasan mobilitas dari unsur pokok permukaan mungkin karena assosiasi lateral mereka dengan integral yang lain atau permukaan komponen peripheral atau interaksinya dengan subpermukaan elemen sitoskeletal (Nicolsosn, 1982). Membran lipid sperma juga mungkin berada dalam daerah tersendiri. Filipin, pemeriksaan terhadap membran kolesterol, berbentuk kompleks istimewa di daerah

plasmalemma akrosom paling luar sperma babi guinea (Elias et al., 1979). Sama halnya dengan interaksi lokalisasi polimiksin dengan daerah membran fusigenik di atas akrosom dan sitoplasma droplet menyatakan bahwa konsentrasi lokal pada anion lipid yang tinggi (Bearer dan Friend, 1982). Seperti lipid mungkin memfasilitasi membran sekiranya kapasitasnya cukup dan reaksi akrosom. Beberapa antigen permukaan pada sel spermatogenik telah terkarakterisasi secara immunologikal, genetik, dan biokimia. Faktor itu termasuk antigen histokompability (Erickson et al., 1977), antigen H-Y (Goldberg et al., 1971),antigen terspersifik dengan lokus T (Bennett et al., 1972; Yanagisawa et al., 1974), antigen F9 dan relatif tertoma (Arzt et al., 1973, 1974), dan antigen membagi dengan spermatozoa dan serebelum neonatal (Schachner et al., 2975; Seeds, 1975). Akhirnya dua dari antigen tersebut terdistribusi ke daerah permukaan sperma. Dan antigen membagi dengan sel teratocarcinoma terkurung pada permukaan postakrosomal dalam sperma tikus dan manusia (Fellous et al., 1974), sementara antigen H-Y tikus terutama berada di atas tutup akrosomal (Koo et al., 1973). Dapat dijawab sebagai fungsi yang penting pada spermatozoon. Bagian antigen ini secara sederhana diserap ke permukaan sel terlebih dahulu daripada spermiation, sepanjang yang lain ketahui produk sel sertoli (cf. Franke et al., 1978; Phillips, 1980). Unsur pokok permukaan autoantigenik telah diidentifikasi pada spermatozoa kelinci (ORand dan Porter, 1979) dan babi guinea (Tung et al., 1979, 1980). RSA-1, sebuah antigen membran plasma pada sperma kelinci, adalah sebuah sialoglikoprotein (Mr ~ 13000) yang mengikat Ricinis communis I lektin (ORand dan Porter, 1979; ORand dan Romrell, 1980b). karekteristik biokimia pertama dari permukaan autoantigen babi guinea mengungkapkan faktor ganda dengan rentang Mrs antara 19000 sampai 69000 (Teuscher et al., 1982). Sebgai tambahan, peneliti telah mengidentifikasi sebuah antigen yang tidak biasa (Mr ~ 6000) pada sperma acrosome-reacted yang mungkin sama dengan glikolipid, teknik immunopresipitasi menggunakan antisera heterologous telah mendefinisikan beberapa faktor permukaan pada sperma tikus (Herr dan Eddy, 1980). Penelitian terkini telah menggunakan antibodi monoklonal untuk meneliti perlawanan spesifik yang langsung pada faktor permukaan dari babi guinea (Myles et al., 1981) dan sperma tikus (Feuchter et al., 1981). Teknologi hibridoma memungkinkan isolasi yang berasal dari sel klon, setiap produksi antibodi yang mengenal faktor antigen tunggal. Empat antibodi monoklonal menimbulkan perlawanan sperma tikus telah diperlihatkan terhadap ikatan untuk daerah yang nyata pada permukaan sel, tiga untuk ciri-ciri daerah pada kepala dan satu untuk ekor (Feuchter et al., 1981). Bagian autoantigen itu tidak terdeteksi pada

permukaan sel sampai spermatozoa matang mencapai korpus epididimis. Sama halnya dengan antibodi monoklonal senogenik yang telah diisolasi setelah imunisasi tikus dengan membran pembuluh terlepas dari sperma babi guinea selama reaksi induksi akrosom ionophore-A23187 (Primakoff et al., 1980a). Pembelahan sel memproduksi 116 sel hibridoma, setiap sel menghasilkan antibodi yang berikatan dengan daerah kutub pada permukaan sel sperma (Myles et al., 1980, 1981; Primakoff et al., 1980b). pola diperolehnya empat antibodi monoklonal ditunjukkan pada gambar 6 dan 7. Tiga antibodi monoklonal immunoprecipitate protein berlabel
125

I mempunyai Mrs ~ 42000 (keseluruhan kepala),

52000 (kepala anterior), dan 60000 (Kepala posterior). Ciri-ciri lokalisasi dari komponen tersebut ke daerah membran dalam daerah akrosomal dan postakrosomal memberi kesan bahwa mereka mungkin mempunyai fungsi selama kapasitasi, reaksi akrosom, atau fertilisasi.

Gambar 6. Diagram sistematik spermatozoa babi guinea memperlihatkan struktur utama dan daerah permukaan sel kutub. (A) terlihat komponen utama dari sel sperma, termasuk akrosom (A), nukleus (N), dan mitokondria (M) (cf. gmbr 1). (B) empat antibody monoclonal dipersiapkan sebagai unsur utama perlawanan dari ikatan pembuluh akrosom untuk ciri-ciri daerah topografi pada permukaan sel. Daerah dikenali oleh antibody tersebut termasuk kepala anterior, kepala posterior, keseluruhan kepala, dan ekor. (diproduksi dari Myles et al., dengan ijin dari editor, Cell.)

Gambar 7. Pola ikatan antibody monoclonal respektif pada permukaan sel babi guinea. Sperma tetap dalam 0,5% paraformaldehida dan kemudian diinkubasi dengan antibody. Fotograf secara tidak langsung memperlihatkan ikatan antibody immunoflourescence dan gambar hubungan phase-contrast. Antibody mengenal unsur pokok protein pada kepala anterior (Mr 52000), kepala posterior (60000), keseluruhan kepala (42000), dan ekor posterior (gambar 7A-C, x 1300; gambar 7D, x 620). (Diproduksi dari Myles et al., 1981, dengan ijin dari editor, Cell.)

III. Biogenesis Spermatozoa Sejak Leeuwenhoek (1680) pertama kali meneliti sel sperma awal mula kehidupan dalam testis tikus, banyak yang telah terdokumentasi mengenai keasliannya dan biogenesisnya (untuk tinjauan lebih lanjut, lihat Bellve, 1979). Sel primordial memulai pada sebuah sisi ekstraembrionik dalam kehidupan janin, berpindah ke arah gen genital dan proliferasi ke hasil stem cells dari epitel neonatal seminiferous (Eddy et al., 1981). Selanjutnya selama perkembangan prepubertas sel tersebut, dan pada deasanya, mengalami seri pembelahan untuk memperbaharui keaslian stem cell dan untuk membentuk hubungan dari diferensiasi spermatogonia (Gambar 8). Pembelahan mitosis manghasilkan spermatosit preleptoten yang mengalami dase akhir dari sintesis DNA dan kemudian, tanpa pembelahan, memasuki meiosis. Meiosis..

Gambar 8 Gambar 8. Diagram sistematik menggambarkan pemotongan diferensiasi yang terjadi selama spermatogenesis tikus. Volume dan karekteristik morfologi dari tipe sel respektif. Proses terjadi dalam tiga fase: spermatogonia proliferat dengan seri pembelahan mitosis (ascending axis), spermatosit undergo diferensiasi sel selama meiosis profase (horizontal axis), dan kemudian terus melalui dua pembelahan reduksi menghasilkan spermatid haploid. Kemudian sel melewati fase kompleks diferensiasi yang memuncak dalam produksi spermatozoa (descending axis). (diproduksi dari Bellve et al., 1977a, dengan ijin dari editor, Journal of Cell Biology.)

Gambar 9 Gambar 9. Diagram skematik dari kepala sperma pada tahap 15 dan 19 dari pematangan fase ofrat spermiogenesis. Struktur kepala ditunjukkan pada bagian sagiltal, dengan beberapa batas-batasnya. Selama fase ini inti mengalami kondensasi lebih lanjut dan mengembangkan kelengkungan falsiforme. Akrosom, yang meliputi sebagian besar permukaan nuklear pada tahap 15, dipindahkan ke depan selama tahap 18 DND 19. Pada teka perinlclear juga berkembang lebih lanjut selama tahap ini, tetapi tidak ditampilkan. A,akrosom; AN, anulus; AX, axoneme; HC, kepala; HCS, dipisahkan kepala-segmen; M, mitokondria; N, inti; P, perforatorium; PM, plasma membran, RN, nuklear; VS, ventral. (Lalli dan Clermont. 1991, dengan izin dari editor, A Journal American Anatomi).

Pada protamines, spesies-spesifik protein yang terkait dengan kromatin, telah terlibat sebagai penentu intrinsik bentuk nuklear sperma (Fawcett dkk..1971) Studi terbaru, tidak mendukung anggapan ini. Tampaknya ada korelasi antara konformasi nuklear dan jenis

proLamine hadir pada spesies mamalia yang berbeda (Bellve, 1979). Jadi, inti dari tikus dan spermatozoa manusia memiliki kemiripan melengkapi tipe I dan tipe 2 protamine tetapi memiliki falsiforme dan bentuk bulat, masing-masing. Spermatozoa tikus adalah falsiforme dalam bentuk tapi rak completery histidin kaya tipe 2 protamine yang adalah konstituen polipeptida utama dari inti sperma tikus (Bellve, 1982). Argumen yang sama dapat diperpanjang untuk inti sperma tikus dan kelinci percobaan, yang berisi jenis analog I protamines namun sangat berbeda dalam bentuk. Pada teka perinnclear dapat bertindak sebagai penentu ekstrinsik bentuk nuklear. Struktur matriks, ketika terisolasi dari nuctreus sperma tikus, mempertahankan konfigurasi nuklear asli protamine bahkan atter dan DNA dikeluarkan (Gambar 58). Struktur ini mungkin berisi aktin dan miosin yang dapat memberikan kekuatan mekanistik diperlukan untuk mengubah bentuk nuklear. Aktin telah diterjemahkan ke wilayah postacrosornai inti sperma beberapa spesies mamalia (Clarke dan Yanagimachi, 1978; Tamblyn, 1980), terutama dalam perforatorium dan wilayah postacrosomal dari teka perinuklear (Campanella dkk., 1979;. Baccetti dkk , 1980., lih. Strauch dkk., 1980.). Pengamatan ini, bagaimanapun, perlu dikonfirmasi dengan studi yang lebih pasti dengan reservasi dalam pikiran, adalah wajar untuk berspekulasi bahwa kabel dari fiaments aktin menyelimuti inti spermatid, mungkin melintasi inti dan berdekatan dengan matriks intranuklear. Filamen ini dapat bertindak dalam konser untuk membentuk inti menjadi bentuk yang telah ditentukan. Proses ini dapat dipandu ekstrinsik oleh rnanchette mikrotubular selama fase awal reorganisasi nuklear dan akan difasilitasi lebih lanjut oleh eliminasi selektif NPCPs banyak dan dengan deposition dari irotamines. Pengendapan terus konstituen protein dari teka perinuklear akan memungkinkan struktur untuk menyesuaikan dengan bentuk nuklear berubah. Selain itu atlate spermiogenesis ini polipeptida bisa Crosslink oleh pembentuk-intra dan antar-molekul ikatan disulfida kovalen, sehingga menstabilkan bentuk nuklear. Pada konstituen utama dari teka perinuklear, nonprotamine yang protein nuklear, disintesis terutama selama spermiogenesis bertepatan dengan periode transformasi nuklear (O'Brien dan Bellve, 1980). Bahan perinuklear (PNM), yang anlage dari teka perinuklear, pertama, muncul di spermatid awal antara granula akrosom forming dan nuklear. Strukturnya meluas perifer pada kutub anterior inti selama spermiogenesis, hanya sebelum ujung bagian akrosom pembentuk (Courlens dkk., 1976). Kemudian ruang subacrosomal melebar lebih jauh, yang memungkinkan deposisi materi tambahan dan perluasan PNM ke wilayah postacrosomal (Lalli dan Clermont, 1981). Dalam myomorph tikus; selama spermiogenesis

akhir, bagian apikal PNM dimodifikasi untuk membentuk perforatorium tersebut (Lalli dan Clermont, 1981). Komponen lain dari teka perinuklear, lamina padat postacrosomal (PDL), pertama muncul dalam memanjangkan spermatid, pada saat PNM meluas ke wilayah postacrosomal (Courtens et ai, l976;. Lalli dan Clermont, 1981).

C. Apparatus Golgi dan Sistem Pengembangan Acrosomic Kompleks Golgi berperan penting dalam sentral spermiogenesis. Organel kompleks ini bermigrasi ke arah kutub apikal inti selama tahap 2 dari spermiogenesis. Ketika proksimal dengan inti, tubuh Golgi mengasumsikan bentuk setengah bola sementara orientasi permukaan cekung ke arah inti (Burgos dan Fawcett, 1955; Sandoz, 1990;. Susi dkk, 1971). Permukaan sitoplasma cembung (permukaan cis) dibatasi oleh lapisan tunggal terputus cisternae rata dari retikulum endoplasma. (Gambar 10A, B). Bagian internal untuk

menghadapi cis terletak lapisan kortikal kompleks, tubulus anastbmosing dan vesikula kecil (Hermo dkk.., 1979, 1980). Vesikula tampaknya dilepaskan dari jaringan pipa dan lulus pada permukaan luar dari 6 hingga 12 saccules Padalel membentuk tubuh dari kompleks Golgi. Luas interkoneksi oleh cisternae kecil, saccules secara aktif terlibat dalam modifikasi pasca translasi dari glikoprotein, menghapus dolichol yang diturunkan dari unit mannose dan menambahkan gula sesuai dan gugus asam sialic sebagai molekul induk diproses melalui saccules berturut-turut (Lihat Farquhar dan Palade, 1981) . Saccules Golgi ini yang terpolarisasi secara fungsional, dengan berturut-turut cisternae mengandung kompleks enzim yang berbeda. Hanya kedua melalui saccules kelima dari muka cis menunjukkan tingkat yang wajar nikotinamida adenin dinukleotida fosfatase activily (NAD Pase), sedangkan tiamin pyrophosphatase aktivitas (TPPase) yang terdeteksi hampir secara eksklusif dalam dua saccules terdalam di permukaan trans (Fig.10A, B) (Clermont dkk., l981.). Sebaliknya, cytidine monophosphatase aktivitas (CMPase) terlokalisir dalam lamellae kaku (Gerl), tunas yang terkait, dan sistem acrosomic pembentukan. Ini regionalisasi fungsi Golgi mungkin memiliki implikasi signifikan untuk pengolahan glikoprotein yang dalam perjalanan ke organel seluler lainnya, plasma membran, dan sistem acrosomic dari spermatid berkembang.

Gambar 10 Gambar 10. Diagram representasi dan mikrograf elektron yang sesuai menunjukkan lokalisasi regional enzim, kegiatan di dalam kompleks Golgi dari spermatid tikus. (A) Organisasi kutub dari kompleks Golgi ditunjukkan dengan lokalisasi diskrit NADPase di saccules luar di permukaan cis, TPPase di saccules trans, dan CMPase dalam struktur Gerl dan dalam lamellae kaku pembentuk acrosome.GERL; T, saccules interkoneksi membran tubulus; S, saccules: VA, vesiculai agregat; PG, perifer daerah Golgi; TS, trans saccules; M, medula; N. inti;. CE, elemen osmiophilic permukaan cis RHE (B) mikrograf elektron dari spermatid (tahap 7) Golgi kompleks menampilkan cytidine aktivitas monophosphatase (CMPase) di saccules trans terdalam, yang Gerl (GL) daerah dan asosiasi tunas (B). Dan berdekatan acrosomic sistem (A) yang melapisi inti (N) (X 40, 000). (Direproduksi setelah Clermont dkk.,1981 oleh izin dari editor The Record Anatomi).

Spermiogenesis mamalia terjadi dalam empat fase utama: Golgi, cap, akrosom, dan fase pematangan pembentukkan akrosom (Leblond dan Clermont, 1952). Dalam spermatid

fase golgi, kaya karbohidrat, granular vesikel berasal dari kompleks Golgi dan bergabung membentuk vesikel proacrosomal. Vesikel besar ini menempel pada zona kecil amplop nuklear yang termodifikasi di kutub anterior inti (lihat juga Sandoz, 1970). Selama fase cap sistem akrosom menyebar secara lateral, secara bertahap membungkus kutub anterior inti karena memperoleh materi tambahan dari vesikel kecil membentuk pada aparatus Golgi terdekat (Susi dkk, I971;.. Hermo dkk, l979, 1980) . Pada awal fase akrosom mengorientasikan ulang spermatid untuk mengarahkan akrosom menuju membran basal epitel seminiferus. Akrosom, sekarang berbentuk padat, meluas terdiri atas tiang dorsal inti memanjang, karena sitoplasma dipindahkan secara bertahap ke arah segmen ekor berkembang. Selama fase ini vesikel kecil yang berasal langsung dari retikulum endoplasma terus menyatu dengan akrosom (Fawcett, 1975b). Beberapa unsur protein, setidaknya dalam kelinci percobaan, mungkin dimasukkan ke dalam akrosom dari membran terkait polyribosomes (Mollenhauer dan Morre, 1978). Selama fase pematangan (tikus, tahap 12-16; tikus, tahap 15-19), sedangkan segmen khatulistiwa adalah membentuk, pembentukan dengan akrosom dan inti terus (Fawcett ana Philips, 1969a; Lalli dan Clermont, 1981). Pada akhir periode pematangan, dengan akrosom tikus adalah berbentuk bulan sabit, memiliki segmen apikal menonjol dan relatif singkat segmen khatulistiwanya (Gbr. 9). D. Struktur Ekor Pengembangan ekor dimulai awal spermiogenesis ketika sentriol bermigrasi ke kutub khatulistiwa sebaliknya akrosom pembentuk (Fawcett dan Phillips, 1969b, 1970; Dooher dan Bennet, 1973). Ada yang mengarahkan sentriol distal tegak lurus ke permukaan sel dan cepat enucleates axoneme tersebut. Pemanjangan flagel berlanjut, tampak oleh polimerisasi tubulin dan protein yang terkait pada ujung distal dari mikrotubulus. Unsur-unsur struktural daerah leher juga mulai terbentuk selama spermiogenesis awal. Pada anlage kapitulum, lembar melengkung dari bahan padat, membentuk sentriol atas proksimal. Kepadatan periodik muncul di sepanjang dinding sentriol distal membentuk elemen pertama dari kolom tersegmentasi. Kemudian (tikus, tahap 5) pada sentriol bermigrasi ke fossa implantasi dekat kutub nuklear ekor. Setelah itu, bentuk potongan berhubungan dalam urutan yang tepat. Bahan padat accumurates antara tubulus triplet dari sentriol proksimal, dengan sekering ekstensi anterior untuk membentuk kapitulum tersebut. Ekstensi lateral dan ekor kemudian muncul searah jarum jam membentuk ujung anterior kolom tersegmentasi. Bahan matriks

yang serupa terakumulasi di sentriol distal dan merakit untuk menghasilkan bagian posterior kolom tersegmentasi yang semakin mengganggu struktur centriolar. Dengan terjadinya fase akrosom dan penampakan dari anulus, yang ANLAGEN dari serat padat luar muncul sebagai proyeksi pada sebuah tubulus.Hal ini mempolimerisasi seluruh panjang dari axoneme dalam arah proksimal ke distal (Irons dan Clermont. 1982). Kemudian, selama tahap 15 dan 16, bahan tambahan terakumulasi

sepanjang seluruh panjang serat padat, dengan tingkat yang bervariasi dalam gradien proksimal-distal. Serat terus tumbuh hingga mencapai mereka dewasa ukuran pada tahap 19 ketika mereka terpisah dari mikrotubulus doublet sepanjang seluruh panjang mereka, kecuali di Termini distal. Anterior, serat padat tetap menyatu dengan kolom tersegmentasi dengan potongan penghubung. Elemen selubung fibrosa pertama yang jelas setelah spermatid tikus memutar dan memproyeksikan dasar ekor mereka ke dalam lumen tubulus seminiferus (Fawcett dan Phillips, 1970). Clermont dan Rambourg (1978) mencatat bentuk selubung fibrosa dimulai pada awal dalam tahap pematangan, dengan perakitan yang terjadi dalam arah distalproksimal. Umumnya, membujur collumns dari selubung yang merakit beberapa saat sebelum tulang rusuk melingkar, yang secara bertahap menebal dan bergabung membentuk pola yang tidak teratur dalam sperma matang.

E. Biogenesis dari Mitokondria dan intro Interkalasi Midpiece Selama spermatogenesis mamalia mitokondria berjalan ditandai perubahan dalam struktur internal (Andre, 1962: Fawcett, 1970). Spermatogonium memiliki mitokondria khas dengan tegak lurus berorientasi krista ke membran luar. Dalam spermatosit krista mengasumsikan bentuk tidak teratur, sementara memanjangkan dan berorientasi sejajar dengan membran mitokondria luar. Peningkatan matriks internal dalam kepadatan dan ruang intracristal memperluas jauh (Fawcett, 1970;. De Martino dkk, 1979). Mitokondria ini sering berhubungan dalam kelompok intervensi dengan bahan agregat (Fawcett, 1972) yang kemudian dapat menjadi bagian dari tubuh chromatoid (Fawcett dkk., 1970;. Fawcett, 1972; Russeli dan Frank, 1978). Selama spermiogenesis awal mitokondria awalnya bermigrasi ke pinggiran sel (Andre, 1962; Kaya dan Harrison, 1976) namun kemudian dapat mendistribusikan seluruh sitoplasma (Gardner, 1966). Selama tahap 15 dan 16 spermiogenesis tikus, setelah manchette disassembles dan anulus bermigrasi caudally, mitokondria berkumpul berdekatan dengan

wilayah midpiece dan kemudian bergabung end-to-end untuk membentuk heliks pilin perifer pada serat padat luar (Woolley, 1970, Fawcett dkk, 1971;. Dooher dan Bennett, 1973; De Martino dkk,. 1979). Mitokondria tidak dimasukkan ke dalam wilayah midpiece segera dibuang dalam sisa tubuh (Smith dan Lacy, 1959; Sandoz, 1970). Hanya ada informasi terbatas yang tersedia tentang fungsi metabolisme mitokondria sel spermatogenik. Mitokondria sel spermatogenik tikus terisolasi (terutama spermatosit dan spermatid) mampu berfosforilasi oksidatif (De Martino dkk., 1979). Namun, spermatid tikus memanfaatkan laktat daripada glukosa sebagai sumber energi (Mita dan Hall, 1982). Temuan dari penulis terakhir ini menyarankan bahwa laktat eksogen teroksidasi oleh dehidrogenase laktat, kemudian oleh piruvat dehidrogenase dan enzim siklus Krebs. Sejak isoenzim LDHC4 (LDH-X) terletak sebagian di mitokondria dari spermatosit dan spermatid (Montamat dan Blanco, 1976; Meistrich dkk., 1977), NADH yang dihasilkan dapat dengan mudah dimanfaatkan untuk produksi ATP. Secara signifikan, kuman sel diinkubasi di hadapan laktat secara substansial meningkatkan konsumsi tingkat O2mereka (Jutte dkk., 1981) dan sintesis protein (Nakamura dkk., 1981.). Konsentrasi tinggi (0,67 mM) laktat dalam cairan tubulus seminiferus (Evans dan Setcheil, 1978) diproduksi oleh sel Sertoli (Robinson dan Fritz, 1981). Secara kolektif, pengamatan ini memberikan bukti definitif pertama untuk peran sustentacular sel Sertoli pada spermatogenesis mamalia.

F. Topografi Reorganisasi Permukaan Sel Selama spermatogenesis membran plasma mengalami transformasi utama karena memperoleh berbagai konstituen baru dan mengatur mereka ke dalam domain regional diskrit yang ada pada spermatozoa matang (Millette dan Bellve, 1980; untuk review, lihat Bellve, 1979, 1982 ). Salah satu aspek unik dari spermatogenesis adalah munculnya sebuah glycerolipid sulfatoxylgalactosyl pecullar pada permukaan sel spermatosit (Kornblatt, 1929). Ini konstituen dengan permukaan presist seluruh spermiogenesis dan tetap dalam membran plasma spermatozoa (Klugerman dan Kornblatt, 1980; Lingwood dan Schachter, 1981). Apakah glycerolipid sulfatoxylgalactosyl baru secara regional terlokalisasi dalam membran plasma, tidak diketahui. Bechtol dkk. (1979), menggunakan antibodi monoklonal, mengidentifikasi dua antigen terdefinisi, mungkin pada permukaan sel dari sel-sel tikus spermatogenik. Kedua antigen muncul selama perkembangan testis dan belum terdeteksi dalam jumlah yang signifikan pada spermatozoa. Beberapa antigen diferensiasi pertama muncul pada spermatosit pakiten dan terus dinyatakan selama ontogeni berikutnya dari sel kuman. Perbandingan permukaan sel antigen telah terdeteksi di spermatosit, spermatid, badan

sisa, dan spermatozoa dari kelinci (O'Rand dan Romrell, 1977), tikus (Millette dan Bellve, 1977), dan tikus (Tung dan Fritz, 1978). Kompleksitas penentu diakui oleh antibodi poliklonal xenogeneic dan isogeneic belum ditentukan. Agaknya, penentu permukaan beberapa sedang diakui sejak empat persiapan antibodi yang berbeda menunjukkan pola yang mengikat berbeda pada permukaan spermatozoa tikus dewasa (Millette dan Bellve, 1977). Permukaan komponen tambahan pertama diungkapkan pada tahap akhir dari spermatogenesis. Autoantigen T, komponen permukaan marmot sel germinal, tidak terdeteksi pada spermatosit primer dan "fase golgi" spermatid (Radu dan Voisin; 1975; L; Bouteilier dkk, 1976.). Autoantigens lain, baik marmut dan kelinci, mungkin tidak muncul sampai tahap akrosom dari spermiogenesis (Tung dkk., 1979;.. O'Rand dan Romrell 1980a). Komponen alloantigenic tertentu terdeteksi nomor awalnya rendah pada spermatosit dan spermatid pakiten awal tetapi kemudian pada substansial meningkatkan angka selama fase selanjutnya dari spermiogenesis (Romrell dan O'Rand, 1978; O'Rand dan Romrell.1980a). Pola-pola waktu yang berbeda mungkin mencerminkan penyisipan berurutan beberapa komponen ke permukaan sel sebagai hasil spermatogenesis. Perkembangan terbaru teknik untuk mendapatkan plasma membran yang murni (Millette dkk.., 1980) dari kelas diskrit terisolasi tikus spermatogenic sel (Romrell et ai, 1976;.. Bellve dkk., 1977 a, b) menyediakan pendekatan definitif untuk mengidentifikasi konstituen membran baru menggunakan pendekatan ini Millette (1991) diidentifikasi oleh dua dimensi gel poliakrilamida komponen sel elektroforesis dua permukaan, dinotasikan sebagai Pa dan Pb, yang hanya ada pada spermatosit pakiten, Empat, RSA-d , hanya terbatas untuk spermatid bundar (tahap 1-8). Sejumlah besar konstituen lainnya pada permukaan kedua jenis sel. Studi ini tidak melaporkan apakah salah satu komponen membran plasma juga ada pada sperma matang atau pada sel sebelum pachynema. Komponen lain permukaan sel, F-28.000, telah terdeteksi di permukaan spermatosit pakiten,. spermatid, DND spermatozoa dari tikus dengan monoklonal antibodi (Gaunt, 1982). Tidak seperti banyak antigen sel kuman lain komponen ini hadir di permukaan tikus, kelinci, tikus, dan marmot spermatozoa dan, karenanya, spesiesnya dapat dilestarikan. Permukaan konstituen spermatozoa matang dipisahkan ke dalam domain topografi yang berbeda, di mana kendala berat yang dikenakan pada mereka lateral yang mobilitas. Sebaliknya, pada tahap awal spermatogenesis, antigen permukaan didistribusikan difus pada membran plasma sel dan mampu membentuk patch dan cap dengan adanya ligan multivalent (Millette, 1977; Romrell dan O'Rand, 1978 dkk., 1979. ). Properti ini berbeda menunjukkan bahwa mekanisme harus beroperasi pada komponen permukaan partisi ke dalam domain

diskrit selama spermiogenesis. Regionalisasi permukaan sel dapat terjadi melalui beberapa mekanisme. Pertama, konstituen membran plasma dapat dipartisi secara selektif ke permukaan tubuh selama sisa spermiation, sehingga dipisahkan dalam diferensiasi lebih lanjut dari spermatozoa. Menyajikan antigen tertentu pada permukaan spermatogonium, spermatosit, dan spermatid tampaknya dipartisi ke tubuh sisa dengan cara ini (Miilette dan Bellve, 1980). Kedua, beberapa antigen membran dapat bertopeng karena modifikasi pascatranslasi, halangan sterik, atau perubahan konformasi. Komponen juga bisa hilang dari permukaan sel, mungkin terinternalisasi dan mengalami proteolisis. Iso dan beberapa alloantigens mungkin jatuh ke dalam kategori yang terakhir (Tung dan Fritz, 1978;. Romrell di al, 1982). Ketiga, konstituen membran lain mungkin akan ditranslokasikan lateral dari daerah tertentu dengan eksklusi sterik atau dipindahkan oleh bawah permukaan spesialisasi ke zona baru. Akhirnya, makromolekul permukaan baru dapat teradsorbsi atau dimasukkan langsung ke dalam domain membrans yang telah ditetapkan selama diferensiasi akhir spematozoon tersebut. Setelah didirikan, domain permukaan tersebut dapat distabilkan oleh ikatan silang lokal, baik untuk komponen membran yang berdekatan atau elemen struktur bawah permukaan.

G. Transkripsi Gen Selama Spermatogenesis Organel dan elemen struktur ke dalam sel sperma terjadi dalam urutan temporal yang tepat selama spermiogenesis. Morfologi rumit butuh predikat yang cukup untuk sintesis protein pada saat genom spermatid ini kondensasi dan transcriptionally menjadi tidak aktif. Permintaan untuk protein beragam dipenuhi oleh terjemahan produk gen yang ditranskripsi selama profase meiosis dan tahap awal spermiogenesis. Beberapa mRNA dapat disintesis dan diterjemahkan selama meiosis ketika genom aktif, dan protein baik dimasukkan ke dalam organel penting atau disimpan untuk biogenesis berikutnya. Atau meiosis, spesifik mRNA atau hnRNA prekursor dapat disimpan selama diperlukan untuk mengkodekan untuk sintesis protein penting yang digunakan untuk merakit sel sperma. Akhirnya, gen tertentu diaktifkan selama meiosis dapat terus menjadi postmeiotically, sementara gen unik lainnya dapat ditranskripsi secara eksklusif dari genom haploid. Sekarang sangat wajar apabila bukti yang menunjukkan bahwa masing-masing kemungkinan terjadinya hal dapat beroperasi selama spermatogenesis. Kegiatan transkripsi relatif dari sel-sel tikus berbagai spermatogenik telah diamati oleh autoradiografi setelah penggabungan in vivo [3H] uridin (monesi, 1964a; 1965a). Tinggi tingkat RNA sintetis terjadi pada spermatogonia tipe A dan kemudian menurun secara

progresif di intemediate dan tipe B spermatogonium untuk mencapai tingkat rendah pada spermatosit preleptotene. Sintesis RNA tidak terdeteksi selama profase meiosis awal. Namun pada zygonema, tingkat meningkat pesat mencapai puncaknya pada spermatosit midpachytene sebelum menurun lagi melalui diplotene ke tingkat tidak terdeteksi selama dua divisi reduksi. Selama meiosis, X terkondensasi dan kromosom Y tidak muncul untuk menggabungkan prekursor RNA (Monesi. 1965b). Sementara rendahnya tingkat sintesis RNA yang diamati dalam spermatid awal, tidak ada penggabungan adalah uridin-terdeteksi setelah tahap 8 sampai 9 dari hamster spermiogenesis.Di Cina dan Suriah, profil transkripsi dari spermatosit dan spermatid mirip dengan yang terjadi di tikus (Utakoji dkk., 1968). Kemudian penelitian menggunakan resolusi tinggi autoradiografi mengkonfirmasi

pengamatan ini awal dan juga menunjukkan ribosomal RNA (rRNA) sintesis dalam profase meiosis awal (Kierszenbaum dan Tres, 1974a). Studi-studi ini tidak memungkinkan untuk variasi permeabilitas membran dan ukuran kolam intraseluler uridin yang dapat menjelaskan perbedaan yang diamati dalam kegiatan sintetis selama meiosis dan spermiogenesis. Namun demikian, dalam penelitian in vitro pada spermatosit dan spermatid pakiten isolited bulat menunjukkan bahwa data awal kemungkinan berlaku. Perlu dicatat bahwa kedua jenis sel mensintesis RNA pada keadaan sebanding ketika kedua disajikan secara genom haploid (Loir, 1972).

1. Karakterisasi RNA disintesis selama Meiosis Lokalisasi nuklear tepat dan identitas molekul RNA baru lahir telah dideteksi oleh autoradiografi, memungkinkan identifikasi tentatif prekursor rRNA dan mRNA yang disintesis di daerah yang berbeda dari inti spermatosit. Selama interval zygotenetomi pachytene di kedua tikus dan hamster, [3H] uridin yang tergabung pada tingkat rendah ke dalam massa nukleolus berdekatan dengan tombol-tombol tertentu pada dasar autosom (Kierszenbaum dan Tres, 1974a). Sintesis ini mungkin merupakan transkripsi dari DNA ribosom cistrons yang terlokalisasi di daerah penyelenggara nukleolus (Hsu dkk., 1975.). Kemudian, selama midpachynema di spermatosit tikus, tubuh nukleolus ini bermigrasi ke arah kromosom seks terkondensasi dan bergabung untuk membentuk nukleolus karakteristik (lihat Tres dan Kierszenbaum, 1978). Sebaliknya, sintesis hnRNA meiosis dalam tikus spermatosit terlokalisir terutama untuk daerah perichromosomal dari autosom (Kierszenbaum dan Tres, 1974a). Dalam studi in vitro dari spermatosit manusia, Tres (1975) mengamati puncak sintesis rRNA di zygotene terlambat, diikuti oleh puncak menonjol dari sintesis hnRNA di midpachynema.

Analisis biokimia sintesis RNA selama spermatogenesis terhambat oleh kompleksitas seluler testis mamalia. Meskipun kesulitan-kesulitan ini, teknik yang beragam telah digunakan untuk mengkarakterisasi RNA ditranskripsi selama meiosis. Berdasarkan analisis dan studi sedimentasi dasar komposisi, hnRNA ditunjukkan untuk menjadi spesies dominan disintesis oleh decapsulated testis hamster (Muramatsu dkk., 1968.). Sintesis tingkat hnRNA dan baris dari rRNA memiliki juga telah terdeteksi di segmen berbudaya tubulus seminiferus yang mengandung midpachytene spermatosit (Soderstrom dan parvinen, 1926). Meskipun masalah penafsiran, kedua kelompok penelitian tentatif atribut aktivitas sintetis utama untuk spermatosit pakiten. RNA sintesis sejak itu telah dinilai secara langsung di spermatosit pakiten yang diisolasi dari tikus (Grootegoed dkk.., 1977a) dan tikus (Geremia dkk., 1978). Penyelidikan ini secara in vitro menunjukkan bahwa lebih convicingly pakiten spermatocytescan mensintesis rRNA dan hnRNA, seperti yang diidentifikasi dengan elektroforesis gel poliakrilamid (Grootegoed, dkk., 1977a) dan sukrosa sentrifugasi gradien (Geremia dkk, 1978). Dalam inti somatik, urutan intervensi (ekson) di banyak molekul hnRNA besar terdeteksi dalam pembentukan mRNA cycaplasmic, (Miller, 1981; Perry, 1981). Oleh karena itu, sintesis hnRNA dalam sel spermatogenik cukup bukti untuk pembentukan urutan utusan khusus, terutama karena banyak dari RNA disintesis tetap dalam inti sampai diplonema (Monesi, 1965a). Analisis oleh poli-(U)-Sepharose chromatograhy menunjukkan sepertiga dari de novo hnRNA disintesis dalam spermatosit pakiten ini polyadenylated (Soerstrom 1976), Dengan kriteria yang sama, sepertiga dari RNA plysomal juga polyadenylated (Geremia dkk., 1978, menunjukkan bahwa beberapa molekul hnRNA diproses selama profase meiosis untuk menghasilkan mRNA sitoplasma (D'Agostino dkk., 1978). RNA sintesis dalam spermatosit pakiten terisolasi tidak terpengaruh dengan penambahan FSH dan / atau testosteron, sehingga mendukung konsep bahwa regulasi hormon spermatogenesis dimediasi oleh sel Sertoli (Grootegoed dkk., 1978). Meskipun beberapa peneliti telah melaporkan androgen yang mengikat aktivitas dalam sel spermatogenik (Galena dkk., 1974;. Sanborn dkk., 1975; Tsai dkk., 1977), baik Lyon genetik (dkk.,. 1975) dan biokimia (Grootegoed dkk.., 1975) dan bukti kuat menunjukkan bahwa sel-sel tidak mengandung reseptor androgen tertentu.

2. Transkripsi pada Gen Haploid Terjadinya sintesis RNA dalam spermatid haploid telah menjadi titik pertikaian selama beberapa tahun. Menggunakan resolusi tinggi otomatis radiografi, Kierszenbaum dan Tres

(1975) gagal menemukan fungsi nukleolus dan menyimpulkan bahwa spermatid mensintesis hnRNA. Baru-baru ini, sebuah cytochemical teknik untuk selektif pewarnaan

transcriptionally aktif daerah penyelenggara nukleolus (Goodpasture dan Bloom, 1975; Bloom dan Goodpasture, 1976) menunjukkan bahwa sintesis rRNA mungkin terjadi selama spermiogenesis awal di sejumlah spesies, termasuk tikus (Schmid dkk., 1977.) Studi biokimia menunjukkan bahwa spermatid awal mensintesis baik rRNA dan mRNA. Tercukupinya suntikan intratesticular dari [3H] uridin. Grootegoed dkk. (1977a) pulih berlabel 18 S, 28 S, dan M tinggi, RNA spesies dari spermatid terisolasi (sreps 1-8). Sel-sel ini, ketika diberi label secara in vitro, menunjukkan profil serupa RNA sintetis seperti yang ditentukan dengan analisis gradien sukrosa (Geremia dkk., 1978; D'Agostino dkk, 1978). Analisis oleh poli (U)-Sepharose kromatografi juga menunjukkan bahwa sekitar sepertiga dari JRNA disintesis dalam sitoplasma sel-sel ini polyadenylated (Geremia dkk., 1978.) dan bahwa beberapa molekul, mRNA ternyata aktif, terikat untuk polysomes (Geremia dkk., 1978;.. D'Agostino dkk, 1978). Harus ditekankan bahwa studi ini harus memberikan bukti yang meyakinkan kemurnian sel dan viabilitas. Hasil yang sama diperoleh ketika oligo (dT)-selulosa kromatografi digunakan untuk menyelesaikan 6 sampai 1s s polyl [A +] RNA (Erichson dkk.., 1980a). Dalam mencari bukti yang lebih pasti, Erickson dkk., (1980) mengisolasi total RNA dari populasi diskrit sel spermatogenik tikus dan dilakukan dalam terjemahan vitro menggunakan sistem reticulolysate kelinci. Produk terjemahan disaring untuk sintesis protamines dan phosphoglycerate kinase (PKG-2). Hanya tingkat minimal [3H] arginin dimasukkan ke dalam protamines dugaan, sehingga sulit untuk menarik kesimpulan tentang ekspresi postmeiotic dari gen ini. Kenaikan enam kali lipat dalam jumlah PKG-2 diterjemahkan setelah masukan RNA spermatid akhir tidak memberikan meyakinkan bukti untuk terjadinya ekspresi gen haploid. Bukti-bukti definitif gen haploid transkripsi eksklusif akan memerlukan penggunaan khusus probe cDNA dibuat dari mRNA testis. Sementara beberapa kelompok penelitian saat ini memiliki perpustakaan cDNA tersebut, tidak ada laporan penggunaannya untuk analisis gen postsegregational transkripsi.

3. Stabilitas Berkepanjangan "Meiosis" RNA RNA disintesis selama profase meiosis harus memiliki panjang yang luar biasa jika ingin digunakan untuk mengarahkan peristiwa translasi 10 sampai 15 hari kemudian selama spermiogenesis. Bukti menunjukkan Autoradiographic bahwa RNA nuklear di spermatosit dilepaskan ke sitoplasma hanya sebelum pembelahan meiosis pertama dimana masih seluruh

spermiogenesis (Monesi, 1964a), sampai bagian sisanya. Dibuang dalam tubuh sisa (Monesi, 1964a; Loir, 1972). Perkiraan jumlah RNA ditranskripsi stabil di spermatosit sangat bervariasi. RNA disintesis dalam tubulus seminiferus terisolasi segmen yang mengandung spermatosit midpachytene tampaknya stabil selama 36 jam-(Sodestrom dan Parvinen, 1976), bahkan setelah lama di hadapan aktinoterapi D (Soderstrom, 1976). Sebaliknya, Grootegoed dkk. (1977a) menemukan RNA disintesis di terisolasi spermatosit pakiten menjadi labil dalam waktu 4 jam inkubasi. Lability ini, bagaimanapun, mungkin mencerminkan degenerasi dari sel kultur yang mampu bertahan hanya beberapa jam dalam stabilitas vitro. RNA dalam vivo mungkin jauh lebih besar dari ini, karena beberapa sebagian kecil dari RNA disintesis dalam spermatosit pakiten dipertahankan selama spermiogenesis, beberapa melalui tahap spermatid lanjut (Geremia dkk., 1977;. Bellve, 1982). Upaya untuk mengkarakterisasi molekul RNA stabil dalam spermatid mamalia belum definitif, meskipun sebagian besar adalah dianggap hnRNA (Soderstrom dan Parvinen, 1976). Dukungan untuk keberadaan mRNA stabil berasal dari karakterisasi luas mRNA trout protamine (untuk review, lihat Dixon et ai, 1977;. Iatrou dan Dixon, 1978). Ini adalah pertama kalinya mRNA jelas dalam sitoplasma spermatosit primer dan terus terakumulasi selama spermiogenesis (Iatrou dkk.., 1978). Pada protamine mRNA diproses dan disimpan dalam sitoplasma sebagai partikel ribonukleoprotein pembeda sebelum sintesis protamine dalam kondensasi spermatid. Dengan demikian, setidaknya salah satu mRNA disimpan selama 15 sampai 30 hari selama spermatogenesis. Sintesis dan pemrosesan RNA preribosomal mungkin lambat dalam spermatosit primer mamalia (Galdieri dan Monesi.1974; Stefanini dkk., 1974;. Soderstrom dan Parvinen, 1976;. Grootegoed dkk., 1977a). Prekursor ribosom Ke-32 S terakumulasi dalam spermatosit pakiten, menunjukkan tahap terakhir dari urutan pematangan adalah tingkat pembatas dalam sel-sel karena dapat pada jaringan somatik. Pada rRNA prekursor disintesis selama meiosis dapat disimpan dan digunakan untuk peristiwa translasi di spermatid.

H. Temporal Penampilan dan Sintesis Protein Spermatozoan Sintesis protein terdeteksi oleh autoradiografi di hampir semua tahapan

spermatogenesis pada tikus (monesi, 1964b, 1965a). Penggabungan tersebut 3H-label asam amino terjadi pada kenaikan suku selama diferensiasi spermatogonia tipe A dan kemudian diclines secara substansial dalam tipe B spermatogonium. Semua sel meiosis mensintesis protein. Sintesis maksimal terjadi pada midpachynema dan kemudian berlanjut

pada tingkat moderat melalui divisi reduclion meiosis ke tahap 11 dari spermiogenesis (Monesi. 1964b. 1965a). Sebuah puncak di [3H] arginin sebuah [3H] penggabungan leusin jelas dalam memanjangnya spermatid (Monesi. 1965a; Lee dan Dixon, 1972). Umumnya, bagaimanapun, penggabungan dari prekursor menjadi protein menurun drastis pada periode pematangan fase dan tidak terdeteksi pada tahap 16 spermatid (Monesi, 1964b, 1965a). Penurunan terlihat dalam sintesis protein berkorelasi dengan regresi dari retikulum endoplasma sangat terstruktur dalam tikus (Clermont dan Rambourg, 1978). Meskipun berharga, studi ini tidak memberikan informasi baik pada kompleksitas protein yang disintesis atau apakah mereka hanya memiliki keberadaan sementara atau ditakdirkan untuk perakitan ke dalam spermatozoa matang. Pola dalam waktu sintesis protein untuk spermatozoa dapat dipelajari oleh pemanfaatan kinetika dikenal spermatogenesis. Proses differentiative mengubah spermatogonium yang tidak dibedakan menjadi spermatozoa matang dalam urutan temporal tepat (Oakberg, 1956; Bellve dkk, 1975;.. Meistrich dkk., 1975). Oleh karena itu, menyusul Intratesticular injeksi I'' Hlleucine, urutan di mana iso protein topikal berlabel 3pear di ekor spermatozoa mencerminkan ontogeni mereka. Sperma komponen juga bisa diolah menjadi frac berbeda tions SDS-larut protein yang berasal dari membran plasma, akrosom, axonenie, dan matriks dan krista ofthe mitokondria, yang elemen ekor SDS larut, protein termasuk struktural leher daerah, luar serat padat, selubung fibrosa, dan membran luar mitokondria, dan kepala SDS larut yang terdiri dari teka perinuklear dan inti (Bellve et al, 1975; C) 'Brien dan Bellve, 1980a; Bell v6, 1982 ). Penilaian 'penampilan temporal [3H] leusin dalam fraksi sperma menyebabkan pengamatan bahwa SDS-larut protein disintesis terutama selama profase meiosis dan pada tingkat de clining selama spermiogenesis (O'Brien dan Bellve, 1980b) . Sebaliknya, sintesis dari SDS larut komponen dari kepala dan ekor sperma hampir secara eksklusif terjadi selama spermiogenesis, bertepatan dengan perakitan struktur ini. Kompleksitas protein disintesis selama profase meiosis substansial (> 250 spesies) tapi berkurang secara nyata sebagai sel pro gresses melalui spermiogenesis (Boitani et al, 1980;. Kramer dan Erickson, 1982). Banyak protein terdeteksi di autoradiographs dua dimensi gel poliakrilamida disintesis oleh kedua spermatosit dan spermatid pakiten, sedangkan sintesis orang lain terjadi dalam tahap yang lain. Agaknya beberapa protein incorpo. Peringkat [35S] metionin secara eksklusif selama spermiogenesis adalah struktur atau unsur budayanya dari inti dan ekor. Protein ini dapat diterjemahkan dari mRNA meiosis disimpan atau mereka mungkin mewakili produk transkripsi gen haploid.

Protein Muncul selama Meiosis Profase meiosis, masa transisi kunci dalam spermatogenesis, ditandai dengan munculnya aktivitas enzim novel dan struktur protein. Dalam tiga spesies mamalia antigen permukaan yang unik muncul dalam spermatosit pakiten dan diekspresikan oleh sel-sel pada semua tahap selanjutnya dari diferensiasi (O'Rand dan Romrell, 1977; Millette dan Bellve, 1977; Tung dan Fritz, 1978;. Romrell et al, 1982) . H-2 dan antigen histokompatibilitas la, meskipun tidak testis-spesifik, juga muncul dipermukaan spermatosit tikus primer (Fellous et al, 1976a,b). Berbagai protein permukaan sel telah diidentifikasi pada spermatosit tikus primer (Millette dan Moulding, 1981), tetapi tidak diketahui apakah ini juga ada pada sel sebelum meiosis. Lain konstituen, para,

sulfatoxylgalactosy' glycerolipid, tampaknya disintesis awalnya selama profase meiosis (Kornblatt, 1979). Mitoenzim chondrial berubah selama profase meiosis seiring dengan transformasi ultra organel-organel. Dua testis iso Zymes, LDH-C, dan sitokrom, yang pertama dideteksi pada midpachyspermatosit Tene (Hintz dan Goldberg, 1977; Gandum et al .. 1977). Aktivitas enzim lain mitokondria, karnitin asetiltransferase, juga meningkat pada campuran sel spermatogenik dominan saya mengandung spermatosit pakiten (Vernon et al., 1971). Selama Pembangunan dari tikus testis-spesifik enzim sitoplasma, siklus nukleotida phosphodiesterase (Monnetal., 1972) dan hex jenis sperma okinase (Sosa et al., 1972), muncul bersamaan dengan dimulainya primer dan sekunder spermatosit, masing-masing. Kehadiran kedua isozim dalam sperma matang menunjukkan bahwa sintesis mereka actually terjadi pada sel germinal prekursor. Namun hanya kesimpulan awal dapat ditarik dari studi pembangunan tersebut, karena sel Sertoli mendatang bersamaan dengan sel germinal meiosis, seperti melakukan berbagai jenis sel lain hadir dalam testis (Bellve et al., 1977a). Munculnya ini konstituen protein selama meiosis CIDES koin dengan puncak sintesis protein pada midpachynema. Namun, pengukuran aktivitas enzim atau deteksi antigen tidak selalu berarti denovo sintesis dari makromolekul. Dalam hal ini 'LDH-C4 adalah enzim hanya yang gambaran biosintesis profil telah dimonitor selama spermatogenesis (Meistrich et al.2977). Sintesis LDH-C4 pertama terjadi di midpachytene spermato cytes and mencapai tingkat maksimal pada pachynemaan sebelum menurun selama spermiogenesis ke tingkat hampir tidak terdeteksi dalam spermatid terlambat. Kromosom protein, baik histon dan nonhiston (NHCP), undergo perubahan selama. meiosis. Setidaknya tiga histon atipikal, dua diidentifikasi sebagai testis-spesifik histon 1 jenis dan satu lagi sebuah histon 2S muncul selama perkembangan awal testis mamalia (Branson et al, 1975. Shires dkk, 1975, 1976;. Levinger dkk,1978). Testis sebutan tertentu mungkin terlalu dini, namun, karena relatif

sedikit somatik jaringan telah diperiksa dalam studi komparatif. Bulu thermore, Kistler dan Geroch (1975) telah mengamati sejumlah kecil. Satu atipikal testis histon 1 dalam berbagai jaringan lain. Ini particular histon 1 jenis, mungkin hadir dalam jumlah rendah dalam membedakan spermatogonium, meningkat, relatif terhadap somatik1, histon ketika spermatosit primer awal muncul dalam testis. Sebaliknya, 2S histon atipikal yang hanya diketahui setelah munculnya Sper utama matocytes (Grimes et al, 1975a; Kumaroo et al, 1975;. Mills et a /, 1977). Meskipun kedua "testis-spesifik" sejarah diberi label oleh inkubasi dari spermatosit pakiten terisolasi dengan LVH] lisin (Brwck et u (.. 1977, 1980), sintesis protein dasar belum dipantau pada tahap awal profase meiosis atau spermatogonium. Ini nadanya terus berada di awal-spermatid (Brock et al., 1977), dan kemudian bersama dengan somatik histon dikeluarkan dari nukleus oleh spermatid memanjangkan (Grimes et al., 1977). Studi pada testis tikus berkembang menunjukkan komplemen dari NHCPs berubah ketika sel meiosis mulai muncul (Kadohama dan Turkington, 1974; Mills dan Sarana, 1977). Kedua penyelidikan, menggunakan teknik yang berbeda, menyajikan data yang bertentangan mengenai kecenderungan umum perubahan ini. Pada mamalia hanya satu NHCP meiosis telah diisolasi dan sebagian ditandai. Ditunjuk protein R, protein ini DNA-binding terdeteksi hanya dalam zygotene dan spermatosit pakiten dan karena itu mungkin penting dalam sinapsis dari kromosom homolog (Mather dan Hotta, 1977). Mungkin hanya beberapa "meiosis" protein nuklir dirakit ke dalam inti sperma matang (O'Brien dan 130,176, 1980b). 2. Protein Muncul du, i, og spermiogenesis Kedua protein sitoplasma dan nuklir tampaknya disintesis oleh sperma mamalia. Pada kelinci percobaan, di mana butiran proacrosomal terbentuk dalam seondary spermatosit, antigen akrosom yang terdeteksi pada, atau hanya sebelum, inisiasi spermiogenesis (Toullet et al, 1973;Radius dan Voisin, 1975). Spermaspesifik antigen juga muncul dalam akrosom selama spermiogenesis kelinci (Johnson dan Hunter, 1972a). Isozyrnes enzim hyaluronidase dari akrosom (Zaneveld et al., 1973), iVasetil-(3-galaktosidase dan R-galaktosidase (Majumder dan Turkington, 1974) dan isozim testis nonacrosomal dari phosphoglycerate kinase (Vandeberg et al, 1976) pertama appir di testis berkembang bertepatan dengan spermatid (untuk diperiksa, lihat Goldberg, 1977). enzim metabolik lainnya, termasuk-glisero dehidrogenase fosfat (Schenkman et al., 1965) dan phosphamidase (Meyer dan Weinmann, 1957), menunjukkan kegiatan meningkat pada tahap akhir dari spermiogenesis. Selain itu, Romrell dan O ' rand (1978) dan Millette dan Bellv6 (1980) memberikan bukti awal untuk peningkatan matic dalam jumlah situs antigen

permukaan selama spermiogenesis khususnya di spermatid terlambat. Disayangkan, kecuali LDH-X, yang sebenarnya sintesis protein spermatidal belum dipantau. Sebagai hasil spermiogenesis, kompleksitas protein nuklir diminishes substansial sebagai sejarah dan NHCPs dikeluarkan dari sel (Marushige dan Marushige, 1974;. Platz et al, 1975). Studi dalam tiga mamalia menunjukkan bahwa protein ini transiently digantikan oleh protein dasar beberapa yang tidak terdeteksi di epididymal sperma. Ini termasuk protein testis-spesifik (TP) yang ditemukan oleh Kistler dkk. (1973) yang menurut struktur utama, bukan turunan a baik histon atau protamine (Kistler et al., 1975b). Protein dengan ukuran yang sama dan komposisi asam amino juga telah diisolasi dari testis manusia (Kistler et al. 1975a). Selanjutnya, memutuskan al protein lain dasar spermatidal telah diidentifikasi pada tikus (Grimes et al, 1975b, 1977; Platz et al, 1976) dan ram (Loir dan Lanneau, 1978). Karena protein disintesis dalam didefinisikan urutan poral selama spermiogenesis terlambat, mereka dapat memfasilitasi kondensasi tertib dan pemanjangan inti sebelum pearanceap dari protamines (Grimes et al, 1977;. Loir dan Lanneau, 1978; Mayer dan Zirkin, 1979; Mayer et al, 1981). Dalam sperma mamalia protein nuklir utama adalah arginine dan sistein kaya protamines yang sementara sintesis telah dipantau di mouse (Bellve et al., 1975) dan tikus (Calvin, 1976a). Dalam studi autoradiographic, monesi (1964b, 1965a) mencatat puncak menonjol dari penggabungan [SH] arginin menjadi inti langkah 11 sampai 14 spermatid, pengamatan kompatibel dengan pemulihan sperma iso topikal berlabel dari saluran excurrent distal 11-13 hari kemudian (Kopecny dan Pavlok, 1975; Goldberg - (3-galaktosidase dan Rgalaktosidase (Majumder dan Turkington, 1974) dan isozim testis nonacrosomal dari phosphoglycerate kinase (Vandeberg et al, 1976) pertama appir di testis berkembang bertepatan. dengan spermatid (untuk diperiksa, lihat Goldberg, 1977) enzim metabolik lainnya, termasuk-glisero dehidrogenase fosfat (Schenkman et al., 1965) dan phosphamidase (Meyer dan Weinmann, 1957), menunjukkan kegiatan meningkat pada tahap akhir dari spermiogenesis. Selain itu, Romrell dan O'Rand (1978) dan Millette dan Bellv6 (1980) memberikan bukti awal untuk peningkatan matic dalam jumlah situs antigen permukaan selama spermiogenesis, khususnya di spermatid akhir kecuali LDH-X, sintesis protein sebenarnya spermatidal belum dipantau. Sebagai hasil spermiogenesis, kompleksitas protein nuklir di minishes substansial sebagai sejarah dan NHCPs dikeluarkan dari sel (Marushige dan Marushige, 1974;. Platz et al, 1975). Studi dalam tiga mamalia menunjukkan bahwa protein ini transiently digantikan oleh protein dasar beberapa yang tidak terdeteksi di

epididymal sperma. Ini termasuk protein testis-spesifik (TP) yang ditemukan oleh Kistler dkk. (1973) yang menurut struktur utama, bukan turunan a baik histon atau protamine (Kistler et al. 1975b). Protein dengan ukuran yang sama dan komposisi asam amino juga telah diisolasi dari testis manusia (Kistler et al, 1975a). Selanjutnya, memutuskan al protein lain dasar spermatidal telah diidentifikasi pada tikus (Grimes et al, 1975b, 1977; Platz et al, 1976) dan ram (Loir dan Lanneau, 1978). Karena protein disintesis dalam didefinisikan urutan poral selama spermiogenesis terlambat, mereka dapat memfasilitasi kondensasi tertib dan pemanjangan inti sebelum pearanceap dari protamines (Grimes et al, 1977;. Loir dan Lanneau, 1978; Mayer dan Zirkin, 1979; Mayer et al, 1981). Dalam sperma mamalia protein nuklir utama adalah arginine dan sistein kaya protamines yang sementara sintesis telah dipantau di mouse (Bellve et al., 1975) dan tikus (Calvin, 1976a). Dalam studi autoradiographic, monesi (1964b, 1965a) mencatat puncak menonjol dari penggabungan [SH] arginin menjadi inti langkah 11 sampai 14 spermatid, pengamatan kompatibel dengan pemulihan sperma topikal berlabel dari saluran excurrent distal 11-13 hari kemudian (Kopecny dan Pavlok, 1975; Goldberget al.1977). Protein dasar yang syrithesized oleh spermatid terlambat diidentifikasi conclusively sebagai protamines dengan metode biokimia langsung di mouse (Bellve et al .1975; Ecklund dan Levine, 1975) dan tikus (Grimes et al, 1977.). IV. KEMATANGAN spermatozoa DI THE'EPIDIDYMlS Eutherian sperma dilepaskan dari tubulus seminiferus tidak mampu pembuahan. Setelah t'ransport melalui rete testis dan efferentes ductule, sperma masuk epididimis dan mengalami perubahan morphological dan biokimia untuk memperoleh kapasitas pemupukan (untuk review, melihat Hamilton, 1977; Bedford, 1979). Perubahan pematangan termasuk perubahan struktural di kedua kepala sperma dan ekor, perubahan sifat permukaan dan konstituen, dan akuisisi `motilitas maju berkelanjutan. Sejauh ini, tidak ada perubahan kematangan tertentu dapat disamakan dengan jatuh tempo fungsional sperma meskipun motility merupakan komponen penting. Sementara studi sebelumnya difokuskan pada re memecahkan pertanyaan apakah faktor intrinsik atau ekstrinsik adalah re bertanggungjawab untuk perubahan kematangan (C) rKebin-Crist. 1967 Bedford, 1967), upaya terakhir telah jelas menunjukkan bahwa ke-(epididymis aktif mempromosikan diferensiasi posttesticular dari mammalizrn 104 Anthony R. Bellve dan Deborah A. O'Brien 2. Para spermatozoa mamalia 105 permeabilitas membran selama pematangan sperma (Hamilton.1977). Atau, pemisahan jelas plasma dan membran akrosom dapat dikaitkan dengan hilangnya pasangan flocculent Rial dari ruang intervensi, setidaknya pada tikus (Suzuki dan Nagane, 1980):

Para peneliti terakhir ini juga menggambarkan perubahan permukaan di atasnya wilayah dengan akrosom selama transit epididimis, termasuk disorganisasi tampak dari pengaturan heksagonal partikel membran dan perubahan dalam bahan permukaan glikokaliks. Penyelesaian perubahan ini dalam cauda proksimal berkorelasi dengan akuisisi dari pemupukan kemampuan dalam spesies ini dan mungkin mencerminkan persiapan permukaan sel untuk berpartisipasi dalam kapasitasi dan reaksi akrosom. Meskipun perubahan morfologi nuklir dan ekor umumnya tidak terjadi, karena sperma melintasi epididym.is, struktur sperma beberapa generally menjadi lebih tahan terhadap sonikasi (Henle et al, 1938.), Detergents (Calvin dan Bedford, 1971; Bedford dan Calvin, 1974a), dan tripsin (Meistrich et al., 1976). Ini termasuk inti, perinuklear teka, piring basal, bagian penghubung, den luar serat e, selubung fibrosa, dan membran mitokondria luar. Peningkatan struktural mereka stability telah dikaitkan dengan peningkatan yang progresif dalam disulfida intra dan intermolekul lintas-link antara protein konstituen durinb epididimis transit (Calvin dan Bedford, 1971; Bedford dan Calvin, 1974a).

B. Perubahan dalam konstituen your-Permukaan Permukaan sperma matang menunjukkan daerah yang memiliki sifat biokimia dan fungsional yang berbeda. Reaksi akrosom dan fusi gamet keduanya terbatas pada domain diskrit permukaan, menunjukkan bahwa konstituen membran di wilayah ini dapat

memainkan peran penting dalam pembuahan. Hal ini penting, karena itu, bahwa sejumlah surwajah properti, termasuk densitas muatan, kelengketan, dan ketahanan terhadap kejutan dingin, yang diubah sewaktu melewati epididimis (Hamilton, 1977; Bedford, 1979). Selanjutnya, studi terbaru di memutuskan spesies mamalia telah mengungkapkan perubahan mencolok posttesticular di konstituen membran plasma, khususnya glikoprotein. Perubahan ini telah menerima banyak perhatian karena mereka mungkin menawarkan wawasan molekul baru tentang pembentukan dan mainte nanc domain membran sperma dan pengembangan kontrasepsitive teknik yang tidak mengganggu fungsi testis. Selama perjalanan sperma epididimis menunjukkan kerugian ditandai dengan kolesterol dan semua kelas fosfolipid, kecuali plasmalogen kolin (untuk repandang, melihat Voglmayr, 1975; Brooks, 1979). Ini adalah kelas utama sperma (lihat Hamilton, 1977; Bedford, 1979). Banyak aspek pematangan sperma dan kelangsungan hidup sekarang diketahui tergantung pada androgen, yang menengahi efek mereka dengan mempromosikan dan menjaga fungsi normal dari epididimis (Orgebin-Crist et al, 1975;. Hamil-ton, 1977).

Epididimis, yang sangat melingkar saluran, memiliki tiga wilayah utama: caput, corpus, dan cauda. Meskipun lokasi yang tepat dari sperma ransum tenor bervariasi di antara spesies, kemampuan untuk membuahi biasanya dicapai pada saat sperma telah memasuki segmen distal didymisepi(Waites, 1980), di mana sperma disimpan sampai ejakulasi. Absorptive dan aktivitas yang keluar dari epitel dianggap bertanggung Sjawab untuk komposisi unik dari epididimis plasma (Hamilton, 1977). Selama transit epididimis, sperma terkonsentrasi 20-fold.or lebih (Brooks, 1979) dan terkena perubahan dalam cairan lingkungan mereka ment termasuk pH menurun (Levine dan Kelly, 1978;. Howards dkk, 1979), diubah ion anorganik komposisi (Jones, 1978;. Howards dkk, 1979), dan akumulasi ditandai karnitin dan glycerylphospho rylcholine (Brooks et al, 1974;. Jones, 1978).

Selanjutnya, khusus proteins disekresikan oleh epididimis muncul untuk berinteraksi langsung dengan sperma (Lea et al, 1978;. Voglmayr et al, 1980;. Moore, 1980). A. Perubahan Struktural spermatozoa Dua fitur ultra sperma pematangan-sitoplasma migrasi tetesan dan remodeling akrosom - telah diamati pada spesies mamalia (Bedford, 1979). Setelah spermiation sisa-sisa sitoplasma tetap melekat pada sperma pada daerah leher. Selama transit epididimis ini droplet sitoplasmik bermigrasi caudally bersama midpiece dan pada akhirnya hilang. Saat ini signifi fungsional cance ini rem acara. Ini jelas, Perubahan yang nyata dalam bentuk akrosom juga telah de:, -; ri OED di guinea pig (Fawcett dan Hollen-berg, 1963), chinchilla (Fawcett dan Phillips, 1969a), dan kera ekor babi (Hoffer et al, 1981). Kurang menonjol bentuk perubahan dan pengurangan akrosom size terjadi pada mamalia lain beberapa (lih. Bed ford, 1979). Selain itu, core kristal muncul dalam isi akrosom sperma kelinci selama pematangan epididimis (Flechon, 1975). Sekali lagi, hovrever, peran fisiologis ini perubahan ultrastruc budayanya belum dijelaskan. Selama bagian epididimis pada beberapa spesies membran plasma tampaknya menjadi kendur dan sedikit lepas dari Acro beberapa (Bedford, 1965; Fawcett dan Phillips, 1969a). Perubahan ini hanya mungkin karena artefak fiksasi (Jones, 1971) atau mungkin mencerminkan perubahan. Anthony R. Bellve dan Deborah A. O'Brien 2. Para spermatozoa mamalia sperma fosfolipid dan mungkin merupakan anggota lembam metabolik konstituen brane sementara fosfolipid lain dapat digunakan sebagai energi substrat (Selivonchick et al., 1980). Juga, proporsi satu dinilai asam lemak dalam meningkatkan fraksi fosfolipid sebagai lancar

melalui sperma epididimis (Scott et al, 1967; Poulos et al, 1973). Tak satu pun dari perubahan lipid tersebut belum terlokalisasi ke membran plasma. Namun, diamati perubahan permeabilitas membran (Hamilton, 1977) dan kerentanan yang lebih besar dari sperma epididimis kauda shock dingin (Hammerstedt et al, 1979) konsisten dengan Phys diharapkan perubahan iochemical akibat hilangnya fosfolipid dan kole Terol dan / atau peningkatan asam lemak tak jenuh. Pengukuran yang sama kadar protein total spermatozoa sapi jantan menunjukkan kerugian seiring protein selama pematangan epididimis, dengan perubahan kuantitatif dan komposisi utama yang terjadi dalam fraksi lipoprotein (Lavon et al, 1971.). Meskipun plasma mem-brane telah terlibat sebagai tempat perubahan biokimia (Lavon et al., 1971), mencurahkan tetesan sitoplasma juga harus menjelaskan beberapa kerugian dalam protein dan lemak sebagai sperma melintasi epididimis (Voglmayr, 1975). Baru-baru ini, peneliti telah menggunakan berbagai probe permukaan untuk mendokumentasikan perubahan epididimis dalam protein permukaan sperma, termasuk kerugian dan penambahan spesifik tuents Konstituante. Lektin dengan kekhususan gula yang berbeda mendefinisikan perubahan yang number dan distribusi residu gula pada permukaan sperma epididimis selama transit. Concanavalin A (con A) situs mengikat dapat meningkatkan (Gordon et al, 1975;. FournierDelpech et al, 1977.), Penurunan (Fournier-Delpech dan Courot, 1980), atau tetap tidak berubah (Nicolson dan Yanagimachi, 1979), tergantung pada spesies dan protokol eksperimental. Perubahan serupa telah diamati dengan lektin lain termasuk Ricinis communis agglutinin dan gandum agglutinin (Nicolson et al., 1977). Selain itu, penurunan lektin yang dimediasi agglutinability. dan perubahan dalam pola mengikat lektin pada permukaan sperma telah diamati mengikuti perjalanan epididimis (untuk diperiksa, lihat Nicolson dan Yanagimachi, 1979; juga, Olson dan Danzo, 1981). Baru Variations dalam mengikat lektin telah berkorelasi dengan perubahan glikoprotein permukaan spesifik pada sperma tikus (Olson dan Danzo, 1981). Ini peneliti terdeteksi kerugian nyata (15-25 l0) dari con Sebuah situs mengikat, mencerminkan penurunan pelabelan dua M tinggi, komponen yang sebagian diimbangi oleh peningkatan mengikat sebuah M, -37.000 glikoprotein. Pelabelan permukaan isotop juga telah mengungkapkan perubahan dalam epididimis proteirvs membran sperma (Olson dan Hamilton, 1978). Misalnya, 37.000-M,. permukaan glyculrotein (s) sperma tikus diberi label ketika equina, tetapi tidak caput, sel yang terkena: 3H-label borohidrida natrium. Oleh Sebaliknya, laktoperoksidase-katalis iodinasi label yang sebanding 37.000-M,. permukaan komponen di kedua caput dan sperma equina (Olson dan Danzo, 1981). Meskipun identitas dari konstituen berlabel belum ditetapkan, hasilnya mungkin mencerminkan protein permukaan zt-glikosilasi dari 'selama transit epididimis, karena kedua con A dan H berlabel

natrium borohydi-ide prosedur label residu gula berorientasi eksternal. Tambahan epididimis variasi dalam membran sperma pro teins telah terdeteksi setelah 1251 pelabelan permukaan residu tirosin dan histidin dalam tikus (Olson dan Danzo, 1981), kelinci (Nicolson et al, 1979;. Oliphant dan Singhas, 1979), dan ram (Voglmayr et al., 1980). Baru-baru Feuchter dkk. (1981) antibodi monoklonal siap recognizing penentu permukaan yang terdeteksi hanya pada resperma tertutup dari segmen distal epididimis th & mouse. Immu lain probe nological menggambarkan kerugian dan / atau modifikasi tertentu glycopro-proteinnya (s) pada permukaan sperma babi hutan selama pematangan epididymai (Bostwick et al, 1980;. Hunter dan Schellpfeffer, 1981). Meskipun permukaan komponen belum diisolasi dan dikarakterisasi, hasil memberikan bukti tambahan untuk Natt dvnamic; tha sperma ru oi 'permukaan selama pematangan epididimis. Beberapa penjelasan dapat menjelaskan epididyrnal diamati negosiasi variabel dalam protein permukaan sperma (lihat Olson dan Hamilton, 1978; Feuchter et al, 1981). Pertama, komponen membran plasma baru baik dapat disintesis de rzouo atau berasal dari beberapa kolam yang sudah ada sebelumnya selular intra Kedua, situs reaktif baik bisa hilang atau membuka tabir pada permukaan sperma setelah penghapusan con membran perifer stituents atau hidrolisis terbatas gugus peptida atau sakarida. Ketiga, modifikasi posttranslational seperti fosforilasi atau glikosilasi juga dapat mengubah protein permukaan sperma. Perubahan enzimatik seperti yang mungkin, terutama mengingat tivity protein kinase terkait dengan permukaan sperma (Majumder, 1978) dan aktivitas galactosyl transferase di epididimis tikus sampel (Hamilton dan Gould, 1980). Hasil Olson dan Hamilton (1978) dan Olson dan Danzo (1981) konsisten dengan glikosilasi konstituen permukaan sperma pada epididimis. Akhirnya, protein baru bisa mengikat ke permukaan sperma setelah disekresi oleh epitel epididimis. Lambang antigen diusulkan dalam studi sebelumnya imunologi (llunter. 1969; Barker dan Amann, 1971; Johnson dan Hunter, lt) ; Kiliiar, dan Amann,I973). Satu antigen epididymhl tersebut diakui oleh paling antibodi monoklonal (Vernon et al., 1982), yang gneatlv akan memfasilitasi studi lebih lanjut tentang fungsi fisiologis ini mouse sperma konstituen renda. Sperma-mengikat asam gIycoproteins disekresikan oleh epididimis tikus 108Anthony K. BeIIvE dan Deborah A. O'Brien 2. Para spermatozoa mamalia 109 telah diidentifikasi dalam penyelidikan beberapa pematangan sperma posttesticular (Lea dkk, 19 18;. Garberi et al, 1979;. Brooks dan

Higgins, 1980;. Bayard et al, 1981). Salah satu komponen ditandai di masing-masing studi memiliki sebuah M,. dari 30.000 sampai 40.000. Sekresi ini protein glyco, mungkin dari sel utama (Lea et al, 1978;.. Bayard et al, 1981), tampaknya menjadi androgen tergantung dan dibatasi untuk particu lar daerah epididimis. Compar, glikoprotein epididimis dapat juga ada pada ram (Voglmayr et al, 1980), kelinci dan hamster (Moore, 1980). Karakteristik serupa protein ini termasuk poin isoelektrik asam, androgen ketergantungan, dan lokalisasi di daerah epididimis tertentu (Moore, 1980). Penelitian lain memeriksa secara rinci kemampuan sintetis dan sekresi dari epididimis baik dalam uiuo (Flickinger, 1979;. Fain Maurel dkk, 1981) dan in vitro (Orgebin-Crist dan Jahad, 1978;. Jones et al, 1980, 1981). Resolusi tinggi autoradiografi protein METABO-lism dalam epididimis tikus umumnya menegaskan jalur anabolik khas cara untuk sintesis, Golgi

pengolahan, dan sekresi protein (s) ke lumen, meskipun sekresi vesikula dan eksositosis belum diamati (Flickinger, 1979 ; Fain-Maurel dkk, 1981).. Ini penyelidikan pertanyaan juga menunjukkan bahwa retikulum endoplasma halus dapat berpartisipasi dalam sintesis dan / atau transportasi vectorial protein dalam sel-sel epitel caput. Mengikuti penggabungan in vitro [355] metionin, tikus dan protein kelinci epididimis menunjukkan variasi regional yang sama dalam profil sintetis dan ketergantungan pada androgen sirkulasi dan / atau faktor-fak tor dalam cairan testis (Jones et al., 1980, 1981). Pengukuran konsentrasi dolichol dan sintesis dalam epididimis memberikan evi dence aktif untuk glikoprotein sintesis dalam organ ini (Wenstrom dan Hamilton, 1980). Ini peneliti yang terakhir ditemukan centrations

substansial dari dolichols, yang berpartisipasi dalam perakitan N-glikosilasi glikoprotein, baik dalam testis dan epididimis, dengan konsentrasi tertinggi di epididimis luteum. Pengikatan glikoprotein pada sperma epididimis selama transit dapat menjelaskan sejumlah perubahan yang diamati pada sifat permukaan seperti densitas muatan dan kelengketan (untuk diperiksa, lihat Bedford, 1975). Spidol Terlihat, termasuk besi koloid dan lektin terkonjugasi, menunjukkan bahwa distribusi residu muatan negatif kering / atau gula pada sperma meningkat selama pematangan epididimis (Courtens dan Fournier-Delpech, 1979; Nicolson dan Yanagimachi, 1979). Hal ini pada lipatan dalam biaya anionik pada permukaan sperma, baik pada antarmuka phos pholipid-air dan di wilayah glycocalyx

(Bedford, 1963;. Hammerstedt et al, 1979), mungkin terutama disebabkan oleh penambahan residu asam sialat (Holt, 1980). Mungkin terkait dengan variasi kerapatan muatan dan distribusi adalah kecenderungan yang meningkat untuk sperma matang mengaglutinasi pada spesies mamalia banyak (Bedford, 1975). Beberapa penyelidikan telah memberikan bukti

bahwa epididymai glikoprotein berkontribusi terhadap perkembangan sperma pemupukan Pability Jumlah besar permukaan-terikat protein epididimis ternyata hilang ketika sperma tikus diinkubasi masuk rahim atau bawah dalam kondisi in vitro mendukung kapasitasi (Kohane et al, 1980). Ini pada vestigators menunjukkan bahwa glikoprotein terikat mungkin memainkan peran protektif dalam mencegah reaksi akrosom dari terjadi sebelum waktunya. Dalam kedua kelinci dan hamster, antisera siap terhadap individu sperma mengikat glikoprotein dari epididimis yang efektif dalam sig-nificantly mengurangi tingkat fertilisasi , sehingga menunjukkan bahwa protein dapat berpartisipasi dalam sperma telur pengakuan atau mengikat (Moore, 1981). Akhirnya, protein motilitas maju diidentifikasi dengan Hoskins dan rekan (1979) adalah glikoprotein, tampaknya dari mal asal epididy (lihat di bawah). C. Perolehan Motilitas Selama transit epididimis spermatozoa mamalia memperoleh pacity untuk motilitas progresif. Kapasitas ini diamati sebagai tion transisi dari gerakan memutar atau whiplashlike sperma caput untuk gerak maju kuat, sperma diisolasi dari cauda epididimis (untuk review, melihat Hamilton, 1977;. Hoskins et al, 1978). Meskipun definitif bukti itive dari situimmotility kurang (Brooks, 1979), Sper matozoa tampaknya adalah diam dalam epididimis dan diaktifkan saat ejakulasi atau transfer ke tepat dalam kondisi in vitro (Jones, 1978). Dengan demikian, akuisisi mptility sperma melibatkan kedua matura perubahan nasional dan acara memicu pada ejakulasi.Pasokan energi tampaknya bukan merupakan faktor pembatas dalam inisiasi motilitas. Spermatozoa dapat memetabolisme berbagai macam substrat eksogen (Voglmayr, 1975; Brooks, 1979) dan juga dapat menumpuk karnitin, substrat endogen potensi untuk metabolisme energi, selama epididimis migrasi (Casillas, 1973; Brooks et Al, 1974; Casillas dan Chxipayungpan, 1979). Selanjutnya, konsentrasi ATP serupa dalam testis dan spermatozoa ejakulasi ram tVoghnayr. 19751. Diamati variasi epididimis dalam metabolisme sperma, ter ing diubah tingkat glikolisis dan respirasi, mungkin konsekuensi sekunder quences pengembangan kapasitas motilitas (Harrison. 1977). Cyclic AMP (cAMP) tingkat jelas berperan dalam regulasi motilitas sperma (untuk tinjauan, lihat Hoskins dan Casillas, 1975; Garbers dan Kopf, 1980). Sebelumnya studi tentang Garbers dkk. (1971a) menunjukkan bahwa Anthony R. Bellve dan Deborah A. O'Brien

2. Para spermatozoa mamalia Motilitas sperma epididimis sapi caiida dirangsang oleh Ety variabel dari nukleotida siklik phosphodiesterase inhibitor. Pejantan berikutnya telah menunjukkan efek stimulasi yang sama dari kedua phodiesterase inhibitor dan analog cAMP pada cauda epididimis atau ejakulasi sperma pada sejumlah spesies mamalia (Garbers dkk, 1971b, 1973a, b, F'renkel et al, 1973. ; untuk diperiksa, lihat Garbers dan Kopf, 1980). Ternyata, baik intensitas (dievaluasi oleh kriteria subjektif atau meastares kuantitatif lebih seperti frekuensi beat) dan persentase sperma motil diperkuat oleh perawatan ini (Schoenfeld et al, 1973;. Lindemann, 1978). Selanjutnya, efek stimulasi yang diamati pada motilitas dimediasi h, 7 peningkatan cAMP intraselular konsentrasi tions yang mendahului a1l;. Erations dalam metabolisme sperma (Garbers et al, 1973a, b). Belum menghasilkan sperma tidak. menunjukkan respon yang konsisten untuk phosphodieste-, inhibitor meruntuhkan atau analog CAM} ', mungkin karena ada perbedaan antara sel pulih dari spesies yang berbeda dan lokasi yang berbeda dalam saluran reproduksi. Sperma testis paling tidak dua spesies tidak dirangsang oleh agen ini (Cascieri et al, 1976;. Wyker dan Howards 1977), sedangkan yang diobati caput epididimis sperma umumnya mantan hibit aktivitas flagellar terbatas tanpa perkembangan ke depan (Hoskins dkk, 1975, 1978;. Wyker dan Howards, 1977). Dengan demikian, cAMP saja tidak cukup untuk inisiasi motilitas maju normal (Hoskins et al., 1978). Beberapa perubahan pematangan sperma yang terjadi selama perjalanan epididimis mungkin terkait dengan akuisisi motilitas. Isi AMP siklik sperma sapi meningkat dua kali lipat dalam epididimis (Hoskins et al, 1974). Peningkatan ini tidak tampak karena aktivitas adenilat sperma adenyl, yang beberapa kali lebih besar dalam caput dibandingkan dengan cauda epididimis (Casillas dkk., 1980). Sebaliknya, tingkat cAMP dapat diatur terutama oleh cAMP sperma, phosphodiesterase aktivitas yang menurunkan secara signifikan sepanjang epididimis sapi (Stephens et al., 1979). Hoskins dan rekan (1978, 1979) memiliki postulated bahwa perkembangan motilitas progresif tergantung pada paling tidak dua faktor-peningkatan kadar cAMP intraseluler dan pengikatan protein yang motilitas spesifik ke depan (FMP) ke permukaan sperma. FMP Bovine telah ditandai sebagai glikoprotein tahan panas, M,. 37.500, yang berasal dari epididimis dan mengikat pada sperma mereka. melintasi organ ini (Acott dan Hoskins, 1978, 1981;. Brandt et al, 1978). Kegiatan serupa telah diidentifikasi dalam plasma mani dari mamalia beberapa, dan FMP sapi merangsang maju motilitas spermatozoa mamalia lain (Acott et al., 1979). Arti penting dari pengamatan ini belum sepenuhnya ditentukan, bagaimanapun, Khususnya di cahaya dari laporan terbaru menunjukkan bahwa

perkiraan awal kegiatan li'MP setidaknya 50% terlalu tinggi (Stephens et al., 1981). Sejumlah penelitian baru-baru ini telah mulai untuk lebih mendefinisikan hubungan antara tingkat cAMP tinggi dan motilitas sperma ditingkatkan. Menggunakan deterjen diekstrak banteng spermatozoa, Lindemann (1978) telah menyajikan bukti bahwa cAMP dapat mengaktifkan sistem flagellar langsung. Bergantian, efek cAMP pada motilitas sperma ini dimediasi melalui fosforilasi protein sesuai dengan model klasik tindakan cAMP. Sperma cAMPdependent protein kinase Beberapa telah ditandai (Hoskins et al, 1972;. Garbers et al;. 1973c), dan substrat potensial untuk enzim ini ditemukan di membran dan fraksi sitosol dari sperma (Huacuja et al, 1977;. Brandt dan Hoskins, 1980). Brandt dan Hoskins (1980) telah memberikan bukti tidak langsung bahwa fosforilasi dari 55.000-M,. protein dapat berkorelasi dengan motilitas. Selanjutnya, Tash dan Sarana t1932). Menggunakan deterjen-segaris sperma anjing, menunjukkan bahwa cf1iV11 'merangsang, motilitas dan fosforilasi protein di bawah kondisi percobaan sama, sementara kalsium memiliki efek penghambatan pada keduanya. Ubulin '1 'dan mungkin subun dynein, mungkin di antara pfvos sperma protein phorylated dalam hubungan dengan cAMP-ditingkatkan motilitas (`I'ash dan Sarana, 1982). Kedua stimulasi dan efek penghambatan kalsium pada motilitas sperma telah dilaporkan, dan perbedaan yang diamati mungkin berhubungan dengan ketergantungan konsentrasi dan spesifisitas spesies (untuk pandang, melihat Garbers dan Kopf, 1980). Hubungan yang tepat antara cAMP dan kalsium sebagai modulator motilitas sperma belum didefinisikan dengan baik, meskipun efek interaktif ion transportasi (Peterson et al .. 1979) dan adenilat adenyl kegiatan (Hyne dan Garbers, 1979) telah dijelaskan. Pengobatan spermatozoa dengan khas gen hormon mamalia tidak menghasilkan motilitas ditingkatkan atau tingkat cAMP tinggi (Hoskins dan Casillas, 1975; Garbers dan Kopf, 1980). Namun, faktor lain, termasuk asetilkolin (Nelson, 1978) dan rendah berat molekul konstituen sperma yang mungkin taurin ('Bavisteu et al, 1978;.. Mrsny et al, 1979), telah diidentifikasi sebagai aktivator potensi' sperma motilitas. V. PEMBAHASAN Organisasi biogenesis dan molekul dari Sper mamalia matozoon telah topik penelitian intensif selama dekade terakhir. Kemajuan yang berasal dari studi ini telah difasilitasi oleh sangat 112 Anthony R. Bellve dan Deborah A. O'Brien

2. Para spermatozoa mamalia.

Upaya terakhir untuk mengintegrasikan teknik morfologi, imunologi, dan biokimia. Pendekatan ini, ditambah dengan metode baru untuk pemisahan sel dan fraksinasi, telah memungkinkan peneliti untuk mengidentifikasi dan melokalisasi konstituen baru banyak dari sel sperma. Akibatnya, banyak lagi sekarang dikenal tentang banyak protein sel struktural dan peraturan, yang umumnya ada dalam organel seluler diskrit dan memiliki asal-usul perkembangan yang berbeda selama meiosis dan spermiogenesis. Namun, masih kurang dari 100 sperma komponen motivasional telah ditandai biokimia dan ditugaskan physiologi fungsi, meskipun array kompleks protein terdiri certain struktur dan organel. Agaknya, konstituen banyak terlibat dalam melindungi genom, metabolisme energi, motilitas, pacitation, reaksi akrosom, pengakuan sel telur, dan pembuahan. Komponen lain mungkin mengabdi peristiwa kurang jelas tapi penting setelah pembuahan, selama pembentukan pronukleus pria dan embriogenesis berikutnya. Kompleksitas dari proses-proses beragam menegaskan kebutuhan dan tantangan untuk menyelesaikan mekanisme molekuler yang mendasari. Para spermatozoa matang adalah produk dari diferensiasi sel benih. Setelah berkomitmen untuk meiosis sel kuman memperoleh berbagai komponen baru. Ini termasuk konstituen terkait dengan kromatin, organel sitoplasma dan flagela, dan membran plasma, yang, dalam banyak kasus, tredirakit menjadi sel sperma terpolarisasi selama spermiogenesis. Komponen lain yang teradsorpsi ke sur sel wajah selama uration rrat epididimis. Bukti awal menunjukkan bahwa proses ini terjadi dalam urutan temporal terpadu selama

spermatogenesis. Namun, kesimpulan ini didasarkan pada keterbatasan evi dence jauh penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menentukan peristiwa molekuler yang memulai dan mengatur diferensiasi sel-sel kuman. Di bukti untuk mendukung "sustentacular" peran dari sel Sertoli hanya menjadi tersedia dan niscaya akan menjadi fokus utama cari di spermatogenesis mamalia. UCAPAN TERIMA KASIH Penyusunan bab ini didanai, sebagian, oleh penelitian hibah HD dan HD 08270 12700 dan Pusat hibah HD 06916 dari Institut Nasional Kesehatan Anak dan Pembangunan Manusia. Dr Deborah A. O'Brien adalah, - Medical Foundation Research Fellow, yang disponsori oleh, Yayasan Medical Inc, Boston, Massachusetts. Para penulis menyampaikan penghargaan mereka kepada Steven Borack unit, fotografi dan kepada Mrs Barbara Lewis untuk membantu dalam mempersiapkan naskah.

REFERENSI Acott, T. S., dan Hoskins, D. D. (1978). Sperma sapi maju motilitas protein: pemurnian parsial dan karakterisasi. J. Biol. Chem. 253, 6744-6750. Acott, T. S., dan Hoskins, D. D. (1981). Sperma sapi maju motilitas protein: Binding untuk spermatozoa epididimis. Biol. Reprod. 24, 234-240. Acott, TS, Johnson, DJ, Brandt, H., dan Hoskins, DD (1979). Sperma maju motilitas protein: Jaringan distribusi dan reaktivitas antar spesies. Biol. Reprod. 20, 247-252. Adams, GMW, Huang, B., Piperno, G., dan Luck, DJL (1981). Para mikrotubular kompleks sepasang pusat Chlamydo zonas flagela: komposisi polipeptida sebagai re vealed dengan analisis mutan. J. your Biol. 91, 69-76. Afzelius, B. (1959). Elektron mikroskop dari ekor sperma: Hasil yang diperoleh dengan fiksatif baru. J. Biophys. Biochem. Cytol. 5, 269-278. Agutter, P. S., dan Richardson, J. C. W. (1980). Nuklir non-struktur kromatin protein: Peran mereka dalam organisasi dan fungsi dari inti interfase. -1. Your Set. 44, 395-435. Allison, A. C, dan Hartree, E. F. (1970). Lisosomal enzim dalam akrosom dan kemungkinan peran mereka dalam pembuahan. J. IZeprod. Fertil. 21, 501-515, Amus, L. A., Linck, R. W., dan Klug, A. 11.976). Molekul struktur flal; ellar mikro tubulus. Cold Spring Harbor Conj: your ProliJeration 3 (Buku C), 847 -867. Andre, J. 119621. Sumbangan la connaissance du choridriome. Etude de se,, modifikasi tions ultrastrucaurales liontin la spermatogenese. J. Ultrastruct. Res, Srippl.. 3, 1-85. Artzt, K., Dubois, P., Bennett, D., Condamine, H. Babinet, C, dan Yakub, F. (1973). Permukaan umum untuk pembelahan embrio mouse dan teratocar primitif cinoma sel dalam kultur antigen. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 70, 2988-2992. Artzt, K., Bennett, D., dan Yakub, F. (1974). Teratokarsinoma sel primitif mengekspresikan antigen diferensiasi ditentukan oleh gen pada lokus T-in mouse. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 71, 811-814. Austin, C. R., dan Uskup, M. W. H. (1958a). Beberapa fitur dari foratorium akrosom dan per pada spermatozoa mamalia. Proc. R. Soc. London, Ser. B 149,234-240. Austin, C. R., dan Uskup, M. W. H. (19.586). Peran foratorium tikus akrosom dan per fertilisasi. Proc. R. Soc. London, Ser. B 149, 241 - '48?. Baccetti, B., dan Afzelius, B. A. (1976). Biologi sel sperma. Murtu [; r. Desember Biol. lo, sl-los. .

Baccetti, B., Pallini, V., dan Burrini, AG (1973). Serat aksesori dari ekor sperma. Struktur I. dan komposisi kimia dari serat banteng kasar. J. Submicr-osc. Cytol. 5, 237-256. E3accetti, B.. Yallini, V., dan Burrini, A. G. (1976a). Serat aksesori dari ekor sperma. II. Peran mereka dalam seng mengikat pada mamalia dan cumi. J. filimfsh-uci. Res. 54,261-275.

Baccetti, B:, Pallini, V., dan Burrini, AU t1976b1. Serat aksesori dari ekor sperma. 111. Tinggi sulfur dan rendah sulfur komponen pada mamalia dan cumi. <I. Ultrastruct. Res. 57, 2239-308. E3aecetti, B., Bigliardi, E., dan Burrini, AG (1980). Para morfogenesis dari perforatorium vertebrata. J. Uhrastruct. Res. 71, 272-287. Eialhorn, R. (1982). Sebuah model untuk struktur kromatin dalam sperma mamalia. J. Kol / Biol. 93, 298-305.558

You might also like