Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Save to My Library
Look up keyword
Like this
371Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
REACCIONES FEBRILES

REACCIONES FEBRILES

Ratings:

4.88

(8)
|Views: 94,227 |Likes:
Interpretacion.
Interpretacion.

More info:

Published by: QUIMICO CLINICO WILLIANS SANCHEZ on Nov 28, 2008
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

09/12/2013

pdf

text

original

 
ANTÍGENOS FEBRILES
AGENTE DE DIAGNÓSTICO
SIGNIFICADO CLÍNICO
La infección causada por microorganis-mos de diversas es-pecies produce entre otros síntomas una marcada elevaciónde la temperatura, tal es el caso de la fiebre tifoidea causa-da por
Salmonella typhi, S. enteritis 
, así como lasparatifoideas causadas
por S. paratyphi 
A y B,y el tifo cau-sado por el genero
Rickettsias 
. La infección por estosmicroorganismos induce a una respuesta inmune de tipo hu-moral con la producción de anticuerpos que pueden ser de-tectados con el antígeno específico.Debido a la dificultad existente para el aislamiento de las
Rickettsia sp,
el antígeno empleado para la determinaciónde anticuerpos es el de
Proteus 
OX-19, el cual presenta unareacción cruzada con bacterias del genero
Rickettsia 
.La reacción de Huddleson es un método serológico quedetecta anticuerpos contra
B. abortus, B. melitensis 
y
B.
uis 
,
agentes causales de la
brucelosis;
también conocida comofiebre de malta o fiebre ondulante por el cuadro febril carac-terístico que se presenta.
FUNDAMENTO
La prueba se basa en una reacción inmunológica entre losanticuerpos séricos y el antígeno correspondiente produ-ciendo una reacción de aglutinación macroscópica.
CONTENIDO
qqqqq
Tífico “O” -
Salmonella typhi; 
Antígeno somático,pH: 6.5
±
1.0
qqqqq
Tífico “H” -
Salmonella typhi; 
Antígeno flagelar, pH:6.5
±
1.0
qqqqq
Paratífico “A” - pH: 6.5
±
1.0
qqqqq
Paratífico “B” - pH: 6.5
±
1.0
qqqqq
Proteus 
OX-19 - pH: 6.5
±
1.0
qqqqq
Brucella abortus - 
pH: 6.5
±
1.0
Suero control negativo:
Suero de conejo el cual no ha sido inmunizado contra nin-gún antígeno, por lo que no muestra ninguna aglutinacióncon los antígenos en suspensión.
Suero Control Positivo:
Suero de conejo el cual ha sido inmunizado contra todos losantígenos febriles en una suspensión.
MATERIALES REQUERIDOS, NO INCLUIDOS
Pipetas serológicas
Placa de Reacción
Agitador
RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Obtenga sangre venosa y separe el suero evitando lahemólisis.
MÉTODO DE PRUEBA RÁPIDA EN PLACA
Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando elantígeno que se este usando.
NOTA:
El reactivo así como los sueros, deben alcanzar latemperatura ambiente para comenzar la prueba.1.Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientescantidades del suero a analizar: 0.08 mL, 0.04 mL, 0.02mL, 0.01 mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTARTOTALMENTE CLARO).2.Agitar el antígeno a utilizar para tener una suspensiónuniforme.3.adir 30
µ
L de la suspensión de antígeno a cada unade las diferentes cantidades de suero. Se recomiendautilizar pipetas automáticas (el gotero incluido proporcionauna gota de 30-40
µ
L).4.Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicadordiferente para cada una de las cantidades de suero.5.Girar la placa manualmente o utilizando un agitadormecánico (120 rpm) durante 2 minutos.6.Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa yobservar la aglutinación macroscópica.7.Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
El grado de aglutinación se registra como sigue:4+Aglutinación del 100% de los organismos3+Aglutinación del 75% de los organismos2+Aglutinación del 50% de los organismos1+Aglutinación del 25% de los organismos-Aglutinación del 0% de los organismosEl titulo del suero será la inversa de la dilución más alta endonde se observa una aglutinación del 50% de microorga-nismos (2+)Las diluciones del suero en la prueba en placa son aproxi-madamente equivalentes a las diluciones para prueba en tubocomo se muestra a continuación.
 
VOLUMEN DEL SUEROTITULO
0.08 mL1: 200.04 mL1: 400.02 mL1: 800.01 mL1: 1600.005 mL1: 320
MÉTODO DE TITULACIÓN EN TUBO:
Mezcle bien la suspensión de antígeno mediante agitaciónsuave; prepare una dilución 1:20 del antígeno a utilizar ensolución salina.1.Colocar 7 tubos de 13 x 100 mm en una gradilla paracada antígeno a probar, marcándolos del 1 al 6 y el tubo7 como control.2.Añadir al tubo 1, 0.9 mL de solución salina y 0.5 mL alos 6 tubos restantes.3.Añadir 0.1 mL del suero a probar al tubo número 1, mezclebien y transfiera 0.5 mL al tubo número 2.4.Continúe esta operación hasta el tubo número 6, eliminar0.5 mL de esta dilución. El tubo 7 (Control negativo) tendráúnicamente solución salina.5.Añadir 0.5 mL del antígeno diluido 1:20 a cada uno delos 7 tubos.6.Agitar bien la gradilla para mezclar el antígeno y el sueroe incubar en baño de agua. El tiempo y temperaturarecomendado es el siguiente.AntígenoTemperaturaTiempo deincubaciónTífico O48-50ºC18-24 HorasTífico H37ºC2 HorasS. paratyphi Ay B48-50ºC2 Horas
Brucella abortus 
37°C48 Horas
Proteus 
OX-1937ºC18-24 Horas7.Después de la incubación, saque la gradilla que contienelos tubos del baño y observe la aglutinación. La utilizaciónde una fuente de luz directa contra un fondo negro darámejores condiciones para la lectura.8.Registrar los resultados como sigue:4+Todos los organismos 100% aparecensedimentados en el fondo del tubo y elsobrenadante es totalmente claro.3+Aproximadamente el 75% de los organismosse encuentran sedimentados y elsobrenadante es ligeramente turbio.2+Aproximadamente el 50% de los organismosse encuentran sedimentados y elsobrenadante es moderadamente turbio.1+Aproximadamente el 25% de los organismosse encuentran sedimentados y elsobrenadante es turbio.NegativoNo se observa aglutinación y la suspensnes turbia.9.Registrar el título del suero en el cual la ultima diluciónde una aglutinación sea 2+.
PRECAUCIONES
1.Todos los sueros por probar deberán estar totalmenteclaros y libres de contaminación bacteriana.2.No caliente el suero antes de probarlo.3.Agite bien el antígeno antes de utilizarlo para aseguraruna suspensión uniforme.4.El antígeno se debe mantener en refrigeración a 2-8ºCcuando no se utilice.5.No congelar.Se recomienda la utilización de sueros control Positivo yNegativo probados en paralelo con la muestra de suero paraasegurar al analista que el antígeno bacteriano en uso escapaz de reaccionar con su anticuerpo homólogo y mostrarcómo serán los resultados esperados en muestras de sueropositivas y negativas.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
1.Algunos sueros normales pueden dar un titulo de1:20 a1:40 y hasta 1:80 pero esto puede ser debido a vacuna-ciones o alguna infección anterior. No siempre se presentaproducción de aglutininas en infecciones bacterianas.2.Se pueden producir reacciones cruzadas de aglutininasdebido a vacunaciones para ciertas enfermedades. Lavacuna tífica puede producir aglutininas contra antígenos
Proteus.
3.En la reacción de Huddleson, títulos de 1:80 puedenconsi-derarse ya de significado clínico.
Nota:
El diagnóstico exacto de la enfermedad depende delacercamiento entre el laboratorio clínico y el médico, ya quela elevación del título en la muestra de suero consintomatología reciente y la muestra de suero en faseconvaleciente indicará la exactitud del diagnóstico.
BIBLIOGRAFÍA
1.Spink, W.W.: Amer, J. Clin, Path., 22:201, 1952.2.Dyer, R.E.: J.A.M.A., 124: 1165, 1944.3.Welch, H. & stuart, C.A.: J. Lab. Clin. Med., 21:411, 19364.Felix, A.: Brit. MD. J., 11:597, 1942.Rev.: 22/02/02IN-384Fabricado en México por:
LABORATORIOS MICSA
Estudios Clasa No. 9Col. Jardines TecmaMéxico, D.F.

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->