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Tecnica de colesterol

Tecnica de colesterol

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La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad
diagnóstica limitada. Se ha visto que el colesterol es uno de
los factores contribuyentes a la formación de ateromas dado
que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en individuos
hipercolesterolémicos.
Estudios epidemiológicos demuestran que el riesgo de contraer
enfermedad cardíaca coronaria para individuos de más
de 40 años con colesterolemia menor a 2,10 g/l es 3 veces
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad
diagnóstica limitada. Se ha visto que el colesterol es uno de
los factores contribuyentes a la formación de ateromas dado
que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en individuos
hipercolesterolémicos.
Estudios epidemiológicos demuestran que el riesgo de contraer
enfermedad cardíaca coronaria para individuos de más
de 40 años con colesterolemia menor a 2,10 g/l es 3 veces
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.

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Published by: QUIMICO CLINICO WILLIANS SANCHEZ on Nov 29, 2008
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861231804 / 01 Pág. 1 de 4
Método enzimático para la determinación de colesterolen suero o plasma
porciones establecidas. Es importante además, respetar elorden de agregado de los reactivos y asegurar una perfectahomogeneización de los mismos, a fin de que el ReactivoFenol no deteriore el Reactivo de Trabajo.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". El fenol estóxico e irritante.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DEALMACENAMIENTOReactivos Provistos:
son estables en refrigerador (2-10
o
C)hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mante-ner a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Reactivo de Trabajo:
en refrigerador y en frasco de vidriocolor caramelo es estable 1 mes a partir del momento de supreparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOSREACTIVOS
Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar unligero color rosado que no afecta los resultados siempre quese procese un Blanco con cada lote de determinaciones y unStandard periódicamente. Desechar cuando las lecturas delBlanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del Stan-dard sean anormalmente bajas.
MUESTRA
Suero o plasma
a) Recolección:
se debe obtener suero o plasma de la ma-nera usual.
b) Aditivos:
 
en caso de que la muestra a emplear sea plas-ma, se recomienda únicamente el uso de heparina como an-ticoagulante para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas:
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-ren en la determinación.- Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valoresfalsamente aumentados por lo que no deben ser usados.- En sueros fuertemente hiperlipémicos puede observarse tur-biedad: en tal caso, diluir el volumen final de reacción a 1/2ó 1/3 con Blanco de reactivos, repetir la lectura y multiplicarel resultado por el factor de dilución.- No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l, ácido ascórbico hasta75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera.Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de lasdrogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
elcolesterol en suero es estable 1 semana en refrigerador (2-10
o
C) y 2 meses congelado, sin agregado de conservadores.
enzimático
SIGNIFICACION CLINICA
La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidaddiagnóstica limitada. Se ha visto que el colesterol es uno delos factores contribuyentes a la formación de ateromas dadoque las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en indi-viduos hipercolesterolémicos.Estudios epidemiológicos demuestran que el riesgo de con-traer enfermedad cardíaca coronaria para individuos de másde 40 años con colesterolemia menor a 2,10 g/l es 3 vecesmenor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 vecesmenor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El esquema reaccional es el siguiente:lipasaésteres de colesterol> colesterol + ácidos grasosCHODcolesterol + O
2
> colesten-3-ona + H
2
O
2
PODH
2
O
2
+ 4-AF + fenol> quinona coloreada + H
2
O
REACTIVOS PROVISTOSStandard:
solución de colesterol 2 g/l.
Enzimas:
suspensión conteniendo lipasa fungal 300 U/ml, co-lesterol oxidasa (CHOD) 3 U/ml y peroxidasa (POD) 20 U/ml.
Reactivo
 
4-AF:
solución de 4-aminofenazona 25 mmol/l.
Reactivo
 
Fenol
: solución de fenol 55 mmol/l.
Concentraciones finales
Lipasa..................................................................
6000 U/lCHOD......................................................................
60 U/lPOD.....................................................................
400 U/l4-AF..................................................................1,25 mmol/lFenol.................................................................2,75 mmol/lpH.........................................................7,4
±
0,1 (a t
o
amb.)
REACTIVOS NO PROVISTOS
Agua destilada. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
INSTRUCCIONES PARA SU USOStandard
: mezclar por inversión antes de usar.
Enzimas:
homogeneizar por inversión antes de usar, evitan-do la formación de espuma.
Reactivo 4-AF:
listo para usar.
Reactivo Fenol:
listo para usar. Ver PRECAUCIONES.
Reactivo de Trabajo
: según el volumen de trabajo colocar enuna probeta 50 partes de agua destilada, 5 partes de Reactivo4-AF, 5 partes de Reactivo Fenol y llevar a 100 partes con aguadestilada. Agregar 2 partes de Enzimas previamente homoge-neizadas. Mezclar por inversión, sin agitar. Rotular y fechar.Pueden prepararse distintas cantidades respetando las pro-
Colestat

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