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Tecnica de colesterol LDL

Tecnica de colesterol LDL

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Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, fosfolípidos
y proteínas. Estas partículas solubilizan y transportan
el colesterol en el torrente sanguíneo.
La proporción relativa de proteína y lípido determina la densidad
de estas lipoproteínas y provee las bases sobre las cuales
establecer una clasificación. Estas clases son: quilomicrones,
lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL - Very Low
Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja densidad (LDL -
Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de alta densidad
(HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos estudios clínicos
han demostrado que las diferentes clases de lipoproteínas
tienen distintos y variados efectos en el riesgo de enfermedad
coronaria. Estos estudios señalan al LDL colesterol
como el factor clave en la patogénesis de la ateroesclerosis y
la enfermedad cardíaca coronaria (ECC), mientras que el HDL
colesterol es considerado como factor protectivo. Puede ocurrir
un aumento en el LDL colesterol, aún con concentraciones
normales de colesterol, asociado a un incremento en el
riesgo de ECC.
Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, fosfolípidos
y proteínas. Estas partículas solubilizan y transportan
el colesterol en el torrente sanguíneo.
La proporción relativa de proteína y lípido determina la densidad
de estas lipoproteínas y provee las bases sobre las cuales
establecer una clasificación. Estas clases son: quilomicrones,
lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL - Very Low
Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja densidad (LDL -
Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de alta densidad
(HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos estudios clínicos
han demostrado que las diferentes clases de lipoproteínas
tienen distintos y variados efectos en el riesgo de enfermedad
coronaria. Estos estudios señalan al LDL colesterol
como el factor clave en la patogénesis de la ateroesclerosis y
la enfermedad cardíaca coronaria (ECC), mientras que el HDL
colesterol es considerado como factor protectivo. Puede ocurrir
un aumento en el LDL colesterol, aún con concentraciones
normales de colesterol, asociado a un incremento en el
riesgo de ECC.

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Published by: QUIMICO CLINICO WILLIANS SANCHEZ on Nov 29, 2008
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861260501 / 00 Pág. 1 de 4
monofase AA
LDL Colesterol
Método colorimétrico sin precipitación para la determi-nación de LDL colesterol en suero o plasmaSIGNIFICACION CLINICA
Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas quecontienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, fos-folípidos y proteínas. Estas partículas solubilizan y transpor-tan el colesterol en el torrente sanguíneo.La proporción relativa de proteína y lípido determina la densi-dad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre las cua-les establecer una clasificación. Estas clases son: quilomi-crones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL - Very LowDensity Lipoproteins), lipoproteínas de baja densidad (LDL -Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de alta densidad(HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos estudios clíni-cos han demostrado que las diferentes clases de lipoproteí-nas tienen distintos y variados efectos en el riesgo de enfer-medad coronaria. Estos estudios señalan al LDL colesterolcomo el factor clave en la patogénesis de la ateroesclerosis yla enfermedad cardíaca coronaria (ECC), mientras que el HDLcolesterol es considerado como factor protectivo. Puede ocu-rrir un aumento en el LDL colesterol, aún con concentracio-nes normales de colesterol, asociado a un incremento en elriesgo de ECC.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El presente método es un ensayo homogéneo sin precipita-ción, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo(Reactivo 1) que solubiliza las partículas lipoproteicas no-LDL.El colesterol liberado es consumido por la colesterol esterasay la colesterol oxidasa en una reacción sin desarrollo de co-lor. Un segundo tensioactivo (Reactivo 2) solubiliza las partí-culas de LDL formándose, por la presencia de enzimas y unreactivo cromogénico, un color proporcional a la cantidad deLDL colesterol presente en la muestra.
REACTIVOS PROVISTOSReactivo
 
1:
 
solución
 
conteniendo
 
colesterol
 
esterasa
 
1000 U/l,colesterol oxidasa 1200 U/l, peroxidasa 1250 U/l, ascorbatooxidasa 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l y tensioactivo 7 g/len buffer MES 50 mM, pH 6,3.
Reactivo 2:
solución conteniendo N,N-bis-(4-sulfobutil)-m-toluidina disódica (DSBmT) 0,4 g/l y tensioactivo 10 g/l enbuffer MES 50 mM, pH 6,3.
Calibrador:
suero humano liofilizado conteniendo lipoproteí-nas de diversos tipos incluyendo LDL. La concentración esvariable lote a lote (ver título en el rótulo).
INSTRUCCIONES PARA SU USOReactivos 1 y 2:
listos para usar.
Calibrador:
reconstituir con el volumen de agua destiladaindicado en el rótulo. Cerrar el vial y dejar 5 minutos. Luegodisolver el contenido del vial por agitación suave evitando laformación de espuma.
PRECAUCIONES
- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".- No pipetear con la boca.- El
 
Calibrador
 
ha
 
sido
 
examinado para HBsAg, HCV y anticuer-po contra HIV 1/2, encontrándose no reactivo. No obstantedebe procesarse como si se tratara de material infectivo.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DEALMACENAMIENTO
Los
 
Reactivos
 
Provistos
 
son
 
estables
 
en
 
refrigerador
 
(2-10
o
C)hasta
 
la
 
fecha
 
de
 
vencimiento
 
indicada
 
en la caja. No congelar.Una vez abierto los reactivos son estables durante 4 sema-nas en refrigerador (2-10
o
C).
Calibrador:
estable en refrigerador (2-10
o
C) hasta la fechade vencimiento indicada en la caja. Una vez reconstituido esestable 2 semanas en refrigerador (2-10
o
C). Puede fraccio-narse en alícuotas debiendo ser conservado a -80
o
C.
MUESTRA
Suero o plasma
a) Recolección:
obtener la muestra de la manera usual.
b) Aditivos:
en caso de que la muestra a emplear sea plas-ma usar EDTA o heparina como anticoagulantes.
c) Sustancias interferentes conocidas:
no se encuentraninterferencias por ácido ascórbico hasta 50 mg/dl, hemoglo-bina hasta 500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl y
 γ 
-globulinahasta 50 g/l. En caso de muestras con concentraciones su-periores de interferentes, deberán diluirse con solución fisio-lógica antes de proceder a su ensayo, multiplicando el resul-tado obtenido por la dilución efectuada.Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de lasdrogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
cen-trifugar y separar el suero del coágulo dentro de las 3 horasposteriores a la extracción. De no procesar las muestras in-mediatamente, las mismas pueden ser conservadas durante5 días en refrigerador (2-10
o
C).
MATERIAL REQUERIDO
(no provisto)- Material volumétrico para medir los volúmenes indicados- Analizador automático
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Longitud de onda primaria.......................................660 nm

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