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Técnica de creatinina en sangre

Técnica de creatinina en sangre

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La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del
organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su determinación
en suero, así como el clearance de creatinina endógena
constituyen parámetros importantes para el diagnóstico
de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los
problemas prácticos inherentes a la determinación del clearance
(recolección de orina en niños, etc.), la determinación
de creatinina sérica es más utilizada como índice de funcionalismo
renal.
La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del
organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su determinación
en suero, así como el clearance de creatinina endógena
constituyen parámetros importantes para el diagnóstico
de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los
problemas prácticos inherentes a la determinación del clearance
(recolección de orina en niños, etc.), la determinación
de creatinina sérica es más utilizada como índice de funcionalismo
renal.

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Published by: QUIMICO CLINICO WILLIANS SANCHEZ on Nov 29, 2008
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861232005 / 02 Pág. 1 de 4
SIGNIFICACION CLINICA
La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina delorganismo casi exclusivamente por filtración renal. Su deter-minación en suero, así como el clearance de creatinina endó-gena constituyen parámetros importantes para el diagnósticode diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a losproblemas prácticos inherentes a la determinación del clea-rance (recolección de orina en niños, etc.), la determinaciónde creatinina sérica es más utilizada como índice de funcio-nalismo renal.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tam-ponado, previa desproteinización con ácido pícrico, obtenién-dose un cromógeno que se mide a 510 nm.
REACTIVOS PROVISTOSReactivo 1:
ácido pícrico 41,4 mmol/l.
Reactivo 2:
buffer glicina/NaOH 1 mol/l, pH final 12,4.
Standard:
solución de creatinina 20 mg/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS
Agua destilada.
INSTRUCCIONES PARA SU USOReactivos Provistos:
listos para usar.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".El Reactivo 2 es cáustico.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DEALMACENAMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables a temperatura ambien-te hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
MUESTRA
Suero u orina
a) Recolección:
obtener suero de la manera usual. Puedeemplearse también orina de 2 o de 24 horas. Su recoleccióndebe efectuarse en un recipiente perfectamente limpio mante-nido en refrigerador (2-10
o
C) durante el tiempo de la recolec-ción. Medir la diuresis, tomar una alícuota y efectuar una dilu-ción 1:50 de la misma. En caso de que la diuresis sea de 2horas, multiplicar el volumen medido por 12 para calcular lacantidad de creatinina eliminada durante 24 horas.
b) Aditivos:
no se requieren. No se recomienda el uso de plas-ma pues se obtienen resultados menores en un 8 a un 15%.
c) Sustancias interferentes conocidas:
hemólisis ligera amoderada no interfiere, pero no debe emplearse sangre totalya que aproximadamente el 60% del material Jaffe-reactivode los eritrocitos no es creatinina.Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de lasdrogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
esconveniente utilizar el suero recién obtenido. Si esto no esposible puede mantenerse hasta 24 horas en refrigerador (2-10
o
C) sin variaciones de los resultados.Orinas destinadas a esta determinación pueden mantenersehasta 4 días en refrigerador (2-10
o
C) sin agregado de conser-vantes.
MATERIAL REQUERIDO
(no provisto)- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.- Tubos de ensayo y de fotocolorímetro.- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 510 nm en espectrofotómetro o en fotoco-lorímetro con filtro verde (500-540 nm).- Temperatura de reacción: temperatura ambiente, que no debeexceder los límites de 15 y 30
o
C.- Tiempo de reacción: 35 minutos- Volumen de muestra: 0,7 ml- Volumen final de reacción: 3,5 ml
PROCEDIMIENTO
En caso de que la muestra a utilizar sea suero, debe efec-tuarse una desproteinización de la siguiente manera: a 0,7 mlde suero agregar 3,5 ml de Reactivo 1. Mezclar por inver-sión. Dejar reposar 10 minutos y centrifugar a 3000 r.p.m.durante 5 minutos como mínimo.En tubos de fotocolorímetro marcados B (Blanco), S (Stan-dard), D
s
y D
o
(Desconocidos suero y orina), colocar:BSD
s
D
o
Desproteinizado
--3 ml-
Standard
-0,5 ml--
Orina diluida (1:50)
---0,5 ml
Agua destilada
1 ml0,5 ml-0,5 ml
Reactivo 1
2 ml2 ml-2 ml
Creatinina
Método colorimétrico para la determinación cuantitati-va de creatinina en suero u orina

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