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microbiologia de alimentos : Laboratorios

microbiologia de alimentos : Laboratorios

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08/04/2013

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Facultad de Ciencias Agropecuarias
Escuela Acad\u00e9mico-Profesional de Ingenier\u00eda
Agroindustrial
PR\u00c1CTICA # 01\u2013 RECUENTO EN PLACA
CURSO
:MICROBIOLOG\u00cdA DE LOS PAI.
DOCENTE
:Blg\u2013 Mblg. GERARDO ALAYO ESPINOZA
ALUMNO
:CAVA SALINAS, MARCO
CICLO
:VII
TRUJILLO\u2013 PER\u00da
2008
C\u00e1tedra de Microbiolog\u00eda y Tecnolog\u00eda de Alimentos
UNT
I. INTRODUCCI\u00d3N:

El m\u00e9todo de recuento en placa, permite la determinaci\u00f3n de los microorganismos viables presentes en una muestra, siempre que se utilice un medio de cultivo adecuado y que las condiciones de incubaci\u00f3n sean correctas (nutrientes, atm\u00f3sferas y temperatura). Por lo tanto, este m\u00e9todo puede aplicarse al recuento de grupos distintos de microorganismos. As\u00ed tenemos: microorganismos psicr\u00f3filos, mes\u00f3filos, term\u00f3filos, mohos y levaduras, enterocococos, estafilocococos, enterobacterias, etc. (Pelczar19).

Las t\u00e9cnicas de siembra m\u00e1s com\u00fanmente usadas para el recuento de microorganismos viables, son el recuento est\u00e1ndar en placa por siembra por incorporaci\u00f3n y el recuento en placa de siembra por extensi\u00f3n en superficie. Es necesario indicar, que ninguna de estas formas de siembra es capaz de poner de manifiesto todos los microorganismos viables presentes en una muestra, debido a la variedad de necesidades nutritivas y condiciones f\u00edsicas exigidas por los diferentes tipos de microorganismos, por lo cual el recuento en placa proporciona s\u00f3lo una aproximaci\u00f3n de la poblaci\u00f3n total presente en la muestra.

Como las colonias pueden originarse tanto de una c\u00e9lula como de un grupo de c\u00e9lulas, para expresar el resultado se utiliza el t\u00e9rmino:\u201cunidades formadoras de colonias\u201d (u.f.c). Adem\u00e1s, a fin de que todas las c\u00e9lulas que queden en una placa tengan una adecuada disponibilidad de nutrientes, y que los errores del m\u00e9todo sean menores, se establece que las condiciones \u00f3ptimas de conteo se dan cuando desarrollan entre 30 y 300 colonias por placa. Cuando esto no se cumple se considera el valor obtenido como una estimaci\u00f3n del recuento.

Para estimar los materiales s\u00f3lidos que son solubles en el agua o que forman suspensiones finas en este medio (como por ejemplo harina, leche en polvo, az\u00facar), se suspende o se disuelve por agitaci\u00f3n en un diluyente est\u00e9ril una cantidad dada de muestra. Ciertos materiales s\u00f3lidos como el queso y la carne, deben se triturados hasta peque\u00f1as part\u00edculas en diluyente est\u00e9ril. Entre los diluyentes m\u00e1s com\u00fanmente empleados se encuentran la soluci\u00f3n Ringer diluida a un cuarto, el diluyente agua de peptona y la Soluci\u00f3n Salina Fisiol\u00f3gica Peptonada (S.S.F.P).

II. OBJETIVOS:
a. Adiestrar al estudiante con el m\u00e9todo
b. Determinar el n\u00famero de microorganismos viables presentes en una
muestra de alimento.
C\u00e1tedra de Microbiolog\u00eda y Tecnolog\u00eda de Alimentos
UNT
III. MATERIAL:
1. BIOL\u00d3GICO:
- Muestra: Agua

2. DE LABORATORIO:
- Placas de petri est\u00e9riles.
- pipetas.
- mechero
- Tubos de ensayo.

3. MEDIOS DE CULTIVO:
- Agar cuenta g\u00e9rmenes (PCA)
- Soluci\u00f3n Salina Fisiol\u00f3gica Peptonada (SSFP)

4. EQUIPOS:
- Contador Quebeck
- Incubadora regulada a 35\u2013 37\u00baC.
IV. PROCEDIMIENTO:
La muestra debe llegar al laboratorio convenientemente identificada cumpliendo los
requisitos de muestreo.
4.1 SIMBRA POR INCORPORACI\u00d3N:
1. Desinfectar al lugar de trabajo con alcohol Yodado.

2. identificar la muestra con los siguientes datos: Nombre y/o n\u00famero del lote, diluci\u00f3n, volumen sembrado, t\u00e9cnica de siembra, fecha, operador, etc.

3. Seg\u00fan la carga microbiana esperada elegir las diluciones a sembrar. Realizar no menos de tres diluciones consecutivas: 1:10, 1:10, 1:1000. Cada vez que se prepara una diluci\u00f3n cargar y descargar la pipeta cuando menos tres veces.

4. depositar 1Ml de cada diluci\u00f3n en placas est\u00e9riles, vac\u00edas, por
duplicado.

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