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Procedimientos
de cultivo y
aislamiento de
hongos
Q.C CIRENIA HERNANDEZ TREJO
OBTENCION Y
PROCESO DE
MUESTRAS
Consideraciones
generales
Tomar muestra del lugar
adecuado
Usar tecnica esteril
Enviar material adecuado
Enviar y procesar con prontitud
Etiquetar y enviar diagnosticos
probables
Origen de
especimenes
Sangre Orina
Médula osea
Líquido
Vagina y cuello
cefalorraquideo uterino
Cutáneo (pelo, uñas y
piel)
Heridas
Tracto respiratorio Lesiones
Tejidos subcutáneas
Lesiones
mucocutáneas
Sangre
Se realiza como hemocultivo
8 ml
Vacutainer con polietanol
sulfonato de sodio
Médula ósea
Se colectan 3-5ml de médula
ósea
Líquido cefalorraquideo
Se colecta asepticamente, la
mayor cantidad posible.
Del sedimento se toma muestra
para examen directo e
inoculacion en medios aerobicos y
anaerobicos
Especimenes
cutaneos, pelo
Se toman tallos pilosos (10)
Si son pelos rotos se frota la piel
cabelluda con hoja de bisturi
Colocar el material entre dos
portaobejtos o en caja de Petri o
incluso en un sobre limpio
Especimenes cutáneos,
uña
Se limpia la uña con alcohol 70%
Con bisturi estéril, se rebaja las
capas superficiales y se obtiene
queratina mas profunda
Se extrae material bajo la lámina
Se coloca el material en caja de
Petri estéril
Especimenes cutáneos,
piel
Limpiar la piel con alcohol 70%
frotar con hoja de bisturi estéril
colocar el material obtenido en
caja de Petri estéril
Tracto respiratorio,
esputo
Se colecta por la mañana
Se retira la dentadura y se
enjuaga la boca
Debe ser de una espectoracion
profunda
colectar en recipiente estéril
Tracto respiratorio, exudado
faringeo
Se puede usar hisopo
Preferentemente con
abatelenguas estéril que se
coloca en tubo estéril
manteniendose húmedo
Tracto respiratorio,
secrecion bronquial
Si es lavado bronquial, por lo
general se contamina con flora de
cavidad oral.
Si es punción transtraqueal no
estará conta- minada.
Tracto respiratorio
La secrecion mucosa espesa
deberá ser pro- cesada para
exponer la mayor cantidad de
microorganismos
Centrifugar para examen directo
y cultivo
Si se hace un estudio
micobacteriologico separar la
muestra en dos tubos antes del
Tejidos
Las biopsias seran tomadas
incluyendo el borde y el centro de
la lesion
Se mantienen húmedas con
solución salina
Buscar granos, absesos para
cultivar
Picar y homogenizar el resto del
tejido para cultivar
Orina
La primera de la mañana
Metodo ideal: cateter
No conviene de muestras de 24
hrs.
Centrifugar para examen directo
y cultivo
No exceder de 12-14 hrs a 4°
Vagina y cervix uterino
Esferulas de C. immitis
en esputo
Lactofenol Azul-algodón
Cristales de fenol 20 gr
Acido lactico 20 ml
Glicerina 40 ml
Agua destilada 20 ml
Azul algodón
solución acuosa 1% 2 ml
- El azul algodon se fija a la quitina de los hongos
- Se puede hacer una preparacion permanente
Examen directo
Histoplasma
Critptococo
Examen directo
Aspergillus
Mucor
Hidroxido de Potasio
Hidroxido de potasio, cristales 10 g
Glicerol 20 ml
Agua destilada 80 ml
Hifa tabicada
en KOH
Examen directo
Examen directo
Parasitacion endotrix
Examen directo
Examen directo
Agentes de Piedra
Examen directo
Malazesia
Tincion de Gram
Los hongos suelen ser Gram +
Los mas frecuentemente encontrados con
esta tincion son levaduras
Examen directo
Pseudohifas
y blastoconidias
Examen directo
Malazesia
Examen directo
Actinomicetos
Tincion de Calcofluor
blanco
- Se trata de un agente blanqueador usado
en la industria textil y del papel
- Se une a la quitina de los hongos
- Se interpreta con el microscopio de
fluorescencia
Examen directo
Pelo parasitado
Tincion para AAR
- Para Actinomicetos
- Coloracion de Ziehl-Neelsen
- Coloracion modificada de Kinyoun
Tinta china
Tinta china 15ml
Merthiolate 1:1000 3ml
Tween 80 1:1000 0.1ml
Criptococo
Otras tinciones
Tinción Hematoxilina y Eosina
Tinción de Gomori para
actinomicetos
Tinción de PAS
Tinción de mucicarmin para
Criptococo
Tincion de Wright
Tinción de Fontana-Masson