Resumen de histología
-Histología: anatomía microscópica.-Técnica histológica: conjunto de procedimientos utilizados para obtener unpreparado histológico.-Preparado histológico: rebanada de tejido colocada sobre un portaobjetos,teñida y tapada con una lámina cubreobjetos.¿CÓMO HACERLO?
-Obtener el material:
el tejido. Puede hacerse mediante:-Biopsia: se saca tejido vivo.Con agujaIncisional (se saca poquito tejido de la lesión)Exicional (se saca toda la lesión)-Autopsia: se saca tejido de un cadáver
-Fijar
: por este proceso se evita la autólisis (Auto / lisis= destrcucción), seconservan las características del tejido, evitando que las enzimas de loslisosomas destruyan a la célula por la falta de ATP, coagulando las proteínaspara detener la acción de las enzimas.SE USA FORMOL AL 10%, 10 veces el tamaño de la muestra.
-Obtención del bloque de parafina
: es un proceso largo, por el cual se lograobtener un bloque de parafina en el que esta introducida la muestra y así sehace posible el corte en rebanadas muy pequeñas. Se debe:-Deshidratar: se mete el tejido en varios potes que están enconcentraciones crecientes de alcohol, para sustituir el agua de la célula por alcohol que es un solvente del Xilol. SE PONE BLANCO-Aclaramiento: se pone la muestra deshidratada en varios potesdiferentes con Xilol para sustituir el alcohol. El Xilol es un solvente de laparafina. SE PONE TRASNPARENTE.-Impregnación: se introduce la muestra en parafina líquida hasta que sesutituya el Xilol por la parafina.-Inclusión: la muestra parafinada se introduce en moldes con parafinalíquida para crear bloquecitos.
-Corte:
se introduce el bloquecito en un microtomo, luego de obtener lasrebanadas se ponen a baño de maría a 38 ºC para suavizar la parafina y lograr que se estire completamente en el porta objetos.
-Coloración:
es un proceso largo en el que se realizan pasos inversos de losutilizados en la obtención del bloque de parafina. Las tintas utilizadas son:-Eosina: es una tinta acidófila, posee cargas negativas por lo cual sepega a las cargas positivas o a las bases de la célula, generalmente elcitoplasma. TIÑE DE ROSADO.-Hematoxilina: es una tinta basófila, pose cargas positivas por lo cual sepega a las cargas negativas o a los ácidos de las células, generalmente elnúcleo. TIÑE DE MORDADO.El proceso a realizar:Desirée Suárez N2Escuela Luis Razetti 1º año
-Desparafinar: se mete la muestra en xilol.-Rehidratar: se mete la muestra en alcohol y luego en agua.- Poner la hematoxilina.-Lavar para quitar el exceso de hematoxilina-Poner la eosina
-Preservación y montaje:
se debe colocar un montante que por lo general essoluble en Xilol por lo que hay que llenar la muestra de Xilol nuevamente.-Se introduce la muestra en alcohol (Se deshidrata)-Se introduce la muestra en Xilol-Se le ponen el montante-Se coloca el cubre objetos que se pega gracias al montante.-
Observación.Microscopio:
Parte mecánica:-Pie: da la estabilidad-Columna: une al pie con el tubo-Tubo: tiene dos extremos (Ocular y revolver) (Es negro por dentro)-Platina: donde se pone el preparada, tiene un huevo para la luz y un carropara mover el preparado.-Tornillo macrométrico: enfoque principal-Tornillo micrométrico: enfoque finoParte óptica:-Ocular: es un tubito con lentes convergentes, es negro por dentro para evitar la difracción de la luz. Solo aumenta entre 5 o 10 veces.-Objetivos: tienen un juego de lentes convergentes. Producen una imagenvirtual e invertida. La que recibe la imagen es la lente frontal.-Condensador: juego de lentes que hacen que haya un rayo de luz paralelo,tiene un diafragma que regula cuanta luz entra.-Luz: natural o con bombillos.EL PODER DE RESOLUCIÓN DEPENDE DEL OBJETIVO, NO DELOCULAR. Y es la distancia mínima en la que dos objetos se ven separados.Tipos de microscopio:-Microscopio óptico de campo claro: es el descendiente directo de losmicroscopios antiguos. Usado para exámenes de rutina de los preparadoshistológicos.-Microscopio óptico de campo oscuro: la lente del objetivo no capta luz directa.En él se detectan partículas más pequeñas que en el de campo claro. Es útilpara la detección de cristales en la orina, y para observar espiroquetas.-Microscopio óptico de contraste: sirve para examinar células y tejidos vivos noteñidos, como los de cultivos.-Microscopio óptico de fluorescencia: se usa para detectar moléculas defluorescencia natural, como la vitamina A y algunos neurotransmisores.También se usa para detectar antígenos y anticuerpos.-Microscopio óptico confocal de barrido: permite ver en tres dimensiones.-Microscopio óptico de luz ultravioleta: se usa para detectar ácidos nucleicos,se usa para determinar el corte de ploidia en los tumores .Desirée Suárez N2Escuela Luis Razetti 1º año
-Microscopio electrónico de transición
Ambos usan electrones en ves
-Microscopio electrónico de barrido
de luz.Célula:
Son unidades estructurales y funcionales básicas que conforman losorganismos multicelulares, funciones:-Absorbe-Excreta-Respira-Contrae-ReproduceSu forma varía con la función. (La estructura interna y externa dependen de sutrabajo en el organismo)-Conjunto de células de similar función: Tejido-Conjunto de tejidos: Órganos-Conjunto de órganos:-Aparatos (órganos de distintos tejidos)-Sistemas (órganos del mismo tejido)Formada por un citoplasma y un núcleo.-Citoplasma: esta formado por:-Matriz citoplasmática o citosol. 70% agua, 1 % iones, resto deproteínas, lípidos y carbohidratos. Ayuda a mantener el Ph más o menosbásico, es en donde ocurren las reacciones, se divide en:-Centrosoma (pegada al núcleo, es como un gel)-Endoplasma (está en el medio, están las organelas)-Ectoplasma: periferia: cortex celular (es un gel)-Organelas:-
Membranosas (poseen membrana celular)-Membrana plasmática:
(o Plasmalema) es una barreradinámica que sirve de límite externo a la célula y la separa del medioextracelular. No se observa en el microscopio de luz. En el microscopioelectrónico se observan dos bandas electrodensas y una bandaelectrolúcida en el medio. Se tiñe con ácido ósmico. Esta organizada de lasiguiente forma:-Bicapa lipídica-Proteínas que se meten dentro y fuera de la bicapa-Carbohidratos que están en la cara que da al mediointracelular. Glucocalix (Cubren la membrana)Los grupos polares de las cabezas de las moléculas lipídicas están en la parteexterna e interna de la membrana (son hidrofílicas), y los cuerpos son nopolares o hidrofóbicos.Está compuesta por:-Lípidos anfipáticos (colesterol: que le da rigidez, fosfolípidos queposeen dos cabezas hidrofílicas o polares y un cuerpohidrofóbico)-Proteínas:Desirée Suárez N2Escuela Luis Razetti 1º año
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