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FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
LABORATORIO INMUNOHEMATOLOGIA III
WILLIANS SANCHEZ RODRIGUEZ GRUPO 702

“DETERMINACIÓN DE SECRETORES”
OBJETIVO:
• Aplicar una reacción de inhibición de la aglutinación para determinar si un individuo es o no es
secretor de las sustancias de grupo sanguíneo

FUNDAMENTO:

Las sustancias de los grupos sanguíneos presentes en la saliva se detectan por la inhibición de la
hemaglutinación, después de hervir y centrifugar.

Si a un suero para diagnostico anti-A se le agrega una sustancia secretora de tipo A sus aglutininas
inactivan el reactivo que ya no podrá aglutinar los glóbulos rojos A.

GENERALIDADES
• Los antigenos del sistema ABO entre otros antígenos corporales no siempre se limitan al
glóbulo rojo, en el cuerpo el Ag se puede adoptar la forma soluble en H2O o soluble en alcohol.

• Loa antígenos solubles en agua A, B y antígenos de la sustancia H están presentes en muchos


fluidos como semen, orina, jugo digestivo, leche, saliva, sudor, plasma, estas sustancias son
glicoproteínas solubles en H2O, que pueden ser útiles en la identificación Ac´s.

• Un segundo numero de antigenos son los que son solubles en alcohol, que están presentes en el
cuerpo , excepto en las lagrimas, estos antígenos solubles en alcohol solubles en alcohol están
influidos por el gen secretor.(3)

EL GEN SECRETOR

• Su presencia en los antígenos ABO en líquidos es controlada por el gen secretor, Se, que es
autosomico dominante, las sustancias del ABO se hallan en el plasma de todos los individuos
independientemente de que sean secretores o no, ahora bien, son muchos más abundantes en el
plasma de los secretores.

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El 80% de los individuos causacoides heredan el gen Se y son llamados secretores (genotipo sese). No
se ha identificado ningún producto específico del gen Se, aunque se sabe que este gen regula la
formación de sustancia H en las secreciones y en el plasma.

Así, un secretor del grupo A tiene sustancias A y H en sus líquidos orgánicos. Los no secretores
(sese) no tienen sustancias ABH en sus secreciones.

Otras sustancias de grupo sanguíneo también se pueden encontrar en el plasma y la saliva(chido, lewis,
rodgerI), aunque su presencia en los líquidos orgánicos no está controlada por el gen Se. .(2)

• La inmunoglobulina A (IgA) es la clase predominante de anticuerpo en las secreciones


seromucosas del organismo tales como saliva, lágrimas, calostro y secreciones respiratorias,
gastrointestinales y genitourinarias. En sangre, se encuentra como una molécula monomérica,
pero en mucosas se encuentra en forma dimérica (IgA secretora).
• Su función principal es identificar a los antígenos e impedir que se localicen en las mucosas.

Los anticuerpos de la IgA se encuentran en las lágrimas, saliva, en el moco, en la leche, en las
secreciones gastrointestinales, en la sangre y en la linfa y brinda protección localizada en la membrana
de la mucosa.

Las formas secretoras de la IgM y IgA forman complejos multiméricos en los que dos o más de las
unidades estructurales básicas de anticuerpo de cadenas están unidas por medio de enlaces
covalentes.(1)

IGA
Las primeras células B con expresión de IgA aparecen inicialmente en la semana 11 después del
nacimiento, a diferencia de lo que ocurre con IgG e IgM, de aparición más temprana. Habitualmente el
nivel sérico de IgA es indetectable en el momento del nacimiento y los niveles del adulto no se logran
hasta la pubertad.

En sujetos adultos, la mayoría de las células plasmáticas está confinada a la producción de esta
inmunoglobulina, la de mayor producción diaria. De hecho, se genera más IgA por día (66 mg/kg/día)
que de cualquier otra clase de inmunoglobulina.

La IgA es la inmunoglobulina más heterogénea y tiene forma de T a diferencia de las restantes Ig con
forma de Y. Existen dos subclases de IgA: IgA1 e IgA2, que difieren por la ausencia de una secuencia
de 13 aminoácidos en la región en bisagra de la IgA2. Esta diferencia estructural explica la resistencia
de la IgA2 a las proteasas bacterianas y explica por qué este subtipo es más frecuente en las mucosas.
En suero, la IgA representa la quinta parte de las inmunoglobulinas debido a su rápido catabolismo
(vida media de sólo 3 a 6 días). La IgA1 monomérica es la forma predominante en sangre. La IgA del
suero es producida por linfocitos B en la médula ósea y en algunos órganos linfoides periféricos.

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En las secreciones mucosas (saliva, lágrimas, calostro, fluidos gastrointestinales, secreción nasal y
bronquial y orina), las células plasmáticas locales pueden producir IgA como IgA polimérica (IgAp),
casi exclusivamente en forma de dímeros unidos por una cadena J y con un componente secretorio
(IgAS).

• Recientemente se propuso que la IgAS deriva de dos fuentes principales: linfocitos B1 y B2.
Los primeros, presentes fundamentalmente en la cavidad peritoneal, contribuyen con alrededor
del 25% de la IgAS. Se ha sugerido que la IgA producida por linfocitos B1 representa un
sistema primitivo, independiente de células T y destinado al reconocimiento de bacterias
comensales.
• Los linfocitos B2 producen el 75% restante de la IgAS. Dichas células se organizan en centros
germinales del tejido linfoide asociado con mucosas (MALT) como las placas de Peyer. La
formación de esta IgA depende de la colaboración de linfocitos T. La IgA de mucosas es
producida por células plasmáticas en forma de IgA dimérica con una cadena J de unión.

Se une y forma complejos covalentes con el receptor de Ig polimérica, presente en la cara basolateral
de las células epiteliales en mucosas. El complejo se transporta en forma activa a través de la célula del
epitelio a la porción apical, donde la IgA se libera del complejo. El componente secretorio permanece
asociado a la IgA dimérica.

Funciones de la IgA
Las mucosas del organismo cubren una superficie aproximada de 400 m2, en contacto permanente con
múltiples agentes infecciosos. Cada día se movilizan más del 70% de las células inmunes para resistir
posibles infecciones.

La IgA con el componente secretorio (IgAS) interviene en forma crucial en la inmunidad innata al
evitar la penetración de microorganismos y de proteínas extrañas en la mucosa. También neutraliza
toxinas y organismos infecciosos. La incapacidad de la IgAS de activar el complemento o de actuar
como una opsonina es una ventaja en las secreciones a cuyo nivel el inicio de una respuesta
inflamatoria podría comprometer el sistema de defensa local y la integridad de las mucosas.

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• Si bien la función de la IgA de mucosas se conoce bien, no ocurre lo mismo con la IgA sérica.
Sin embargo, se considera que esta última puede ser un «guardián pasivo» ya que los
inmunocomplejos con IgA son eliminados por el sistema fagocítico sin inflamación asociada.

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IgA Niveles DE Activación

Más aún, la IgA sérica monomérica tiene actividad antiinflamatoria y es capaz de inhibir ciertas
funciones como fagocitosis inducida por IgG, actividad bactericida, estallido respiratorio y liberación
de citoquinas.

La deficiencia selectiva de IgA (la deficiencia primaria más frecuente) predispone a los enfermos a la
aparición de alergia y autoinmunidad. La interacción de la IgA con el FcALFARI en células fagocíticas
tisulares puede representar una segunda línea de defensa en el caso de infecciones bacterianas.

Tipos de receptores de IgA (FcALFAR)

• Existen cinco tipos no relacionados estructuralmente. Tres de ellos se consideran genuinos: el


receptor de IgA polimérica está involucrado en el transporte de IgM e IgA a través de las
barreras mucosas. El segundo tipo (el CD89) es el receptor específico de IgA (FcALFARI) que
une IgA1 e IgA2. El tercer tipo une IgA e IgM mientras que los dos restantes, alternativos, son
el receptor de asialoglucoproteína y de transferrina (TfR).

Inmunoglobulina SUBTIPOS Cadena Forma Tamaño de la


pesada secretora forma secretora
dominios

IgA IgA 1 A1 Mónomero, 150, 300 0 o 400


IgA2 A2 dímero,
trímero

Material:

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• 6 tubos de 12 x 75
• 1 gradilla
• 1 pizeta
• 4 pipetas pasteur
• Centrífuga
• 1 vaso precipitado
• termómetro
• Tripie
• Mechero
• Sueros anti-A y B

Muestra biológica:
Eritrocitos A y B
Saliva

TECNICA

1. Recolectar 3-5 ml de saliva en un tubo de ensaye de persona de grupo sanguíneo A y B.


2. En un vaso precipitado se calienta saliva 56°C durante 5 minutos
3. Centrifugar 2000 rpm durante 5 minutos y separar el sobrenadante que se utilizara

4. En tubos de 12 x 75 marcar en como A y B y colocar 4 gotas de la saliva a estudiar y se le


agrega 1 gota de suero anti-Ay B respectivamente
5. Mezclar y dejar reposar a temperatura ambiente durante 15 minutos
6. Preparar tubo testigo positivo con 4 gotas de solución salina y 1 gota suero anti-A y B
7. Agregar a cada tubo 1 gota de eritrocitos conocidos y mezclar
8. Esperar 3 minutos buscando aglutinación
9. Reportar en cruces

Interpretación: cualquier grado de aglutinación es indicativo de que el individuo es secretor

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OBERVACIONES:

RESULTADO: no aglutino, es secretor

CONCLUSIONES:
Cuando se inactivo la saliva(se destruyen enzimas que inactiven a las sustancias del grupo ABO, se
hizo reaccionar con un suero especifico( anti-B), para que se uniera la sustancia del grupo B presente
en la saliva ant(AgB) se neutraliza el anticuerpo del suero debido a que ya esta formada la reacción
antígeno- anticuerpo, cuando se hace reaccionar con sus eritrocitos (AgB) con su antígeno especifico,
no reacciona con el suero debido a que la persona no fue secretor , debido a que ya están ocupados los
determinantes antigenicos.

REFERENCIAS:

1. Abbas, K, Inmunología Celular Y Molecular, Cuarta edición, 2002, Editorial McGrawhill,


Mexico.
2. Albarran, S.C. , Manual técnico de banco de sangre, Editorial la prensa medica mexicana,
México, 1986, paginas:93
3. Bryant, A.H. Introduction inmunohematology, 1994, Editorial Saunders, pagina:111
4. http://www.med.uio.no/rh/patologi/liipat/secretory_immunity/pictures/TI-fig1big.htm
5. http://es.wikipedia.org/wiki/Inmunoglobulina_A
6. http://www.bago.com/BagoArg/Biblio/alergweb155.htm

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