1-Intrduo 2- Como a sobrecarga lipdica danifica os tecidos (...) Inchao, desintegrao.

Extravasamento de seu contedo celular e inflamao local, clulas apoptticas desenvolvem "corpos apoptticos", fragmentos de DNA denso rodeado por membrana plasmtica aparentemente intacto, e condensao e fragmentao de DNA. Este ltimo se assemelha a uma "escada" quando separados na eletroforese de DNA em gel e usada para quantificar a apoptose. A apoptose um mecanismo normal de renovao celular, mas pode ser acelerada por stress celular causado por fatores trmicos, hipxia e citotxicos, tais como citocinas, radicais de oxignio e peroxinitrito (ONOO-) e causar uma reduo lquida na populao de clulas funcionamento de um rgo . As alteraes morfolgicas de apoptose so o resultado da ao da cistena proteases conhecidas como "caspases" [12,13]. Eles so especificamente ativados durante a apoptose [14]. Estas enzimas tm sido altamente conservados durante a evoluo e esto presentes em Hydra, nematides, insetos e no homem. Caspases tm um stio ativo cistena e clivam substratos aps resduos de cido asprtico [15]. Elas podem ser pensadas como "carrascos central" da apoptose, que pode ser prevenido atravs do bloqueio da sua atividade. Os resultados de DNA fragmentao do DNA laddering, que amplamente utilizado como um marcador de morte celular por apoptose [16] e o resultado da ativao de uma caspase nuclease que corta o DNA genmico entre nucleossomos [1719]. Um evento-chave da apoptose a extruso de citocromo e da membrana mitocondrial interna atravs de um poro formado por membros da famlia proapoptotic Bcl2 [20], um conjunto de reguladores apoptticos que foram divididos em trs grupos. O Grupo 1 tem atividade anti-apopttica, enquanto os grupos 2 e 3 promovem a morte celular. Esses membros da famlia podem homodimerizar ou heterodimerizar. Se um excesso de membros pr-apoptticos, Bax, Bad, Bim e Licitao, dimerizam, apoptose seria promovida, enquanto um excesso de protenas dimerizam antiapoptticas, tais Bcl2, iria proteger. No entanto, os mecanismos precisos ainda no foram elucidados.

2.1- Citocromo C

Citocromo C um transportador de eltrons envolvidos na fosforilao oxidativa e est localizado no espao intramembranar das mitocndrias. Na apoptose, citocromo c expulso atravs da membrana externa da mitocndria [21]. Membros da famlia proapoptticos Bcl2 melhoram o processo, enquanto os membros da famlia antiapoptticas Bcl2 impedem. Uma possibilidade que os sinais apoptticos alterarem a fisiologia mitocondrial de uma forma que cause o inchao e ruptura da membrana e liberao de protenas como o citocromo c intermembranar. Em clulas de lipdeos, graves alteraes mitocondriais tm sido observadas ao microscpio eletrnico (Fig. 1) [22]. Citocromo c extruso quase uma caracterstica universal da morte celular por apoptose. Tem sido demonstrado em lipoapoptosis cardaca [23].

Sempre FA fluxo em uma clula excede cronicamente oxidao oxidado, o excedente FA deve finalmente entrar utilizando vias do metabolismo no oxidativo. Inicialmente, a esterificao TG parece ser o caminho metablico principal, e TG provavelmente no prejudica a clula. Eles podem at mesmo proteg-lo, inicialmente, por desvio de FA aps a entrada em vias mais deletrios do dano a lipdeos-infligido Mas, afinal, a hidrlise desses armazenamentos TG ir acrescentar ao conjunto j expandido de acil Coa graxos, fornecendo substrato para suplementar o metabolismo FA MONOXIDATIVE (Fig. 2A) O mecanismo do final da fase destrutiva da sobrecarga de gordura nas clulas ilhotas pancreticas foi estudado em ZPF (fa/fa) ratos [18,19], e em cardiomicitos [6,23]. O caminho da ceramida (Fig. 2A) parece ser a mais importante das rotas destruidoras, embora outras vias independentes da ceramida, tais como peroxidao lipdica, efeitos detergentes, etc., no foram excludos. Nos estados de resistncia leptina, a enzima serina palmitoil transferase (SPT) [24] expresso em nveis elevados em ilhotas pancreticas (Fig. 2B) [8,9], aumentando assim a biossntese de novo ceramida (Fig. 2C). A ceramida elevada parece ser derivada, no de esfingomielina, acredita-se que na origem em outras formas de ceramida-apoptose induzida mas sim de sntese de novo de ceramida resultantes do excesso de cidos graxos acil Coa [10]; estudos metablicos da ZDF ilhotas revelam maior incorporao de 3H-palmitoil Coa [7] e 3H-serina [10] em 3H ceramida (Fig. 4B). As profundas alteraes mitocondriais (Fig.1) [22] e apoptoses identificados nas clulas do pncreas de ratos fa/fa leptina insensvel ZDF acredita-se ser o resultado de excessiva formao de ceramida de novo, acoplado-a e amplificado pela FA UNDEREXPRESSION induzida e/ou inativao dos fatores anti-apoptticos do Bcl2 [9] (fig.3) Inativao dos fatores pr-apoptticos, como Bad, Bax, Bid e Bim, requer a sua fosforilao pela Akt [protena quinase B (PKB)], uma serina-treonina quinase envolvidos em fosfolarizao crucial que parecem dar conta de insulina estimulada.

LEGENDA: NO TRATADOS E TRATADOS Fig. 1. (A) de seo fina de uma clula de insulina a partir de um tratado de ratos Zucker Diabetic Fatty falfa (ZDF), com alteraes de mitocndrias (m) e reduo no nmero de grnulos de corpo denso secretoras; reas de partculas densas representando glicognio (gl) tambm pode ser detectado com alta freqncia. (B) de seo fina de uma clula B de um rato TGZ tratados com falfa ZDF. Ambas as mitocndrias e denso ncleo grnulos secretores parecem normais em aspecto e nmero. G = complexo de Golgi. (C) O percentual de mitocndrias alterados foi estabelecido com base nos seguintes critrios morfolgicos: inchao da ruptura da matriz, das cristas, ou a presena de figuras de mielina-like. Os bares abertos esquerda indicam os valores para os seis ratos no tratados (U1-U6), os bares fechados direita mostram os valores para os seis ratos tratados (T1-T6). As barras de largura

entre representam os valores de cada categoria experimental. Trs ilhotas de ratos e por oito clulas B por ilhotas foram avaliados. Fig. 2.(A) Via do putativo lipoapoptosis. A condensao de oxidadas palmitoil-CoA e serina-l catalisada pela serina palmitoil transferase gera ceramida. Ceramida modula + a expresso do xido ntrico sintase (iNOS) pela ativao do NFkB. Alternativamente, pode reduzir a fosforilao da AKT, reduzindo os seus efeitos anti-apoptticos (ver texto). A apoptose pode ser previnida pela inibio da sntese de ceramidas com cicloserina-l (CS) ou femonisina B1 (FB1). (B) RNAm de serina palmitoil transferase, enzima que catalisa de l-Coa e serina palmitoil, em 7 e 14 semanas se idade (+/+) normais e obesos (fa/fa) ratos ZDF. Fa/fa ratos se tornar diabtico em 14 semanas de idade como consequencia da diminuio de apoptoses das clulas . (C) Comparao de [3H]-formao de ceramida para [3H]-serina ou [3H]-palmitato. Esta sndrome caracterizada por esteatose heptica, resistncia insulina, NIDDM grave e miocardiopatia precoce da vida resultando em morte precoce. Da mesma forma, os modelos experimentais da lipodistrofia generalizada em exposio ... o mesmo ratos da sndrome de resistncia insulina, NIDDM e esteatose heptica macia. Em um tal modelo, a sndrome foi revertida atravs da implantao de tecido adiposo branco de ratos normais, enquanto que o tecido estreito de leptina deficiente ob/ob em camundongos no teve efeito. Isso implicou o adipcito hormnio leptina, como o fator que protege contra a esteatose nonadipose. A potente ao antiesteatose de leptina foi demonstrada em ratos por lipodistrficos Shimomura et al. e em pacientes humanos CGL por Oral et al., o tratamento com leptina recombinante reduziu o teor de TG elevados de seus fgados em gordura. A ao da leptina antiesteatose havia sido demonstrada anteriormente nas ilhotas em gordura de ratos obesos CDF com transgenicamente modificados para expressar um receptor da leptina normal, o excesso de TG foi ento reduzido pela leptina e a funo das clulas- foi melhorada. Num estudo mais recente, a ao antiesteatose da hiperleptinemia endgena em seu fgado gordo foi demonstrada in vivo por meio de transferncia adenoviral do receptor da leptina do tipo selvagem para o fgado in vivo. Novamente, a esteatose heptica foi reduzida, neste caso, pelos elevados nveis circulantes de leptina endgena. Mais recentemente, a adiponectina, um outro membro de um nmero crescente de hormnios adipcitos, mostrou ter uma ao, leptinomimetica, antiesteattica, diminuindo o contedo de TG no msculo esqueltico e no fgado de ratos obesos e revertendo a resistncia insulina de camundongos lipoatroficos quando foi administrado com leptina. Estas descobertas recentes do credibilidade hiptese de que os adipcitos secretam hormnios, no para prevenir a obesidade, mas sim para facilitar a estocagem de calorias em excesso sem a apoptose em tecidos nonadipose. Sempre que este sistema putativo antiesteatotico falhar, seja por meio de uma deficincia de todos os hormnios dos adipcitos, lipodistrofia generalizada no brao, uma deficincia de leptina por si s, ou insensibilidade leptina secundria a uma mutao de perda de funo no gene receptor da leptina ou a resistncia leptina postreceptora, o TG ser depositado nos tecidos nonadipose em proporo ao excesso calrico. A deposio ectpica de lipdios causa disfuno e, ultimamente,

lipoapoptoses de clulas. Isto d origem a muitos dos componentes da constelao de perturbaes conhecidas coletivamente como sndrome metablica (sndrome X). 4- Normal liporegulation (...) A reduo no contedo de TG causados pela leptina aps a superexpresso do receptor da leptina funcional em suas ilhotas associado com a funo das clulas B melhorou, apoiando o conceito de que uma funo importante da leptina, talvez a sua funo mais importante, para proteger os tecidos de "lipotoxicidade" . 5.2. Mecanismos de lipoapoptosis

Quando cronicamente sobrecarregados com CC oxidadas, mau funcionamento de tecidos nonadipose e, finalmente, morrer. A apoptose parece ser uma rota principal de morte, mas tambm pode ocorrer a necrose. Lipoapoptosis foi descrita pela primeira vez nas ilhotas de ratos ZDF. Neste modelo, a apoptose progressiva do gordo-carregado de clulas B, que culminou com NIDDM, foi atribudo sntese de ceramidas inreased. Isso comea no perodo pr-diabtica e atinge um pico aps o incio do diabetes. A importncia dessa via na apoptose de clulas B das ilhotas ZDF reforada pelo facto de fumonisina B1, um inibidor da sntese de ceramidas, impede completamente FA induzida por apoptose. A via ceramida tambm podem estar envolvidos na cardiomiopatia de ratos ZDF em que lipoapoptosis progressiva dos resultados cardiomicitos na perda grave da funo miocrdica. Como no caso de apoptose de ilhotas, a apoptose dos cardiomicitos completamente bloqueado por reduo TG miocrdica com a terapia de troglitazona. Fig.5. (A) lipoapotoxicity Cardaca: Myocardialcontractility, mostrando perda funcional em fa 20 semanas de idade / ytreatment ratos ZDF fa prevete com a troglitazona drogas antisteatotio (TGZ). (B) DNA laddering, anindex da apoptose no corao dos obesos fa / fa ratos ZDF anos 14 semanas. O aumento da laddering e da perda de contratilidade so bloqueados pelo tratamento dos ratos por seis semanas com a troglitazona agente antisteatotic (TGZ), comeando s 7 semanas de idade. Os dados esto expressos como alterao dobra a partir da base de 7 semanas de idade, em fa / fa, que 10 vezes maior do que magra + / + ratos com a idade. (C) Cardiac triglicrides (TG) e (D) o contedo da ceramida ZDF 14 semanas de idade (fa / fa) ratos e controles do tipo selvagem (+/+) * P <0,01. Fig.6. (A) Comparao dos efeitos de um 1 mm2: 1 oleato / palmitato de mistura na produo de xido ntrico (nitrito) em ilhotas isoladas de prediabetic fa / fa ratos ZDF. (B) laddering DNA e expresso de iNOS em ilhotas de fa / fa ratos ZDF cultivados em meio sem suplementao, em meio contendo 1 mM mistura de cidos gordos por si, ou com triacsin-C ou com troglitazona, os quais reduzem lipdico ilhota contedo, ou com aminoguanidina (AG), um inibidor da iNOS. laddering DNA mostrada e quantificada em porcentagem do DNA total. O mecanismo pelo qual ceramida produz apoptose menos clara. H evidncias de que ele faz isso iNOS de regular, pelo menos na origem ilhotas e ambos podem ser bloqueados por fumonisina B1, os inibidores como ceramida aminoguanidina pode

bloquear a apoptose de clulas-B. No entanto Chiu et al.relatam que, embora a superexpresso da ACS no miocrdio de ratos transgenig produz esteatose cardaca, itincreased contedo ceramida e extrudion citocromo c, da apoptose e morte prematura. No entanto, a ceramida pode induzir a apoptose por outras vias, como por inibio direta da cadeia respiratria mitocondrial complexo de 3 por ceramida clulas permeveis ou pela inibio da atividade da quinase Akt, FA tambm pode danificar os tecidos independentemente da ceramida atravs de peroxidao lipdica e reduzindo a expresso de BCL2. Baseados em diferenas no caminho explorado por Chiu et al, parece provvel que a sobrecarga de FA sustentada induz apoptose e / ou necrose atravs de mais de um pathstudies de seu efeito sobre a funo cardaca na obesidade humana esto ainda disponveis. 6.2.3-Envelhecimento H evidncias ineressing que o envelhecimento programado com um liporegulao fracasso e que isso pode contribuir para muitas das anormalidades familiares geritricas. De fato, os efeitos salutares da restrio calrica e exerccio da esperana de vida pode refletir uma reduo no contedo de TG de tecido, que pode ser aumentada em indivduos mais velhos, mesmo na ausncia de obesidade. A sarcopenia e a perda em geral de massa corporal magra associados ao processo de envelhecimento pode ser a conseqncia de lipoapoptosis. Claramente, os dramticos efeitos da hiperleptinemia induzida experimentalmente sobre o apetite e a composio corporal so profundamente atenuadas com o envelhecimento, mas de outra forma em ratos normais [73]. (Fig.7). Isso indica que mesmo um supervit calrico menor ser refletido por um aumento na deposio de lipdeos ectpica. Como no caso da obesidade, esteatose do envelhecimento presumido de modo a refletir uma causa postreceptor de resistncia leptina. bem possvel que a perda relacionada idade da sensibilidade leptina em indivduos no obesos tambm a causa da perda de sensibilidade leptina na obesidade. Agradecimentos Os autores agradecem Susan Kennedy para a soberba servios de secretariado e Kay McCorkle para suporte tcnico. Agradecemos o apoio financeiro do Departamento de Assuntos dos Veteranos apoio institucional, a National Institutes of Health, e os Institutos Nacionais da Sade / Juvenile Diabetes Foundation Programa Interdisciplinar de Pesquisa