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Autores: Lissette Gioanna, Horna Acevedo Carlos Wilfredo, Lpez Cenizario UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLLO
TIPO DE INVESTIGACIN
De Acuerdo al fin que persigue: De Acuerdo a la tcnica de Contrastacin: Bsica Descriptiva
RGIMEN DE INVESTIGACIN:
Libre
BIENES:
Material Biolgico:
Equipos:
Equipo de Lixiviacin
Tamiz Resh
Solventes: Agua destilada. Alcohol etlico de 96 GL. Reactivos: 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH*) Lab. Sigma Acido sulfrico 10% calidad Merck
PRESUPUESTO Segn Clasificador de Gastos Pblicos para el ao 2012 Cdigo Gastos Presupuestario Costo
2.3.1 1.1 1 2.3.1 5.1 2 2.3.1.8.2.1 Alimentos y bebidas de consumo humano Papelera en general, tiles y materiales de oficina Material de Laboratorio S/.18.00 S/.20.00 S/.617.00 S/.150.00 S/.120.00 S/.330.00 2.3. 1 10. 1 2 Material biolgico 2.3.1 99.1 2 2.3.2 1.2 1 2.3.2 2.2 2.3.2 2.4 4 Productos qumicos Pasajes y gastos de transporte Servicios de Telefona e Internet Servicio de impresiones, encuadernacin y empastado TOTAL S/. 1486.00 FINANCIAMIENTO Autofinanciado Recursos de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional de Trujillo S/ 31.00 S/.200.00
PLAN DE INVESTIGACIN
Realidad Problemtica
Justificacin
El presente trabajo no solo pretende demostrar la actividad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de la hoja de Sambucus peruviana, sino canalizar la posibilidad de su utilizacin en la prevencin de enfermedades producidas por radicales libres, contribuyendo de esta manera a fomentar estudios cientficos que demuestran su actividad antioxidante in vivo.
PROBLEMA
Cul es la Capacidad Antioxidante in vitro de los Flavonoides Totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.B.K. (sauco) proveniente de la ciudad de Huamachuco?
OBJETIVOS
Objetivo General:
Determinar la capacidad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.B.K. (sauco)
Objetivos Especficos:
Cuantificar flavonoides totales de la hoja de Sambucus peruviana H.B.K. (sauco) proveniente de la ciudad de Huamachuco. Determinar la capacidad antioxidante in vitro de los
DISEO DE CONTRASTACION
Diseo de estudio
MTODO
Recoleccin
Soluci n Patrn
1.6 ppm
3.2 ppm
4.8 ppm
6.4 ppm
9.6 ppm
Llevar el papel filtro que contiene los flavonoides totales, en forma de cristales, a la estufa a 40C durante 2 horas.
Los cristales purificados disolver en etanol de 96 GL y aforar con este a un volumen de 100 ml.
SOLUCION PROBLEMA
Determinacin de la capacidad antioxidante in vitro de los flavonoides totales obtenidos de las hojas de Sambucus peruviana H.B.K. Fundamento del mtodo
2,2-difenil-1picrilhidrazilo
Preparacin del Reactivo: Solucin 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH*) Preparar una solucin de DPPH* con etanol de 96 GL a una concentracin de DPPH 0.1 mM (0.03943 mg/ml)
Tubo
ul de
muestra
Tubo
ul de
muestra
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
55 60 65 70 75 80 85 90 95 100
Leer 3 absorbancias de cada tubo en el espectrofotmetro
(Se monitorea las absorbancia desde un tiempo cero hasta 30 minutos)
Determinacin de la cantidad necesaria de la muestra (antioxidante) para reducir en un 50% la concentracin inicial del radical DPPH (IC50)
5b 5 IC5 = 5 m
Donde: IC50 : cantidad necesaria de la muestra para reducir en un 50% la concentracin inicial del radical DPPH (l) b : Intercepto de lnea de regresin lineal m : Pendiente de la lnea de regresin lineal
Anlisis de Datos
Los datos sern procesados en el programa X Microsoft Office Excel 2007. Caracterizados mediante parmetros estadsticos descriptivos: Media Aritmtica ( ) y Desviacin Estndar ()