COOMBS DIRECTO 1 Objetivo:

Determinar la sensibilizacin de los eritrocitos del paciente (Coombs directo)

Alcance:

2.1

Este procedimiento es aplicable al personal qumico, tcnico laboratorista y mdico del Banco de Sangre asignado en el rea de inmunohematologa.

3 Referencias:
3.1. NOM-003-SSA2-1993 Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos. 3.2. NOM-166-SSA1-1997 Organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos. 3.3. EL BANCO DE SANGRE Y LA MEDICINA TRANSFUSIONAL. Ed. Medica panamericana. Mxico,DF.2004

4 Responsabilidades:
Es responsabilidad del personal qumico, tcnico laboratorista o mdico del rea de inmunohematologa: Estar instruido y capacitado para realizar los procedimientos correspondientes en el rea, teniendo acceso a una actualizacin constante. Debe tener conocimientos de las Buenas Prcticas de Laboratorio para asegurar la confiabilidad de los resultados del laboratorio.

Es responsable de ejecutar las medidas de seguridad personal correspondientes,

as como la optimizacin de los mismos.

Es responsabilidad del Jefe de Servicio, verificar que las actividades, procedimientos, mtodos y registros asentadas en este manual, se lleven a cabo en ptimas condiciones dentro del Banco de Sangre.

5 Definiciones:
Coombs directo: se utiliza para la deteccin de hemates sensibilizados in vivo por inmunoglobulinas o fracciones del complemento. Coombs indirecto: permite la deteccin de anticuerpos eritrocitarios presentes en el suero o plasma del paciente, por sensibilizacin de hemates in vitro Esta prueba de Coombs indirecta slo se usa rara vez para diagnosticar una afeccin y, con ms frecuencia, se utiliza para determinar si una persona podra tener o no una reaccin a una transfusin de sangre (pruebas cruzadas).

Principio de la prueba: est basada en el principio de la hemoaglutinacin. El Coombs poliespecfico es capaz de aglutinar los hemates cubiertos de anti IgG y/o por componentes del Complemento (C3b, C3bi, C3dg o C3d).

6 Insumos:
6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 6.10 Tubo de ensaye 12x75mm Reactivo Coombs. Tarjeta de gel de Coombs. Guantes. Gasas. Bote con bolsa roja para RPBI. Pipeta automtica de volumen 5 microlitos, 50 microlitros. Puntas amarillas. Incubador Centrfuga

7 Resultados:
7.1 8 DESARROLLO
8.1 COOMBS DIRECTO EN TUBO

Deteccin rpida y oportuna de eritrocitos sensibilizados en el paciente o donador as como el rastreo de anticuerpos irregulares en la muestra (suero).

8.1.2Preparar una suspensin al 5% de clulas de la muestra problema, previamente lavadas 3 veces. 8.1.3Colocar una gota en un tubo de ensaye y 2 gotas de reactivo de Coombs, previamente temperado. 8.1.4Centrifugar y Leer. 8.1.5En caso de dar negativo el Coombs, realizar consumo con clulas sensibilizadas. 8.1.6Centrifugar y Leer. Debe haber consumo de anticuerpos y se visualiza aglutinacin. 8.1.7Reportar resultados en cruces.

8.2

COOMBS DIRECTO EN TARJETA DE GEL

8.2.1Centrifugar la tarjeta a utilizar, para evitar malformaciones en el gel de Coombs. 8.2.2Preparar una suspensin de hemates al 1% con solucin DG GEL. 8.2.3Dispensar 50 microlitros de dicha suspensin en el pocillo correspondiente. 8.2.4Centrifugar y Leer. 8.2.5Reportar resultados en cruces. NEGATIVO Banda de hemates en el fondo de la columna, resto de la columna si aglutinados visibles

POSITIVO

+/1+ 2+ 3+ 4+

DP

Escasos aglutinados de pequeo tamao en la mitad inferior de la columna Algunos aglutinados de pequeo tamao en la columna Aglutinados de pequeo tamao en la columna Banda superior de aglutinados, de tamao mediano en la mitad superior de la columna. Banda de hemates aglutinados en la parte superior de la columna Doble poblacin (doble banda de hemates, en el fondo y en la parte superior de la columna)

DIAGRAMA DE FLUJO