Revista FAVE - Ciencias Agrarias 7 (1-2) 2008

ISSN 1666-7719

ESTUDIO DE LA APLICACIN DE INOCULANTES PARA EL ENSILADO DE FORRAJES II. EFECTO DE LA ADICIN DE UN COADYUVANTE
VICENTE, F.1, SCOLLO, D.1, MORA, V.1 , GIRAUDO, M.1, RAMIREZ, E.2 & RECHIMONT, R.2

RESUMEN
El presente experimento compara el efecto de dos inoculantes y un coadyuvante sobre la acidez y calidad del proceso de fermentacin de silajes de pasturas. Se utiliz una pastura de alfalfa y cebadilla (relacin 80/20) cortada con motoguadaa a la que se le aplicaron los siguientes tratamientos: T1: Testigo, agua destilada (16mL/kg de forraje); T2: inoculante UNLa (16 mL/kg de forraje); T3: Sill-All (16 mL/kg de forraje); T4: inoculante UNLa + Nutrisilaje (16mL/kg de forraje); y T5: Sill-All + Nutrisilaje (16mL/kg de forraje). El material de cada tratamiento se compact en microsilos de P.V.C. hasta lograr una densidad de 0,5 kg/dm3. Los microsilos fueron abiertos a los 7, 15, 30 y 60 das para analizar pH y concentracin de N-NH3 del forraje. Se observ que la adicin de inoculantes aumenta la acidez y la velocidad con que esta se alcanza respecto del testigo. Tambin se observaron menores concentraciones de N-NH3 en los tratamientos que incluan un inoculante, lo mismo que con el agregado de coadyuvante. Palabras clave: silajes, coadyuvante, inoculante, pH.

SUMMARY
Study of inoculating for fodder silages. II: Effect of coadjutant addition.
The present experiment compared at intervals of 7, 15, 30 and 60 days the effect of two inoculants and a coadjutant on the acidity and quality of the process of fermentation of microsilages under anaerobiosis of forages (alfalfa and autochthonous barley). The addition of the inoculants increased the acidity and produced a minor concentration of N-NH3 in the treatments that included an inoculant. The same occurred on adding the coadjutant. Key words: silages, coadjutant, inoculant, acidity.

1.- Universidad Nacional de Lans, 29 de Septiembre 3901. (1826) Lans, provincia de Buenos Aires, tel.: (011) 6322-9200 int. 105, email: mgiraudo@unla.edu.ar 2.- NutriWorld Consultora. Manuscrito recibido el 20 de marzo de 2008 y aceptado para su publicacin el 9 de septiembre de 2008.

F. Vicente et al.

INTRODUCCIN
Los forrajes, como por ejemplo las gramneas de pastoreo, alfalfa, maz y sorgo, son comnmente conservados en silaje como una de las formas de preservar sus cualidades nutritivas en la alimentacin del ganado. Los principios de conservacin del forraje mediante el ensilado es la reduccin del pH por efecto de la anaerobiosis lctica (Driehuis et al., 1999). El proceso de ensilado de forrajes de diferentes especies y estadios vegetativos puede mejorarse mediante el agregado de inoculantes que ayudan en los procesos fermentativos. La mayora de estos inoculantes contienen bacterias homofermentativas de tipo lcticas y suplementos de diferentes composiciones para que las mismas garanticen velocidad y eficiencia en la fermentacin (Ramrez, 1999). Cada inoculante generalmente contiene una o ms cepas de Lactobacillus plantarum y otras especies de bacterias lcticas como son los gneros Pediococcus o Streptococcus. Estas bacterias crecen rpidamente bajo una gran variedad de condiciones y producen principalmente cido lctico cuando se multiplican usando los azcares agregados o los propios de la pastura (Ramrez, 1999). Los inoculantes microbianos son aplicados a los forrajes al momento de ensilar para acelerar el descenso del pH durante la etapa inicial de fermentacin, su protena por disminucin de la protelisis y desaminacin inhibiendo la fermentacin butrica (Seale 1986), de este modo lograr medio anaerbico cido en el cual el forraje se conserva. La variacin en la concentracin de protones (pH) es un indicador de vital relevancia en el proceso de conservacin de los

forrajes ensilados, debido a que es una de las transformaciones ms radicales que aparecen durante los procesos fermentativos y tiene estrecha relacin con los procesos conservativos. Es necesario que el descenso del pH sea lo ms rpido posible para garantizar un hbitat desfavorable para los clostrdium, reduciendo la aerobiosis en el medio y evitando as la protelisis del forraje ensilado y la proliferacin de microorganismos indeseables durante el proceso (Pezo, 1981; Muck, 1988). En este sentido, el agregado de azcares solubles, buffers y otras sustancias (Coadyuvantes) mejoran la accin de las bacterias homofermentativas y el equilibrio de las reacciones bioqumicas iniciales tanto en los procesos de fermentacin como en la posterior conservacin. La presencia de amonaco en los ensilajes es un ndice del catabolismo (proteolisis) de las sustancias nitrogenadas, principalmente protenas. En los ensilajes bien conservados se considera como ptima una concentracin menor del 7% de nitrgeno amoniacal como porcentaje del nitrgeno total (Ojeda et al., 1991). En base a lo anterior, la medicin del pH y la concentracin del nitrgeno amoniacal en relacin al nitrgeno total (protena bruta), permite comparar forrajes ensilados con la adicin de inoculantes y/o el efecto del agregado de coadyuvantes. Al mismo tiempo comparar la calidad de la pastura obtenida despus de la fermentacin (calidad en la conservacin). El objetivo del presente estudio fue evaluar el comportamiento de un inoculante en vas de desarrollo que se esta efectuando en la UNLa (Universidad Nacional de Lans) comparndolo con inoculantes comerciales, y el efecto del agregado de un coadyuvante sobre ensilados de pasturas base alfalfa.

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Estudio de la aplicacin de inoculantes

MATERIALES Y MTODOS
El ensayo se realiz durante el mes de abril del 2006. El forraje a ensilar se obtuvo de una pastura proveniente de un ensayo de evaluacin de forrajeras del campo experimental de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Lomas de Zamora (FCA-UNLZ), ubicado en Vicente Casares, Argentina. La pastura estaba compuesta por un 80% de alfalfa (Medicago sativa) en estado vegetativo tardo y un 20% de cebadilla criolla (Bromus catharticus, Vahl) mediante cuadrado de corte y evaluacin botnica. Para obtener el material a ensilar, la pastura fue cortada mecnicamente con una motoguadaa simulando el proceso que se realiza a campo. El material obtenido fue previamente oreado al aire libre durante 3 horas, luego cosechado en bolsas ad hoc e inmediatamente trasladado al laboratorio para ser ensilado y analizado. Entre la cosecha del material oreado y el momento del ensilado en el laboratorio transcurrieron menos de 2 horas. El forraje cosechado (60Kg. aproximadamente) fue homogneamente mezclado y dividido en 5 partes iguales. Cada parte fue asignada a uno de los siguientes tratamientos: T1: Testigo (control) adicin de agua destilada mediante aspersin a razn de 16mL/ kg de forraje, con el fin de lograr igual humedad en todas las variables a determinar. T2: Adicin de un inoculante en desarrollo (UNLa)* mediante aspersin a razn de 16 ml/kg de forraje . Solucin compuesta por 5 mL de inoculante y 11 mL de agua destilada. T3: Adicin de un inoculante comercial** mediante aspersin a razn de 16 mL/kg de forraje de una solucin compuesta por 4mL de solucin madre segn especificaciones del fabricante (2,5g de inoculante por litro de agua) y 12mL de agua destilada.

T4: Adicin del inoculante en desarrollo (Unla) y un coadyuvante comercial*** mediante aspersin de 16mL/kg de forraje de una solucin compuesta por 5 mL de inoculante, 7 mL de agua destilada y 4 ml de coadyuvante. T5: Adicin de un inoculante comercial** mediante aspersin a razn de 16 mL/kg de forraje de una solucin compuesta por 4mL de solucin madre segn especificaciones del fabricante (2,5g de inoculante por litro de agua), 4mL de coadyuvante comercial *** y 8mL de agua destilada. (*) Inoculante UNLa: compuesto por Lactobacillus plantarum, Pediococcus acidilactici, y dos diferentes Streptococcus spp. (Vicente et al.) (**) Sill-All Water Soluble (Alltech Biotechnology S.A) (***) Nutrisilaje (Nutriworld-divisin biotecnologa) Para el proceso de ensilado en laboratorio se utilizaron microsilos fabricados en tubos de PVC de 11cm de dimetro por 20cm de alto con tapas del mismo material, con un peso (vaco) de 350g. El material obtenido en cada uno de los tratamientos se ensil mediante compactacin mecnica hasta que cada microsilo pesara unos 1350g (aproximadamente se compactaron 1000g de forraje en cada microsilo), logrando as una densidad uniforme en todo el material de 0,5 kg/dm3 (similar a la obtenida a campo). Se efectuaron 4 microsilos por cada tratamiento. Previamente a ello, se tom una muestra de forraje cosechado para su evaluacin fisi- coqumica (da 0). Luego de compactar el material tratado hasta la densidad deseada se procedi al sellado eficiente de los microsilos con cinta adhesiva plstica para asegurar anaerobiosis. Los microsilos fueron almacenados a temperatura ambiente en rea oscura hasta la evaluacin. Los micro-silos fueron abiertos a los das 7,15, 30 y 60 de iniciado el experimento.
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F. Vicente et al.

Los cambios en la acidez fueron determinados por medicin de pH mientras, que la calidad de la conservacin fue evaluada mediante la determinacin del nitrgeno amoniacal (N-NH3). Los valores de pH fueron obtenidos con pehachmetro (Polaris) en dilucin acuosa del material ensilado en la relacin 1:2 a los 0; 7; 15; 30 y 60 das. Se muestran en el Cuadro 1. Los valores de nitrgeno amoniacal fueron determinados por el mtodo de destilacin y valoracin cido-base del amoniaco a los 0; 7; 15 y 30 das. Se muestran en el Cuadro 2.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Los cambios de acidez observados entre los tratamientos (efecto del inoculante y/o el efecto del agregado de coadyuvante) se muestran en el Cuadro 1. La calidad de conservacin del forraje puede observarse en el Cuadro 2 (concentracin de N-NH3).

La figura 1 muestra los valores de pH del testigo conjuntamente con el promedio de valores del inoculante UNLa y el promedio de valores del inoculante comercial. Las muestras fueron agrupadas de acuerdo al tipo de inoculante. En este caso se vio claramente que, tanto los ensilados tratados como el material testigo, aumentaron la acidez a valores de pH menores a 4,5 en los primeros 25 das, siendo los valores del inoculante UNLa un poco menores que el inoculante comercial ensayado, aunque probablemente estas diferencias carezcan de significado estadstico. A los 60 das, el inoculante UNLa mantuvo los valores mas bajos de acidez (pH=4,00) indicando una clara persistencia en relacin al pH del testigo y del otro inoculante (pH>4,00 en ambos casos). La figura 2 muestra los valores de N-NH3 del testigo, conjuntamente con valores promedio del inoculante UNLa y del inoculante comercial. Las muestras fueron agrupadas de acuerdo al inoculante utilizado. Se ob-

Cuadro 1.- Valores de pH en funcin del tiempo para cada tratamiento

Das 0 7 15 30 60 T1 5,89 4,96 4,10 3,97 4,37 T2 5,89 4,76 4,11 4,25 3,99 T3 5,79 4,84 4,24 4,28 4,60 T4 5,89 4,50 3,90 3,98 3,86 T5 5,84 4,64 4,48 4,01 3,99

T1: Testigo; T2: inoculante UNLa; T3: inoculante comercial; T4: inoculante UNLa + coadyuvante; y T5: inoculante comercial + coadyuvante.

Cuadro 2.- Valores de N-NH3 , mg/100g, en funcin del tiempo para cada tratamiento

Das 0 7 15 30

T1 350,00 381,60 458,30 727,30

T2 257,00 376,10 484,10 467,00

T3 325,50 471,00 424,60 568,10

T4 335,30 416,10 458,80 404,40

T5 346,80 459,70 568,10 493,90

T1: Testigo; T2: inoculante UNLa; T3: inoculante comercial; T4: inoculante UNLa + coadyuvante; y T5: inoculante comercial + coadyuvante

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serv que todas las muestras inoculadas tuvieron, a partir de los 15 das, una concentracin de N-NH3 menor que el testigo no inoculado, lo que indicara menor protelisis. Nuevamente a los 30 das de ensilado, el material tratado con inoculante UNLa tuvo menor concentracin de N-NH3 que el material tratado con inoculante comercial. Fue notable que el testigo a los 30 das de ensilado mostr valores de 750 mg de N-NH3/100 gr. de materia seca lo que indica que, a pesar de mantener niveles aceptables de acidez, la protelisis se produca igual. Las figuras 3 y 4 muestran el efecto del agregado de un coadyuvante sobre la acidez (pH) y el nitrgeno amoniacal en las muestras tratadas. La figura 3 promedia los

valores de pH de acuerdo al uso del coadyuvante. En el mismo se muestra claramente que el pH de los silos inoculados se mantuvo ms bajo a partir de los 60 das de agregado del coadyuvante. La figura 4 describe en funcin del tiempo, la concentracin de N-NH3 por el uso de un coadyuvante. En este caso, tanto los materiales tratados con coadyuvante como los no tratados, incluyendo al testigo, mostraron comportamientos similares hasta los 30 das (el testigo indic una diferencia marcada), alcanzando concentraciones de hasta 750mg N-NH 3/100gr materia seca, en relacin a los silos inoculados con y sin coadyuvante. El coadyuvante aceler el crecimiento de las bacterias lcticas lo que fue verificado por el descenso del pH.

 

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Inoculante Comercial

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Fig. 1: Efecto del inoculante sobre el pH en funcin del tiempo.

Fig. 2: Efecto del inoculante sobre el N-NH3 en funcin del tiempo. | 71

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F. Vicente et al.
6,00


5,50





5,00

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4,50

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4,00


3,50 0 7 15 30 60

    

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c/coadyuvante

s/coadyuvante

testigo

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VFRDG\XYDQWH

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Fig. 3: Efecto del coadyuvante sobre el pH en funcin del tiempo.

Fig.3: Efecto del coadyuvante sobre el N-NH3 en funcin del tiempo.

CONCLUSIONES
No se presentan los datos fisicoqumicos del material ensilado. Los datos aportados en los cuadros y figuras 1 y 2 mostraron que la adicin de inoculantes mejor la acidez (pH) del silaje de pasturas base alfalfa, con una persistencia hasta los 60 das. El inoculante desarrollado por UNLa parecera producir pH ms bajos y persistentes, aunque no fue demostrado estadsticamente. Con respecto a la concentracin de nitrgeno amoniacal (N-NH3) se observ claramente un efecto del agregado de inoculantes en relacin al material ensilado sin estos aditivos, mostrando una menor protelisis y por lo tanto una mejor conservacin de la fraccin proteica. La determinacin de altos valores de N-NH3 en forrajes ensilados se aso-

ci a una menor disponibilidad proteica y a la existencia de sustancias derivadas irritantes y/o txicas, particularmente cuando superaron el 7% del nitrgeno total inicial (Ojeda et al., 1991). El inoculante UNLa fue el de menor valor a los 30 das porque no sobrepas el 7% de nitrgeno amoniacal con relacin al nitrgeno total. Si se sobrepasa dicho valor, aparecen como componentes de los silajes varias aminas biognicas, principalmente histamina, tiramina y putrescina. En base a los datos observados en los grficos 3 y 4, se puede concluir diciendo que el agregado de coadyuvantes a silos inoculados mejor el comportamiento de ambos inoculantes en relacin al testigo, aunque no se dispuso de un testigo sin inocular, pero tratado con coadyuvante en lugar de agua destilada solamente. El efecto del coadyu-

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vante podra inferirse que es pequeo en los cambios de acidez que en la concentracin de N-NH3. Lamentablemente el tamao de las muestras no result suficiente para una mejor evaluacin estadstica de la interaccin coadyuvante vs. tipo de inoculante, lo cual nos permitira establecer dosis en funcin del tipo de inoculante o bien del tipo de pastura a ensilar. Cabe destacar que los resultados mostraron que el material original tuvo un buen comportamiento en los cambios de acidez an sin el agregado de aditivos. Pero no sucedi lo mismo con los datos obtenidos de N-NH3 , los que alcanzaron valores muy altos mostrando que, si bien el uso de aditivos no influy mucho en la acidez, el uso de coadyuvantes potenci el efecto de los inoculantes estudiados y que, tanto la adicin de inoculantes como de otros coadyuvantes, mejor la calidad de la conservacin del forraje al producir menores concentraciones de N-NH3.

BIBLIOGRAFA
DRIEHUIS, F.; OUDE ELFERINK, S. & SPOELSTRA, S. 1999. Anaerobic lactic acid degradation during ensilage of whole crop maize inoculated with Lactobacillus buchneri inhibits yeast qrowths and improves aerobic stability - Journal of Applied Microbiology, 87, 583-594. MUCK, R. 1988. Factors influencing silage quality and their implications for management. Journal of Dairy Science. 71(11): 2992-3002. OJEDA, F.; CCERES, O. & ESPERANCE, M. 1991. Conservacin de Forrajes. Editorial Pueblo y Educacin. 80p. PEZO, D. 1981. Ensilajes de forrajes tropicales. En: Produccin y Utilizacin de Forrajes en el Trpico. Compendio. Turrialba, C. R., CATIE. p. 141-154 (Serie Materiales de Enseanza n 10). RAMIREZ, E. 1990. Aditivos en la confeccin de silaje - Marca Lquida, 37-40. SEALE, D. R. 1986. Bacterial inoculants as silage additives. Journal of Applied. Bacteriol. Microbiology. 61 (Suppl.): 9S26S. VICENTE, F.; SCOLLO, D.; MORA, V.; GIRAUDO, M.; RAMREZ, E. & RECHIMONT R. 2008. Estudio de inoculantes para el ensilado de forrajes I (en prensa).

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