Cuprins:

Cap. I Introducere
1.1. Zinculelement chimic 1.2 ntrebuinrile zincului 1.3 Combinaiile zincului 1.4 1.5 Produsele zaharoase i grsimilealimente supuse contaminrii Surse de contaminare

Cap. II Contaminarea
2.1. Contaminarea cu zinc a solului, plantelor i animalelor 2.2. Contaminarea alimentelor cu zinc (n special contaminarea produselor zaharoase i a grsimilor). 2.3. Rolul biologic al zincului

Cap. III Limite admise

3.1. Limite admise n sol i plante (furaje) 3.2. Limite admise n produsele alimentare

Cap. IV Metode de determinare

4.1. Uleiuri i grsimi vegetale. Pregtirea probelor n vederea determinrii metalelor (STAS 145/23-71) 4.2. Determinarea zincului din produse dulci (STAS 2213/19-89) 4.3. Alte metode de determinare

Bibliografie

Cap. I INTRODUCERE
1.1 Zincul element chimic
Acum cteva secole, zincul a fost descoperit ca un element distinct, minereul de zinc fiind folosit pentru realizarea unui aliaj mpreun cu cuprul. Un aliaj datnd din 1400-1000 BC a fost gsit n Palestina. Un aliaj coninnd 87% zinc a fost gsit n ruinele preistorice din Transilvania. Aliajul de zinc i cupru a fost descoperit aparent n Cipru i a fost folosit mai trziu de ctre romani. Zincul metalic a fost produs n secolul XIII n India prin reducerea carbonatului de zinc cu substane organice precum lna. Metalul a fost redescoperit mai trziu n Europa. William Champion a dezvoltat industria zincului n Bristol (Anglia) n anul 1740. alte industrii s-au stabilizat mai trziu n Belgia i Siria. n toamna anului 1803, englezul John Dalton a fost n stare s explice rezultatele ctorva studii, presupunnd c materia e format din atomi i c toi acetia se pot combina ntre ei.(11.4) Simbolul folosit pentru zinc de ctre Dalton este prezentat n continuare: Element: zinc Simbol: Zn Numr atomic Z: 30 nveli electronic (Ar)3d104s2 Punct de temperatur (C): 420 Punct de fierbere (C): 906 Stri de oxidare + Zincul este un metal cenuiu-albstrui. Luciul iniial intens dispare la aer, prin formarea unui strat de oxid care mpiedic naintarea oxidrii. Zincul este destul de casant la temperatura camerei, devine ns maleabil ntre 100-150C, aa c poate fi laminat n form de foi. Peste 200C este din nou att de casant nct poate fi pulverizat n mojar. Duritatea

este mic (2,5). Reeaua cristalin a zincului este hexagonal. Rcit la temperaturi foarte joase (0,79K) devine supraconductor. nclzit la aer, zincul arde cu flacr verde-albstr, dnd ZnO. La temperatur nalt, zincul descompune vaporii de ap i bioxidul de carbon, trecnd, de asemenea n ZnO. Cu halogenii, n prezena umezelii, zincul reacioneaz chiar la rece, de asemenea cu hidrogenul sulfurat, care formeaz ns numai un strat insolubil, protector de ZnS. Un amestec de pulbere de Zn cu pulbere de sulf reacioneaz cu degajare mare de cldur i lumin, cnd este aprins, dnd ZnS. Cu apa Zn nu reacioneaz la rece, potenialul de oxidare fiind ns puternic pozitiv, acest metal se dizolv uor n acizi, dnd ioni Zn2+. De asemenea zincul se dizolv n hidroxizi alcalini, cu degajare de hidrogen, formnd hidroxizincai.

1.2 ntrebuinrile zincului

Zincul metalic se utilizeaz mult, mai ales sub form de tabl. Cantiti mari de zinc servesc pentru acoperirea tablei, a srmei i a evilor de oel, cu un strat protector mpotriva ruginii. Dei se numesc galvanizate, obiectele astfel tratate se obin de obicei, prin cufundare n zinc topit (dup o prealabil curire a suprafeei de oxizi, prin cufundare n acid sulfuric diluat, decapare).Se folosesc mult i obiecte de zinc turnat. n laborator i n industrie, zincul se utilizeaz ca agent reductor.(1)

1.3 Combinaiile zincului

a) Oxidul de zinc-ZnO, se obine industrial sub forma unei pulberi albe prin arderea zincului metalic. Se gsete n natur ca zinchit, colorat roiatic datorit unui coninut de oxid de mangan cu care este izomorf. Sub numele de alb de zinc, oxidul de zinc este cel mai utilizat n vopselele cu ulei. b) Hidroxidul de zinc Zn (OH)2 se depune ca un precipitat alb voluminos, din soluiile srurilor de zinc prin tratarea cu hidroxizii alcalini. c) Halogenurile zincului clorura de zinc ZnCl2 incolor se prepar prin dizolvarea zincului metalic, a oxidului sau a sulfurii de zinc, n acid clorhidric. Prin evaporarea acestor soluii se obine clorura de zinc sub form de granule albe, care se topesc

la 262C i se solidific la rcire dnd o mas translucid. Clorura de zinc se dizolv uor i n alcool. Bromura de zinc, ZnBr2 i iodura de zinc ZnI2 se aseamn mult cu clorura, iar iodura este galben. Fluorura de zinc, ZnF2 este forte greu solubil n ap. d) Cianura de zinc Zn(CN)2 se precipit din soluiile srurilor de zinc prin adugarea de KCN, ca un precipitat alb. e) Sulfura de zinc ZnS alb se gsete cristalizat n natur sub form de blend, mult mai rar de wurt-sit. Sulfura de zinc proaspt precipitat este uor solubil n acizi minerali, cu timpul solubilitatea scade, probabil datorit cristalizrii.(1)

1.4 Produsele zaharoase i grsimi alimente supuse contaminrii

Produsele obinute pe baz de amidon, glucoz zahr, miere, produse zaharoase sau dulciuri, sunt apreciate de cumprtori datorit valorii energetice ridicate i proprietilor psiho-senzoriale de gust, arom , culoare. Consumate n cantiti moderate produsele zaharoase constituie principalul element de atracie (mai ales pentru copii) i determin uneori un consum abuziv de dulciuri cu urmri negative asupra sntii. n aceste cazuri se poate instala obezitatea, suprasolicitarea pancreasului, apariia diabetului, creterea colesterolului, a tensiunii arteriale, formarea cariilor dentare. Grupa produselor zaharoase cuprinde un sentiment larg de alimente caracterizate printr-un coninut mare de zahr, aspect atrgtor, gust dulce i arom plcut. Produsele zaharoase se clasific n: produse de caramelaj, drajeuri, caramele, produse de laborator, ciocolata, halvaua i rahatul. ns ,dulciul cel mai rspndit, preparat pe cale industrial i nelipsit de pe lista alimentelor de toate zilele, nu numai datorit calitilor sale, dar i strii pure n care se conserv foarte bine i poate fi folosit n orice combinaii cum ar fi: ceaiuri, limonade, prjituri, compoturi, dulceuri este zaharoza sau zahrul, cum l numim noi de obicei. Este de asemenea utilizat n mare msur i la conservarea produselor alimentare, n special a celor de fructe, ct i la obinerea produselor zaharoase.(9) Contaminarea zahrului are loc cnd acesta este uscat n usctoare.

Natura ambalajului poate fi, de asemenea, o surs de contaminare cu microorganisme, metale, etc. Astfel, n urma unor studii efectuate, s-a constatat c sacii de iut pot produce o puternic infectare, pe cnd n cazul sacilor de polietilen sau de hrtie, contaminarea este aproape nul. Nerespectarea condiiilor de igien n timpul proceselor de fabricaie, sau de debitare, poate face ca acest produs s devin periculos pentru consumator.(10) Grsimile sunt alimente importante din punct de vedere energetic, deoarece prin ingerarea onor caliti relativ mici, organismul beneficiaz de un numr mare de calorii n comparaie cu alte alimente. n afara ntrebuinrii alimentare a grsimilor, multe ramuri industriale folosesc ca materii prime i auxiliare diferite grsimi. Astfel sunt: industria pielriei, industria produselor cosmetice, a vopselelor, etc Din punct de vedere chimic, grsimile sunt esteri ai glicerinei cu acizi grai, saturai sau nesaturai. Alimentaia bogat n grsimi tari (de bovine, ovine), care au un coninut mare de acizi saturai, face s creasc concentraia de colesterol din snge, iar regimul n care predomin acizii grai nesaturai (uleiul de floarea-soarelui, de porumb, de soia) are efect de reducere a colesterolului. Consumul de grsimi trebuie s fie raional, n raport cu nevoile energetice ale organismului. Abuzul de grsimi duce la mbolnviri(obezitate), iar un coninut redus duce la subalimentaie. n alctuirea meniului, grsimile vegetale trebuie s prezinte 50% din totalul grsimilor pentru persoanele adulte, iar pentru copii i adolesceni produsele de origine animal (unt, produse lactate) pot atinge pn la 85 % din totalul alimentelor. Grsimile se obin din seminele plantelor oleaginoase (floarea-soarelui, soia, rapi dovleac, etc) i din anumite fructe (nuci, arahide etc). Dup consistena lor grsimile se clasific n grsimi vegetale lichide (uleiurile) i grsimi vegetale solide (margarin i ulei comestibil solidificat). Grsimile vegetale se mpart n grsimi vegetale lichide (ulei de floarea-soarelui, de rapi, de dovleac, de porumb, de msline, etc) i grsimi vegetale solide (margarina i uleiul comestibil solidificat). Grsimile alimentare de origine animal cuprind mai multe sortimente: untura de porc, untura de pasre, seul de bovine sau de oaie, untura de pete.

Uleiurile comestibile se ambaleaz n butelii de 1l i 0,5l, capsulate ermetic sau n ambalaje de transport butoaie metalice, cisterne. Dac ambalajele conin urme de zinc, acestea pot ajunge n produse.(9)

1.5 Surse de contaminare

Alimentele se pot ncrca cu cantiti suplimentare din numeroase surse: rezervoare sau recipiente din tabla galvanizat , evi galvanizate, tvi, forme pentru copt aluaturi i alte ustensile confecionate confecionate din tabl galvanizat i substane pesticide cu zinc, etc. Este cert c majoritatea surselor conin zinc n cantitate teoretic optim, dar nu n toate el nu este disponibil biologic. n plante circa 80% din zinc exist n fraciunea care poate fi extras cu etanol. Suplimentarea raiilor cu zinc se poate face fr team de o eventual supradozare, deoarece la majoritatea speciilor doza toxic este mult superioar celei biologice active. Intoxicaia cu zinc este n general rar care tolereaz bine concentraii mari n alimente. O cauz modern a intoxicaiei cu zinc a crei semnificaie etiologic n aceast privin nu trebuie subapreciat este poluarea industrial. Praful i fumul industrial cu coninut de particule pulverulente ale diverselor substane chimice ca: fluor, plumb, beriliu, zinc, cadmiu, cupru, magneziu, nichel, seleniu, stibiu, aerosoli nitrici, aerosoli sulfurici, acid cianhidric, aerosoli mercurici, halogenici, compui aminici, oxid de carbon, sulfat de arsen, etc., se consider a fi periculoase. n fiecare an atmosfera, poart peste 30.000.000 tone de praf. De exemplu, n courile fabricilor de superfosfai se ridic odat cu fumul, diferite gaze, vapori. Dintre aceste gaze, mai importani sunt compuii sulfului (SO2, SO3, SO4, H2S) i compuii fluorului (HFl3). Prin zdrobirea i mcinarea bulgrilor de apatit rezult mult praf cu ncrctur mare de fluor (cca. 3,8%), iar din procesul de prjire a piritelor rezult o cantitate mare de cenu, metalifer, bogat n oxizi de Fe, Cu, Zn, Pb, etc. n majoritatea lor, aceste particule ale elementelor chimice toxice, au dimensiunile sub 1 micron (dispersie nalt), formndu-se n cursul volatilizrii compuilor chimici n prezena aerului. Oxizii au ncrctur electric pozitiv, iar hidroxizii, negativ. n aparatul respirator ar fi reinute numai particulele ncrcate electric. Sunt cazuri cnd n fumul industrial i praful industrial nu predomin un singur element toxic, ci exist un amestec de mai multe elemente toxice, n afar de elementele

considerate inerte, dar care totui viciaz aerul atmosferic prin prezena lor n dauna coninutului de oxigen. Intoxicaia mai poate aprea ca urmare a stocrii alimentelor, mai ales acide (siloz, lapte), n vase zincate, care prin coroziune mbogesc concentraia de zinc n coninut. O surs o reprezint i tabla metalic folosit pentru cutii de diferite dimensiuni pentru conservarea preparatelor alimentare (uleiuri, produse dulci), care trebuie cositorit uniform i continuu, fr puncte sau zone neacoperite de cositor, dup care urmeaz lcuirea. Lacul trebuie s fie aderent att la prelucrarea foilor ct i n timpul procesului tehnic. Cedarea vernisului impurific coninutul alimentar, afectnd mult aspectul comercial i sub raport nutritiv, chiar dac nu prezint semnificaie toxicologic. Recomandri mai deosebite pentru tabla zincat se refer n primul rnd la aderena, uniformitatea i continuitatea zincului i n al doi-lea rnd la meninerea n stare curat i evitarea pstrrii ndelungate a alimentelor n astfel de recipiente. Materialele metalice folosite de obicei ca recipiente (cutii de diverse dimensiuni pentru alimente conservate) pentru a rezista degradrii se supun procesului de cositorire i de lcuire cu amestecuri de rini. Semnificaia toxicologic prezint staniul, zincul, plumbul, etc.(3) Zincul este folosit sub form de aliaj pentru fabricarea unor vase i tacmuri. Mult importan n industria alimentar prezint prezena zincului n alimentele conservate n ambalajele metalice. nnegrirea (marmorarea) feei interne a cutiilor metalice de conserve se explic prin formarea de fier sau staniu, datorit aciunii sulfului pus n libertate de unele alimente n timpul sterilizrii. Sulful este eliberat sub form de hidrogen sulfurat sau de produse de degradare care conin grupe SH. Urmele de zinc ce vin n contact cu produsul alimentar (produse zaharoase i grsimi) imprim acestuia un gust metalic neplcut i totodat altereaz culoaroarea.(4) S-au nregistrat cazuri de intoxicaii cu mere fierte n vase zincate, lapte fiert n vase zincate, alimente prelucrate pe masa acoperit cu tabl zincat preparate de cofetrie meninute n vase zincate, saramuri n vase zincate (galvanizate). Cu ct alimentele sau furajele se menin mai mult timp n vasele zincate, cu att coninutul de zinc va fi mai ridicat.

Zincul este un constituent normal al alimentelor. Excesul poate proveni din numeroase surse: supradozri medicamentoase sau nutriionale, confuzii, fum i vapori de zinc de pe lng fabricile prelucrtoare, vase, tvi, mese i bi de zinc sau galvanizate, insecticide i fungicide cu zinc, lipituri cu clorur de zinc ale cutiilor de conserve, din oxidul de zinc folosit ca pigment la lacurile sulforezistente ale cutiilor, ambalajul de zinc al brnzeturilor, etc. Mai mult zinc se va gsi n alimentele i furajele acide. Multe din materialele i ambalajele de zinc s-au nlocuit cu tabl de oel inoxidabil, mase plastice, etc.(3) O alt surs este fosfura de zinc (Zn3P2, Zintan, Zinc fosfid), se prezint sub form de pulbere grinchis, care conine 15-18% fosfor activ i 70-80% zinc i este foarte solubil n ap. Preparatele n comer conin ntre 60-70% fosfur de zinc i pn la 7% fosfor activ. Mirosul sulfurii de zinc, seamn cu cel al carbidului sau al unei carburi. n contact cu umezeala, aerul i CO2, fosfura se descompune i degaj hidrogen fosforat, astfel c n scurt timp i dispare toxicitatea. Momelile din cereale au 30-35 fosfur de zinc, sunt colorate n rou i nu au miros sau gust. oarecii, popndii i hrciogii mor n cuiburile lor i nu transmit otrava, deoarece sulfura de zinc se descompune n cadavre. Momelile cu cel mult 20 fosfur de zinc se pot prepara i din carne tocat cu pine. Nu se folosesc pentru momeli alimente care fermenteaz uor, ntruct acestea descompun fosfura de zinc. Asemntor este preparatul Hora (Zinc fosfid). Momelile se detoxific cu timpul. Pierderile provocate de roztoare sunt aproape de 20 de ori mai mari dect pagubele produse prin consum. O alt surs reprezint insecticidele organofosforice. Sunt foarte toxice n doze de ordinul miligramelor, iar evoluia intoxicaiei este uneori doar de cteva minute. Dintre insecticidele organofosforice ntlnite n produsele zaharoase amintim Thionazin sau Zinophos a crei limit este 0,1ppm la sfecl de zahr. Cel mai ntlnite produse alimentare contaminate cu zinc sunt: ou, conserve, roii, produse de cofetrie, produse zaharoase, pete, uleiuri, buturi rcoritoare, etc.

Cap. II CONTAMINAREA
2.1 Contaminarea cu zinc a solurilor, a plantelor i animalelor
Sub forma diverilor compui, zincul se gsete att n scoara pmntului ct i n celulele vegetale i animale, fiind un constituent natural i indispensabil vieii. Fabricile de ulei sunt mari consumatoare de ap. n general, fabricile au o alimentare dubl cu ap: din reeaua public i din surse proprii. Apa provine din surse de suprafa sau din surse de adncime.(2) n cazul n care apa trece prin soluri contaminate cu pesticide de zinc sau ali derivai ai zincului, apa ajuns la plant (sfecla de zahr trestia de zahr etc,) duce la contaminarea acesteia, iar aceasta n urma procesului tehnologic poate da natere la produse contaminate. De asemenea, animalele se pot contamina n urma consumului de plante furajere ce conin zinc. La fenomene de ordin toxic se poate ajunge i cnd oligoelementele au fost introduse n cantiti normale, dar s-au inclus n raporturi necorespunztoare ori n combinaii fie cu aciune antagonist (Cu i Mo, I i F, Ca i Zn, Ca i I, As i Se, Mg i Ca etc), fie sinergic (Ca i Fe, Mn i Zn etc) Unele microelemente, chiar n cantiti foarte mici pot fi toxice (plumb, mercur, fluor, seleniu, molibden etc). n majoritatea lor, au efect cumulativ material sau fiziopatologic. Forma acut a intoxicaiei cu microelemente constituie o raritate, dar forma cronic, instalat lent i ocult, este frecvent ntlnit. Ca i n cazul strilor careniale, produsele alimentare de origine animal sau nutreurile pot fi compromise n cazul excesului (intoxicaiilor) de microelemente. Macro i microelementele minerale se vor suplimenta n hrana animalelor doar cnd prin controlul periodic al raiei se constat un deficit privind unul sau mai multe elemente. Este necesar de cunoscut compoziia solurilor i posibilitile de ncrctur a plantelor de pe soluri n astfel de elemente chimice. Este cunoscut c terenurile nisipoase, mltinoase, podzolice sunt n general srace n microelemente, iar Cmpia Dunrii e srac n cobalt. Chimizarea solului (ngrminte chimice, insectofungicide etc) schimb i compoziia

chimic a plantelor, faptul putnd uneori prezenta un pericol destul de serios. La fel pot interveni irigaia, clima, timpul de recoltare, modul de conservare. Totodat se va ine seama de specia de animal, vrsta, profilul de producie etc., ntruct fiecare categorie necesit anumite elemente chimice. De obicei, macro-i microelementele de provenien industrial se introduc n diverse preparate furajere, mai cu seam n nutreurile combinate, form sub care pot interveni ca factori nocivi asupra organismului animal. Astfel, nutreul combinat poate conine n limite normale elementele chimice, dar s fie greit etichetat i deci s se foloseasc la alt categorie de animale dect cea prevzut, fapt ce reprezint una din cauzele principale ale mortalitii ridicate. Alteori, se poate ca nutreul combinat s nu fie bine omogenizat i astfel elementele chimice s se afle n cantiti mari doar n anumite pri ale furajului. Sunt cazuri cnd, datorit umiditii ridicate i adaosului neuniform al grsimilor, elementele chimice nu difuzeaz n mod uniform n nutre, ci conglomereaz. Acest fapt constituie un grav pericol. Este strict interzis a se folosi nutreuri n amestecuri diverse, fr a se respecta o reet tiinific, ntocmit de ctre un laborator competent. Folosirea diverselor deeuri, ca zgur manganic, zgur cupric, reziduuri de la industria metalurgic, siderurgic i carbonifer, culturi de ciuperci cu adaosuri de macro-i microelemente (Fe, Zn, Mn, Mg, Co, Ca, P, Mo, Cu, Cr, K etc.) sub form ca atare, pulbere sau cenu, diverse preparate sub form de pulbere sau capsule, reziduuri de antibiotice, ape reziduale, nmoluri, cenu, deeuri de antibiotice, pirite, ape de sonde etc., precum i diverse sruri (sulfai, carbonai i cloruri), acizi, preparate complexe de microelemente (brichete de lins, sare iodat etc.) n nutreuri sau ca ngrminte pentru solul pe care se cultiv plantele furajere, se va face numai cu avizul laboratorului. Limitele admisibile la unele animale: bovine 500-900 ppm, la ovine 500-1000 ppm, la psri 3000 ppm (Mai, 1979). Consumul raiei este redus, datorit gustului neplcut cnd zincul se gsete 0,2% in furaje la porcine, 0,15% la miei i peste 0,17% la viei. Gustul apei este modificat la un coninut de 5 mg/l i apa devine tulbure la 20 mg/l. La nivele mai ridicate s-au observat diminuarea accentuat a apetitului i creterii, hemoragii interne i artrite, anorexie, diaree n alternan cu constipaia, datorit aciunii iritante a Zn etc. Mortalitatea este foarte ridicat la 4000-8000 ppm. La pui i gini, apetitul i creterea scad la circa 3000 ppm. Anemia este dat de utilizarea mai slab a Cu i Fe, n prezena Zn n exces. Zincul ofer protecie n cazul cnd porcii sunt intoxicai cu cupru. n exces, zincul tulbur metabolismul Cu i Fe i, peste cantitatea de 0,5-1 g% n alimente, provoac anemie

10

microcitar hipocrom, oprirea n cretere i moartea, prin diminuarea activitii citocromoxidazei i a catalazei din ficat. Intoxicaia cronic se manifest la tineret prin apetit diminuat, anemie, pierdere n greutatea corporal, deformri articulare, chiopturi, rigiditatea coloanei vertebrale, decubit prelungit etc. Tulburrile se previn prin administrarea de cupru, care ins nu amelioreaz creterea. Aciunea toxic acut se traduce prin iritaii ale esuturilor care vin n contact cu srurile de zinc (pulmon, tub digestiv, conjunctivit etc.), precum i printr-o aciune general, prin afectarea enzimelor cum ar fi fosfatazele sanguine, anhidraza carbonic i catalaza hepatic i renal. Aciunea clorurii i a sulfatului de zinc se aseamn cu cea a sulfatului de cupru. n prezena arsenului, efectul sinergetic este de 3-4 ori mai mare dect simpla nsumare a efectelor pariale. Indirect, prin detritusuri celulare, zincul acioneaz i asupra sistemului nervos. La om, doza mortal de sulfat de zinc se apreciaz la 5-10 g; cea de clorur la 3-2 g, iar doza toxic de oxid de zinc la circa 10 g. La bovine adulte, doza toxic este apreciat la 75 g ZnO, timp de 3-4 zile, iar doza de 527 g ZnCl2 administrat zilnic, 30 zile, nu produce intoxicaie manifestat clinic. S-au nregistrat cazuri de intoxicaii cu mere fierte n vase zincate, alimente prelucrate pe mas acoperit cu tabl zincat, preparate de cofetrie meninute n vase zincate, saramuri n vase zincate, iar la tineretul sugar, cu lapte i zer din vase zincate (galvanizate). Cu ct alimentele sau furajele se menin mai mult timp n vase zincate, cu att coninutul n zinc, va fi mai ridicat.(3)

2.2 Contaminarea cu zinc a produselor alimentare

Din punct de vedere nutriional, metalele care se gsesc n produsele alimentare, sunt metale cu rol fiziologic bine determinat, numite eseniale sau biometale, respectiv metale neeseniale. Din prima categorie fac parte: sodiul, potasiul, calciul, magneziul, fierul, cuprul, zincul, manganul, cobaltul, seleniul. Lipsa, sau chiar numai insuficienta lor, din alimentaia omului determin, dup o perioad de timp, dereglri ale proceselor metabolice i apariia unor boli careniale. Metalele neeseniale sunt: plumbul, mercurul, aluminiul, staniul, nichelul, cadmiul, cromul, argintul, s.a. Prezenta acestora n alimente apare ca o contaminare. Cnd cantitile

11

ingerate zilnic, din aceste metale, sunt mai mici dect posibilitile normale de eliminare, ele se comport ca nite impurificatori chimici, care traverseaz organismul uman, fr s produc perturbri biochimice importante. Pentru ambele categorii de metale, ns, creterea concentraiei n alimente, peste anumite niveluri, poate exercita efecte nocive asupra consumatorilor unor astfel de produse (efectul duntor al metalelor neeseniale fiind considerabil mai mare dect cel datorat metalelor eseniale n concentraii mai mari dect cele necesare vieii). Metalele cu potenial toxic ajung n alimente pe ci multiple, odat cu materiile prime, n urma tratamentelor aplicate n agricultura, n timpul prelucrrii, depozitarii si transportului, din materiale auxiliare si din apa folosita n procesele tehnologice.(11.3) n alimentaie, uleiurile i grsimile vegetale se folosesc ca atare sau sub form de uleiuri hidrogenate i margarin pentru gtit, precum i la prepararea unor produse de patiserie (biscuii, creme). Dac aceste i grsimi sunt contaminate cu zinc, i produsele obinute n urma tehnologiilor aplicate se pot contamina i apoi ajunge la consumator unde poate produce diferite tulburri.(2) Gravitatea efectului toxic este dependena de natura, cantitatea i forma chimic sub care se gsete metalul n produsul alimentar, de ponderea pe care alimentul contaminat o deine n structura meniurilor, de rezistenta organismului, de efectul sinergic sau antagonic al altor contaminani chimici, de ali factori. Unele metale ncep s-i exercite aciunea lor duntoare abia dup ce s-au acumulat n organism ntr-o cantitate suficient. Ele sunt reinute n esuturi si, fiecare cantitate nou de substana ptruns n organism, se adaug la cea veche, iar la un moment dat, cnd s-a acumulat o cantitate suficient, se declaneaz boala. Acest efect cumulativ este ntlnit la plumb, mercur, cadmiu. Un alt mod de acionare al metalelor toxice este prin acumularea efectului lor, care se manifest prin aceea c, acionnd mereu pe aceleai esuturi, la un moment dat acestea devin foarte sensibile i ptrunderea, chiar a unei doze foarte mici de substan toxic, declaneaz procesul de intoxicaie. Folosirea metodelor moderne de determinare a metalelor toxice, de mare sensibilitate, a permis decelarea acestora n majoritatea produselor alimentare, stabilindu-se o strns corelaie ntre poluarea mediului i prezenta metalelor grele n alimente.(11.3)

12

2.3 Rolul biologic al zincului

Dup fier, zincul este cel mai abundent oligoelement esenial n organism. Cantitatea total din corpul uman adult este apreciat la aproximativ 1,8 g. Zincul n organism este procurat din unele alimente vegetale i animale. Cele mai importante sunt: carne (n special ficatul), oule, laptele, boabele de cereale smna de dovleac i drojdia de bere. Fructele i legumele reprezint o surs secundar de zinc. Trebuie subliniat faptul c prezena n alimentaie a unor cantiti crescute de calciu sau fibre vegetale mpiedic absorbia zincului, chiar dac hrana conine concentraii mari ale acestui mineral. Aportul de zinc este n jur de 15 mg/zi, cantitate apreciat mai mult dect suficient, innd seama de necesarul zilnic se ridic la 8-10 mg. Numai pn la din cantitatea asigurat de alimente este absorbit. Ptruns n organism, zincul particip la desfurarea a numeroase procese fiziologice, prezena sa fiind obligatorie pentru buna funcionare a multor esuturi i organe. Se cunosc pn n prezent peste 80 de enzime care au n constituia lor acest mineral. Se pare c nici o cale metabolic important nu se poate desfura n absena acestor enzime. El acioneaz n special la nivelul rinichiului, ficatului, vaselor, testiculelor i globulelor roii. Zincul intr, de asemenea, n constituia enzimelor care favorizeaz digestia, absorbia i sinteza proteinelor, oxidarea alcoolului i formarea ct i degradarea depozitelor de glucoz, maturarea osoas, funcionarea sistemului vascular. Rolul biologic al zincului nu se limiteaz numai la participarea sa n activitii enzimatice, ci el intervine i n alte procese, mai cu seam n cele hormonale. Spre exemplu, alterarea prii endocrine a pancreasului - responsabil de apariia diabetului zaharat se nsoete de o reducere cu 50% a concentraiei de zinc fa de persoanele sntoase. Fr a constitui o soluie n tratamentul diabetului zaharat, acest efect nu este neglijat, motivnd asigurarea necesarului optim de zinc din alimentaie. Suplimentarea de zinc restabilete, relativ rapid, pofta de mncare. Zincul are un rol fundamental n aprarea imunitar, favoriznd lupta organismului mpotriva agresiunii strine. El are de asemenea o aciune protectoare mpotriva fenomenului de mbtrnire, mpiedicnd aciunea de uzur a unor substane toxice asupra echipamentului biologic celular.

13

n cazul n care apare deficitul de zinc, echilibrul funciilor tisulare se altereaz evident. Acest deficit apare n diferite ocazii: absorbie intestinal sczut alimentaie prin perfuzare exclusiv de glucoz, infecii bacteriene, boli renale, sarcin, consumul unor medicamente ca contraceptivele i cortizonul. De asemenea a fost constatat n anumite boli: hepatit viral, ciroz generat de alcoolism, insuficien pancreatic, uremie, n terapia oral cu penicilin, giardioz, etc Manifestrile carenei de zinc sunt variate: lipsa ciclic a poftei de mncare, ntrzierea creterii n nlime i n greutate, anemie, cderea prului, modificri ale unghiilor, scderea sensibilitii gustative i olfactive, prelungirea perioadelor de cicatrizare a rnilor. Excesul de zinc din organism se ntlnete rareori la om, care, n general tolereaz bine concentraiile mari. ntre necesarul zilnic i dozele zilnice este o limit larg. O cauz posibil de intoxicaie este poluarea industrial sau consumul de lapte pstrat n vase de zinc, care prin coroziune se mbogete cu acest mineral. Se pare c persoanele tinere, au o sensibilitate mai mare la dozele crescute de zinc, dect cele n vrst. (4) Zincul este un microelement esenial i pentru organismul omului. La un adult de 70 kg se afl circa 1,4-3,0 g Zn. S-a decelat, n cantiti mai nsemnate, n ficat i muchi (50-55 mg/g), n glanda suprarenal (12-17 mg/g), n prostat (cca.10 mg/g). Este stabilizator al structurii moleculare a lipoproteinelor din membrana celular. Particip la biosinteza i biodegradarea glucidelor, lipidelor, protidelor i acizilor nucleici. Un rol esenial joac n transferul polinucleotidelor i n mecanismele transmiterii informaiei genetice. Bolnavii contaminai cu produse ce conin zinc prezint grea, senzaie de vom, accelerarea tranzitului intestinal, dureri abdominale, frisoane, febr, astenie marcat. n formele mai uoare, dar prelungite ale contaminrii organismului cu zinc se constat o cretere a colesterolului i agravarea fenomenului de ateroscleroz. De asemenea, fiind prezent n doze ridicate ntr-un regim alimentar, poate produce efecte antagoniste asupra altor bioelemente i, n consecin, deficite secundare n cupru, fier, cadmiu, care se nsoesc n anemie i osteoporoz. Tratamentul excesului de zinc este relativ simplu, constnd n administrarea de medicamente, care, cuplndu-se cu zincul, favorizeaz eliminarea acestuia din organism.

14

Dintre afeciunile cutanate, care beneficiaz cu tratamentul cu zinc, menionm unele micoze, eczeme, eroziuni suprainfectate, etc. Zincul, datorit funciilor sale multiple i dificultilor de asimilaie, care se ntlnesc prin consumul unor alimente uzuale, a reprezentat subiectul a numeroase cercetri privind gsirea cilor de mbogire a hranei cu acest mineral. S-a constatat c zincul din pinea neagr, graham este mai greu absorbit dect cel din pinea alb. Se apreciaz c mbogirea alimentelor cu zinc nu ridic sensibil costul de vnzare, avnd astfel o larg accesibilitate n rndul populaiei.(6)

Cap. III LIMITE ADMISE

3.1 Limite admise n sol i plante

15

Zincul este esenial pentru creterea plantelor pentru c el controleaz sinteza acidului indoleacetic care regleaz creterea plantelor. Zincul este de asemenea activ n multe reacii enzimatice i este necesar pentru sintetizarea clorofilei i formarea carbohidratului. Deficiena zincului variaz de la an la an. Umezeala, frigul, vremea rea din timpul sezoanelor determin deficiena. Deficiena zincului n unele cereale este remarcat n iunie, dar deficiena dispare dup uscarea solurilor. Civa compui ai zincului pot fi folosii pentru a-i corecta deficiena. Sulfatul de zinc, oxidul de zinc, clorura de zinc, sulfitul i carbonatul de zinc sunt comune cu srurile organice. Compuii organici precum chelaii de zinc (zinc EDTA i zinc NTA) sunt de cinci ori mai periculoi dect srurile echivalente de zinc. Cteva fungicide care conin zinc pot fi folosite n tratamente. Aceste fungicide pot corecta deficiena zincului.(5) Limite n sol Elemente chimice care polueaz solul sunt, n cea mai mare parte, de natur organic. Importana lor este multipl, ele servesc ca suport nutritiv pentru germeni, dar i pentru insecte i roztoare, sufer procese de descompunere i eliberare de gaze toxice i mirositoare care pot fi antrenate n sursele de ap, pe care le degradeaz. Cele mai importante elemente chimice poluante ale solului sunt ns substanele zoxice, prezente aproape exclusiv n reziduurile industriale. Mai frecvente sunt ntlnite metalele, metaloizii, pesticidele, coloranii. (5) Coninutul de zinc mai mic de 20 p.p.m. reprezint o deficien. Valorile normale sunt de 30-100 p.p.m.; valorile peste 300 p.p.m. pot fi considerate excesive sau toxice. Limitele cele mai ridicate n sol variaz ntre 100i 300 p.p.m.

Limite n plante Pentru plante, deficitul de zinc este reprezentat de valori mai mici de 20 p.p.m., suficient este ntre 25 i 150 p.p.m., iar toxic este peste 300 p.p.m. deoarece tolerana toxicitii zincului variaz, nivelele specifice solurilor extractive nu au fost stabilizate.(11.1) Concentraia de zinc n unele furaje (ppm):

16

Furajul Sfecla de zahr Sfecl furajer Semine leguminoase Fin de carne i oase Fin de pete

Ppm 26 27 35-55 100 86

3.2 Limite admise n produsele alimentare

Zincul este un bioelement necesar, att regnului vegetal ct i animal. Aportul alimentar normal de zinc pentru un adult este de 10-20 mg/zi. Normele Ministerului Sntii prevd urmtoarele limite pentru zinc (mg/kg): 5 pentru lapte, unt, margarin; 10 pentru suc de roii, produse de cofetrii; 20 n ou, conserve de legume n oet sau bulion; 30 n supe concentrate, pasta de roii; 50 n carne, pete, mezeluri, conserve i semiconserve de pete, carne. Normele Ministerului Sntii prevd urmtoarele limite maxime admisibile (mg/kg): 25 pentru produse de caramelaj, drajeuri, halva, cacao; 50 pentru buturi alcoolice naturale, buturi rcoritoare, produse pentru copii; 150 pentru conserve de carne, legume n ap sau oet, compoturi, nectar.(11.3) Tolerane admise n Rusia: 5 ppm n lapte, buturi, ulei i suc de roii; 10 ppm n conserve dietetice pentru copii, dulciuri; 20 ppm n conserve de fasole, paste de roii i fasole. Tolerane admise n Polonia: 50 ppm n conserve de carne i pete, 20 ppm n gemuri i tomate concentrate, 10 ppm n bulion de roii, 5 ppm n sucuri i siropuri vegetale, magiunuri, etc. Tolerane admise n Ungaria: 50 ppm n produse i conserve de carne, ficat i pete; 200 ppm n produse vegetale; 10 ppm n sucuri de fructe. n S.U.A s-a precizat tolerana zincului din Zineb doar la fructe de 7 ppm(4). Prezena metalelor grele n alimente precum i n materiile prime folosite n prepararea acestora, peste limitele admise, constituie un factor de risc pentru sntatea consumatorilor. Controlul alimentelor din acest punct de vedere se face de ctre laboratoare acreditate, n condiiile stabilite de sistemul calitii n conformitate cu SREN. 45001.(11.3)

Cap. IV METODE DE DETERMINARE

17

4.1. STANDARD DE STAT(ediie special) STAS 145/23-72

Uleiuri i grsimi vegetale. Pregtirea probelor n vederea determinrii metalelor

Prezentul standard stabilete metoda de pregtire a probelor de uleiuri vegetale n vederea determinrii metalelor. 1) Principiul metodei Metalele, care se gsesc n uleiuri vegetale sub form de sruri ale acizilor grai superiori i ale acizilor anorganici, se extrag prin agitare la cald, cu acid clorhidric diluat. 2) Aparatur: agitator mecanic plnie de separare de 250 cm3, n form de par, cu tij scurt (8-10 cm)

3) Reactivi - Acid clorhidric d=1,18-1,19 (cu coninut de maximum 0,00001% Cu, Zn, Cd, sau Pb), diluat 3+2. - Ap distilat sau de puritate echivalent (n text-ap)

4) Modul de lucru 4.1) n plnia de separare se introduc 100g ulei din proba luat conform standardelor sau normelor interne, se adaug 15 cm3 HCl, se nchide cu dopul i se agit dou minute cu agitatorul Plnia cu emulsia se aduce n poziie orizontal, se stabilete uor dopul i se scufund parial ntr-o baie de ap adus la fierbere, tija rmnnd n afara bii. Se ine pe baia de ap 15 minute. Apoi se agit cu agitatorul 5 minute. Se aeaz din nou plnia pe baia de ap, n aceeai poziia i se menine 30-45 minute, pn ce dispare emisia i uleiul devine limpede.

18

Se aeaz apoi plnia ntr-un stativ cu inel i se trece imediat faza acid inferioar prin hrtie de filtru cantitativ cu porozitate medie, dubl, prinznd filtratul ntr-un balon cotat de 100 cm3 i avnd grij s nu trec pe hrtiile de filtru picturi de ulei. n plnie se adaug 10-15 cm3 ap i fr agitare se trece faza apoas prin hrtiile de filtru n balonul cotat. 4.2) Se repet imediat nc de dou ori extracia, cu cte 10 cm3 acid clorhidric i ap, procednd conform punctului 4.1.) i pierznd filtratele n acelai balon cotat. 4.3) Se adaug n plnie 20 cm3 ap fierbinte (peste 90C) i se agit cu agitatorul. Se aeaz plnia pe baia de ap adus la fierbere, n poziie orizontal i se menine 30 minute. Apoi plnia se aeaz n stativ i se trece faza apoas prin hrtiile de filtru, prinzndu-se filtratul tot n balonul cotat. Uleiul rmne n plnia de separare sub form de emulsie. 4.4) Se spal hrtiile de filtru cu ap rece, pn ce balonul cotat se umple aproape de semn. Soluia din balon se rcete la temperatura camerei, se aduce la semn cu ap i se omogenizeaz. 4.5) n paralel se pregtete o soluie martor, introducnd 35 cm3 acid clorhidric ntrun balon cotat de 100 cm3, care se aduce la semn cu ap. 4.6) Din soluia obinut conform punctului 4.4.) se pot determina cuprul, plumbul, zincul i cadmiul. Aprobat de Institutul Romn de Standardizare (7) 4.2. STANDARD DE STAT-EDIIE SPECIAL

Determinarea zincului din produse dulci

(STAS 2213/19-89)

1. Generaliti
1.1. Obiect i domeniu de aplicare 1.1.1. Prezentul standard stabilete metodele de determinare a zincului din produse zaharoase (produse de caramelaj, caramele, drajeuri, produse de ciocolat, produse de laborator, glucoz i zahr).

19

1.1.2. Metodele descrise n standard se aplic i la cafea, cacao, semine oleaginoase, boabe de cacao. 1.1.3. Determinarea zincului se face prin: Metoda spectrofotometric cu dializ Metoda spectrometric de absorbie atomic. n caz de litigiu se folosete metoda spectrometric de absorbie fotometric. 1.2. Indicaii generale Reactivii folosii trebuie s fie pentru analiz sau de calitate echivalent lipsii de zinc. Apa trebuie s fie bidistilat sau de puritate echivalent. 1.2.2. Instalaiile de distilare a apei i a solvenilor organici trebuie s aib toate piesele de legtur din sticl borosilicativ. Nu se admite folosirea de dopuri i tuburi de cauciuc. 1.2.3. Sticlria folosit trebuie s fie din sticl borosilicativ. Aceasta se spal cu acid acetic diluat 1+10 cald i acid acetic soluie 3%, apoi de mai multe ori cu ap distilat i n final cu ap bidistilat. n cazul sticlriei noi aceasta se spal cu acid azotic diluat 1+1, acid acetic soluiei 3% i apoi cu ap. Creuzetele i capsulele se spal cu acid azotic diluat 1+5, se fierbe astfel: se introduce acidul acetic n creuzet sau capsul, se acoper cu o sticl de ceas i apoi se aeaz pe baia de ap adus la fierbere unde se menine timp de o or, dup care se spal de mai multe ori cu ap distilat i apoi cu ap bidistilat. 1.2.4. n cazul metodei spectrofotometrice rezistena sticlriei de ditizon se verific nainte de folosire astfel: Plnia de separare de 100cm3 pentru prepararea soluie amoniacale de ditizon i biureta de msurare se vor umple cu soluie amoniacal de ditizon i se las n repaus timp de o or, dup care se ia o poriune din aceast soluie i se agit cu un volum egal de cloroform purificat prin distilare; stratul de cloroform trebuie s rmn incolor. Plnia de separe de 100cm3 pentru extracie se umple cu ditizon soluie 0,02% n toluen i se las n repaus o or, dup care culoarea verde trebuie s rmn neschimbat.

1.2.1.

2. Pregtirea probelor pentru analiz

Proba de produs se mrunete integral, fr separarea umpluturii.

20

3. Metoda spectrofotometric cu ditizon

3.1 Principiul metodei Zincul bivalent (Zn2+) formeaz cu ditizona n toluen, n mediu de citrat, la pH = 9, un complex de culoare roie roz, ditizonatul de zinc, care se extrage n toluen; elementele interferente se complexeaz cu dietilcarbamat de sodiu. Intensitatea culorii complexului format se msoar la spectrofotometru sau la fotocolorimetru; sensibilitatea metodei este de 1g zinc n prob. 3.2 Aparatura folosit: Spectrofotometru sau fotocolorimetru; Plnii de separarea sub form de par de 100cm3, 200cm3, 500cm3, 1000cm3 i 2000cm3 cu dopuri i robinete cu lif i cu tij scurt Baloane cotate de 100cm3, 500cm3 i 1000cm3; Pipete de 1cm3, 5cm3, 10cm3 i 25cm3; Creuzete din cuar sau porelan. (8 10cm);

3.3 Reactivi Citrat de sodiu sau citrat de amoniu, soluii de 0,25m, preparat astfel: a) Citrat de sodiu soluie 0,25m:87g citrat trisodic (Na3C6H5O7 H2O) sau 89,3 (Na3C6H5O7 5 1/2H2O) cntrite cu precizie de 0,01g, se dizolv n 500 cm3 ap iu se introduc cantitativ ntr-un balon cotat de 1000cm 3. se adaug 1cm3 soluie de albastru de timol se neutralizeaz cu hidroxid de amoniu soluie 25% diluat 1+1 (purificat prin distilare), pn la culoarea albastr (pH = 8,5), se completeaz la semn cu ap i se purific.

21

b)

Citrat de amoniu, soluie 0,25m: 65,3g citrat de amoniu tribazic [(NH4)3C6H5O7 H2O] sau 56,5g citrat de amoniu bibazic [(NH4)2HC6H5O7] sau 52,3g citrat de amoniu monobazic [(NH4)HC6H5O7], se cntresc cu precizie de 0,01g i se procedeaz n continuarea ca la aliniatul a.

Acid clorhidric: d = 1,19 i diluat 1+1. Hidroxid de amoniu, soluie 25% diluat 1+1 preparat i purificat. Soluie de splare preparat astfel: 20 cm 3soluie 25 % diluat 1+1 i purificat, se introduc ntr-un balon cotat de 1000 cm3 i se completeaz la semn, cu ap, dup care se trece ntr-un flacon de polietilen. Albastru de timol, soluie 0,1%: se dizolv 0,1 g albastru de timol n 2,15 cm3 hidroxid de sodiu soluie 0,1 N, ntr-un balon cotat de 100 cm3 i se completeaz la semn cu ap. Dietilditiocarbamatul de sodiu, soluie 0,2%, proaspt preparat; soluia se poate pstra maxim 3 zile la ntuneric i la maxim 10C. Dac la preparare, dup agitare energic, soluia prezint particule nedizolvate, se filtreaz prin hrtie de filtru cu porozitate mare. Ditizon (difeniltiocarbazon), soluie 0,02% n cloroform (soluie de rezerv): 100 mg ditizon triturat se trec cantitativ, cu cloroform, ntr-un balon cotat de 500 cm3 , se dizolv prin agitare i se completeaz la semn cu cloroform. Dac soluia obinut are culoare brun datorit prezenei produselor de ozidare sau are culoare roie datorit prezenei ditizonailor de metale, soluia de ditizon 0,02% i cloroform se prepar i se purific. Soluia de ditizon n cloroform se poate pstra la ntuneric i la temperatura de maxim 10C, timp de cel puin 30 zile. Ditizon, soluie amoniacal proaspt preparat: ntr-o plnie de separare se introduce un volum de soluie de ditizon 0,02 % n cloroform i dou volume de ap la care se adaug 0,2 volume de hidroxid de amoniu soluie 25 %, diluat 1+1 i purificat. Se agit 20 secunde i se las n repaus, ferit de lumina solar direct. Dup separarea i limpezirea celor dou faze (cca. 30 minute) se mic plnia pentru deplasarea picturii de cloroform rmas la suprafaa fazei amoniacale, iar faza cloroformic inferioar se trece n recipientul dev recuperare a cloroformului. Faza amoniacal de ditizon, limpede i fr cloroform se trece ntr-o biuret, printr-un filtru de hrtie cu porozitate medie.

22

Soluia amoniacal de ditizon se prepar numai n cantitatea necesar. Aceasta este stabil n biuret, la lumin difuz, maxim 2 ore. Toluenul purificat prin distilare la 110-111C sau toluen recuperat din extractele de ditizonat de Zn, dup dou distilri. Soluia etalon de Zn : a) Soluia etalon de rezerv cu coninut de 100g Zn/cm3 preparat prin una din urmtoarele metode: 0,1 g zinc metalic, cntrit cu precizie de 0,0001 g, se trec cantitativ ntr-un balon cotat de 1000 cm3 i se dizolv n 5 cm3 acid clorhidric diluat 1+1, dup care se completeaz la semn cu ap i se omogenizeaz. 0,2199 g sulfat de zinc(ZnSO4 7 H2O) se trec cantitativ, cu ap, ntr-un balon cotat de 500 cm3, se dizolv, se aciduleaz cu o pictur de acid sulfuric d = 1,83 - 1,84, se completeaz pn la semn cu ap i se omogenizeaz. b) Soluia etalon de lucru cu coninut de 1g Zn/cm3: 5 cm3 soluie de rezerv se introduc ntr-un balon cotat de 500 cm3, se aciduleaz cu o pictur de acid sulfuric d=10-,83-1,84, se completeaz pn la semn cu ap i se omogenizeaz. Se folosete proaspt preparat.

Observaii
1. naintea unei determinri sau a unei serii de determinri, se face verificarea global a puritii reactivilor, efectund o determinare martor, nlocuind proba de analizat cu 10 cm3 . Absorbana obinut trebuie s nu depeasc valoarea de 0,100; n cazul n care depete aceast absorban se face o nou purificare a reactivilor. 2. Absorbana soluiei amoniacale de ditizon trebuie s aib, dup diluare de cinci ori, o valoare de minim 1,00, colorimetrat la lungimea de und de 480 nm 3.4 Purificarea reactivilor

23

3.4.1 Soluia de citrat de sodiu sau de amoniu 0,25m se introduce ntr-o plnie de separare i se agit energic de cteva ori, cu cte 10 cm3 soluie de ditizon 0.02% n cloroform, pn ce stratul de cloroform rmne complet verde. Se mai adaug nc o poriune de ditizon i se agit energic 3 minute. Urmele de ditizon se elimin prin agitare i extracii repetate cu cte 10 cm3 cloroform, pn ce cloroformul rmne incolor. Extractele cloroformice se colecteaz n recipientul de sticl pentru recuperarea cloroformului. Soluia purificat se las 1-2 h n repaus , pn ce devine limpede, dup care se pstreaz ntr-un flacon de polietilen. 3.4.2 Purificarea ditizonei i prepararea soluiei de ditizon 0,02% n cloroform se face astfel: 100 mg ditizon triturat se trec cantitativ cu 100cm3 cloroform ntr-o plnie de separare de 500 cm3 i se agit pn la dizolvare complet. Se adaug 300 cm3 ap i 30cm3 hidroxid de amoniu soluie 25%, diluat 1+1 i se agit 10 s, timp n care ditizona trece n faza amoniacal pe care o coloreaz n rouportocaliu. Se las n repaus pn la separarea stratului inferior de cloroform, care se elimin, colectndu-se n recipientul de sticl pentru recuperarea cloroformului. Soluia amoniacal de ditizon se neutralizeaz i se aciduleaz uor prin adugare treptat de acid clorhidric d=1,19 (liber de zinc), pictur cu pictur cu pictur, pn cnd culoarea soluiei vireaz spre verde i ditizona este precipitat complet n flacoane. Se extrage ditizona cu ct 100 cm3 cloroform, pn ce faza apoas rmne incolor. Extractele cloroformice de ditizon, colectate n alt plnie de separare se spal n final prin agitare cu 50 cm3 ap. Dac faza apoas se coloreaz n galben, se adaug o pictur de acid clorhidric 1+1 i se agit. Soluia cloroformic de ditizon se trece ntr-un balon cotat de 500 cm3 i se completeaz pn la semn cu cloroform. Se pstreaz la ntuneric i la temperaturi de maxim 10C, timp de cel mult 30 de zile. 3.4.3 Soluia de hidroxid de amoniu 25%, diluat 1+1, se purific prin distilare astfel: 1000 cm3 soluie de hidroxid de amoniu 25% se introduc ntr-un balon de distilare cu lif, de 2000 cm3 ,al unei instalaii de distilare prevzut cu alonj cu bul de siguran a crei tij se introduce ntr-o butelie de sticl marcat n prealabil la volumul de 2000 cm3, n care s-au introdus 1500 cm3 ap. Butelia de sticl se scufund ntr-o baie de ap cu ghea.

24

Dup nclzirea balonului de distilare, amoniacul barboteaz n apa din butelia de sticl, ncepnd de la 45-50 C. Pn la 90C, distilatul se prinde ntr-un vas conic de laborator. Se unesc cele dou distilate n butelia de sticl i se aduce, cu ap, la volumul de 2000 cm3 obinndu-se astfel soluie de hidroxid de amoniu 25 % diluat 1+1. 3.5 Mod de lucru 3.5.1 Mineralizarea pe cale uscat a probelor conform STAS 2213/13-69. 3.5.2 Extracia zincului ntr-o plnie de separare de 100cm3 se introduc 10cm3 de ap i un volum de 1 5cm3 (cu un coninut de maxim 15g zinc) din soluia probei mineralizate. n cazul n care se ian lucru o cantitate mai mic de 5 cm3 mineralizat, se completeaz pn la volumul de 5cm3 cu soluia martor a reactivilor folosii la mineralizare. Se adaug 103 soluie de citrat de sodiu sau amoniu i 2 picturi albastru de timol, se neutralizeaz cu soluie de hidroxid de amoniu 25%, diluat 1+1, pn la culoarea albastru deschis (pH = 8,5), apoi se adaug 3cm3 soluia de dietiditiocarbamat de sodiu i se agit. Se adaug cu biureta 15cm3 toluen, apoi 5cm3 soluie amoniacal de ditizon i se agit energic un minut n care timp se formeaz ditizonatul de zinc care se extrage n toluen. Dup separarea celor dou faze, stratul toluenic cu proba trebuie s conin ditizon n exces; stratul toluenic trebuie s fie colorat n verde sau rou-violacee, iar cel amoniacal n galbenbrun. n caz contrar se repet determinarea cu un volum mai redus din soluia probei mineralizat. Se las n repaus pn la clarificarea celor dou faze, (3 5 minte), dup care faza amoniacal se ndeprteaz i se spal pereii interiori ai plniei precum i dopul de nchidere al acesteia cu circa 10cm3 ap adugat n jet subire, apoi fr s se agite se elimin apa de splare. Se adaug 25cm3 soluie de splare de hidroxid de amoniu i se agit constant 10 secunde (se numr pn la 15) pn ce excesul de ditizon trece complet n faza amoniacal care devine galben sau portocalie, miar n faza toluenic rmne ditizonatul de zinc de culoare roie sau roie-roz (dispare culoarea verde sau violacee). Se las apoi n repaus pentru separarea i clarificarea fazei de toluen. Se efectueaz dou determinri din soluia mineralizat conform STAS 2213/13-69.

25

n paralel se face o determinare martor n condiii identice nlocuind proba mineralizat cu 5cm3 din soluia, martor a reactivilor folosii la mineralizarea pe cale uscat a probelor efectuate conform STAS 2213/13-69. 3.5.3 Msurarea absorbanei Din soluia obinut la extracia zincului se ndeprteaz faza amoniacal, iar prin gura plnii se trece o poriune din extractul de ditizonat de zinc de culoare roie-roz, ntr-o cuv cu grosimea stratului de 10mm i se msoar absorbana la spectrofotometru, lungimea de und de 530nm fa de cuv cu toluen sau la fotocolorimetru cu filtru verde. Se procedeaz n acelai mod i cu extractul toluenic obinut la determinarea martor. Din valoarea absorbanei probei se scade valoarea absorbanei probei martor.

3.5.4 Trasarea curbei de etalonare. n 6 plnii de separare identice se introduc cte 0,5 cm3 acid clorhidric diluat 1+1 i cantitile de soluie etalon de lucru i ap indicate n tabelul 1: Nr. de ordine al soluiilor etalon (plniilor de separare) Soluia etalon de lucru cu coninutul de 1g zinc/cm3, cm3. Apa, cm3 Coninutul de zinc n etaloane, g 0 0 15 0 1 1 14 1 2 3 12 3 3 5 10 5 4 10 5 10 5 15 0 15

n continuare se adaug citratul de sodiu sau amoniu. Valoarea absorbanei etalonului 0 se scade din valorile absorbanei celorlalte etaloane, iar cu valorile obinute se traseaz curba de etalonare, nscriind pe abscis coninutul de zinc al etaloanelor, iar pe ordonat absorbanele corespunztoare. Se calculeaz apoi factorul de pant (F), pentru transformarea absorbanei n coninut de zinc prin efectuarea raportului dintre coninutul de zinc n microorganisme i absorbana corespunztoare curbei etalon. 3.5.5 Calculul i exprimarea rezultatului

26

Coninutul de zinc (Zn), exprimat n mg/kg produs, se calculeaz cu formula:

Zinc (Zn)=C V/m V1 (mg/kg)

n care: C- coninutul n zinc citit pe curba de etalonare, n microorganisme; V- volumul total al soluiei obinute la mineralizarea probei, n cm3; V1- volumul soluiei mineralizate luat pentru determinare, n cm3 ; m-masa probei luat pentru mineralizare conform STAS 2213/13-69, n grame. n cazul aplicrii n calcul a factorului de transformare, coninutul de zinc, exprimat n mg , la un gram de produs, se calculeaz cu formula:

Zinc (Zn)=A F V/V1 m (mg/kg)

n care: A- absorbana probei citit la spectrofotometru sau fotocolorimetru; F-factorul de pant, de transformare a absorbanei, n mg zinc; Ca rezultat se ia media aritmetic a celor dou determinri efectuate n paralel, dac sunt ndeplinite condiiile de repetabilitate. 3.6 Repetabilitatea Diferena dintre rezultatele a dou determinri efectuate de acelai operator, din aceeai prob mineralizat, n cadrul aceluiai laborator, nu trebuie s depeasc 10% din media aritmetic a celor dou determinri.

.4 Metoda spectrometric de absorbie atomic

4.1. Principiul metodei Zincul din soluia probe mineralizate pe cale uscat i pulverizat n flacra arztorului spectrometrului de absorbie atomic se transform n atomi liberi care absorb radiaiile de rezonan emise de lampa cu catod de zinc, iar absorbana rezultat la lungimea de und de 213,6 nm. Sensibilitatea metodei este de 0,05 g Zn/cm3. 4.2. Aparatur

27

 Spectrometru de absorbie atomic cu lamp de catod pentru Zn; Cuptor electric termoreglabil; Baie de ap; Creuzete de cuar sau porelan cu nlimea de 5 cm i diametrul de 4 cm sau cu nlimea de 6,5 cm i de diametrul de 5 cm; Capsule e cuar sau de sticl borosilicatic, termorezistent, cu diametrul de 5-6 cm sau 7-8 cm; Sticle de ceas; Baloane cotate de 25 cm3, 100 cm3, 500 cm3 i 1000 cm3; Flacoane de polietilen de 100 cm3; Pahare de laborator di sticl sau polietilen de 20 cm3 sau 25 cm3; Plnii de filtre cu diametrul de 3 cm i tija subire; Pipete de 1 cm3, 2 cm3, 5 cm3i 10 cm3; Rondele de hrtie de filtru cantitativ, cu porozitate mare, cu diametru de cca. 5 cm. Observaie: Flacoanele din polietilen se spal cu acid azotic d=1,40, diluat 1+1 i apoi cu ap. 4.3. Reactivi HCl d=1,19 i diluat1+1; HNO3 d=1,40, diluat 1+5 i 1+10; Azotat de Mg, soluie 10%; Perhidrol (peroxid de hidrogen soluie 30%); Ap acidulat cu acid clorhidric: la 500 cm3 ap bidistilat se adaug 5 cm3 acid clorhidric d=1,19; Soluii etalon de Zn: a) Soluie etalon de rezerv cu coninut de 1000g Zn/cm3: se dizolv 0,5g zinc metalic n 5 cm3 acid clorhidric d=1,19, ntr-un balon cotat de 500 cm3 i se completeaz la semn, cu ap. b) Soluie etalon de lucru cu coninut de 100 g Zn/cm3; 10 cm3 din soluie de rezerv se introduc ntr-un balon cotat de 100 cm3 i se aduc la semn cu ap.

28

Obs. soluia etalon de lucru cu coninut de 100 g Zn/cm3 se poate prepara i din sulfat de zinc, astfel: 0,2199 g sulfat de zinc [ZnSO4 7H2O], cntrite cu precizie de 0,0001 g, se trec cantitativ cu ap, ntr-un balon cotat de 500 cm3, se adaug 5 cm3 de HCl diluat, se aduce la semn i se omogenizeaz.

4.4 Mod de lucru 4.4.1 Mineralizarea probelor ntr-un creuzet se cntrete ci precizie de 0,01 g, o cantitate de 5 g din proba bine mrunit i omogenizat. Dac probele gonfleaz n timpul nclzirii, acestea se cntresc n creuzete mari sau n capsule. n cazul produselor de caramelaj care au un coninut redus de substane minerale, se adaug 1,5 cm3 soluie de azotat de magneziu i 0,2 cm3 soluie de acid sulfuric diluat 1+1 i se amestec cu o baghet. Aceasta se terge cu o bucat mic de hrtie cu porozitate mic, care se introduce n creuzet. Creuzetele cu probe se nclzesc nti pe o plit electric sau pe o sit de azbest timp de 2-3 h pentru uscare i carbonizare parial, avnd grij ca probele s nu deverseze prin gonflare. Uscarea se mai poate efectua i n etuv la 105-110C. Dac probele conin lichid, acestea se evapor la sec, pe baie de ap. Probele se introduc apoi n cuptorul electric la 150C i se ridic temperatura cu cte 50C la fiecare 15 minute, pn ce ncepe s se degaje fum (200-250C) i apoi, mai lent, cu cte 25C la 15 minute, iar cnd se ajunge la degajare mai accentuat de fum (cca300C) se ine cca o or pn la diminuarea fumegrii, dup care se ridic temperatura ca mai sus pn la ncetarea fumegrii (cca400C). Dup ce se obine o carbonizare complet, se ridic temperatura cu 50C la 15 minute, pn se ajunge la 500c, temperatur la care se menine pentru ardere 5 ore. n cazul produselor la care s-a folosit H2SO4, pentru a obine o cenu cu puine resturi de crbune se ridic temperatura la550C i creuzetele cu proba se menin la aceast temperatur 5 h.

29

Creuzetele cu cenu se rcesc pe o plac de asbest. Cenua se trateaz cu 0,5 cm3 HNO3 diluat 1+10 i apoi cu 0,5 cm3 perhidrol, iar dup amestecare se evapor la sec n etuv, dup care creuzetele se introduc n cuptorul electric, se ridic repede temperatura la 500C, respectiv 550C, se mai ard o or pn ce cenua devine alb i apoi se rcesc pe placa de asbest. Se adaug 2,5 cm3HCl, diluat 1+1, se evapor la sec pe baie de ap fiebinte, se mai adaug 0,5 cm3 acid azotic diluat 1+1, se amestec uor i se evapor din nou la sec. Se reia rezidul cu 2,5 cm3 HCl diluat 1+1, se acoper creuzetele cu o sticl de ceas i se nclzesc pe baie de ap timp de 15 minute, dup care se dilueaz cu cca 5 cm3 ap acidulat, apoi se trece soluia fierbinte cantitativ printr-un filtru ntr-un balon cotat de 25 cm3. Se spal creuzetul i filtrul de cinci ori cu cte 2-3 cm3 ap acidulat fierbinte pn ce soluia ajunge la semn. Dup rcire se completeaz la semn i se omogenizeaz. Soluia trebuie s fie complet limpede. Pentru determinare se face o diluarea soluiei probei mineralizate, de 2-10 ori, n funcie de coninutul de Zn, astfel: se ia un volum (V1) din soluia probei mineralizate, se introduce ntr-un balon cotat de 25 cm3(V2) i se aduce coninutul balonului la semn, cu ap. Se efectueaz n paralel dou mineralizri di aceeai prob. De asemenea, se pregtesc dou probe martor a reactivilor, cu cantitile folosite la mineralizare, care se trateaz ca i proba de analizat. 4.4.2 Efectuarea determinrii Pregtirea aparatului Se conecteaz spectrometrul de absorbie atomic la reeaua electric cu 20-30 minute nainte de lucru, se aduce lampa cu catod pentru Zn n drumul optic i se pune n funciune cu cca.15 minute nainte de nceperea lucrului. Se regleaz parametrii de lucru optimi (lungimea de und la 213,9 nm, fanta, curentul de alimentare a lmpii, etc) dup instruciunile aparatului. Se deschide alimentarea cu aer, apoi cu acetilen i se aprinde imediat flacra la arztorul aparatului. Se regleaz debitele de aer i acetilen pentru a obine o flacr corespunztoare. Se regleaz nlimea arztorului i din nou parametrii aparatului pentru a obine valoarea 0, aspirnd ap prin tubul capilar. Se aspir soluia etalon cu coninut de zinc de 1,5g la un cm3 i se regleaz debitul de pulverizare, pn se obine absorbana maxim.

30

Trasarea curbei de etalonare n apte baloane cotate de 100 cm3 se introduc cte 10 cm3 soluie de HCl diluat 1+1 i volumele de soluie etalon indicate n tabelul 2, dup care se aduc la semn, cu ap i se omogenizeaz: Nr. de Ordine al soluiilor etalon (baloanelor 1 cotate) Soluii etalon de lucru cu coninut de 100 g 0,2 Zn/cm3, cm3 Coninutul de zinc al etaloanelor, g/ cm3 0.2 2 0,4 0.4 3 0,6 0.6 4 0,8 0.8 5 1 1 6 1,5 1.5 7 2 2

Soluiile pregtite mai sus se trec n flacoane din polietilen de 100 cm 3 i se pot pstra maxim 7 zile. Fiecare soluie etalon se aspir i se pulverizeaz n flacra de la arztorul aparatului pe rnd, n ordinea cresctoare a concentraiei i se msoar absorbana rezultat. Cu valorile obinute se traseaz o curb etalon, nscriind pe ordonat valorile absorbanei, iar pe abscis concentraiile de zinc ale soluiei etalon. Reprezentarea grafic trebuie s fie o dreapt care s treac prin origine. Obs. Valorile absorbanei sau concentraia pot fi afiate digital sau pe un ecran, sau sunt nregistrate pe o imprimant, n funcie de dotarea aparatului. La aparatele dotate cu microcomputer i ecran, curba etalon poate fi tras i afiat direct pe ecranul aparatului. Msurarea absorbanei Se aspir n flacra arztorului soluia de analizat, apoi soluia etalon cu concentraia n zinc cea mai apropiat i se verific dac absorbana acesteia corespunde celei din curba etalon i din nou soluia de analizat.

31

Se noteaz de fiecare dat absorbanele respective de pe ecranul digital sau sunt nregistrate pe imprimant. n mod similar se procedeaz i cu proba martor a reactivilor folosii la mineralizare i dizolvare, iar absorbana obinut se scade din cea a probei de analizat (dac este diferit de 0). Pe baza absorbanei rezultate se citete pe curba etalon coninutul de zinc, n g/cm3. nainte i dup fiecare aspirare a probei de analizat sau a unei soluii etalon se aspir ap pn ce absorbana devine 0. Pentru msurarea corect a absorbanei, soluiile se aspir timp de 10-15 s pn ce valoarea absorbanei indicate este constant. 4.4.3 Calculul i exprimarea rezultatelor Coninutul de zinc (Zn), exprimat n mg la 1 kg produs, se calculeaz cu formula: Zinc (Zn)=C V2 V/V1 m (mg/kg) n care: C- concentraia n Zn din soluia probei mineralizate, n g/cm3; V- volumul soluiei mineralizate, n cm3; m- masa probei luate pentru mineralizare, n g; V1- volumul soluiei mineralizate luat pentru diluare, n cm3; V2- volumul soluiei rezultate dup diluare, n cm3; Ca rezultat se ia media aritmetic a dou determinri dac se ntrunesc condiiile de repetabilitate. 4.4.4. Repetabilitate Diferena ntre rezultatele a dou determinri efectuate de acelai operator, din aceeai prob, n acelai laborator, nu trebuie s depeasc 10% din media aritmetic a celor dou determinri. Meniuni n buletinul de analiz n buletinul de analiz se menioneaz: date necesare pentru identificarea lotului; metoda folosit; rezultatul obinut;

32

STAS2213/19-89.(8)

4.3 Alte metode de determinare

n continuare sunt prezentate i alte metode de mineralizare necesare naintea determinrii zincului prin metode analitice. Zincul din produsele organice necesit, n prealabil, eliberarea din substana organic prin mineralizare cu clor sau acizi. Mineralizarea cu clor (tehnica Fresenius-Babo-Ogier-Stepanov) Mineralizarea cu clor a fost propus nc din 1838 de Duflos i Millon i perfecionat de Fresenius i Babo (1844), Ogier (1891) i mai trziu de Stepanov. Clorul, rezultat din acid clorhidric i clorat de potasiu, acioneaz asupra substanelor organice mineraliznd-o i permind trecerea metalelor sub form ionic. Clorul reacioneaz cu apa, formnd acid hipocloros, care d natere la oxigen printr-o reacie al crei echilibru este deplasat spre dreapta (n sensul formrii oxigenului) n prezena substanelor organice, acceptor de oxigen. Au loc reaciile: KClO3+6HCl3Cl2+KCl+3H2O Cl2+H2OHOCl+HCl 2HOCl2HCl+O2 Modul de lucru: a) Varianta Ogier: Produsul de analizat solid, fin divizat sau lichid, concentrat prin evaporare, se introduce ntr-un balon Wurtz. ntruct clorul n prezena alcoolului etilic produce explozie, produsul de analizat care conine alcool trebuie, n prealabil, supus evaporrii pentru ndeprtarea acestuia. n balonul Wurtz se adaug, peste produsul solid,

33

acid clorhidric 12% n cantitate suficient spre a obine o mas semifluid. La lichidul final concentraia acidului clorhidric s nu depeasc 12 %, evitndu-se formarea (n cazul prezenei arsenului) de AsCl3, volatil. Se introduc apoi 2-3g clorat de potasiu cristale i se adapteaz la balon o plnie de separare n care se gsete clorat de potasiu 5%. Tubul lateral al balonului este introdus ntr-un flacon coninnd NaOH 10% pentru captarea clorului n exces. Meninerea constant a degajri clorului se realizeaz prin reglarea introducerii cloratului 5% prin robinetul plniei, agitnd periodic balonul. b) Varianta Stepanov: mineralizarea are loc ntr-un balon nchis cu un dop prin care trece un tub n spiral, servind ca refrigerent. Peste produsele de analizat (produse zaharoase, grsimi etc.) se introduce HCl n cantitate astfel calculat nct n final concentraia s nu depeasc 12%, i nici cantitatea de clorat de K cristale, adugate periodic, pn la terminarea mineralizrii. Se renun, deci la adausul de soluie de clorat de K. n ambele variante, mineralizarea se consider terminat cnd masa din balon devine un lichid floconos, galben-verzui. Se dilueaz cu ap 1:1 se concentreaz pe baia de ap. Se trateaz cu SO2 sau NaHSO4 pentru eliminarea urmelor de Cl; in plus, SO2 reduce i compuii oxigenai superiori ai As5+, trecndu-i n As3+, mai uor de depistat. Se rcete, cnd la suprafa apare un strat de grsime, iar la fund se depune un sediment verzui format din: esut conjunctiv nesolubilizat, o parte din grsimi i totalitatea Ba sub form de BaSO4 (nu ns i clorurile insolubile de Pb i Ag i nici sulfaii de Pb i Sn, cci mediul puternic acid asigur solubilizarea cantitilor mici ale acestor sruri. Se filtreaz prin hrtie de filtru. Toxicii n raport cu natura lor se afl fie dizolvai n lichidul de mineralizare, fie depui n sediment sau inclui n stratul de grsime de unde trebuie extrai. Filtratul, cu grsimea i sedimentul, se mineralizeaz din nou , de obicei prin calcinare cu carbonat de sodiu i azotat de potasiu 1:2, cnd au loc reaciile: BaSO4BaCO3 PbSO4PbCO3PbO+CO2 2AgClAg2CO3Ag2O+CO2 Reziduul de la calcinare se reia cu puin ap, care dizolv sulfaii alcalini i apoi cu acid azotic diluat, care dizolv toi compuii rezultai prin calcinare, trecndu-i n ioni identificabili.

34

Lichidul de la mineralizarea iniial (filtratul) i lichidele de la prelucrarea depozitului de filtru, se supun analizei prin metodologia analitic clasic sau prin spectrofotometrie cu absorbie atomic, etc. Mineralizarea cu acizi a) Mineralizarea cu acid sulfuric i azotat de amoniu (tehnica Stepanov)- metoda se bazeaz pe mineralizarea substanelor organice cu acid sulfuric i azotat de amoniu a crui manipulare este mai puin periculoas dect a acidului percloric. Se preteaz la mineralizarea produselor e analizat n cantiti mici. b) Mineralizarea cu acid azotic i bisulfit de potasiu. Se ia 10 ml acid azotic concentrat 1-2 g bisulfit de potasiu cristal, se acoper cu o sticl e ceas i se nclzete pe baia de nisip pn ce rmn 2-3 , adugnd cte 10 ml HNO3 ml concentrat pn la reziduu complet alb. Dac reziduul nu este alb, se adaug 2-5 ml perhidrol i se repet nclzirea.(3)

35

Bibliografie
1. C.D. Neniescu-Chimie general-Ed. didactic i pedagogic, Buc. 1980; 2. Tehnologia uleiurilor vegetale i a furfurolului-Ed. didactic i pedagogic-Buc. 1963; 3. Cotru, Marian; Proca, Maria-Toxicologie analitic Ed. MedicalBuc. 1988; 4. Rpeanu D. MiticPrevenirea aciunii factorilor poluani asupra animalelor i produselor de origine animal Ed. Ceres, Buc. 1979; 5. Mnesu SergiuPoluarea mediului i sntatea, Ed. tiinific i enciclopedic, Buc. 1978; 6. Grban ZenoBiochimie-Tratat comprehensiv Vol. I, Ediia a II-a, Ed. Didactic i pedagogic R.A., Buc. 1999; 7. Standard de StatEdiie specialUleiuri i grsimi vegetale. Pregtirea probelor n vederea determinrii metalelor (STAS 145/23-71); 8. Standard de StatEdiie specialDeterminarea zincului din produse dulci, (STAS 2213/19-89); 9. Ducu tefMerceologia produselor alimentare, Ed. Mirton, Timioara 2002; 10. Corina Dana MicMicrobiologia produselor agroalimentare, Ed. Solness, Timioara 2001; 11. Internet http://www.msue.msu.edu/msue/imp/modf1/05209706.html http://www.crcpress.com http://www.globus.home.ro/articole/12_metalele%20din%20alimente.htm http://www.webelements.com/webelements/elements/text/Zn/hist.html http://www.webelements.com/webelements/elements/text/Zn/key.html

36