CAIET DE PRACTIC pentru Laboratorul didactic de BIOTEHNOLOGII, sala D 1.4.

, Facultatea de tiina i Ingineria Mediului, domeniul INGINERIA MEDIULUI Responsabil: lector dr.biolog Dana Malschi
Tel: 0745 367373, e-mail: danamalschi@yahoo.com Tematica practicii: STUDIUL INDICATORILOR BIOLOGICI DE POLUARE. Bioindicatori in mediul terestru. Bioindicatori n mediul acvatic. ISO - metode de evaluare a polurii prin bioindicatori si biomonitoring. Metode biologice pentru determinarea toxicitatii i de evaluare a biotehnologiilor. BIOTEHNOLOGII PENTRU TRATAREA APELOR UZATE SI POLUATE. BIOREMEDIEREA ECOSISTEMELOR ACVATICE. Bioremedierea apelor subterane contaminate i a apelor uzate cu ajutorul microorganismelor (bacterii, cianobacterii, fungi) i plantelor superioare. Indeprtarea metalelor grele din ape poluate cu ajutorul cianobacteriilor. Bioremedierea prin zone umede construite (asociaii de plante acvatice, fungi, microorganisme) pentru tratarea apelor uzate sau a eluatelor din soluri contaminate. BIOREMEDIEREA ECOSISTEMELOR TERESTRE. Rolul microflorei in depoluare. Grupe ecofiziologice de bacterii. Studiul microbiotei depoluante. Depoluarea biologica a solului prin biodegradarea substanelor organice din sol. Bioremedierea solurilor poluate cu metale grele, dioxid de sulf, hidrocarburi, compusi organici sintetici. RECONSTRUCIA ECOLOGIC. Tehnologii de bioremediere a haldelor de steril, a iazurilor de decantare, a deeurilor industriale. Tehnologii de bioremediere a deseurilor urbane, a reziduurilor de la termocentrale. Asociaii de arbori, arbuti, plante ierboase, microorganisme utile n reconstrucia ecologic. BIOTEHNOLOGII -ECOTEHNOLOGII APLICATE IN AGRICULTURA. PERDELELE AGROFORESTIERE DE PROTECTIE ANTIEROZIONALA I DEZVOLTAREA DURABIL A AGRICULTURII N CENTRUL TRANSILVANIEI, N CONDIIILE NCLZIRII I ARIDIZRII, A SCHIMBARILOR CLIMATICE ACTUALE. Rolul ecotehnologiei agroforestiere de protecie n bioremedierea terenurilor agricole deteriorate, n limitarea poluarii cu insecticidelor, in combaterea biologica a daunatorilor, n agricultura ecologic. Rolul biotehnologiilor nepoluante de combatere biologica a daunatorilor n protecia mediului i a plantelor (teste de laborator n izolatoare prad-prdtor cu insecte fitofage si entomofage pradatoare). BIOTEHNOLOGII GENETICE. Studiul impactului introducerii organismelor genetic modificate ( OGM ) n agroecosisteme Descrierea laboratorului de biotehnologii. Laboratorul include doua structuri: 1. Laboratorul didactic /2007 Tehnologii de conservare i utilizare a bioresurselor-Reconstrucie ecologic, bioremediere, depoluare biologic, management ecologic al sistemelor biotehnice i ecologice, dotat cu Finanare din Programul naional de infrastructur n educaie MEdC 2006 2008, 2. Laboratorul de cercetare Agroecologie si dezvoltare durabila - (entomologie) dotat cu finantare din proiectul CNCSIS 1448, 2007-2008 Laboratorul de biotehnologii are ca scop: formarea profesional pentru elaborarea biotehnologiilor de valorificare durabil i gestiune a bioresurselor, specifice activitilor inginereti de protecia mediului. desfasurarea studiului i cercetrilor asupra componentelor mediului biotic, biodiversitii i impactului factorilor ambientali, naturali i tehnologici in ecosisteme naturale i biotehnice; formarea capacitiilor de elaborare a bio- i eco-tehnologiilor pentru depoluare, bioremediere, reconstrucie ecologic, n contextul impactului schimbrilor climatice i tehnologice actuale. In domeniul Agroecologie si dezvoltare durabila (entomologie), laboratorul are ca scop efectuarea de cercetri entomocenotice, studii pentru elaborarea biotehnologiilor de combatere a daunatorilor si a sistemelor de management integrat al duntorilor, studii asupra reconstructiei agroecologice etc. n scopul dezvoltrii agricole durabile, siguranei i calitii produciilor agricole, proteciei mediului, conservrii i utilizrii biodiversitii, promovrii agriculturii ecologice, a agriculturii conservative, n condiiile noi legate de schimbrile climatice, agroecologice i tehnologice zonale.

Activiti planificate n laborator: lucrri practice, activiti studeneti de cercetare-ndrumare licen, masterat, cerc tiinific etc., experiene demonstrative de ecofiziologie, ecotoxicologie si depoluare biologic; experiente de laborator cu plante, insecte vii, (pentru studiul parametrilor de dezvoltare etc.); prelucrarea probelor recoltate din teren; determinari calitative si cantitative de fauna si flora; intocmirea colectiilor didactice; prelucrarea datelor; documentarea i tehnoredactarea lucrrilor tiinifice etc. Laboratorul beneficiaza de: 1. Condiii de lumin natural i artificial puternic, cu sistem de lumin suplimentar pentru experientele cu insecte i plante, prize multiple electrice pentru aparatur etc.; 2. Numr de locuri studeni: 25-35; 3. Suprafaa: 64 m2(8 m x 8 m); 4. Dotare: Echipamente noi, din 2007-2008, cu Finanare din Programul naional de infrastructur n educaie MEdC 2006 2008, pentru Laboratorul didactic /2007 Tehnologii de conservare i utilizare a bioresurselorReconstrucie ecologic, bioremediere, depoluare biologic, management ecologic al sistemelor biotehnice i ecologice: 1 stereomicroscop Motic, lup binocular cu sistem de iluminare; 5 buci stereomicroscop binocular Optika, sistem propriu de iluminare; 1 stereomicroscop Motic-Microscop digital Binocular with integral CCTV), termostat cu lumina, 1 etuv. Aparatura din dotarea cu finantare CNCSIS, a proiectului 1448, 2007-2008, pentru Laboratorul de cercetare Agroecologie si dezvoltare durabila (entomologie): 2 buci stereomicroscop cu sistem propriu de iluminare (Optika Trinocular); 2 buci microscop biologic cu sistem propriu de iluminare (Optika Trinocular); 4 buci microscop biologic cu sistem propriu de iluminare (Optika binocular); 2 buci Stereomicroscop trinocular Optica SYR10 cu DIGI8 camera; 1 microscop biologic trinocular OpticaB353A; 2 buci microscop biologic binocular Optica B 353 A; 2 buci videoproiector, ecran de proiecie -1 bucat; aparat foto digital, 7M PIXELI -1 bucat; Digital camera -1 bucat; sistem pentru prelucrarea probelor, frigider cu congelator Arctic. Etuva; sistem pentru conservarea probelor, frigider, lmpi, calorifere, ventilator etc.; Obiecte de inventar specifice cercetrilor de biologie, lmpi, truse pentru probe; Sistem de calculcalculator i echipamente electronice: calculator P4, Laptop, Laser Jet imprimanta alb-negru, Imprimanta color, Scan Jet scaner, Multifuncional imprimant. Software: Windows XP Microsoft office, Net etc. corespunztoare tehnicii de calcul, aparatelor i microscoapelor din dotare.

Imagine din Laborator, studenii ISBE anul 3

Imagine din laborator, studentii IM anul

Bibliografia Malschi Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie si microbiologie. Note de curs si aplicatii practice, Manual in format electronic. Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai Cluj-Napoca. Editura Bioflux, Cluj-Napoca. 2009, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ p. 640, plane color. ISBN 978-606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/docs/malschi2.pdf . Malschi Dana, 2009. Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice.(Tehnologii de depoluare biologica. Tehnologii de bioremediere. Reconstructia ecologica). Note de curs si aplicatii practice. Manual in format electronic. Facultatea de Stiinta Mediului,Universitatea Babes-Bolyai. Editura Bioflux, Cluj-Napoca. BIOFLUX, Cluj-Napoca, ISBN 978-606-92028-5-2. Malschi Dana, 2008. Mediu-agricultur-dezvoltare durabil. Optimizarea tehnologiilor de management integrat al daunatorilor grului in dinamica modificarilor agroecologice din Transilvania. Ed. Argonaut. 2008. ISBN 978-973-109-115-0. Malschi Dana, 2009. Integrated pest management in relation to environmental sustainability. Part I. Ecological management of wheat pests. Manual online. Faculty of Environmental Sciences, Bioflux Publishing House, Cluj-Napoca, p. 200. ISBN 978-606-92028-3-8. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti2009/

STUDIUL INDICATORILOR BIOLOGICI DE POLUARE. Bioindicatori in mediul terestru. Bioindicatori n mediul acvatic. ISO - metode de evaluare a polurii prin bioindicatori si biomonitoring. Metode biologice pentru determinarea toxicitatii i de evaluare a biotehnologiilor.

Teste de biomonitoring (bioindicatori) si toxicitate a solului cu Lolium perene, in laborator

pentru SO2, F, metale grele. Expunerea se face pe o durat de 14-28 zile utiliznd ghivece cu plante crescute din semine (plante de Template copyright 6-8 4/24/2010 sptmni www.brainybetty.com 2005

Testele standard cu bioindicatori pentru m ediile terestre se efectueaz cu Lolium multiflorum

3. 1.

2.

Test de ecotoxicitate (aprilie 2010/stud. A.Bolonyi ISBE). Lolium perrene crescut pe substrat degradat din : 1. iazul de decantare Anies (substrat rou); 2. iazul Valea Glodului (substrat cenuiu) . 3. martor nepoluat (pmnt de flori, negru), n 5 repetiii.

1. Iazul de decantare Anie

2. Iazul Valea Glodului

Exploataia minier RODNA. Bistria-Nsud

Teste de biomonitoring (bioindicatori) si toxicitate a apei cu Lemna minor, in laborator

Teste de ecotoxicitate a apei si imagini din zona depozitului de deseurilor de la Fabrica de ingrasaminte si pesticide Tarnaveni. (Foto: Student Ghira George SM 3)

Bioindicatori pentru mediile terestre Lichenii constituie bioacumulatori puternici datorit capacitii lor de a prelua poluanii prezeni n aerul atmosferic. Avnd o sensibilitate deosebit fa de poluani, lichenii sunt utilizai ca bioindicatori, pentru diverse categorii de poluani: SO2, NOX, HF, Cl2, O3, peroxiacetat, metale grele, elemente radioactive, fertilizatori, pesticide, erbicide.Speciile de licheni corticali Parmelia physodes, Parmelia coperata i Evernia prunastri au servit ca bioindicatori pentru a monitoriza poluarea cu plumb a aerului. Cladonia rangiferina i Cladonia nitei pot fi utilizate ca bioindicatori acumulatori pentru U, Fe, Pb, Ti. Mercurul poate fi acumulat de lichenii: Alectoria capillaris, Alectoria tremontii, Hypogymmia physodes, Cladonia sp., Collema sp. (Oros, 2002). Cel mai larg utilizat bioindicator este lichenul Hypogymnia physodes. Pe lng sulf el poate acumula foarte multe metale realiznd valori mari ale factorului de concentrare: Cd 70 x Fe 28 x Pb 62 x Mn 28 x Cu 35x Zn 26 x Cr 34 x Ni 9x V 31X

Briofitele (muchii) prezint o sensibilitate deosebit fa de poluarea aerului. Ca urmare, numrul speciilor de briofite a fost mult diminuat n zonele urbane, n centrele industriale intens poluate. Unele specii s-au stins iar altele s-au redus ca numr de indivizi (i biomas) i ca arie de rspndire. De exemplu, n Olanda au disprut n ultimii 100 de ani 15% din speciile de briofite terestre i 13% din speciile de briofite epifite. Pleurozium schreberi, Hyloconium splendens i Hypneum cupressiforme au fost utilizate ntr-un proiect de biomonitorizare a polurii de fond cu 8 metale (As, Cd, Cr, Cu, Fe, Pb, Ni, V, Zn) a Europei de Nord. Elementele radioactive sunt i ele acumulate n muchi mai intens dect n plantele superioare. Astfel, Pleurozium schreberi a fost utilizat pentru monitorizarea cderilor de La, Zr i alte elemente n urma testelor nucleare, iar speciile Ceratodon purpurens, Tortula ruralis i Bryum argenteum, pentru biomonitorizarea cderilor de 137Cs dup accidentul de la Cernobl. n cazul metalelor grele s-a stabilit urmtoarea secven a toxicitii acestora pentru briofite (este asemntoare i la plantele cu flori): Hg > Pb > Cu > Cd >Cr > Ni > Zn Unele specii au o capacitate deosebit de mare de acumulare a metalelor uneori pn la concentraii extrem de mari. De exemplu, Hyloconium splendens originar dintr-o min de cupru a acumulat Pb, Cd, Cu, Zn n concentraie de 17320 ppm (n comparaie cu plantele superioare Picea 349,5 ppm, Clintonia 548,5 ppm n acelai mediu) (Blanc, 1974. citat de Oros, 2002). Plante superioare, bioindicatori pentru metale grele Plante cu flori - specii ierboase - acumulatori. Dintre speciile acumulatoare de metale mai cunoscute sunt:
- Melandrium album (opaia) 4,286 g/g 1,683 g/g 1,547 g/g 1,437 g/g 1,190 g/g 1000-3500 g/g (pentru Ni i Zn). - Lolium perenne (raigras) - Plantago lanceolata (ptlgina) - Lepidium draba (urda vacii) - Polygonum aviculare (troscot) - Thlaspi (pungulia)

Specii indicatoare: Lolium perenne i Lolium multiflora sunt foarte adecvate pentru a fi utilizate ca indicatori de expunere. Aceste plante sunt frecvente n parcuri, pe marginea drumurilor, a oselelor. Pe lng metale grele, ele sunt indicatori pentru S i F. Alte specii ierboase utilizate ca bioindicatori pentru metale grele sunt: - Melandrium album (opai) - (Pb) - Thlaspi (punguli) - (Ni, Zn) - Solidago canadensis (splinu) (Pb) - Artemisia vulgaris (pelin), Calamagrostis epigeios (trestia), Chelidomium majus (rostopoasca), Plantago major (ptlgina mare), Poa annua (firua) - utilizate ca bioindicatori pentru metale grele ntr-un studiu n Berlin; - Equisetum arvense (coada calului) - ca bioindicatori de Hg n zona distrus de vulcanul Sf.Elena din SUA; - Achilea milefolium (coada oricelului), Artemisia vulgaris (pelin), Plantago lanceolata (ptlgina), Amaranthus retroflexus (moul curcanului) - bioindicatorii pentru V (Harhnan i Reznicek, 1986 citati de Oros, 2002). - Hypericum perforatum (pojarnig), Hedera helix (iedera), Urtica dioica (urzica moart) - pentru Pb, Cu, Zn, Cd, Hg (Holvarth i Rump, 1970, citati de Oros, 2002); - Vaccinium myrtilus (afinul), Vaccinium vitis ideea (merior) - pentru Cd, Fe, Mn, Pb (Czukojovska i colab., 1980, citati de Oros, 2002). Arbori i arbuti de foioase Frunzele arborilor fixeaz metale grele din zonele poluate (de exemplu, pe marginea oselelor n apropierea uzinelor) att din sol ct i direct din aer. - Specii sensibile: Betula pendula (mesteacn), Fraxinus excelsior (frasin), Sorbus aucuparia (scoru de munte), Tilia cordata (tei), Malus domestica (mr). - Indicatori acumulatori - specii considerate rezistente: Eleagnus angustifolia (slcioara), Populus canadensis (plop canadian), Salix alba (salcie), Sambucus nigra (soc negru). - Specii relativ rezistente (acumulatori): Carpinus betulus (carpen), Quercus robur (stejar), Fagus sylvatica (fag), Quercus palustris (stejar de balt), Acer saccharum (arar), Platanus acerifolia (platan). Coninuturi de diferite metale n frunzele unor arbori de foioase (indicatori-acumulatori)
Valori medii (ppm) Alianthus glandulosa (oetar) Aesculus hippocastanus (castan slbatic) Tilia tomentosa (tei) Sophora japonica Celtis occidentalis Robinia pseudaccacia (salcm) Acer platanoides (paltin de cmp) Platanus acerifolia (platan) 1027 874 806 754 565 596 451 399 Valori maxime (ppm) 2112 1483 2458 2076 1239 1194 1101 660 n zone rurale (ppm) 190 300 240 233 214 262 289 193

- Indicatori pentru microelemente i ultramicroelemente: Ag Robinia pseudaccacia (salcm); B Rosa rugosa (mce), Acer campestre (artar de cmpie), Aesculus hippocastanus(castan slbatic), Morus alba, Platanus hybrida (platan), Salix alba (salcie), Sambuccus nigra (soc);

Bi Ce Co Cr Cs Eu F Ga La Mo Ni Sb Sn Th U V W Zn

Robinia pseudaccacia (salcm); Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus (castan slbatic); Sophora japonica; Koelrenteria paniculata; Rosa rugosa; Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Sophora japonica; Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Rosa rugosa; Robinia pseudaccacia; Rosa rugoza, Sophora japonica, Thuja orientalis, Aesculus hyppocastanus; Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus; Thuja occidentalis; Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Rosa rugosa, Thuja occidentalis, Robinia pseudaccacia, Aesculus hyppocastanus; Robinia pseudaccacia; Robinia pseudaccacia.

Coniferele sunt indicatori mai sensibili dect copacii cu frunze cztoare datorit faptului c durata de via a acelor (frunzelor) este de 3-4 ani i sunt expuse polurii i pe perioadele de iarn. Poluarea cu SO2 i HF poate fi indicat de conifere i prin determinarea coninutului din frunze (coniferele sunt i acumulatori). Specii de conifere sensibile la poluarea cu SO2 sunt: Abies alba, Picea abies, Pinus banksiana, Pinus nigra, Pinus silvestris, Pinus strobus, Larix decidua, iar fa de poluarea cu HF sunt sensibile: Abies alba, Picea abies, Pinus ponderosa, Pinus silvestris, Pinus strobus. Unele specii pot fi utilizate i pentru indicarea polurii cu oxidani fotochomici: Picea abies, Pinus banksiana, Pinus strobus. Indicarea polurii cu metale grele se face prin acumularea acestora, mai ales n acele coniferelor (coniferele sunt acumulatori de metale grele). Astfel, Picea abies, Pinus silvestris, Pinus nrigra, Taxus baccata, Thuja occidentalis sunt specii adecvate pentru indicarea polurii cu Fe, Mn,Cu, Pb. Zn,Cd,Ag, Hg. Plante de tis (Taxus baccata) au fost utilizate ntr-un proiect de evaluare a polurii cu metale grele n oraul Darmstadt din Germania n perioada 1978-1984, coninutul de metale (Pb, Cu, Cd, Ni, Cr, Hg) indicnd o scdere a polurii n perioada menionat (Kovacs, 1992, citat de Oros, 2002). Bioindicatori in apele dulci. Avand in vedere ca depoluarea biologica este deosebit de activa in medii acvatice, in iazuri de depoluare, precizam o serie de bioindicatori i bioacumulatorii, care permit evaluarea unor poluani cum sunt metale grele etc. Macrofite acvatice. O serie de alge, briofite, fanerogane amfibii sau hidrofite prezint aptitudini accentuate de concentrare n esuturi att a unor elemente minerale (metale grele) ct i a unor compui organici xenobiotici din ape (dupa Oros, 2002). Muchii acvatici cu potenial de bioacumulare sunt printre alii: Fontinalis, Amblystegium, Rhychostegium, Plathyhypnidium, Cindidotus. O serie de cercetri au stabilit c Fontinalis squamosa i Fontinalis antipyretica au o capacitate mare de bioacumulare a Zn i altor metale toxice. Ultima specie acumuleaz i PCB sau ali compui organici xenobiotici, sau metale mai rare ca Ag, Bi, Sn. Alge. Alga roie Lemanea sp. este una dintre puinele macrofite care poate tri n imediata apropiere a apei dintr-un iaz de steril de la o exploatare de Pb, se poate dezvolta n ape cu concentraii mari de metale toxice-Zn. Fanerogame. Typha latifolia (papura) s-a dovedit un bioacumulator eficace al Zn, acumulnd n rdcini pn la 1400 mg Zn / kg atunci cnd plantele au crescut pe sedimente cu coninut de 10 mgZn/kg de sediment (Oros, 2002).

Substanele toxice cu concentraii diferite pot afecta diferite specii prezente n ecosistem. Abordarea ideal pentru o caracterizare precis a nivelului de toxicitate a unui mediu const n utilizarea mai multor specii de organisme aparinnd unor grupri trofice i taxonomice diferite, unor diferite specii de plante i de microorganisme, etc. Criteriile pentru selectarea testelor de ecotoxicitate au fost stabilite n contextul evalurii riscului i a clasificrii substanelor chimice (Cristina Dobrot, Munteanu V. , http://www.resolmet.utcluj.ro). Antrenarea n soluiile apoase a fraciunilor solubile, coloidale sau a particulelor are un rol important n evaluarea solurilor contaminate. Apa mobilizeaz cea mai mare parte a contaminanilor afectnd n acest mod microorganismele i plantele. Eluatele apoase sunt folosite pentru a testa efectul ecotoxic asupra organismelor expuse contactului cu apa contaminat. Standardul ISO 15799:2003 (E) Ghid pentru caracterizarea ecotoxicologic a solurilor i materialelor din sol stabilete procedurile de lucru care trebuie aplicate pentru o testare ecotoxicologic adecvat. Astfel, probele trebuie comparate cu probe martor, care pot fi repezentate de soluri necontaminate cu proprieti pedologice stabilite, materiale inerte, (nisip de cuart), sol certificat (sol standard), sau sol standardizat artificial ( ISO 11267, ISO 11268-1,2). cnd se utilizeaz eluate trebuie fcute diluii succesive ale probei contaminate. Evaluarea ecotoxicitii solului ca substrat pentru microorganisme. Flora microbian reprezint aproximativ 80% din totalul organismelor din sol. Rolul micrororganismelor este acela de a degrada i a descompune, alturi de microfaun, complexele organice n substane simple, meninnd la valori normale ciclul carbonului, al azotului al fosforului i al sulfului. Respiraia indus la nivelul solului reprezint un indicator important al densitii populaiei microbiene. Bacteriile nitrificatoare care sunt rspunztoare de oxidarea amoniului la nitrit i de la nitrit la nitrat, sunt un grup foarte sensibil de microorganisme. Nitrificarea redus este un indicator sensibil a inhibiiei proceselor eseniale din sol. Determinarea biomasei microbiene, sau a altor procese microbiene din sol, sau din eluate (cretere, fluorescen) permite evaluarea continu a meninerii fertilitii solului, a potenialului de degradare a compuilor organici i a efectelor reziduurilor aplicate pe sol asupra comunitilor microbiene. Evaluarea ecotoxicitii solului ca substrat pentru creterea plantelor. Rdcinile plantelor reprezint o mare suprafaa biologic in sol. Contactul dintre rdcini i sol este mrit datorit perilor radiculari i a micorizelor. Testele pe plante determin biodisponibilitatea i efectele poluanilor care nu pot fi detectai pe cale chimic. Testele de ecotoxicitate vizeaz germinaia, creterea sistemului radicular, a prilor aeriene ale plantelor, coninutul n clorofil, viabilitatea i fotosinteza. Standarde pentru evaluarea ecotoxicitii se pot aplica procedurile prezentate n: ISO 11269: 2003. Calitatea solului-Determinarea efectelor poluanilor asupra florei solului o (1) Metoda pentru msurarea inhibrii creterii rdcinii. o (2) Efectele chimicalelor asupra rsririi i creterii plantelor superioare. ISO 22030:2005. Calitatea solului metode biologice toxicitate cronic la plantele superioare. ISO 8692: 2005 Calitatea apei. Inhibarea creterii algelor de ap dulce n teste cu Scenedesmus subspicatus i Selenastrum capricornutum.. Alge verzi:

Evaluarea ecotoxicitii solului .

ISO 20079: 2005 Calitatea apei Determinarea efectului toxic al constituenilor apei i al apelor uzate asupra lintiei (Lemna minor)- inhibarea creterii la (Lemna minor).

ISO 14442: 2006 Calitatea apei. Ghid pentru testele de inhibare a creterii algelor cu materiale greu solubile, compui volatili, metale i ape reziduale ISO 10519:1997 Semine de rapi determinarea coninutului de clorofil -- metoda spectrometrica.

Determinarea efectelor poluanilor asupra florei solului 1. Metod pentru msurarea creterii rdcinilor. IDT ISO 11269-1:1993 Standardul a fost elaborat pentru a pune la dispoziia utilizatorilor o metod rapid pentru evaluarea calitii solurilor afectate de fenomene de poluare sau a celor recuperate pentru agricultur de pe terenuri situate n zone industriale sau n areale de depozitare a sterilului de la exploatri miniere. Metoda descris poate fi folosit pentru a pune n eviden efectul unor substane ncorporate n sol asupra calitii acestuia precum i la compararea unor soluri de calitate necunoscut. Evaluarea se bazeaz pe compararea vitezei de cretere a rdcinilor unei anumite plante ntr-o situaie standard i pe un sol supus ncercrii. Este un experiment rapid de cretere bazat pe dezvoltarea seminelor n condiii controlate de mediu. Metoda poate fi folosit pentru a compara solurile, pentru a urmri schimbrile n activitatea lor sau pentru a determina efectul substanelor adugate, pentru a evalua calitatea solurilor dup recuperarea terenurilor industriale i suprafeelor de depozitare a sterilului de la exploatrile miniere sau cnd se decoperteaz un teren. Metoda se aplic tuturor solurilor, materialelor de sol, deeurilor sau substanelor chimice care pot fi aplicate n sol exceptnd cazul n care contaminantul este foarte volatil sau afecteaz numai fotosinteza. Se aplic la msurarea efectelor substanelor adugate n sol n mod deliberat i la compararea solurilor de calitate cunoscut i necunoscut. Se determin creterea unor semine pregerminate n condiii controlate, pe o anumit perioad, stabilit n funcie de planta folosit n experiment. Cele dou medii martor sunt nisipul i solul. La sfritul perioadei de cretere se msoar lungimea rdcinilor, att de la martori ct i de la solul necunoscut sau la substana experimentat. O diferen semnificativ din punct de vedere statistic n lungimile rdcinilor plntuelor crescute in oricare din mediile experimentate comparativ cu martorii indic existena unui efect. Plantele pentru experimentare trebuie crescute din semine nedecorticate. Orzul (Hordeum vulgare L.) varietatea CV Triumph a fost folosit timp de mai muli ani i se recomand n mod curent. Sunt corespunztoare i alte varieti de orz (nedecorticat), cu condiia s aib aceleai caliti de germinaie, de alungire a rdcinilor.

2. Efectele substanelor chimice asupra ncolirii i creterii plantelor superioare. IDT ISO 11269-1:1993 Metoda e aplicabil pentru determinarea unui efect toxic posibil al substanelor chimice incorporate n sol asupra ncolirii i primelor stadii de cretere i dezvoltare ale unei varieti de plante terestre. Acest test de fitotoxicitate se bazeaz pe rspunsul din timpul ncolirii i primelor stadii de cretere al unei varieti de specii de plante terestre la concentraii diferite ale unei substane chimice adugate solului de testare. Seminele sunt plantate n vase ce conin sol in care a fost adugat substana chimic testat i n vase martor iar in final se compar plantele din vasele martor cu celelalte. Trebuie selectate pentru test, cel puin dou specii, cuprinznd cel puin o specie din fiecare categorie. Sunt dou categorii. Categoria 1 - monocotiledonate, speciile: Secale cereale, Lolium perenne, Oryza sativa, Avena sativa, Triticum aestivum, Hordeum vulgare, Sorghum bicolor, Zea mays. n categoria 2 - dicotiledonate: Sinapis alba, Brassica napus ssp. napus, Raphanus sativus, Brassica rapa ssp. rapa, Brassica campestris Var. Chinensis, Trifolium ornithopodioides, Lactuca sativa, Lepidium sativum, Lycopersicon esculentum, Phaseolus aureus. Testul de toxicitate a metalelor grele asupra algelor Standardul ISO 14442:2006), ndrumtor pentru teste de inhibiie a creterii algelor cu materiale puin solubile, compui volatili, metale i ape reziduale. Creterea algelor aduce modificri ale toxicitii metalelor grele. Metalele sunt absorbite n celulele algelor, cauznd o scdere a toxicitii la nivele ridicate de toxicitate. n ciuda acestor dificulti, cu o optimizare adecvat, teste cu alge asupra metalelor grele pot fi realizate n condiii n care influena sistemului de testare e minim. Factorii cheie sunt ca biomasa de alge s fie meninut la un nivel redus, influena chelailor, a fierului i a microelementelor s fie minimizat i pH-ul s fie bine controlat (Cristina Dobrot, Munteanu V. , http://www.resolmet.utcluj.ro).

BIOTEHNOLOGII PENTRU TRATAREA APELOR UZATE SI POLUATE. BIOREMEDIEREA ECOSISTEMELOR ACVATICE. Bioremedierea apelor subterane contaminate i a apelor uzate cu ajutorul microorganismelor (bacterii, cianobacterii, fungi) i plantelor superioare.

STUDIUL MICROFLOREI SI MICROFAUNEI.

Alge verzi (Closterium), diatomee etc.). Crustacee Cladocere (Daphnia) si

Copepode (Cyclops).

Indeprtarea metalelor grele din ape poluate cu ajutorul cianobacteriilor. Din cele 35 de metale considerate periculoase pentru sanatatea umana, 23 au fost catalogate drept metale grele: stibiu, arsen, bismut, cadmiu, ceriu, crom, cobalt, cupru, galiu, fier, aur, plumb, mangan, mercur, nichel, platina, argint, telur, taliu, staniu, uraniu, vanadiu si zinc. Cele mai periculoase substante pentru sanatate sunt considerate plumbul, cadmiul, mercurul si arsenul. Expunerea la concentratii mari din aceste metale poate duce la otraviri, cu grave efecte asupra sistemului nervos sau asupra organelor interne precum plamani, ficat, rinichi si altele. In ultimii ani s-au dezvoltat numeroase tehnici de indepartare a metalelor grele din apele uzate, cu scopul de a scadea cantitatea de ape uzate cu continut de metal rezultat din activitatile industriale precum si pentru a imbunatati calitatea efluentilor. Numeroase tratamente precum precipitarea chimica, coagularea-flocularea, flotarea, schimbul ionic sau filtrarea prin membrane pot fi folosite pentru a indeparta metalele grele din ape uzate contaminate, fiecare metoda avand anumite avantaje si limitari. O modalitate de ndeprtare a metalelor grele prin utilizarea microorganismelor - cyanobacteriilor este deosebit de intens cercetat (Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009). Folosirea microorganismelor pentru indepartarea metalelor grele. Biosorbtia reprezinta proprietatea biomasei microbiene nevii de a acumula ioni ai metalelor grele, proces nesustinut metabolic. In contrast, termenul bioacumulare descrie un proces activ in care metalele grele sunt indepartate in urma unei activitati metabolice a unor organisme vii. In ultimii ani, cercetarea s-a bazat pe mecanisme de biosorbtie deoarece biomasa poate fi utilizata cu succes pentru a indeparta metalele grele din efluentii industriali precum si pentru a recupera metale pretioase din solutii de procesare (http://www.resolmet.utcluj.ro, http://www.dsmz.de/strains/degradtn.htm). Celulele microbiene reprezinta biosorbenti excelenti datorita raportului mare suprafata/ volum pe care-l au si datorita unui numar mare de situsuri de chemo-sorbtie potential active. Cercetarile in domeniul biosorbtiei metalelor grele au condus la identificarea mai multor tipuri de biomase microbiene eficiente in concentrarea acestor metale. Unele tipuri de biomasa sunt deseuri rezultate la fermentari industriale (de ex. bacteria Bacillus subtilis). Alte tipuri de microbi care pot lega metale pot fi recoltate din medii specifice precum lacuri sau mari (anumite tipuri de cianobacterii). Acestea pot acumula cantitati considerabile de metale grele, precum Pb, Cd, U, Cu, Zn, Cr sau altele. Caracteristici generale ale cianobacteriilor. Cianobacteriile reprezinta un grup larg de bacterii Gramnegative, procariote fototrofice caracterizate prin capacitatea de a realiza fotosinteza in prezenta oxigenului dar si autotrofe, ca principala sursa de nutritie. S-a observat ca anumite cianobacterii pot creste pe intuneric pe anumite

substraturi organice sau in conditii anaerobe, realizand fotosinteza in lipsa oxigenului, folosind sulfuri ca si donori de electroni. Aceasta independenta trofica, alaturi de usurinta cultivarii lor, recomanda cianobacteriile in procesele de decontaminare. Utilizarea cianobacteriilor in indepartarea metalelor grele. In ultimii ani s-au publicat multe articole referitoare la capacitatea microorganismelor de a acumula si indeparta metalele grele din ape. Aceste procese pot fi clasificate ca: procese active, metabolice sau procese pasive, nemetabolice. In procesele active, adsorbtia, numita bioacumulare, se datoreaza transportului metalului prin membrana celulara, urmata de acumularea intracelulara in functie de metabolismul celular. In cazul interactiilor fizico-chimice intre metal si gruparile functionale prezente pe suprafata celulei (bazate pe adsorbtia fizica, schimb ionic si complexare), procesul de sorbtie nu depinde de metabolism. Peretele celular, compus din polizaharide, proteine, lipide poate oferi situsuri pentru legarea metalelor (Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009). Cianobacteriile au un perete celular care permite adsorbtia pasiva a unor mari cantitati de metale dizolvate. Pe suprafata peretelui celular exista de fapt grupari functionale precum grupari carboxilat, hidroxil, sulfat, fosfat sau amino. Cationii metalici pot fi luati din mediu de catre gruparile incarcate negativ de pe peretele celular (Fig. 1), cu sarcina negativa prezenta pe straturile polizaharidice care inconjoara peretele celular (Fig. 2) sau cu sarcinile negative ale polizaharidelor eliberate in mediul inconjurator (apa) (Fig. 3), (dupa Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009).

Fig. 1. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative de pe suprafata celulara

Fig. 2. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative de pe straturile polizaharidice exocelulare (dupa Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009). Un numar mare de tipuri de cianobacterii au fost testate in legatura cu capacitatea lor de a indeparta metalele grele (in special Cd, Hg, Ni, Zn sau Pb) din solutii metalice. Tolypothrix tenuis si Calothrix parietina au indepartat cu succes cantitati ridicate de Hg, Scytonema schmidlei, Anabaena cylindrica si A. torulosa au indepartat 96-98% din Cd aflat intr-o solutie de Cd de concentratie 1mg/ l., Gloeocapsa sp., Nostoc paludosum, N. piscinale, N. punctiforme, N. commune, Oscillatoria agardhii, Phormidium molle si Tolypothrix au indepartat 90-96% Pb dintro solutie de Pb de concentratie 1mg/ l. Procesul de legare al metalului are loc prin complexarea ionilor metalici cu materialul polizaharidic, mucilaginos care acopera ceretele celular sau este eliberat de suprafata celulara (Roberto De Philippis, Ernesto Micheletti, 2009.)

Indeprtarea metalelor grele de ctre Cyanobacterii: Resultate obinute cu Cyanobacterii i metale ( Dupa : Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009.
Metal Cyanobacterii / Sorbia (mmol g-1)a sau Eficiena ndeprtrii metalului(%)b Spirulina platensis / 0.0045a,c Spirulina maxima / 0.0145a,c Mastigocladus laminosus / #113 0.0284a,c Anabaena nodosum / 0.087a Anaabena nodosum / 0.81a Anabaena sp. BCC / 2 85b Anabaena variabilis NIES / 23 57b Anacystis nidulans n.r. Aphanocapsa halophytia n.r. Calothrix marchica BCC / 4 57b Calothrix marchica BCC / 6 87b Calothrix parietina TISTR 8093 / 0.70a Calothrix sp. BCC10 / 89b Calothrix sp. TISTR 8130 82b Chlorococcus paris n.r. Cylindrospermum sp. BCC / 20 65b Gloeocapsa sp. BCC / 25 96b Gloeothece magna 3.78a,c Hapalosiphon hibernicus BCC 27 90b Hapalosiphon sp. BCC 30 62b Hapalosiphon welwitschii BCC 34 75b Lyngbya hieronymusii BCC 41 97b Lyngbya spiralis BCC 42 80b Lyngbya taylorii 0.37a Mastigocladus laminosus #113 0.0048a,c Mastigocladus sp. BCC 36 78b Nostoc rivularis n.r. Microcystis aeruginosa f. aeruginosa NIES 44 95.3b Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 1.23a,c Nostoc linckia n.r. Nostoc sp. BCC 50 94b Nostoc commune. BCC 76 69b Nostoc micropicum BCC 77 72b Nostoc piscinale. BCC 47 82b Nostoc punctiforme BCC 48 73b Nostoc punctiforme BCC 49 84b Oscillatoria amoena BCC 53 83b Oscillatoria jasorvensis BCC 56 94b Oscillatoria agardhii BCC 52 90b Phormidium angustissimus BCC 68 87b Phormidium molle BCC 7193 95b Phormidium valderianum BDU 30501 83b Rivularia sp. BCC 80 88b Spirulina platensis 0.0035a,c Spirulina maxima 0.0017a,c Spirulina platensis 0.33a Spirulina platensis 1.07a Spirulina vulgaris 1.00a Stigonema sp. BCC 90 89b Synechococcus sp. PCC 7942 0.06a Tolypotrix tenuis TISRT 8063 0.80a Tolypotrix tenuis 0.18a Tolypotrix tenuis BCC 100 53b Cyanobacterii / Sorption (mmol g-1)a sau Eficiena ndeprtrii metalului(%)b Oscillatoria angustissima / 0.26a Spirulina sp. / 0.0002a Phormidium valderianum BDU / 30501 n.r. Aphanocapsa halophytia 0.29a Cyanospyra capsulata 0.36a Cyanothece CE 4 1.83a Cyanothece ET 5 0.59a Cyanothece PE 14 0.26a Cyanothece TI 4 1.29a Cyanothece VI 13 0.93a Cyanothece VI 22 1.08a Cyanothece 16Som 2 3.77a Nostoc PCC 7936 0.07a Spirulina sp. 0.19a Synechococcus sp. PCC 7942 0.10a Phormidium laminosum 94.8b Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 2.84a,c Aphanocapsa halophytia n.r. Cyanospyra capsulata 1.41a Cyanothece CE 4 1.24a Cyanothece ET 5 0.24a Cyanothece PE 14 0.19a Cyanothece TI 4 0.62a Cyanothece VI 13 0.39a Cyanothece VI 22 0.59a Cyanothece 16Som 2 0.96a Lyngbya taylorii 0.65a Microcystis aeruginosa 4.26a Nostoc PCC 7936 0.032a Phormidium laminosum 85b Spirulina sp. 0.003a Synechococcus sp. PCC 7942 0.05a Synechocystis sp. 3.23a

Al

Co

Cd

Cr

Fe Mn Ni

Pb

Anabaena sp. BCC 2 29b Anabaena variabilis NIES 23 48.92b Aphanothece halophytica 22b Calothrix sp. BCC 8 59b Calothrix sp. BCC 10 13b Calothrix sp. TISTR 8130 86b Calothrix sp. n.r. Cylindrospermum sp. BCC 20 52b Gloeocapsa sp. BCC 25 96b Hapalosiphon hibernicus BCC 27 13b Hapalosiphon welwitschii BCC 34 47b Lyngbya heironymusii BCC 41 80b Lyngbya spiralis BCC 42 73b Lyngbya taylorii 1.47a Mastogocladus sp. BCC 36 29b Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 1.50a,c Nostoc commune BCC 76 94b Nostoc piscinale BCC 47 94b Nostoc punctiforme BCC 48 98b Nostoc punctiforme BCC49 51b Oscillatoria agardhii BCC 52 73 96b Oscillatoria amoena BCC 53 89b Oscillatoria jasorvensis BCC 56 89 85b Phormidium angustissimum BC 68 77b Phormidium molle BCC 71 90b Rivularia sp. BCC 80 76b Spirulina maxima 84b Spirulina platensis 35b Spirulina platensis 0.08a Spirulina, sp. 0.00005a Stigonema sp. BCC 90 52b Stigonema sp. BCC 92 59b Synechococcus sp. PCC 7942 0.15a Tolypothrix tenuis TISTR 8063 88b Tolypothrix tenuis BCC 100 90b Tolypothrix tenuis TISTR 8063 0.15a Anabaena variabilis NIES 23 67.7b Anacystis nidulans n.r. Aphanocapsa halophytia n.r. Aphanothece halophytia 2.03a Chroococcus paris n.r. Lyngbya taylorii 0.49a Mastigocladus laminosus #113 0.00856a, Microcystis aeruginosa f. fl os-aquaeC3-40 1.23a,c Nostoc linckia n.r. Nostoc rivularis n.r Oscillatoria angustissima 0.33a Oscillatoria angustissima 9.81a Phormidium laminosum 78.2b Spirulina maxima 0.0023a,c Spirulina platensis 0.0046a,c Spirulina platensis 0.11a Tolypotrix tenuis TISTR 8063 0.14a

Hg

Anabaena sp. BCC 2 68b Calothrix marchica BCC 4 84b Calothrix sp. BCC 8 86b Calothrix sp. BCC 10 92b Calothrix parietina TISTR 8093 50b Calothrix sp. TISTR 8130 40b Cylindrospermum sp. BCC 20 83b Gloeocapsa sp.BCC 25 50b Hapalosiphon hibernicus BCC 27 84b Hapalosiphon welwitschii BCC 34 85b Lyngbya hieronymusii BCC 41 92b Lyngbya spiralis BCC 42 96b Mastigocladus laminosus #113 0.005a,c Mastigocladus sp. BCC 36 89b Nostoc sp. BCC 50 86b Nostoc commune sp. BCC 76 43b Nostoc micropicum BCC 77 26b Nostoc piscinale sp. BCC 47 22b Nostoc punctiforme sp. BCC 48 66b Nostoc punctiforme sp. BCC 49 49b Oscillatoria amoena BCC 53 12b Oscillatoria jasorvensis BCC 5689 89b Oscillatoria agardhii BCC 52 73b Phormidium angustissimus BCC 68 74b Phormidium molle BCC 71 93b Rivularia sp. BCC 80 86b Spirulina maxima 0.00125a,c Spirulina platensis 0.00055a,c Stigonema sp. BCC 90 92b Stigonema sp. BCC 92 94b Tolypotrix tenuis BCC 100 94b

Sn Cu

Zn

Aphanocapsa halophytia 82b Anabaena variabilis NIES 23 35.4b Anacystis nidulans n.r. Aphanocapsa halophytia n.r. Calothrix sp. n.r. Chroococcus paris n.r. Cyanospyra capsulata PCC 9502 3.65a Cyanospyra capsulata 1.97a Cyanospyra capsulata 2.25a Cyanothece CE 4 0.52a Cyanothece ET 5 1.78a Cyanothece PE 14 0.16a Cyanothece TI 4 050a Cyanothece VI 13 0.95a Cyanothece VI 22 0.98a Cyanothece 16Som 2 3.17a Gloeothece sp. PCC 6909 0.41a Microcystis aeruginosa f.flos-aquae C3-40 4.1a Nostoc PCC 7936 1.465a Oscillatoria angustissima 4.22a Phormidium laminosum 97.5c Spirulina, sp. 0.19a Synechococcus sp. PCC 7942 0.18a Tolypotrix tenuis TISTR 8063 0.18a

Microorganisme care realizeaza indepartarea metalelor prin oxidari si utilizari biologice (dupa DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany, www.dsmz.de/strains/degradtn.htm)
Substanta Arsenate AsO43 Sulfura de carbon CS2 Denumirea Chrysiogenes arsenatis Sulfurospirillum arsenophilum Methanococcus maripaludis Methanothermobacter marburgensis Thiobacillus thioparus Acetitomaculum ruminis Acetohalobium arabaticum Bacillus schlegelii Bacillus sp. Carboxydothermus restrictus Clostridium formicaceticum Moorella thermoacetica

Monoxidul de carbon

Carbonat Cyanamide CN2H2 Fe(III) Fier feros Fe(II) FeSO4 Hydrogen sulfurat H2S

Mn(IV)

Nitrate Oxid de azot NO Pirita FeS2 Sulfat Sulfide (S2-) H2S, NaHS, Na2S, Ag2S, CdS etc.

Sulfonai Sulf

Thiosulfate (S2O32),

Mycobacterium sp. Bryantella formatexigens Myrothecium verrucaria Desulfuromonas palmitatis Thermoterrabacterium ferrireducens Acidithiobacillus ferrooxidans Leptospirillum ferriphilum Alicyclobacillus disulfidooxydans Blastochloris sulfoviridis Rhodovulum euryhalinum Rhodovulum sulfidophilum Desulfuromonas palmitatis Geobacter bremensis Geobacter pelophilus Paracoccus solventivorans Pseudomonas aeruginosa Alicyclobacillus disulfidooxydans Desulfomicrobium escambiense Pandoraea norimbergensis Paracoccus pantotrophus Rhodovulum euryhalinum Rhodovulum sulfidophilum Thermithiobacillus tepidarius Xanthobacter tagetidis Clostridium pasteurianum Acidianus ambivalens Acidianus brierleyi Acidianus infernus Acidithiobacillus thiooxidans Desulfomicrobium baculatum Desulfomicrobium norvegicum Desulfurococcus amylolyticus Desulfurococcus mobilis Desulfurococcus mucosus Desulfuromonas acetoxidans Geobacter bremensis Geobacter pelophilus Pandoraea norimbergensis Pyrococcus furiosus Pyrococcus woesei Staphylothermus marinus Thermithiobacillus tepidarius Thermococcus celer Thermofilum pendens Thermoplasma volcanium Thermoproteus neutrophilus Thermoproteus tenax Thiobacillus sp. Thiomicrospira thyasirae Blastochloris sulfoviridis Chlorobium limicola Prosthecochloris vibrioformis Hydrogenophaga palleronii Hydrogenophaga pseudoflava Marichromatium purpuratum Pandoraea norimbergensis Paracoccus pantotrophus Rhodovulum sulfidophilum Thermithiobacillus tepidarius Xanthobacter tagetidis

Sistematica cianobacteriilor. Grupul 11 (Bacterii fototrofe oxigenice Subgrupul 1 (Ordinul Chroococcales): Synechococcus

Synechococcus, component principal al planctonului marin si dulcicol

Synechocystis

Subgrupul 2(Ord.Pleurocapsales):

Pleurocapsa Subgrupul 3 (Ord.Oscillatoriales) Oscillatoria

Subgrupul 4 (Ord.Nostocales): A (Fam. Nostocaceae), Nostoc

B (Fam. Scytonemataceae), Scytonema

Scytonema

Scytonema endolithicu

C (Fam. Rivulariaceae): Calothrix

Subgrupul 5 (Ord. Stigonematales): Stigonema

Calothrix desertica: trichomi (filamente) Peter v.Sengbusch-

Principalele tipuri nutritive de bacterii n funcie de natura sursei de energie, sursei de C, donatorii de H Tipul nutritiv Sursa de energie Sursa de carbon Donatorii de H Exemple (de metabolism) Fotolitoautotrofe Chimiolitoautotrofe Radiaii luminoase CO2 H2O, Cianobacterii, H2S, Chromatiaceae S, H2 Chlorobiaceae NH3, Nitritbacterii, NO2-, Nitratbacterii, H2S, Thiobacillus, S, Ferobacterii, H2, Bacterii metanogene Fe2+ Compui organici Rhodospirillaceae Compui organici Bacillus, Clostridium, Pseudomonas Lactobacillus etc.

Fotoorganoheterotrofe Chimioorganoheterotrofe

Oxidarea unor compui anorganici H2S, S, NH3, H2, Fe2+etc. Radiaii luminoase Oxidarea unor compui organici

CO2

Compui organici Compui organici

Bioremedierea prin zone umede construite (asociaii de plante acvatice, fungi, microorganisme) pentru tratarea apelor uzate sau a eluatelor din soluri contaminate. Apele poluate cu metale grele pot fi eficient tratate utiliznd iazuri de decantare artificiale sau sisteme de zone umede. ndeprtarea metalelor n aceste sisteme includ urmtoarele mecanisme: filtrarea i sedimentarea particulelor n suspensie, adsorbia, ncorporarea n materialul vegetal, precipitarea prin procese biogeochimice mediate de microorganisme. Utiliznd un habitat ingineresc i o biocenoz construit ca instalaii sau zone de inundare artificiale (zone umede construite - constructed wetlands) se poate realiza decontaminarea prin bioremediere a apelor subterane poluate, a apelor uzate i a eluatelor din soluri contaminate. Metoda poate fi o alternativ promitoare i economic fat de tehnologiile de pompare i tratare sau fa de barierele reactive. Astfel implementarea unui habitat ingineresc de zone umede constriuite exploatnd principiile degradrii biologice sunt aplicabile i in situ, la scar larg sau medie (n instalaii wetlands mobile) sau n scopul reducerii nivelului de poluare). S-au investigat beneficiile proceselor anaerobe de reducere a sulfailor, reducere a cromului etc.), pentru fixarea i precipitarea metalelor grele i a unor metaloizi (As). S-a demonstrat importana biotehnologiile wetland folosite pentru fixarea/recuperarea metalelor grele din apele de min, din soluiile rezultate din depozitele de deeuri, i din efluenii industriali (Kuschk i colab., 2005). Indeprtarea metalelor grele prin bioreactoare i zone umede construite a constituit obiectivul cercetrilor finanate de NATO Collaborative Linkage Grant No. EST.CLG.978918 (2003-2004), cu partneri: - UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle (Leipzig, Germany), Department of Bioremediation and Centre for Environmental Biotechnology (UBZ) at the UFZ; - Wageningen University (Wageningen, The Netherlands); Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms of RAS (Pushchino, Russia), - Institute for Biology of Inland Waters of RAS (Borok, Russia), (dupa Kuschk i colab., 2005).

Uniti de plante i ape uzate,cu crom.

Uniti mobile de inundare cu filtru orizontal . Uniti cu filtru orizontal n meso-scale experiment wetland pentru bioremediere (dupa Kuschk i colab., 2005).

Cercetrile proiectului au fost concentrate asupra proceselor biologice capabile de ndeprtarea metalelor, n special a cromului, din apele uzate. Principalele rezultate obinute (dupa Kuschk i colab., 2005), au cuprins: 1. Cercetri asupra gamei largi de procese fizice, chimice i biologice care contribuie la detoxificarea de metale n zone umede construite i n filtre de sol plantate care asigur un sistem heterogen de gradieni coninui n ambele zone, aerobe sau anaerobe.

2. n laborator, la scri diferite, s-au cercetat sisteme de zone umede (pe suprafee orizontale i n sisteme cu fluxuri subterane, sau n iaz cu covor de plante plutitoare; toate sistemele, plantate cu Juncus effusus- rogoz, pipirig), au fost testate pentru rata lor de ndeprtare a cromului. Cele mai bune rezultate s-au obinut n sisteme cu fluxuri subterane. Se consider c acest rezultat poate fi atribuit numai bacteriilor anaerobe stabilite n sistem, Juncus effusus avnd o capacitate sczut de adsorbie pe pietri i o rata sczut de ndeprtare pentru crom, n sistem hidroponic. 3. Au fost mbogite culturile mixte de bacterii reductoare pentru crom, constnd din diferite specii de bacterii anaerobe i facultativ anaerobe. n consoriu au avut loc o succesiune de procese reducere bacterian i, dup ce cromul a fost precipitat, n sistem s-a acumulat numai sulfura. 4. O bacterie reductoare pentru crom a fost izolat i caracterizat. Prezena nitratului a ridicat specific rata de reducere a Cr(VI) i numrul de celule. 5. Furnizarea de substrate organice promoveaz dezvoltarea condiiilor anoxice i activitatea bacteriilor metal reductoare i sultat reductoare n consoriul de bacterii i n zonele umede construite. 6. Experienele au testat efectul diferiilor contaminani (compui organici i metale grele) asupra plantelor in condiii de ser. S-au cultivat diferite specii de plante de ap emergente (helofite), pstrate n ser pe timpul iernii. Principalele specii cultivate : Acorus calamus (obligean), Glyceria maxima (mana de ap), Iris pseudacorus (stnjenelul galben), Juncus effusus (rogoz,pipirig), Phragmites australis (stuf, trestie), Typha latifolia (papura cu frunza lat), Typha angustifolia (papura cu frunza ngust)

Acorus calamus (obligean)

Glyceria maxima (mana de ap)

Iris pseudacorus (stnjenelul galben)

Juncus effusus (rogoz, pipirig) Phragmites australis (stuf). Typha latifolia. Typha angustifolia (papura)

Instalaia experienelor cu plante emergente de ap. Sera i containerele de cultivare (dupa Kuschk i colab., 2005).

BIOREMEDIEREA ECOSISTEMELOR TERESTRE. Rolul microflorei in depoluare. Grupe ecofiziologice de bacterii. Studiul microbiotei depoluante. Depoluarea biologica a solului prin biodegradarea substanelor organice din sol. Bioremedierea solurilor poluate cu metale grele, dioxid de sulf, hidrocarburi, compusi organici sintetici. RECONSTRUCIA ECOLOGIC. Tehnologii de bioremediere a haldelor de steril, a iazurilor de decantare, a deeurilor industriale. Tehnologii de bioremediere a deseurilor urbane, a reziduurilor de la termocentrale. Asociaii de arbori, arbuti, plante ierboase, microorganisme utile n reconstrucia ecologic. Tehnologii de bioremediere a haldelor de steril, iazurilor de decantare, deeurilor industriale. Efectul distructiv al factorilor perturbatori i al dezastrelor ecologice asupra biocenozelor naturale sau antropizate, impune reconstrucia ecologic a zonei afectate sau denudate de vieuitoare, n scop ambiental, sanogenetic (parcuri, zone verzi), peisagistic, agricol sau silvic, antierozional sau protectiv fa de schimbrile climatice i tehnologice actuale i de perspectiv. Reconstrucia ecologic, aplicat pe substrate abiotice, biotopuri poluate, contaminate, halde de steril, materiale de descopertare si alte reziduuri rezultate din exploatari miniere si din alte activitati industriale, agricole etc., opereaz cu metode tehnice i biologice care pot asigura ecogeneza sau sucesiunea ecologic secundar. Ecogeneza presupune: - nfiinarea fito i zoo-cenozelor de pionierat, concomitent cu - pedogeneza, refacerea microbiotei, refacerea humusului i proprietilor solului; - reconstrucia fito i zoocenotic,cultivarea, colonizarea speciilor, stabilizarea relaiilor interspecifice favorabile productivitii i echilibrului biocenotic al noului ecosistem. Funciile mediogene i de reglaj ale fitocenozelor asigur reconstrucia ecologic : fixarea reliefului antropic, reglajul pedogenezei i protecia solului, formarea zoocenozelor,conservarea faunei, reglajul microclimatului, intercepia precipitaiilor i reglajul hidric, atenuarea vitezei vntului, diminuarea scurgerilor de suprafa, a eroziunii de profunzime (alunecri de teren, ravene, ogae), aluviuni etc. (Cristea, 1993, Cristea, Gafta, Pedrotti, 2004). Substratul abiotic care necesit reconstrucia ecologic rezult prin alterarea profund a mediului, n urma diferitelor activiti economice, n industria extractiv i n construcii, prin acumularea sterilului dup extragerea minereului, prin realizarea iazurilor de decantare, a autostrzilor, barajelor, lacurilor de acumulare, etc. Colonizarea vegetaiei pe substratul abiotic se realizeaz n etape de ecogenez: 1. Substratul iniial abiotic, se populeaz cu speciile-pionier, care au o mare amplitudine de toleran ecologic la variaiile factorilor ambientali. La instalarea acestei vegetaii, concurena interspecific este mic sau nul. Se formeaz asociaii alctuite dintr-un numr mic de specii, care fixeaz panta, ca: Rumex scutatus cu Galeopsis angustifolia sau Rumex cu Tussilago farfara (podbal), pe pantele nordice, umede

Rumex scutatus (macris de munte) Polygonaceae

Galeopsis angustifolia Labiatae

Tussilago farfara (podbal) Asteraceae/Compositae

Pe pantele mobile se instaleaz vegetaie cu sistem radicular puternic ramificat de suprafa i de adncime, care rezist la alunecrile de teren, si curpenul de pdure-Clematis vitalba.

Ranunculaceae - Clematis vitalba

From: Flora londinensis by William Curtis. London, the author, [1775-] 1777-1798, (plate 244).

Colonizarea i fixarea reliefului antropic de ctre fitocenoze depinde: de capacitile adaptative ale comunitilor de plante, de variabilitatea ecotipic (biodiversitatea genetic) a speciilor componente, de proprietile fizico-chimice ale materialului de baz (Cristea, 2004). Pe sterilul cu coninut de metale, se instaleaz specii metalofite specializate pentru seleniu o serie de Leguminoase, pentru stroniu Graminee, pentru zinc specii calaminare etc.) (Fabian, Onaca, 1999).

Thlaspi calaminare (pungulita) Brassicaceae

Viola lutea ssp. calaminaria

n sprijinul ideii de reconstrucie ecologic (Cristea, 1990), pe voluminoasele halde de steril, acumulate la minele de crbune, de sare, de metale feroase i neferoase, la termocentrale i alte activiti industriale, argumentele se refer la: toxicitatea sterilului, la aspectul inestetic, la pericolul alunecrii reliefului antropic, la necesitatea reintegrrii lor n circuitul economic.

RECONSTRUCTIA ECOLOGICA. Iazul de decantare Anie, rezultat din sterilul de la staia de flotare a Expl.Miniere Rodna (jud. Bistria-Nsud) a fost infiinat n 1973. Sterilul din iaz era lipsit de substante organice, avea un pH de 8,5 i coninea metalele grele Pb, Mn, Fe, Cu, Zn ce depeau valorile prevazute de normative, sulf, arseniu, cadmiu, magneziu etc. Aceste condii impiedic dezvoltarea spontan a vegetaei, instalarea microbiocenozei i afecteaz sntatea populaiei. Dupa inchiderea activitii, pe sterilul din iazul de decantare s-au amenajat 11 nivele, cu terase de 3,8-4,0 m lime i taluzuri de 2,5 m nlime i nclinaie 45-50o. Pentru declanarea fitocenogenezei, s-a efectuat consolidarea cu arocament la baz, copertarea cu glii nierbate, uniform sau n romburii plantri:Pinus nigra-Robinia pseudacacia

Pinus nigra

Robinia pseudacacia La baza iazului, n condiii de umiditate crescut, s-a instalat spontan o vegetaie lemnoas de arini, (asociaia Aegopodio Alnetum glutinosae). Vegetaia ierboas, instalat pe taluzuri aparine la 2 asociatii: Festuco rubraeAgrostietum tenuis i Agropyretum repentis (syn. Agropyro-Convolvuletum arvensis ) S-a constatat c instalarea vegetaiei se poate realiza n timp optim prin acoperirea cu un strat de minimum 10 cm de sol, ceea ce devanseaz procesul de cenogenez cu cel puin dou-trei decenii (Cristea, 1990).

Arin negru (Alnus glutinosa)

Aegopodium podagria (piciorul cprii)

Festuca rubra (piu rou)

http://www.oardc.ohio-state.edu/seedid/images/Festuca_rubra_subsp._rubra_2.jpg/ http://www.biopix.dk/Temp/

Agrostis tenuis (iarba cmpului)

Agropyrum repens (pirul)

Convolvulus arvensis (volbura)

RECONSTRUCTIA ECOLOGICA a haldelor de steril i iazurilor de decantare n zona miniera Baia Bora

Etape in reconstructia ecologica la iazul de decantare Colbu 2010 (Baia Borsa). (Foto: student Danci Ionel ISBE 4 )

Reconstructia ecologica si reimpdurirea haldelor de steril din zona Baia Borsa, 2010. (Foto: student Danci Ionel ISBE 4 )

BIOTEHNOLOGII -ECOTEHNOLOGII APLICATE IN AGRICULTURA. PERDELELE AGROFORESTIERE DE PROTECTIE ANTIEROZIONALA I DEZVOLTAREA DURABIL A AGRICULTURII N CENTRUL TRANSILVANIEI, N CONDIIILE NCLZIRII I ARIDIZRII, A SCHIMBARILOR CLIMATICE ACTUALE. Rolul ecotehnologiei agroforestiere de protecie n bioremedierea terenurilor agricole deteriorate, n limitarea poluarii cu insecticidelor, in combaterea biologica a daunatorilor, n agricultura ecologic.

Ferma cu perdele agroforestiere antierozionale Boldut SCDA Turda

(Foto: 2008, ing.Adina Iva).

Foto: 30.10.2008, ing. N.Tritean)

(Imagine SPOT, Asist. Drd. Cristian Malos).

Aspecte ale fermei cu perdele agroforestiere de protectie antierozionale de la Cean-Boldu (SCDATutda) (Foto: 25 10 2008 ing R erbnescu)

Experienele de plantare a perdelelor agroforestiere antierozionale s-au facut la ferma Ceanu de catre Institutul de cercetri silvice, cu concursul statiunii experimentale agricole Campia Turzii. Pe terenul fermei Ceanu, s-au instalat in anii 1951-1953 un numar de 12 perdele de protectie experimentale, cu dimensiuni, compozitie si structura diferite de la o perdea la alta, in lungime totala de 10.440 m, ocupand o suprafata plantata de 16,72 ha si un numar de 16 parcele experimentale de impadurire in terenuri degradate, in suprafata totala de 4,00 ha. Tipurile de perdele i schemele de amestec.
Perdeaua 1 ( de hotar, de 11 m lime) vezi harta: In rndurile 1 si 7: corcodu Prunus cerasifera, arbust rndurile 2 si 6: specii de Quercus Quercus spp., pure i n amestec cu arbuti i cu specii de nsoire, n diferite variante. Perdeaua 2 ( de hotar, de 16 m lime): n rndurile 1 i 15 : prun Prunus sylvestris i mr Malus sylvestris, arbust (neplantat); in randurile cu so 2 14: clocoti Staphylea pinnata; n rndurile 3 i 13: ulm de cmp Ulmus minor i ulm de Turkestan Ulmus pumilla; 5, 7, 9 i 11 : stejar pedunculat Quercus robur, paltin de munte Acer pseudoplatanus. Perdeaua 3 ( la margine de drum public, de 11 m lime). n rndurile 1 i 7: un cire Cerasus avium (1), patru aluni Corylus avellana (4); 2, 4, 6: stejar pedunculat Quercus robur; 3 i 5: paltin de munte Acer pseudoplatanus, clocoti Staphylea pinnata. Perdeaua 4 ( la margine de drum public, de 16 m lime): n rndul 1 ( spre cmp) : ulm de cmp Ulmus minor, arbust ( neplantat): Rndurile cu so de la 2-14 : clocoti Staphylea pinnata ; fr so de la 3-13 : stejar rou Quercus rubra,, frasin comun Fraxinus excelsior; n rndul 15 ( spre drum) : pducel Crataegus monogyna. Perdeaua 7 ( antierozional i de protecie de 11 m lime): ca perdeaua 3, nsa n rndurile 3 i 5, n loc de paltin de munte sunt introduse celelalte acerinee, pe variante de cte 100 m lungime. Perdeaua 8 ( antierozional , de 17 m lime): n rndurile 1 i 11: corcodu Prunus cerasifera,trei arbuti; cu so 2-10: stejar pedunculat Quercus robur, n variante, cu i fr arbuti; 3, 5, 7, 9: paltin Acer sau arbust (pure), sau paltin cu arbust, pe variante. Perdeaua 9 ( antierozional , de 11 m lime): n rndul 1 ( spre curte): pr Pirus piraster, alun Corylus avellana; n rndurile 2, 4 i 6 : frasin comun Fraxinus excelsior; snger Cornus sanguinea; 3 i 5: ulm de cmp Ulmus minor, snger Cornus sanguinea; rndul 7 ( spre cmp): corcodu Prunus cerasifera, pducel Crataegus monogyna. Perdeaua 13 ( antierozional, de 12 m lime): n rndurile 1 i 11 : cire Cerasus avium, agri Ribes spp; 2 i 10: stejar pedunculat Quercus robur, paltin de munte Acer pseudoplatanus; 4, 6 si 8: stejar pedunculat Quercus robur, paltin de munte Acer pseudoplatanus; 3, 5, 7, 9 : lemn cinesc Ligustrum vulgare.

Perdeaua 14 ( antierozionala, de 16 m latime): In randurile 1 si 15: cires Cerasus avium,, coacaz Ribes grossularia; 2, 8 si 14: stejar pedunculat Quercus robur, frasin comun Fraxinus excelsior ; 4, 6, 10 si 12: stejar pedunculat Quercus robur, paltin de munte Acer pseudoplatanus; fara sot 3-13: lemn cainesc Ligustrum vulgare. Perdeaua 15 ( antierozionala, 22 m latime): In randurile 1 si 21: cires Cerasus avium, coacaz Ribes grossularia; 2, 8, 10, 12, 16, 18: stejar pedunculat Quercus robur, paltin de munte; fara sot 3-19: lemn cainesc Ligustrum vulgare. Perdeaua 17 ( de umezire, pe coama, de 22 m latime): In randurile 1 si 21: macies Rosa canina; 2 si 20: mar paduret Malus sylvestris; fara sot 3-19: lemn cainesc Ligustrum vulgare; 4 si 18: ulm de Turchestan Ulmus pumilla; 6 si 16: paltin de camp Acer platanoides; 8, 10, 12, 14: stejar pedunculat Quercus robur, visin turcesc Padus mahaleb. Perdeaua 18 ( antierozionala, de 16 m latime): In randurile 1 si 15: cires Cerasus avium, arbust ( neplantat); 2, 6, 10, 14: stejar pedunculat Quercus robur, paltin de camp Acer platanoides si paltin de munt pseudoplatanus (pe variante); 3-5, 7-9, 11-13: clocotis Staphylea pinnata. Importana perdelelor agroforestiere pentru dezvoltarea agricol durabil. Schimbrile actuale ale climatului, sistemelor exploataiilor agricole i tehnologiilor de cultur determin modificri agroecologice importante. Acestea privesc efectele grave produse asupra solului i asupra dezvoltrii plantelor de cultur prin greelile tehnologice, prin poluare, secet i ari, furtuni, torente, alunecri de teren, inundaii etc., precum i schimbrile structurii i abundenei entomofaunei duntoare, care pot duce la distrugerea agroecosistemelor. n cadrul sistemelor de dezvoltare agricol durabil, se contureaz tot mai puternic necesitatea implementarii rezultatelor cercetrii privind plantarea perdelelor agroforestiere antierozionale, cu numeroasele lor efecte protective pentru culturi, stabilitate i echilibru agrobiocenotic, pentru biodiversitate i evitarea polurii cu pesticide etc. La noi n ar, aceast metod de protecie a solului i a culturilor agricole prin perdele forestiere a fost iniiat din anul 1861 i dezvoltat n anii cu mari calamiti, secete excesive, furtuni de praf (1890, 1935, 1946), concretizndu-se pn n anul 1961 n plantarea a peste 6000 ha de perdele forestiere, iar n anii 1970-1975 a nc 1700 ha pe nisipurile din sudul Olteniei (Popescu, 1993). Eficiena perdelelor forestiere este recunoscut n lupta contra secetei i a altor adversiti legate de clim i relief: furtuni, torente, viscole, alunecri de teren, pentru prevenirea i combaterea, proceselor masive de degradare ale solului dar i pentru protejarea i dezvoltarea fondului natural de entomofagi. Protejnd culturile agricole, perdelele forestiere au un rol decisiv prin efectul direct asupra microclimatului; oprirea alunecrilor de teren i a torentelor locale; creterea i conservarea fertilitii solului. Toate aceste efecte ale prezenei perdelelor forestiere de protecie contribuie i la protejarea i dezvoltarea diversitii florei i faunei. Un impact special n dezvoltarea dinamic a agroecosistemului l are rolul perdelelor forestiere n conservarea particular a faunei de artropode utile, cu efect n stabilizarea echilibrului entomocenotic. Sistemul de agricultur cu perdele forestiere se nscrie n strategia i legislaia modern a rii. Conform cerinelor integrrii europene, managementul integrat de mediu pentru dezvoltarea agricol durabil include conservarea i utilizarea durabil a bioresurselor i biodiversitii, reconstrucia agroecosistemelor, obiective care se pot atinge prin plantarea perdelelor agroforestiere (Ordonanta de urgen a Guvernului 195/2005 privind protectia mediului, Legea nr 289/2002 privind perdelele forestiere de protecie, Legea nr. 46/2008. Codul silvic). In domeniile utilizrii durabile a resurselor naturale i a conservrii biodiversitii, n centrul Transilvaniei, cercetrile efectuate la Staiunea de Cercetare-Dezvoltare Agricola Turda au demonstrat faptul c sistemul de agricultur cu perdele forestiere de protecie antierozional asigur o buna dezvoltare a biodiversitii, asigur protecia antierozional i a microclimatului, fiind i deosebit de bogat n faun de artropode entomofage auxiliare. Sub aspectul utilizrii biodiversitii n limitarea biologic natural a duntorilor, importana protectiv i calitativ a sistemului de agricultur cu perdele agroforestiere s-a evideniat ca model de tehnologie durabil i nepoluant, n comparaie cu sistemul de agricultur n cmp deschis, unde n perioada 1990-2008, condiiile agroecoclimatice i atacul duntorilor din biocenozele cerealiere au reprezentat reale situaii de risc i calamitate, necesitnd aplicarea tratamentelor cu insecticide (Malschi, 2005, 2007, 2008).

Agroecositemul cu perdele forestiere de protecie de la Cean-Boldu reprezint un model de tehnologie ecologic pentru combaterea duntorilor i pentru dezvoltarea durabil a culturilor cerealiere, n zona de dealuri din centrul Transilvaniei. Situat n partea de sud-vest a Cmpiei Transilvaniei, Staiunea de Cercetare-Dezvoltare Agricol Turda este beneficiara fermei de la Cean-Boldu pentru culturi de cmp, amenajate n sistem antierozional prin reeaua de perdele forestiere de protecie, plantate din anul 1952. Ferma cuprinde 342 hectare de teren agricol i pajiti, ncadrate de cele 14 hectare de perdele alctuite din circa 36 specii arborescente i arbustive, pstrnd aproape complet planul iniial de plantare i fiind, n prezent, singura de acest fel din Romnia. Prin echilibrul evident al agrosistemului cerealier, ferma este un simbol privind preocuprile cercetrii i practicii agricole n direcia proteciei culturilor i a combaterii eroziunii solurilor (Popescu, 1993, Lupe, Sprchez, 1953) precum i a conservrii faunei de artropode utile (Malschi, Mustea, 1995; Malschi, 2004, 2005, 2007). n ferma de culturi de cmp de la Cean-Boldu s-au nregistrat o mare diversitate a speciilor entomofage i combaterea biologic natural a insectelor duntoare din culturile cerealiere protejate de perdele forestiere (Malschi i Mustea, 1995, Malschi, 2007). Cercetrile au demonstrat avantajele practicrii agroecosistemului cu perdele forestiere, care realizeaz: stabilizarea echilibrului entomocenotic, prin care duntori importani (gndacul ovzului - Oulema melanopus, mutele cerealelor, tripsul grului - Haplothrips tritici, afidele etc.) sunt limitai i meninui la niveluri sub pragurile economice de dunare; eficiena ecologic n lupta mpotriva duntorilor i invaziilor lor masive, prin efectul de protejare, dezvoltare i conservare a fondului natural de entomofagi; economicitatea, rezultat din evitarea combaterii cu insecticide (Malschi, Mustea, 1995, Malschi, 2005, 2007). Reeaua de perdele agroforestiere antierozionale de la Cean-Boldu este amplasat ntr-o zon tipic a Cmpiei de coline joase ale Transilvaniei, avnd caracteristicile naturale, geomorfologice, litologice, climatice, edafice i fitocenotice ale acesteia. Relieful este slab frmntat, cu altitudini ntre 280 i 460 m i o nclinare moderat de la nord-est spre sud-est. Unele poriuni sunt abrupte sau chiar prezint rupturi verticale i alunecri ntre perdelele 1, 3, 8 i n punile din vest, pe treimea superioar a versanilor. Valorile multianuale privind temperatura medie i precipitaiile anuale sunt de 8,6 oC i 509,2 mm. Solurile dominante sunt cernoziomuri (n 9 tipuri i 20 de subtipuri) i prezint diferite procese de degradare: eroziuni, alunecri, coluvionri. Se nregistreaz (dup Popescu, 1993): eroziune superficial pe pantele cu nclinare de 3-5o, unde orizontul de humus are 40-50 cm grosime; eroziune avansat, pe nclinrile de 6-12o, unde orizontul de humus are 23-35 cm iar pe pantele cu nclinri de 16-30o solurile sunt complet erodate. Terenul arabil protejat ns de perdele forestiere prezint o bun evoluie i conservare a calitii solului. Vegetaia este specific pentru limita inferioar a zonei forestiere cu silvostepa. Perdelele antierozionale sunt alctuite din amestecuri a peste 36 de specii arborescente i arbustive. Rndurile marginale sunt formate din specii pomicole i arbuti fructiferi: cire (Cerasus avium), mr (Malus silvestris), pr (Pirus piraster), porumbar (Prunus spinosa), pducel (Crataegus monogyna), mcie (Rosa canina), coacz (Vaccinium spp.), alun (Corylus avellana), lemn cinesc (Ligustrum vulgare), clocoti (Staphylaea pinnata), soc (Sambucus nigra) .a. Rndurile interioare ale perdelelor sunt formate din specii forestiere avnd la baz stejarul (Quercus robur), ulmul de Turchestan (Ulmus sp.), salcmul (Robinia pseudacacia), paltinul de cmp (Acer platanoides), paltinul de munte (Acer pseudoplatanus), frasinul (Fraxinus excelsior), teiul (Tillis cordata) i salcia (Salix caprea), (Lupe, Sprchez, 1953 Popescu, 1993). Pajitile i benzile de ierburi marginale conin specii caracteristice zonei i specii cu atractivitate speciala pentru entomofagi (Pastinaca sativa, Daucus carota, Achillea millefolium, Hypericum perforatum, Tanacetum vulgare, Cichorium inthybus, Sinapis arvensis, Papaver rhoeas, Sonchus arvensis, Veronica persica, Matricaria chamomilla, Myosotis arvensis, Viola arvensis, Lolium perene, Plantago major etc.). Culturile de cmp sunt cele din rotaia cerealier, de regul o rotaie de trei ani cu gru de toamn, orz de primvar, porumb, fasole, leguminoase furajere - trifoi, lucern, amplasate n sole de 9-16 ha, maxim 22 ha. Aceste condiii ecologice i mai ales structura diversificat a florei n agroecosistemul cu perdele forestiere constituie un mediu deosebit de favorabil pentru dezvoltarea faunei de artropode utile. Observaiile multianuale (Malschi i Mustea, 1993) nregistreaz prezena tuturor grupelor importante de artropode entomofage prdtoare: Aranea; Dermaptera (Forficulidae); Heteroptera (Nabidae .a.); Thysanoptera (Aeolothripidae); Coleoptera (Sylphidae, Coccinellidae, Carabidae, Staphylinidae, Cantharidae, Malachiidae, .a.); Diptera (Syrphidae, Scatophagidae, Empididae .a.); Hymenoptera (Formicidae .a.; Neuroptera (Chrysopidae), (Malschi i Mustea, 1995), datele fiind concordante cu literatura de specialitate (Basedow, 1990; Welling, 1990; Wetzel, 1995), acestea evideniind capacitatea de distrugere a speciilor entomofage n agrobiocenozele cerealiere i mai ales activitatea afidifag. Motivaia aprofundrii acestor cercetri, s-a desprins din interesanta constatare asupra faptului c n sistemul de culturi de cmp cu perdele forestiere antierozionale exist, la peste 50 de ani de la plantarea reelei, un echilibru entomocenotic real, astfel nct nu se nregistreaz situaii critice de atac al duntorilor i nu se impune aplicarea tratamentelor cu insecticide. Atacul duntorilor in culturi de gru in cmp deschis (Turda) i in ferma cu perdele forestiere (Boldu).
Densitatea i atacul principalilor duntori ai grului. The density and attack of main pests of wheat. 2000-2005. Turda Densitatea duntorilor. (Pests density) Boldut Turda Boldut Turda Boldut Gru de toamn. (Winter wheat ) Haplothrips tritici Larve/spic (larvae/ear) 22 3,8 Afide/spic (Aphids/ear) 32 3,2 Larve de diptere (% tulpini atacate) Diptera larvae (% attacked tillers) 25 5,5

In condiiile de nclzire climatic din perioada 2000-2008, n sistemul de agricultur n cmp deschis, atacul duntorilor a prezentat reale situaii de risc sau calamitate, ceea ce a evideniat, comparativ, importana protectiv i calitativ a sistemului de agricultur cu perdele agroforestiere consolidate. Investigaiile s-au intensificat prin nregistrarea unor interaciuni pradprdtor deosebit de puternice. Se constat c, n ferma cu perdele forestiere de protecie, n condiiile de nclzire climatic i aridizare, ale perioadei actuale, s-au remarcat combaterea biologic natural complet a populaiilor gndacului ovzului (Oulema melanopus L.) i limitarea populaiilor altor duntori ai cerealelor, afide (Sitobion avena Fabr. .a.) i tripi (Haplothrips tritici Kurdj.), la niveluri sub pragul economic de dunare. Rolul biotehnologiilor nepoluante de combatere biologica a daunatorilor n protecia mediului i a plantelor (teste de laborator n izolatoare prad-prdtor cu insecte fitofage si entomofage pradatoare).

Cercetri privind fauna de prdtori entomofagi auxiliari din culturile cerealiere n Transilvania

Studii asupra compoziiei przii i raiei de hrnire pe zi i pe individ prdtor n experiene de laborator cu duntorii cerealelor. Raia de hrnire a prdtorilor cu afide

(numr de duntori consumai/zi/ individ prdtor n teste de laborator )

INDRUMTOR pentru LUCRRI de CERCETARE n LABORATORUL DE BIOTEHNOLOGII 1. OBINEREA i PRELUCRAREA DATELOR din analiza probelor i a experienelor de laborator pentru studiul biotehnologiilor (tehnologii de bioremediere, depoluare biologic, reconstrucie ecologic etc.). ALEGEREA VARIANTELOR. Se aleg variante comparative cu martorul necontaminat (exemplu: -sol fertil/zon i sol necontaminat de laborator/pmnt de flori; -prob de ap necontaminat din zon sau ap potabil de la reea); -pentru testele de ecotoxicitate, bioremediere sau fitoextracie cu Lolium perene sau Lemna minor, pentru metale grele i ali poluani, se analizeaz martorul crescut n laborator pe substrat necontaminat, pmnt de flori, respectiv ap de la reea. PRELEVAREA PROBELOR (exemplu: -probe de insecte, artropode epigee din sol; -probe de substrat, sol, hald de deeuri; -pentru probe din ape poluate se fac relevee specifice fiecrui tip de analiz, expl.: biobentos, bioderm, fitobentos, plancton, nmol, vegetaie acvatic etc. ). TEHNICA REPETIIILOR, pentru notri i analiza statistic: la prelevarea din teren, se colecteaz repetiiile ntr-un singur vas / variant; la prelucrarea n laborator, din proba mare se extrag 3-5 repetiii / variant; sunt necesare la prelucrarea statistic cu 3-5 repetiii pentru fiecare variant.

2. TEHNICA DE CRETERE N LABORATOR A BIOINDICATORILOR (Lolium perene, Lemna minor, Daphnia, licheni, muchi acvatici i de pmnt etc.) 3. TEHNICA FOTOGRAFIERII EVOLUIEI PROCESELOR / variantelor experimentale din laborator i din teren, n dinamic, n timp, n ani etc. 4. TEHNICA DE LUCRU N LABORATOR pentru studiul probelor de artopode (la stereomicroscop), de microorganisme i alge (la microscopul biologic). 5. NTOCMIREA TABELELOR CU DATE, a caietelor cu notri. Se precizeaz : denumirea titlul tabelului-experimentului, metoda de recoltare, de analiz i prelucrare a datelor, locaia i data prelevrii probelor ; numele complet al fiecrei variante i a martorului, n linii, pe vertical ; notarea valorilor n 3-5 repetiiilor, n 3-5 coloane, pe orizontal i media); necesare pentru calcul statistic (analiza varianei, regresii i corelaii) i grafice.
Titlul. Locul, etapa, data, metoda de recoltare i de analiz, unitatea de msur (m2, 100 de filetri, 5 vase Barber etc.) Repetiii Media Varianta R1 R2 R3 V1. Martor V2. halda Anie V...n

PARTICULARITI PENTRU TEHNICA DE EVALUARE A POLURII, A ETAPELOR BIOREMEDIERII I RECONSTRUCIEI ECOLOGICE prin analiza complex a calitii mediului biotic i abiotic, prin recoltarea probelor de ap, sol, asociaii de vieuitoare, pentru analiza fizico-chimic i biologic Prelevarea probelor de ap, sol, hald pentru analize biologice-fizico-chimice asupra: Parametrilor biologici: lista de specii sau grupe sistematice, grupe ecologice (urmrindu-se rolul n biocenoz, poziia n lanul trofic), structura % i abundena, biologia, ecologia speciilor sau a grupelor biotice / cerinele de mediu, impactul de mediu, rolul de bioindicatori de poluare etc. Analiza factorului biotic se poate face pe etaje-nivele sau compartimente ale ecosistemului, sau pe anumite grupe (exemplu: artropode de la nivelul solului, insecte de pe plante, culturi, pajiti; fitocenoze; grupe de bioindicatori, asociaii de organisme acvatice etc.). Parametrilor fizico-chimici: Ph, salinitate, conductivitate,potenial redox, solide dizolvate, compui organici, azot total i organic, humus, metale grele etc.

Probele se iau n mai multe etape (funcie de sezon, lun, decad), n 3-5 repetiii. Se recolteaz date experimentale pentru diferitele variante care se compar: 1. martorul zonal, din ecosistem natural sau nepoluat; 2. sterilul din hald sau din iazul de decantare, apa din iaz sau batal toxic; 3. halda reconstruit ecologic, replantat, recultivat, de pe terase, taluze, din diferite etape ale stabilizrii i consolidrii haldei sau a terenului degradat, dup diferitele tehnici de mpdurire sau recultivare, dup speciile alese n funcie de tipul de hald, de particularitile zonei etc.; Se efectueaz:

1. Notarea dezvoltrii asociaiilor de plante ierboase, arbuti, arbori, n teren: se noteaz numrul plantelor/specie/pe suprafaa de prob de 1/4 m2 sau 10 m2; sau se efectuez fotografii, incluznd marcaje pentru suprafaa fotografiat 2. Notarea dezvoltrii faunei de artropode (artropode epigee din zone degradate, poluate, halde de steril etc., insecte din terenuri cultivate, nierbate sau silvice (se pstreaz n alcool etilic sau spirt medicinal, se analizeaz n laborator). Se noteaz numrul exemplare colectate/specie sau grup/ pe suprafa m2 sau prin recoltri cu fileul entomologic-plasa de insecte/la 100 de cosiri/50m2, prin capturare pe plci cu clei sau i cu feromoni, prin recoltarea n capcane de sol, 3-5 vase Barber (20 cm diametru, cu ap, ngropate pn la nivelul solului, protejate de ploi, amplasate n careu de 10 m2), colectate la 7 zile (splate cu ap, strecurate/sit i nchise n recipient cu alcool). 3. Notarea dezvoltrii asociaiilor de organisme acvatice. Se recolteaz probe prin metode specifice pentru biobentos, bioderm, fitobentos, plancton, nmol, vegetaie acvatic etc., (de la suprafaa apei, cu plasa pentru plancton, pentru plante acvatice plutitoare, din nmol, din zona litoral-fotic-din bioderma de pe substrate etc.), se pstreaz n recipiente cu ap din prob, cu aer sub capac, cateva zile pn la analiz.
26 august 2011 Lector Dr.biolog Dana Malschi

Anexa 1 Model de tabele cu date pentru analiza probelor de nevertebrate epigee recoltate cu capcane de sol
Fauna de nevertebrate epigee din arealul Roia Montan (Mirela Sicoe, 2011. Lucrare de dizertaie: Investigaii asupra mediului biotic, biomonitorizare n perimetrul minier Roia Montan - Iazul de decantare Slite). Tabel de date primare (model)
Nevertebrate Capcane de sol-Barber Grupe sistematice Insecte Carabide (gndaci) Staphylinidae Chrysomelidae Cicade Greieri Furnici Mute Cosai Coropinie Omizi Albine Pianjeni Miriapode Izopode Melci Rme total 1 2 Proba Abrud 3 4 5 1 Proba Iazul de decantare Valea Selitei 2 3 4 5

4 2 30 5 1 20 20 2 1 2 3 5 5 4 1 4 109

3 0 2 20 0 11 10 0 0 0 0 2 0 3 1 4 56

1 2 5 6 1 30 25 0 0 0 0 5 3 2 0 5 85

10 5 20 10 3 45 30 4 1 3 2 6 4 0 0 3 146

5 0 8 9 0 30 15 0 0 0 2 8 2 1 1 3 84

Probele au fost recoltate o dat pe parcusul unei saptmni n perioada 20 27 aprilie. Legend: Abrud: 1 capcana 1, n zon de lunc, vegetaie abundent specific luncilor din zonele montane 2 capcana 2, n apropierea unei surse de ap, pru, vegetaie specific suprafeelor umed 3 capcana 3, n zon fara multa vegetaie, pietri, 4 capcana 4, n zon de coast, vegetaie pitic, 5 capcana 5, n apropierea zonei locuite. Selite: 1 capcana 1, la baza iazului, n zon cu vegetaie spontan variat, 2 capcana 2, pe panta iazului, zon presrat din loc n loc cu molid i muchi, 3 capcana 3, pe panta iazului, zon presrat cu molid, muchi, 4 capcana 4, pe varful coastei iazului, vegetaie inexistent, 5 capcana 5, pe varful coastei iazului, vegetaie inexistent. - sum.

23 9 65 50 5 136 100 6 2 5 7 26 14 10 3 19 480 679

2 0 5 11 1 24 20 1 0 1 2 12 1 0 5 5 90

0 0 0 9 0 20 10 0 0 0 1 2 0 0 0 1 43

0 0 0 7 0 18 13 0 0 0 0 4 0 0 1 0 43

0 0 0 0 0 3 7 0 0 0 0 1 0 0 0 0 11

0 0 0 0 0 4 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12

2 0 5 27 1 69 58 1 0 1 3 19 1 0 6 6 199

Metoda de colectare a artropodelor epigee cu capcane de sol

Pentru determinarea calitii mediilor biotice terestre s-au prelevat, n dou seturi de probe (n lunile august i septembrie 2010) cu ajutorul capcanelor Barber. Fiecare prob a constat n prelevarea a 5 subprobe (4 situate la colurile unui ptrat cu latura de 5 m, una situat la intersecia diagonalelor acestuia).

Distribuia probelor: (a) schia unui punct de prob; (b) amplasarea unui punct de prob n zona lipsit de vegetaie a haldei de steril; (c) capcan Barber amplasat n zona martor. (Dup Georgiana Ieremia, 2011, Evaluarea impactului asupra mediului generat de haldele de steril de la Mina Lupeni (Valea Jiului), USAMV Cluj.)

Capcanele au fost confecionate din flacoane de plastic cu nlimea de 15 cm. Pe fundul fiecrei capcane s-a pus o cantitate mic de ap amestecat cu alcool etilic. Lichidul conservant mpiedic ieirea animalelor din capcan sau devorarea unor specii, i ajut la conservarea materialului colectat. Fiecare capcan a fost acoperit (Fig.c) pentru a evita colmatarea sau ptrunderea apei de precipitaii. Capcanele au fost lsate n teren timp de 5-6 zile, dup care materialul biologic a fost colectat ntr-un singur recipient din toate cele 5 vase ale fiecrui punct de prob/amplasament/variant, splat sub jet de ap, conservat n alcool etilic i ulterior citit cu ajutorul lupei binoculare. Pentru fiecare prob/variant, s-au fcut trei citiri, datele fiind apoi prelucrate sub form de tabele. Tabel de date iniiale selectiuni (Model). Setul 2: septembrie
Martor Furnici Colembole Paianjeni Izopode Carabid Miriapod Hymenoptere Proba 1 Furnici Colembole Paianjeni Miriapode Larva carabide Hymenoptere Tricogramma Proba 2 Furnici Paianjeni Colembole Lacuste Tipulide Afide Izopode Proba 3 Furnici Paianjeni Hymenoptere 1 1 1 1 1 21 4 3 3 1 2 2 1 6 3 2 2 1 7 2 9 17 2 3 1 3 31 7 4 3 3 1 4 3 4 2 1

2 3 9 1 1 3 1 3 2 24 4 2 1 2 2

6 3 28 2 1

1 17 3 4 1

1 2 1 3 2

Tabel de date finale (model)

Repartizarea numrului de indivizi, grupai pe grupe taxonomice, n funcie de datele de prelevare i punctele de prob (M- zona natural, martor, P1- punct pe hald cu vegetaie arborescent, P2 punct pe hald cu vegetaie ierboas, P3- punct pe hald lipsit de vegeie)
(Dup Georgiana Ieremia, 2011, Evaluarea impactului asupra mediului generat de haldele de steril de la Mina Lupeni (Valea Jiului), USAMV Cluj.)

Grupa taxonomic Clasa Insecta Ord.HYMENOPTERA Fam. Formicidae Ord.HYMENOPTERA Fam. Braconidae, Chalcidoidea, Ichneumonidae, Proctotrupidae Ord. COLLEMBOLA Ord. THYSANOPTERA Ord. DIPTERA Sord. Brachicera Ord. DIPTERA Sord. Nematocera Fam. Culicidae Fam. Tipulidae Ord. MECOPTERA Fam. Panorpidae Ord . COLEOPTERA Fam. Carabidae Ord . COLEOPTERA Fam. Staphylinidae Ord . COLEOPTERA Fam. Crisomellidae Ord . COLEOPTERA Fam. Elateridae Ord. HETEROPTERA Ord. HOMOPTERA Cicadina - Aphidina Ord. LEPIDOPTERA Clasa Arachnida Ord. ARANEAE Clasa Myriapoda Subcl. Chilopoda Clasa Crustacea Ord. ISOPODA

Numrul de indivizi pe punctele de recoltare n funcie de cele dou date de prelevare August 2010 Septembrie 2010 M P1 P2 P3 M P1 P2 P3 282 7 45 0 7 60 4 2 0 32 125 0 7 0 0 6 0 0 1 0 61 8 28 0 0 13 17 14 0 2 69 3 6 0 1 3 1 0 0 0

2 6 0 1 0 0 2 1 16 1 33

14 0 2 0 0 3 0 0 3 2 2

0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 5

0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0

0 7 0 0 1 0 0 0 9 4 6

0 2 0 0 1 1 0 0 4 3 0

0 0 0 2 0 0 2 0 9 0 1

0 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0

Anexa 2. Studiu privind testele de laborator cu Lolium perenne i Lemna minor pentru biomonitorizarea i fitoextraca poluanilor din terenuri i ape degradate n urma activitilor din industrie
In cadrul Laboratorului de biotehnologii, la Facultatea de tiina i Ingineria Mediului, Universitatea Babe-Bolyai Cluj-Napoca, s-au efectuat, n perioada 2009-2011, teste de fitoextracie a metalelor grele, metaloizilor etc., cu Lolium perenne, din probe de steril recoltate din halde i iazuri de decantare ale exploatrilor miniere, i cu Lemna minor, din pe probe de ape poluate rezultate din activiviti ale industriei miniere (iazuri de decantare) i chimice (platforme, bataluri de deeuri chimice). Verificarea potenialului de fitoextrecie, bioacumulare i bioremediere la speciile Lolium perenne (raigras peren), Fam. Poaceae/Gramineae i Lemna minor (linti de balt), Fam. Araceae/ Lemnaceae, se realizeaz prin analiza comparativ a probelor de esuturi verzi ale plantelor obinute din variantele experimentale, pe baza determinrii microelementelor prin metoda spectrometriei de emisie atomic, n laboratoare de specialitate. Rezultatele demonstreaz eficiena metodelor de testare i biomonitorizare a ecotoxicitii substratelor poluate cu metale grele, metaloizi etc., prin fitoextracie i bioacumulare n plante de Lolium perenne i Lemna minor; precum i importana unor posibile metode de bioremediere a terenurilor i apelor contaminate cu metale grele, metaloizi etc., rezultate n industria minier i chimic, prin utilizarea plantelor de Lolium perenne (pentru terenuri poluate, halde de steril), respectiv de Lemna minor (pentru ape uzate, bataluri toxice, iazuri de decantare, platforme de deeuri chimice etc.).

Cercetrile privind bioremedierea arealelor terestre i a apelor poluate n urma activitilor din industrie prezint o ampl abordare actual legat de oportunitatea elaborrii tehnologiilor complexe de bioremediere. Bioremedierea haldelor de steril, iazurilor de decantare, rampelor de deeurilor industriale impune tehnologii complexe de refacere ecologic a zonei afectate sau denudate de vieuitoare. Reconstrucia ecologic presupune parcurgerea etapelor biotehnologice care s asigure: nfiinarea unor fito i zoo-cenoze de pionierat, concomitent cu pedogeneza, refacerea microbiotei, refacerea humusului i proprietilor solului; - reconstrucia fito i zoocenotic, cultivarea, colonizarea speciilor, revegetarea cu asociaii de plante ierboase, arbori, arbuti, esenial pentru reconstrucia ecosistemelor terestre (Bernard et al. 2011; Bruce&Pivetz, 2001; Cristea et al, 1990; Kiss et al., 1993; Meers et al. 2008; Malschi Dana, 2009; Oros, 2000, 2002; Ozunu&Carmen Teodosiu, 2002). n prima etap a bioremedierii i reconstruciei ecologice un rol important l au plantele cu potenial de fitoremediere i depoluare prin fitoextracie i bioacumulare. Numeroase cercetri precizeaz impactul deosebit al cultivrii speciei Lolium perenne n bioremedierea i reconstrucia arealelor terestre poluate datorit intensitii proceselor de fitoextracie i bioacumulare n esuturile plantei (Goecke et al., 2011; McCutcheon&Schnoor, 2003; Yi-Hao Wu, 2008; Li Hong-xia et al., 2008; Willey, 2007). Lolium perenne este cunoscut ca bioindicator de poluare pentru testele de biomonitorizare i ecotoxicitate a solului. Standarde pentru evaluarea ecotoxicitii recomand procedurile prezentate n: - ISO 11269: 2003 - Calitatea solului - Determinarea efectelor poluanilor asupra florei solului: - Metoda pentru msurarea inhibrii creterii rdcinii. - Efectele chimicalelor asupra rsririi i creterii plantelor superioare; - ISO 22030: 2005 - Calitatea solului Metode biologicetoxicitate cronic la plantele superioare. Testul standard cu bioindicatori de metale grele pentru medii terestre se efectueaz cu Lolium (Malschi Dana, 2009; Oros&Camelia Drgici, 2002). Bioremedierea ecosistemelor acvatice se poate realiza prin utilizarea unor asociaii de plante acvatice, fungi, microorganisme implicate n depoluarea biologic a apelor uzate, contaminate. Apele poluate cu metale grele pot fi eficient tratate utiliznd iazuri de decantare artificiale sau ecosisteme de zone umede special amenajate.

33

Indeprtarea metalelor grele prin bioreactoare i zone umede construite a constituit obiectivul unor cercetri importante (Dickinson et al. 2009; Jing et al., 2001; Juang&Chen, 2007; Kuschk&colab.,2005; Oros, 1996; Prabhat Kumar Rai, 2008), numeroase rezultate evideniaz efectul plantelor de Lemna minor n fitoremedierea prin bioacumularea poluanilor din apele contaminate (Rachel Dosnon-Olette et al., 2011; Landesman et al., 2005; Rahmani&Sternberg, 1999; Rahman et al., 2007). Lemna minor este cunoscut ca bioindicator de poluare pentru testele de biomonitorizare i de ecotoxicitate a mediului acvatic (Standardul ISO 20079: 2005/Calitatea apeiDeterminarea efectului toxic al constituenilor apei i al apelor uzate asupra lintiei (Lemna minor) : inhibarea creterii la Lemna minor. Studiul indicatorilor biologici de poluare n mediul terestru i n mediul acvatic (Malschi Dana, 2009; Oros, 1996, 2002, Oros&Camelia Drgici, 2002) prezint un interes actual deosebit datorit importanei pentru evaluarea polurii prin biomonitoring, pentru determinarea ecotoxicitii i evaluarea biotehnologiilor. Metoda de lucru. In perioada 2009-2011, n cadrul Laboratorului de biotehnologii, la Facultatea de tiina i Ingineria Mediului, Universitatea Babe-Bolyai Cluj-Napoca, s-au efectuat teste de fitoextracie a metalelor grele, metaloizilor etc., cu Lolium perenne L. din probe de steril recoltate din halde i iazuri de decantare ale exploatrilor miniere, i teste de ecotoxicitate, cu Lemna minor L. pe probe de ape poluate rezultate din activiviti ale industriei miniere (iazuri de decantare) i chimice (platforme, bataluri de deeuri chimice). Investigaiile asupra ecotoxicitii i biomonitorizrii probelor de sol, steril, ape poluate etc. s-au realizat prin metoda testrii n laborator a plantelor bioindindicatoare de poluare Lolium perenne i Lemna minor. Experienele de ecotoxicitate i biomonitoring a probelor supuse studiului n laborator s-au efectuat n 2-3 repetiii, corespunznd la 2-3 perioade diferite de recoltare a probelor din fiecare areal investigat, n perioada anilor 2009-2011. Plantele test de Lolium perenne s-au obinut din semine i s-au dezvoltat fenologic n laborator, timp de 6-8 sptmni. Aceste plante au fost transplantate pentru expunerea la substratul de prob, n vase de vegetaie i pstrate timp de 14-28 zile (Malschi Dana, 2009; Oros, 2002; Oros&Camelia Drgici, 2002). n acest interval, plantele crescute pe sol poluat au prezentat simptomele de fitotoxicitate. Pentru probele de ap s-au utilizat plantele test de Lemna minor dezvoltate pe mediu acvatic nepoluat (ap de la reeaua oraului). Fiecare variant a inclus 5 repetiii-vase de vegetaie, cu cte 30 de plante de Lolium transplantate. Pentru Lemna fiecare variant a avut 2-5g de plante adugate la proba de ap. Dezvoltarea plantelor, efectele fitotoxice ale eantioanelor de sol sau ap testate, s-au evideniat prin cntrirea sau fotografierea diferenelor vizibile dintre variante, comparativ cu situaia din martorul nepoluat. Datele privind fitoextracia i bioacumularea poluanilor (metalelor grele, metaloizilor etc) n esuturile verzi de Lolium perenne i Lemna minor se obin prin metoda spectrometriei de emisie atomic. Probele pentru aceste analize au reprezentat valori medii fiind obinute din nsumarea materialului vegetal, uscat i mojarat, rezultat din cele 2-3 repetri ale experimenei de ecotoxicitate i biomonitoring din laborator, pentru variantele fiecrui experiment, n 2009-2011. Investigaiile de biomonitoring i fitotoxicitate prin teste cu Lolium perenne i Lemna minor s-au efectuat asupra unor probe de steril i ape uzate, recoltate din site-uri poluate istoric n care se derulez activiti de ecologizare i depoluare: Iazurile de decantare Valea Glodului i Anie care au acumulat sterilul de la staiile de flotare a minereului complex de plumb i zinc, provenind de la Exploataia Minier Rodna, BistriaNsud, aparinnd n prezent de Remin SA BaiaMare. (Autorul experienei (2009-2010): student Alin Bolonyi.) Haldele de steril de la Fundu-Moldovei, provenind de la EM Fundu-Moldovei pentru minereu de cupru, plumb, argint, mangan, pirit, afiliat la Combinatul Minier Suceava, iar n prezent la SC Minbucovina SA Vatra Dornei. (Autorul experienei (2010): student Crihan Alexandru Bogdan.) 34

Iazul Aurul-Baia-Mare i Iazul Central-Tuii de Sus ale Exploataiei Miniere Aurul, Baia-Mare, care aparin n present de SC Romaltyn Mining SRL. (Autorul experienei (2011): student Brhaia Ioan-Dorian.) Platforma cu bataluri de deeuri chimice a Combinatului Chimic Trnveni, Mure-SC Bicapa SA Trnveni. (Autorul experienei (2011): student Ghira George Bogdan.) Verificarea potenialului de fitoextrecie, bioacumulare i bioremediere la speciile Lolium perenne (raigras peren), Fam. Poaceae/Gramineae i Lemna minor (linti de balt), Fam. Aracae/ Lemnaceae, se poate realiza analiza probelor de esuturi verzi ale plantelor recoltate din variantele experimentale, pe baza determinarii microelementelor prin metoda spectrometriei de emisie atomic n plasm cuplat inductiv, n laboratoare de specialitate. Datorit capacitii de fitoextracie i bioacumulare a plantelor de Lolium perenne i Lemna minor, acestea acumuleaz n esuturile verzi (frunze, tulpini), concentraii mai mari de metale grele, metaloizi etc., prin dezvoltarea lor pe substrate poluate, comparativ cu plantele crescute pe substratul martor, nepoluat, n testele de ecotoxicitate. Speciile Lolium perenne (raigras peren), Fam. Poaceae/Gramineae i Lemna minor (linti de balt), Fam. Araceae/Lemnaceae, sunt utile ca bioacumulatori i bioindicatori pentru metale grele, metaloizi etc. Creterea i dezvoltarea acestor plante n condiii de laborator ofer o metod eficient de testare a ecotoxicitii probelor de mediu i o metod de monitorizare a nivelului polurii cu metale grele, metaloizi etc., util pentru evalurile de mediu i evalurile de eficien a tehnologiilor de bioremediere sau de reconstrucie ecologic. Cultivarea lor poate reprezenta o metod n cadrul tehnologiilor de bioremediere sau reconstrucie ecologic a ecosistemelor naturale i antropizate, poluate cu metale grele, metaloizi etc., n urma activitilor industriei metalurgice, miniere, chimice etc. ; se recomand utilizarea plantelor de Lolium perenne pentru bioremedierea terenurilor poluate, haldelor de steril etc., respectiv, utilizarea plantelor de Lemna minor pentru bioremedierea apelor uzate, batalurilor toxice de pe iazurile de decantare, platformele de deeuri chimice, etc..
BIBLIOGRAFIE 1. Cristea V., Hodisan I., Pop I., Emilia Bechis, Groza G., Galan P., 1990. Reconstrucia ecologic a haldelor de steril minier.I. Dezvoltarea vegetaiei spontane. Contrib.botanice, Univ.Cluj-Napoca, Grdina botanic:33-38. 2. Cristina Dobrot, Muntean V.,2008.Raport RESOLMET, contract 32161 / 2008, http://www.resolmet.utcluj.ro. 3. Bernard R. Glick & Jennifer C. Stearns, 2011. Making Phytoremediation Work Better: Maximizing a Plants Growth Potential in the Midst of Adversity, International Journal of Phytoremediation, 13:sup1, 4-16: http://dx.doi.org/10.1080/15226514.2011.568533 4. Nicholas M. Dickinson, Alan J.M. Baker, Augustine Doronila, Scott Laidlaw & Roger D. Reeves, 2009; Phytoremediation Of Inorganics: Realism And Synergies, International Journal of Phytoremediation, 11:2, 97-114:http://dx.doi.org/10.1080/15226510802378368 5. Rachel Dosnon-Olette, M. Couderchet, M. A. Oturan, N. Oturan, Ph. Eullaffroy, 2011. Potential Use of Lemna Minor for the Phytoremediation of Isoproturon and Glyphosate. International Journal of Phytoremediation. Volume 13, Issue 6, 2011. pages 601-612. Available online: 26 Mar 2011. http://dx.doi.org/10.1080/15226514.2010.525549 6. Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009. Heavy Metal Removal with Exopolysaccharide-Producing Cyanobacteria. In Heavy Metals in the Environment (2009), eds.: Lawrence K. Wang, J. Paul Chen, Nazih K. Shammas, Yung-Tse Hung. CRC Press. Taylor & Francis Group. pp 89-123 7. Paul Goecke, Rosanna Ginocchio, Michel Mench, Alexander Neaman, 2011. Amendments Promote the Development of Lolium Perenne in Soils Affected by Historical Copper Smelting Operations. International Journal of Phytoremediation. Volume 13, Issue 6, 2011. pages 552-566. http://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/15226514.2010.495150 8. Juang, D.F.; Chen, P.C., 2007. Treatment of polluted river water by a new constructed wetland. Int. J. Environ.Sci. Tech., 4 (4), 481-488. www.ceers.org/ijest/issues/full/v4/n4/404010.pdf 9. S.R. Jing, Y.F. Lin, D.Y. Lee, T.W. Wang, 2001. Using constructed wetland systems to remove solids from highly polluted river water. Water Science and Technology: Water Supply Vol.1, No.1 pp 8996. http://www.environmental-expert.com/Files/5302/articles/5891/art11.pdf 10. Kiss t., Dragan-Bularda M., Daniela Paca, 1993. Enzimologia mediului nconjurtor. Enzimologia solurilor tehnogene.Vol. II. Ed. CERES, Bucureti

35

11. Peter Kuschk, Arndt Wiener, Roland Mller, Matthias Kstner, 2005. Constructed Wetlands Treating
Wastewater with Cenoses of Plants and Microorganisms. A Research Association at UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle. In the Helmholtz Association. Published by UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle. Printed by System PrintMedien GmbH Dezember 2005 12. LI Hong-xia, ZHAO Xin-hua, MA Wei-fang, LI Ya-nan, HUANG Jian-jun, 2008. Phytoremediation of Heavy Metal in Sewage River Sediment by Lolium Perenne. Journal of Jilin Agricultural University, 2008-03, http://en.cnki.com.cn/Article_en/CJFDTOTAL-JLNY200803020.htm 13. Steve C. McCutcheon, Jerald L. Schnoor, 2003. Phytoremediation: transformation and control of contaminants. books.google.ro/books?isbn=0471394351 14. E. Meers, F.M.G.Tack, S.VanSlycken, A.Ruttens,G.Du Laing,J.Vangronsveld, M.G.Verloo, 2008; Chemically Assisted Phytoextraction: A Review of Potential Soil Amendments for Increasing Plant Uptake of Heavy Metals, Intern. Journal of Phytoremediation,10:5,390-414. http://dx.doi.org/10.1080/15226510802100515 15. Malschi Dana, 2009. Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice. (Tehnologii de depoluare biologica, Tehnologii de bioremediere. Reconstructia ecologica). Note de curs si aplicatii practice. Manual in format electronic Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai Cluj-Napoca. Editura Bioflux, ClujNapoca. 2009, P. 200. 978-606-92028-5-2. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ 16. Malschi Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Note de curs si aplicatii practice. Manual in format electronic. Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai Cluj-Napoca. Editura Bioflux, Cluj-Napoca, 2009, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ 634 pg., plane color, ISBN 978606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/docs/malschi2.pdf/ 17. Oros, V., 1996. Aspecte ecotoxicologice ale polurii apelor cu metale grele. n vol.: Cercetri noi in mineritul i metalurgia neferoas".Sesiunea:35ani nvmnt Superior in Baia Mare.Vol. III, "Ingineria Mediului", 133 - 139. 18. Oros, V., 2000. Recultivarea biologic a terenurilor degradate datoril activitii miniere de suprafa i depozitrii deeurilor. n DENU I. (eds.), Reabilitarea ecologic i managementul siturilor degradate de industria minier. Ed. Univ.de Nord, Baia-Mare, 2000. 19. Oros, V., 2002. Biomonitoring. In Poluarea si monitorizarea mediului, Ed..Univ. Transilvania, Brasov.p.60-73. 20. Oros, V., 2002. Reabilitare ecologic a siturilor degradate industrial. Ed. Univ. Transilvania Braov. Cap.IV. Recultivarea biologica a terenurilor degradate p.134-153 21. Oros Vasile, Camelia Drgici, 2002. Managementul deeurilor. Ed. Univ. Transilvania Braov. 22. Al. Ozunu, Carmen Teodosiu, 2002. Prevenirea poluarii mediului . Ed. Univ. Transilvania Brasov. 23. Bruce E. Pivetz, 2001. Phytoremediation of Contaminated Soil and Ground Water at Hazardous Waste Sites. Ground Water Issue. Edited by United States Environmental Protection; Agency Office of Solid Waste and Emergency Response; Office of Research and Development. http://www.cluin.org/download/remed/epa_540_s01_500.pdf. www.researchgate.net/.../15226514_International_Journal_of_Phytoremediation. 24. Prabhat Kumar Rai, 2008. Heavy Metal Pollution in Aquatic Ecosystems and its Phytoremediation using Wetland Plants: An ecosustainable approach. International Journal of Phytoremediation. http://www.tandfonline.com/loi/bijp20 25. G.N.H. Rahmani, S.P.K. Sternberg, 1999. Bioremoval of lead from water using Lemna minor, Bioresource Technology 70 (3) (1999) pp. 225-230. http://www.mobot.org/jwcross/duckweed/practical_duckweed.htm 26. M.A.Rahman, H.Hasegawa, K.Ueda, T.Maki, C.Okumura, M. M.Rahman, 2007. Arsenic accumulation in duckweed (Spirodela polyrhiza L.): A good option for phytoremediation. Chemosphere. Volume 69, Issue 3, September 2007, Pages 493-499. linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0045653507005012, http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0045653507005012. 27. Marco Vienudelli, Linda Pieri, M. Cristina Grandi, Luca Fiorentini, Paola Rossi Pisa, 2008. Comparison Between Aquatic Plants in Small Artificial Wetlands: First Results on Nitrate Uptake. Italian Journal of Agronomy. Rivista di Agronomia. University of Bologna. Faculty of Agriculture. Department of Agroenvironmental Sciences and Technologies. P.133-134. 28. Neil Willey, 2007. Phytoremediation: methods and reviews. Humana Press INC. New Jersey. 478 pagini. Neil Willey Eds. http://books.google.ro/books?isbn=1597450987 29. Yi-Hao Wu , 2008. Phytoremediation of Heavy Metal by Six Plants. Master's Thesis. Department and Graduate Institute of Environmental Engineering and Management. http://ethesys.lib.cyut.edu.tw/ETDdb/ETD-search/view_etd?URN=etd-0817109-162323 30. *** http://www.resolmet.utcluj.ro. Raport RESOLMET, contract 32161 / 2008). 31. *** http://www.dsmz.de/strains/degradtn.htm. DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany. DSMZ - Degradation (including Fermentation, Oxidation, Utilization) 26 septembrie 2011 Lector dr.biolog Dana Malschi Membru asociat al Academiei de tiine Agricole i Silvic

36