Welcome to Scribd, the world's digital library. Read, publish, and share books and documents. See more
Download
Standard view
Full view
of .
Save to My Library
Look up keyword
Like this
1Activity
0 of .
Results for:
No results containing your search query
P. 1
Tinh Che Enzyme

Tinh Che Enzyme

Ratings: (0)|Views: 56 |Likes:
Published by Dấu Chấm Cảm

More info:

Published by: Dấu Chấm Cảm on May 26, 2012
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PPT, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

05/26/2012

pdf

text

original

 
 
CHƯƠNG 3. CÁC PHƯƠNG PHÁP TINHCHẾ ENZIM
 
Giai đoạn 1:
dựa trên các tính chất lý – hoá học tác động lên cácchất phân tử lượng lớn.
Giai đoạn 2:
Khai thác các tính chất đặc trưng khác nhau của protein cầu.
Phân tách dựa trên các thông số riêng như trọng lượng phân tử,điện tích của protein.
Giai đoạn 3: 
dựa trên những tương tác đặc hiệu và có tính rhuậnnghịch giữa enzim và:
Cơ chất.
Coenzim.
Chất gắn.
Chất hoạt hoá.
 
ξ
1. LỊCH SỬ PHAT TRIỂN CỦA TINH CHẾ ENZIM
 
 
 
ξ
2. NGUYÊN TẮC CHỌN PHƯƠNG PHÁP TINHCHẾ ENZIM
Xác định enzim mong muốn là gì và chọn nguyên liệu giàu enzim.
Xác định
 
các đặc trưng của nguyên liệu:
Bản chất của NL: lỏng, rắn
Dạng chung của NL: động vật, thực vật, VSV.
Cấu trúc sinh học của NL: tế bào VSV, tế bào thực vật.
Xác định vùng chứa enzim: ty thể, tế bào chất, màng tế bào.
Xác định các tính chất cấu trúc và lý hoá của enzim: trọng lượng PT,cấu trúc PT, hằng số động học, tính ổn định PT, pH tối ưu, điểm đẳngđiện, chất hoạt hoá, chất kìm hãm…
Phải có phương pháp giải phóng protein dưới dạng hoà tan mà khônglàm mất hoạt tính của nó.
Xử lý phải thực hiện ở T thấp (+4
O
C); môi trường có chất đệm; tácnhân bảo về (nếu cần như EDTA, 2-mecaptoetanol…); thời gian xử lýnn.
 
 
ξ
3. CÁC PHƯƠNG PHÁP KẾT TỦA ĐỂ PHÂNĐOẠN ENZIM
1.Kết tủa phân đoạn bằng muối trung tính
 
Nguyên tắc:
Protein hoà tan trong các dung dịch muối có pH xa với điểm đẳng điện.
Độ hoà tan của P chỉ tăng cùng với lực ion MT trong một khoảng nhất địnhcủa [muối], Nồng độ muối cao hơn protein enzim có thể kết tủa.
Mối enzim có một khoảng [muối] mà enzim kết tủa hoàn toàn, gọi là nồngđộ muối tích. Dựa vào tính tan khác nhau mà phân đoạn enzim.
 
Cách tiến hành
B
ổ sung vào dịch chứa enzim một thể tích muối bão hoà hoặc một lượngmuối trung tính dạng rắn để đạt được độ phần trăm bão hoà nào đó củamuối này.
Nếu kết tủa là những phần tử không phải enzim mong muốn thì tách haipha lỏng rắn và loại bỏ kết tủa thu hồi dịch trong.
 
N
ếu enzim cần tinh chế kết tủa thì sau khi phân tách hai pha lỏng - rắn hoàtan kết tủa trong một lượng nhỏ dung dịch đệm.

You're Reading a Free Preview

Download
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->