TECNOLOGIAS DE MICRO E NANO-PROCESSAMENTO

Materiais nanoestruturados
Estruturas de Carbono, Nanopartculas, Nanocpsulas e Quantum Dots. Casos de estudo em Nanobiotecnologia.
Ismael Filipe Correia de Castro

2010

P R O G R A M A D O U T O R A L E M E N G E N H A R I A F S I C A U N I V E R S I D A D E D E A V E I R0O

ndice
1. 2. Sumrio ............................................................................................................................................... 2 Estruturas de Carbono ......................................................................................................................... 3 2.1 Fulerenos ..................................................................................................................................... 4 Aplicaes dos fulerenos....................................................................................................... 5

2.1.1 2.2

Nanotubos de Carbono ................................................................................................................. 7 Sntese de nanotubos de carbono ........................................................................................10 Propriedades dos nanotubos de carbono .............................................................................13 Aplicaes dos nanotubos de carbono .................................................................................14

2.2.1 2.2.2 2.2.3 3

Nanopartculas ....................................................................................................................................16 4.0.1 4.0.2 4.0.3 4.1 4.2 Tipos de nanopartculas .......................................................................................................18 Sntese de nanopartculas ....................................................................................................19 Aplicaes das nanopartculas .............................................................................................20

Nanocpsulas ..............................................................................................................................21 Quantum Dots .............................................................................................................................24 Sntese de quantum dots .....................................................................................................28 Aplicaes dos quantum dots...............................................................................................29

4.2.1 4.2.2 4

Casos de Estudo em Nanobiotecnologia ..............................................................................................29 4.1 4.2 Aneeve Nanotechnologies ...........................................................................................................29 CENIMAT-i3N...............................................................................................................................31

Biosensor de DNA desenvolvido no CENIMAT-i3N ...............................................................................32 5.1 Nanopartculas de ouro ...............................................................................................................32 Sntese e funcionalizao de AuNPs .....................................................................................34

5.1.2 5.2 5.3

Deteo colorimtrica de DNA com AuNPs ..................................................................................34 Biosensor de DNA ........................................................................................................................36 Fabrico do fotodetector de TiO2 ...........................................................................................39 Performance de fotodetector e biosensor de DNA ...............................................................41 Concluses...........................................................................................................................43

5.3.1 5.3.2 5.3.3

Referncias Bibliogrficas ...........................................................................................................................44 ndice de Figuras .........................................................................................................................................45 ndice de Tabelas ........................................................................................................................................46

1.

Sumrio
Pretende-se com este trabalho abordar alguns tipos de materiais nanoestruturados, assim

como dar a conhecer aquilo que actualmente se faz de melhor a nvel de nanotecnologia, e particularmente em nanobiotecnologia, recorrendo a este tipo de materiais. Um material nanoestruturado pode ser considerado qualquer material com um constituinte de interesse com pelo menos uma dimenso nanoescala (inferior a 100 nm), o que inclui uma variedade muito extensa de materiais. Neste trabalho abordam-se em particular os nanomateriais constitudos unicamente por tomos de carbono (fulerenos e nanotubos) e faz-se uma viso geral sobre as nanopartculas, com referncia mais especfica s nanocpsulas e aos quantum dots (nanopartculas semicondutoras), tendo sempre em conta as suas aplicaes. Inclusivamente, so apresentados dois casos de estudo de instituies com investigao de sucesso na rea da nanotecnologia, dando nfase s aplicaes desenvolvidas na rea da nanobiotecnologia, nomeadamente em biosensores, sobre os quais apresentado um trabalho especfico desenvolvido em Portugal, no mbito de um biosensor de DNA com base em nanopartculas de ouro. Este foi um trabalho de pesquisa, tendo sido utilizada uma metodologia baseada na pesquisa bibliogrfica (livros, artigos cientficos e pginas na internet), assim como contacto com investigadores cujo trabalho mencionado.

2.

Estruturas de Carbono
O Carbono considerado o elemento da vida, pois a base de todas as molculas

orgnicas. Existem milhes de compostos de Carbono, pois este tem uma capacidade extraordinria de se combinar das formas mais variadas com outros tomos, formando diferentes cadeias e anis. No entanto, em termos de estruturas compostas unicamente por tomos de carbono (estruturas cristalinas), at 1985 conheciam-se apenas dois tipos, o diamante e a grafite (Fig. 1), que esto presentes na natureza, para alm das estruturas amorfas (desordenadas), como o carvo. Curiosamente, a grafite frgil, opaca, semimetlica e barata, enquanto que o diamante duro, transparente, isolante e caro! A nica diferena entre eles tem no entanto a ver com o tipo de ligaes que se estabelecem entre os tomos de carbono e a estrutura resultante dessas ligaes [1].

Figura 1 Grafite e diamante [2].

Os tomos de carbono nestas estruturas cristalinas esto ligados por fortes ligaes covalentes. Um tomo livre de carbono tem a estrutura electrnica 1s22s22p2. De maneira a formar ligaes covalentes, um dos electres 2s promovido a 2p e as orbitais so depois hibridizadas em uma de 3 maneiras possveis. Na grafite, um dos electres 2s hibridiza com dois dos 2p para dar 3 orbitais sp2 cada uma a 120 da outra, com a orbital restante a ter uma configurao pz, a 90 deste plano. As orbitais sp2 formam as fortes ligaes covalentes entre os tomos de C nos planos da grafite (nestes planos cada tomo de C une-se a 3 vizinhos, formando uma estrutura de padro hexagonal), enquanto que as orbitais pz ou fornecem as fracas ligaes de Van der Walls entre os planos (Fig. 2). No diamante, cada tomo de C une-se a 4 vizinhos numa estrutura tetradrica e a ligao sp3, resulta da mistura de uma orbital 2s com trs orbitais 2p. Como os planos da grafite podem deslizar uns sobre os outros, a grafite mais frgil ainda que as ligaes sp2 dos planos da grafite sejam mais fortes do que as sp3 do diamante [3].

Figura 2 Ligaes e estruturas atmicas de grafite e diamante (adaptada de [4]).

2.1

Fulerenos
Em 1985, dois cientistas ingleses, Harry Kroto e Richard Smalley (Nobel da Qumica em

1996), descobriram uma nova estrutura ordenada constituda apenas por tomos de carbono, quando realizavam uma srie de experincias de vaporizao da grafite com laser, numa atmosfera de hlio a alta temperatura. Esta descoberta no foi intencional, uma vez que estas experincias visavam recriar processos nas estrelas. No entanto, esta vaporizao da grafite veio a revelar produtos extraordinrios. A primeira estrutura observada foi o C60, uma estrutura com 60 tomos de carbono e a forma de uma bola de futebol, com 1 nm de dimetro (Fig. 3). A sua estrutura particular fez com que fosse apelidada originalmente de buckminsterfulereno, em homenagem ao arquitecto Richard Buckminster Fuller, cujas cpulas geodsicas faz lembrar. Outro nome dado ao C60 futeboleno (buckyball). A estrutura do C60 pode-se comprender se imaginarmos um icosaedro com cada um dos 12 vrtices substituido por um pentgono. Neste processo, as 20 faces triangulares so transformadas em 20 hexgonos.

Figura 3 A molcula de C60 [1].

Pouco tempo depois descobriram-se outras estruturas semelhantes, outros membros desta famlia de compostos a que se deu o nome de fulerenos. Os fulerenos tm uma estrutura semelhante grafite, que composta por camadas de anis hexagonais empilhadas (camadas de grafeno), mas tm tambm anis pentagonais e s vezes heptagonais. Os fulerenos definem-se ento como estruturas fechadas, obtidas a partir da grafite, compostas no s por anis hexagonais mas tambm pentagonais e s vezes heptagonais.

Figura 4 Exemplos de outros fulerenos: C70 (esquerda) e C540 (direita) [1].

O C60 o fulereno mais importante, sendo a molcula mais simtrica que existe (permite cerca de 120 operaes de simetria, tais como rotaes em torno de um eixo). Na molcula de C60, cada tomo de C est ligado a 3 vizinhos, por isso a ligao essencialmente sp 2, havendo tambm uma pequena quantidade de ligaes sp3 devido curvatura. O mesmo se verifica nos outros fulerenos. Os 12 pentgonos e 12 hexgonos que constituem a molcula de C 60 no so nmeros ao acaso, mas um requisito do teorema de Euler, que diz que so necessrios 12 pentgonos para construir uma estrutura fechada a partir de uma matriz hexagonal planar. Os fulerenos maiores (e.g. C70, C82, C540) tm estruturas semelhantes com exactamente 12 pentgonos, mas com nmero diferente de hexgonos. O fulereno mais pequeno o C20, que contm apenas 12 pentgonos e nenhum hexgono [3,5]. 2.1.1 Aplicaes dos fulerenos O facto importante para a nanotecnologia que, dentro destas molculas, podem ser colocados tomos. Alm disso, podem tambm ligar-se tomos por fora, formando sais nesse caso [3]. Os fulerenos so solveis em solventes orgnicos e tm vrias propriedades qumicas e biolgicas interessantes que permitem utiliz-los em diversas aplicaes, tais como:

Clulas fotovoltaicas orgnicas os fulerenos comportam-se como semicondutores do tipo n (aceitadores de electres), podendo ser usados em conjunto com um polmero do tipo p para formar a camada activa (heterojuno) de uma clula fotovoltaica orgnica (Fig. 5). As eficincias actuais destas clulas rondam actualmente os 7% [6], e Dennler et al. sugeriram em 2009 que podero ser alcanadas eficincias de cerca de 20% usando um dispositivo de heterojuno polmero/fulereno [7].

Figura 5 Representao esquemtica de uma clula fotovoltaica orgnica de heterojuno polmero/fulereno [6].

Antioxidantes e biofarmacuticos reagem rapidamente e a altas taxas com radicais livres, que so muitas vezes a causa de processos oxidativos que resultam em danos ou morte celular. Os fulerenos comportam-se como esponjas de radicais livres, podendo absorver e neutralizar 20 ou mais radicais livres por molcula de fulereno, demonstrando uma performance cerca de cem vezes superior aos melhores antioxidantes usados actualmente, como a vitamina E. Existem j cremes para a pele baseados em C 60. Uma aplicao promissora do potencial antioxidante dos fulerenos na rea da sade, em farmacuticos para preveno de doenas neurodegenerativas relacionadas com stress oxidativo, como a doena de Alzheimer. Outras aplicaes importantes so na preveno de processos de deteriorao de plsticos ou corroso metlica.

Catalisadores tm uma capacidade marcada de aceitar e transferir tomos de hidrognio, sendo altamente eficientes a promover a converso de metano em hidrocarbonetos maiores;

Supercondutores quando formam sais, a condutividade elctrica dos fulerenos aumenta bastante, e.g. K3C60 supercondutor a 18K e Rb3C60 a 30K (temperaturas de transio ainda baixas);

2.2

Nanotubos de Carbono
Os nanotubos so uma estrutura particular de fulereno, em forma de tubo, possivelmente

com uma importncia superior devido s suas propriedades nicas. Apesar de terem sido observados e reportados anteriormente, a sua descoberta atribui-se ao japons Sumio Iijima, em 1991. Os nanotubos podem ser descritos como tubos de grafite (anis hexagonais), com um dimetro de alguns nm e comprimentos que podem chegar a alguns cm (consideram-se estruturas 1D), fechados em cada ponta por uma metade de uma molcula de C 60, cada uma com 6 anis pentagonais [5]. Dependendo da forma como se divide a molcula de C 60, existem duas formas simtricas de nanotubo possveis: zig-zag e armchair (Fig. 6).

Figura 6 As duas estruturas simtricas de nanotubo possveis, a) zig-zag (9,0); b) armchair (5,5) [5].

Na verdade, os nanotubos obtidos na prtica experimental no tm geralmente estas formas to simtricas, mas sim estruturas em que os hexgonos esto enrolados helicoidalmente em torno do eixo do tubo, denominadas estruturas quirais (Fig. 7). As pontas dos nanotubos tambm s raramente so hemisfrios, mas podem ter uma variedade de formas, como exemplifica a Fig. 8. Nas pontas dos nanotubos verifica-se sempre a presena de anis de carbono pentagonais e, em formas mais complexas, para alm destes observam-se tambm anis heptagonais [5].

Figura 7 Nanotubo com estrutura quiral, em que a camada de grafeno enrolada helicoidalmente [5].

Figura 8 Ponta tpica de um nanotubo de parede mltipla (MWNT), escala 5 nm [5].

A estrutura de um nanotubo pode ser entendida imaginando uma camada de grafeno a ser enrolada num cilindro. A forma como se d esse enrolamento que vai definir a estrutura do nanotubo, particularmente as suas propriedades electrnicas, e representa-se por um vector de coordenadas (m,n), = 1 + 2 , que junta os pontos que ao enrolar se sobrepem (1 e 2 so os vectores unitrios da camada de grafeno) [3]. Quando n=0, a estrutura zigzag; se m=n, a estrutura armchair e todos as outras estruturas possveis so quirais. Uma propriedade interessante, e intrigante, que, dependendo do dimetro e da quiralidade, os nanotubos podem ter propriedades de metal ou de semicondutor (Fig. 9). As estruturas armchair so metlicas, assim como estruturas quirais em que m-n mltiplo de 3. As estruturas zig-zag e quirais em que m-n no seja mltiplo de 3, tm propriedades semicondutoras.

Figura 9 Propriedades electrnicas de nanotubos variam consoante o seu dimetro e quiralidade [3].

Quanto ao nmero de camadas de grafeno que constituem as paredes cilndricas dos nanotubos, estes podem classificar-se em nanotubos de parede simples (SWNT: single-walled nanotubes) ou de parede mltipla (MWNT: multi-walled nanotubes). A maior parte dos nanotubos

de parede simples tem cerca de 1 nm de dimetro (podem ter at cerca de 20 nm), e um comprimento que pode ser muitos milhes de vezes maior. Os SWNT tm propriedades elctricas nicas, que no so partilhadas pelos MWNT (e.g. podem ser excelentes condutores ou semicondutores equiparveis ao silcio). So por isso os mais provveis candidatos para a futura miniaturizao da electrnica, da micro para a nanoelectrnica. Os SWNT tendem a aglomerar-se em cordas (ropes), devido a atraes de Van der Walls (e.g. Fig. 10) [9].

Figura 10 Imagem HRTEM de corda de nanotubos [10].

Os MWNT so nanotubos com uma parede de vrias camadas, resultando num dimetro entre 10 a 200 nm, com um espao entre camadas de cerca de 0,35 nm (Fig. 11). A maior parte dos estudos defende uma estrutura tipo boneca russa, ou seja, de vrios nanotubos concntricos, com os de menor dimetro dentro dos maiores. Desta forma podemos ter uma variedade muito grande de estruturas, dependendo do tipo de nanotubo em cada camada, o que resulta em propriedades no uniformes. Uma minoria defende uma estrutura que resulta do enrolamento de uma s camada de grafite (como um jornal enrolado) [10].

Figura 11 Estrutura e imagens HRTEM de SWNT (a,b) e MWNT (c,d) [5].

Dentro dos MWNT, os nanotubos de parede dupla (DWNT: double-walled nanotubes) so importantes pois tm morfologia e propriedades semelhantes aos SWNT, mas maior resistncia a qumicos. A ligao de qumicos superfcie dos nanotubos importante para que estes adquiram funes qumicas que no possuam anteriormente (funcionalizao). Nos SWNT, a ligao de outras molculas vai quebrar as ligaes C-C, deixando falhas na estrutura do nanotubo que modificam as propriedades mecnicas e elctricas. No caso dos DWNT, s a camada externa que modificada.

Figura 12 Imagens TEM de MWNT (esquerda), DWNT (centro) e MWNT (direita).

2.2.1 Sntese de nanotubos de carbono Existem essencialmente trs tcnicas principais para produzir nanotubos de carbono (de parede simples e mltipla): arco elctrico, ablao a laser e CVD (Chemical Vapor Deposition). Arco elctrico O arco elctrico foi o primeiro mtodo utilizado e talvez o mais simples. Consiste em colocar dois elctrodos de carbono (normalmente grafite) numa atmosfera de He ou Ar a baixa presso, colocados muito prximos um do outro, a cerca de 1 mm (Fig. 13). Ao aplicar uma corrente entre 50 a 100 A, conduzida por uma tenso de cerca de 20 V, produz-se uma descarga de alta temperatura que leva evaporao do nodo e formao de nanotubos de carbono que se depositam no ctodo [11, 12].

Figura 13 Representao esquemtica bsica do mtodo do arco elctrico [11].

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Para produzir MWNTs, usam-se dois elctrodos de grafite pura, enquanto que para produzir SWNTs, so inseridos catalisadores metlicos no nodo (Fig. 14). Foram experimentados vrios metais e combinaes metlicas, para obter bom rendimento e qualidade de nanotubos, e a melhor combinao encontrada foi uma mistura de Ni e Y [12].

Figura 14 Produo de SWNTs e MWNTs pelo mtodo do arco elctrico [12].

A tcnica do arco elctrico permite produzir facilmente SWNTs e MWNTs, com poucos defeitos estruturais. No entanto, os nanotubos tendem a ser curtos, com direes e tamanhos aleatrios e normalmente requerem muita purificao ps-sntese. Ablao a laser Na ablao a laser, um alvo de grafite colocado num forno a 1200C e vaporizado por um laser pulsado ou contnuo. Dentro do forno, a atmosfera de He ou Ar a uma presso de 500 Torr (1 atm = 760 Torr) e em regime de fluxo. O gs recolhe os produtos da vaporizao e deposita-os como fuligem (processo de condensao) num substrato de cobre arrefecido com gua (Fig. 15 ).

Figura 15 Representao esquemtica da tcnica de ablao a laser [12].

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O depsito composto por nanotubos com paredes de 4 a 24 camadas e comprimentos at 300 nm, alm de outras estruturas incluindo possivelmente fulerenos. Para produzir SWNTs, os alvos so misturados com pequenas percentagens de metal catalisador (e.g Co-Ni ou Ni/Y). A ablao a laser semelhante ao arco elctrico, no sentido em que o gs e a mistura catalisadora ptimos so os mesmos, o que sugere mecanismos de reao qumica idnticos. Os nanotubos produzidos por ablao a laser so mais puros do que os produzidos por arco elctrico, no entanto esta tcnica mais cara [10-12]. CVD A tcnica de CVD basicamente consiste no aquecimento de um material, normalmente sob vcuo, para formar um gs de material nanoparticulado que depois se deposita como slido numa superfcie. Para produzir nanotubos por CVD, utilizam-se hidrocarbonetos como fontes de carbono (e.g. metano, acetileno). A alta temperatura (650 a 1000C) quebra estas molculas em tomos de carbono, que depois se depositam sobre um substrato revestido com partculas metlicas catalisadoras (Fe, Co ou Ni). O substrato de metais catalisadores normalmente produzido por sputtering (pulverizao catdica) do metal num substrato e usando etching qumico (e.g. com amnia) ou annealing trmico para induzir a nucleao das partculas catalisadoras. O annealing trmico resulta na formao de um cluster (aglomerado) no substrato, a partir do qual os nanotubos vo crescer. As vantagens das tcnicas de CVD so que permitem um excelente alinhamento e controlo posicional escala nanomtrica, assim como controlo do dimetro e taxa de crescimento, dependendo das condies de sntese. mais fcil produzir nanotubos em larga escala por CVD do que pelas outras tcnicas, j que um processo e que permite obter nanotubos longos e de alta pureza [11,12]. Existem muitas tcnicas de CVD (e.g. plasma-enhanced, trmica, a baixa presso, com precursores metalorgnicos, etc.), mas h uma que merece meno especial na sntese de nanotubos de carbono, que a CVD de converso de monxido a alta presso (HiPCO). Em vez de utilizar um hidrocarboneto como precursor, este mtodo alimenta CO a alta presso (30 a 50 atm) como fonte de carbono. possvel obter uma produo em relativa larga escala (10 g/dia) de SWNTs de alta pureza por fluxo de CO a alta presso em clusters catalticos de ferro, que se formam in situ da decomposio de Fe(CO)5 e condensao de tomos de ferro.

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2.2.2 Propriedades dos nanotubos de carbono Os nanotubos de carbono so o material mais forte e rgido conhecido, o que se deve ligao sp2 do carbono, que a ligao qumica mais forte que existe. Ao longo do eixo, os nanotubos exibem excelentes propriedades mecnicas devido natureza destas ligaes. H muitos valores experimentais diferentes reportados para o mdulo de Young e resistncia traco dos nanotubos, dependendo do protocolo e do volume do tubo assumido. No entanto, o mdulo de Young normalmente entre 1 a 1.5 TPa e a resistncia trao tem valores nas dezenas de GPa (muito superior aos 1.2 Gpa de uma liga de ao-carbono) [10, 11, 13]. Inicialmente, o mtodo para medir o mdulo de Young de um nanotubo era por microscopia electrnica de transmisso (TEM), a partir das vibraes geradas termicamente. Mais tarde, foram possveis medies directas utilizando microscopia de fora atmica (AFM). Tanto o mdulo como a resistncia trao so altamente dependentes do mtodo de sntese dos nanotubos e subsequente processamento. Os nanotubos so altamente flexveis, podendo dobrar-se repetidamente at 90 sem partir ou danificar [13]. Na Tabela 1 podem-se comparar estas propriedades mecnicas dos nanotubos com as de outros materiais conhecidos. Como se pode verificar, para alm de possuirem excelentes valores de mdulo de Young e resistncia trao, os nanotubos tm baixa densidade relativamente a metais. Os valores so referentes direo axial do tubo, sendo que os nanotubos no so to rgidos na direo radial.
Tabela 1 Propriedades mecnicas dos nanotubos de carbono e outros materiais conhecidos [9].

Propriedades mecnicas SWNT MWNT Ao Alumnio Mdulo de Young (GPa) 500 1500 200 1000 200 70 Resistncia trao 20-100 10-60 0.400 0.11 Densidade ~1 2.16 7.86 2.71

Em termos de propriedades elctricas, os nanotubos exibem igualmente propriedades extraordinrias. A resistividade medida em cordas de SWNTs da ordem dos 10 -4 .cm, o que significa que as cordas so as fibras de carbono mais condutivas que existem. Os nanotubos exibem a chamada conduo balstica, que consiste na conduo elctrica em que os electres seguem um percurso directo, ao contrrio da normal difuso trmica, em que chocam com os

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fones. Assim, os nanotubos so capazes de conduzir correntes ao longo de distncias muito grandes, muito rapidamente e com muito poucas perdas. A maior parte dos condutores elctricos tem uma resistncia finita positiva, o que faz com que dissipem potncia na forma de calor. A densidade de corrente no pode ser demasiado alta seno o condutor derrete ou arde, ou o material isolador falha. A altas densidades de corrente, o material que constitui a ligao elctrica (interconnect), tipicamente Al ou Cu, comea mesmo a mover-se, num fenmeno conhecido como electromigrao. A densidade de corrente tpica qual ocorre electromigrao em interconnects de Cu ou Al entre 106 e 107 A/cm2. Medies da densidade de corrente em nanotubos deram valores superiores a 107 A/cm2 e, em teoria, os nanotubos metlicos podem conduzir uma densidade de corrente elctrica to alta como 10 13 A/cm2 [11]. Logo, os nanotubos podero ser uma alternativa aos actuais interconnects de Al ou Cu para resolver o problema da electromigrao a altas densidades de corrente. Uma outra propriedade elctrica exibida pelos nanotubos a emisso de campo (field emission), que permite a um dispositivo emitir electres em consequncia da aplicao de um campo elctrico. Os nanotubos exibem emisso de campo para uma tenso de apenas algumas centenas de V, emitindo correntes na ordem dos 0,1 mA. Todos os nanotubos devero ser muito bons condutores trmicos ao longo do tubo, mas bons isoladores lateralmente ao eixo. Prev-se que os nanotubos possam transmitir at 6000 W.m-1.K-1 temperatura ambiente (a condutividade trmica do Cu 385 W.m-1.K-1). A estabilidade trmica dos nanotubos estima-se em 2800C em vcuo e 750C no ar *9, 10+. 2.2.3 Aplicaes dos nanotubos de carbono As propriedades superiores dos nanotubos fazem com que tenham aplicaes em muitas reas da nanotecnologia, em electrnica, ptica, cincia de materiais, entre outras. Devido s suas propriedades mecnicas, so usados para reforar a rigidez de materiais compsitos de alta performance, substitundo as fibras de carbono tradicionais, o kevlar ou as fibras de vidro (os mais resistentes at data), em aplicaes como equipamento aeroespacial sujeito a condies extremas (existe mesmo um projecto para construir um elevador espacial com base nos nanotubos de carbono [11, 14]), ou noutras mais terra terra, como por exemplo a bicicleta vencedora da Tour de France de 2006, constituda por fibra de carbono reforada com nanotubos [15]. Uma outra aplicao importante da rigidez e flexibilidade dos nanotubos como sondas para microscpios de fora atmica e de efeito de tnel (STM) [13].

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Devido s suas extraordinrias propriedades electrnicas, os nanotubos tm um grande potencial para construo de partes electrnicas nanoescala. Os nanotubos metlicos conduzem melhor do que o Cu podendo ser utilizados em nanofios elctricos e os nanotubos semicondutores comportam-se como o Si. Logo, so grandes candidatos para substituir o Si e permitir passar da micro para a nanoelectrnica. possvel obter nanododos numa nica molcula, por fuso de dois nanotubos com quiralidades diferentes, um condutor e outro semicondutor (Fig. 16) [13].

Figura 16 Dodo rectificador com nanotubos [16].

Figura 17 FET com nanotubos (IBM) [17].

Em transstores de nanotubos como o esquematizado na Fig. 17, os nanotubos individuais (SW ou MW) funcionam como o canal do transstor de efeito de campo (FET). Foi tambm possvel desenvolver a primeira porta lgica intramolecular, usando FETs de SWNTs. Uma vez que os SWNTs so p-FETs quando expostos a oxignio e n-FETs quando no expostos, protegendo metade de um SWNT da exposio ao O2 produz-se um SWNT que funciona como porta lgica NOT [15]. Estes so os primeiros passos para o desenvolvimento de circuitos mais complexos. Alguns problemas nesta passagem da micro para a nanoelectrnica com os nanotubos esto relacionados com pequenas variaes na condutividade dos nanotubos, assim como com a necessidade de dar formas especficas aos componentes, ou crescer nanotubos em direes especficas. O processo de emisso de campo nos nanotubos poder ser vantajoso em vrias aplicaes, tais como iluminao e ecrs planos de alta definio. A forte capilaridade dos nanotubos de carbono, associada grande rcio superfcie/peso, torna-os ideais para absoro de gs, o que tem aplicao no armazenamento de gs em clulas de combustvel. Devido sua fluorescncia no infravermelho prximo (NIR), os nanotubos so bons candidatos para serem usados como biosensores pticos, para detectar alvos especficos no corpo humano, ligando-os por exemplo a protenas com ligao especfica s clulas alvo [13].

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Nanopartculas
Uma nanopartcula pode ser definida como a unidade mais pequena que se comporta

como um todo em termos de propriedades e transporte, com pelo menos uma das dimenses inferior a 100 nm [18]. No entanto, esta limitao na definio de tamanho no rgida, at porque existem vrias aplicaes interessantes com partculas de algumas centenas de nm. As nanopartculas com tamanhos entre 1 e 100 nm so tambm classificadas como ultrafinas [18, 19]. Embora a maioria das molculas esteja dentro destas dimenses, normalmente as molculas individuais no so referidas como nanopartculas. As nanopartculas so maiores do que os tomos ou molculas individuais, mas menores do que o slido macio. Logo, no obedecem nem qumica quntica nem s leis da fsica clssica, tendo propriedades que diferem bastante do esperado [19]. A transio das micro para as nanopartculas leva a grandes mudanas nas propriedades fsicas, provocadas por dois principais fenmenos que se observam nesta transio: o aumento da rcio rea superficial / volume e o aumento da predominncia dos efeitos qunticos. O aumento da rcio rea superficial / volume leva a um aumento da dominncia do comportamento dos tomos superfcie da partcula sobre os tomos interiores (por exemplo, uma nanopartcula de CdS com 4 nm tem cerca de 1500 tomos, 500 dos quais esto na superfcie). Esta dominncia dos tomos superficiais sobre os tomos interiores traduz-se em propriedades interessantes e por vezes inesperadas das nanopartculas (e.g. nas clulas fotovoltaicas, a absoro de luz muito maior em materiais compostos por nanopartculas do que em filmes finos de folhas contnuas de material). Alm disso, o facto de as nanopartculas terem dimenses inferiores ao comprimento de onda da luz torna-as transparentes, uma propriedade que as torna teis para aplicaes como revestimentos, cosmtica ou electrnica transparente. No entanto, nem sempre as propriedades fsicas adquiridas pelas nanopartculas so desejveis, por exemplo os materiais ferroelctricos inferiores a 10 nm podem inverter a sua direo de magnetizao usando a energia trmica da temperatura ambiente, logo tornam-se desadequados para armazenamento de memria. O aumento da predominncia dos efeitos qunticos mais notvel em metais e semicondutores e ocorre porque o tamanho da nanopartcula se torna comparvel ao comprimento de onda de de Broglie dos seus portadores de carga [19]. Devido ao confinamento espacial dos portadores, os limites das bandas de valncia e de conduo dividem-se em nveis discretos, quantizados, semelhantes aos de tomos e molculas (Fig. 18). medida que os

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tamanhos das partculas diminuem, o espaamento dos nveis electrnicos e a bandgap aumentam, porque os pares electro-lacuna esto muito mais prximos e as interaes de Coulomb entre eles no podem ser negligenciadas, aumentando a energia cintica total.

Figura 18 Bandas de conduo e valncia nos estados macio, nanoparticulado e atmico de um metal (A) e de um semicondutor (B) [20].

Devido aos fenmenos nicos que ocorrem nas nanopartculas, possvel controlar selectivamente as suas propriedades, variando o tamanho, morfologia e composio das partculas produzidas. Assim, possvel alterar completamente as propriedades do material macio, o que quando feito controladamente, permite melhorar as propriedades dos materiais. As nanopartculas podem, entre outras coisas, tornar os metais mais fortes e resistentes, as cermicas mais maleveis e flexveis ou transformar materiais normalmente isoladores em condutores trmicos/elctricos. Por esta razo, a nanotecnologia levou e continuar a levar durante o sculo XXI, a uma revoluo a nvel industrial, pela re-engenharia de muitos produtos existentes e desenvolvimento de novos produtos, processos e aplicaes. O termo nanopartcula muito genrico e muitas vezes usado para englobar materiais que tm termos especficos que os descrevem melhor, como as nanocpsulas, os quantum dots (pontos qunticos), os dendrmeros (polmeros globulares) ou os materiais nanoporosos. Devido s suas caractersticas especiais, cada um destes tipos de nanopartculas merece um tratamento

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individual, sendo que as nanocpsulas e os quantum dots so abordados nos subcaptulos seguintes deste trabalho. 4.0.1 Tipos de nanopartculas As nanopartculas podem ser feitas de uma variedade muito grande de materiais, podendo classificar-se em nanopartculas cermicas, metlicas (e.g. Pt, Ni, Co, Fe, Ag) e outras como as polimricas (e.g. nanopartculas de quitosano, que melhoram a absoro, sendo usadas por exemplo em condicionadores de cabelo e cremes para a pele). Nesta classificao excluem-se os tipos particulares de nanopartculas como os referidos anteriormente. O material mais comum da nova gerao de nanopartculas a cermica, que se subdivide em cermica de xidos metlicos (e.g. TiO2, ZnO, Al2O3, Fe2O3) e nanopartculas de silicatos (xidos de silcio), geralmente na forma de flocos de argila nanoescala (Fig. 19) . As nanopartculas de silicato so flocos com cerca de 1 nm de espessura e 100 a 1000 nm de comprimento. J so produzidas h muitos anos e o tipo de argila mais comum usada a montmorilonite. As nanopartculas em metal e em nanops cermicos de xidos metlicos tendem a ter aproximadamente o mesmo tamanho em todas as 3 dimenses, desde os 2 ou 3 nm at algumas centenas (poderia-se esperar que partculas to finas se suspendessem no ar mas de facto elas formam um p muito fino, sendo atradas e mantidas juntas por foras electrostticas) [18].

Figura 19 Nanopartculas cermicas: A) de xidos metlicos (Fe3O4); B) de silicato (SiO2) [21, 22].

As nanopartculas de metal puras, assim como as nanopartculas cermicas, podem ser sinterizadas a temperaturas mais baixas do que as partculas maiores, levando a revestimentos melhores e mais fceis de criar (com aplicaes electrnicas como em condensadores), assim como a reduo dos custos de fabrico. As nanopartculas cermicas de xidos metlicos podem tambm ser usadas para criar camadas finas, cristalinas ou amorfas. J foram feitos fios

18

supercondutores de nanopartculas cermicas, criando um material relativamente flexvel, enquanto que os materiais de cermica tradicionais so muito frgeis. 4.0.2 Sntese de nanopartculas H uma grande variedade de tcnicas de produo de nanopartculas, que se dividem essencialmente em trs processos: gasosos , lquidos e do estado slido. As partculas podem depois ser revestidas com substncias hidroflicas ou hidrofbicas, dependendo da aplicao desejada. Existe tambm o processo de auto-montagem (self-assembly), que no se encaixa propriamente numa destas categorias, em que as nanopartculas se formam a partir de molculas que se agregam espontaneamente [18]. Os processos gasosos envolvem a vaporizao de um metal slido seguida da condensao rpida do vapor para formar aglomerados de nanopartculas (nano-clusters) que se acumulam na forma de um p. Esta tcnica usada para produzir nanopartculas metlicas e cermicas de xidos metlicos. Para criar nanopartculas metlicas, utilizam-se gases inertes para evitar a oxidao, enquanto que para produzir nanopartculas cermicas de xidos metlicos usada uma atmosfera reactiva de oxignio. Existem vrias formas de vaporizar o metal e a variao do meio no qual o vapor libertado afecta a natureza e o tamanho das partculas, pela variao de parmetros como a temperatura, atmosfera gasosa e taxa de evaporao. A grande vantagem das tcnicas gasosas so os baixos nveis de contaminao. Os processos lquidos consistem em crescer nanopartculas num meio lquido composto por vrios reagentes ou precursores qumicos. Tambm chamados mtodos coloidais, baseiam-se em processos de precipitao em solues (e.g. sol-gel). O tamanho final das partculas pode ser controlado escolhendo qumicos tais que formem partculas estveis que parem de crescer a um certo tamanho ou, tal como nos processos gasosos, parando o processo quando o tamanho desejado alcanado. Geralmente, as tcnicas qumicas so mehores do que as tcnicas de condensao de vapor para controlar a forma final das partculas. Os mtodos so geralmente baratos e de alto volume, mas a contaminao pelos qumicos precursores pode ser um problema, que pode interferir com um dos usos comuns das nanopartculas, o revestimento de superfcies por sinterizao (sintering). Nos processos de estado slido, utilizado um mtodo top-down para obteno de nanopartculas, atravs de tcnicas como a moagem, triturao ou pulverizao. Estas tcnicas podem ser usadas para produzir nanopartculas de materiais que no se conseguem produzir pelas

19

duas tcnicas anteriores. O tamanho e propriedades das partculas resultantes variam em funo do material e tempo de moagem, assim como do meio atmosfrico. A contaminao pelo material de moagem pode ser um problema [18]. 4.0.3 Aplicaes das nanopartculas As nanopartculas tm infindveis aplicaes nas mais variadas reas, e.g.: Catalisadores escala nanomtrica, o ouro, por exemplo, torna-se um bom catalisador. As nanopartculas de Au sobre um suporte poroso proporcionam um catalisador prtico que, num arranque a frio, decompe os xidos de azoto e o monxido de carbono em substncias incuas. Alm disso, as nanopartculas de ouro so tambm um novo e promisssor candidato a catalisador para as clulas de combustvel.

Figura 20 Nanopartculas de ouro para novos catalisadores [23].

Obturaes dentrias nanopartculas de apatite (fosfato de clcio) permitem obturaes dez vezes mais rpidas de canais no esmalte do que preparados de apatite clssicos e a camada remineralizada comporta-se exactamente como o material do dente;

Protectores solares nanopartculas de ZnO tm propriedades de bloqueio de UV superiores s do material macio, tornando protectores solares mais eficientes; Nanoelectrnica transstores de electro nico (Fig. 21), condensadores mais pequenos e de alta performance (e.g. para telemveis), memrias e meios de armazenamento, etc.

Figura 21 Representaes esquemticas de transstores de electro nico, em que nanopartculas de CdSe so colocadas entre dois fios de ouro [19].

20

Clulas solares e dipositivos electrocrmicos, tirando partido das propriedades das nanopartculas semicondutoras (quantum dots), abordadas em 4.3; Txteis nanopartculas permitem desenvolver tecidos impermeveis e que se sujam muito menos, pois a gua e outras partculas no aderem ao material (a rea de contacto mnima e as foras de tenso superficial prevalecem sobre as foras de adeso);

Espelhos anti-embaciamento de igual forma, nanopartculas de cermica com um invlucro orgnico, um material que diminui a tenso superficial da gua, so usadas para revestir espelhos de casa de banho resistentes ao embaciamento;

Isqueiros resistentes corroso, em esquentadores a gs; Biomarcadores para ressonncia magntica nanopartculas magnticas permitem melhor detalhe e contraste;

4.1

Nanocpsulas
As nanocpsulas definem-se como qualquer nanopartcula que consista num recipiente

com um espao no qual podem ser colocadas substncias de interesse [24]. Desta definio excluem-se as nanopartculas revestidas. As nanocpsulas j existem desde sempre na Natureza, que utiliza fosfolpidos como constituntes das membranas de clulas e lipossomas, que so cpsulas usadas para transportar substncias, dentro e fora das clulas (Fig. 22). Os fosfolpidos so molculas hidrofbicas de um lado e hidroflicas do outro, o que significa que quando so colocadas num meio aquoso, formam espontaneamente cpsulas, em que as pores hidrofbicas esto no interior e as hidroflicas em contacto com a gua.

Figura 22 Diagrama de membrana celular (bicamada fosfolipdica) e formao de lipossoma.

Lipossomas fabricados pelo homem so usados j desde h alguns anos para controlar a libertao de substncias ou proteg-las do meio em que se inserem. Hoje em dia so produzidas

21

nanocpsulas de muitos outros materiais, tais como polmeros. As cpsulas polimricas, ao contrrio dos lipossomas e cpsulas semelhantes, so mantidas juntas por fortes ligaes covalentes, o que as torna particularmente robustas. O processo bsico de produo o mesmo, comeando por uma emulso de leo (substncia gordurosa ou hidrofbica) em gua ou gua em leo, criando nanocpsulas oleosas ou aquosas, respectivamente. A sntese de nanocpsulas uma forma de auto-montagem ou self-assembly, referida em 4.1.2. As condies de formao no so extremas, o que torna as nanocpsulas particularmente atractivas para encapsulamento de substncias biolgicas sensveis. O tipo de emulso usada depende da substncia a encapsular e do tipo de aplicao. Por exemplo, a injeo ultravenosa de nanocpsulas requer uma base aquosa e por isso, nanocpsulas feitas de uma emulso de leo em gua [24]. No entanto, a natureza hidrofbica ou hidroflica da substncia a encapsular pode no ser compatvel com a aplicao desejada (no exemplo dado, uma nanocpsula aquosa, i.e. encapsulando substncias hidroflicas, sendo hidrofbica no exterior, no seria compatvel). A forma de resolver estes conflitos passa por revestir as cpsulas com camadas adicionais de substncias como protenas, polmeros ou outros materiais que, para alm da afinidade desejada (por gua ou gordura), podem ser escolhidos com base em vrias propriedades desejveis como a adeso, resistncia a diferentes ambientes, entre outras. As nanocpsulas so geralmente funcionalizadas, ligando substncias superfcie da membrana ou inserindo-as no seu interior, de forma a poder criar um mecanismo de trigger para a entrega de frmacos a um alvo especfico. Essas substncias tm afinidade pelo alvo especfico e propriedades especiais que permitem s nanocpsulas transportarem o seu contedo at ao alvo e s a libertarem o seu contedo em resposta a uma biomolcula particular. Por exemplo, Liu et al. (2008) utilizaram estruturas modificadas das molculas polimricas de quitosano (CHC: carboxymetil hexanoyl chitosan) para encapsular doxorubicina (DOX), um frmaco anticancergeno [25]. O processo de formao das nanocpsulas de CHC semelhante ao dos lipossomas (Fig. 23). A interao hidrofbica entre os grupos hexanoil fornece a fora condutora para a auto-agregao, ficando os grupos hidrofbicos no interior e os hidroflicos no exterior em contacto com gua. Na Fig. 24 pode-se visualizar uma imagem de TEM dos aglomerados de nanocpsulas de CHC-4 (grau de substituio dos grupos: 50% carboximetlico e 48% hexanoil) [25], assim como imagens de SEM das nanocpsulas produzidas.

22

Figura 23 Processo de formao de nanocpsulas de CHC [25].

Figura 24 Imagens TEM (esquerda) e SEM (direita) de nanocpsulas CHC-4 [25].

Em vez de um mecanismo de triggering para a entrega de frmacos, o interior das nanocpsulas pode ser libertado por difuso simples, se as molculas forem suficientemente pequenas, ou a estrutura das nanocpsulas pode degradar-se naturalmente ou ser degradada por ultrasons. As substncias utilizadas pelos vrus para encapsular os seus cidos nucleicos so muitas vezes bons modelos para as nanocpsulas, j que incham ou contraem em resposta a mudanas de pH ou salinidade, libertando o seu contedo, o que pode ser usado numa aplicao de entrega de frmacos [24]. Para alm da rea biomdica e biofarmacutica, as nanocpsulas tm aplicaes noutras reas, como na alimentar ou cosmtica: Uma empresa australiana (Tip-Top Bakeries) produz po com nanocpsulas de cidos gordos mega-3 do atum (estas s libertam o seu contedo no estmago), que adicionam valor nutricional ao po e ajudam sua conservao;

23

Uma empresa israelita (Shemen Industries) recorre ao nanoencapsulamento de fitoesteris fortificados para produzir leo de canola que reduz a absoro de colesterol em 14%; A Loral utiliza nanocpsulas no desenvolvimento de cosmticos, para ajudar os ingredientes activos a penetrarem nas camadas mais profundas da pele.

4.2

Quantum Dots
Os quantum dots so semicondutores com todas as trs dimenses na ordem dos 1 a 50

nm, i.e., so nanopartculas semicondutoras. Nesta ordem de tamanhos, os electres exibem efeitos mecnicos qunticos e da resultam efeitos pticos e electrnicos interessantes. Na literatura os quantum dots so tambm conhecidos como nanocristais semicondutores, e englobados nas nanopartculas. Considere-se um semicondutor a ser irradiado com luz de energia superior energia de bandgap Eg (para semicondutores, isto corresponde a luz no NIR, visvel e UV). Um electro ir ser promovido da banda de valncia para a banda de conduo, deixando uma lacuna, isto , uma carga positiva para trs. Esta lacuna pode ser considerada como a ausncia de um electro e comporta-se como uma partcula com a sua prpria massa efectiva e carga no slido. A separao espacial do par electro-lacuna produzido (chamado excito) pode ser calculada usando um modelo de Bohr modificado: 2 = 2 , em que r o raio da esfera definida pela separao 3D do par electro-lacuna, a constante dielctrica do semicondutor, mr a massa reduzida do par electro-lacuna, h a constante de Planck e e a carga do electro [26].
Tabela 2 Dimetro de Bohr do excito e Eg de alguns semicondutores [adaptada de 27].

Semicondutor CuCl CdS CdSe CdTe GaAs Si Ge

Energia de bandgap (eV) 3,4 2,53 1,74 1,50 1,43 1,11 0,67

Dimetro de Bohr do excito () 13 56 106 150 280 37 (longitudinal) 90 (transverso) 50 (longitudinal) 200 (transverso)

24

Para muitos semicondutores, as massas do par electro-lacuna foram determinadas por ressonncia ciclotrnica de ies e so geralmente entre 0.1 me e 3 me. Para constantes dielctricas de semicondutor tpicas, o clculo sugere que a separao espacial electro-lacuna cerca de 1 a 10nm para a maioria dos semicondutores, sendo claramente dependente do material (Tabela 2). Quando o tamanho do material se torna comparvel ao dimetro de Bohr do excito, os efeitos de confinamento quntico tornam-se importantes. Nos semicondutores macios, como as dimenses do cristal so muito superiores ao raio de Bohr do excito, o excito pode estender-se para o seu limite natural. No entanto, nos quantum dots, quando o excito criado, as dimenses fsicas da partcula confinam o excito (de forma semelhante ao problema da partcula numa caixa da mecnica quntica) e comeam-se a observar efeitos qunticos, como a quantizao dos nveis de energia. Se o tamanho do quantum dot 3-10 vezes maior do que o dimetro de Bohr do excito, o ponto diz-se estar no regime de confinamento fraco, mas se for mais pequeno, o quantum dot est no regime de confinamento forte [27]. Nestas condies, h grandes repercusses no comportamento de absoro e emisso do material semicondutor. Alternativamente, pode-se pensar na nanopartcula como tendo uma estrutura electrnica intermdia entre as bandas dos semicondutores macios e as ligaes das orbitais das molculas. Uma consequncia deste carcter intermdio que a Eg est correlacionada com o tamanho: medida que as dimenses da particula diminuem, a Eg aumenta [26]. Os quantum dots so tambm chamados tomos artificiais, devido aos estados electrnicos quantizados, que tm muitas analogias com os estados electrnicos dos tomos, e pela possibilidade de controlar os estados de energia dos electres variando o tamanho das nanopartculas, ou pela aplicao de uma tenso. Na realidade, cada quantum dot contm entre 100 a 100000 tomos no seu volume [26, 28]. Louis Brus foi pioneiro nos quantum dots, com os quais trabalhou na Bell Labs durante os anos 70. Brus desenvolveu um popular modelo de massa efectiva que relaciona o tamanho da partcula com a energia de bandgap de um quantum dot semicondutor: = + 2 1 1 1,8 2 + 82 40

, onde Eg a energia de bandgap, R o raio do quantum dot, me a massa efectiva do electro no

slido, mh a massa efectiva da lacuna no slido e a constante dielctrica do slido. O segundo termo do segundo membro da equao um termo tipo partcula-numa-caixa para o excito,

25

enquanto que o ltimo termo representa a atrao de Coulomb do par electro-lacuna, mediada pelo slido. Assume-se nesta equao que os quantum dots so esfricos e que as massas efectivas dos portadores de carga e a constante dielctrica do slido so constantes em funo do tamanho. O modelo de Brus traduz bem a relao Eg-tamanho para quantum dots maiores, mas as predies no correspondem a medies experimentais para tamanhos de partculas muito pequenos [26]. Muitas outras aproximaes mais complexas tm sido derivadas teoricamente e correspondem melhor a valores experimentais. O aumento da Eg com a diminuio do tamanho das nanopartculas pode ser observado experimentalmente pelo shift azul no espectro de absoro e por vezes at visualmente pela alterao da cor das amostras. Uma Eg maior significa que necessria mais energia para excitar um electro da banda de valncia para a banda de conduo e logo, luz de maior frequncia e menor comprimento de onda absorvida. Uma vez que a frequncia de emisso do quantum dot depende da Eg, possvel controlar o comprimento de onda de emisso com grande preciso, apenas pela adio ou subtrao de alguns tomos do quantum dot, obtendo-se a cor de emisso desejada (Fig. 25)

Figura 25 Nanopartculas de CdTe. Cores dependem apenas do tamanho [23].

O pico de emisso gaussiano e ocorre a um comprimento de onda ligeiramente maior do que o primeiro pico de excito (onset de absoro: comprimento de onda a patir do qual os quantum dots absorvem luz). Esta separao de energias referida como shift de Stokes. Uma propriedade interessante dos quantum dots que o comprimento de onda do pico de emisso independente do comprimento de onda da luz de excitao, assumindo que mais curto do que o do onset de absoro. A largura de banda do espectro de emisso (FWHM) deriva da temperatura, largura de linha espectral natural dos quantum dots e da distribuio de tamanhos da populao de quantum dots numa soluo ou matriz de material. Distribuies de tamanho mais finas resultam em FWHMs mais baixas. Para quantum dots de CdSe, uma distribuio de tamanhos de 5% corresponde a um pico de emisso com cerca de 30 nm FWHM [29].

26

Ao contrrio dos semicondutores macios, que tm um espectro de absoro quase uniforme, o espectro de absoro dos quantum dots aparece como uma srie de picos sobrejacentes que so mais largos para comprimentos de onda mais curtos. Mais uma vez, isto ocorre devido natureza discreta dos nveis de energia dos electres nos quantum dots, sendo que cada pico corresponde a uma energia de transio entre nveis de energia discretos. Para diferentes tamanhos de quantum dots, verifica-se que medida que o tamanho diminui, o pico de absoro desloca-se para o azul, i.e., para comprimentos de onda mais curtos (Fig. 26).

Figura 26 Espectros de absoro (em cima) e de emisso (em baixo) de quantum dots de CdSe estabilizados com uma camada superficial de ZnS, para diferentes tamanhos do ncleo de CdSe (de 2.7 a 4.1 nm) [26].

Uma outra tcnica para observar experimentalmente o confinamento quntico nos quantum dots a espectroscopia vibracional de Raman. A espectroscopia de Raman ocorre quando luz incide numa amostra e excita modos vibracionais, o que faz com que perca energia e altere o seu comprimento de onda, sendo depois detectada. Um pico alto e estreito indicador de uma amostra cristalina. medida que se comeam a sentir os efeitos de confinamento, o espectro

27

de Raman alarga [27]. Na Fig. 27 podemos ver o shift Raman para diferentes tamanhos de quantum dots de Ge. Para tamanhos menores claramente visvel um alargamento do pico [27].

Figura 27 Shift Raman para diferentes tamanhos de quantum dots de germnio [27].

4.2.1 Sntese de quantum dots Em termos de sntese, existem duas abordagens gerais para sintetizar quantum dots. Uma delas a bottom-up, mais familiar aos qumicos, em que precursores moleculares ou inicos dos quantum dots so postos a reagir em soluo para produzir quantum dots como colides. A outra abordagem, mais familiar aos engenheiros, a top-down: tamanhos de features entre 1-10nm so esculpidos litograficamente ou electroquimicamente a partir de um substrato semicondutor. So tambm possveis abordagens hbridas, por exemplo, precursores moleculares para os quantum dots que reagem na fase gasosa e so depois depositados como filmes finos em substratos [26]. Inicialmente, os quantum dots crescidos quimicamente (e.g. por Louis Brus) eram basicamente s de CdSe ou CdTe, mas hoje em dia produzem-se quantum dots de praticamente qualquer semicondutor. A arquitectura destes quantum dots est a tornar-se muito sofisticada, com estruturas tipo cebola formadas por um material revestido por outro (core-shell) a tornaremse mais comuns. Estas estruturas podem ser usadas para proteger um quantum dot quimicamente ou electricamente sensvel de um ambiente menos amigvel [28]. Uma outra tcnica para formar quantum dots o crescimento expitaxial de tenso (strained epitaxial growth), em que os quantum dots so auto-montados, depositando um filme fino semicondutor com uma constante de rede cristalina maior (distncia entre tomos na estrutura cristalina) sobre um semicondutor com uma constante de rede cristalina menor. Apenas uma ligeira percentagem de diferena entre os tamanhos das redes cristalinas cria tenses (ou

28

presses) num filme que so dez vezes superiores quelas existentes nos oceanos mais profundos da Terra [30]. medida que novas camadas so depositadas, estas presses enormes foram o filme inicialmente plano a separar-se em pontos e a emergir numa terceira dimenso para aliviar as tenses, em vez de continuar a crescer contra a resistncia em duas dimenses. Sistemas tpicos eram Ge em Si e InAs em GaAs [28]. So estes quantum dots auto-montados que tm sido usados para fabricar lasers de quantum dots e este processo levou capacidade de encontrar formas de gerar fotes nicos. 4.2.2 Aplicaes dos quantum dots Os quantum dots tm aplicaes em dispositivos pticos e optoelectrnicos, computao quntica e armazenamento de informao: LEDs, ecrs, iluminao; Marcadores fluorescentes e sensores (e.g. testes de DNA); Clulas fotovoltaicas (gerao de mltiplos excites por foto); Lasers de comprimentos de onda muito precisos (Quantum Dot Laser); Gravao e armazenamento de informao; Computadores qunticos o spin de um electro num quantum dot pode ser usado para representar um bit quntico, ou qubit;

4
4.1

Casos de Estudo em Nanobiotecnologia

Aneeve Nanotechnologies
A Aneeve uma empresa em fase inicial, fundada em 2007 como spin-out da UCLA

(Universidade da Califrnia, Los Angeles) e localizada no campus universitrio, fazendo parte da iniciativa incubadora da UCLA em conjunto com o CNSI (California Nanosystems Institute). A incubadora permite empresa ter acesso a instrumentao de fabrico e caracterizao, assim como outros servios e infra-estruturas da universidade (e.g. sala limpa), eliminando despesas de aquisio de equipamento e recursos. Inicialmente, a empresa fornecia nanotubos de carbono puros e alinhados em materiais isoladores e em silcio, para aplicaes em dispositivos altamente lineares, de baixo rudo e de alta frequncia. Actualmente, os principal objectivos da empresa passam por desenvolver nanoelectrnica e nanodispositivos que respondam s necessidades da indstria nas reas de

29

semicondutores, defesa, comunicao e energia, por exemplo sensores sem fios baratos e de baixo consumo. Para tal, explora novas formas de nanofabrico para nanoelectrnica, incluindo nanomateriais avanados como o grafeno, que exibe a maior qualidade electrnica de todos os materiais conhecidos. O grafeno tem uma mobilidade elctrica de 200.000 cm 2/(V.s), mais de 100 vezes superior do silcio, o que faz com que seja um condutor extremamente eficiente. Isto permite que seja usado em dispositivos de alta performance tanto para aplicaes de alta potncia (power FETs) como de baixa potncia (circuitos integrados). O grafeno tambm exibe alto ganho e operao em alta frequncia, nos THz, o que o torna til em aplicaes de circuitos analgicos e de radiofrequncia. Outros aspectos incluem a excelente condutividade trmica de at 5850 W/mK (50 vezes mais do que o Si), o que permite us-lo como material superior na gesto trmica de dispositivos nanoescala (e.g. dissipadores de calor) [31]. Para alm da ligao estreita com a UCLA, a Aneeve tem apoio da DARPA (agncia do Departamento de Defesa dos Estados Unidos responsvel pelo desenvolvimento de novas tecnologias para uso militar) e colabora com empresas como a Lockheed Martin (aeroespacial) e Intel Stanford (electrnica e processadores). De entre as novas formas de nanofabrico para nanoelectrnica, destaca-se a impresso a jacto de tinta com tintas de nanotubos de carbono, que permite fabricar cirtuitos integrados impressos em vrios substratos, a baixo custo e em larga escala, com aplicaes em vrias reas incluindo em biosensores. Nesta rea especfica, os investigadores da Aneeve esto a desenvolver sensores hormonais usando circuitos impressos a jacto de tinta com nanotubos de carbono (Fig. 28), que podero ajudar na compreenso e tratamento de condies relacionadas com flutuaes hormonais tais como a infertilidade ou menopausa. A utilizao dos nanotubos aumenta a sensibilidade de deteo hormonal.

Figura 28 Impressora de jacto de tinta com cartuchos de tinta de nanotubos de carbono [31].

30

Esta uma combinao de tecnologias eficiente a nvel de custos, que permitir desenvolver um sensor compacto, porttil, fcil de usar e que dar informao instantnea dos nveis hormonais, de forma semelhante a um sensor de glicmia por picada no dedo, permitindo um melhor controlo da terapia hormonal (actualmente no existe ainda sensor hormonal deste gnero). O princpio de funcionamento do sensor baseia-se na ligao dos nanotubos ao estradiol (principal tipo de estrognios, hormonas femininas), que altera a sua resistncia e propriedades pticas, sendo essa mudana transmitida por ondas de rdio a um outro dispositivo. At agora, foi demonstrado que os sensores so capazes de monitorizar estrognios com uma exactido ao nvel de ng/ml. No entanto, para poderem ser eficazes com uma nica picada no dedo, a sensibilidade tem de ser melhorada para pg/ml [32]. A combinao de tecnologias usadas na Aneeve inovadora, pois integra vrias tecnologias que outros tm explorado individualmente, de uma forma que eficiente a nvel de custos. Esta empresa no est s a olhar ao nvel de demonstrar conceitos ou novas tecnologias, mas mais para a sua viabilidade comercial e capacidade de integrao no mercado.

4.2

CENIMAT-i3N
O Centro de Investigao de Materiais (CENIMAT) est sedeado na Faculdade de Cincias e

Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa (FCT-UNL) e integra desde 2006 o Laboratrio Associado i3N (Institute for Nanostructures, Nanomodelling and Nanofabrication). Divide-se em 4 equipas de investigao que abrangem as diferentes reas da engenharia e cincia dos materiais: Estruturas e Materiais Dielctricos realiza actividade de investigao relacionada com a preparao e caracterizao de electretes polimricos, polmeros e cermicos piro e piezoelctricos, compsitos polmero-cermico electroactivos e sensores inteligentes; Materiais da Electrnica e Optoelectrnica desenvolve actividade de investigao e desenvolvimento nas reas de tecnologia de filmes finos (revestimento de semicondutores, xidos condutores e materiais isolantes), processos da microelectrnica (produo de circuitos integrados) e converso de energia (clulas e sistemas solares); Materiais Polimricos e Mesomrficos desenvolve investigao na rea dos cristais lquidos e polmeros, com aplicao por exemplo em janelas de transparncia controlvel;

31

Materiais Estruturais desenvolve investigao nas seguintes reas: cristaloqumica, anlise estrutural de materiais inorgnicos, tratamentos trmicos e termomecnicos de ligas metlicas, compsitos de matriz metlica, processamento de cermicos e compsitos vidro-cermicos, metalurgia extractiva e reciclagem de materiais [33]. O grupo de materiais da electrnica e optoelectrnica o que tem maior visibilidade

cientfica e meditica, maioritariamente devido ao trabalho da equipa da Doutora Elvira Fortunato, no desenvolvimento de dispositivos electrnicos envolvendo o papel como substrato: TFTs (Thin Film Transistor) orgnicos, circuitos lgicos, dispositivos electrocrmicos, etiquetas RFID, e at mesmo a utilizao do papel como parte activa dos dispositivos com o FET de papel e memrias do tipo RAM de papel [34, 35]. O Grupo coordena e colabora em vrios projectos nacionais e internacionais, dominando as tecnologias e as tcnicas de caracterizao adequadas para responder a solicitaes feitas pela indstria, incluindo o projecto e o fabrico de prottipos industriais. De entre os materiais investigados pelo grupo, destacam-se ainda os xidos transparentes condutores e semicondutores, nomeadamente os filmes finos de xido de ndio dopado com zinco (IZO) ou com zinco e glio (GIZO), com aplicaes em electrnica transparente.

Biosensor de DNA desenvolvido no CENIMAT-i3N

Na rea da nanobiotecnologia, desenvolvem-se no CENIMAT biosensores para aplicaes

point-of-care, i.e., biosensores portteis que podem ser utilizados no local de tratamento. Neste captulo aborda-se especificamente um desses biosensores, capaz de detectar sequncias especficas de DNA, tirando partido das propriedades pticas das nanopartculas de ouro.

5.1

Nanopartculas de ouro
As nanopartculas de ouro (AuNPs) tm propriedades fsico-qumicas facilmente regulveis

atravs de tcnicas adequadas de sntese. Para alm de robustez e elevadas reas superficiais, as AuNPs exibem propriedades pticas nicas, que resultam da Ressonncia de Plasmo de Superfcie (SPR Surface Plasmon Resonance), que responsvel pelas diferentes cores que as AuNPs exibem. A SPR um fenmeno que ocorre nas estruturas metlicas nanoescala e consiste numa oscilao colectiva de electres livres na superfcie da partcula, produzindo propriedades de absoro e disperso elctrica intensas. Logo, a SPR resulta numa banda de absoro de luz que, no caso das AuNPs, tem um pico de absoro aproximadamente nos 520 nm (verde). Esta

32

absoro de luz resultante da SPR leva a uma mudana de cor das partculas de ouro nanoescala. Enquanto que o ouro macio tem uma cor amarelada, as AuNPs exibem uma cor vermelha (uma vez que os comprimentos de onda na regio verde so absorvidos). Isto pode ser melhor compreendido pela roda das cores (Fig. 29), que indica a relao entre a cor de um objecto e a cor que ele absorve, situadas em lados opostos da roda.

Figura 29 Roda das cores: os objectos absorvem a luz de cor complementar que exibem, no lado oposto da roda.

Uma particularidade das AuNPs que a banda de SPR varia consoante o grau de agregao das partculas. Enquanto que as AuNPs monodispersas tm cor vermelha, com o pico da banda de SPR nos 520 nm, uma soluo de AuNPs agregadas tem cor azul, correspondente a um red-shift do pico da banda de SPR para cerca de 600 nm (Fig. 30). Ao absorverem comprimentos de onda mais altos, as AuNPs agregadas vo exibir cores correspondentes a comprimentos de onda mais baixos.

Figura 30 Mudana de cor de solues de AuNPs por agregao das partculas.

Os altos coeficientes de absoro das AuNPs que resultam da SPR fazem com que as AuNPs tenham maior sensibilidade em mtodos de deteo ptica do que os corantes usuais (e.g. fluorescncia), o que as torna ideias para desenvolver biomarcadores para identificao de compostos especficos. Isto feito por funcionalizao da superfcie das AuNPs, i.e., por ligao de molculas especficas sua superfcie, que por sua vez depois se vo ligar aos compostos alvo,

33

permitindo aplicar as AuNPs em vrias reas, tais como no diagnstico clnico, em anlises de contaminao de gua ou alimentos, anlises ambientais, entre outras. 5.1.2 Sntese e funcionalizao de AuNPs Existem vrios mtodos de sntese de AuNPs mas, devido sua simplicidade e alto rendimento, o mtodo mais usado para preparao de AuNPs esfricas para ensaios biolgicos mtodo da reduo de citrato, que consiste numa reao qumica de reduo de um sal de ouro com um citrato, produzindo uma soluo coloidal de AuNPs com dimetros entre 10 a 20 nm. O uso de citrato como agente de capping muito conveniente devido ao fcil tratamento de pssntese, j que pode ser facilmente substitudo por outros agentes (e.g. tiol) com funcionalidade apropriada para ligar ao analito biolgico de interesse. Existem j vrios mtodos para preparar AuNPs solveis em gua com bandas de SPR no NIR, o que tem um grande potencial para aplicaes biolgicas, j que permite o uso de AuNPs em fluidos biolgicos sem interferncia da absoro de outras molculas biolgicas [36]. A funcionalizao de AuNPs envolve o uso de ligandos bifuncionais nos quais uma parte liga nanopartcula enquanto a outra dirigida superfcie exterior da biomolcula especfica. Para a deteo especfica de sequncias especficas de cidos nucleicos em amostras biolgicas, as AuNPs so funcionalizadas com oligonucletidos tiolados, formando as chamadas nanosondas de ouro. As nanosondas de ouro so sintetizadas por reaes de derivatizao de uma soluo aquosa de AuNPs com um oligonucletido tiolado complementar ao do gene alvo (derivatizao uma transformao de um composto qumico num produto de estrutura qumica semelhante). Esta tcnica no s til em diagnstico pela deteo colorimtrica de DNA, mas tambm pode ser usada para estudar mecanismos moleculares de processos biolgicos, pela comparao da expresso gentica entre clulas em diferentes estados, ou para desenvolver frmacos especficos para um determinado gene anormal [37]. A funcionalizao de AuNPs tambm tem sido usada com outras biomolculas, incluindo anticorpos para melhoria de sinal em imuno-ensaios; carbohidratos para estudar interaes moleculares especficas e funcionalizao com ligandos que se podem customizar para ligao a protenas especficas ou ligao directa de pptidos e protenas superfcie da AuNP [36].

5.2

Deteo colorimtrica de DNA com AuNPs

Existem dois mtodos de hibridizao das nanosondas de ouro com o alvo de DNA:

34

Hibridizao cross-linking (Mirkin et al., 1996) consiste em usar duas nanosondas diferentes, cada uma funcionalizada com uma sequncia de DNA complementar a uma das regies do alvo. A hibridizao do alvo com as duas nanosondas resulta na formao de uma rede polimrica que faz com que as AuNPs se aproximem alterando a cor da soluo (resultado positivo azul e o negativo vermelho);

Hibridizao non-cross-linking este mtodo foi desenvolvido pelo grupo de biotecnologia da FCT-UNL [38] (Batista et al., 2006; Doria et al., 2007) e consiste em usar uma nica nanosonda e adicionar sal soluo. O aumento da fora inica provoca a agregao das AuNPs e a mudana de cor, se no estiver presente o DNA alvo. Se estiver presente a sequncia alvo complementar, a hibridizao previne a agregao das AuNPs pela adio do sal, o que faz com que a soluo mantenha a cor inicial (resultado positivo vermelho e negativo azul). A abordagem do grupo do CENIMAT baseia-se no segundo mtodo, onde a agregao das

nanosondas de Au induzida por um aumento da concentrao de sal na soluo. Apesar de ser possvel uma comparao visual (a olho n) que indica com fiabilidade o resultado, o mtodo consiste na comparao espectrofotomtrica das solues antes e depois da agregao das nanosondas induzida pelo sal (Fig. 31).

Figura 31 Mtodo do ensaio de deteo de DNA baseado em hibridizao non-cross-linking e comparao visual ou espectrofotomtrica dos resultados, 15 minutos aps a adio de sal [36].

35

Como se pode ver na imagem, uma mutao do DNA alvo ou a variao de apenas um nucletido da sequncia (SNP Single Nucleotide Polymorphism) leva a um resultado negativo. Este mtodo foi capaz de detectar especificamente quantidades de mRNA to pequenas como 0,3 g de RNA total no amplificado, com a mudana de cor fcil de detectar visualmente [39]. um mtodo barato, fcil de realizar, no requer amplificao ou melhoria de sinal nem controlo de temperatura e demora menos de 15 minutos a revelar o resultado, constituindo uma alternativa barata e fcil aos ensaios de fluorescncia ou radioactividade. A AFM permitiu tambm verificar o mecanismo de hibridizao das nanosondas de Au com alvos de DNA de cadeia dupla previamente desnaturados para a forma de cadeia nica, como se pode ver na Fig. 32.

Figura 32 Imagem AFM do produto da hibridizao de nanosondas de Au (a amarelo) e DNA alvo (fios azuis) [36].

5.3

Biosensor de DNA
O biosensor de DNA desenvolvido no CENIMAT [40] resulta da combinao de trs

tecnologias emergentes: 1. Mtodo non-cross-linking de deteo colorimtrica de DNA com AuNPs; 2. Fotodetector de TiO2 sensibilizado com corante (clula de Grtzel); 3. Impresso a jacto de tinta (usada para fabricar o fotodetector) O grande desenvolvimento a introduo da tcnica de fabricao por impresso a jacto de tinta, que no s simplifica o processo de patterning, como reduz o consumo de materiais e energia, permitindo escalar a produo do laboratrio para um nvel industrial. Alm de baixar os preos, abre a possibilidade da produo de fotodetectores descartveis para usar em

36

biosensores, ou seja, esta combinao de tecnologias leva a uma reduo significativa do tempo e custo de ensaios de deteo de DNA. Os fotodetectores sensibilizados com corante, ou clulas de Grtzel (Fig. 33), so uma alternativa simples e barata aos fotodetectores de silcio, e com um princpio de funcionamento diferente. Enquanto que as clulas de silcio utilizam um campo elctrico para afastar as cargas negativas e positivas geradas pela incidncia da luz, as clulas de Grtzel usam uma abordagem mais subtil para separar as cargas, semelhante usada pelos cloroplastos para realizar a fotossntese nas clulas das plantas, fazendo uma distino entre as entidades que geram o electro e as que o transportam. A clula de Grtzel usa molculas de corante orgnico para capturar a energia da luz e injectar um electro do corante num semicondutor como o TiO 2, numa reao de separao de cargas bastante eficiente e que inicia o fluxo de corrente elctrica. O material ideal deve ter uma grande rea superficial para absoro de luz e separao de cargas, da o uso de nanopartculas de TiO2. A grande vantagem destas clulas fotovoltaicas que podem ser fabricadas de materiais baratos e de baixa pureza, por mtodos simples e de baixo custo, produzindo clulas com eficincias de converso razoavelmente boas, apesar de inferiores s do silcio. Alm disso, a sensibilidade ajustvel mudando o corante. A maior desvantagem destes fotodetectores est relacionada com problemas de selagem e estabilidade devido sensibilidade trmica e volatilidade do electrlito lquido utilizado. No entanto, este problema poder ser ultrapassado usando um fotodetector do estado slido sensibilizado com corante que no contenha electrlitos volteis [19, 41].

Figura 33 Fotodetector de TiO2 sensibilizado com corante (Clula de Grtzel) [41].

37

O mtodo utilizado no biosensor de DNA desenvolvido no CENIMAT simples (Fig. 34). As amostras contendo as nanosondas de Au e a sequncia de DNA alvo so colocadas entre um LED verde de alta potncia e o fotodetector de TiO2 fabricado por impresso a jacto de tinta. A fotocorrente resultante medida por um electrmetro digital ligado a um PC, onde analisada de forma a fornecer o resultado. O sistema colocado dentro de uma cmara escura de forma a evitar a interferncia da luz ambiente. usado um LED verde, uma vez que o pico de absoro (SPR) das AuNPs mximo para este comprimento de onda, ou seja, permite maior sensibilidade de fotodeteo, j que a diferena entre o sinal inicial do LED e o sinal aps atravessar a amostra vai ser maior. Alm disso, a diferena entre as absorvncias da soluo positiva (vermelha) e negativa (azul) maior nesse comprimento de onda tambm [39]. Este facto o mais relevante, uma vez que o que interessa medir uma diferena de fotocorrentes, portanto quanto maior for a diferena de respostas das solues positiva e negativa, mais sensvel ser a deteo. Mais ainda, o fotodetector de TiO2 produzido tem um pico de eficincia nos 520 nm [40]. Para avaliar a resposta do fotodetector, usaram-se primeiro s solues de AuNPs com concentraes crescentes de sal (NaCl). Depois usaram-se nanosondas hibridizadas com sequncias complementares e no complementares do alvo, adicionando um sal diferente neste caso (MgCl2). As nanosondas de Au usadas neste estudo eram especficas para a sequncia de DNA do agente etiolgico da tuberculose humana (M. Tuberculosis). As medies foram efectuadas 15 minutos aps a adio de sal e repetidas 6 vezes para cada amostra. As solues de referncia tambm variam, sendo que para as AuNPs a soluo referncia gua ultra-pura e para as nanosondas de Au uma soluo de NaCl 0.1 M (mol/dm3) com um tampo fosfato 10 mM [40].

38

Figura 34 Representao esquemtica do biosensor desenvolvido para deteo de DNA [40].

5.3.1 Fabrico do fotodetector de TiO2 Foram utilizados dois mtodos diferentes de fabrico do fotodetector de nc-TiO2 (nanocristalino): o mtodo doctor blade (basicamente consiste em espalhar a pasta de TiO2 com uma lmina) e a impresso a jacto de tinta. O objectivo comparar o novo processo de impresso a jacto de tinta com o processo de fabrico tradicional. A disperso aquosa de TiO2 (tinta), com viscosidade e tenso superficial controladas, foi preparada usando TIO2 (0.12 wt%), etanol (20 wt%) e Triton X-100 5% (surfactante). A disperso foi filtrada com um filtro de poros de 1.2 um e misturada ultrasonicamente com etanol. A impressora usada foi uma Canon PIXMA IP4500 modificada, com resoluo de 9600x2400 dpi (dots per inch), que permite depositar o material/tinta de forma digital directamente num substrato de vidro (atravs de 1536 orifcios). O processo de fabrico est esquematizado na Fig. 35. A camada activa de TiO2 com 4-5 m de espessura foi produzida temperatura ambiente e presso atmosfrica em substratos pr-limpos de vidro condutor de xido de estanho dopado com ndio (ITO) e depois foi sinterizada a 450C durante meia hora num forno. Os contactos elctricos dos substratos de ITO foram imprimidos com uma soluo de nanopartculas de Ag (para melhorar a condutividade elctrica), utilizando a mesma impressora, e depois sinterizados a 120C por meia

39

hora. Os substratos foram depois tingidos numa soluo de etanol absoluto de corante de rutnio N3, por 24h. Os fotodetectores foram depois fabricados ensanduichando estes fotoelctrodos com um vidro condutor dopado com flor revestido com platina (Pt-FTO). O electrlito redox com iodeto de ltio e iodo numa mistura 6:4 de acetonitrilo e carbonato de propileno foi introduzido entre o elctrodo de TiO2 com corante e o contraelctrodo de platina. A espessura final dos fotodetectores fabricados pelo mtodo doctor blade com a mesma pasta de TiO2 foi cerca de 7 m.

Figura 35 Fabrico do fotodetector de TiO2 [40].

Figura 36 Filme de TiO2 imprimido a jacto de tinta aps sintering [40].

Figura 37 SEM do filme de TiO2 aps sintering. Dimetro mdio das partculas 25 nm [40].

40

Figura 38 Fotografia do fotodetector de TiO2 sensibilizado com corante produzido por impresso a jacto de tinta [40].

5.3.2 Performance de fotodetector e biosensor de DNA A performance do fotodetector foi avaliada em termos de eficincia de converso da luz incidente em corrente e de resposta de deteo a solues de AuNPs de diferentes concentraes, apresentando-se os resultados nas figuras 39 e 40. Foi utilizada espectrofotometria para validao do prottipo produzido.

Figura 39 Eficincia de converso dos fotodetectores de TiO 2 produzidos. Inset: espectro de absoro do corante [40].

A eficincia de converso, IPCE (Incident Photon to Current Efficiency), foi medida usando um setup caseiro ligado a um multmetro. A frmula de clculo a apresentada na Fig. 39, em que Jsc a densidade de corrente em curto-circuito (para uma tenso aplicada de 0 V), o comprimento de onda de excitao e Wi o fluxo fotnico (W/m2). A constante 1240 tem a ver com a taxa de converso de energia fotnica em energia electroqumica. A IPCE inferior verificada para o fotodetector produzido por impresso a jacto de tinta relativamente ao produzido por doctor blade deve-se principalmente menor espessura.

A resposta de deteo a solues de AuNPs de diferentes concentraes, tanto com as partculas no agregadas como agregadas pela adio de sal, foi calculada subtraindo a densidade de corrente obtida com a amostra obtida com a soluo referncia, = .

Figura 40 Respostas de deteo do fotodetector produzido A) por doctor blade e B) por impresso a jacto de tinta, para diferentes concentraes de AuNPs, agregadas e no agregadas. Inset: medies espectrofotomtricas correspondentes [40].

Em ambos os mtodos, verificam-se respostas bastante lineares para partculas no agregadas (R2 > 0,98). No caso das partculas agregadas, h uma resposta no linear em ambos os mtodos (incluindo no espectrofotmetro), que pode ser explicada por vrios eventos (e.g. agregao, floculao, precipitao e possvel adsoro superfcie plstica da cuvette) [40]. De qualquer forma, para aplicao como biosensor, o relevante a capacidade de discriminar entre as formas agregada e no agregada, e no a linearidade destas respostas. Foram obtidas respostas claramente diferentes entre as diferentes solues, para concentraes usadas rotineiramente em mtodos de deteo de DNA (1.5 a 2.5 nM). Para concentraes baixas (< 1.0 para DBP e < 1.5 nM para IPP), atinge-se o limite de sensibilidade do sensor. Finalmente, os sensores foram aplicados em conjunto com ensaio de deteo de uma sequncia especfica de DNA (M. Tuberculosis) e foi avaliada a performance do biosensor (Fig. 41).

Figura 41 Respostas de deteo dos fotodetectores integrados em biosensor de DNA (azul: negativo; vermelho: positivo) [40].

42

Ambos os fotodetectores apresentam respostas claramente distintas em ensaios de deteo com o DNA complementar e no complementar (17,5% para o DBP e 6,7% para o IPP). Este valor inferior do mtodo IPP pode-se justificar pela maior espessura do fotodetector produzido por doctor blade, cerca de 1,75 vezes superior ao imprimido por jacto de tinta. de realar tambm que a impresso a jacto de tinta utilizada pela primeira vez na tecnologia de fotodetectores de TiO2 sensibilizados com corante. A sensibilidade do sensor poder ser melhorada usando corantes diferentes e optimizando o processo de fabrico. 5.3.3 Concluses Foram demonstrados pela primeira vez novos sensores de TiO 2/corante produzidos por impresso a jacto de tinta para deteo de DNA atravs de nanosondas de Au. Os limites de sensibilidade dos biosensores desenvolvidos (1.0 nM para DBP e 1.5 nM para IPP) so comparveis a tcnicas de espectrofotometria (1.0 nM), o que permite utiliz-los em aplicaes de diagnstico ou rastreio. Apesar de demonstrada com sucesso, a usabilidade e fiabilidade da tcnica de impresso de fotodetectores a jacto de tinta para identificao de sequncias de DNA requer mais investigao e desenvolvimento, para determinar influncia da espessura da camada de TiO 2 e do tamanho das nanopartculas na performance do sensor. O mtodo de impresso a jacto de tinta digital, no usa mscaras nem vcuo, rpido e barato, mostrando-se uma alternativa actual microfabricao de pistas condutoras, por litografia ou eletrlise, que cara e leva tempo. O decrscimo de custos associado ao diagnstico molecular atravs desta tecnologia torna-a ideal para a produo em massa de biosensores descartveis, e pode revelar-se extremamente importante nos pases em desenvolvimento.

43

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ndice de Figuras
Figura 1 Grafite e diamante [2]. ................................................................................................................. 3 Figura 2 Ligaes e estruturas atmicas de grafite e diamante (adaptada de [4])....................................... 4 Figura 3 A molcula de C60 [1].................................................................................................................... 4 Figura 4 Exemplos de outros fulerenos: C70 (esquerda) e C540 (direita) [1]. ................................................. 5 Figura 5 Representao esquemtica de uma clula fotovoltaica orgnica de heterojuno polmero/fulereno [6]. .................................................................................................................................. 6 Figura 6 As duas estruturas simtricas de nanotubo possveis, a) zig-zag (9,0); b) armchair (5,5) [5].......... 7 Figura 7 Nanotubo com estrutura quiral, em que a camada de grafeno enrolada helicoidalmente [5]. ... 7 Figura 8 Ponta tpica de um nanotubo de parede mltipla (MWNT), escala 5 nm [5]. ................................ 8 Figura 9 Propriedades electrnicas de nanotubos variam consoante o seu dimetro e quiralidade [3]. ..... 8 Figura 10 Imagem HRTEM de corda de nanotubos [10]. ............................................................................ 9 Figura 11 Estrutura e imagens HRTEM de SWNT (a,b) e MWNT (c,d) [5]. ................................................... 9 Figura 12 Imagens TEM de MWNT (esquerda), DWNT (centro) e MWNT (direita). ................................... 10 Figura 13 Representao esquemtica bsica do mtodo do arco elctrico [11]. ..................................... 10 Figura 14 Produo de SWNTs e MWNTs pelo mtodo do arco elctrico [12]. ......................................... 11 Figura 15 Representao esquemtica da tcnica de ablao a laser [12]. ............................................... 11 Figura 16 Dodo rectificador com nanotubos [16]. ................................................................................... 15 Figura 17 FET com nanotubos (IBM) [17]. ................................................................................................ 15 Figura 18 Bandas de conduo e valncia nos estados macio, nanoparticulado e atmico de um metal (A) e de um semicondutor (B) [20]. ............................................................................................................. 17 Figura 19 Nanopartculas cermicas: A) de xidos metlicos (Fe3O4); B) de silicato (SiO2) [21, 22]. ........... 18 Figura 20 Nanopartculas de ouro para novos catalisadores [23]. ............................................................ 20 Figura 21 Representaes esquemticas de transstores de electro nico, em que nanopartculas de CdSe so colocadas entre dois fios de ouro [19]. ......................................................................................... 20 Figura 22 Diagrama de membrana celular (bicamada fosfolipdica) e formao de lipossoma.................. 21

45

Figura 23 Processo de formao de nanocpsulas de CHC [25]. ............................................................... 23 Figura 24 Imagens TEM (esquerda) e SEM (direita) de nanocpsulas CHC-4 [25]...................................... 23 Figura 25 Nanopartculas de CdTe. Cores dependem apenas do tamanho [23]. ....................................... 26 Figura 26 Espectros de absoro (em cima) e de emisso (em baixo) de quantum dots de CdSe estabilizados com uma camada superficial de ZnS, para diferentes tamanhos do ncleo de CdSe (de 2.7 a 4.1 nm) [26]. ............................................................................................................................................... 27 Figura 27 Shift Raman para diferentes tamanhos de quantum dots de germnio [27]. ............................. 28 Figura 28 Impressora de jacto de tinta com cartuchos de tinta de nanotubos de carbono [31]. ............... 30 Figura 29 Roda das cores: os objectos absorvem a luz de cor complementar que exibem, no lado oposto da roda. .......................................................................................................................................... 33 Figura 30 Mudana de cor de solues de AuNPs por agregao das partculas. ...................................... 33 Figura 31 Mtodo do ensaio de deteo de DNA baseado em hibridizao non-cross-linking e comparao visual ou espectrofotomtrica dos resultados, 15 minutos aps a adio de sal [36]. .............. 35 Figura 32 Imagem AFM do produto da hibridizao de nanosondas de Au (a amarelo) e DNA alvo (fios azuis) [36]. .................................................................................................................................................. 36 Figura 33 Fotodetector de TiO2 sensibilizado com corante (Clula de Grtzel) [41]. ................................. 37 Figura 34 Representao esquemtica do biosensor desenvolvido para deteo de DNA [40]. ................ 39 Figura 35 Fabrico do fotodetector de TiO2 [40]. ....................................................................................... 40 Figura 36 Filme de TiO2 imprimido a jacto de tinta aps sintering [40]. .................................................... 40 Figura 37 SEM do filme de TiO2 aps sintering. Dimetro mdio das partculas 25 nm [40]. .................. 40 Figura 38 Fotografia do fotodetector de TiO2 sensibilizado com corante produzido por impresso a jacto de tinta [40]. ...................................................................................................................................... 41 Figura 39 Eficincia de converso dos fotodetectores de TiO2 produzidos. Inset: espectro de absoro do corante [40]. .......................................................................................................................................... 41 Figura 40 Respostas de deteo do fotodetector produzido A) por doctor blade e B) por impresso a jacto de tinta, para diferentes concentraes de AuNPs, agregadas e no agregadas. Inset: medies espectrofotomtricas correspondentes [40]. .............................................................................................. 42 Figura 41 Respostas de deteo dos fotodetectores integrados em biosensor de DNA (azul: negativo; vermelho: positivo) [40]. ............................................................................................................................. 42

ndice de Tabelas
Tabela 1 Propriedades mecnicas dos nanotubos de carbono e outros materiais conhecidos [9]. ............13 Tabela 2 Dimetro de Bohr do excito e Eg de alguns semicondutores [adaptada de 27]. ........................24

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