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Tambin hay errores de inserciones delecciones y ruptura de enlaces en una hebra o varias
grado de error que presentan las enzimas naturales, las dna polimerasas (de los mamiferos ), cuando se sintetiza DNA in vitro en ciertas condiciones . En los mamiferos las 5 principales clases de DNA polimerasas son , , , , .las polimerasas y intervienen en la replicacion del genoma delos mamiferos , mientras que las y estan vinculadas con procesos especiales de reparacion del DNA y la polimerasa se asocia con el proceso de replicacion del DNA mitocondrial
En ciertas condiciones las polimerasas y no poseen la actividad correctora (exonucleasa) , por la presencia inhibidora de una subunidad especifica . Por eso introducen un error . Las altas tasas de error in vitro indican la existencia de correctores in vivo
reduce la tasa de errores. Este mecanismo consiste en la eliminacion de los nucleotidos incorrectos inmediatamente despues de que se agreguen al DNA en crecimiento durante la replicacion La recombinacion en el DNA es un mecanismo para salvar interrupciones en la replicacion
Enfermedad de Huntington
transtorno neurologico autosomico dominante, gen
mutado expresa proteina huntingtina q se expresa en el cerebro y contiene residuos de poliglutamina Las disposiciones repetidas tienden a alargarse de una generacion a la siguiente anticipacion
Las bases se pueden lesionar por agentes alquilantes, agentes oxidantes y la luz
Agentes quimicos que causan la alteracin de las bases
luego de la replicacion del DNA Mutagenos especies de oxigeno reactivas como el radical hidroxilo Ejm guanina al reaccionar con agua produce 8oxoguanidina el cual se va a emparejar con adenina
Desaminacion
Es cuando la adenina se modifica a hipoxantina y se
empareja con citosina Alquilacion la radiacion ultravioleta de la luz solar y la radiacion electromagnetica alta de los rayos x son mutagenos
Tipos de lesiones
Dao espontneo
A) Desaminaciones
A) B) Depurinacin
Benzopireno
Guanina
Benzopireno-guanina
O-6-metilguanina
de bases no habituales (Uracilo, hipoxantina, xantina),Bases alquiladas, Dimeros de pirimidinas en algunos otros organismos. DNA glucosilasas, cortan enlace N-glucosilo; dejando sitios AP o absicos. Uracilo DNA glucosilasa. Bacterias presentan 1 solo tipo. En el hombre 4 tipos: UNG (ms abundante), hSMUG1, TDG y MBD4.
de la desaminacion de C. AP endonucleasa, corta cadena que contiene sitio AP. El DNA es reemplazado por DNA polimerasa I El espacio vaco es sellado por DNA ligasa
estructurales, como dmeros de Pirimidina. Este mecanismo de reparacion es la principal via de muchos tipos de lesiones de ADN. Como los dmeros de Timina, fotoproducto 6-4, benzopireno-guanina (por efecto al humo del cigarrillo).
enlaces fosfodiester. En Bacterias escinde de 12- 13 nucleotidos. En humanos de 27-29 nucleotidos. ABC excinucleasa. 3 subunidades (UvrA, UvrB y UvrC). DNA polimerasa I. DNA ligasa
NER en Bacterias
Los pacientes de xeroderma pigmentosa (XP). son extremadamente sensibles a la luz solar (sufren quemaduras abundantes en su piel, desarrollan melanomas, Tienen mutaciones en genes implicados en vas de NER Hay 7 genes implicados: XP (A G). En dmeros de timina, la XP A reconoce dicha lesin, entonces se introduce una helicasa TFII y se va abriendo el DNA en la zona adyacente a la lesin. XP G y XP F van cortando y eliminando la zona de la lesin. Se libera el oligo (23-24 nts) y RFC coloca la pinza PCNA para que la DNA polimerasa rellene el hueco y la ligasa selle el nick (en esencia es lo mismo que ocurre en E. coli).
Sistemas eucariticos responsables del mecanismo de reparacin por escisin de nucletidos (NER)
desapareamientos de bases, as si a una G por error se le enfrenta una A, aunque son bases normales, no lo es su apareamiento, (mismatch: bases desapareadas). En condiciones normales la actividad exonucleasa asociada a la polimerasa evita los desapareamientos, pero si no lo hace hay que eliminarlo antes de que la banda se replique, ya que si no, la mutacin quedara fijada
implicados en la eliminacin de estos desapareamientos (si hay mutantes en estos genes Mut se produce una tasa de mutacin ms elevada de lo normal). El sistema de E. coli usa un reparisoma formado por las siguientes protenas:
metilacion de A , por la Metilasa Dam. En secuencias 5 GATC. Mut S y Mut L forman complejo en el apareamiento incorrecto. La cadena es pasada a travs de este complejo hasta encontrar a la MutH. La Mut H quien corta la hebra no metilada, en la secuencia G (del GATC en el lado 5)
Acta un mecanismo de seguridad que permite que la maquinaria de replicacin se salte by pass estos sitios de lesin
Este sistema es muy propenso a cometer errores, pero evita que un cromosoma se replique de manera incompleta
E. Coli
carcionomas, leucemias y linfomas. Mltiples alteraciones cromosmicas Se debe a una mutacin del gen BS (c. 15q26.1)
Ataxia Telangiectasia
Se debe a una mutacin en el gen ATM (C. 11Q22.3). Telanglectasias.
Predisposicin al cncer.
Acompaado de la diabetes mellitus. Incurable y presistente.
el proceso de reparacin por escisin de nucletidos(NER). Los pacientes no puede remover segmentos de DNA daados por la radiacin ultravioleta. Ocasiona la aparicin de un gran nmero de manchas pigmentadas de color oscuro. Riesgo elevado de desarrollar cnceres de piel letales y desfigurantes.
en
un cultivo de clulas a una dosis de radiacin ultravioleta. Esta tcnica se ha llevado a cabo utilizando fibroblastos de la piel. Sntesis no planificada de ADN (unscheduled DNA synthesis, UDS).- mide la accin combinada de endonucleasa, exonucleasa y polimerasa del sistema de reparacin de nucletidos por escisin. Las clulas son irradiadas con radiacin ultravioleta y posteriormente incubadas en un medio que contiene timidina marcada radiactivamente. Reactivacin celular en el husped.- se utiliza un plsmido no replicativo que contenga un gen cuya correcta expresin sea fcil de detectar . El plsmido, irradiado y daado con radiacin ultravioleta, se transfecta en la clula humana cuya capacidad de reparacin se pretende determinar.
Sndrome de Cockayne(CS)
Con patrn de herencia autosmico
recesivo. fue nombrado por Edward Cockayne, mdico britnico quien en 1933 lo describi por primera vez. Personas afectadas tienen una sensibilidad a la luz solar, baja estatura, alteraciones del desarrollo y envejecimiento prematuro. Su causa son las mutaciones en los genes ERCC6 ERCC8.
que se ve saboteado por anormalidades en los primeros dos aos de vida, tales como el deterioro de la visin, el odo y el sistema nervioso central y perifrico. Esta degeneracin progresiva conduce hacia la muerte, sea en la primer o segunda dcada de vida.
El tipo II.- Tambin llamado connatal, tiene una esperanza
Tricotiodistrofia (TTD)
cabellos quebradizos, etc. La mayoria de los pacientes con ticrotiodistrofia tiene un defecto en XPD (ERCC2). Algunos presentan mutaciones en XPB(ERCC3) y TTDA(TBF5), genes que son componentes del factor de transcripcin TFIH que regula tanto la reparacin del DNA como su transcripcin. La tricotiodistrofia fotosensitiva puede ser causada por la mutacin de por lo menos 2 genes separados: PROTENA ERCC2 y ERCC3. La tricotiodistrofia no-fotosensitiva es causada por la mutacin en el gen TTDN1.