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AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE COCOS GRAM POSITIVOS: GENERO STAPHYLOCOCCUS INTRODUCCION Los Estafilococos pertenecen a Familia Micricococcaceae y son organismos

redondos u ovales, agrupados generalmente en forma de racimos, inmóviles, no esporulados y Gampositivos en los cutivos jóvenes. Son habitantes naturales de la flora nasal, boca, piel e intestinos, pero como patógeno es causante de diversos procesos infecciosos que van desde forunculos, abscesos, intoxicaciones alimentarias hasta septicemias mortales. De las tres especies conocidas S. aureus, S. epidermidis y S. saprophyticus, solo dos tienen importancia medica. Solo la especie patógena S. aureus produce una enzima llamada coagulasa. MARCO TEORICO Este género Estafilococos pertenece a la familia Staphylococacceae, orden Bacillales, clase Bacilli, Phylum Firmicutes. Dentro del género Staphylococcus hay 55 especies y subespecies, siendo las más importantes desde el punto de vista clínico las siguientes: - Staphylococcus aureus subsp. aureus - Staphylococcus epidermidis, y - Staphylococcus saprophyticus subsp. Saprophyticus El microorganismo más importante por su patogenicidad es Staphylococcus aureus, que se caracteriza por poseer una enzima que coagula el plasma: la coagulasa. Esta prueba permite distinguir a S. aureus del resto de especies de estafilococos que aparecen clínicamente, que no poseen dicho enzima. Los estafilococos de interés en patología humana que no pertenecen a ninguna de las especies anteriores se informan en el laboratorio como estafilococos coagulasa negativos (SCN) y aunque son colonizadores habituales del ser humano no producen enfermedad tan importante como los anteriores. Patógenos comunes S. haemolyticus S. lugdunensis Patógenos infrecuentes S. capitis S. saccharolyticus S. hominis S. warneri S. auricularis S. cohnii Algunas especies de géneros diferentes, anteriormente relacionados taxonómicamente, como Micrococcus luteus o Kocuria rosea, que raramente producen infecciones en humanos, tienen características fenotípicas muy similares desde el punto de vista morfológico y bioquímico a los estafilococos, por lo que conviene saber diferenciar ambas especies de las del género Staphylococcus.

aureus). con forma casi esférica. apareciendo las colonias de la misma manera que lo hacen en agar sangre. El ClNa impide el crecimiento de otros microorganismos. aureus. presentándose las colonias de S. superficie lisa y brillante. que debe mostrar un frotis con cocos Gram positivos. Kocuria. Pruebas bioquímicas para identificación del género Staphylococcus Además de la tinción de Gram. haciendo que las colonias tengan un color amarillo sobre un fondo rosado. como son Micrococcus. será conveniente utilizar medios diferenciales o inhibidores que nos permitan evitar el crecimiento de aquellos microorganismos no deseados. S. no forman esporas y excepcionalmente pueden tener cápsula. Son poco exigentes en sus necesidades. con el consiguiente aclaramiento del medio. En los cultivos viejos los estafilococos pueden aparecer como bacterias Gram negativas. En C. Una particularidad de los miembros de este género es que crecen en medios con una elevada concentración de ClNa que no soportan el resto de los microorganismos (son bacterias halófilas). y rodeadas de un halo brillante de 2 a 5 mm de diámetro. convexas. y se utiliza para detectar la presencia de desoxirribonucleasa en bacterias. El agar sangre con inhibidores (Acido Nalidíxico) también se utiliza para la recuperación de este microorganismo.E. Son aerobios y anaerobios facultativos. existen otras pruebas que nos van a permitir identificar correctamente a los miembros del género Staphylococcus. bordes netos. y el manitol. las colonias de S. arracimados. . La distinción fundamental debemos hacerla con aquellas bacterias que muestren unas características morfológicas y de tinción semejantes. consistencia variable y en algunas ocasiones. hemolíticas.D. Esto permite la creación de medios de cultivo casi específicos para los estafilococos. brillantes. viéndose como bacterias Gram positivas. sobre todo en agar sangre. Entre los medios específicos para su recuperación tenemos el medio de Chapman. Las bacterias pertenecientes a esta especie son cocos. al ser metabolizado por el S. que posee manitol y una alta concentración de ClNa (10%). La producción de este pigmento es mucho más evidente en agar chocolate o a temperatura ambiente. proporciona un pH ácido al medio que provoca el cambio de color del indicador rojo fenol. aureus producirá una lisis del DNA presente en la placa si posee este enzima. aureus aparecen con una coloración amarillenta no debida a la pigmentación. En caso de partir de una muestra con flora polimicrobiana.L. El medio de Baird-Parker permite el crecimiento de estafilococos y otros gérmenes Gram positivos. sino a la fermentación de la lactosa que lleva incorporada el medio y al cambio de color del indicador. con forma redonda y aplanada. o visualizar mejor las colonias de S. El agar DNasa contiene DNA.Características microscópicas y de tinción . aureus negras. Algunas cepas pueden producir un pigmento carotenoide que les da una coloración amarillenta (S. Características de cultivo . aureus cuando éstas aparezcan en el medio. Streptococcus y Enterococcus. con una temperatura óptima de crecimiento entre 30-37ºC. crecen bien en cualquier medio ordinario. Las colonias son visibles fácilmente. aunque lo hacen mejor en los medios enriquecidos. Forman masas arracimadas. No tienen flagelos.

.Las dos pruebas más importantes para poder discernir entre los géneros aludidos anteriormente son: Catalasa: La prueba de la catalasa se utiliza para diferenciar microorganismos procedentes de cultivos en los que. entre los cuales destacan: . Las toxinas estafilocócicas responsables de la mayor parte de los efectos perjudiciales de estos gérmenes sobre el huésped son: .Síndrome del shock tóxico: en mujeres que utilizan tampones absorbentes. que morfológica y tintorialmente pueden aparecer de forma similar. al hacer una tinción de Gram.Bacteriemia: paso del microorganismo a la sangre a partir de un foco dérmico. . al no ejercer ningún efecto sobre Micrococcus / Kocuria. En presencia de lisostafina. . Micrococcus y Kocuria y negativa para Streptococcus y Enterococcus. .Síndrome de piel escaldada ( dermatitis exfoliativa ). Lisostafina: La lisostafina es un enzima que rompe la pared de Staphylococcus y no tiene acción sobre Micrococcus / Kocuria.+ Sensibilidad a Nitrofurantoína (*) S R Sensibilidad a Bacitracina (*) R S Crecimiento anaerobio . La lisostafina.Osteomielitis: infección del hueso.Enterotoxinas (responsables de las toxiinfecciones alimentarias) .+ Diferenciación de especies del género Staphylococcus Enfermedades producidas por los estafilococos Los estafilococos son parte de la flora bacteriana normal de piel. . por esta razón se utiliza para diferenciar estos géneros.Absceso cutáneo: foco localizado de infección en la piel.Hemolisinas y leucocidina (actúan sobre células sanguíneas) . se observan cocos Gram positivos. una suspensión (turbia) de estafilococos acabará lisándose.Exfoliatina (responsable del síndrome de piel escaldada) . Sin embargo en determinadas ocasiones son capaces de lesionar gravemente al huésped dando lugar a diversos cuadros infecciosos.Exotoxinas pirógenas (productoras de hipertermia) .Neumonía: 2ª a gripe o a bacteriemia. y . mantendrá la misma turbidez que originalmente tenía la suspensión.Endocarditis: infección de válvulas cardiacas. La prueba de la catalasa es positiva para los géneros Staphylococcus. y por lo tanto perderá esa turbidez inicial. Otras pruebas que nos pueden ayudar a diferenciar con precisión entre ambos géneros se muestran en la siguiente tabla: Staphylococcus Micrococcus / Kocuria Fermentación de glucosa (*) + Lisostafina (*) S R Lisozima R S Oxidasa modificada . .Conjuntivitis: infección de la conjuntiva.Infecciones urinarias: más frecuentes en mujeres. mucosas y tracto respiratorio superior. .

Sin embargo la aparición de resistencia ante un antibiótico parece extenderse a todos los demás.. hialuronidasa y estafiloquinasa. los estafilococos son microorganismos bastante sensibles a la mayoría de los antimicrobianos tradicionales. resultando algunas cepas resistentes a la mayoría de los antimicrobianos utilizados. Susceptibilidad antimicrobiana de los estafilococos En general. En estos últimos años ha aparecido en España un aumento de resistencia de los estafilococos a la meticilina. Sin embargo nuevas moléculas como roxitromicina o teicoplanina aparecen para aliviar la presión que sufren los hospitales ante este aumento de resistencias a los antibióticos comúnmente utilizados. condiciona la resistencia de estos microorganismos a todos los antibióticos beta lactámicos (penicilina y derivados). En la actualidad se utilizan sustancias no antibióticas que se unen irreversiblemente a las betalactamasas impidiendo su acción posterior. Antibióticos tradicionales tales como vancomicina o lincomicina siguen siendo buenas opciones para el tratamiento de las infecciones producidas por estos microorganismos. como oxacilina o meticilina. La presencia de un enzima ß-lactamasa (codificada y trasmitida mediante plásmidos). Son el ácido clavulánico y el sulbactam. Estas cepas se denominan MRSA (Staphylococcus aureus meticilin resistentes). considerándose un grave problema a nivel hospitalario. El siguiente cuadro resume la susceptibilidad actual de S. La inmunidad que dejan las infecciones estafilocócicas es generalmente escasa y poco duradera. aureus a los antimicrobianos más importantes: Resistencia <10% Oxacilina Clindamicina Vancomicina Imipenem Ciprofloxacino Gentamicina Amikacina Cloranfenicol Resistencia variable Eritromicina Tetraciclina Cefalosporinas Meticilina Resistencia > 90% Penicilina G Ampicilina Aztreonam .Enzimas estafilocócicas: Coagulasa. pareció solucionar el grave problema que representaba la inutilidad terapéutica de la penicilina G. La aparición de penicilinas que resistían la acción de las beta lactamasas.

El ClNa impide el crecimiento de otros microorganismos.Síndrome de piel escaldada ( dermatitis exfoliativa ).Bacteriemia: paso del microorganismo a la sangre a partir de un foco dérmico. . Es inmóvil y no forma esporas. de bordes definidos. proporciona un pH ácido al medio que provoca el cambio de color del indicador rojo fenol. y . La fermentación del azúcar Manitol específico como la coagulasa del estafilococo aureus (el más importante). aunque también se le puede evidenciar en cadenas cortas o diplococos. . posee manitol y una alta concentración de ClNa (10%).CUESTIONARIO: 1. Mencione de que cuadros infecciosos son causantes las especies de Staphylococcus. Contiene varias características en sus factores de virulencia. El hombre es portador asintomático entre un 20 y un 40% de los adultos sanos y forma parte de la flora normal de muchos sitios del organismo como piel y nasofaringe y tracto gastrointestinal.Neumonía: 2ª a gripe o a bacteriemia. 4. a veces Bhemolítica. Los ácidos le sirven para adherirse a superficies corporales junto con las especies de estafilococo que tienen cápsula. blanca o en ocasiones dorada.Síndrome del shock tóxico: en mujeres que utilizan tampones absorbentes. y el manitol. y en conjunto los ácidos teicoicos y el péptidoglicano tienen la característica que activan el sistema inmune del complemento y sirven además de evasores de la fagocitosis. Es habitual encontrar una colonia mediana. Que factores condicionan la patogenicidad de Staphylococcus aureus. Al gram se evidencia como una cocácea gram positiva de 1um dispuesta en racimos. Presencia de B lactamasa. conociéndose también como el Staphylococcus dorado.Endocarditis: infección de válvulas cardiacas. . aureus (patognomónico). Entre sus factores de virulencia que le sirven para la invasión están:     2. . . Absceso cutáneo: foco localizado de infección en la piel.Osteomielitis: infección del hueso. que rompe el anillo b lactámico de los antibióticos con esta estructura Que características fisiológicas identifican a Staphylococcus aureus. La presencia de coagulasa en el caso del S. 3.Conjuntivitis: infección de la conjuntiva. En su estructura se encuentran los ácidos teicoicos y lipoteicoico. . y lospéptidoglicanos. . al ser metabolizado por el S. causando diversas manifestaciones clínicas. haciendo que las colonias tengan un color amarillo sobre un fondo rosado. Es anaerobio facultativo y crece bien en agar sangre a 37ºC. Cuál es la composición del Medio hipertónico de Chapman. El medio de Chapman.Infecciones urinarias: más frecuentes en mujeres. aureus. . La presencia de catalasa.

Sus exigencias nutricionales . Existe un enverdecimiento del medio debido a la salida del eritrocito de un derivado del tipo de la metahemoglobina. Enterococos). Santiago de Chile – Chile. Streptococcus viridans. Características La mayoría de las especies de Streptococcus son anaerobios facultativos. canis). que. 2001. causa importante de caries dental. Pertenece al grupo de estreptococos viridans. Diversas pruebas bioquímicas permiten la diferenciación de las especies de Streptococcus.Volumen III de la segunda edición del Manual Bergey de Bacteriología Sistemática. del Griego ςτρεπτοσ streptos. agalactiae). por su capacidad de unión a anticuerpos. El grupo de estreptococos alfa hemolíticos se denominan S. Algunas especies de los grupos C y G tienen en su pared la proteína G. Estas bacterias crecen en cadenas o pares. K (S. Las especies de estreptococus que producen enfermedades son:      Estreptococos del grupo A: Streptococcus pyogenes producen amigdalitis e impétigo. equi). otros forman parte de la flora normal o transitoria del cuerpo y otros son saprofitos. MARCO TEORICO El género Streptococcus es un grupo de bacterias formado por cocos grampositivos pertenecientes al filo firmicutes y al grupo de las bacterias ácido lácticas. Katia Abarca V. donde cada división celular ocurre a lo largo de un eje. Streptococcus mutans. es una causa importante de endocarditis y de abscesos dentales. C (S. H (S. Estreptococos del grupo B: Streptococcus agalactiae producen meningitis en neonatos y trastornos del embarazo en la mujer. viridans. La hemolisis tipo α es incompleta. que permite diferenciar algunas especies en base a ala hemolisis producida. los globulos rojos que rodean a la colonia son parcialmente dañados pero no lisados como sucede en la hemolisis tipo β. La mayoría de Streptococcus pueden desarrollar en presencia o ausencia de oxigeno. Los Streptococcus desarrollan en medios enriquecidos como el agar sangre. Con la coloración de Gram se comportan como positivos adoptando formas de cadenas. salivarius) y Streptococcus pneumoniae (no pertenece a ningún grupo). D (Ej. que es oxidado a compuestos como la biliverdina. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE COCOS GRAM POSITIVOS: GENERO STREPTOCOCCUS INTRODUCCION El genero Streptococcus comprende muchas especies agrupadas según la clasificación de Lancefield en los grupos A (S. G (S. en la sección de "Bacterias Gram positivas con bajo porcentaje de contenido en G+C" 1989. Algunos son patógenos para el hombre y los animales. Patricia García. es la principal causa de neumonía adquirida en la comunidad. Ediciones Universidad Católica de Chile. USA. Los Streptococci son oxidasa– y catalasa– negativos. significa que se dobla o retuerce con facilidad. De allí que su nombre. B (S. y Pablo Vial C. sanguis). pyogenes). Neumococo: Streptococcus pneumoniae.. tiene importantes aplicaciones en biotecnología. y algunos crecen únicamente en una atmósfera enriquecida con dióxido de carbono (crecimiento capnofílico). Microbiología Clínica. como una cadena.

Algunos pueden identificarse con pruebas inmunológicas instantaneas. En cultivo en agar sangre de cordero se observan a la lupa de luz como colonias umbilicadas (elevación central) Viridans y Otros  S.son complejas. Son capaces de fermentar carbohidratos produciendo ácido láctico y también son catalasa negativos a diferencia de los estafilococos. causante de neumonía bacteriana. Son diplococos gram positivos. Por regla general. en la identificación de Streptococcus pyogenes para iniciar el tratamiento antibiótico. La diferenciación de las especies que componen este género es complicada debido a que utilizan tres sistemas diferentes:   Propiedades serológicas (grupos de Lancefield). Patogénesis A pesar de las enfermedades infecciosas que causan algunas especies de estreptococo. pneumoniae. Estreptococo Alfa-Hemolítico Neumococo  S. intestino y el tracto respiratorio superior de los humanos. y su aislamiento requiere el uso de medios enriquecidos con sangre o suero. las especies individuales de los estreptococos se clasifican basados en sus propiedades hemolíticas.       Grupos de la A a la W Hemólisis completa (hemólisis beta *β+) Hemólisis incompleta (hemólisis alfa *α+) Ausencia de hemólisis (hemólisis gamma *γ+) Pruebas bioquímicas Patrones hemolíticos: Propiedades bioquímicas Los grupos de Lancefield (creados por Rebeca Lancefield en 1933) se basa en la identificación de antígenos específicos de grupo la mayoría de los cuales son carbohidratos de pared celular. mutans. Desgraciadamente muchos estreptococos α-hemolíticos y no hemolíticos carece de los antígenos de pared celular y no son específicos. piel. Clasificación Véase también: Sistema de Lancefield. otras no son patógenas. por ejemplo. Al microscopio óptico se ven como cocaceas gram positivas de aspecto lanceolado (forma de grano de arroz). otitis media y meningitis. un contribuyente para caries dental. . Los estreptococos forman parte de la flora saprófita de la boca.

Aunque el Real Colegio de Obstetras y Ginecólogos expidieron normativas basadas en el riesgo en 2003 (dada la revisión en 2006). Si la amigdalitis no es tratada. esto debe aún ser probado por RCT en el escenario del Reino Unido y. S. Otras especies de Streptococcus también pueden poseer el antígeno del Grupo A. Muchos habitantes de las montañas en Canadá han encontrado cadáveres de alces yaciendo en la . fiebre escarlata. el cual causa enfermedad en caballos. dada la evidencia para la eficacia de la evaluación y tratamiento desde otros países. los clínicos han sido lentos en la implementación de los mismos estándares como en los Estados Unidos. (GAS) incluyendo faringitis estreptocócica (amigdalitis). dysgalactiae subsp. Otra manera es detectar el antígeno A mediante enzimoinmunoanálisis o inmunoaglutinación. Estos también pueden colonizar los intestinos y el tracto reproductor femenino. thermophilus. usado en la manufactura de algunos quesos y yogurts.   S. El método más comúnmente empleado en los laboratorios clínicos para la identificación presuntiva en cultivos de Streptococcus Beta-hemolítico del grupo A (Streptococcuss pyogenes) es la prueba de susceptibiidad a la bacitracina o Taxo A. En el Reino Unido. equisimilis y del Grupo S. puede desarrollarse fiebre reumática. el cual causa infecciones en varias especies de mamíferos incluyendo al ganado y caballos. Estreptococos Beta-Hemolíticos Grupo A S. Grupo B S. notable como colonias con crecimiento en Agar Sangre con fuerte olor a caramelo. Australia y Canadá. con bacteremia sistémica ocasional. o GBS. viridans. pero las infecciones en humanos por cepas no-S. la implementación de estas normativas ha sido irregular. solamente un 1% de unidades de maternidad han verificado la presencia del Estreptococo Grupo B. S. zooepidemicus. patógeno humano ocasional. causa neumonía y meningitis en neonatos y en las personas más jóvenes. glomerulonefritis aguda y fascitis necrotizante. Grupo C S. El Colegio Americano de Obstétras y Ginecólogos. La infección por Estreptococos Grupo A es diagnosticada generalmente con una Prueba Rápida de Estreptococos o mediante Cultivo. la mayoría de los cuales pudieran ser prevenidos. podría ser que el necesario ensayo a gran escala no recibiría respaldo ni aprobación ética. Las mujeres que obtengan un examen positivo debería recibir antibióticos profilácticos durante la labor. no obstante. agalactiae. Este también puede ocasionar muerte en gallinas y alces. una enfermedad que afecta las articulaciones y lasválvulas cardiacas. pyogenes GAS (algunas cepas S. con lo cual usualmente prevendrá la transmisión al infante. incrementando el riesgo de ruptura prematura de membranas y la transmisión al infante. En el Reino Unido. Algunos grupos sienten que como resultado 75 infantes en el Reino Unido mueren cada año por enfermedad relacionada con GBS y otros 600 o más sufren infección seria. la Academia Americana de Pediatras y los Centros para el Control de las Enfermedades recomiendan a todas las mujeres embarazadas entre 35 y 37 semanas de gestación la evaluación para GBS. anginosus) parecen no ser comunes. equi. causa de endocarditis y Abscesos dentales. constellatus. fiebre reumática aguda. y S. pyogenes (también conocido como GAS) es el agente causal en las infecciones estreptocócicas del Grupo A.

Las cadenas remanentes no-enterocócicas del Grupo D incluyen Streptococcus bovis y Streptococcus equinus. Streptococcus faecalis se conoce en la actualidad como Enterococcus faecalis. faecalis. . durans. las pruebas post mórtem han establecido la presencia de estreptococos del grupo C en su sangre. avium). S.mitad del camino. estreptococos del grupo D betahemolíticos débilmente hemolíticos y Listeria monocytogenes no deben ser confundidos con estreptococos no hemolíticos. Por ejemplo. y S. Estreptococos no hemolíticos Los estreptococos no hemolíticos rara vez causan enfermedad. Sin embargo. faciem. Grupo D (Enterococos) *hemolísis de tipo variable Muchos estreptococos del Grupo D han sido reclasificados y ubicados en el Género Enterococcus (incluyendo S. S.