CAPITOLUL I

1. Genetica tiina ereditii i variabilitii organismelor vii

1.1. Definiia i obiectul de studiu Genetica este tiina biologic a crei obiect de studiu l constituie ereditatea i variabilitatea organismelor, stabilind mecanismele care asigur conservarea informaiei genetice precum i cele ale modificrii ereditare. Anul apariiei geneticii ca tiin este 1865, cnd GREGOR MENDEL a emis primele legi ale ereditii. Denumirea de genetic a fost introdus de BATESON la Congresul de genetic din anul 1906. Ereditatea, ca obiect de studiu a geneticii reprezint nsuirea descendenilor de a moteni de la prini caracteristici asemntoare. Gena este definit ca particula material a ereditii localizat n cromozom i care condiioneaz formarea uneia sau mai multor caractere sau nsuiri. Totalitatea genelor unui organism viu (cele nucleare) reprezint genotipul. Totalitatea genelor din cadrul unui set haploid de cromozomi, transmise ca o unitate de la unul din prini reprezint genomul. Felul de a fi a unui individ ca mod de manifestare a genotipului, n interaciune cu condiiile de mediu reprezint fenotipul. Noiunile de genotip i fenotip au fost introduse de JOHANSEN n 1909 (PANFIL, 1980). Variabilitatea ca cel de al doilea obiect de studiu a geneticii, reprezint nsuirea organismelor vii, cu diferite grade de nrudire, de a se deosebi ntre ele. n natur nu exist doi indivizi identici. Chiar i gemenii uniovulari nu sunt identici din punct de vedere genetic, ei manifestnd profile imunologice diferite, constituite n primele ase luni de via (BOTEZ, 1991). 1.2. Ramurile geneticii i metodele de cercetare utilizate Genetica formal sau genetica clasic, studiaz legile ereditii descoperite de GREGOR MENDEL (transmiterea n descenden a caracterelor determinate de gene plasate pe cromozomi diferii) i THOMAS HUNT MORGAN i colaboratorii si (transmiterea n descenden a caracterelor determinate de gene plasate pe aceiai pereche de cromozomi). n studiul mecanismelor ereditii genetica a utilizat metode de lucru i baze de date oferite de alte tiine. Din mbinarea acestora, au luat natere numeroase ramuri ale geneticii, dintre care menionm:

 Citogenetica, care studiaz structurile celulare cu rol genetic. Radiogenetica, studiaz efectele radiaiilor asupra bazei materiale a ereditii. Genetica molecular, studiaz ereditatea la nivel molecular, biochimic. Genetica populaiilor, studiaz structura genetic a organismelor vii, precum i factorii care modific structura populaiilor. Genetica ecologic, studiaz procesele de adaptare a populaiilor naturale la mediul lor de via. Genetica cantitativ, studiaz legitatea variabilitii caracterelor, prin aplicarea metodelor matematice la studiul variabilitii. Genetica uman, cu rol major n prevenirea, combaterea i tratarea bolilor ereditare la om. Genetica fiind o disciplin experimental, dezvoltarea ei a fost condiionat de metodele i posibilitile de cercetare proprii, dar i de altele specifice altor discipline, de care genetica se poate folosi pentru nelegerea i explicarea legitilor i fenomenelor sale. Metoda genealogic, const n nregistrarea i analiza datelor privind relaiile dintre indivizi ntr-o succesiune de generaii. Prin utilizarea acestei metode se poate stabili modul de transmitere ereditar a caracterelor, precum i modul de manifestare. Metoda hibridologic, const n ncruciarea unor organisme cu ereditate diferit i analiza statistic-matematic a motenirii caracterelor la urmai. Cu ajutorul acestei metode au fost descoperite primele legi ale ereditii de ctre G. MENDEL i T.H. MORGAN. Metoda biometric, const n studierea diferitelor caracteristici cantitative i stabilirea corelaiilor dintre diferite caractere. Aceast metod ofer informaii asupra variabilitii diferitelor caractere i corelaiilor existente ntre ele, gradul de meninere i mbuntirea caracterelor i a nsuirilor obinute prin selecie .a. Metoda citogenetic, este utilizat pentru studiul structurilor celulare cu rol genetic, cu ajutorul aparaturii de laborator specifice (microscoape, tehnici cromatografice, difracie cu raze X .a.). Cu ajutorul ei s-au studiat caracteristicile cromozomilor i a altor structuri cu rol genetic. Metoda radiaiilor, permite utilizarea diferitelor tipuri de radiaii pentru modificarea ereditii organismelor. Metode biochimice i biofizice, contribuie la cunoaterea structurii materialului genetic la nivel molecular. Materialul genetic utilizat, n general pentru studiile de genetic clasic trebuie s prezinte urmtoarele particulariti: 2

s aib caractere bine conturate, uor de urmrit (markeri genetici); s aib ciclul scurt de dezvoltare; s permit obinerea unui numr mare de descendeni; s posede un numr relativ mic de cromozomi; s fie acceptabil la aciunea factorilor mutageni; s nu fie foarte scump i s fie relativ uor de ntreinut.

CAPITOLUL II
2. Legile mendeliene ale ereditii
G. MENDEL a nceput cunoscutele sale experiene de hibridare la plante n 1857 i opt ani mai trziu el sintetizeaz rezultatele obinute n cele dou legi ale segregrii i anume: - legea puritii gameilor sau segregrii factorilor ereditari; - legea liberei combinaii a factorilor ereditari, sau a segregrii independente a perechilor de caractere. 2.1. Monohibridismul i legea puritii gameilor Monohibridarea const n ncruciarea a doi indivizi, care se deosebesc printr-o singur pereche de caractere. GREGOR MENDEL a ncruciat mazrea cu bobul neted (caracter datorat prezenei amidonului) cu mazrea cu bobul zbrcit (caracter datorat prezenei dextrinei), obinnd n prima generaie numai plante cu bob neted. Acest caracter a fost denumit dominant, n timp ce caracterul bob zbrcit, care nu a aprut n prima generaie, a fost denumit recesiv. Prin autopolenizarea plantelor din prima generaie, a obinut n generaia a doua att plante cu bob neted, ct i cu boabe zbrcite, proporia dintre caracterul dominant i cel recesiv fiind de 3:1. G. MENDEL a cercetat modul de segregare i la alte perechi de caractere. G. MENDEL explic segregarea celor dou caractere studiate, bob neted i bob zbrcit, ca fiind datorate prezenei n celul a dou tipuri de factori ereditari, notai cu A i a. Plantele din soiul cu boabe netede (AA) conin excesiv factorul ereditar care determin acest caracter, iar cele din soiul cu boabe zbrcite (aa) conin exclusiv factorul ereditar al caracterului respectiv. La hibrizii din prima generaie, factorii ereditari ai mamei i tatlui se altur (Aa), astfel c atunci cnd acestea formeaz gamei, factorii ereditari se separ, fiecare gamet neavnd dect un singur tip de factor ereditar. Gameii sunt, n felul acesta, puri din punct de vedere genetic. Prin unirea acestor gamei pe baz de probabilitate n F2, n procesul fecundrii, se obin plantele generaiei a doua, care se comport astfel: - 25% din plante sunt pure cu bobul neted, avnd un singur tip de factori ereditari (AA); - 25% din plante sunt pure cu bobul zbrcit, avnd exclusiv cellalt tip de factori ereditari (aa); - 50% din plante cu bobul neted, poart ambii factori ereditari alturai (Aa). MENDEL a denumit plantele, care conin un singur tip de factor ereditar homozigote, iar cele care conin ambele tipuri, heterozigote. La indivizii heterozigoi nu se manifest dect unul dintre factorii ereditari, cel dominant (bob neted), cellalt rmnnd n stare ascuns (bob zbrcit). n acest fel, G. MENDEL a reuit s descopere deosebirea dintre structura genetic a organismelor i nfiarea lor, noiune care mai trziu a fost denumit de JOHANSEN genotip i respectiv fenotip. Genotipul reprezint totalitatea genelor coninute de un organism. Fenotipul reprezint suma nsuirilor morfologice, fiziologice, biochimice i de comportament a unui organism ca rezultant a interaciunii dintre genotip i mediu. Din exemplul anterior se remarc faptul c plantele cu acelai fenotip (75% bob neted), prezint genotipuri diferite: 25% sunt homozigote i 50% sunt heterozigote. Studiul comportrii n descenden a hibrizilor obinui l-a condus pe Mendel la elaborarea primei legi a ereditii, legea puritii gameilor. Gameii sunt ntotdeauna puri din punct de vedere genetic, adic nu conin dect unul dintre factorii ereditari. Prin 4

combinarea probabilistic a acestor gamei rezult n generaia a doua, n urma fenomenului de segregare, un raport de 3 dominant : 1 recesiv. Prin autofecundarea generaiei a doua se obine generaia a treia, la care se observ urmtoarele: - din plantele pure cu bobul neted se obin exclusiv plante cu bobul neted; - din plantele pure cu bobul zbrcit se obin exclusiv plante de acest tip; - plantele heterozigote cu bobul neted segreg n felul urmtor: 25% plante homozigote cu bobul neted, 25% plante homozigote cu bobul zbrcit i 50% plante heterozigote cu bobul neted. Deci, plantele heterozigote din generaia a doua se comport n generaia a treia la fel cum se comport hibrizii din prima generaie. Dac florile plantelor hibride din prima generaie se polenizeaz cu polen de la plantele genitorului cu bob neted (backcross), atunci se obin n generaia a doua numai plante cu boabe netede, din care 50% sunt homozigote i 50% heterozigote. n caz contrar, dac polenizarea se realizeaz cu polen de la plantele cu bobul zbrcit, se va forma n generaia a doua jumtate plante heterozigote cu bobul neted i jumtate homozigote cu bobul zbrcit. Obinerea ultimei combinaii nu ar fi posibil dac gameii ar conine ambii factori ereditari, deci gameii sunt puri din punct de vedere genetic, adic conin un singur factor ereditar (o singur gen) din perechea considerat. 2.2. Dihibridarea i legea segregrii independente a perechilor de caractere ncruciarea ntre prini care se deosebesc prin dou perechi de caractere poart numele de dihibridare. G. MENDEL a studiat cazul cnd genitorii se deosebesc prin dou perechi de caractere. El a ncruciat mazrea cu bobul neted i culoare galben cu mazrea cu bobul zbrcit i de culoare verde. n prima generaie hibrid, toate plantele aveau boabe netede i de culoare galben (caractere dominante). Prin autopolenizarea plantelor din prima generaie s-a obinut generaia a doua (F2) n care aproximativ 9/16 din plante aveau boabe netede i galbene, 3/16 zbrcite i galbene, 3/16 netede i verzi i 1/16 zbrcite i verzi (fig. 2.4.) n mod ipotetic, ncruciarea unei forme de salcm cu flori albe (AA) i cu lujeri spinoi (SS) caractere dominante, cu o form cu flori roze (aa) i lujeri nespinoi (ss) caractere recesice n prima generaie s-ar obine numai exemplare cu flori albe i lujeri spinoi. n F2, la arborii obinui prin autofecundarea hibrizilor F1 s-ar ajunge la urmtoarea repartiie a caracterelor: 9/16 plante cu flori albe i lujeri spinoi, 3/16 plante cu flori albe i lujeri nespinoi, 3/16 plante cu flori roze i lujeri spinoi i 1/16 plante cu flori roze i lujeri spinoi (STNESCU, 1982). Aceast segregare se explic prin aceea c hibrizii din prima generaie provenii din prini ce se deosebesc prin dou perechi de caractere, formeaz patru categorii de gamei n care se afl cte un singur factor ereditar din fiecare pereche. Prin combinarea celor patru categorii de gamei se formeaz 16 combinaii care reprezint segregarea n cazul ncrucirii prinilor ce se deosebesc prin dou perechi de caractere, care se realizeaz astfel: 9:3:3:1. n cazul unei trihibridri, cnd se ncrucieaz organisme care se deosebesc prin trei perechi de caractere, se formeaz opt tipuri de gamei masculi i opt tipuri de gamei femeli, prin a cror unire pe baz de probabilitate se formeaz 64 de combinaii i 8 tipuri de organisme: - 27/64 cu trei caractere dominante (ABC); - 9/64 cu dou caractere dominante i unul recesiv (ABc);

- 9/64 cu dou caractere dominante i unul recesiv (AbC); n acest fel, MENDEL a ajuns la concluzia c la ncruciarea ntre organisme ce se deosebesc prin dou sau mai multe perechi de caractere are loc fenomenul segregrii independente a perechilor de caractere. El a considerat, de asemenea, c ereditatea unei perechi de caractere este independent de ereditatea celeilalte perechi de caractere, astfel c i segregarea are loc independent. Dac n exemplul cu dihibridarea, se studiaz segregarea perechii de caractere bob neted i bob zbrcit, fr s se in seama de culoarea bobului (galben sau verde), atunci se obine acelai raport de segregare de 3:1 ntre boabele netede i cele zbrcite. Acelai lucru se ntmpl i n cazul culorii boabelor. Aceasta este segregarea de tip Pisum denumit astfel deoarece a fost descoperit la mazre. n conformitate cu acest tip de segregare, n F2 heterozigoii de tip Aa sunt identici fenotipic cu homozigoii AA. 2.3. Alte tipuri de segregare Abaterile de la legile mendeliene ale ereditii apar n urma mecanismelor de interaciune a genelor, ce genereaz fenomene de dominan complet, incomplet, letalitate .a. Raportul de segregare genotipic n F2 este acelai, dar n funcie de relaiile existente ntre genele alele sau nealele, aceste constituii genotipice determin fenotipuri diferite. 2.3.1. Semidominana n cazul dominanei complete, organismele homozigote (AA) prezint acelai fenotip cu cele heterozigote (Aa). n unele cazuri ns, fenotipul organismelor ce conin genele alele n stare heterozigot se deosebete de cel al organismelor ce conin genele respective n stare homozigot (deci AAAa). Fenomenul menionat este cunoscut sub denumirea de semidominan sau dominan incomplet. Semidominana a fost descoperit de CORRENS n 1912 la specia Mirabilis jalapa. ncrucind o plant cu flori roii (RR), cu una cu flori albe (rr), a obinut n generaia F 1 plante cu flori de o culoare intermediar, roz (Rr). Indivizii heterozigoi (Rr) manifest caractere intermediare ntre fenotipurile genitorilor, datorit dominanei incomplete sau semidominanei genei R dominant asupra genei r recesiv. Prin autopolenizarea plantelor hibride F1, n F2 s-au obinut att plante cu flori roii i albe, dar i plante cu flori roz. Raportul fenotipic este identic cu cel genotipic 1RR (flori roii):2Rr (flori roz):1rr (flori albe) (fig. 2.5.). La Zea mays, din ncruciarea unei varieti cu boabe albastre cu una cu boabe galbene au rezultat n F1 plante cu boabe violete, culoare intermediar ntre genitori. n F 2 s-a produs segregarea astfel:1 albastru: 2 violet:1 galben. Acest tip de segregare (1:2:1), n care organismele heterozigote prezint fenomenul dominanei incomplete, este cunoscut sub denumirea de segregare de tip Zea, pentru a-l deosebi de segregarea de tip Pisum de 3:1 observat de MENDEL. La psri fenomenul de dominan incomplet a fost observat la ginile de Andaluzia, cu penaj de culoare albstruie. Ele provin din ncruciarea unei rase de gini cu penajul negru cu una cu penajul alb. n F1 toate psrile au penaj albastru. n F2 se produce segregarea astfel: 25% penaj negru, 25% penaj alb i 50% penaj albastru. Aceasta nseamn c ginile de Andaluzia cu penaj albastru sunt heterozigote, fapt pentru care ele segreg mereu, neputnduse crea o ras de gini de Andaluzia. Dominana incomplet intervine i n cazul raporturilor de segregare la arbori, fenomenul acionnd probabil, n cazul unor caractere cum sunt forma acuminat a solzilor conurilor de molid, n raport cu forma rotunjit sau culoarea rocat a ritidomului, la pinul silvestru, n raport cu culoarea cenuie-nchis a ritidomului .a.

2.3.2. Supradominana n acest caz, indivizii heterozigoi depesc n productivitate, fertilitate, viabilitate etc., genitorii homozigoi, dominani sau recesivi, AA<Aa>aa. Fenomenul se numete supradominan i el poate fi observat att la plante ct i la animale. n procesul de apariie a supradominanei sunt de obicei, implicate mai multe gene cu caracter aditiv. Fenomenul mai poart denumirea de heterozis monogenic. La Drosophila melanogaster, heterozigoii ww+, prezint o cantitate mai mare de pigmeni n ochi (sepiaterina), fa de genitorii homozigoi w+w+ (ochi rou-crmiziu) i ww (ochi albi). 2.3.3. Codominana Codominana determin apariia la indivizii heterozigoi pentru genele dominante a unui fenotip nou, comparativ cu indivizii homozigoi. Se tie c indivizii din populaia uman pot s aib patru grupe de snge notate cu A, B, AB i 0. Aceste grupe de snge sunt determinate genetic de trei grupe de gene polialele notate LA, LB i l. Genele LA i LB sunt dominante asupra genei l, iar mpreun sunt codominante, adic determin un fenotip nou grupa de snge AB. Ca urmare, indivizii pot fi fenotipic i genotipic de mai multe tipuri (tabelul 2.2.)
Fenotip
0 A B AB

Genotip
ll

LL LAl LBLB LBl LALB

A A

Fig. 2.2. Schema grupelor de snge din sistemul AB0

n cazul fenomenului de codominan, ambele gene sunt funcionale, determinnd apariia unui fenotip nou. Genotipul heterozigot LALB se manifest prin grupa de snge AB. Pentru realizarea unor transfuzii sangvine trebuie cunoscute grupele de snge ale donatorului i receptorului. Cunoaterea modului cum se motenesc grupele sangvine are importan i n stabilirea paternitii. 2.3.4. Pleiotropia Prin fenomenul de pleiotropie se nelege efectul fenotipic multiplu a unei singure gene. Genele care au capacitatea de a determina la acelai organism dou sau mai multe caractere se numesc pleiotropice. Fenomenul a fost observat de MENDEL, care a demonstrat c mazrea cu flori albe are boabe cu tegumentul alb, cea cu flori colorate are tegumentul cenuiu sau brun. NILLSON-EHLE a artat c o anumit gen la ovz modific simultan forma aristelor spicului, pilozitatea i fragilitatea tulpinilor. Un exemplu caracteristic de pleiotropie l ofer hibridul Nicotiana silvestris Nicotiana tabacum, la care apar ase caractere distincte, deschiderea carpelelor, transformarea ovulelor n carpele, alungirea axei florale deasupra carpelelor, placentaia, cantitatea de nectar i ncreirea bazal a corolei, care sunt controlate de aceiai gen.

2.3.5. Genele letale Genele letale schimb raportul mendelian de segregare, deoarece prezena lor n stare homozigot (dominant sau recesiv) determin moartea indivizilor purttori, nainte de maturitatea sexual. Dup gradul de manifestare, efectul genelor letale poate fi: - gene letale, ce cauzeaz o mortalitate de 100% a indivizilor purttori; - gene semiletale, n acest caz 50% dintre indivizii purttori mor; - gene subvitale, care cauzeaz moartea unui numr mai mic dect 50% dintre indivizii purttori. 2.3.6. Complementaritatea genelor Interaciunea dintre dou sau mai multe gene nealele, prezente mpreun, determin apariia unui alt fenotip, dect fenotipul determinat de fiecare gen n parte. A. Complementaritatea de dominan a fost evideniat de BATESON i PUNNET (1908) la specia Lathyrus odoratus. S-a remarcat c n urma ncrucirii a dou varieti de L. odoratus, cu flori albe, n generaia F1 s-au obinut plante cu flori roii, iar n generaia F2, raportul de segregare a fost 9/16 plante cu flori roii, 7/16 plante cu flori albe. Pentru formarea antocianului este necesar prezena concomitent a dou gene dominante (C i P). Fiecare genitor prezint n stare homozigot o gen dominant i una recesiv (CCpp, respectiv ccPP). n stare dominant ambele gene sunt ntlnite numai n F1 (CcPp) i 9/16 din plantele obinute n F2 (C-P-). Raportul fenotipic de segregare este de 9:7 (fig. 2.8.) B. Complementaritatea de recesivitate, a fost evideniat de SHULL n 1914, la specia Capsella bursa pastoris (traista ciobanului). S-a remarcat c forma capsulei plantei este determinat de interaciunea dintre dou gene nealele. n starea de recesivitate a ambelor gene, apare tipul cu capsul ovoid. Dac una sau ambele gene se afl n stare dominant, apare tipul cu capsul triunghiular. Raportul genotipic de segregare n F2 este de 9/16 A-B (capsul triunghiular):3/16 aaB (capsul triunghiular):3/16 A-bb (capsul triunghiular):1/16 aabb (capsul ovoid), iar cel fenotipic de 15:1 (fig. 2.9). Aciunea complementar a genelor recesive se explic prin prezena unor gene duplicate, adic a unor gene similare ca aciune, care ns se transmit independent. Planta Capsella bursa pastoris fiind un tetraploid, are dou perechi din fiecare cromozom omolog i ca atare posed gene duplicate, care determin aciunea de complementaritate recesiv. 2.3.7. Interaciunea dintre gene Interaciunea dintre genele nealele poate determina apariia unui fenotip nou. Forma crestei la gini este determinat de interaciunea a dou gene nealele P i R. n funcie de interaciunea lor, forma crestei poate s fie: - pprr creast simpl; - P-rr creast mzrat; - pp-R creast trandafir; - P-R creast nuc. n urma ncrucirii ntre doi indivizi homozigoi, pentru ambele gene, PPrr i ppRR, cu creast mzrat, respectiv trandafir, n F1 se obin numai indivizi cu creasta tip nuc RrPp, iar n F2 se obin cele patru tipuri de creast n raport de 9 nuc:3: trandafir:3 mazre:1 simpl.

Interaciunile dintre genele nealele intervin i n formarea i transmiterea caracterelor la arbori, numai c, pn n prezent, ele au fost puin studiate din cauza dificultilor metodologice de care s-a amintit. 2.3.8. Epistazia Epistazia const n mascarea expresiei fenotipice a unei gene numit hipostatic, de ctre o alt gen nealel numit epistatic. Epistazia poate fi de dominan sau de recesivitate, dup cum gena epistatic este dominant sau recesiv. A. Epistazia de dominan. Culoarea glumelor i bobului la ovz este determinat de dou gene: N, epistatic, pentru culoarea neagr i C hipostatic, pentru culoarea cenuie. Prezena genei N, n stare dominant mpiedec manifestarea genei C. ncrucind ovzul slbatic (Avena fatua), NNCC, cu boabe negre, cu ovzul cultivat (A. sativa), nncc, cu boabe galbene, s-au obinut n F1 plante hibride, heterozigote pentru ambele gene NnCc, cu boabe negre. Prin autopolenizarea generaiei F1 s-a obinut n F2 raportul de segregare fenotipic: 12 boabe negre:3 boabe cenuii: 1 boabe galbene. Raportul de segregare geonotipic a fost: 9/16 N-C: 3/16 N-Cc: 3/16 nnCC: 1/16 nncc. B. Epistazia de dominan i recesivitate a fost evideniat de BATESON i PUNNET, n experienele lor privind transmiterea colorat a penajului la gini. Culoarea penajului este determinat de dou gene nealele. Una dintre gene I epistatic, care determin penajul alb (fie c este n stare homozigot dominant II, sau heterozigot Ii) mascheaz manifestarea celeilalte gene, hipostatic C, care determin penajul colorat. n urma ncrucirii a dou rase de gini cu pene de culoare alb, Leghorn (IICC) i Wyandotte (iicc), n F1, s-au obinut heterozigoi IiCi, cu penaj de culoare alb. Prin ncruciarea indivizilor F1 ntre ei, n F2 s-au obinut indivizi cu penajul alb i colorat n raport de 13:3; cei 3/16 indivizi cu penaj colorat (negru) avnd combinaia C-ii, n care gena C nu mai este represat de gena I, aflat n stare recesiv. C. Epistazia de recesivitate. Aciunea unei gene recesive n stare homozigot, gen epistatic, inhib manifestarea altei gene nealele, n stare homozigot sau heterozigot, gena hipostatic. Culoarea blnii la cini este controlat de dou gene: cc (gena epistatic), determin culoarea alb; B (gena hipostatic), care n absena cc, determin culoarea neagr; bb (gen hipostatic), n absena cc, determin culoarea maron. n urma ncrucirii ntre dou rase de cini, una homozigot cu blana alb, BBcc, i alta homozigot cu blana maron, bbCC, se obin n F1 numai indivizi cu blan neagr, BbCc. n F2 se obine raportul de segregare fenotipic: 9 blan neagr: 4 blan alb: 3 blan maron. 2.3.9.Poligenia (polimeria) Mai multe gene nealele, care segreg independent, pot afecta acelai caracter, expresia sa fenotipic depinznd de numrul de gene dominante prezente. NILSSON-EHLE a constat c la gru, n determinarea culorii bobului sunt implicate 2 (3) perechi de gene nealele, notate cu R1, R2, (R3). Culoarea bobului depinde de numrul de gene dominante prezente i numrul de gene nealele (2 sau 3), implicate. Intensitatea culorii boabelor de gru, la indivizi rezultai n F2, este proporional cu numrul de gene n stare dominant prezente n genotipul lor. Indivizii cu 4 gene R (R1R1R2R2) n genotipul lor, vor avea bobul rou nchis, cei cu trei gene R, vor avea bobul rou, cei cu dou gene R, vor avea bobul roietic, cei cu o gen R, vor avea bobul rou pal, iar cei cu ambele gene n stare recesiv (r1r1r2r2), vor avea bobul alb. Raportul de segregare n F1 este de 1:4:6:4:1, formnduse 5 grupe fenotipice.

2.3.10. Transgresiunea Mai multe gene nealele, determin n generaiile de segregare F2-F5, la o parte din descendeni, depirea expresiei maximale i minimale a unui caracter, fa de gradul de manifestare a acestui caracter la genitori. Prin ncruciarea unor iepuri, cu blan de culoare nchis (M1M1M2M2M3M3m4m4), cu iepuri cu blan de culoare deschis (m1m1m2m2m3m3M4M4), n prima generaie s-au obinut indivizi heterozigoi cu blan de culoare intermediar (M1m1M2m2M3m3M4m4). Din descendena acestora, pe lng indivizi cu diferite nuane ale blnii, apar i iepuri cu blan alb (m1m1m2m2m3m3m4m4), transgresiune negativ (nglobeaz toate genele recesive), precum i iepuri cu blan de culoare neagr (M1M1M2M2M3M3M4M4), transgresiune pozitiv (nglobeaz toate genele dominante). Formele transgresive pozitive pot fi utilizate ca genitori valoroi, n procesul de ameliorare. Excepiile de la tipurile de segregare mendelian prezentate, sunt n fond aparente, deoarece mecanismul separrii factorilor ereditari i al formrii combinaiilor rmne de tip mendelian. Exist ns i abateri reale de la proporiile respective, avnd o alt surs, cum ar fi segregarea preferenial a cromozomilor, nesepararea cromozomilor omologi n meioz, formarea nerandomizat a zigoilor la fecundare. Astfel, repartiia ntmpltoare n meioz a cromozomilor omologi la celulele fiice i formarea gameilor cu cromozomi omologi i gene alele n raport de 1:1 sunt uneori deranjate, producndu-se segregarea preferenial a unor cromozomi. n consecin, n macrosporogenez, la plante, se ntmpl ca un cromozom s se localizeze de preferin n oosfer, iar omologul lui n unul din ceilali nuclei ai sacului embrionar, neparticipnd astfel la formarea zigotului. Aberaii similare pot s apar i la formarea spermaiilor i a polenului i ele afecteaz proporiile n care apar grupele de fenotipuri n descenden. Nondisjuncia cromozomilor n meioz are ca efect la prima diviziune apariia unei celule haploide cu un cromozom suplimentar i a celeilalte celule haploide cu un cromozom n minus celulele sexuale care iau natere vor produce astfel n procesul fecundrii zigoi cu 2n+1 i 2n-1 cromozomi, deci cu alte caractere i cu alt repartiie la descendeni dect n cazul normal. Formarea nerandomizat a zigoilor, adic unirea gameilor n procesul fecundrii nu n mod ntmpltor, dup cum se realizeaz de obicei, ci dup anumite preferine condiionate genetic, cum ar fi viabilitatea inegal a celulelor sexuale mascule sau capacitatea de formare i maturizarea inegal a stigmatului. Fecundarea nerandomizat duce, de asemenea, la modificarea raporturilor de segregare mendelian. 2.4. Ereditatea caracterelor calitative i cantitative nsuirile organismelor sunt de o mare diversitate. Ele se pot totui grupa n dou categorii importante: caractere calitative i caractere cantitative. Caracterele calitative sunt trsturi ale unui organism care-l fac s se deosebeasc categoric de un alt organism. Diferenele calitative mpart indivizii n tipuri distincte, fr legturi prin intermediari. Cele mai tipice prezint stri alternative ca : prezena aristelor la gru - lipsa lor, prezena-lipsa coarnelor la animale, prezena - lipsa pigmentului, pigment de o culoare - pigment de alt culoare. n aceast categorie se nscriu i trsturile definitorii la arbori, forma, structura anatomic, nsuirile metabolice caracteristice la frunze, flori, fructe, tulpin .a. Caracterele calitative au un grad ridicat de stabilitate i sunt prea puin influenate de factorii de mediu,

10

care nu pot determina dect mici variaii de expresie, structur sau comportament, niciodat fundamentale. La om, un exemplu concludent l ofer grupele sangvine, care depind n exclusivitate de fondul genetic. n analizele genetice, MENDEL, ca i ali cercettori, au exprimat n cercetrile lor, ndeosebi, caractere calitative. Ele sunt determinate adesea de una sau dou perechi de gene (gene majore), iar efectul fluctuaiilor mediului nconjurtor asupra lor, poate fi imperceptibil dup cum s-a mai amintit. Din aceste considerente, n urma ncrucirilor apar fenotipuri distincte, bine conturate, cu dominan complet sau incomplet (gene semidominante), ceea ce determin o variabilitate discontinu. Caracterele cantitative se caracterizeaz prin urmtoarele: se apreciaz cantitativ prin msurare, cntrire, numrare, cronometrare etc., de aceea se mai numesc i caractere metrice; sunt determinate, adesea, de mai multe gene i nu pot fi separate uor i categoric pe clase de fenotipuri. Sunt puternic influenate de condiiile de mediu i prezint o variabilitate continu, adic fenotipuri cu valori cuprinse ntre cele mai mici i cele mai mari valori, ca un ir continuu de fenotipuri. Variabilitatea unor asemenea caractere se studiaz cu ajutorul biometriei. 2.4.1. Caracteristicile ereditii caracterelor cantitative Un exemplu privind ereditatea mendelian a caracterelor cantitave i punerea n eviden a principalelor sale caracteristici o reprezint cercetrile lui EAST (1916) la Nicotiana longiflora. ncrucind ntre ele dou varieti de Nicotiana, una cu corola de 40 mm lungime (P1), iar cealalt cu corola de 93 mm (P2), caractere foarte constante, EAST a obinut n F1 i F2 plante cu lungime intermediar, cu deosebirea c variabilitatea hibrizilor F2 a fost dubl fa de cea a hibrizilor din F1. Autofecundnd plante din F2, deosebite n ceea ce privete lungimea corolei, s-au obinut n F3 familii care n medie au avut aceeai lungime a corolei ca i formele parentale din F2. Mai mult, prin selecia divergent a plantelor din F2 i F3 s-au obinut familii care au avut valori foarte apropiate de valorile tipice prinilor iniiali (P 1 i P2). Aplicnd selecia n F4 i F5 s-a reuit s se deplaseze media formelor extreme i mai mult ctre cea a varietilor parentale (P1 i P2). Rezultatele obinute l-au fcut pe EAST s emit urmtoarele postulate: - ncruciarea ntre varieti homozigote va da n F1 populaii avnd aceiai uniformitate ca cea a formelor parentale; - variabilitatea populaiilor din F2, va fi mai mare dect a populaiilor din F1 ; - n cazul cnd populaiile din F2 sunt suficient de mari, pot fi ntlnii indivizi cu valori egale cu ale formelor parentale ; - n unele cazuri unii indivizi din generaia F2 pot chiar depi tipurile parentale, apar deci transgresiuni ; - indivizii situai n diferite puncte ale curbei de frecven a populaiilor F 2, vor da n F3 i n generaiile urmtoare familii care se vor deosebi marcant ntre ele. Rezultatele obinute de EAST n urma hibridrii celor dou varieti de Nicotiana i postulatele stabilite au dus la concluzia c genele joac un rol foarte important n ereditatea caracterelor cantitative. NILSSON-EHLE (1909) cercetnd ereditatea culorii la boabele de gru a stabilit c aceasta este determinat de trei perechi de gene i anume: R 1r1, R2r2, R3r3 din care genele dominante R1, R2 i R3 condiioneaz culoarea roie, iar genele recesive r1, r2 i r3 culoarea alb. Fiecare din cele 3 perechi de gene segreg independent conform legii segregrii independente a perechilor de caractere a lui MENDEL. Astfel, n urma autofecundrii 11

indivizilor R1r1 se obin plante cu boabe roii i cu boabe albe n raport de 3 roii (R 1-) : 1 alb (r1r1). n cazul segregrii a dou perechi de gene (R1r1, R2r2) raportul dintre cele dou categorii de plante este de 15 roii : 1 alb, iar n cazul segregrii a trei perechi de gene (R 1r1, R2r2, R3r3) raportul de segregare este de 63 roii : 1 alb. Interpretnd rezultatele, NILSSON-EHLE a elaborat teoria genelor polimere potrivit creia exist factori ereditari cu aciune foarte asemntoare, care i nsumeaz efectele, determinnd formarea aceluiai caracter cantitativ. Cu ct numrul factorilor crete, cu att caracterul controlat devine mai expresiv. Astfel de gene cu aciune individual redus care particip la formarea aceluiai caracter au fost numite gene polimere (gene multiple, factori multipli). Fiecare gen n parte urmeaz ereditatea de tip mendelian ntocmai ca genele cu efect calitativ. Cnd genele respective se asociaz produc, n urma adiiei efectelor, o variaie cantitativ continu. La arbori, un exemplu ipotetic de determinism polimeric poate fi dat la molid, n ceea ce privete forma solzilor conurilor. Molidul carpatic (Picea abiens var. montana) prezint conuri cu solzi acuminai (ascuii), n timp ce molidul de origine austriac (P. abiens var. europaea) are conuri cu solzi rotunjii la vrf. Este posibil ca formarea solzilor s fie codificat de dou perechi de gene alele A1a1 i A2a2 care, prin ncruciri, n F2 s dea combinaii genotipice de 9 i clase fenotipice n numr de 5. Reiese din analiza datelor din tabel c n funcie de cota de participare a alelelor A1a1 i A2a2, vrfurile solzilor variaz de la puternic acuminai n genotipul A1A1A2A2, la evident rotunjit n genotipul a1a1a2a2. n acest caz, ns, nu numai genele A1 i A2 ar fi active ci i alelele a1 i a2 care codific forma rotunjit a conurilor, fr ns ca ntre aceste gene s apar relaii de dominan i recesivitate. Teoria genelor polimere a lui NILSSON-EHLE a fost confirmat prin cercetrile lui EMERSON i EAST (1913) la porumb, DEVENPORT la om, SHULL (1914) la traista ciobanului i EAST (1916) la tutun. Ereditatea caracterelor cantitative a fost fundamentat sub aspect tiinific de ctre MATHER (1949, 1953). Potrivit concepiei sale transmiterea caracterelor se efectueaz prin dou categorii de gene : poligenele minore i obligogenele sau genele majore. Primele controleaz caracterele cantitative iar ultimele caracterele calitative. Poligenele sunt gene cu efect slab, de unde i numele de gene minore. Pe msur ce se acumuleaz ele exercit o aciune puternic n procesul de formare a caracterelor, fiind echivalent cu genele polimere.

12

CAPITOLUL III Bazele citologice ale ereditii

3. Organizarea celular a matariei vii Celula, ca form superioar de organizare a materiei vii, este unitatea morfologic i funcional de constituire a tuturor organismelor vii, cu excepia virusurilor. Celula posed metabolism individual, ciclu de via i energie proprie, fiind capabil de cretere i autoreproducere independent. n raport cu complexitatea structural a celulei i mai ales a nucleului, organismele vii aparin la dou tipuri de organizri: tipul procariot i tipul eucariot. 3.1. Organizarea celular la eucariote Organizarea eucariot, mai complex, este caracteristic algelor verzi, brune i roii, ciuperci, muchi, ferigi, gimnosperme i angiosperme, i organismelor animale. n linii mari, o celul eucariot este alctuit din membran, citoplasm i nucleu Membrana celular (plasmalema) la plante este protejat, de regul, de un perete celular de natur pectic-celulozic, avnd rol de schelet. La animale, plasmalema reprezint un strat superficial de condensare plasmatic, peretele celular lipsind. Citoplasma, nalt difereniat structural i funcional, este alctuit din : a) citosolul (hialoplasma), reprezint mediul n care sunt incluse celelalte componente putnd s existe n stare de gel, sau de sol. b) sistemul de membrane sau reticolul endoplasmetic, poate fi neted (alfa), sau rugos (beta). Cel neted este reprezentat printr-o reea de tubuoare i vezicole la nivelul crora se sintetizeaz n principal hormoni. Sistemul endoplasmatic rugos are pe suprafaa sa formaiuni granulare ribozomale, constituind ergastoplasma, activ n sinteza proteinelor de secreie. Organitele celulare sunt formaiuni intracelulare, unele prezente n toate celulele (mitocondriile, aparatul Golgi, lizozomii, ribozomii), altele prezente numai n celulele vegetale (plastidele), cu rol n procesele metabolice specifice. a) Ribozomii sau granulele lui Palade sunt constituite din ARN-ribozomal i proteine, cu rol important n sinteza proteic. Au o structur constant, sub form sferic sau elipsoidal. Ribozomii pot exista n citoplasm, sau ataai de reticolul endoplasmatic. Ei se pot cupla cu ARN-m n procesul de biosintez formnd polizomii. b) Mitocondriile sunt structuri mici, independente, considerate centrele energetice ale celulei. La nivelul lor a fost pus n eviden ADN, cu rol n ereditatea extracelular. ADN-ul mitocondrial este dublu eliciodal circular i reprezint mai puin de 1% din ADN-ul celular. Mitocondriile sunt capabile de autoreplicare, de cretere, de stocare i transmitere a informaiei genetice specifice, comportndu-se ca nite organite semiautonome, cu continuitate citologic i genetic. c) Plastidele sunt organite citoplasmatice proprii celulei vegetale, cu rol esenial n procesul de sintez i stocare a substanelor organice. Conin toate elementele unui sistem genetic (ADN i ARN), avnd astfel rol ereditar. d) Aparatul Golgi este o reea perinuclear, alctuit din formaiuni numite dictiozomi, cu rol n procesul de maturare proteic, n transportul i depozitarea substanelor elaborate. 13

e) Centrozomul, depistat n celula animal i vegetal, este format din doi centrioli i centrosferi i are rol n formarea fusului de diviziune. Fiind purttor de ADN, are rol ereditar. f) Lizozomii sunt corpusculi de form ovoid, ce conin enzime digestive fiind responsabili de digestia intracelular. Beneficiaz de enzime hidrolitice (proteoz, ribonucleoz, fosfataz .a.) i sunt specifice celulei animale. Formaiuni cu funcii asemntoare au fost semnalate i la plante (peroxizomi, sferozomi i glioxizomi). Nucleul sau carionul este partea cea mai reprezentativ a celulei sub aspect genetic, reprezentnd 1/4-1/3 din volumul total al celulei. Nucleul ca entitate morfologic, este alctuit din membran nuclear, cariolimf, nucleol, cromocentrul i cromatin (cromozomi). a) Membrana nuclear se evideniaz n interfaz. Este format din dou membrane lipoproteice, prevzute cu pori prin care se realizeaz schimburile dintre cariolimf i citoplasm. Membrana exterioar se racordeaz cu reticolul endoplasmatic, prin care realizeaz legtura ntre membrana nuclear i cea celular. Are rol important n organizarea i funcionarea cromozomilor, precum i n procesul de replicare i transcriere de ADN. b) Cariolimfa, nucleoplasma sau matrixul nuclear, este mediul n care sunt incluse formaiunile nucleare, putnd exista n stare de gel sau sol. c) Nucleolul, este prezent n nucleu ca un corp sferic, vizibil n interfaz i profaz ataat la unii cromozomi n zona strangulaiei secundare. Numrul nucleolilor este caracteristic fiecrei specii. d) Cromatina reprezint starea n care se gsete materialul cromozomal n interfaz sub forma fibrei elementare de cromatin. Prin condensarea fibrei elementare de cromatin, n cursul diviziunii celulare se pot evidenia cromozomii. 3.1.1. Cromozomii la organismele eucariote Principalii purttori ai informaiei genetice la eucariote sunt cromozomii prezeni n nucleul celular. Acetia sunt constituii din cromatin, ce conin aproximativ 60% proteine, 35% acid dezoxiribonucleic (ADN) i 5% acid ribonucleic (ARN). Dup funciile lor, cromozomii sunt de dou tipuri: autozomi, ce se regsesc n celulele somatice i variaz ca numr de la o specie la alta i heterozomi, sau cromozomi ai sexului. Celulele somatice conin dou seturi de autozomi i doi heterozomi XX sau XY, iar celulele sexuale conin un set de autozomi i un heterozom. 3.1.1.1. Morfologia cromozomului la eucariote Sub aspect morfologic, cromozomul eucariot prezint urmtoarele formaiuni: cromatidele surori, centromerul, constricia secundar, telomerii, satelitul i knobul. Cromatidele surori sunt dou uniti structurale identice genetic, unite la nivelul centromerului. Centromerul (strangulaia sau constricia primar) este zona cu care cromozomul se fixeaz de fibrele fusului de diviziune celular. El mparte cromozomul n dou brae scurt, sau proximal (p) i braul lung, sau distal (q). n raport cu poziia centromerului, distingem urmtoarele tipuri morfologice de cromozomi: - telocentrici, cu poziia centromerului terminal; - acrocentrici, poziia centromerului fiind subterminal ; - submetacentrici, cu poziia centromerului submedian ; - metacentrici, poziia centromerului fiind median.

14

Strangulaia sau constricia secundar este asemntoare centrome-rului, ns la nivelul ei cromatidele nu se unesc. Zona se mai numete i organizator nucleolar, la acest nivel fiind ataat de obicei nucleolul. Telomerii sunt formaiuni terminale ale cromozomilor ce le confer stabilitate. n lipsa acestora apar restructurri cromozomale i modificarea morfologic. Satelitul sau trabantul este o formaiune facultativ, separat de restul cromozomului prin strangulaia secundar. De regul este dispus pe braul proximal (scurt) al cromozomului. Knobul este o formaiune terminal sau subterminal heterocromatic, dispus pe anumii cromozomi, cu valoare de marker citologic. 3.1.1.2. Structura cromozomului eucariot Elementul structural de baz al cromozomului este nucleosomul. La microscopul electronic, nucleosomii apar ca un irag de perle, fiecare fiind alctuit dintr-un miez histonic pe care se nfoar dou spire de ADN. ntre doi nucleosomi exist elemente de legtur constituite din segmente scurte de ADN asociate cu o component histonic H1 (fig. 3.4). Succesiunea mai multor nucleosomi determin formarea fibrei simple de cromatin, care la rndul ei se spiraleaz sub form de selenoid i formeaz fibra elementar de cromatin, care constituie elementul de baz a cromozomului. n interfaz cromozomii se gsesc sub aceast form elementar de cromatin. 3.1.1.2. Compoziia chimic a cromozomului eucariot Cromozomii sunt alctuii din cromatin, substan fundamental ce conine acizi nucleici i proteine, lipide i poliglucide, ioni de calciu i magneziu. ADN-ul nuclear reprezint aproximativ 95% din totalitatea ADN-ului celular, i rspunde de stocarea informaiei genetice i continuitatea ei de la o generaie la alta. Cantitatea constant de ADN din fiecare cromozom este supus unei variaiuni ciclice, determinat de separarea cromatidelor n cadrul ciclului celular. ADN-ul din care este constituit cromatina poate fi de dou feluri : ADN cu coresponden de codare i fr corespondent de codare. - ADN-ul cu coresponden de codare este activ n procesul de transcripie, putnd fi de dou feluri : a) ADN nerepetitiv (unic) care conine gene active n procesul de sintez a proteinelor celulare, ce poart mesajul genetic necesar transcrierii ARN-m ; b) ADN repetitiv, corespunde genelor ce poart mesajul genetic transcrierii ARN-r, ARN-t i ARN-m necesar biosintezei histomelor. - AND-ul fr coresponden de codare, inactiv n procesul de transcripie este nalt repetitiv, fiind sub dou forme: a) ADN spaiator, dispus ntre secvenele unice; b) AND satelit cu localizare telomeric, sau n vecintatea centromerului i a satelitului. ARN-ul cromozomal se gsete n cantitate diferit n celulele diferitelor organe, reprezentnd cca. 10% comparativ cu ADN. Proteinele se prezint sub forma de nucleoproteine i sunt: histon i nonhiston. Histonele sau proteinele bazice sunt omogene, cu rol de reglare nespecific al activitii genelor i rol structural. Nonhistonele sunt foarte heterogene, cu rol enzimatic, structural i reglator specific a activitii genelor. 3.1.1.3. Caracteristicile cariotipului la eucariote

15

Alturi de elementele morfologice, caracteristicile cromozomilor sunt exprimate prin numrul, forma i mrimea acestora. Numrul, forma i mrimea cromozomilor dintr-o celul somatic constituie cariotipul unui individ sau a unei specii. Acesta reprezint un criteriu de identificare a speciilor. Numrul cromozomilor oscileaz de la o specie la alta i este relativ stabil pentru indivizii aparinnd unei entiti taxonomice. n celulele somatice cromozomii sunt dispui n perechi, unul de origine matern i unul de origine patern (cromozomi omologi), avnd aceiai form, aceiai mrime i aceiai valoare genetic, alctuind garnitura diploid, notat cu 2n. n celulele sexuale, sau gamei, exist un singur set de cromozomi, adic cte un cromozom din fiecare pereche, numrul lor fiind redus la jumtate. Aceasta este starea haploid i se noteaz cu n. La monocotiledonate numrul de cromozomi este cuprins ntre 2n=4 i 2n=300, iar la dicotiledonate ntre 2n=6 i 2n=226 (DARLINGTON i WHYLIE, 1995). La arbori n celulele somatice numrul cromozomilor (2n) este cuprins ntre 12 i 14 (la genurile Cercis, alnus, Laurus .a. i 62-82 la genurile Ailanthus, Tilia etc. majoritatea speciilor forestiere de interes, de la noi molidul, bradul, laricele, pinul, fagul, stejarul, castanul .a. au 24 de cromozomi. Forma cromozomilor se stabilete n metafaza diviziunii mitotice, cnd cromozomii ating maximum de contracie, n funcie de poziia centromerului. n anafaz, ca urmare a ndoirii braelor cromozomale la nivelul centromerului, pot s apar configuraii n forma literei V, L sau I. Mrimea cromozomilor difer de la o specie la alta. Lungimea lor variaz ntre 2 i 220 microni, iar grosimea ntre 0,2 i 2 microni. Datorit caracteristicilor morfologice, fiecare cromozom poate fi identificat n celulele indivizilor. Cu toate modificrile care apar pe parcursul diviziunilor celulare, cromozomii apar n acelai numr, cu aceiai form i mrime, ceea ce permite individualizarea i recunoaterea lor n cadrul complexului cromozomal. 3.2. Reproducerea celular Substratul material al ereditii se caracterizeaz prin continuitate. Aceast proprietate se realizeaz la nivel celular i se asigur prin reproducerea sa cu fidelitate, transmindu-se odat cu diviziunea, de la o celul la alta i n procesul reproducerii, de la o generaie la alta. 3.2.1. Ciclul celular mitotic i semnificaia sa genetic Ciclul celular mitotic se desfoar n celulele somatice i poate fi definit ca fiind diviziunea celular n urma creia plecnd de la o celul mam cu un anumit numr de cromozomi, rezult dou celule fiice cu acelai numr de cromozomi ca i celula mam, identice genetic ntre ele, identice i cu celula mam de la care provine. n cadrul ciclului mitotic se disting dou etape : diviziunea nucleului sau cariochineza i diviziunea citoplasmei sau citochineza.

16

Fig. 3.4. Ciclul celular mitotic: 1,2,3-profaza; 4-metafaza; 5 nceputul i 6-sfritul anafazei, 7,8-telofaza; 9-citochineza; c.p.-calote polare; m.n.-membran nuclear; z.c.-zona clar; chr-cromocentre; ph-fragmoplast; p.c.-plac celular

Chariochineza. Procesele prin care trece materialul genetic din nucleu n cariochinez se regsete n interfaz i mitoza propriu-zis. Interfaza sau interchineza, este faza dintre dou mitoze succesive. La microscop se observ nucleul conturat de membrana nuclear, cromozomii fiind prezeni sub forma fibrei elementare de cromatin i nu pot fi individualizai. n cadrul nucleului pot fi vzui unul sau mai muli nucleoli. n funcie de momentul sintezei ADN-ului, interfaza se mparte n trei etape : G1, S i G2. Faza G1 sau prereplicativ se caracterizeaz prin sinteza proteinelor i a ARN-ului. Cromozomii sunt monocromatidici. Faza S (de sintez sau replicativ) este caracterizat de sinteza ADN-ului, concomitent cu a proteinelor histonice, astfel c fiecare cromozom devine bicromatidic, cele dou cromatide surori fiind identice. Faza G2 (postreplicativ) este perioada de postsintez n care are loc maturarea nucleului i pregtirea sa pentru diviziunea propriu-zis.

17

Mitoza sau mitoza propriu-zis, cuprinde patru faze : profaza, metafaza, anafaza i telofaza. Profaza este marcat de apariia n cadrul nucleului a cromozomilor sub forma unor fibre subiri i lungi. n profaz dispar nucleoli, se dezorganizeaz membrana nuclear i se constituie fusul de diviziune. Metafaza. Cromozomii ajuni la condensarea maxim se ataeaz cu ajutorul centromerului de fibrele fusului de diviziune i se aliniaz la centrul celular formnd placa metafazic sau ecuatorial. n metafaz se pot determina numrul, forma i mrimea cromozomilor, elemente ce definesc cariotipul unei specii. Anafaza se caracterizeaz prin clivarea longitudinal a cromozomilor, dup ce n prealabil s-a produs clivarea centromerilor. Cromozomii monocromatici se deplaseaz cu centromerul nainte, spre polii celulei. n anafaz se asigur repartizarea aceleai informaii genetice la celulele fiice, avnd n vedere c cele dou cromatide surori sunt identice. Telofaza este un proces invers profazei. n cursul telofazei fibrele fusului de diviziune dispar, iar cromozomii monocromatici ajuni la cei doi poli se despiraleaz, se subiaz i iau aspectul unui ghem (spirem). Are loc procesul de reconstituire a membranei nucleare i a nucleotidelor. Citochineza. n esuturile somatice, n condiii normale, cariochineza este urmat de diviziunea citoplasmei. n celula vegetal, cu perete celular rigid, diviziunea citoplasmatic are loc la apariia la centrul celulei a unui corpuscul plasmatic denumit fragmoplast, de forma unui inel care treptat i umple lumenul cu substane celulozo-pectice, care se transform n perete celular. La animale citochineza const n apariia unei strangulaii n zona ecuatorial a celulei, care asigur separarea celulelor fiice. Distribuia tuturor componentelor protoplasmatice este foarte precis i exact, realizat sub control genetic, fapt ce determin formarea a dou celule fiice cu aceiai alctuire structural i constituie genetic. Semnificaia esenial a diviziunii celulare mitotice const n aceea c ea asigur continuitatea genetic de-a lungul generaiilor celulare succesive. Ciclul celular, prin sporirea numrului de celule i procesele de biosintez ce le implic, asigur creterea organismului, asigurndu-se continuitatea genetic n ontogenez, de la o celul la alta, prin copierea mesajului genetic n interfaz i repartizarea acestui mesaj n condiii riguros exacte celulelor fiice prin mecanismul mitozei, n anafaz. n consecin, n privina informaiei genetice nucleare, toate celulele sunt identice. Prin desfurarea mitozei se asigur constana numeric morfologic i structural a cromozomilor. 3.2.2. Ciclul celular meiotic i semnificaia sa genetic Ciclul celular meiotic, sau diviziunea meiotic este un tip particular de diviziune celular, caracteristic organismelor ce se nmulesc pe cale sexuat i n urma cruia dintr-o celul somatic cu 2n cromozomi se formeaz 4 celule fiice cu n cromozomi, diferite genetic ntre ele, diferite i de celula mam de la care provin. Diviziunea meiotic se desfoar n celule germinale, localizate n organele de reproducere i implic dou diviziuni succesive, meioza I i meioza II, interfaza fiind prezent o singur dat, la nceputul ciclului celular, avnd ca finalitate formarea gameilor. Meioza I (primar sau reducional). n aceast faz are loc reducerea la jumtate a numrului de cromozomi i fenomenul de recombinare genetic. Diviziunea meiotic are aceleai faze ca i cea mitotic, att pentru metafaza I i II, ns profaza este mai complex.

18

 Profaza I-a. n aceast faz cromozomii parcurg o serie de procese ce se realizeaz n urmtoarele subfaze: leptonem, zigonem, pachinem, diplonem i diachinez. n leptonem nucleul se mrete n volum, cromozomii apar sub forma unor filamente subiri, n lungul crora ncep s se contureze cromozomii. n zigonem cromozomii omologi, unul de provenien matern i altul de provenien patern, se altur i se unesc doi cte doi, formnd cromozomi bivaleni. Fenomenul de conjugare a cromozomilor se numete sinaps. mperecherea cromozomilor omologi este controlat genetic, realiazndu-se strict gen alel la gen alel i se caracterizeaz prin formarea complexului sinaptomenal, care permite realizarea recombinrii genetice prin crossing-over. Pachinemul, se caracterizeaz prin condensarea cromozomilor, legatura dintre ei devine din ce n ce mai intim, devenind posibile fenomenele de recombinare prin crossing-over. Diplomenul se caracterizeaz prin faptul c la fiecare bivalent se pot observa 4 cromatide, datorit tendinei omologilor de a se separa, rmnnd unii ns la nivelul chiasmelor. Aceast configuraie poart denumirea de tetrad cromatidic. Diachineza este reprezentat de condensarea i scurtarea puternic a cromozomilor. Spaiile dintre chiasme se mresc, chiasmele fiind deplasate spre extremitile cromozomilor, fenomen denumit terminalizare. La sfritul profazei I nucleolul i membrana nuclear dispar, formndu-se fusul nuclear, pe care se ataeaz configuraiile cromozomale bivalente. Metafaza I. Cromozomii bivaleni se aeaz pe fibrele fusului de diviziune, orientai cu centromerii spre polii opui, formnd placa ecuatorial. n metafaz sunt vizibile inc chiasmele care leag cromozomii fiecrei perechi. Anafaza I. Legtura dintre cromozomii omologi se diminueaz, bivalenii se separ n cromozomi bicromatici, ce migreaz spre polii celulei. n anafaza I are loc reducerea numrului de cromozomi i recombinarea genetic intracromozomial, datorit segregrii libere a perechilor de cromozomi. Telofaza I. Cromozomii, n numr haploid, se grupeaz n cei doi nuclei, se formeaz membrana nuclear, se reorganizeaz nucleolii i apar dou celule haploide (o diad). Cu aceasta se ncheie prima diviziune meiotic. Nucleii nou formai intr ntr-un stadiu numit interchinez. n urma meiozei I, uneori citoplasma se divide, alteori nu. n acest ultim caz rezult celule binucleate, numite diade. Meioza II (mitoz haploid) este asemntoare unei mitoze. Ea se petrece n celule cu numr haploid de cromozomi. Profaza II. n nucleul normal constituit, cromozomii se condenseaz i se individualizeaz. La sfritul profazei II are loc dezintegrarea membranei nucleare i formarea fusului de diviziune. Metafaza II. Cromozomii se deplaseaz spre centrul celulei, unde se fixeaz cu centromerul de fusul de diviziune, formnd placa metafazic (ecuatorial). Aspectul cromozomilor este de forma literei X, configuraie determinat de prezena unui singur centromer pentru cele dou cromatide, iar braele lor se resping. Centromerul fiecrui cromozom, care a inut unite cromatidele surori, se dubleaz structural i funcional. Anafaza II. Are loc separarea centromerilor i a cromozomilor n cromatide, care devin cromozomi independeni ce migreaz spre poli. Telofaza II. Se formeaz patru nuclei cu numr haploid de cromozomi monocromatidici. Membrana nuclear se reface n jurul fiecrui grup de cromozomi haploizi i are loc apoi citokineza.

19

Fig. 3.6. Ciclul celular meiotic la Aloe thraskii 1-5-profaza heterotipic:1-leptoten, 2-zigoten, 3-pachitem, 4-diploten, 5-diachinez 6-metafaza heterotipic; 7- anafaza; 8-telofaza; 9-interchinez; 10-metafaza homeotipic; 11-anafaza; 12-teleofaza

Formaiunea format din patru celule haploide ce ia natere la sfritul meiozei II se numete tetrad celular. Astfel, dintr-o celul diploid cu 2n cromozomi, n urma celor dou diviziuni ale meiozei, rezult patru celule fiice haploide, cu n cromozomi. Fiecare din cele patru celule formate, conin combinaii diferite de gene, asigurndu-se astfel variabilitatea genetic. * * * Ciclul celular mitotic este, de fapt, un ciclu nchis n sensul c celulele rezultate n urma meiozei nu mai reiau ciclul ntruct, la animale, acestea nu se mai divid urmnd a funciona ca i gamei n procesul de fecundare, iar la plante sufer un numr limitat de diviziuni mitotice haploide n procesul de formarea gameilor. Ciclul celular mitotic contribuie la realizarea a dou funcii biologice majore: diversitatea lumii vii prin asigurarea variabilitii genetice a gameilor i continuitatea

20

genetic de la o generaie la alta n procesul de fecundare, asigurnd constana numrului de cromozomi a descendenelor. Variabilitatea genetic a gameilor se asigur n cadrul proceselor de recombinare intracromozomal prin crossing-over n profaza meiozei I i intercromozomal la nivelul setului haploid de cromozomi prin segregarea independent a perechilor de cromozomi omologi n anafaza meiozei I. 3.2.3. Ciclul de via i recombinarea genetic la plantele superioare; semnificaia biologic i genetic Prin ciclul de via se asigur continuitatea genetic de la o generaie la alta n filogenez i cuprinde alternarea unor generaii celulare haploide, n procesul de formare a gameilor (gametogeneza), cu a unor generaii celulare diploide, datorit fecundrii. Gradul de reprezentare a celor dou generaii celulare, haploid i diploid, difer la plante i animale. La plante, gradul de reprezentare a nivelului haploid i diploid difer n raport de poziia ocupat pe scara evolutiv. n urma meiozei rezult celule haploide, care nu reprezint gamei ca i n cazul animalelor ci spori din care n urma mitozei haploide succesive va rezulta gametofitul (generaia haploid), formaiune ce va da natere gameilor. Gameii n urma procesului de fecundare vor da natere zigotului diploid i apoi prin diviziuni mitotice succesive se va forma sporofitul (generaia diploid), care n urma meiozei va produce din nou celule haploide (spori), ncheindu-se astfel ciclul de via. Diviziunea reducional (meioza), se produce att la animale, n spermatogenez i ovogenez, ct i la plante, n microsporogenez i macrosporogenez. n spermatogenez (meioza, la animale mascule), toate cele patru celule rezultate sunt de regul, funcionale, reprezentnd spermatozoizii. n ovogenez (meioza, la animale femele), doar una dintre cele patru celule este funcional ovulul gametul femel. Gametogeneza la plantele superioare cuprinde microgametogeneza, sau procesul de formare a gameilor masculi i mega sau macrosporogeneza, adic procesul de formare a gameilor femeli. n microsporogenez (meioza la plante, n cazul grunciorilor de polen) din fiecare celul haploid a tetradei se formeaz cte un gruncior de polen (fig. 3.8.). Acesta, n timpul germinrii, sufer dou diviziuni mitotice succesive, n urma crora rezult un nucleu generativ i unul vegetativ. Nucleul vegetativ se resoarbe, iar nucleul generativ haploid trece printr-o nou diviziune mitotic, dnd natere la doi nuclei spermatici, care reprezint gameii masculi. n macrosporogenez (meioz, n cazul gameilor femeli), numai una dintre cele patru celule ale tetradei este funcional, devenind sacul embrionar. Nucleul haploid al sacului embrionar parcurge trei diviziuni mitotoce succesive n urma crora rezult opt nuclei. Unul dintre aceti nuclei haploizi ai sacului embrionar devine nucleul oosferei (gametul femel la plante), doi se contopesc dnd nucleul secundar diploid al sacului embrionar, trei formeaz nucleii antipodelor i doi devin nucleii sinergidelor. n urma procesului de fecundare se realizeaz fuziunea celor dou celule sexuale, mascul i femel. Sub aspect genetic, semnificaia fecundrii este primordial, deoarece prilejuiete ntlnirea i regruparea cromozomilor omologi din gamei, unul de provenien matern, cellalt de provenien patern. Celula, dispune astfel de 2n cromozomi fiind diploid, fa de gameii care sunt haploizi cu n cromozomi.

21

Unirea gameilor la fecundare se produce n mod ntmpltor, nedirijat, ceea ce constituie o surs primordial de variabilitate genetic. Astfel, n cazul combinrii a n gene, fiecare fiind reprezentat prin cte a alele, numrul de genotipuri (g) ce vor rezulta, sunt: n a (a + 1) g= 2 Din exemplul dat, dac se iau n calcul numai 10 gene, fiecare cu cte 2, 3 sau 4 alele, numrul de combinaii este de 310, respectiv 610 i 1010 etc. n cazul plantelor superioare, Angiosperme, se produce dubla fecundare, din contopirea oosferei cu gametul mascul, rezultnd oul sau zigotul, iar din unirea nucleului secundar cu al doilea gamet se formeaz zigotul accesoriu. Dac zigotul este diploid, zigotul accesoriu are trei seturi de cromozomi, fiind tetraploid, deoarece rezult din fuziunea nucleului secundar diploid cu gametul mascul haploid. Faptul c n setul triploid (3n) cromozomi, un numr de 2n cromozomi provin de la printele matern i numai n cromozomi de la cel patern are consecine n producerea unor fenomene genetice, de tipul ereditii citoplasmatice. Din zigot, prin diviziuni celulare succesive mitotice, ia natere embrionul, iar din zigotul accesoriu, se formeaz endospermul secundar i albumenul. n cazul Gymnospermelor fecundarea este simpl, un singur gamet contopindu-se cu oosfera. Endospermul primar al gimnospermelor, dei ndeplinete aceleai funciuni ca i la angiosperme, are origine diferit, lund natere dintr-o celul a nucelei aflat n apropierea micropilului i fiind haploid (n cromozomi). n esen, diferenierea timpurie a esuturilor embrionului, ca i diferenierea postembrionar care urmeaz, att la angiosperme ct i la gimnosperme, are ca surs primordial informaia genetic din structurile ADN ale celulei-ou n care sunt memorizate de la nceput toate caracterele organismului.

22