PROJET DE RECHERCHE

Elabor par : NOM : EMBOLO ENYEGUE Elise Libert - lve ingnieur biomdical (FMSP) : OPTION : Toxicologie Et Impact Environnemental. - DEA BIOLOGIE MOLECULAIRE ET CELLULAIRE (FS)

A MONSIEUR LE DIRECTEUR GENERAL DE LACDIC

SUJET :
TUDE DE LA TOXICITE DE 2 NOUVELLES BOISSONS COMMERCIALISEES AU CAMEROUN : ANALYSE DES FONCTIONS PHYSIOLOGIQUES ET ANATOMIQUES DE rattus norvegicus : TRANSPOSITION A LHUMAIN ET EVALUATION DE LIMPACT ENVIRONNEMENTAL.

Introduction La forme physique personnelle a t un lment indispensable pour la survie dans toutes les socits antiques. Charles DARWIN dans ses travaux a pu prouver que lvolution dune espce dpendait non seulement de sa capacit pouvoir sadapter mais aussi de ses dispositions parentales acquises (patrimoine gntique). Ces deux penses runissent les acquis intellectuels et les comptences physiques. De nos jours, la maturit dun individu se fait encore valuer par sa capacit pouvoir braver des preuves. Plusieurs mthodes sont employes par les individus afin de runir en leur faveur les facteurs qui lui permettront darriver ces fins; on voit alors des individus se lancer toute sorte de dpravation : prostitution, vagabondage, consommation de drogues (cocane, amphtamine, cannabis etc), toutes ces activits ont deux revers : le premier direct, est bas sur la qute deuphorie afin de raliser sans valuation de consquence lobjectif fix et le second lointain bas sur la transmission des maladies ou alors sur la destruction des facults cognitives. Les rglementations juridiques de plusieurs pays ont tabli des rgles strictes qui empchent la consommation de toutes ces substances. En rponse cela on voit alors natre des stratgies nouvelles bases lutilisation des boissons dites nergisantes avec des concentrations leves en psychotrope. En effet. Les boissons nergisantes sont des boissons sucres, promues pour leur capacit rehausser les niveaux dnergie et de vivacit, elles contiennent de la cafine comme principal ingrdient actif, en plus de diverses autres substances aux proprits dites stimulantes. Ces boissons prsentent des dangers potentiels pour la sant de la jeunesse et aussi pour la socit toute entire cause du comportement imprvisible quelles peuvent entraner. Evaluer quelle peut en tre la toxicit au Cameroun peut tre dune importance capitale pour le maintien de la sant du peuple et la conservation des murs sociales.

I-

PROBLEMATIQUE
Le terme boisson nergisante a t choisi par lindustrie dans le but de soutenir ses

initiatives de marketing et de mettre de lavant les proprits stimulantes de ces boissons. Il nexiste aucun consensus parmi les organismes de rglementation quant la dfinition de ces boissons et la terminologie qui leur est associe. Les boissons nergisantes viennent dans une varit de marques, de saveurs, et de formats. On les retrouve dans la plupart des commerces dalimentation, ct dautres boissons sucres (boissons gazeuses, boissons aux fruits, etc.), et dans les bars, les centres
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sportifs et autres commerces. Elles peuvent contenir diffrents ingrdients, principalement du sucre (glucose, sucrose, etc.) et de la cafine (sous forme de cafine ou de guarana) ainsi que de la taurine, du glucuronolactone, des vitamines et diverses autres substances (ex. : ginseng, inositol, etc.). Au Cameroun aucun suivi nest effectu autour de ces boissons. Les deux principales marques rencontres dans ce pays dans presque tous les commerces dalimentation sont : le REACTOR et le XXL .

Tableau 1. Principaux ingrdients communment contenus dans les boissons nergisantes : teneur par dose et description sommaire* I.1/ PUBLIC CIBLE ET TETCHNIQUE EMPLOYEE Les boissons nergisantes sont offertes en vente libre dans de nombreux points de vente, tels que les dpanneurs, les piceries et les machines distributrices, o elles se retrouvent proximit des autres boissons (boissons gazeuses, eaux aromatises, th glac, etc.). Afin dlargir le march cible traditionnel des jeunes hommes, les fabricants de boissons nergisantes ont labor de nouvelles saveurs, de nouveaux mlanges dingrdients et de nouveaux emballages, et ils ont donn de nouvelles proprits ces produits. Tandis que plusieurs fabricants visent les femmes et les consommateurs plus gs avec des versions faibles en calories et le recours des ingrdients naturels, dautres utilisent des stratgies de commercialisation qui ciblent une clientle de plus en plus jeune. Le marketing des boissons nergisantes repose en grande partie sur une image associe la culture des jeunes et sur des thmes lis lattrait pour la rbellion, le risque et laventure qui se manifeste souvent ladolescence. Les entreprises de boissons nergisantes privilgient les canaux de diffusion
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non traditionnels tels que les vnements, les commandites, les sites Internet des fabricants et les sites Internet de rseautage social comme MySpace et Facebook. Plusieurs entreprises tablissent des partenariats avec des organismes et des vnements sportifs (ex. : comptition de descente en patins Red Bull Crashed Ice) ou des athltes professionnels, le plus souvent de sports extrmes (ex. : planche roulettes, BMX, motocross, karat). Certaines entreprises font galement du placement de produits dans des missions prises du jeune public, comme celles de la chane de tlvision amricaine MTV. Les slogans publicitaires et les sites Internet des fabricants de boissons nergisantes suggrent dutiliser leurs produits pendant un effort physique ou mental exigeant, notamment pour tudier, travailler, pratiquer une activit sportive ou encore danser toute la soire. I.2/ INNOCUIT ET TOXICIT DES PRINCIPAUX INGRDIENTS En dpit de la popularit des boissons nergisantes, il nexiste que peu dtudes sur les effets possibles de la consommation rgulire ou occasionnelle de ces produits sur la sant. a- Cafine La cafine, une mthylxanthine alcalode, est sans aucun doute la substance psychostimulante lgale la plus consomme actuellement dans le monde. Ses sources sont multiples, les plus connues tant la graine de cafier et la feuille de thier. On peut galement extraire la cafine des noix de kola, des feuilles de yerba mate et des graines de guarana. Bref, plusieurs produits de consommation en contiennent, comme le caf, le th, les boissons gazeuses, les boissons nergisantes, le chocolat, les friandises et les prparations pharmaceutiques. La cafine constitue lingrdient actif principal des boissons nergisantes, auxquelles elle est ajoute en raison de ses proprits stimulantes. Les premiers symptmes d'intoxication aigu par la cafine sont gnralement les tremblements et l'agitation, suivis de nauses, de vomissements, dune tachycardie. En cas dintoxication grave, un dlire, des convulsions, des tachyarythmies supraventriculaires et ventriculaires (tachycardie et fibrillation ventriculaires), une hypokalimie, une hyperglycmie et une acidose mtabolique peuvent se produire. La dose thrapeutique usuelle varie de 100 200 mg de cafine par jour. Une consommation excessive de fortes doses de cafine (plus de 250 mg) sur une longue priode peut provoquer un syndrome appel cafinisme . Il est important de diffrencier ce dernier du syndrome de sevrage de la cafine, car les symptmes du cafinisme se prsentent pendant la consommation de cafine, et non la suite dun arrt de celle-ci. Les symptmes du
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cafinisme dcrits sont : les cphales, la nervosit, lirritabilit, les tremblements, les soubresauts musculaires occasionnels, les palpitations, les bouffes de chaleur, lhyperventilation, les arythmies, la tachypne, la tachycardie, la diurse et certains troubles gastro-intestinaux. b- La guarana Originaire du Brsil, le guarana (Paullinia cupana) est une plante dont les graines contiennent principalement de la cafine (parfois surnomme guaranine), mais aussi des traces de thophylline et de thobromine. Selon la littrature, la cafine reprsente de 2 7,5 % du poids de la graine de guarana, comparativement de 1 2 % pour la graine de caf(59). Selon le lieu, lenvironnement et les conditions climatiques, il se pourrait que la graine de guarana contienne une quantit encore plus leve de cafine. La toxicit du guarana est attribuable la cafine quelle contient. c- La taurine Cette molcule est considre comme un acide amin conditionnellement non essentiel , cest--dire quelle peut tre synthtise par lorganisme (taurine endogne), mais il est possible que les quantits produites de cette manire ne suffisent pas pour compenser son limination en priode de stress ou dactivit physique intense. Gnralement, la synthse endogne de taurine satisfait aux besoins de lorganisme, et un apport alimentaire nest pas ncessaire. On retrouve la taurine endogne principalement dans le cerveau, la rtine, le myocarde, les fibres musculaires de type II et galement, plus faible concentration, dans la rate, les reins, le foie et le pancras. Il existe peu dinformation sur les effets ngatifs de la consommation de taurine. forte dose, des cas de constipation et de diarrhe ont t rapports chez quelques individus. La majorit des effets secondaires connus de la taurine ont t observs chez des patients malades ou prsentant une condition particulire. Une tude tablit que la taurine peut provoquer de lhypothermie et de lhypokalimie chez certains patients souffrant dune insuffisance adrnocorticale. Une autre tude fait tat de nauses, de cphales, de vertiges et de trouble de la dmarche chez certains patients pileptiques. La taurine aurait aussi t associe des pisodes psychotiques aigus. d- Ginseng Le ginseng est une plante adaptogne, cest--dire quil peut augmenter la capacit du corps sadapter diffrents stress. La racine, la feuille et mme le fruit de cette plante originaire dAsie sont rputs depuis des sicles pour leurs proprits pharmaceutiques. Cest surtout de la racine quon extrait les composs actifs, principalement des ginsenosides. Lapparition dpisodes de manie (tat de surexcitation psychique caractris par l'exaltation
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ludique de l'humeur, l'acclration dsordonne de la pense et les dbordements instinctuels). Chez des patients dpressifs est attribuable au ginseng. Aux doses thrapeutiques recommandes, le ginseng serait totalement dnu deffets indsirables. On a toutefois observ des effets indsirables conscutifs une surconsommation de ginseng chez des patients qui avaient consomm au moins 3 g de ginseng en une journe (6 comprims de 500 mg). Lhypertension, les dsordres gastrointestinaux, linsomnie, lirritabilit, la nervosit, la confusion et la dpression figurent au nombre des effets indsirables rapports. Des cas de syndromes dabus de ginseng ont t diagnostiqus la suite dun surdosage (15 g/jour). Ce syndrome est caractris principalement par de linsomnie, de lhypertonie, des ruptions cutanes, de la diarrhe et de ldme. Le ginseng est contre-indiqu chez les patients atteints dhypertension artrielle, de problmes cardiaques, de diabte, de schizophrnie et dinsomnie et chez ceux qui sont en attente dune chirurgie. Certains types de ginseng favorisent lactivit oestrognique; les femmes qui prsentent un dsordre hormonosensible (ex : cancer hormonodpendant) doivent donc viter den consommer. La prudence est galement de mise en ce qui concerne les enfants, les femmes enceintes et les mres qui allaitent. e- Glucuronolactone Chez lhumain, le glucuronolactone est produit naturellement par le mtabolisme du glucose dans le foie. Cest un ester cyclique, inodore et incolore, driv de lacide glucuronique. Aucun effet toxique na encore t observ par cette molcule. f- Inositol Linositol est une molcule organique cyclique; il sagit dun isomre du glucose qui est produit par lorganisme, Aucune tude na t recense au sujet des effets indsirables de la consommation dinositol chez lhumain. g- Vitamines du complexe B Les vitamines du complexe B sont des molcules hydrosolubles impliques dans le mtabolisme de production dnergie. Cest pourquoi la riboflavine (vitamine B2), la niacine (vit. B3), lacide pantothnique (vit. B5), la pyridoxine (vit. B6) et la cyanocobalamine (vit. B12) sont souvent ajoutes aux boissons nergisantes. Les concentrations des vitamines du complexe B des boissons nergisantes dpassent largement lapport nutritionnel recommand (ANR), si bien que la consommation dune ou de plusieurs canettes par jour peut fournir un apport suprieur lapport maximal tolrable (AMT) quotidien de ces vitamines.

Les vitamines du complexe B ne provoqueraient des effets nfastes qu de trs fortes doses. Lingestion de fortes doses de vitamines du complexe B peut induire les effets suivants : perturbations gastro-intestinales, douleurs abdominales, vomissements, somnolence, vertiges, cphales, paresthsie, neuropathie sensitive, dmangeaisons, thrombose vasculaire priphrique, sensation denflure, polyurie et coloration urinaire orang. Ces effets sont gnralement signals dans des rapports de cas; leur frquence est donc indtermine. La niacine est la vitamine du complexe B qui prsente le potentiel de toxicit le plus lev. Certains effets sont constats partir dune dose de 30 mg/jour(98). En fait, lingestion rgulire dune dose leve (30 1 000 mg) de niacine sous forme de supplments ou de fortifiants alimentaires peut notamment causer des bouffes congestives, cest--dire des rougeurs subites au visage, au cou et la poitrine, accompagnes de dmangeaisons, de picotements et dune sensation de brlure. Parmi les cas dintoxication, on rapporte de lhpatotoxicit, des perturbations intestinales, une diminution de la tolrance au glucose, une diminution de lexcrtion de lacide urique, de lhypotension, de la somnolence, de la tachycardie, des arythmies, des vertiges et des cphales. La niacine est cependant une vitamine peu toxique des doses modres durant des priodes limites. De plus, aucun effet nocif na t associ la consommation de la niacine prsente naturellement dans les aliments. I.3/ PRESENTATION DES DIFFERENTS TYPES DE BOISSONS ENERGISANTES PREPONDERANTES AU CAMEROUN Au Cameroun on distingue principalement deux types de boissons nergisantes, rencontr dans presque toutes les ventes de presque tous les quartiers il sagit du REACTOR et le XXL. 1- LE REACTOR Le ractor est une boisson gazeuse sans alcool vendu dans des bouteilles plastiques de 350 ml. Le contenu et la bouteille sont des marques dposes de the Monarch Beverage Company et de source du pays SA. Cette boisson est embouteille par SP, source du pays SA, licence de the Monarch Beverage Company, Atlanta. a- ingrdients Cette boisson contient comme ingrdient dclar : de leau gazifie ; du sucre ; acide citrique (e 330), le citrate de sodium (e331) ; armes naturels et artificiels ; la taurine ; la cafine ; le benzoate de sodium (e221) ; caramel (e 150d) ; la tartrazine (e102); extrait de ginseng ; inositol ; vitamines B3, B5, B6 et B12.

b- Valeur nutritionnelle Pour une bouteille de 350 ml, nous avons : 168g de lipides ; 40,5g de glucide ; 11,2mg de B3 (63%) ; 2,8mg de B5 (49%) ; 2,8mg de B6 (140%) ; 2,8 mg de B12 (280%). c- Prcautions Sur la bouteille il est inscrit : dconseill aux femmes enceintes ou allaitant, aux enfants, aux diabtiques, et aux personnes sensibles la cafine. 2- LE XXL Le xxl est une boisson nergisante aromatis et sans alcool ; elle se prsente sous deux formes. Une forme sur bouteille cassable de 300 ml et une autre sous forme de bouteille plastique de 350 ml. Il est fabriqu et embouteill sous licence internationale par les brasseries du Cameroun. aingrdients Cette version de boisson nergisante contient : de leau carbonate ; sirop de mas de haut fructose ; acide citrique ; d glucuronolactone ; armes naturels et artificiels ; benzoate de sodium ; acide ascorbique ; sorbate ; choline ; penthothenate de sodium; inositol ; cafine ; taurine ; nicotinamide ; EDTA (pour protger larme) ; yellow 5 ; pyridoxine ; hydrochloride et le cyanocobalamine. bValeur nutritionnelle 100% de B3 ; 50% de B5 ; 190% de B6 ; 175% de B12.

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HYPOTHESES DE TRAVAIL
Les boissons nergisantes sont certes constitues de molcules pour la plupart

inoffensives, mais des toxicits pourraient tre observes au niveau de la physiologie des mammifres. Il faut noter que cest la dose qui fait le poison (Paracelse). Dans la plupart de ces boissons, les lments quon y retrouve, ont des concentrations extrmement leves. De prime-a-bord, lobjectif est de stimuler le corps afin de produire plus dnergie ; do le nom de boisson nergisante. La recrudescence observe dans la commercialisation des boissons nergisantes dans le monde et en particulier dans notre pays le Cameroun pourrait avoir plusieurs raisons. - La corruption des systmes de contrle de qualit des produits ; - Le manque dinfrastructures de contrle toxicologique ; - Le manque dapplication stricte des textes sectionnant limportation de ces produits; - La dsinvolture des pouvoirs publics quant la scurit de ses citoyens.

Les consquences ces actions de ngligence pourraient avoir des impacts aussi bien au niveau individuel quau niveau social.

II.1/ IMPACT AU NIVEAU INDIVIDUEL

a- Effets cardiovasculaires Depuis quelques annes, plusieurs cas anecdotiques darythmies et mme de dcs conscutifs la consommation de boissons nergisantes durant une activit physique intense ont soulev des inquitudes quant la possibilit que lingestion de ces boissons, dans le cadre de la pratique de sports ou en combinaison avec de lalcool, puisse augmenter le risque de dcs par arythmie. b- Effets neurologiques Une tude ralise auprs de jeunes adultes en bonne sant (n = 15) a valu leffet rsiduel de la consommation dune boisson nergisante sur la qualit du sommeil. Les rsultats rvlent que la consommation de deux canettes de boisson nergisantes deux reprises au cours dun quart de travail de nuit avait rduit de 29 minutes la dure du sommeil, comparativement au placebo. De plus, lefficacit du sommeil a t rduite de 92 % 85 %. c- Effets psychiatriques Un article rcent rapporte un premier cas qui associe un pisode de manie la consommation de boisson nergisante. Un homme de 36 ans, connu pour une maladie bipolaire de type 1 qui tait bien contrle depuis 5 ans sous traitement au lithium, sest prsent en pisode de manie et a d tre hospitalis. Sur la base de ce rapport. d- Effets rnaux RIESENHUBER et al., ont dmontr que les effets diurtiques et natriurtiques des boissons nergisantes seraient secondaires la prsence de cafine dans ces boissons. En effet, la prise de 750 ml dune boisson nergisante contenant au total 240 mg de cafine chez 12 sujets sains aurait produit des augmentations moyennes de 243 ml de la diurse (soit 1,01 ml/mg de cafine) et de 27 mmol du sodium urinaire (p < 0,001 dans les deux cas). La taurine naurait pas eu deffet additif sur ces paramtres. e- Boissons nergisantes et tabac La fume du tabac modifie la pharmacocintique de la cafine. En effet, ce type de fume est un puissant inducteur du cytochrome P450 1A2 hpatique, la principale voie mtabolique de la cafine. Une tude rcente qui visait principalement dcrire la pharmacocintique de la cafine dans une population asiatique a dmontr que la demi-vie dlimination de la cafine est de 4,3 heures chez les non-fumeurs, comparativement 3

heures chez les fumeurs. Chez ces derniers, il faut donc des doses suprieures de cafine des intervalles plus rapprochs pour obtenir le mme effet recherch que chez les non-fumeurs. De plus, une tude ralise auprs dadolescents a rvl une forte association positive entre la consommation de boissons nergisantes et le tabagisme. f- Boissons nergisantes et alcool Une tude a valu les consquences de la consommation dune boisson nergisante alcoolise sur certains paramtres neuropsychologiques chez 27 femmes dont la moyenne dge tait de 21,6 ans. Sur le plan de ltat neuropsychologique, les participantes qui avaient consomm une boisson nergisante alcoolise ont obtenu un rsultat global nettement infrieur celui des participantes qui avaient consomm une boisson nergisante sans alcool ou une boisson sans cafine et sans alcool. Les rsultats de fluidit verbale et de jugement Visio-spatial taient particulirement faibles. II.2/ IMPACT AU NIVEAU SOCIAL La consommation des boissons nergisantes na surement pas seulement un impact au niveau de la sant de lindividu ; la socit aussi pourrait en souffrir. Puisque laction psychostimulante de la cafine, principal constituant des boissons nergisantes pourrait entrainer des troubles des fonctions cognitives et de mmoire trs pousss entrainant ainsi les sujets la dlinquance, la dpravation des meurs etc

III- CADRE OPERATOIRE

Cette tude toxicologique sera prospective, base sur des bios-essais sur rattus norvegicus. Elle sera ralise dans le laboratoire de biologie animal conjointement avec le laboratoire de Biochimie et le laboratoire danatomie de la facult de mdecine de luniversit de Douala. III.1/ DONNEES SUR Rattus norvegicus Autrefois abhorr et mpris, considr seulement comme une crature nuisible, le rat est dsormais un animal de compagnie la mode et surtout un sujet d'exprience indispensable en laboratoire. Il est utilis comme modle d'tude dans de trs nombreux domaines de la recherche biomdicale. Et la plupart des exprimentations pharmacologiques et toxicologiques sont aussi ralises sur ce petit rongeur. Le rat de laboratoire ou de compagnie, Rattus norvegicus, est un rongeur de la famille
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des Murids. Son anctre, le rat sauvage, est originaire dAsie centrale. Malgr son nom, il na pas dorigine norvgienne. Il sest propag en Europe, partir du Moyen-ge, le long des routes commerciales et militaires. Le poids dun adulte est de 450 520 grammes pour les mles et de 250 300 grammes pour les femelles. Le poids dun petit la naissance est de 5 6 grammes. - La dure moyenne de vie varie de 2,5 3,5 ans. La dure de vie maximale dcrite est de 56 mois soit un peu plus de 4 ans et demi. - La temprature rectale moyenne est comprise entre 35,9 et 37,5 C. - La frquence respiratoire est comprise entre 70 et 115 inspirations par minute, et la frquence cardiaque entre 250 et 450 battements par minute. - Le nombre de chromosomes (diplode) est de 42. A- ALIMENTATION ET PHYSIOLOGIE DIGESTIVE Le rat est omnivore. Pour 100 grammes de poids vif, il consomme environ 5 6 grammes de nourriture et boit 10 ml deau par jour. En outre, il est ccotrophe cest--dire quil ingre ses excrments afin de pouvoir digrer compltement la cellulose. En laboratoire, l'alimentation est standardise et on utilise des rgimes complets commercialiss par les grands groupes d'alimentation animale. Ces rgimes sont composs principalement d'une source de protines, (soit de la casine soit de la poudre de lait crm), d'une source de glucides (qui reprsentent plus de 60% de la ration) sous forme de saccharose ou d'amidon de mas et enfin de minraux et vitamines en plus faibles quantits. La formule dentaire est la mme que pour les autres rongeurs soit : incisives 1/1, canines 0/0, prmolaires 0/0, molaires 3/3. Les incisives ont une croissance continue. Lestomac est divis en deux parties dont une seule est glandulaire. Le vomissement est impossible du fait de lanatomie de labouchement de loesophage lestomac. Le rat ne possde pas de vsicule biliaire. Le ccum est trs dvelopp et adapt la digestion de la cellulose grce une microflore particulire. Cest un point important souligner, car chez les souches indemnes de germes, le ccum peut parfois se dilater et tourner autour de son axe. Cette torsion est alors fatale. B- REPRODUCTION Les mles et femelles atteignent leur maturit sexuelle entre 65 et 110 jours, cest-dire entre 2 et 4 mois environ, quand les mles psent au moins 300 grammes et les femelles
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250 grammes. La reproduction cesse vers 12-18 mois. Le mode de reproduction peut tre monogame. Dans ce cas un mle et une femelle sont levs dans la mme cage et on enlve chaque porte aprs le sevrage. Si on choisit un mode polygame, un mle est lev avec deux six femelles, chaque femelle est spare dans une cage individuelle juste avant la mise-bas. Le cycle stral de la femelle dure 4 5 jours et lovulation est spontane. La dure de gestation est de 21 23 jours mais peut tre rallonge de 3 7 jours si la femelle allaite encore une porte prcdente pendant la gestation. Lstrus post-partum est fcond. La femelle possde 6 paires de mamelles et le tissu mammaire est trs dvelopp. Il stend du cou jusqu'en rgion inguinale, ainsi que sur les flancs et sur le dos. Les portes comprennent 6 12 petits environ car il existe des variations en fonction des souches et de lge des parents. Les petits naissent aveugles et sans poils dans le nid prpar par la mre. Ils sont sevrs lge de 21 jours. La croissance est trs longue, surtout chez le mle pour qui les os ne sont compltement ossifis que vers lge de 2 ans. CAUTRES PARTICULARITES Le rat a une trs mauvaise vue mais un odorat fortement dvelopp. Il possde une glande lacrymale particulire, nomme glande de Harder, qui scrte des larmes riches en lipides et en porphyrines. En temps normal ces larmes lubrifient lil, mais en cas de stress important ou de pathologie aigu, elles scoulent par le canthus interne et par le nez, laissant apparatre des crotes rouges qui ne sont pas du sang. Ce phnomne est appel chromodacryorrhe. Parmi les autres spcificits, on peut citer la prsence de masses de graisse brune, situes entre les paules et en rgion cervicale, quil ne faut pas confondre avec des glandes salivaires ou des ganglions. Leur rle est mtabolique et thermorgulateur. III.2/ METHODE OPERATOIRE Des rats seront levs dans lanimalerie du laboratoire de biologie animal de luniversit de Douala. Ds leur maturit, ils seront spars en 2 groupes de 6 lots numrots de 1 6 ; chaque lot sera constitu de 6 rats. Les lots 1 et 2 seront constitus des rats de sexe fminin ; les lots 3 et 4 seront constitus des individus de sexe masculin ; le lot 5 sera constitu de 3 rats mles et de 3 rats femelles enfin le 6me lot sera constitu de tmoins. Pendant un mois tout entier les individus du groupe 1 seront nourris normalement et abreuvs au ractor diffrentes doses comme suit : Lot 1 et 3, eau + de 350 ml de ractor ; Lot 2 et 4, eau + de 350 ml de ractor ;
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Lot 5, de 350 ml de ractor sans eau ; Lot 6 eau uniquement sans ractor.

Pendant cette mme priode, les individus du groupe 2 seront nourris normalement et abreuvs au XXL diffrentes doses comme suit : - Lot 1 et 3, eau + de 350 ml de XXL; - Lot 2 et 4, eau + de 350 ml de XXL ; - Lot 5, de 350 ml de XXL sans eau ; - Lot 6 eau uniquement sans XXL. Du sang sera recueilli aprs chaque semaine selon une mthode adquate et des examens seront effectus ; Il sagira de plusieurs types dexamens : 1- EXAMEN DHEMATOLOGIE : hmogramme Par dfinition l'hmogramme est l'tude cytologique quantitative et qualitative du sang circulant. Il s'agit donc d'un diagramme sanguin qui analyse le nombre, la proportion, la morphologie et les variations des lments figurs du sang. Il comprend d'abord les numrations absolues rythrocytaire, leucocytaire et plaquettaire. On tablit ensuite pour les globules blancs la formule leucocytaire donnant les pourcentages des diffrents types de leucocytes : granulocytes neutrophiles, granulocytes osinophiles, granulocytes basophiles, lymphocytes et monocytes (les granulocytes sont parfois appels polynuclaires). A ct de la formule leucocytaire on peut valuer le nombre d'rythroblastes prsents sur le frottis. Ce nombre est exprim en pourcentage du nombre total de globules blancs. Les globules rouges sont aussi caractriss par les paramtres numriques rythrocytaires suivants: - L'hmatocrite (Ht) est le pourcentage du volume sanguin occup par les globules rouges. - Le volume globulaire moyen d'un rythrocyte (VGM) est exprim en femtolitres (fl). C'est le paramtre mesur par la plupart des automates qui en dduisent, connaissant dj la numration rythrocytaire, l'hmatocrite et la CCMH. - La teneur corpusculaire moyenne en hmoglobine (TCMH) correspond la charge moyenne en hmoglobine d'une hmatie est exprime en picogrammes (pg). C'est le rapport de la concentration en hmoglobine sur la numration rythrocytaire. - La concentration corpusculaire moyenne en hmoglobine (CCMH) correspond la charge en hmoglobine pour 100 ml de sang. C'est le rapport de la concentration en hmoglobine sur l'hmatocrite. Elle est exprime en g/100ml ou en pourcentage.

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- Le taux de rticulocytes correspond au pourcentage de rticulocytes par rapport au nombre total de globules rouges circulants. - La concentration en hmoglobine [Hb] est dtermine classiquement par spectrophotomtrie. 2- LE FROTTIS Il suffit d'une seule goutte de sang pour raliser un frottis, prleve avec ou sans anticoagulant. La goutte est dpose une extrmit d'une lame de verre propre et dgraisse. On utilise ensuite une autre lame ou une lamelle ou bien encore une lame rode, qu'on approche juste devant la goutte, en respectant un angle d'inclinaison de 30 degrs avec la premire lame. La goutte va alors se rpandre le long de la jonction entre les deux lames. Avant qu'elle n'atteigne les bords de la lame rode, on tale la goutte de sang vers l'autre extrmit de la lame support. Si le frottis est bien ralis, il ne doit pas toucher les bords ni occuper plus de trois quarts de la longueur de la lame. L'angle de 30 degrs est dterminant car l'talement selon un angle plus obtus fournirait un frottis trop pais, et selon un angle plus aigu, un frottis trop fin, l'idal tant d'obtenir une monocouche cellulaire. Le frottis doit tre ensuite rapidement sch l'air pendant une demi-heure au moins. Pour activer l'vaporation et minimiser les artefacts dus au schage, on peut agiter vigoureusement la lame pendant la premire minute de schage. Cette mthode manuelle d'talement demeure la mthode de rfrence. Aprs le schage, le frottis peut tre color. Il existe de nombreuses techniques de coloration et les plus courantes sont de type Romanowsky, c'est--dire qu'elles comprennent des colorants acides et basiques qui font bien ressortir les contrastes de bleu et de rouge. Parmi les colorations de ce type, les plus connues sont les colorations de Wright, de Giemsa et de May-Grnwald-Giemsa qui sont toutes les trois frquemment utilises en hmatologie et souvent sous forme de colorations rapides (ex : Diff Quick), c'est dire avec un protocole simplifi. On peut galement employer des colorations plus spcifiques comme par exemple le bleu de mthylne pour mettre en vidence les rticulocytes, ou le mthyle violet pour dtecter des corps de Heinz. Il existe aussi des techniques plus rcentes de colorations cytochimiques ou immunohistochimiques permettant une classification trs prcise des cellules selon leurs proprits.

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3- LES EXAMENS DE BIOCHIMIE ACIDE FOLIQUE, VITAMINE B 12 Une carence en acide folique - tout comme une carence en vitamine B12 - perturbe la synthse normale de l'ADN. GLUCOSE URINAIRE CREATININE BILIRUBINE TOTALE ET CONJUGUEE ET URINAIRE ELECTROPHORESE DES PROTEINES PROTEIN C REACTIVE (CRP) CHOLESTEROL IONOGRAME COMPLET GAZ SANGUINE TSH T4, T3 LH, FSH, TESTOSTRONE, PROGESTERONE COMPLEMENT (C3 ET C4) ANTICORPS ANTI-THYROGLOBULINE ET ANTI-THYROPEROXYD ASE (TPO)

4- LES EXAMENS DANATOMO-PATHOLOGIE Des observations microscopiques seront effectues sur les organes tels que : le cur, le poumon, lestomac, les reins et le foie. Les anomalies (irrgularits) seront ainsi dcrites.

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IV-COUT PREVISIONNEL DU TRAVAIL

Matriels 100 rats Nourriture pour rats 100 REACTORS 100 XXL Hmogramme + frottis TOTAL MATERIEL BIOCHIMIE GLUCOSE URINAIRE -CREATININE -BILIRUBINE TOTALE ET CONJUGUEE ET URINAIRE -ELECTROPHORESE DES PROTEINES -PROTEIN C REACTIVE (CRP) -CHOLESTEROL -IONOGRAMME COMPLET -GAZ SANGUINE -TSH T4, T3 -LH, FSH, TESTOSTRONE, PROGESTERONE -COMPLEMENT (C3 ET C4) -ANTICORPS ANTI-THYROGLOBULINE -ANTI-THYROPEROXYD ASE (TPO) 7800 * 80 15500 * 80 18200 * 80 ANATOMOPATHOLOGIE EXAMENS REINS, CUR, POUMON, FOIE, ESTOMAC Prix unitaire 97 000 * 5 Prix total 485000 624 000 1 240 000 1 456 000 7 688 000 13500 * 80 5500 *80 7800 * 80 12000 *80 10800 *80 (6800 * 3) *80 (12800 * 3) * 80 1 080 000 440 000 624 000 960 000 864 000 1 632 000 3 072 000 6000 * 80 5200 * 80 12000 * 80 480 000 416 000 960 000 Prix (FCFA) 1300 * 100 100f la boule * 100 500 * 100 500 * 100 6600 * 80 Total (FCFA) 130 000 10 000 50 000 50 000 528 000 768 000

TOTAL EXAMENS BIOCHIMIE

PRIX TOTAL PROJET

TOTAL MATERIEL TOTAL EXAMENS BIOCHIMIE ANATOMOPATHOLOGIE 768 000 7 688 000 485000 8 941 000 FCFA

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CONCLUSION lissue de cette analyse, nous constatons que le jeune camerounais est au centre de notre travail. Il est llment vulnrable cibl par les marketistes. Fer de lance de la nation camerounaise, le jeune doit tre protg ; pour cela il doit jouir de toutes ses facults physiques et mental, ce que noffre les boissons nergisantes . Dans les autres pays developps, la consommation de ce type de boisson prive la socit des talents de la jeunesse, ils sont en proi aus effets de la drogue. Etablir les effets des boissons nergisantes vendus au cameroun pourrait aider sauver la jeunesse mondiale et en particuli la jeunesse camerounaise. Contrler la toxicit ou linnocuit des boissons nergisante reste un problme majeur, nglig par les authorits, dtruisant a petit feu les consommateurs et rendant la socit inapte des talents de leur jeunesse.

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RFRENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1- ABBOT,D.P., CHERRY,C.P.- Malignant mixed thymic tumor with metastases in a rat- Vet. Pathol., 1982, 19, 721-723 3- ABBOT,D.P., PRENTICE, D.E., CHERRY,C.P.- Mononuclear cell leukemia in aged Sprague-Dawley rats- Vet. Pathol., 1983, 20, 434-439 3- AKAHANE,K., FURUHAMA,K., ONODERA,T.- Simultaneous occurrence of hypercholesterolemia and hemolytic anemia in rats fed cholesterol diet- Life. Sci., 1986, 39, 499-505.

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