BAB I PENDAHULUAN 1.1. MAKSUD PERCOBAAN PRAKTIKUM Penentuan kadar bahna kimia / obat-obatan dengan memakai alat spektrofotometer.

1.2. TUJUAN PERCOBAAN PRAKTIKUM Agar mahsiswa/i mampu unutk mengetahui susunan, cara kerja dan penggunaan alat spektrofotometri. 1.3. PRINSIP PERCOBAAN 1. Berkas polykromatis dirobah menjadi monokromatis 2. Sinar yang diabsorbsi oleh bahan yang diselidiki sebanding dengan jumlah (konsentrasi) bahan yang diselidiki. 3. Hukum Lambret-Berr. 1.4 TEORI

Spektrofotometer UV-VIS adalah salah satu alat analisis kimia yang sering digunakan di laboratorium untuk analisis kimia Bahan Bakar Nuklir. Namun kurangnya personil yang menguasai unjuk kerja alat tersebut menjadi kendala dalam mengaplikasikan alat tersebut. Untuk mengatasi hal tersebut Kelompok fisiko kimia Bidang Pengembangan Radiometalurgi PTBN Batan Serpong bermaksud untuk mengadakan coaching peralatan spektrofotometer UV-VIS, agar semua personil kelompok fisiko kimia dapat berkompeten untuk mengaplikasikan peralatan spektrofotometer UV-VIS sebagai salah satu alat analisis kimia yang cukup handal. Selain itu juga kegiatan ini

dimaksudkan untuk membina kader ahli analisis kimia, alih keahlian dalam memahami dan mengopersikan alat spektrofotometer UV-VIS. Memberikan pelatihan keahlian untuk membentuk kelompok ahli dalam melaksanakan pekerjaan analisis kimia khususnya uranium, thorium dan sulphat dalam bahan nuklir penggunakan spektrofotometer UV-VIS di laboratorium IRM termasuk cara-cara preparasi sampel, pengukuran sampel, mengevaluasi hasil pengukuran, memvalidasi metode yang meliputi linieritas pengukuran, penentuan limit deteksi, limit kuantitasi, akurasi, presisi serta persen recovery dan bagaimana mengektimasi ketidakpastian pengukuran. Selain itu juga diharapkan dapat melakukan kontrol kinerja alat dalam rangka pemeliharaan peralatan. Aplikasi

Contoh dari UV-vis readout UV / Vis spectroscopy adalah secara rutin digunakan dalam kuantitatif penentuan solusi dari logam transisi ions dan sangat conjugated organic compounds.

Solusi dari logam transisi ions bisa berwarna (misalnya, terlihat menyerap cahaya) karena d elektron dalam atom logam dapat digairahkan dari satu

negara ke elektronik lainnya. Warna ion logam solusi sangat dipengaruhi oleh keberadaan jenis-jenis lainnya, seperti anions tertentu atau ligands. Misalnya, warna yang memperencer solusi dari copper sulfate sangat biru muda; menambahkan amonia intensifies warna dan perubahan pada panjang gelombang maksimum penyerapan ( m a x).

Organic compounds, terutama mereka yang tinggi derajat konjugasi, juga menyerap sinar UV atau di daerah terlihat dari electromagnetic spektrum. Dengan larutan untuk determinations sering larut air air compounds, atau ethanol untuk organik-larut compounds. (Larutan organik mungkin signifikan UV penyerapan; tidak semua pembersih yang sesuai untuk digunakan dalam UV spectroscopy. Ethanol menyerap sangat lemah paling banyak wavelengths.) PH larutan polaritasnya dan dapat berpengaruh pada penyerapan spektrum yang organik kompleks. Tyrosine, misalnya, berkurang. peningkatan penyerapan maxima dan koefisien molar pemadaman ketika pH meningkat 6-13 atau ketika larutan polaritasnya

Sedangkan biaya transfer kompleks juga menimbulkan warna, warnawarna yang seringkali terlalu kuat untuk digunakan untuk pengukuran kuantitatif. The Beer-Lambert hukum menyatakan bahwa absorbance sebuah solusi

secara langsung proporsional dengan konsentrasi yang menyerap jenis solusi dan jalur panjang. Oleh karena itu, untuk tetap jalan panjang, UV / Vis spectroscopy dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi yang breker dalam solusi. Adalah penting untuk mengetahui seberapa cepat perubahan yang absorbance dengan konsentrasi. Ini dapat diambil dari referensi (tabel koefisien molar pemadaman), atau lebih tepat, yang ditentukan dari kalibrasi melengkung. UV / Vis spectrophotometer dapat digunakan sebagai detektor untuk HPLC. Keberadaan sebuah analyte memberikan respon yang dapat dianggap proporsional dengan konsentrasi. Untuk hasil yang akurat, maka instrumen tanggapan analyte ke dalam unknown harus dibandingkan dengan respon terhadap

standar; ini sangat mirip dengan penggunaan kalibrasi Curves. Respon (misalnya, puncak ketinggian) untuk konsentrasi tertentu yang dikenal sebagai respon faktor.

Hukum Lambert Beer Metode yang paling sering digunakan dalam cara kuantitatif untuk menentukan konsentrasi yang menyerap jenis solusi, dengan menggunakan hukum Beer-Lambert:

dimana A adalah diukur absorbance, I

adalah intensitas dari kejadian yang

diberikan cahaya pada panjang gelombang, saya yang dikirim intensitas, L yang pathlength melalui sampel, dan c dengan konsentrasi yang menyerap spesies. Untuk setiap jenis dan panjang gelombang, adalah konstan dikenal sebagai molar kapasitet atau koefisien pemadaman. Konstan ini adalah dasar molekular properti yang ada pada larutan, pada suhu dan tekanan tertentu, dan memiliki unit 1 / F * c m atau sering J U / M * c m. The absorbance pemadaman dan kadangkadang didefinisikan dari segi logaritma alami, bukan dasar-10 logaritma. The Beer-Lambert Hukum berguna untuk banyak characterizing compounds tetapi tidak terus sebagai universal hubungan untuk konsentrasi dan penyerapan zat semua.. Pesanan jumlahnya banyak hubungan antara konsentrasi penyerapan dan kadang-kadang menemui untuk sangat besar, kompleks seperti molekul organik dyes (Xylenol Orange atau Merah Netral, misalnya). Dengan mengukur transmitans larutan sampel, dimungkinkan untuk menentukan konsentrasinya dengan menggunakan hukum Lambert-Beer. Karena spektroskopi UV-VIS sangat sensitif dan spektrometernya dapat dibuat dengan ukuran yang sangat kecil, metoda ini khususnya sangat bermanfaat untuk analisis lingkungan, dan khususnya cocok untuk pekerjaan di lapangan.

Hukum Lambert-Beer dipenuhi berapapun panjang gelombang sinar yang diserap sampel. Panjang gelombang sinar yang diserap oleh sampel bergantung pada struktur molekul sampelnya. Jadi spektrometri UV-VIS dapat digunakan sebagai sarana penentuan struktur. Sejak 1876, kimiawan Swiss-Jerman Otto Nikolaus Witt (1853-1915) mengusulkan teori empiris warna zat (yang ditentukan oleh panjang gelombang sinar yang diserap) dan struktur bagian-bagiannya. Menurut teori ini, semua senyawa berwarna memiliki beberapa gugus tak jenuh seperti yang diberikan di Gambar 13.3. Gugus fungsi semacam ini disebut dengan kromofor. Semua senyawa pewarna dan pigmen memiliki kromofor. Terdapat beberapa faktor lain yang harus diperhatikan sehubungan dengan warna senyawa. Panjang konjugas linear adalah faktor yang penting. Misalnya, warna merah -karoten (Gambar 1) berasal dari sistem terkonjugasi, dan warna ini cocok dengan hasil perhitungan kimia kuantum. Terdapat beberapa gugus fungsi, seperti -NR2, -NHR, -NH2, -OH dan -OCH3, yang memiliki efek memekatkan warna kromofornya. Semua ini disebut auksokrom.

Gambar 1 Struktur -karoten. Warna merah wortel dan tomat adalah akibat sistem terkonjugasi yang panjang ini. Namun, tidak mungkin menyimpulkan struktur senyawa dari senyawa dari warnanya atau panjang gelombang sinar yang diserapnya. Pertimbangan Praktis Sebenarnya untuk melakukan pengukuran yang valid Anda harus memahami dan menyadari keterbatasan tertentu instrumen yang digunakan. Hal ini sangat penting saat melakukan pengukuran sederhana dengan menggunakan (dan karena itu relatif murah) instrumen, di mana pengguna yang lebih besar untuk menghadapi suatu batasan instrumental, atau saat melakukan pengukuran bahan baku yang belum baik karakteristik yet. The molar koefisien pemadaman, , adalah fungsi dari panjang gelombang (yakni, warna) dari cahaya yang digunakan. Untuk Beer-Lambert hubungan di atas untuk terus dalam kasus tertentu, harus terang cukup satu warna yang digunakan adalah koefisien exctinction baik ditetapkan. Ada juga dapat membatasi dikenakan oleh bahan yang diukur, misalnya jika bahan bukan merupakan solusi. Menyadari bahwa hukum Beer-Lambert menunjukkan bahwa perubahan dalam konsentrasi dan panjang jalan harus memiliki efek setara. Itulah sebabnya, misalnya, diluting solusi oleh faktor dari 10 seharusnya memiliki efek yang sama pada absorbance mentega sebagai jalan panjang dari normal 10 mm sampai 1 mm. Jika sel yang berbeda panjang jalan yang tersedia, ini adalah alternatif untuk tes hanya plotting penyerapan versus konsentrasi untuk menilai validitas sebuah pengukuran. Kegagalan seperti tes dapat menunjukkan konsentrasi yang bergantung pada efek dalam contoh, seperti penyerapan perataan. Spektral Bandwidth Sebagai contoh, hantu bandwidth dari instrumen (seperti FWHM), porsi spektrum yang dipilih untuk pengukuran, harus lebih kecil dibandingkan dengan lebar dari absorbance curve dari sampel, sehingga exctintion koefisien tidak berubah signifikan atas band. Beberapa instrumen membolehkan pemilihan bandwidth. (The tradeoff adalah mengurangi bandwidth mengurangi energi lulus

dengan detektor dan akan memerlukan waktu yang lebih panjang untuk mencapai ukuran yang sama sinyal ke rasio kebisingan.) Kesalahan Panjang Gelombang Dalam cairan, yang biasanya pemadaman koefisien perubahan perlahan dengan riak gelombang. A puncak absorbance curve (panjang gelombang yang dimana absorbance mencapai maksimum) adalah dimana tingkat perubahan absorbance dengan panjang gelombang yang terkecil. Pengukuran biasanya dilakukan di puncak untuk meminimalkan kesalahan yang dihasilkan oleh kesalahan dalam panjang gelombang dalam instrumen, yang karena kesalahan yang berbeda dari koefisien pemadaman diasumsikan. Stray Cahaya Faktor lain yang penting adalah kemurnian dari cahaya yang digunakan. Yang paling penting faktor yang mempengaruhi ini adalah sesat tingkat cahaya yang monochromator Detektor yang digunakan adalah broadband, ia merespon semua cahaya yang mencapai itu. Jika sejumlah besar terang melalui sampel berisi wavelengths yang jauh lebih rendah dibandingkan dengan koefisien pemadaman nominal satu, instrumen yang akan melaporkan salah absorbance rendah. Setiap instrumen akan mencapai titik di mana peningkatan konsentrasi sampel tidak akan mengakibatkan kenaikan yang dilaporkan absorbance, karena detektor hanya menanggapi stray cahaya. Dalam praktek yang konsentrasi sampel atau optik panjang jalan harus disesuaikan dengan tempat yang tidak diketahui absorbance dalam jarak yang berlaku untuk instrumen. Kadang-kadang sebuah fungsi kalibrasi empiris dikembangkan, dikenal dengan konsentrasi dari sampel, untuk membolehkan pengukuran ke dalam wilayah di mana menjadi instrumen nonlinear. Sebagai panduan kasar, instrumen dengan satu monochromator biasanya akan memiliki cahaya nyasar ke tingkat yang sesuai sekitar 3 AU, yang akan melakukan pengukuran di atas sekitar 2 AU bermasalah. Instrumen yang lebih kompleks dengan dua monochromator akan memiliki tingkat cahaya sesuai nyasar ke sekitar 6 AU, maka yang akan membolehkan pengukuran yang lebih luas absorbance jangkauan.

Penyerapan Perataan Sifat dari bahan yang diukur juga penting. Solusi yang tidak dapat menunjukkan penyimpangan yang homogen dari Beer-Lambert hukum karena fenomena penyerapan perataan. Hal ini dapat terjadi, misalnya, di mana menyerap zat berada dalam partikel ditangguhkan yang akan penyimpangan yang paling nyata di bawah kondisi yang rendah dan konsentrasi tinggi absorbance. Referensi yang menjelaskan cara untuk benar untuk deviasi ini. Ultraviolet-visible spectrophotometer Dengan instrumen yang digunakan dalam ultraungu-terlihat spectroscopy disebut UV / vis spectrophotometer. It mengukur intensitas cahaya melewati sampel (I), dan membandingkan ke intensitas cahaya sebelum melewati sampel (I
o).

Rasio I / I

disebut transmittance, dan biasanya dinyatakan dalam persentase

(% TThe absorbance, A, didasarkan pada transmittance: A = l o g (% T / 100%) J = - l o g (% T / 100%) Dasar bagian spectrophotometer adalah sumber cahaya, yang dudukan untuk sampel, yang difraksi kisi atau monochromator untuk memisahkan berbagai wavelengths cahaya, dan detektor. Radiasi yang sering merupakan sumber Wolfram kawat pijar (300-2500 nm), sebuah deuterium arc lampu yang berkesinambungan melalui wilayah ultraungu (190-400 nm), dan baru-baru ini lebih ringan emitting diodes (LED) dan Xenon Arc Lamps untuk yang terlihat wavelengths. Photodiodes digunakan dengan monochromators, yang menyaring cahaya lampu sehingga hanya satu panjang gelombang mencapai detektor. Difraksi gratings digunakan dengan CCDs yang mengumpulkan cahaya pada berbagai wavelengths berbeda piksel.

Diagram single-beam UV / vis spectrophotometer. A spectrophotometer dapat berupa satu atau dua balok beam. Balok dalam satu instrumen (seperti Spectronic 20), semua lampu melewati sel sampel. umum dipakai di kedua pengajaran dan laboratorium industri.
O

saya

harus diukur dengan mengeluarkan sampel. Ini merupakan desain awal, tapi masih

Diagram double-beam UV / vis spectrophotometer Dalam double-beam instrumen, terang adalah menjadi dua beams sebelum mencapai sampel. Satu beam digunakan sebagai referensi, yang lainnya balok melewati sampel. Beberapa instrumen double beam memiliki dua ganda (photodiodes), dan sampel dan acuan beam dihitung pada waktu yang sama. Dalam instrumen lainnya, kedua beams melewati sebuah balok chopper, yang satu blok balok pada suatu waktu. Yang berukuran antara detektor alternates sampel balok dan balok acuan.

Sampel untuk UV / Vis spectrophotometry cairan yang paling sering, walaupun absorbance of gas dan bahkan dari solids juga dapat diukur. Contoh biasanya ditempatkan di transparan sel yang dikenal sebagai mangkuk yg dihiasi dgn ukiran. Cuvettes biasanya dalam bentuk persegi panjang, yang umum internal dengan lebar 1 cm. (This width becomes the path length, L , in the Beer-Lambert law.) (Ini menjadi lebar jalan panjang, L, dalam hukum Beer-Lambert.) Tes tabung juga dapat digunakan sebagai cuvettes dalam beberapa instrumen. Jenis sampel yang digunakan harus kontainer membolehkan radiasi untuk lulus melalui momok wilayah yang menarik. Yang paling banyak berlaku cuvettes dibuat berkualitas tinggi tergabung silika atau kuarsa kaca karena ini adalah transparan sepanjang UV, yang kelihatan dan inframerah dekat daerah. Kaca dan plastik cuvettes umum juga, walaupun gelas plastik dan sebagian besar dalam menyerap UV, yang membatasi mereka untuk kegunaan terlihat wavelengths Ultraviolet-terlihat spektrum An-ultraungu spektrum terlihat pada dasarnya adalah sebuah grafik terang absorbance versus panjang gelombang dalam berbagai ultraungu atau terlihat

daerah. Seperti spektrum sering bisa diproduksi secara langsung oleh yang lebih canggih spectrophotometer, atau data dapat dikumpulkan satu panjang gelombang pada suatu waktu oleh instrumen sederhana. Demikian juga, untuk suatu substansi, suatu standar grafik dari pemadaman koefisien () vs panjang gelombang () dapat dibuat atau digunakan jika ada yang sudah tersedia. Seperti grafik standar akan efektif "konsentrasi-dikoreksi" sehingga konsentrasi independen. . The Woodward-aturan Fieser adalah serangkaian pengamatan empiris
max,

yang dapat digunakan untuk memprediksi dienes dan ketones.

yang panjang gelombang yang

paling intens UV / Vis penyerapan, untuk conjugated compounds organik seperti The wavelengths penyerapan puncak dapat berhubungan dengan jenis obligasi yang ada pada molekul dan berharga dalam menentukan kelompok fungsional dalam molekul. UV / Vis penyerapan tidak Namun, khusus untuk menguji setiap kompleks. Sifat dari larutan, dengan pH dari solusi, suhu, konsentrasi elektrolit tinggi, dan adanya campur zat dapat mempengaruhi penyerapan Spectra dari compounds, seperti variasi di celah lebar (bandwidth efektif) di spectrophotometer.

Air minum dalam kemasan

Manfaat Air Minum Bagi Kesehatan Tubuh Sekitar 75% dari tubuh manusia terdiri atas air. Semua cairan tubuh, termasuk darah, urine, keringat, ludah, dan limpa mengandung air. Air diperlukan tubuh untuk ditoksifikasi (pemusnahan racun), untuk menjaga kesehatan kulit dan selaput-selaput mukosa, serta fungsi sel dan kesehatan setiap sistem organ tubuh pasti bergantung pada air. Sayangnya, banyak orang yang tidak minum air dalam jumlah cukup. Padahal, kurang minum dapat menyebabkan dehidrasi dan apabila tidak sepat diatasi dapat menyebabkan kematian. Sayangnya, air minum dalam kemasan di kehidupan modern ini acap tercemar logam-logam berat, mikrooganisme, klorin, fluoride, dan zat-zat pengotor lainnya. Banyak yang percaya bahwa salah satu bentuk air yang terbaik adalah air yang berasal dari sumber yang teruji. Bila tidak memperoleh air terbaik ini, tingkatkan kualitas air

minum dengan menyaringnya dengan sistem pembalikan osmosis, arang kayu, keramik, atau filter kualias tinggi lainnya (Bunda, edisi 182, Agustus 2004). Manfaat air putih pada umumnya adalah membuat kulit sehat, menurunkan berat badan, menghilangkan racun, mengurangi serangan jantung, dalam hal ini sebuah penelitian di Loma Linda University telah diketahui bahwa di antara 20.000 pria dan wanita sehat, yang meminum lebih dari lima gelas air putih dapat terhindar dari serangan atau penyakit jantung dibandingkan mereka yang meminum air putih tidak lebih dari dua gelas perharinya. Manfaat lainnya adalah sebagai pelindung dan pelumas persendian otot, buang air besar teratur, bersemangat dan tetap siaga, menstabilkan suhu tubuh, mengurangi resiko penyakit dan infeksi, dan lebih baik, atau bisa dikatakan resep tradisional mengatakan minum banyak air putih ketika sakit sangat manjur, seperti mengontrol demam, mengganti cairan yang hilang, dan mengurangi lendir di hidung.

BAB II PROSEDUR KERJA

2.1. Alat dan Bahan a. Alat yang digunakan 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Lampu deuterium Monokromator Cell/kuvet Detector Inidkator Pipet milli Pipet tetes Gelas ukur Buret b. Bahan yang digunakan

 Pelarut-pelarut sampel (lihat tabel) yang disesuaikan dengan sampel yang diperiksa. HCl 1:1, HONH2HCl, O.Phenootrolin 0,1%, Fe standar, Larutan buffer. 2.2. PROSEDUR KERJA a. Prosedur Kerja Preparasi 1. Pipet larutan stock Fe (1ml= 1 ug Fe) 0,0 ; 2,0 ; ... ; 10ml ke dalam labu ukur 50ml, tambahkan 1ml HCl 1:1 tambahkan 1ml HONH HCL 10%, tambahkan 5ml O.phenontrolin. Aduk smpai rata dan tambahkan 5ml buffer asetat 50% dan diaduk kembali sampai rata. 2. Lakukan perlakuan yang sama seperti diatas dengan mengganti larutan stock dengan sampel. 3. Ukur warna pakai spektrometri pada 510nm. b. Prosedur Kerja UV Vis Spektrophotometer 1. Periksa bahwa tidak terdapat sampel di dalam compartement. 2. Periksa posisi setiap switch, harus pada posisi off atau posisi semula. 3. Nyalakan power switch. 4. Pilihlah lampu yang sesuai. Nyalakan sesuai dengan range panjang gelombang yang akan diukur. Lampu D2 untuk range 190-380 nm. Lampu W untuk range 380-900 nm. 5. Melalui knop panjang gelombang, atur panjang gelombang yang dikehendaki. 6. Periksa 0% T dengan meletakkan shutter block pada sampei beam, display harus menunjukkan 0% T. 7. Letakkan cell-cell berisi pelarut pada reference dan sampel beam, atur agar absorbansinya 0 atau 100% Y. 8. Letakkan cell berisi sampel yang akan diukur pada sampei beam. Baca hasilnya pada display.

BAB III GAMBAR RANGKAIAN

3.1. Gambar Peralatan

3.2. Gambar Rangkaian dan Penjelasan

BAB IV DATA PENGAMATAN

Berdasarkan Grafik maka data yang diperoleh adalah :

KONSENTRASI (Xi) NO 1 2 3 4 (ppm) 0,0000 2,0000 4,0000 6,0000 ABSORBANSI (Yi) 0,034 0,058 0,081 0,134

BAB V PENGOLAHAN DATA

DATA (n) 1 2 3 4 =4

Xi 0,0000 2,0000 4,0000 6,0000 12,000 0

Yi 0,034 0,058 0,081 0,134 0,307

Xi2 0,0000 4,0000 16,000 0 36,000 0 56,000 0

Yi2 0,0012 0,0034 0,0065 0,0179 0,029

XiYi 0,0000 1,16 0,324 0,804 2,288

(Xi)2

(Yi)2

3136

0,0942

5.1 Perhitungan Regresi linear sederhana Rumus : a b = = n Xi2 (Xi)2 4(2,288) (12,0000) (0,307) = 4 (56,0000) (3136) = a -0,00187 Y - bX nXiYi - (Xi) (Yi)

= Y - bX = 0,0765 (-0,00187 x 3) = 0,0765 + 0,00561 = 0,08236

Sehingga dari hasil perhitungan diperolehlah persamaan regresi Y = 0,08236 0,00187) X

5.2 Perhitungan koefisien Korelasi

n XY - X Y Koefisien korelasi rxY = n X2 - (X)2 = 4(3136) (0,0942) = 0,0488 4(0,029) (0,0942) n Y2 (Y)2 4 (2,288) (12) (0,307)

BAB VI

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan 1. Semakin tinggi konsentrasi dari sampel maka semakin tinggi pula daya absorbennya. 2. Dari hasil pengolahan data maka diperoleh persamaan Y = 0,1939 + 0,0198 X 3. Zat atau unsur yang akan dianalisa dalam spektrofotometer UV-Visibel harus yang berwarna. 4. Panjang gelombang maksimal pada spektrofotometer UV-Visibel adalah sebesar 510 nm. 6.2 Saran Sebaiknya praktikum dilakukan dengan teliti.

DAFTAR PUSTAKA

Basset. J, dkk. 1994. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC Khopkar.S.M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : Universitas Indonesia (UI-Press) http://farmasi07itb.wordpress.com/2010/03/13/uv-vis-spektrofotometry/